Germination of Amaranthus deflexus L. seeds subjected to different temperature and salt-stress conditions / Germinação de sementes de Amaranthus deflexus L. submetidas a diferentes condições de temperatura e estresse salino

Weeds compete with crops for limiting factors in the environment in which they live; therefore, studies that demonstrate the germination response of seeds subjected to artificial stress are important to understand the survival and adaptation capacities of these species under natural stress conditions. This study proposes to evaluate the effect of salinity and thermal conditions on the germination and vigor of seeds of Amaranthus deflexus L. Two experiments were conducted with sowing in Petri dishes containing two sheets of filter paper moistened with distilled water (control) or NaCl solutions. In experiment 1, a completely randomized experimental design was adopted with a 2 × 6 factorial arrangement consisting of two photoperiods (12 h light and 24 h dark) and six levels of salt stress (0, -0.3, -0.6, -0.9, -1.2, and -1.5 MPa), totaling twelve treatments, with four replications. At the end of the test, the seeds that did not germinate were washed and placed on paper towel substrate, which was moistened with water for hydration and to stimulate the germination process. Experiment 2 was also laid out in a completely randomized design and involved eight treatments (germination at 20, 25, 30, 35, 40, 20/30, 25/35, and 30/40 °C) and four replicates each. Salt stress negatively affected the seed vigor of A. deflexus from the stress level of -0.3 MPa. The absence of light compromised seed vigor, regardless of the stress level applied. The final germination percentage and the germination speed index of A. deflexus seeds were superior at the constant temperature of 25 °C and in the alternating regime of 25-35 °C. The multivariate procedure discriminated treatments 1 and 2 as superior in dendrogram A, as well as 4, 5, and 6 in dendrogram B, making it a robust method for inference in factorial experiments on germination behavior.

As plantas daninhas competem com as culturas por fatores limitantes do meio em que vivem, portanto, estudos que apontem a resposta germinativa de sementes submetidas a estresses artificiais são importantes para entender a capacidade de sobrevivência e adaptação destas espécies sob condições de estresse naturais. Objetivou-se neste trabalho avaliar o efeito das condições salinas e térmicas sobre a germinação e vigor de sementes de Amaranthus deflexus L. Foram instalados dois experimentos, com semeadura realizada em placas de petri contendo duas folhas de papel de filtro umedecidas com água destilada (controle) ou com soluções de NaCl. No experimento 1 utilizou-se o delineamento experimental inteiramente casualizado (DIC), em esquema fatorial 2 x 6, constituído de dois fotoperíodos (12h luz e 24h escuro) e seis níveis de estresse salino (0; -0,3; -0,6; -0,9; -1,2 e -1,5 MPa), totalizando doze tratamentos, com quatro repetições. Ao final do teste, as sementes que não germinaram foram lavadas e colocadas em substrato papel toalha, umedecido com água para hidratação e estimular o processo germinativo. No experimento 2 utilizou-se um DIC com oito tratamentos (germinação sob 20; 25; 30; 35; 40°C, 20/30; 25/35 e 30/40°C) e quatro repetições cada. O estresse salino afetou negativamente o vigor das sementes de A. deflexus desde o nível de estresse de -0,3 MPa. O vigor das sementes foi comprometido pela ausência de luz, independentemente dos níveis de estresse aplicados. Houve superioridade na percentagem final de germinação e o índice de velocidade de germinação das sementes de A. deflexus na temperatura de 25°C constante e no regime alternado de 25-35°C. O procedimento multivariado discriminou os tratamentos 1 e 2 como superiores no dendograma A, bem como 4, 5 e 6 no dendograma B, configurando-se como método robusto para inferência em experimentos fatoriais sobre o comportamento germinativo.

Effects of anthropogenic disturbance in the survival of the sand lizard, Liolaemus occipitalis (Squamata: Liolaemidae) / Efeitos do distúrbio antropogênico na sobrevivência do lagarto da areia, Liolaemus occipitalis (Squamata: Liolaemidae)

Habitat fragmentation is one of the sources of the global threat to wildlife populations. During the last four decades, urban development in Brazil's southern coastline has seen considerable growth, fragmenting the habitat of the sand lizard Liolaemus occipitalis Boulenger, 1885, thus threatening it with extinction. In order to assess the influence of urban development on this species, we used tagging and recapture data to study two populations in Brazil's southern coastline, one in a conserved area rarely subjected to disturbance and the other in an area undergoing different kinds of anthropogenic disturbance. We explored the consequences of this change in the natural landscape by comparing estimates of survival and abundance with Robust Design Model, and the body condition of individuals in both populations with analysis of covariance and variance. Survival of individuals were lower in the disturbed population than in the conserved population. The abundance of this lizard species was similar between populations. The body condition of females was higher in the disturbed area than in the conserved area, while males were similar among populations, but longer (SVL). This study shows how anthropic impacts can affect a population of lizards and the importance of maintaining protected areas and their interconnection to preserve Liolaemus occipitalis.(AU)

A fragmentação do habitat é uma das fontes de ameaça global às populações de vida selvagem. Durante as últimas quatro décadas, o desenvolvimento urbano do litoral sul do Brasil teve um crescimento considerável, fragmentando o habitat da lagartixa-da-praia lagarto-da-areia Liolaemus occipitalis Boulenger, 1885, ameaçando-o de extinção. Para avaliar a influência do desenvolvimento urbano sobre esta espécie, usamos dados de marcação e recaptura para estudar duas populações, uma em uma área conservada raramente sujeita a perturbações, e a outra em uma área submetida a diferentes tipos de perturbações antrópicas. Exploramos as consequências dessa mudança na paisagem natural comparando estimativas de sobrevivência e abundância com Modelo Robusto de Pollock, e condição corporal dos indivíduos com análises de covariância e variância, em ambas as populações situadas no litoral sul do Brasil. A abundância da espécie foi semelhante nas duas áreas, mas a sobrevivência dos indivíduos foi menor na população perturbada do que na conservada. A condição corporal das fêmeas foi maior na área perturbada, enquanto que o CRC dos machos foi maior na área conservada. Este estudo mostra como impactos antrópicos podem afetar uma população de lagartos e a importância da manutenção de áreas protegidas e sua interconexão para a preservação de Liolaemus occipitalis.(AU)

Poultry by-product meal as dietary protein source for dourado, Salminus brasiliensis: an economic appraisal

The dourado, Salminus brasiliensis, a large, carnivorous, Neotropical, Characin, is highly regarded for fish farming and sport fishing alike. However, studies on the farming and husbandry of dourado are still scarce. This study evaluated the performance of dourado fed diets formulated so as to contain increasing levels of poultry by-product meal as a replacement for fish meal and aimed to identify the maximum level of replacement to maximize profit. The trial was set up in a closed recirculation system with controlled water quality (temperature 27 °C, dissolved oxygen 6.5 mg L−1, pH 7.4, and ammonia 0.25 mg L−1). Juvenile fish were stocked in tanks in a completely randomized design, acclimatized to system conditions and experimental diets, and then fed twice a day for 66 days with extruded, nutritionally complete diets (40 % digestible protein and 4020 kcal kg−1 digestible energy), formulated to contain 0, 20, 40, 60, 80 or 100 % poultry meal as a surrogate protein source for fish meal. Performance parameters – average weight gain, specific growth rate, feed consumption, feed conversion rate, protein efficiency rate, productive value of protein, energy retention rate, survival rate – did not differ (p > 0.05). To minimize the effects of influential data, the robust regression method was used and profit maximization analysis revealed that replacing 33.3 % of dietary fishmeal by poultry by-product meal maximizes profit in the farming of dourado.

Poultry by-product meal as dietary protein source for dourado, Salminus brasiliensis: an economic appraisal

The dourado, Salminus brasiliensis, a large, carnivorous, Neotropical, Characin, is highly regarded for fish farming and sport fishing alike. However, studies on the farming and husbandry of dourado are still scarce. This study evaluated the performance of dourado fed diets formulated so as to contain increasing levels of poultry by-product meal as a replacement for fish meal and aimed to identify the maximum level of replacement to maximize profit. The trial was set up in a closed recirculation system with controlled water quality (temperature 27 °C, dissolved oxygen 6.5 mg L−1, pH 7.4, and ammonia 0.25 mg L−1). Juvenile fish were stocked in tanks in a completely randomized design, acclimatized to system conditions and experimental diets, and then fed twice a day for 66 days with extruded, nutritionally complete diets (40 % digestible protein and 4020 kcal kg−1 digestible energy), formulated to contain 0, 20, 40, 60, 80 or 100 % poultry meal as a surrogate protein source for fish meal. Performance parameters average weight gain, specific growth rate, feed consumption, feed conversion rate, protein efficiency rate, productive value of protein, energy retention rate, survival rate did not differ (p > 0.05). To minimize the effects of influential data, the robust regression method was used and profit maximization analysis revealed that replacing 33.3 % of dietary fishmeal by poultry by-product meal maximizes profit in the farming of dourado.(AU)

Estimating population parameters of longsnout seahorses, Hippocampus reidi (Teleostei: Syngnathidae) through mark-recapture

Estimating population parameters is essential for understanding the ecology of species, which ultimately helps to assess their conservation status. The seahorse Hippocampus reidi is directly exposed to anthropogenic threats along the Brazilian coast, but the species still figures as Data Deficient (DD) at IUCN's Red List. To provide better information on the ecology of this species, we studied how population parameters vary over time in a natural subtropical environment. By combing mark-recapture models for open and closed populations, we estimated abundance, survival rate, emigration probability, and capture probability. We marked 111 individuals, which showed a 1:1 sex ratio, and an average size of 10.5 cm. The population showed high survival rate, low temporary emigration probability and variable capture probability and abundance. Our models considering relevant biological criteria illuminate the relatively poorly known population ecology and life history of seahorses. It is our hope that this study inspires the use of mark-recapture methods in other populations of H. reidi in a collective effort to properly assess their conservation status.(AU)

Parâmetros populacionais são essenciais para compreender a ecologia das espécies, além de auxiliar a avalição do seu status de conservação. Dentre as espécies de cavalo-marinho que ocorrem no Brasil, Hippocampus reidi é a mais abundante, o que expõe suas populações a frequentes ameaças antropogênicas. Entretanto, esta espécie ainda consta como Deficiente em Dados (DD) na lista vermelha da IUCN. Considerando esta falta de informações sobre populações de H. reidi, utilizamos métodos de marcação e recaptura para avaliar como parâmetros de uma população de ambiente subtropical variam ao longo do tempo. Baseado em históricos de captura individuais, combinamos modelos de populações abertas e fechadas para estimar abundância, taxa de sobrevivência, probabilidade de emigração e probabilidade de captura. Ao todo, marcamos 111 indivíduos, em proporção sexual de 1:1, e tamanho médio de 10,5 cm. Esta população relativamente pequena apresentou alta taxa de sobrevivência, baixa probabilidade de emigração temporária e probabilidade de captura e abundância variáveis. A partir dos nossos modelos que consideraram critérios biológicos relevantes, fornecemos estimativas de parâmetros chave que auxiliarão a compreensão da ecologia e da história de vida de cavalos-marinhos. Nossa expectativa é que este método passe a ser amplamente utilizado em outras populações, em um esforço coletivo para avaliar o estado de conservação desta espécie.(AU)

Estimating population parameters of longsnout seahorses, Hippocampus reidi (Teleostei: Syngnathidae) through mark-recapture

Estimating population parameters is essential for understanding the ecology of species, which ultimately helps to assess their conservation status. The seahorse Hippocampus reidi is directly exposed to anthropogenic threats along the Brazilian coast, but the species still figures as Data Deficient (DD) at IUCN's Red List. To provide better information on the ecology of this species, we studied how population parameters vary over time in a natural subtropical environment. By combing mark-recapture models for open and closed populations, we estimated abundance, survival rate, emigration probability, and capture probability. We marked 111 individuals, which showed a 1:1 sex ratio, and an average size of 10.5 cm. The population showed high survival rate, low temporary emigration probability and variable capture probability and abundance. Our models considering relevant biological criteria illuminate the relatively poorly known population ecology and life history of seahorses. It is our hope that this study inspires the use of mark-recapture methods in other populations of H. reidi in a collective effort to properly assess their conservation status.(AU)

Parâmetros populacionais são essenciais para compreender a ecologia das espécies, além de auxiliar a avalição do seu status de conservação. Dentre as espécies de cavalo-marinho que ocorrem no Brasil, Hippocampus reidi é a mais abundante, o que expõe suas populações a frequentes ameaças antropogênicas. Entretanto, esta espécie ainda consta como Deficiente em Dados (DD) na lista vermelha da IUCN. Considerando esta falta de informações sobre populações de H. reidi, utilizamos métodos de marcação e recaptura para avaliar como parâmetros de uma população de ambiente subtropical variam ao longo do tempo. Baseado em históricos de captura individuais, combinamos modelos de populações abertas e fechadas para estimar abundância, taxa de sobrevivência, probabilidade de emigração e probabilidade de captura. Ao todo, marcamos 111 indivíduos, em proporção sexual de 1:1, e tamanho médio de 10,5 cm. Esta população relativamente pequena apresentou alta taxa de sobrevivência, baixa probabilidade de emigração temporária e probabilidade de captura e abundância variáveis. A partir dos nossos modelos que consideraram critérios biológicos relevantes, fornecemos estimativas de parâmetros chave que auxiliarão a compreensão da ecologia e da história de vida de cavalos-marinhos. Nossa expectativa é que este método passe a ser amplamente utilizado em outras populações, em um esforço coletivo para avaliar o estado de conservação desta espécie.(AU)

Polychromatism of populations of Corallus hortulanus (Squamata: Boidae) from the southern Amazon Basin, Brazil / Policromatismo das populações de Corallus hortulanus (Squamata: Boidae) ao sul da Bacia Amazônica, Brasil

The Amazon tree boa Corallus hortulanus is known for featuring a wide variation in color pattern and design markings. Although there are studies on its polychromatism, none of them addresses the geographic variation in the color pattern of this species. The aim of this study was to describe the chromatic variation found in the populations of C. hortulanus from the southern Amazon Basin and its relationship with geographic distribution of the species. Analysis of both design markings and color patterns on 112 C. hortulanus specimens from the southern Amazon Basin interfluves resulted in the identification of six distinct morphotypes. Grayish-brown coloration and elongated diamond-shaped patterns were the most frequent patterns. Two morphotypes showed a tendency of correlation with the geographical distribution of those species found in Madeira and Juruá Rivers. The small sample size does not allow for a robust conclusion on the possible cause of geographic variation. The distribution of morphological patterns of C. hortullanus in the Amazon Basin suggest that there is gene flow between populations, regardless of geographical distance and natural barriers. The variation in color pattern and markings may represent a phenotypic response to the characteristics of different habitats occupied by the species.(AU)

Corallus hortulanus é uma serpente conhecida por apresentar grande variação no padrão de coloração e desenho. Apesar de estudos relacionados ao seu policromatismo, nenhum deles abordou a variação geográfica no padrão de cor desta espécie. O objetivo deste estudo foi descrever a variação cromática das populações de C. hortulanus na Calha sul do Rio Amazonas e verificar a correlação entre a distribuição geográfica e a variação encontrada. A partir da análise do padrão de desenho e cor de 112 espécimes de C. hortulanus procedentes dos interflúvios (área entre dois rios) da Calha Sul foram descritos seis morfotipos. Dos seis morfotipos descritos, a cor marrom-acinzentado e o padrão de desenho losango alongado foram os mais comuns entre as populações analisadas. Dois morfotipos apresentaram uma tendência de correlação com a distribuição geográfica, estando relacionados aos rios Madeira e Juruá, embora o número de amostras tenha sido pequeno. A distribuição dos padrões morfológicos de C. hortullanus na Bacia Amazônica revelou que existe fluxo gênico entre as populações, independentemente da distância geográfica e das barreiras naturais. Provavelmente, o padrão de cor e desenho seja uma resposta fenotípica às pressões nos diferentes ambientes ocupados pela espécie.(AU)

Polychromatism of populations of Corallus hortulanus (Squamata: Boidae) from the southern Amazon Basin, Brazil / Policromatismo das populações de Corallus hortulanus (Squamata: Boidae) ao sul da Bacia Amazônica, Brasil

The Amazon tree boa Corallus hortulanus is known for featuring a wide variation in color pattern and design markings. Although there are studies on its polychromatism, none of them addresses the geographic variation in the color pattern of this species. The aim of this study was to describe the chromatic variation found in the populations of C. hortulanus from the southern Amazon Basin and its relationship with geographic distribution of the species. Analysis of both design markings and color patterns on 112 C. hortulanus specimens from the southern Amazon Basin interfluves resulted in the identification of six distinct morphotypes. Grayish-brown coloration and elongated diamond-shaped patterns were the most frequent patterns. Two morphotypes showed a tendency of correlation with the geographical distribution of those species found in Madeira and Juruá Rivers. The small sample size does not allow for a robust conclusion on the possible cause of geographic variation. The distribution of morphological patterns of C. hortullanus in the Amazon Basin suggest that there is gene flow between populations, regardless of geographical distance and natural barriers. The variation in color pattern and markings may represent a phenotypic response to the characteristics of different habitats occupied by the species.

Corallus hortulanus é uma serpente conhecida por apresentar grande variação no padrão de coloração e desenho. Apesar de estudos relacionados ao seu policromatismo, nenhum deles abordou a variação geográfica no padrão de cor desta espécie. O objetivo deste estudo foi descrever a variação cromática das populações de C. hortulanus na Calha sul do Rio Amazonas e verificar a correlação entre a distribuição geográfica e a variação encontrada. A partir da análise do padrão de desenho e cor de 112 espécimes de C. hortulanus procedentes dos interflúvios (área entre dois rios) da Calha Sul foram descritos seis morfotipos. Dos seis morfotipos descritos, a cor marrom-acinzentado e o padrão de desenho losango alongado foram os mais comuns entre as populações analisadas. Dois morfotipos apresentaram uma tendência de correlação com a distribuição geográfica, estando relacionados aos rios Madeira e Juruá, embora o número de amostras tenha sido pequeno. A distribuição dos padrões morfológicos de C. hortullanus na Bacia Amazônica revelou que existe fluxo gênico entre as populações, independentemente da distância geográfica e das barreiras naturais. Provavelmente, o padrão de cor e desenho seja uma resposta fenotípica às pressões nos diferentes ambientes ocupados pela espécie.

DDRT-PCR approaches applied for preeminent results in the isolation of DETs from fish brain tissues / Aplicação de abordagens de DDRT-PCR para aprimoramento de resultados no isolamento de DETs a partir de tecido cerebral de peixes

Differential Display (DD) is a technique widely used in studies of differential expression. Most of these analyses, especially those involving fish species, are restricted to species from North America and Europe or to commercial species, as salmonids. Studies related to South American fish species are underexplored. Thus, the present work aimed to describe DD technique modifications in order to improve outcomes related to the isolation of DETs (Differentially Expressed Transcripts), using Leporinus macrocephalus, a large commercially exploited South American species, as a fish design. Different DDRT-PCR approaches were applied to brain samples and the products of the reactions were analyzed on 6% polyacrylamide gels stained with 0.17% Silver Nitrate (AgNO3). The use of PCR reactions under high stringency conditions and longer oligonucleotides based on VNTR (Variable Number of Tandem Repeats) core sequences led to better results when compared to low stringency PCR conditions and the use of decamer oligonucleotides. The improved approach led to the isolation of differentially expressed transcripts on adult males and females of L. macrocephalus. This study indicates that some modifications on the DDRT-PCR method can ensure isolation of DETs from different fish tissues and the development of robust data related to this approach.(AU)

Display Diferencial (DD) é uma técnica amplamente utilizada em estudos de expressão diferencial. A maioria desses estudos envolvendo espécies de peixes está restrita a espécies da América do Norte e Europa ou a espécies comerciais, como os salmoniformes. Estudos relacionados a peixes da América do Sul são ainda pouco explorados. Desse modo, o presente trabalho teve como objetivo descrever modificações na técnica de DD, a fim de melhorar os resultados relacionados ao isolamento de DETs (Transcritos Diferencialmente Expressos), utilizando Leporinus macrocephalus, peixe explorado comercialmente na América do Sul, como espécie para tal delineamento. Diferentes abordagens de DDRT-PCR foram desenvolvidas a partir de amostras de tecido cerebral e os produtos das reações foram analisados em gel de poliacrilamida 6% corados com 0,17% de nitrato de Prata (AgNO3). A utilização de reações de PCR sob condições de elevada estringência e oligonucleotídeos mais longos, com base em sequências cerne de VNTR (Número Variável de Repetições em Tandem), mostrou melhores resultados quando comparada a condições de baixa estringência e ao uso de oligonucleotídeos decâmeros. A estratégia empregada permitiu o isolamento de transcritos diferencialmente expressos em machos e fêmeas adultos de L. macrocephalus. Este estudo evidencia que modificações no método de DDRT-PCR garantem o melhor isolamento de DETs a partir de diferentes tecidos de peixes e asseguram a obtenção de dados mais sólidos relacionados a essa abordagem.(AU)

Caseinomacropeptide index in UHT whole milk stored under different conditions of temperature and time / Efeito das condições de armazenamento no índice de caseinomacropeptídeo de amostras de leite integral ultra alta temperatura (UAT)

Caseinomacropeptide (CMP) index is a method used to detect adulteration of milk by addition of cheese whey, since CMP is a glycopeptide characteristic produced during cheesemaking, and soluble in the whey phase. The objective of this work was to evaluate the caseinomacropeptide index of UHT milk stored under different temperatures. Six batches of recently processed UHT milk were collected and stored under three temperatures (21ºC, 6ºC, and -12ºC) and analyzed by HPLC in the day of the milk collection (day 0) and at 30, 60, 90, and 120 days of storage. The experiment was run as a randomized block design with a 3x5 factorial arrangement, and the Student-Newman-Keuls (SNK) method was used as the post-hoc test (p = 0.05). There was a progressive increase of the CMP index during the storage period of 120 days, and this indicates the possibility of false positive results if the CMP index is used as an adulteration test for long term stored UHT milk. The validity of the CMP index as an adulteration indicator is only possible soon after packaging, and sample freezing is the only alternative when immediate analysis is not possible. The method was found to be precise, with robust CV of 1.9% even with high CMP levels.(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência da temperatura e do tempo de armazenamento de amostras de leite UAT, em relação ao índice de caseinomacropeptídeo, por cromatografia líquida de alta eficiência, e a precisão do método de detecção. Seis lotes foram coletados e armazenados em três temperaturas (21ºC, 6ºC e -12ºC ± 1ºC) e analisadas durante o armazenamento nos dias 0, 30, 60, 90 e 120 dias. Utilizou-se o delineamento em blocos casualizados com os tratamentos em arranjo fatorial 3x5 e os resultados foram comparados por meio do teste Student-Newman-Keuls (SNK) a 5% de significância. Houve aumento progressivo do índice de CMP por CLAE durante os 120 dias; portanto, um produto conforme pode se tornar não conforme sem que ocorra adulteração. A detecção de fraude por adição de soro lácteo em leite UAT pode ser detectada somente após o envase. Caso não seja possível a análise imediata, recomenda-se que as amostras sejam congeladas. O método é muito preciso (CV=1,9%) e indiferente aos níveis de CMP encontrados nas amostras.(AU)

Avaliações morfofisiológicas na fase vegetativa de milho irrigado / Reviews morphophisiological in vegetative phase of irrigated corn

O milho é uma cultura de grande importância econômica na agricultura brasileira e mundial. O suprimento de água é importante para seu crescimento e desenvolvimento desde que adotado na quantidade adequada para atender as necessidades hídricas da planta. O presente trabalho objetivou avaliar a resposta fisiológica e bioquímica de um cultivar de milho transgênico e um híbrido submetidos a diferentes lâminas de irrigação. O trabalho foi conduzido em ambiente protegido, no campus II da Unoeste, Presidente Prudente – SP. O delineamento experimental foi em blocos ao acaso em esquema fatorial duplo, com cinco lâminas de irrigação (150, 100, 75, 50 e 25% evapotranspiração da cultura (ETc)), 2 cultivares (transgênico (Agroceres 8088) e PEN 22 robusto (Selegrãos)) e 4 blocos. As lâminas de irrigação foram determinadas em função de leituras diárias do evaporímetro de Pichê ajustadas pelo coeficiente de cultura (kc) de 1,2 para a cultura do milho. Os parâmetros avaliados foram altura de plantas (quinzenalmente), comprimento e volume de raiz, massa seca de parte aérea e raiz, relação raiz/parte aérea e concentração de prolina nas folhas frescas. Os dados foram submetidos à ANOVA e posteriormente ao teste de Tukey para comparação entre as médias ao nível de probabilidade de 0,05. Para as condições do Oeste Paulista, é mais viável o plantio do cultivar da PEN 22 Robusta com irrigação de 25% da evapotranspiração da cultura (ETc) por garantir acúmulo de biomassa na fase de desenvolvimento vegetativo.

Corn is a crop of great economic importance in the Brazilian and world agriculture. The watersupply is important for their growth and development from that adopted in the proper amount tomeet the water needs of the plant. This study aimed to evaluate the physiological and biochemicalresponse of a cultivar of transgenic corn and a hybrid subjected to different irrigation. The workwas conducted in greenhouse on campus Unoeste II, Presidente Prudente - SP. The experimentaldesign was in randomized blocks in a double factorial design with five depth of irrigation (150, 100,75, 50 and 25% crop evapotranspiration (ETc)), two cultivars (transgenic Agroceres 8088 androbust 22 PEN (Selegrãos)) and 4 blocks. The depths of irrigation were determined according tothe daily readings evaporimeter tar adjusted by the crop coefficient (kc) of 1.2 for the corn crop.The parameters evaluated were plant height, length and root volume, dry weight of shoot androot, root / shoot ratio and shoot proline concentration in fresh leaves. Data were submitted toANOVA and then Tukey test to compare means between the probability level of 0.05. For theconditions of Oeste Paulista, is more feasible planting cultivar of PEN 22 Robust irrigation with25% of crop evapotranspiration (ETc) for ensuring biomass accumulation in the vegetative stage.

Avaliações morfofisiológicas na fase vegetativa de milho irrigado / Reviews morphophisiological in vegetative phase of irrigated corn

O milho é uma cultura de grande importância econômica na agricultura brasileira e mundial. O suprimento de água é importante para seu crescimento e desenvolvimento desde que adotado na quantidade adequada para atender as necessidades hídricas da planta. O presente trabalho objetivou avaliar a resposta fisiológica e bioquímica de um cultivar de milho transgênico e um híbrido submetidos a diferentes lâminas de irrigação. O trabalho foi conduzido em ambiente protegido, no campus II da Unoeste, Presidente Prudente SP. O delineamento experimental foi em blocos ao acaso em esquema fatorial duplo, com cinco lâminas de irrigação (150, 100, 75, 50 e 25% evapotranspiração da cultura (ETc)), 2 cultivares (transgênico (Agroceres 8088) e PEN 22 robusto (Selegrãos)) e 4 blocos. As lâminas de irrigação foram determinadas em função de leituras diárias do evaporímetro de Pichê ajustadas pelo coeficiente de cultura (kc) de 1,2 para a cultura do milho. Os parâmetros avaliados foram altura de plantas (quinzenalmente), comprimento e volume de raiz, massa seca de parte aérea e raiz, relação raiz/parte aérea e concentração de prolina nas folhas frescas. Os dados foram submetidos à ANOVA e posteriormente ao teste de Tukey para comparação entre as médias ao nível de probabilidade de 0,05. Para as condições do Oeste Paulista, é mais viável o plantio do cultivar da PEN 22 Robusta com irrigação de 25% da evapotranspiração da cultura (ETc) por garantir acúmulo de biomassa na fase de desenvolvimento vegetativo.(AU)

Corn is a crop of great economic importance in the Brazilian and world agriculture. The watersupply is important for their growth and development from that adopted in the proper amount tomeet the water needs of the plant. This study aimed to evaluate the physiological and biochemicalresponse of a cultivar of transgenic corn and a hybrid subjected to different irrigation. The workwas conducted in greenhouse on campus Unoeste II, Presidente Prudente - SP. The experimentaldesign was in randomized blocks in a double factorial design with five depth of irrigation (150, 100,75, 50 and 25% crop evapotranspiration (ETc)), two cultivars (transgenic Agroceres 8088 androbust 22 PEN (Selegrãos)) and 4 blocks. The depths of irrigation were determined according tothe daily readings evaporimeter tar adjusted by the crop coefficient (kc) of 1.2 for the corn crop.The parameters evaluated were plant height, length and root volume, dry weight of shoot androot, root / shoot ratio and shoot proline concentration in fresh leaves. Data were submitted toANOVA and then Tukey test to compare means between the probability level of 0.05. For theconditions of Oeste Paulista, is more feasible planting cultivar of PEN 22 Robust irrigation with25% of crop evapotranspiration (ETc) for ensuring biomass accumulation in the vegetative stage.(AU)

Sperm biotechnologies in domestic species: state of the art

Modern livestock breeding is basically dependent on the proper use of semen for artificial insemination of femeles and of other reproductive biotechnologies such as the production of embryos in vitro for embryo transfer (IVP). Both these techniques have made possible not only the wide dissemmation of genetic material onto breeding populations but also anhanced the selection of best sires, owing to the development of better diagnostic techniques for sperm function and of preservation of seminal material over time. Although use ofliquid semen cooled to room temperature, to intermediate temperatures (+16-20ºC) or chilled (+5ºC) dominates in different species cryopreservation is preferred in bovine A1 and it is advancing in other species by the design of new containers, freezing methods and the use of better insemination strategies. Techniques to separate the aliquot of most robust spermatozoa from an ejaculate have shown a renascent particularly for sires with low sperm quality, and technological advances in separating spermatozoa for c hromosomal sex make the technique suitable for commercial use, following applicat ion of novel findings in sperm and seminal plasma (SP) diagnostics and function. Alongside, knowledge of the epigenome and signalling c apabilities of the semen (sperm and SP) call s for further studies regarding transgene production via ICSI for IVP or AI.

Sperm biotechnologies in domestic species: state of the art

Modern livestock breeding is basically dependent on the proper use of semen for artificial insemination (AU) of femeles and of other reproductive biotechnologies such as the production of embryos in vitro for embryo transfer (IVP). Both these techniques have made possible not only the wide dissemmation of genetic material onto breeding populations but also anhanced the selection of best sires, owing to the development of better diagnostic techniques for sperm function and of preservation of seminal material over time. Although use ofliquid semen cooled to room temperature, to intermediate temperatures (+16-20ºC) or chilled (+5ºC) dominates in different species cryopreservation is preferred in bovine A1 and it is advancing in other species by the design of new containers, freezing methods and the use of better insemination strategies. Techniques to separate the aliquot of most robust spermatozoa from an ejaculate have shown a renascent particularly for sires with low sperm quality, and technological advances in separating spermatozoa for c hromosomal sex make the technique suitable for commercial use, following applicat ion of novel findings in sperm and seminal plasma (SP) diagnostics and function. Alongside, knowledge of the epigenome and signalling c apabilities of the semen (sperm and SP) call s for further studies regarding transgene production via ICSI for IVP or AI.(AU)

Quitosana associada a grão de soja integral na alimentação de vacas leiteiras: I. Digestão, metabolismo e desempenho produtivo; II. Avaliação de metodologias para estimativas da digestibilidade aparente total e produção microbiana ruminal

A presente tese foi elaborada em três capítulos, correspondente às seções 2, 3 e 4. No primeiro objetivou-se avaliar a associação de quitosana com grão de soja integral nas dietas sobre o consumo, fermentação ruminal, digestibilidade e metabolismo de nutrientes e seus efeitos sobre a produção de leite, perfil de ácidos graxos do leite e a eficiência produtiva de vacas em lactação. Para tal, 24 vacas multíparas da raça Holandesa, oito dessas com cânula ruminal, foram distribuídas em quadrados latinos 4×4 replicados. Os tratamentos foram obtidos por esquema fatorial 2×2 pela combinação de quitosana e grão de soja integral nas dietas. De modo geral, a associação de quitosana com grão de soja aumentou a eficiência de fermentação ruminal, reduziu as populações bacterianas ligadas à biohidrogenação e assim aumentou o teor de ácidos graxos insaturados na gordura do leite, mas houve significativa redução do consumo e digestibilidade dos nutrientes, da síntese de proteína microbiana e da produção de leite. No entanto, a adição de quitosana em dietas sem suplementação lipídica pode ser uma boa estratégia nutricional para aumentar a retenção de N e a eficiência alimentar de vacas em lactação, e adicionalmente, aumentar o teor de ácidos graxos insaturados e de cis-9, trans-11 CLA no leite. No segundo capítulo, o objetivo geral foi avaliar os indicadores externos Cr2O3 e TiO2 e os internos MSi, FDNi e FDAi, estes analisados em diferentes sacos de incubação in situ, a partir da acurácia, precisão e robustez das estimativas de excreção fecal em ensaio de digestão com vacas leiteiras consumindo diferentes dietas. Foram utilizadas as oito vacas canuladas no rúmen para a realização de coletas totais de fezes com 24, 48 e 72 h de duração. De modo geral, o Cr2O3 gerou estimativas acuradas e precisas, no entanto a recuperação fecal e a robustez foram afetadas pelo consumo de EE das vacas. O indicador TiO2 apresentou incompleta recuperação fecal, baixa acurácia, precisão e robustez. Dentre as combinações avaliadas para os indicadores internos, a FDNi em sacos de poliéster teve completa recuperação e gerou as estimativas mais acuradas, precisas e robustas. A falta de acurácia e precisão dos indicadores têm grande impacto final sobre as estimativas de digestibilidade. No terceiro capítulo, o objetivo foi avaliar o uso da creatinina como indicador do volume urinário para estimativas de excreção total de derivados de purinas como técnica de avaliação da produção microbiana ruminal em vacas leiteiras alimentadas com diferentes dietas. Também foram utilizadas as oito vacas canuladas no rúmen para a realização de coletas totais de urina com 24, 48 e 72 h de duração. De modo geral, a creatinina foi afetada pelas condições experimentais do estudo, incluindo efeito de dieta e variações conforme o período experimental e animais. Apesar da relação entre excreção observada e estimada de derivados de purinas, essa deve ser vista com cautela, em razão de que o volume urinário foi subestimado e que as estimativas não identificaram corretas diferenças entre as dietas, comprometendo as avaliações sobre a produção microbiana ruminal.

The present thesis was elaborated in three chapters, corresponding to sections 2, 3 and 4. In the first one, the aim was to evaluate the association of chitosan (C) and whole raw soybean (WRS) in diets, evaluating the intake, ruminal fermentation, digestibility and nutrient metabolism and its effects on milk production, milk fatty acids profile and the productive efficiency of lactating cows. Multiparous Holstein cows (n= 24), eight of them fitted with ruminal cannula, were distributed in a replicated 4 × 4 Latin squares. The treatments were a combination of C and WRS diets arranged in a 2 × 2 factorial design. This association increased the efficiency of ruminal fermentation, reducing the bacterial population responsible for the biohydrogenation and thus, increased the unsaturated fatty acids in milk. The C and WRS diets caused a significant reduction in DMI and nutrient digestibility, in microbial protein synthesis and milk yield. However, the addition of C in diets without a lipid supplementation may be a good nutritional strategy to increase the N retention and increase the food efficiency of lactating cows, and, indeed, to increase the unsaturated fatty acids content, mainly cis-9, trans -11 CLA. In the second chapter, the objective was to evaluate the external indicators Cr2O3 and TiO2 and the indigestible internal DM, NDF and ADF that were determined in in situ different incubation bags from the accuracy, precision and robustness of the fecal excretion estimates in a digestion assay with different dairy cow diets. Eight cows fitted with ruminal cannula were used to perform total fecal collection over 24, 48 and 72 hours. The Cr2O3 generated accurate estimates, however, the fecal recovery and robustness were affected by the ethereal extract intake. The TiO2 indicator showed incomplete fecal recovery, low accuracy, precision and robustness. Among the combinations for the internal indicators, the NDFi in polyester bags had a complete recovery and generated the most accurate and robust estimates. The lack of accuracy and precision of the indicators have a big impact on the digestibility estimates. In the third chapter, the aim was to evaluate the use of creatinine as an indicator of urinary volume. It would be possible to estimate the total excretion of purine derivatives to evaluate the ruminal microbial production in different cow diets. Also, eight multiparous cows fitted with ruminal cannula were used to make total urine collection over 24, 48 and 72 hours. The creatinine was affected by the study experimental conditions, including dietary effect and variations according to period and animals. The relationship between observed and estimated excretion of purine derivatives should be viewed with caution, because the urinary volume was underestimated and the estimates did not identify the correct differences between diets, that could compromise the evaluations of ruminal microbial production.

IMPACTS OF DIET INVERSION ON VOLUNTARY INTAKE, DIGESTA AND FECAL COMPOSITION, AND BACTERIAL COMMUNITY COMPOSITION IN RUMEN OF CATTLE FED TROPICAL FORAGE-BASED DIETS

Objetivou-se avaliar o impacto da inversão de dietas sobre o consumo voluntário, composição das fezes e digesta ruminal, fermentação ruminal e estrutura da microbiota ruminal de bovinos alimentados com dietas baseadas em forragens tropicais e estabelecer a duração mínima do período de adaptação que poderia ser aplicado em protocolos de experimentos conduzidos em delineamentos em crossover e changeover. Doze bovinos mestiços Europeu × Zebu fistulados no rúmen foram utilizados no experimento (quatro animais jovens não-castrados, quatro animais castrados e quatro novilhas). O experimento teve a duração total de 60 dias e duas inversões de dietas foram realizadas no 21º e 41º dias. Quatro sequências de dietas foram avaliadas: cana-se-açúcar-silagem de milho-cana-deaçúcar, silagem de milho-cana-de-açúcar-silagem de milho, baixo concentrado-alto concentrado-baixo concentrado e alto concentrado-baixo concentrado-alto concentrado. Todas as dietas foram ajustadas com ureia para apresentarem 110 g de proteína bruta por kg de matéria seca. Quatro grupos de variáveis foram avaliados ao longo do experimento: características do consumo voluntário, excreção e composição fecal, composição da digesta ruminal e perfil de fermentação ruminal. O comportamento dos grupos ao longo do tempo foi interpretado por um procedimento de agrupamento não-hierárquico. A diversidade das populações bacterianas da fase líquida da digesta ruminal foram avaliadas por PCR-DGGE somente nos animais jovens não castrados entre 6 dias antes e 20 dias após a segunda inversão de dietas. Variações na estrutura da comunidade bacteriana foram avaliadas por intermédio de procedimento de agrupamento utilizando-se o método de pares de grupos não-ponderados com média aritmética. A estabilização do consumo voluntário, digesta ruminal, excreção e composição fecal e fermentação ruminal ocorreu entre 9 e 13, 9 e 14, 6 e 13, e 4 e 11 dias após a inversão de dietas, respectivamente. A comunidade bacteriana na fase líquida estabilizou entre 3 e 9 dias após a inversão das dietas. O tempo máximo requerido para adaptação entre todas as características deve ser escolhido para assegurar-se a utilização de protocolo experimental robusto. Assim, a partir dos resultados do presente trabalho, entre todos os tempos necessários para a adaptação do consumo, excreção fecal, composição e perfil de fermentação ruminal e microbiota ruminal, períodos de adaptação de 14 dias são recomendados para experimentos em changeover e crossover com bovinos alimentados com dietas baseadas em forragens tropicais.

The objective of this study was to evaluate the impact of the diet inversion on voluntary intake, ruminal digesta and feces composition, ruminal fermentation, and bacterial community composition in cattle fed tropical forage-based diest and to establish the minimal length of the adaptation period that could be applied to changeover or crossover design protocols. Twelve rumen-cannulated crossbreed (B. taurus × B. indicus) bovines were used in this experiment (four young bulls, four steers, and four heifers). The experiment lasted 60 d and two diet inversions were done at d 21 and d 41. Four diet sequences were evaluated (one animal of each category per sequence): sugarcane-corn silage-sugarcane, corn silage-sugarcane-corn silage, high-low-high concentrate diets, and low-high-low concentrate diets. All diets were adjusted to 110 g crude protein per kg of dry matter by using urea. Four group of variables were evaluated along experimental days: voluntary intake characteristics, fecal excretion and composition, ruminal digesta compostion, and ruminal fermentation profile. The pattern of the groups along time was interpreted through a non-hierarchical clustering procedure. The diversity of the liquid-associated rumen bacterial community was evaluated by PCR-DGGE in the young bulls from 6 days before to 20 days after the second diet inversion. The pattern of microbial diversity was evaluated through a clustering procedure using the unweight pair group method with arithmetic mean. Stabilization of the voluntary intake, ruminal digesta, fecal excretion and composition, and rumen fermentation profile was achieved within 9-13, 9- 14, 6-13, and 4-11 days after diet inversion, respectively. The bacterial community in the liquid phase stabilized within 3-9 days after diet inversion. The maximum required adaptation period among all characteristics must be chosen to assure the utilization of a robust experimental protocol. From the results of this experiment, among all obtained times to adapt intake, fecal and digesta composition, and ruminal fermentation and microbial diversity, a 14- days adaptation period is recommended for changeover and crossover experiments with cattle fed tropical forage-based diets.