In vitro inactivation of thrombin generation by polysulfated fractions isolated from the tropical coenocytic green seaweed Caulerpa racemosa (Caulerpaceae, Bryopsidales) / Inativação in vitro da geração de trombina por frações polissulfatadas isoladas damacroalga verde cenocítica tropical Caulerpa racemosa (Caulerpaceae; Bryopsidales)

Pharmacological efficacy of Caulerpa racemosa (Chlorophyta) sulfated polysaccharidic (SPs) fractions (F IIII) on models of coagulation and inflammation has been demonstrated, but not their effects on thrombin generation (TG). This study examined fractions for composition and physical-chemical characteristics and in vitro inactivation of TG by F I and F II in 60-fold diluted human plasma using continuous method. Papain-extraction yield of 0.7% revealed F IIII by DEAE-cellulose chromatography, with differences among the relative proportions of sulfate (17.37-24.00%), total sugars (30.03-48.34%) and absence of proteins. Charge density patterns and molecular sizes > 100 kDa of the fractions were verified by both agarose/polyacrylamide analyses, respectively. These electrophoreses combined with toluidine blue/Stains-All also indicated nonSPs. Anticoagulant effects of 4.76 (F I), 12.00 (F II) and 2.32 (F II) IU mg-1 by activated partial thromboplastin time test were recorded against heparin (193 IU mg-1), without changes in prothrombin time. Diluted plasma treated with F I and F II reduced concentration-dependent and sulfation pattern TG by both intrinsic and extrinsic pathways, with 50% inactivation by intrinsic pathway of F II even at 4.1 µg. Heparin abolished TG at least 4-fold lower. Therefore, C. racemosa produces SPs with TG inhibition.(AU)

Eficácia farmacológica de frações (F I→III) polissacarídicas sulfatadas (PSs) da Chlorophyta Caulerpa racemosa sobre modelos de coagulação e inflamação tem sido demonstrada, exceto seus efeitos sobre geração de trombina (GT). Examinaram-se frações quanto à composição, características físico-químicas e inativação in vitro de GT por F I e F II, em plasma humano diluído 60 vezes usando método contínuo. Rendimento de extração-papaína (0,7%) revelou, por cromatografia de DEAE-celulose, F I→III com diferenças entre as proporções relativas de sulfato (17,37-24,00%), açúcares totais (30,03-48,34%) e ausência de proteínas. Foram verificados, por ambas as análises agarose/poliacrilamida, graus de densidade de carga e tamanhos moleculares > 100 kDa das frações, respectivamente. Também essas eletroforeses, combinadas com azul de toluidina/Stains-All, indicaram polissacarídeos não sulfatados. Foram registrados, pelo teste do tempo de tromboplastina parcial ativada, efeitos anticoagulantes de 4,76 (F I), 12,00 (F II) e 2,32 (F II) UI mg-1 contra heparina (193 UI mg-1), porém não modificando tempo de protrombina. Plasma diluído tratado com F I e F II reduziu GT por ambas as vias intrinsíca/extrínsica, dependente de concentração e grau de sulfatação, com F II em 4,1 μg apresentando eficácia de 50% pela via intrínsica. Heparina, quatro vezes menos, aboliu GT. Portanto, C. racemosa produz PSs com inibição de GT.(AU)

EFEITO DO -HIDROXIBUTIRATO SOBRE A FUNÇÃO OVARIANA DE VACAS LEITEIRAS SUBMETIDAS A PROTOCOLO DE INSEMINAÇÃO ARTIFICIAL EM TEMPO FIXO

A seleção de animais com capacidade produtiva superior conduziu à alta produção, necessidades nutricionais únicas e problemas reprodutivos variados, comprometendo a eficiência dos rebanhos leiteiros modernos. No período das últimas três semanas até o pico de lactação, as alterações metabólicas conduzem à elevados níveis de ácidos graxos não esterificados e baixos de glicose, com comprometimento da responsividade e sensibilidade tecidual à insulina. O resultado é o desacomplamento do eixo somatotrópico, evidenciado pelos elevados níveis de hormônio do crescimento e queda de suas somatomedinas. Esta condição conduz à doenças metabólicas, anestro, formação de cistos, alterações do tempo de vida do corpo lúteo, níveis baixos de progesterona e estradiol que alteram a qualidade dos oócitos e do ambiente uterino. Uma abordagem comum é o uso de protocolos hormonais para contornar os problemas acima mencionados. No entanto, a utilização de protocolos hormonais no pós-parto geralmente resulta em baixa eficiência e grande variabilidade dos resultados. Para resolver esta questão avaliamos o efeito do -hidroxibutirato sobre a função ovariana de vacas leiteiras, submetidas a protocolos de inseminação artificial em tempo fixo. Vinte vacas leiteiras receberam protocolo hormonal em media 81,95 dias após o parto, mensurando-se o - hidroxibutirato com medidor de mão no início do protocolo e a progesterona plasmática no quinto dia pós inseminação. Um segundo experimento foi realizado com dezoito vacas leiteiras que receberam protocolo hormonal em média 73,94 dias após o parto, mensurando-se os níveis de -hidroxibutirato no início do protocolo hormonal e avaliando o comportamento da onda folicular e a taxa de ovulação através de ultrassonografia. Os resultados demonstraram que o -hidroxibutirato medido no início do protocolo de inseminação artificial em tempo fixo não consegue predizer; o comportamento da onda folicular, a taxa de ovulação e não tem correlação com os níveis de progesterona do quinto dia pós inseminação.

The selection of animals with superior productive capacity led to high production, unique nutritional needs and varied reproductive problems, compromising the efficiency of modern dairy herds. In the period of the last three weeks until peak lactation, metabolic changes lead to high levels of non-esterified fatty acids and low glucose, impairing responsiveness and tissue sensitivity to insulin, resulting in the uncoupling of the somatotropic axis, evidenced by the high levels of growth hormone and fall of their somatomedins. This condition leads to metabolic diseases, anestrus, cyst formation, changes in corpus luteum life span, low levels of progesterone and estradiol, changes in duration and intensity of estrus, and alter the quality of oocytes and the uterine environmen. A common approach is to use hormonal protocols to circumvent the above- mentioned problems. However, the use of hormonal protocols on postpartum period usually determines low efficiency and high results variability. To solve this question, we evaluated the effect of -hydroxybutyrate on the ovarian function of dairy cows submitted to fixed-time artificial insemination protocols. Twenty dairy cows received a hormonal protocol at a mean of 81.95 days postpartum, measuring -hydroxybutyrate with a hand meter device at the beginning of the protocol and plasma progesterone on the fifth day after insemination. A second experiment was performed with eighteen dairy cows that received a hormonal protocol on average 73.94 days postpartum, measuring the levels of -hydroxybutyrate at the beginning of the hormonal protocol and evaluating the behavior of the follicular wave and ovulation rate through of ultrasonography. The results showed that the -hydroxybutyrate measured at the beginning of the protocol of insemination at fixed time could not predict; the follicular wave behavior, ovulation rate and has no correlation with progesterone levels of the fifth day post insemination.

Fatores hepatotróficos e regeneração hepática. Parte II: fatores de crescimento

Several identifyed substances are involved with liver proliferative process, somatomedines (growth factors) among them. The most of them show different actions, stimulating or inhibiting cell division, depending on their concentrations. The following factors play important role on the liver: HGF; EGF; TGF-alpha; TGF b ; Interleucin-6; IGF; FGF; VEGF; KGF; HSS e ALR. The combined action of HGF, TGF-alpha, IL-6, TNF-alpha, norepinephrin and EGF, allows insulin, glucagon and also EGF to express their effects. HGF seems to be essential and constitutes, maybe, the main trigger of this process, generating endocrine signal wich strongly ativates mitogenesis in the hepatocytes primmed by EGF, IL-6, insulin, remainig matrix matriz and others, leading to DNA synthesis. EGF probably participates of initial events imediately after partial hepatectomy. Besides their actions upon the liver, FGF, VEGF and KGF propably play role in the tissue recovering processes.

Várias substâncias identificáveis estão implicadas no processo de crescimento hepático, entre elas os fatores de crescimento. A maioria deles possui diferentes ações, estimulando a proliferação de células, ou mesmo inibindo na dependência de suas concentrações. Dentre os fatores de crescimento, ou somatomedinas, com ação sobre o fígado pode-se destacar: HGF; EGF; TGF-alpha; TGF b ; Interleucina 6; IGF; FGF; VEGF; KGF; HSS e ALR. A ação conjunta dos hormônios HGF, TGF-alpha, IL-6, TNF-alpha, norepinefrina, EGF, permite que insulina, glucagon e o próprio EGF manifestem seus efeitos. O HGF tem papel vital, talvez o principal "gatilho" deste processo, gerando um sinal endócrino que ativa fortemente a mitogênese nos hepatócitos já "preparados" pelo EGF, IL-6, insulina, matriz remanescente e outros, levando à síntese de DNA. Admite-se que o EGF também participe dos eventos iniciais do processo logo após a hepatectomia e que FGF, VEGF e KGF também participem dos eventos ligados à recomposição de outros tecidos.