Reactivity against Sarcocystis neurona and Sarcocystis falcatula-like in horses from Southeastern and Midwestern Brazil / Reatividade contra Sarcocystis neurona e Sarcocystis falcatula-like em equinos das regiões Sudeste e Centro-Oeste do Brasil

Equine protozoal myeloencephalitis (EPM) is a neurological disease caused by Sarcocystis neurona. Immunofluorescence antibody tests (IFATs) have been widely used to identify exposure of horses to S. neurona in Brazil. Here we used IFAT to search for IgG antibodies against Sarcocystis falcatula-like (Dal-CG23) and S. neurona (SN138) in sera from 342 horses sampled in Campo Grande, Mato Grosso do Sul state (Midwestern), and São Paulo, São Paulo state (Southeastern), Brazil. The 1:25 cutoff value was chosen to maximize sensitivity of the test. IgG antibodies against S. neurona were detected in 239 horses (69.88%), whereas IgG antibodies against S. falcatula-like were detected in 177 horses (51.75%). Sera from 132 horses (38.59%) reacted against both isolates. Absence of reactivity was evidenced in 58/342 horses (16.95%). The lower cutoff used, and the presence of opossums infected with S. falcatula-like and Sarcocystis spp. in the regions where the horses were sampled, might justify the high seroprevalence observed here. Owing to the similarity among antigens targeted in immunoassays, reports on S. neurona-seropositive horses in Brazil may also derive from the exposure of horses to other Sarcocystis species. The role of other Sarcocystis species in causing neurological diseases in horses in Brazil remains unclear.(AU)

Mieloencefalite protozoária equina (MPE) é uma doença neurológica causada por Sarcocystis neurona. Reação de imunofluorescência indireta (RIFI) tem sido utilizada para identificar a exposição de equinos à S. neurona no Brasil. Neste estudo, a RIFI foi utilizada para avaliar a presença de anticorpos IgG anti-Sarcocystis falcatula-like (Dal-CG23) e anti-S. neurona (SN138) no soro de 342 equinos de Campo Grande, Mato Grosso do Sul (Centro-oeste) e São Paulo, São Paulo (Sudeste), Brasil. O ponto de corte de 1:25 foi escolhido para maximizar a sensibilidade. Anticorpos IgG anti-S. neurona foram detectados em 239 cavalos (69,88%), enquanto anticorpos IgG anti-S. falcatula-like foram detectados em 177 cavalos (51,75%). O soro de 132 animais (38,59%) reagiu contra ambos os isolados. A ausência de reatividade foi evidenciada em 58/342 animais (16,95%). O baixo ponto de corte e a presença de gambás infectados com S. falcatula-like e Sarcocystis spp., nas regiões onde os equinos foram amostrados podem justificar a alta soroprevalência aqui observada. Devido à similaridade entre antígenos de superfície detectados nos imunoensaios, relatos de soropositividade contra S. neurona no Brasil podem resultar da exposição dos equinos a outras espécies de Sarcocystis. O papel de outras espécies de Sarcocystis como causa de doença neurológica em equinos no Brasil permanece incerto.(AU)

Pathology, microbiology, and molecular evaluation of tissues from equids serologically positive for Burkholderia mallei in Midwestern Brazil / Avaliação patológica, microbiológica e molecular em amostras de tecidos de equídeos sorologicamente positivos para Burkholderia mallei no Centro-Oeste do Brasil

Glanders is a disease caused by the bacterium Burkholderia mallei that primarily affects horses, mules and donkeys. The disease can cause lesions in the skin, lungs and several other organs. However, it often manifests as an asymptomatic disease. In Brazil, serological tests of high sensitivity and specificity are used to assist in the detection of antibodies against B. mallei and to contribute to the control of the disease. However, due to the mandatory euthanasia of seroreactive animals, equids with positive serology for B. mallei and asymptomatic generated great conflicts between breeders, veterinarians and diagnostic laboratories. This study clarifies the limitations of complementary diagnostic tests for detecting B. mallei. It describes the clinical, morphological and laboratory findings in 24 equines from different municipalities in the Mato Grosso State, Brazil, which reacted to the complement fixation test and were positive in the western blotting test for glanders. Data and tissue samples were collected from 24 horses for histological, microbiological and molecular analysis. In 23 horses, no clinical signs, morphological alterations, microbiological isolation, or molecular detection would characterize B. mallei infection. On the other hand, samples from an asymptomatic horse without lesional alterations showed sequence amplification compatible with B. mallei in the PCR. Considering that the infection by B. mallei is subject to the application of animal sanitary defense measures and that, by international requirement and national legislation, the serological results are tools that should support the sanitation procedures for the error of the bacteria in the Mato Grosso State, Brazil.

Mormo é uma enfermidade causada pela bactéria Burkholderia mallei que acomete primariamente cavalos, mulas e burros. A doença pode causar lesões na pele, pulmões e em diversos outros órgãos, entretanto frequentemente manifesta-se como uma enfermidade assintomática. No Brasil são utilizados testes sorológicos de elevada sensibilidade e especificidade para auxiliar na detecção de anticorpos contra B. mallei e contribuir para controle da doença. Porém, devido à obrigatoriedade da eutanásia de animais sororeagentes, os equídeos com sorologia positiva para B. mallei e assintomáticos geraram grandes embates entre criadores, médicos-veterinários e laboratórios de diagnóstico. Este trabalho esclarece as limitações dos testes diagnósticos complementares para detecção de B. mallei e descreve os achados clínicos, morfológicos e de exames laboratoriais em 24 equídeos, procedentes de diferentes municípios do estado de Mato Grosso, Brasil, que reagiram ao teste de fixação de complemento e foram positivos no teste de "western blotting" para mormo. Foram colhidos dados e amostras de tecidos de 24 equídeos para análise histológica, microbiológica e molecular. Em 23 equídeos não existiam sinais clínicos, alterações morfológicas, isolamento microbiológico ou detecção molecular que caracterizassem infecção por B. mallei. Por outro lado, amostras de um cavalo assintomático e sem alterações lesionais apresentaram amplificação de sequência compatível com B. mallei na PCR. Considerando que a infecção por B. mallei é passível da aplicação de medidas de defesa sanitária animal e que por exigência internacional e da legislação nacional, os resultados sorológicos são ferramentas que devem amparar os procedimentos de saneamento para erradicação da bactéria no estado de Mato Grosso, Brasil.

Comparison of different diagnostic modalities for isolation of Mycobacterium Tuberculosis among suspected tuberculous lymphadenitis patients / Comparação de diferentes modalidades de diagnóstico para isolamento de Mycobacterium tuberculosis entre pacientes com suspeita de linfadenite tuberculosa

Tuberculosis is a communicable disease with high morbidity and mortality rates in developing countries. The study's primary objective is to compare conventional methods such as acid-fast bacillus (AFB) culture and microscopy with rapid diagnostic methods. The secondary objective is to compare histopathological and microbiological findings in suspected patients with tubercular lymphadenitis. A total of 111 samples (August 2018 to September 2019) of lymph nodes were processed for AFB microscopy, AFB cultures, drug-susceptibility testing (DST), histopathology, and Xpert Mycobacterium Tuberculosis (MTB)/resistance to Rifampin (RIF) assays. Out of 111 lymph node samples, 6 (5.4%) were positive for AFB smear microscopy, 84 (75.6%) were positive for AFB culture, 80 (70.7%) were positive on Gene Xpert, and 102 (91.8%) were indicative of tuberculosis for histopathology studies. Mycobacteria growth indicator tube (MGIT) culture positivity was 84 (75.6%) higher than solid Lowenstein-Jensen (LJ) culture 74 (66.6%). Positive cultures underwent phenotypic DST. Two cases were Multidrug-resistant (MDR) on DST, while three cases were Rifampicin resistant on Gene Xpert. The sensitivity of Genexpert was (62%) against the conventional AFB culture method. The poor performance of conventional lymphadenitis diagnostic methods requires early and accurate diagnostic methodology. Xpert MTB/RIF test can help in the treatment of multidrug-resistant TB cases. Nonetheless, rapid and conventional methods should be used for complete isolation of Mycobacterium tuberculosis.

A tuberculose é uma doença transmissível com altas taxas de morbimortalidade nos países em desenvolvimento. O objetivo principal do estudo é comparar métodos convencionais, como cultura de bacilo álcool-ácido resistente (BAAR) e microscopia, com métodos de diagnóstico rápido. O objetivo secundário é comparar os achados histopatológicos e microbiológicos em pacientes com suspeita de linfadenite tubercular. Um total de 111 amostras (agosto de 2018 a setembro de 2019) de gânglios linfáticos foi processado para microscopia de AFB, culturas de AFB, teste de susceptibilidade a drogas (DST), histopatologia e Xpert Mycobacterium tuberculosis (MTB)/ensaios de resistência à rifampicina (RIF). Das 111 amostras de linfonodos, 6 (5,4%) foram positivas para baciloscopia de AFB, 84 (75,6%) foram positivas para cultura de AFB, 80 (70,7%) foram positivas para o GeneXpert e 102 (91,8%) foram indicativas de tuberculose para estudos histopatológicos. A positividade da cultura do tubo indicador de crescimento de micobactérias (MGIT) foi 84 (75,6%), maior que a cultura sólida de Lowenstein-Jensen (LJ), 74 (66,6%). As culturas positivas foram submetidas a DST fenotípico. Dois casos eram multirresistentes (MDR) ao DST, enquanto três casos eram resistentes à rifampicina no GeneXpert. A sensibilidade do GeneXpert foi 62% contra o método convencional de cultura AFB. O fraco desempenho dos métodos convencionais de diagnóstico de linfadenite requer metodologia de diagnóstico precoce e precisa. O teste Xpert MTB/RIF pode ajudar no tratamento de casos de tuberculose multirresistente. No entanto, métodos rápidos e convencionais devem ser usados para o isolamento completo do Mycobacterium tuberculosis.

Comparison of different diagnostic modalities for isolation of Mycobacterium Tuberculosis among suspected tuberculous lymphadenitis patients / Comparação de diferentes modalidades de diagnóstico para isolamento de Mycobacterium tuberculosis entre pacientes com suspeita de linfadenite tuberculosa

Tuberculosis is a communicable disease with high morbidity and mortality rates in developing countries. The study's primary objective is to compare conventional methods such as acid-fast bacillus (AFB) culture and microscopy with rapid diagnostic methods. The secondary objective is to compare histopathological and microbiological findings in suspected patients with tubercular lymphadenitis. A total of 111 samples (August 2018 to September 2019) of lymph nodes were processed for AFB microscopy, AFB cultures, drug-susceptibility testing (DST), histopathology, and Xpert Mycobacterium Tuberculosis (MTB)/resistance to Rifampin (RIF) assays. Out of 111 lymph node samples, 6 (5.4%) were positive for AFB smear microscopy, 84 (75.6%) were positive for AFB culture, 80 (70.7%) were positive on Gene Xpert, and 102 (91.8%) were indicative of tuberculosis for histopathology studies. Mycobacteria growth indicator tube (MGIT) culture positivity was 84 (75.6%) higher than solid Lowenstein-Jensen (LJ) culture 74 (66.6%). Positive cultures underwent phenotypic DST. Two cases were Multidrug-resistant (MDR) on DST, while three cases were Rifampicin resistant on Gene Xpert. The sensitivity of Genexpert was (62%) against the conventional AFB culture method. The poor performance of conventional lymphadenitis diagnostic methods requires early and accurate diagnostic methodology. Xpert MTB/RIF test can help in the treatment of multidrug-resistant TB cases. Nonetheless, rapid and conventional methods should be used for complete isolation of Mycobacterium tuberculosis.(AU)

A tuberculose é uma doença transmissível com altas taxas de morbimortalidade nos países em desenvolvimento. O objetivo principal do estudo é comparar métodos convencionais, como cultura de bacilo álcool-ácido resistente (BAAR) e microscopia, com métodos de diagnóstico rápido. O objetivo secundário é comparar os achados histopatológicos e microbiológicos em pacientes com suspeita de linfadenite tubercular. Um total de 111 amostras (agosto de 2018 a setembro de 2019) de gânglios linfáticos foi processado para microscopia de AFB, culturas de AFB, teste de susceptibilidade a drogas (DST), histopatologia e Xpert Mycobacterium tuberculosis (MTB)/ensaios de resistência à rifampicina (RIF). Das 111 amostras de linfonodos, 6 (5,4%) foram positivas para baciloscopia de AFB, 84 (75,6%) foram positivas para cultura de AFB, 80 (70,7%) foram positivas para o GeneXpert e 102 (91,8%) foram indicativas de tuberculose para estudos histopatológicos. A positividade da cultura do tubo indicador de crescimento de micobactérias (MGIT) foi 84 (75,6%), maior que a cultura sólida de Lowenstein-Jensen (LJ), 74 (66,6%). As culturas positivas foram submetidas a DST fenotípico. Dois casos eram multirresistentes (MDR) ao DST, enquanto três casos eram resistentes à rifampicina no GeneXpert. A sensibilidade do GeneXpert foi 62% contra o método convencional de cultura AFB. O fraco desempenho dos métodos convencionais de diagnóstico de linfadenite requer metodologia de diagnóstico precoce e precisa. O teste Xpert MTB/RIF pode ajudar no tratamento de casos de tuberculose multirresistente. No entanto, métodos rápidos e convencionais devem ser usados para o isolamento completo do Mycobacterium tuberculosis.(AU)

Profile of otitis externa isolates in dogs and cats diagnosed in laboratory of microbiology in 2020 / Perfil dos isolados de otites externas em cães e gatos diagnosticados em laboratório de microbiologia em 2020

Otitis externa is one of the most frequent diseases in the clinical routine of dogs and cats, and they can be caused by several associated factors. Due to incorrect use of antimicrobial products, the treatment and control of otitis have become challenging. This study aims to analyze the results of otological exams at the Laboratory of Microbiology HV-ULBRA in 2020 and demonstrate the profile of patients and isolated bacteria. Staphylococcus was the main genus isolated, and 71,11% of samples showed multi-drug resistance to antimicrobial testing. These results indicate the need to use complementary examinations to control otitis externa.(AU)

A otite externa é um das enfermidades mais frequentes na rotina clínica de cães e gatos e pode ser causada por diversos fatores associados. Devido ao uso incorreto de antimicrobianos, o tratamento e o controle das otites se tornaram desafiadores. O objetivo desse estudo é analisar os resultados dos exames otológicos encaminhados ao Laboratório de Microbiologia HV-ULBRA em 2020 e, além disso, delinear o perfil dos pacientes e das bactérias isoladas. Staphylococcus foi o principal gênero isolado e 71,11% das amostras apresentou multirresistência aos antimicrobianos testados. Esses resultados evidenciam a necessidade do uso de exames complementares para controle das otites externas.(AU)

Streptococcus spp. in equines - infection and antimicrobial susceptibility profiles

Background: Empirical antimicrobial prescribing is commonly used in equine veterinary. Therefore, professionals can obtain information about antimicrobial susceptibility profile of the bacterial strains based on veterinary literature. Considering equine infections, Streptococcus spp. are important pathogens that can cause serious damage in horses. Therefore, the aim of this study was to describe the antimicrobial susceptibility testing (AST) and infection profiles of Streptococcus spp. strains isolated from equines with infectious diseases subjected to microbiological analysis. Materials, Methods & Results: Veterinarians sent 13 samples and culture in Blood and MacConkey Agar were performed. After the incubation period, suspected colonies, which showed significative growth, were analyzed by Gram-staining, biochemical tests, and subjected to confirmatory identification in Matrix Assisted Laser Desorption Ionization Time of Flight Mass Spectrometry. In vitro AST analysis were performed by disc diffusion method, in accordance with the veterinarians' request. The antimicrobials tested in this study were: ceftiofur, gentamicin, ampicillin, enrofloxacin, amikacin, penicillin, trimethoprim-sulfamethoxazole, ciprofloxacin, doxycycline, vancomycin and metronidazole. The samples included uterine exudate, hock fistula, osteosynthesis exudate, exudate from the guttural pouch, and were originated from animals located in different and distant geographical regions in the cities of Porto Alegre, Pelotas, and Bagé, Rio Grande do Sul, Brazil. Streptococcus dysgalactiae, Streptococcus equi and Streptococcus thoraltensis were the Streptococcus species identified in the samples. S. dysgalactiae was the mainly species found in the uterus samples, while S. thoraltensis, an unusual Streptococcus species, was identified as etiological agent of endometritis in 2 of the analyzed animals. On the other hand, S. equi was found in both the guttural pouch, representing the etiological agent of the strangle case, and in the osteosynthesis exudate, as infectious agent of post-osteosynthesis surgery. The majority of streptococci strains were susceptible to ceftiofur drug. Amikacin and ciprofloxacin, however, were the drugs for which the strains were mainly resistant according to the results. Discussion: The present study provided the AST and infection profile of Streptococcus species related to equine infectious diseases. S. dysgalactiae is considered an unusual bacterium isolated from horses that can be related to endometritis, S. equi is the causative agent of strangles, and S. thoraltensis is unusual in equines. Generally, the observed susceptibility to ceftiofur of the strains analyzed was in agreement with previous results reported in the literature. However, ceftiofur is a third-generation cephalosporin and is considered a critically important antibiotic for human health and its use in veterinary medicine should be cautious. Considering the resistance profile found, Streptococcus spp. can be intrinsically resistant to low drug concentrations of aminoglycosides. Moreover, the emergence and spread of fluoroquinolones resistance may also be due to the acquisition of resistance via horizontal gene transfer. Therefore, the present study described both infection and antimicrobial susceptibility patterns of Streptococcus strains related to equine infectious diseases. Considering the findings, the results found in this study might contribute to the decision-making by veterinarians to further equine treatments.

Microbiological contamination in a university veterinary hospital / Contaminação microbiológica em hospital veterinário universitário

This study aimed to evaluate the microbiological contamination of the different sectors of a university veterinary hospital, the efficiency of the sanitation procedures performed, and the resistance to antimicrobials and disinfectants. Fourteen environmental samples and seven swab samples were collected from procedure tables of the different sectors. During analysis, the following microorganisms were found: bacterial species Rothia spp., coagulase-negative Staphylococcus spp., Staphylococcus aureus, and Enterococcus spp. and zygomycete fungi (could not be classified in genus due to the absence of reproductive structures) and other fungal species Cladosporium spp., Epicoccum spp., Drechslera spp., Scopulariopsis spp., and Penicillium spp. The bacterial species were submitted to a sensitivity assessment of the antimicrobials used in routine prescription. Rothia spp. and S. aureus were resistant only to erythromycin (15 µg), coagulase-negative Staphylococcus spp. were resistant to erythromycin (15 µg) and sulfazotrim (25 µg), and Enterococcus spp. were resistant to ampicillin (10 µg). For the effectiveness test of disinfectants, the products used to sanitize hospital surfaces were tested. All microorganisms in this study were resistant to 1% sodium hypochlorite solution. Rothia spp. and Enterococcus spp. were resistant to 70% ethyl alcohol. The best results were found using pure sodium hypochlorite and benzalkonium chloride, pure and diluted to 20%, which showed a bactericidal effect against all tested microorganisms. These data are relevant for knowledge of the hospital microbiota at the intersection of possible cases of hospital infections.

O objetivo desta pesquisa foi avaliar a contaminação microbiológica de diferentes setores de um hospital veterinário universitário, a eficiência dos procedimentos de higienização realizados e a resistência aos antimicrobianos das cepas encontradas. Quatorze amostras ambientais e sete amostras de swabs foram coletadas dos diferentes setores. Durante a análise foram encontradas as seguintes espécies bacterianas: Rothia spp., Staphylococcus spp. coagulase negativa, Staphylococcus aureus e Enterococcus spp.; e os seguintes fungos: zigomicetos, que não puderam ser classificados em gênero devido a ausência de estrutura reprodutiva, os demais foram Cladosporium spp., Epicoccum spp., Drechslera spp., Scopulariopsis spp. e Penicillium spp. As bactérias foram submetidas a uma avaliação de sensibilidade dos antimicrobianos utilizados prescritos na rotina. A avaliação concluiu que Rothia spp. e S. aureus foram resistentes apenas à Eritromicina (15 µg), Staphylococcus coagulase negativa resistente à Eritromicina (15 µg) e Sulfazotrim (25 µg) e Enterococcus spp. mostrou resistência à Ampicilina (10 µg). Para o teste de eficácia dos desinfetantes, foram utilizados os produtos utilizados na higienização das superfícies do hospital. O teste mostrou que todos os microrganismos encontrados no estudo eram resistentes à solução de hipoclorito de sódio diluída a 1%; Rothia spp. e Enterococcus spp. resistentes ao álcool etílico 70%. Os melhores resultados dos testes foram encontrados com hipoclorito de sódio puro e cloreto de benzalcônio puro e diluído a 20%, que apresentou efeito bactericida contra todos os microrganismos testados. Os dados encontrados foram relevantes para o conhecimento da microbiota hospitalar no cruzamento de possíveis casos de infecções hospitalares.

Classification of dairy properties according to the geometric mean of the somatic cell count and its antimicrobial resistance profile / Classificação de propriedades leiteiras de acordo com a média geométrica da contagem de células somáticas e seu perfil de resistência aos antimicrobianos

Milk and its derivatives are highly consumed foods worldwide, with recognized nutritional importance. The search for the production of products with superior quality is constant. For the present work, 26 milk-producing properties were selected, with a total of 506 milk samples collected during the period from October 2019 to May 2020 being evaluated. The objective of this study was to evaluate the quality of milk produced in dairy properties in the region west Paraná, classified as good or bad based on the results of the Somatic Cell Count (SCC) and through sampling (n = 10) to evaluate the resistance profile of enterobacteria and Staphylococcus spp. isolated from milk samples, in addition to the presence of the mecA gene in strains of Staphylococcus spp. resistant to oxacillin. There were significant differences between the good and bad properties for the levels of lactose, SCC (cell/mL), and Standard Plate Count (SPC) (CFU/mL). The strains of Staphylococcus spp. showed differences in the percentage of resistance in relation to the good and bad properties for antibiotics: tetracycline, ciprofloxacin, oxacillin, amikacin, clindamycin, gentamycin, and erythromycin. The mecA gene was not detected in any of the coagulase-negative Staphylococcus isolates that showed resistance to oxacillin. For enterobacteria, the isolated species differed in relation to the classification of properties, with predominance for Escherichia coli (40%) for properties classified as bad and Hafnia alvei (40%) for those classified as good. The percentage of antibiotic resistance compared to enterobacteria isolates was higher in properties classified as good. Monitoring through microbial culture and antibiogram is extremely important, favoring the correct choice for the treatment of animals with a reduced selection of resistant strains.(AU)

O leite e seus derivados são alimentos altamente consumidos em todo mundo, com importância nutricional reconhecida. A busca pela produção de produtos com qualidade superior é constante. Para o presente trabalho foram selecionadas 26 propriedades produtoras de leite, sendo avaliado um total de 506 amostras de leite colhidas durante o período de outubro de 2019 a maio de 2020. O objetivo deste estudo foi avaliar a qualidade do leite produzido em propriedades leiteiras da região oeste do Paraná, classificadas como boas ou ruins com base nos resultados da Contagem de Células Somáticas (CCS) e por meio de amostragem (n=10) avaliar o perfil de resistência das enterobactérias e Staphylococcus spp. isolados das amostras de leite, além da presença do gene mecA em cepas de Staphylococcus spp. resistentes à oxacilina. Houve diferenças significativas entre as propriedades boas e ruins para os teores de lactose, CCS (cél./mL) e Contagem Padrão em Placas (CPP) (UFC/mL). As cepas de Staphylococcus spp. apresentaram diferenças no percentual de resistência em relação às propriedades boas e ruins para os antibióticos: tetraciclina, ciprofloxacina, oxacilina, amicacina, clindamicina, gentamicina e eritromicina. Não foi detectada a presença do gene mecA em nenhum dos isolados de Staphylococcus coagulase negativa que apresentaram perfil de resistência à oxacilina. Para as enterobactérias as espécies isoladas diferiram em relação à classificação das propriedades, com predomínio para Escherichia coli (40%) para as propriedades classificadas como ruins e Hafnia alvei (40%) para as classificadas como boas. O percentual de resistência aos antibióticos frente aos isolados de enterobactérias foi maior nas propriedades classificadas como boas. É extremamente importante o monitoramento por meio de cultura microbiana e antibiograma, favorecendo a correta escolha para o tratamento dos animais com redução da seleção de cepas resistentes.(AU)

Retrospective study of bacterial agents found in urine culture of dogs: antimicrobial sensitivity and resistance profile / Estudo retrospectivo de agentes bacterianos observados na urocultura de cães: perfil de sensibilidade e resistência antimicrobiana

Urinary tract infections are commonly diagnosed in dogs, accounting for 2 to 3% of cases in the clinical routine, as cystitis being the most reported condition. Dogs of all ages and breeds can be affected, and early diagnosis is an important tool for therapeutic success. Urine culture and antibiogram are gold-standard tests for the diagnosis of bacterial cystitis, allowing correct therapy and better recovery of the patient, since currently there is great resistance to antimicrobials used in the veterinary clinics. Thus, the aim of this study was to determine the main etiological agents isolated in dog urine cultures, as well as the resistance and sensitivity profile of the isolated agents in relation to antibiotics, in order to assist the clinician ́s choice of the most appropriate antimicrobial, aiming at the patient's therapeutic success. For this study, a retrospective study was performed of 49 samples of urine cultures of male and female dogs, collected between 2012 and 2021, which were positive for bacterial growth. From this analysis, it was observed that Escherichia coli, Enterococcus spp. and Staphylococcus spp. were the most isolated agents, presenting higher antimicrobial resistance to cephalexin, sulfadiazine plus trimethoprim, ampicillin, enrofloxacin and ciprofloxacin, respectively.(AU)

s infecções do trato urinário são comumente diagnosticadas em cães, representando de 2 a 3% dos casos na rotina clínica, sendo a cistite a afecção mais relatada. Cães de todas as idades e raças podem ser acometidos, sendo o diagnóstico precoce uma ferramenta importante para o sucesso terapêutico. A urocultura e o antibiograma são exames padrão-ouro para o diagnóstico das cistites bacterianas, permitindo a terapêutica correta e melhor recuperação do paciente, já que atualmente há grande resistência aos antimicrobianos empregados na rotina clínica veterinária. Desta forma, o objetivo deste estudo foi determinar os principais agentes etiológicos isolados nas uroculturas de cães, bem como o perfil de resistência e sensibilidade dos agentes isolados frente aos antibióticos, de modo a auxiliar o médico veterinário na eleição do antimicrobiano mais adequado, visando sucesso terapêutico do paciente. Para realização deste estudo foi feita uma análise retrospectiva de 49 uroculturas de cães machos e fêmeas, coletadas entre os anos de 2012 e 2021, as quais apresentaram crescimento bacteriano positivo. A partir desta análise foi observado que Escherichia coli, Enterococcus spp. e Staphylococcus spp. foram os agentes mais isolados nas uroculturas, apresentando maior resis-tência aos antimicrobianos cefalexina, sulfazotrim ampicilina, enrofloxacina e ciprofloxacina, respectivamente.(AU)

Species identification and antimicrobial susceptibility profile of bacteria associated with cow mastitis in southern Brazil / Identificação de espécies e perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos de bactérias associadas à mastite bovina no sul do Brasil

Bovine mastitis is the most common disease in dairy cattle and responsible for economic losses in the milk industry. The present study aimed to identify the main species and to evaluate the antimicrobial susceptibility of bacterial isolates from cow herds with mastitis in dairy farms from southern Brazil. A total of 107 milk samples were collected from different cow herds in one important dairy producing region in southern Brazil, including farms located in ten cities from the Northeast region in the Rio Grande do Sul state. Bacterial strains were isolated and submitted to presumptive identification by classical bacteriological methods. Bacterial species were also identified by MALDI-TOF MS and antimicrobial susceptibility testing was performed with 12 antimicrobials commonly used in dairy farms. Fifty-one bacterial strains were isolated and the presumptive identification demonstrated the occurrence of Staphylococcus spp. (82.3%), Bacillus spp. (3.9%), Klebsiella spp. (3.9%), Streptococcus spp. (3.9%), Corynebacterium sp. (2%), Enterococcus sp. (2%) and Serratia sp. (2%). Forty-one isolates were successfully identified in the MALDI-TOF analysis, including 35 isolates from eleven different bacterial species. Importantly, there were eight different Staphylococcus species, with a high frequency of Staphylococcus chromogenes (48.6%) and Staphylococcus aureus (20%). Overall, bacterial isolates demonstrated resistance to penicillin (46.3%), tetracycline (39%), amoxicillin (36.6%), ampicillin (34.1%) and sulfamethoxazole/trimethoprim (31.7%). Enrofloxacin was the unique antimicrobial that all isolates were susceptible. In addition, there were six multidrug resistant isolates (five S. chromogenes and one S. aureus). This study highlights that bacterial pathogens with resistance to several antimicrobials were identified in cows from dairy farms in a very important milk producing region located in southern Brazil. Microbial identification of the bovine mastitis pathogens and determination of the antimicrobial profile is necessary for the rational use of the medicines.

A mastite bovina é a doença mais comum em gado leiteiro e responsável por perdas econômicas na indústria de laticínios. O presente estudo teve como objetivo identificar as principais espécies e avaliar a suscetibilidade antimicrobiana de isolados bacterianos de rebanhos bovinos com mastite em fazendas leiteiras no sul do Brasil. Um total de 107 amostras de leite foram coletadas em diferentes rebanhos bovinos em uma importante região produtora de leite do sul do Brasil, incluindo fazendas localizadas em 10 cidades da região Nordeste do estado do Rio Grande do Sul. As cepas bacterianas foram isoladas e submetidas à identificação presuntiva por métodos bacteriológicos clássicos. A identificação bacteriana foi confirmada por MALDI-TOF MS e o teste de sensibilidade antimicrobiana foi realizado com antimicrobianos comumente usados em fazendas leiteiras. Cinquenta e uma cepas bacterianas foram isoladas e a identificação presuntiva demonstrou a ocorrência de Staphylococcus spp. (82,3%), Bacillus spp. (3,9%), Klebsiella spp. (3,9%), Streptococcus spp. (3,9%), Corynebacterium sp. (2%), Enterococcus sp. (2%) e Serratia sp. (2%). Os 41 isolados foram identificados com sucesso na análise MALDI-TOF, incluindo 35 isolados de onze espécies bacterianas diferentes. É importante ressaltar que houve a ocorrência de oito espécies diferentes de Staphylococcus, com alta frequência de Staphylococcus chromogenes (48,6%) e Staphylococcus aureus (20%). No geral, os isolados bacterianos tiveram alta resistência à penicilina (46,3%), tetraciclina (39%), amoxicilina (36,6%), ampicilina (34,1%) e sulfametoxazol/trimetoprima (31,7%). A enrofloxacina foi o único antimicrobiano que todos os isolados foram suscetíveis. Além disso, havia seis isolados multirresistentes (cinco S. chromogenes e um S. aureus). Este estudo destaca que os patógenos bacterianos com resistência aos antimicrobianos estão presentes em fazendas leiteiras de subsistência em uma importante região produtora no sul do Brasil. É necessário o monitoramento constante dos patógenos da mastite bovina e a determinação de seu perfil antimicrobiano para o uso racional dos medicamentos.

Species identification and antimicrobial susceptibility profile of bacteria associated with cow mastitis in southern Brazil / Identificação de espécies e perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos de bactérias associadas à mastite bovina no sul do Brasil

Bovine mastitis is the most common disease in dairy cattle and responsible for economic losses in the milk industry. The present study aimed to identify the main species and to evaluate the antimicrobial susceptibility of bacterial isolates from cow herds with mastitis in dairy farms from southern Brazil. A total of 107 milk samples were collected from different cow herds in one important dairy producing region in southern Brazil, including farms located in ten cities from the Northeast region in the Rio Grande do Sul state. Bacterial strains were isolated and submitted to presumptive identification by classical bacteriological methods. Bacterial species were also identified by MALDI-TOF MS and antimicrobial susceptibility testing was performed with 12 antimicrobials commonly used in dairy farms. Fifty-one bacterial strains were isolated and the presumptive identification demonstrated the occurrence of Staphylococcus spp. (82.3%), Bacillus spp. (3.9%), Klebsiella spp. (3.9%), Streptococcus spp. (3.9%), Corynebacterium sp. (2%), Enterococcus sp. (2%) and Serratia sp. (2%). Forty-one isolates were successfully identified in the MALDI-TOF analysis, including 35 isolates from eleven different bacterial species. Importantly, there were eight different Staphylococcus species, with a high frequency of Staphylococcus chromogenes (48.6%) and Staphylococcus aureus (20%). Overall, bacterial isolates demonstrated resistance to penicillin (46.3%), tetracycline (39%), amoxicillin (36.6%), ampicillin (34.1%) and sulfamethoxazole/trimethoprim (31.7%). Enrofloxacin was the unique antimicrobial that all isolates were susceptible. In addition, there were six multidrug resistant isolates (five S. chromogenes and one S. aureus). This study highlights that bacterial pathogens with resistance to several antimicrobials were identified in cows from dairy farms in a very important milk producing region located in southern Brazil. Microbial identification of the bovine mastitis pathogens and determination of the antimicrobial profile is necessary for the rational use of the medicines.(AU)

A mastite bovina é a doença mais comum em gado leiteiro e responsável por perdas econômicas na indústria de laticínios. O presente estudo teve como objetivo identificar as principais espécies e avaliar a suscetibilidade antimicrobiana de isolados bacterianos de rebanhos bovinos com mastite em fazendas leiteiras no sul do Brasil. Um total de 107 amostras de leite foram coletadas em diferentes rebanhos bovinos em uma importante região produtora de leite do sul do Brasil, incluindo fazendas localizadas em 10 cidades da região Nordeste do estado do Rio Grande do Sul. As cepas bacterianas foram isoladas e submetidas à identificação presuntiva por métodos bacteriológicos clássicos. A identificação bacteriana foi confirmada por MALDI-TOF MS e o teste de sensibilidade antimicrobiana foi realizado com antimicrobianos comumente usados em fazendas leiteiras. Cinquenta e uma cepas bacterianas foram isoladas e a identificação presuntiva demonstrou a ocorrência de Staphylococcus spp. (82,3%), Bacillus spp. (3,9%), Klebsiella spp. (3,9%), Streptococcus spp. (3,9%), Corynebacterium sp. (2%), Enterococcus sp. (2%) e Serratia sp. (2%). Os 41 isolados foram identificados com sucesso na análise MALDI-TOF, incluindo 35 isolados de onze espécies bacterianas diferentes. É importante ressaltar que houve a ocorrência de oito espécies diferentes de Staphylococcus, com alta frequência de Staphylococcus chromogenes (48,6%) e Staphylococcus aureus (20%). No geral, os isolados bacterianos tiveram alta resistência à penicilina (46,3%), tetraciclina (39%), amoxicilina (36,6%), ampicilina (34,1%) e sulfametoxazol/trimetoprima (31,7%). A enrofloxacina foi o único antimicrobiano que todos os isolados foram suscetíveis. Além disso, havia seis isolados multirresistentes (cinco S. chromogenes e um S. aureus). Este estudo destaca que os patógenos bacterianos com resistência aos antimicrobianos estão presentes em fazendas leiteiras de subsistência em uma importante região produtora no sul do Brasil. É necessário o monitoramento constante dos patógenos da mastite bovina e a determinação de seu perfil antimicrobiano para o uso racional dos medicamentos.(AU)

Evaluation of fecal smear methods for research on Cryptosporidium spp. oocysts in the feces of dairy calves / Avaliação dos métodos de esfregaço fecal para a pesquisa de oocistos de Cryptosporidium spp. nas fezes de bezerros da bovinocultura de leite

The objective of this study is to compare the direct fecal smear (DFS) and centrifugal sedimentation (CS) methods in the detection of Cryptosporidium spp. oocysts in fecal samples of dairy calves. One hundred and fourteen fecal samples were collected from calves aged up to six months from 10 dairy farms located in Palotina and Francisco Alves, Paraná, Brazil. The microscopic analysis revealed the presence of Cryptosporidium spp. oocysts in 51.75% (59/114) of the samples in both methods. In CS, 48.25% (55/114) of the samples were positive, while in DFS slides, only 6.14% (7/114) were positive. Only 4 samples were positive exclusively in DFS. To ensure that there were no false-negative results in the microscopic analysis, the 55 samples that were negative in both DFS and CS were selected for molecular analysis using the nested PCR (nPCR). Of these 55 samples, 24% (13/55) were positive and forwarded for sequencing part of the genome, which made it possible to identify C. parvum, C. bovis and C. ryanae. Besides the characterization of the Cryptosporidium species, it was possible to identify bacteria of the genus Acinetobacter interfering directly in the analyzed samples. The microscopic analysis also revealed higher sensitivity when CS was used to make the fecal smears. However, some samples that were negative in this technique had positive PCR results. Thus, molecular analysis is indicated to confirm cases of Cryptosporidium spp. Further studies are necessary to prove the specificities of the used primers since the results obtained in nPCR were positive for the protozoan but, when genetic sequencing was performed, Acinetobacter spp. was identified.(AU)

O objetivo deste trabalho foi comparar os métodos de esfregaço fecal direto (DFS) e centrífugo sedimentação (CS) para a pesquisa de oocistos de Cryptosporidium spp. em amostras fecais de bezerros leiteiros. Foram coletadas 114 amostras fecais de bezerros com até seis meses de idade, provenientes de dez propriedades leiteiras localizadas nos municípios de Palotina e Francisco Alves, Paraná. Por meio da análise microscópica, foi possível observar oocistos de Cryptosporidium spp. em 51,75% (59/114) das amostras. Pelo método da CS foi identificada positividade em 48,25% (55/114) das amostras, enquanto nas lâminas pelo método do esfregaço fecal direto (DFS), apenas 6,14% (7/114) foram positivas. Somente 4 amostras foram positivas exclusivamente no método do DFS. Para assegurar que na análise microscópica não houvesse resultados falso-negativos, as 55 amostras negativas para os dois métodos de confecção de lâminas (DFS e CS) foram selecionadas para análise molecular por meio da técnica de Nested PCR. Das 55 amostras submetidas a nPCR, 24% (13/55) apresentaram-se positivas e foram encaminhadas para o sequenciamento genético de uma porção do genoma, o qual possibilitou identificar as espécies de C. parvum, C. bovis e C. ryanae. Além da caracterização das espécies de Cryptosporidium, foi possível identificar a presença de bactérias do gênero Acinetobacter interferindo diretamente nas amostras analisadas. A análise microscópica revelou maior sensibilidade quando o método de CS foi usado para a confecção dos esfregaços fecais, entretanto, amostras negativas por meio dessa metodologia apresentaram resultados positivos na nPCR. Desta forma, para a confirmação dos casos de Cryptosporidium spp., é indicado a realização da análise molecular. Novos estudos são necessários para se comprovar a especificidade dos primers utilizados, uma vez que na nPCR o resultado obtido foi positivo, porém ao realizar o sequenciamento genético houve a identificação de Acinetobacter spp.(AU)

Antimicrobial susceptibility of Salmonella spp and Staphylococcus aureus isolated from beef sold in Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brazil / Suscetibilidade antimicrobiana de Salmonella spp e Staphylococcus aureus isolados de carnes bovinas comercializadas em Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brasil

Hygiene failures in meat can be identified based on the evaluation of pathogenic microorganisms, which compromise the microbiological quality of food and can transmit food-borne diseases. The aim of the present study was to evaluate the hygienic quality of beef sold at supermarkets, butcher shops and public markets in the city of Campo Grande, state of Mato Grosso do Sul, Brazil, through the phenotypic and genotypic characterization of Salmonella spp. and Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) as well as the investigation and quantification of Staphylococcus aureus. Seventy-one samples of beef from 17 commercial establishments were evaluated. Isolates were tested for antimicrobial susceptibility using the disk diffusion method recommended by the Clinical & Laboratory Standards Institute. Salmonella was found in 7.04% of the samples and 70.0% of the isolates were sensitive to the antimicrobials tested. A total of 25.35% of the samples were positive for Staphylococcus aureus, with counts ranging from 1.0 x 102 to 4.3 x 104 CFU/g; these isolates exhibited resistance to penicillin (87.5%), tetracycline (18.75%) and chloramphenicol (6.25%). None of the samples was positive for STEC. The detection of these pathogens in food poses a danger to public health, mainly due to the presence of antimicrobial-resistant isolates. These findings underscore the need for good hygiene and manufacturing practices at retail establishments.

As falhas na qualidade higiênico-sanitária da carne podem ser identificadas a partir da avaliação de microrganismos patogênicos que comprometem a qualidade microbiológica do alimento e podem veicular doenças de origem alimentar. O presente estudo objetivou avaliar a qualidade higiênica-sanitária de carnes bovinas comercializadas em supermercados, açougues e mercados públicos da cidade de Campo Grande (Mato Grosso do Sul, Brasil) por meio da pesquisa e caracterização fenotípica e genotípica de Salmonella spp. e Escherichia coli produtora de toxina Shiga (STEC) e pesquisa e contagem de Staphylococcus aureus. Foram avaliadas 71 amostras de carne bovina de 17 estabelecimentos comerciais que foram submetidas a pesquisa de detecção de Salmonella spp., Escherichia coli produtora de toxina Shiga (STEC) e pesquisa e contagem de Staphylococcus aureus. Os isolados obtidos foram submetidos ao perfil de sensibilidade aos antimicrobianos pelo teste de difusão em disco, de acordo com o Clinical & Laboratory Standards Institute (CLSI). Constatou-se a presença de Salmonella em 7,04% das amostras avaliadas, sendo que 70,0% dos isolados foram sensíveis aos antimicrobianos testados. Em relação ao Staphylococcus aureus, 25,35% das amostras foram positivas com contagens variando entre 1,0 x 102 a 4,3 x 104 UFC/g, sendo que os isolados apresentaram resistência para penicilina (62,5%), tetraciclina (18,75%) e cloranfenicol (6,25%). Nenhuma amostra apresentou-se positiva para STEC. A detecção desses patógenos em alimentos representa um perigo a saúde pública, principalmente, devido a presença de isolados resistentes a antimicrobianos. Além disso, ressalta-se a necessidade do emprego das boas práticas de higiene e fabricação nos estabelecimentos varejistas.

Ceftiofur efficacy in the intramammary extended treatment of staphylococcal subclinical mastitis in primiparous cows / Eficácia do ceftiofur no tratamento estendido intramamário da mastite subclínica por estafilococos em vacas primíparas

Extended therapy is an alternative approach to treat nonresponsive staphylococcal mastitis, although it has been used mainly in adult cows. This study investigated the efficacy of intramammary ceftiofur in the treatment of staphylococcal subclinical mastitis in primiparous cows. Sixty primiparous cows Holstein were divided into four groups (G1 = Group negative to staphylococci infection, G2 = Group positive to staphylococci infection untreated with intramammary ceftiofur, Group, G3 = Group treated with intramammary ceftiofur early lactation, G4 = Group treated with intramammary ceftiofur late lactation group) with milk samples collected at five moments (M0 = diagnosis of subclinical mastitis, M1 = 7 days after diagnosis of subclinical mastitis and early extended therapy, M2 = 14 after the diagnosis of subclinical mastitis, M3 = 21 days after diagnosis of mastitis) and M4 = 28 days after diagnosis of mastitis). In groups G3 and G4, which were treated with intramammary ceftiofur, the microbiological cure was evidenced by a reduction in SCC of 73.3% and 46.7%, respectively. Thus, in the treated groups (G3 + G4) and untreated (G2), cure rates were 60% and 26.7%, respectively (P <0.05). Forty-five strains of staphylococci were Motta, R. G. et al.1958Semina: Ciênc. Agrár. Londrina, v. 43, n. 5, p. 1957-1974, set./out. 2022isolated, with a predominance of S. aureus (51,1%) and S. intermedius (48,8%). The in vitro antimicrobial susceptibility pattern showed higher sensitivity indices of isolates for oxacillin (80%), ceftiofur (77.8%), cephalexin (77.8%), ciprofloxacin (66.7%), and gentamicin (60%). In contrast, cloxacillin (24.4%), penicillin (35.6%), and tetracycline (44.5%) were ineffective antimicrobials for staphylococci isolates. Among the milk samples taken when M0 and M1 (7 days after isolation), 13.3% were positive for the detection of the inhibiting substances (antimicrobials) in Delvotest™ and all negative in the Snap test™, whereas in the M2 (14 days after isolation), 55% were positive in Delvotest™ and 46.7% in the Snap test™. Twenty-one days after diagnosis (M3), 16.7% revealed positive results in Delvotest™ and 11.7% in the Snap test™. For M4 (28 days after isolation), 11.7% showed positive results in Delvotest™, and 8.3% revealed positive results in the Snap test™. There was a reduction in SCC among all cured animals. Significant results were identified for milk production in the M0, so G1 produced more milk than the other three groups, G2, G3, and G4. A statistical association was observed between the reduction in the volume of daily milk and production in animals with subclinical mastitis, denoting losses in milk production in primiparous bovines infected during lactation by staphylococci. Extended intramammary therapy with ceftiofur in bovine primiparous cows subclinically affected by staphylococcal mastitis is effective mainly in cases treated at the beginning of lactation, showing microbiological cure and reduction in SCC.(AU)

O estudo presente investigou a eficácia do ceftiofur intramamário no tratamento da mastite subclínica por estafilococos em primíparas bovinas. Foram utilizados 60 animais da raça holandesa, divididos em quadro grupos (G1 = Grupo negativo, G2 = Grupo positivo não tratado com ceftiofur intramamário, G3 = Grupo tratado com ceftiofur intramamário no início da lactação, G4 = Grupo tratado com ceftiofur intramamário no final da lactação), com amostras de leite coletadas em cinco momentos (M0 = diagnóstico da mastite subclínica, M1 = 7 dias após diagnóstico e início da terapia estendida, M2 = dia 14 após o diagnóstico da mastite subclínica, M3 = dia 21 após o diagnóstico da mastite, M4 = dia 28 após o diagnóstico da mastite). Nos grupos tratados com ceftiofur intramamário, foi evidenciada a cura microbiológica com redução na CCS em 73,3% no G3 e 46,7% no G4. Nos grupos tratados (G3+G4) e não tratado (G2), as taxas de cura foram, respectivamente, 60% e 26,7% (p<0,05). Foram isoladas 45 linhagens de estafilococos, com predomínio de S. aureus (51,1%) e S. intermedius (48,8%). O perfil de sensibilidade microbiana "in vitro" dos isolados apresentou maiores índices de sensibilidade para oxacilina (80%), ceftiofur (77,8%) e cefalexina (77,8%), ciprofloxacino (66,7%) e gentamicina (60%). Em contraste, cloxacilina (24,4%), penicilina (35,6%) e tetraciclina (44,5%) foram os antimicrobianos menos efetivos diante dos estafilococos isolados. Nas amostras de leite colhidas nos momentos M0 e M1, 13,3% foram positivas para o teste de detecção de substâncias inibidoras na prova de Delvotest™ e todas negativas no Snap test™. Já, no M2, 55% foram positivas no Delvotest™ e 46,7% no Snap test™. No M3, 16,7% positivas no Delvotest™ e no 11,7% no Snap test™. No M4, 11,7% positivas no Delvotest™ e 8,3% no Snaptest™, dois dias após o término do tratamento (M2). Foram identificados nos grupos G3 e G4 a presença de animais positivos em 96,7% para o Delvotest™ e 90% para o Snap test™. Ocorreu redução na CCS em todos os animais curados. Foram identificados resultados significativos para a produção de leite no MO, posto que o G1 produziu mais leite se comparado aos outros três grupos G2, G3 e G4. Foi observada associação estatística entre a redução no volume de leite diário e a produção nos animais com mastite subclínica, denotando prejuízos na produção de leite em primíparas bovinas infectadas na lactação por estafilococos. A terapia intramamária estendida com ceftiofur em primíparas com mastite estafilocócica é eficaz principalmente nos casos tratados no início da lactação, mostrando cura microbiológica e redução da CCS, indicando que esta abordagem terapêutica alternativa pode ser utilizada para o tratamento de novilhas.(AU)

Tertiary hospital sewage as reservoir of bacteria expressing MDR phenotype in Brazil / Esgoto de hospital terciário como reservatório de bactérias expressando o fenótipo MDR no Brasil

High doses of antibiotics used in hospitals can affect the microbial composition of sewers, selecting resistant bacteria. In this sense, we evaluated the antibiotic resistance profile and the multiresistant phenotype of bacteria isolated in sewage from a tertiary hospital in the interior São Paulo state, Brazil. For bacteria isolation, 10 µL of sewage samples were sown in selective culture media and the isolates were identified using VITEK-2 automatized system. The antibiotic sensitivity test was performed by disk diffusion. High percentages of resistance were found for amoxicillin, ampicillin, ceftazidime, clindamycin, vancomycin and the multidrug-resistant phenotype (MDR) was attributed to 60.7% of the isolates. Our results show bacteria classified as critical/high priority by WHO List of Priority Pathogens (Enterococcus and Staphylococcus aureus resistant to vancomycin and Enterobacteriaceae resistant to carbapenems) in hospital sewage. Therefore, the implementation of disinfection technologies for hospital sewage would reduce the bacterial load in the sewage that will reach urban wastewater treatment plants, minimizing superficial water contamination and bacterial resistance spread in the environment.

Altas doses de antibióticos utilizados em hospitais podem afetar a composição microbiana dos esgotos, selecionando bactérias resistentes. Nesse sentido, avaliamos o perfil de resistência a antibióticos e o fenótipo multirresistente de bactérias isoladas em esgoto de um hospital terciário no interior do estado de São Paulo, Brasil. Para o isolamento de bactérias, foram semeados 10 µL das amostras de esgoto em meios de cultura seletivos e os isolados foram identificados usando o sistema automatizado VITEK-2. O teste de sensibilidade aos antibióticos foi realizado por disco-difusão em ágar. Elevadas porcentagens de resistência foram encontradas para amoxicilina, ampicilina, ceftazidima, clindamicina, vancomicina e o fenótipo multirresistente (MDR) foi atribuído a 60,7% dos isolados. Nossos resultados mostram bactérias classificadas como prioridade crítica/alta pela Lista de Patógenos Prioritários da OMS (Enterococcus e Staphylococcus aureus resistentes à vancomicina e Enterobacteriaceae resistentes aos carbapenêmicos) no esgoto hospitalar. Sendo assim, implementação de tecnologias de desinfecção do esgoto hospitalar reduziriam a carga bacteriana no esgoto que chegará às estações de tratamento de esgoto urbanas, minimizando a contaminação dos ecossistemas hídricos receptores e a disseminação da resistência bacteriana no ambiente.

Tertiary hospital sewage as reservoir of bacteria expressing MDR phenotype in Brazil / Esgoto de hospital terciário como reservatório de bactérias expressando o fenótipo MDR no Brasil

High doses of antibiotics used in hospitals can affect the microbial composition of sewers, selecting resistant bacteria. In this sense, we evaluated the antibiotic resistance profile and the multiresistant phenotype of bacteria isolated in sewage from a tertiary hospital in the interior São Paulo state, Brazil. For bacteria isolation, 10 µL of sewage samples were sown in selective culture media and the isolates were identified using VITEK-2 automatized system. The antibiotic sensitivity test was performed by disk diffusion. High percentages of resistance were found for amoxicillin, ampicillin, ceftazidime, clindamycin, vancomycin and the multidrug-resistant phenotype (MDR) was attributed to 60.7% of the isolates. Our results show bacteria classified as critical/high priority by WHO List of Priority Pathogens (Enterococcus and Staphylococcus aureus resistant to vancomycin and Enterobacteriaceae resistant to carbapenems) in hospital sewage. Therefore, the implementation of disinfection technologies for hospital sewage would reduce the bacterial load in the sewage that will reach urban wastewater treatment plants, minimizing superficial water contamination and bacterial resistance spread in the environment.(AU)

Altas doses de antibióticos utilizados em hospitais podem afetar a composição microbiana dos esgotos, selecionando bactérias resistentes. Nesse sentido, avaliamos o perfil de resistência a antibióticos e o fenótipo multirresistente de bactérias isoladas em esgoto de um hospital terciário no interior do estado de São Paulo, Brasil. Para o isolamento de bactérias, foram semeados 10 µL das amostras de esgoto em meios de cultura seletivos e os isolados foram identificados usando o sistema automatizado VITEK-2. O teste de sensibilidade aos antibióticos foi realizado por disco-difusão em ágar. Elevadas porcentagens de resistência foram encontradas para amoxicilina, ampicilina, ceftazidima, clindamicina, vancomicina e o fenótipo multirresistente (MDR) foi atribuído a 60,7% dos isolados. Nossos resultados mostram bactérias classificadas como prioridade crítica/alta pela Lista de Patógenos Prioritários da OMS (Enterococcus e Staphylococcus aureus resistentes à vancomicina e Enterobacteriaceae resistentes aos carbapenêmicos) no esgoto hospitalar. Sendo assim, implementação de tecnologias de desinfecção do esgoto hospitalar reduziriam a carga bacteriana no esgoto que chegará às estações de tratamento de esgoto urbanas, minimizando a contaminação dos ecossistemas hídricos receptores e a disseminação da resistência bacteriana no ambiente.(AU)

Copro-PCR in the detection and confirmation of Toxoplasma gondii oocysts in feces of stray and domiciled cats / Copro-PCR na detecção e confirmação de oocistos de Toxoplasma gondii emfezes de gatos errantes e domiciliados

Molecular methods such as Copro-PCR stand out in the diagnosis of T. gondii, because they are highly sensitive and specific, and can distinguish T. gondii from other morphologically similar coccids. The purpose was the detection of Toxoplasma gondii copro-prevalence by polymerase chain reaction in 149 fecal samples from stray and domiciled cats, using three distinct markers (B5-B6, 18S and 529bp RE). Oocysts of T. gondii/H. hammondi were detected in 15.4% by parasitology fecal tests (PFT), and 4% of these oocysts were positively identified as T. gondii by Copro-PCR. The presence of T. gondii genetic material was detected in 16.1%, but 12% of the samples that tested positive by Copro-PCR were negative in PFT. Samples with discordant results were subjected to a new Copro-PCR with 18S marker and a 529, and of the 17 samples, 9 contained T. gondii genetic material. A comparison of the PFT and the molecular methods showed the latter was more sensitive, since it detected 22.1% while the PFT detected 15.4%. Demonstrating the high sensitivity and specificity of the Copro-PCR, particularly with the association of primers (k=0.809), but also confirms the importance of using molecular techniques in laboratories, since Copro-PCR was able to detect samples considered negative by PFT.(AU)

Métodos moleculares como a Copro-PCR se destacam no diagnóstico de T. gondii por serem altamente sensíveis e específicos, podendo distinguir T. gondii de outros coccídeos morfologicamente semelhantes. O objetivo foi a detecção da coproprevalência de Toxoplasma gondii por reação em cadeia da polimerase, em 149 amostras fecais de gatos errantes e domiciliados, utilizando-se três marcadores distintos (B5-B6, 18S e 529pb RE). Oocistos de T. gondii/H. hammondi foram detectados em 15,4% pelos exames parasitológicos de fezes (EPF), e 4% desses oocistos foram identificados positivamente como T. gondii pela Copro-PCR. A presença de material genético de T. gondii foi detectada em 16,1%, mas 12% das amostras positivas pelo Copro-PCR foram negativas no EPF. As amostras com resultados discordantes foram submetidas a uma nova Copro-PCR com os marcadores 18S e 529 e, das 17 amostras, 9 continham material genético de T. gondii. A comparação do EPF com os métodos moleculares mostrou que esse último foi mais sensível, pois detectou 22,1%, enquanto o EPF detectou 15,4%. Isso demonstra a alta sensibilidade e especificidade da Copro-PCR, principalmente com a associação de marcadores (k = 0,809); mas também confirma a importância do uso de técnicas moleculares em laboratórios, uma vez que a Copro-PCR foi capaz de detectar amostras consideradas negativas pelo EPF.(AU)

Pododermatite em elefante-asiático (Elephas maximus Linnaeus, 1758), mantido sob cuidados humanos

El elefante és uno de los mamíferos terrestres más grandes, ellos son carismáticos y bastante populares en zoológicos. Una elefante asiatica hembra adulta (Elephas maximus), mantenida en cuidado humano, de aproximadamente 60 años, con un peso aproximado de tres toneladas, presentaba cojera de los miembros anteriores con pereza o desgana para moverse por el recinto y con antecedentes de pododermatitis en miembros anteriores. Se observaron lesiones en la planta de la pata anterior con presencia de secreción purulenta, tejido vivo con áreas de necrosis. Con la ayuda de hisopos estériles, se enviaron muestras de las lesiones al laboratorio para cultivo y antiobiograma. El resultado de laboratorio mostró el crecimiento bacteriano de Klebsiella sp y Citrobacter sp. El antiobiograma reveló sensibilidad a los antibióticos: amoxicilina y ácido clavulónico, cefalexina, enrofloxacina, gentamicina, neomicina y sulfametoxazol-trimetoprima.

The elephant is one of the largest land mammals, they are charismatic and quite popular in zoos. An asian elephant (Elephas maximus), adult female kept in human care, aged approximately 60 years, weighing approximately three tons, was presented limping of the forelimbs members with reluctance to move around and with a history of pododermatitis. Lesions were observed in the foot sole with the presence of purulent secretion, living tissue with areas of necrosis. With the aid of sterile swabbs, samples of the lesions were sent to the laboratory for culture and antibiogram. The laboratory result showed the bacterial growth of Klebsiella sp and Citrobacter sp. The antibiogram revealed sensitivity to the antibiotics: amoxicillin and clavulonic acid, cephalexin, enrofloxacin, gentamicin, neomycin and sulfamethoxazole-trimethoprim.

O elefante é um dos maiores mamíferos terrestres, eles são carismáticos e bastante populares em jardins zoológicos. Um exemplar de elefante-asiático (Elephas maximus), fêmea, adulta, mantido sob cuidados humanos, com idade aproximada de 60 anos, pesando aproximadamente três toneladas, apresentava claudicação dos membros locomotores, relutância em se movimentar e com histórico de pododermatite em membros anteriores e posteriores. Foram observadas lesões na planta da pata com presença de secreção purulenta, hipequeratose, erosões e áreas de necrose. Com auxílio de swabs estéreis, amostras das lesões foram enviadas ao laboratório para cultura e antibiograma. O resultado laboratorial apontou o crescimento bacteriano de Klebsiella sp e Citrobacter sp. O antibiograma revelou sensibilidade para os antiobióticos: amoxicilina e ácido clavulônico, cefalexina, enrofloxacina, gentamicina, neomicina e sulfametoxazol-trimetoprim.

Pododermatite em elefante-asiático (Elephas maximus Linnaeus, 1758), mantido sob cuidados humanos

El elefante és uno de los mamíferos terrestres más grandes, ellos son carismáticos y bastante populares en zoológicos. Una elefante asiatica hembra adulta (Elephas maximus), mantenida en cuidado humano, de aproximadamente 60 años, con un peso aproximado de tres toneladas, presentaba cojera de los miembros anteriores con pereza o desgana para moverse por el recinto y con antecedentes de pododermatitis en miembros anteriores. Se observaron lesiones en la planta de la pata anterior con presencia de secreción purulenta, tejido vivo con áreas de necrosis. Con la ayuda de hisopos estériles, se enviaron muestras de las lesiones al laboratorio para cultivo y antiobiograma. El resultado de laboratorio mostró el crecimiento bacteriano de Klebsiella sp y Citrobacter sp. El antiobiograma reveló sensibilidad a los antibióticos: amoxicilina y ácido clavulónico, cefalexina, enrofloxacina, gentamicina, neomicina y sulfametoxazol-trimetoprima.(AU)

The elephant is one of the largest land mammals, they are charismatic and quite popular in zoos. An asian elephant (Elephas maximus), adult female kept in human care, aged approximately 60 years, weighing approximately three tons, was presented limping of the forelimbs members with reluctance to move around and with a history of pododermatitis. Lesions were observed in the foot sole with the presence of purulent secretion, living tissue with areas of necrosis. With the aid of sterile swabbs, samples of the lesions were sent to the laboratory for culture and antibiogram. The laboratory result showed the bacterial growth of Klebsiella sp and Citrobacter sp. The antibiogram revealed sensitivity to the antibiotics: amoxicillin and clavulonic acid, cephalexin, enrofloxacin, gentamicin, neomycin and sulfamethoxazole-trimethoprim.(AU)

O elefante é um dos maiores mamíferos terrestres, eles são carismáticos e bastante populares em jardins zoológicos. Um exemplar de elefante-asiático (Elephas maximus), fêmea, adulta, mantido sob cuidados humanos, com idade aproximada de 60 anos, pesando aproximadamente três toneladas, apresentava claudicação dos membros locomotores, relutância em se movimentar e com histórico de pododermatite em membros anteriores e posteriores. Foram observadas lesões na planta da pata com presença de secreção purulenta, hipequeratose, erosões e áreas de necrose. Com auxílio de swabs estéreis, amostras das lesões foram enviadas ao laboratório para cultura e antibiograma. O resultado laboratorial apontou o crescimento bacteriano de Klebsiella sp e Citrobacter sp. O antibiograma revelou sensibilidade para os antiobióticos: amoxicilina e ácido clavulônico, cefalexina, enrofloxacina, gentamicina, neomicina e sulfametoxazol-trimetoprim.(AU)

Isolation, characterization, and resistance profile of Salmonella spp. from chicken cuts / Isolamento, caracterização e perfil de resistência de Salmonella spp. provenientes de cortes de frango

The present study aimed at isolating and characterizing Salmonella spp. from chicken cuts marketed in Francisco Beltrão, PR, and verify the resistance profile of the isolates against antimicrobials used in human therapy. Samples of chicken cuts (n=40) were purchased from supermarkets and submitted to microbiological analysis for the detection of Salmonella spp. The suspected colonies underwent biochemical testing for the identification of enterobacteria. Four colonies were selected from each sample positive for Salmonella spp., totaling 28 isolates that were tested for antimicrobial sensitivity. Colonies that showed resistance to ceftriaxone were subjected to extended-spectrum beta-lactamases (ESBL). Among the analyzed chicken samples, seven (17.5%) showed biochemical behavior characteristic of Salmonella spp. Among the 28 isolates, seventeen different resistance profiles were found, of which 46.42% (n=13) had a multi-resistance profile, and 21.4% (n=6) of the isolates had a phenotype for ESBL production. The strains of Salmonella spp. isolated from chicken cuts found in this study showed a high level of resistance to antimicrobials of different classes and of last generations, these data serve as a warning, as they put the human treatment of salmonellosis at risk.(AU)

A pesquisa objetivou isolar e caracterizar Salmonella spp., a partir de cortes de frangos comercializados na cidade de Francisco Beltrão - PR, bem como verificar o perfil de resistência dos isolados em relação aos antimicrobianos utilizados na terapêutica humana. Amostras de cortes de frango (n=40) foram adquiridas em supermercados e submetidas à análise microbiológica para detecção de Salmonella spp. As colônias suspeitas foram submetidas a provas bioquímicas para identificação de enterobactérias. Quatro colônias foram selecionadas de cada amostra positiva para Salmonella spp., totalizando 28 isolados, que foram testadas quanto à sensibilidade a antimicrobianos. As colônias que apresentaram resistência à ceftriaxona foram submetidas à pesquisa de betalactamases de espectro estendido (ESBL). Das amostras de frango analisadas, sete (17,5%) apresentaram comportamento bioquímico característico de Salmonella spp. Entre os 28 isolados, foram encontrados 17 perfis diferentes de resistência, tendo 46,42% (n=13) apresentado perfil de multirresistência e 21,4% (n=6) apresentado fenótipo para produção de ESBL. As cepas de Salmonella spp. isoladas de cortes de frango, encontradas neste estudo, apresentaram alto índice de resistência a antimicrobianos de diferentes classes e de últimas gerações. Esses dados servem de alerta, uma vez que coloca em risco o tratamento da salmonelose humana.(AU)