Maintenance of quality of eggs submitted to treatment with propolis extract and sanitizers

This study aimed to evaluate the internal and microbiological quality of eggs submitted to different types of shell treatments. One hundred and forty-four fresh red eggs were distributed in a scheme of 4 treatments (no washing; washing and immersion in chlorine; washing and immersion in peracetic acid; and washing and spraying of propolis extract) x 5 storage periods (7, 14, 21, 28,and 35 days), stored at 25°C, in each period 6 eggs per treatment were analyzed. The parameters to assess were: weight loss; shell weight; yolk weight; albumen weight, yolk diameter; yolk height; albumen height and Haugh unit (HU). The microbiological quality of eggs was evaluated at 35 days through analysis for aerobic mesophilic bacteria, thermotolerant coliforms, Staphylococcusspp., Salmonellaspp. and molds and yeasts. The treatment with propolis extract was the only effective one to maintain the high HU quality of the eggs until 21 days of storage at 25°C and was effective against microbiological contamination of all bacterial groups. The results presented showed greater effectiveness of the propolis extract for maintenance of internal and microbiological quality of eggs, it can be an alternativeproduct to chemical sanitizers.(AU)

Avaliação da resposta imune celular de ovelhas ao desafio por Staphylococcus spp.

Objetivou-se neste estudo desafiar leucócitos polimorfonucleares (PMNL) sanguíneos de ovelhas com espécies de Staphylococcus (S. aureus,S. haemolyticus,S. chromogenes,S. simulans,S. xylosus,S. sciuri eS. devriesi)isolados de diferentes nichos ecológicos de ovelhas. Para isso, foi coletado sangue de 14 ovelhas da Raça Santa Inês (7 primíparas e 7 multíparas) e 14 ovelhas da raça Lacaune (7 primíparas e 7 multíparas). Avaliamos a viabilidade, a produção intracelular de espécie reativa de oxigênio (ERO) dos PMNL, e a capacidade de resistir à fagocitose opsonizada e não opsonizada dos diferentes isolados deStaphylococcusspp. por citometria de fluxo. Inicialmente observamos as possíveis diferenças na viabilidade, nas respostas fagocíticas e na produção intracelular de espécies reativas de oxigênio por PMNL sanguíneos de ovelhas Santa Inês e Lacaune, primíparas e multíparas, desafiados com um isolado de Staphylococcus aureus. Posteriormente, avaliamos o comportamento de escape das defesas imunes dos isolados de estafilococos aureus e não aureus, considerando a fagocitose e a inibição da produção de ERO por PMNL do sangue de ovelhas da raça Santa Inês. Observamos maior intensidade de fagocitose de S. aureus por PMNL de ovelhas multíparas e nenhum efeito da paridade sobre a funcionalidade dos PMNL sanguíneos foi encontrado. O comportamento de fagocitose foi diferente entre as raças Santa Inês e Lacaune e a opsonização de S. aureus mediada por anticorpos foi associada a uma menor intensidade de fagocitose por ovelhas primíparas. Os PMNL de ovelhas Lacaune levaram a maior média geométrica de intensidade da fluorescência (GMFI) da produção de ERO intracelular quando estimulados com S. aureus, sugerindo que uma maior atividade microbicida e/ou inflamação poderia ser desencadeada nessas ovelhas. Nossos resultados mostram que ovelhas multíparas fagocitaram mais que as primíparas e que fagocitaram mais Staphylococcus não aureus (SNA) do que S. aureus. Entre os isolados de SNA, Staphylococcus chromogenes foi o que apresentou maior média geométrica da intensidade de fluorescência (GMFI) de fagocitose. Todas as espécies, exceto S. devriesi apresentaram maior porcentagem de fagocitose opsonizada do que não opsonizada. Pela primeira vez, demonstramos que ovelhas multíparas fagocitaram mais que ovelhas prímiparas, além de observarmos maior intensidade de fagocitose de S. chromogenes por PMNLs de ovelhas. Dessa forma, nosso estudo fornece novos insights sobre a funcionalidade dos PMNLs em ovelhas primíparas e multíparas, o que poderia afetar sua saúde, junto a outras possíveis variáveis como manejo e condições sanitárias do rebanho.

The aim of this study was to challenge blood polymorphonuclear leukocytes (PMNL) from sheep with Staphylococcus species (S. aureus, S. haemolyticus, S. chromogenes, S. simulans, S. xylosus, S. sciuri eS. Devriesi) isolated from different ecological niches of sheep. For this, blood was collected from 14 Santa Inês sheep (7 primiparous and 7 multiparous) and 14 Lacaune sheep (7 primiparous and 7 multiparous). We evaluated the viability, the intracellular production of reactive oxygen species (ROS) of PMNL, and the ability to resist opsonized and nonopsonized phagocytosis of the different Staphylococcusspp isolates. by flow cytometry. Initially, we observed the possible differences in viability, phagocytic responses and intracellular production of reactive oxygen species by blood PMNL from Santa Inês and Lacaune sheep, primiparous and multiparous, challenged with a Staphylococcus aureus isolate. Subsequently, we evaluated the escape behavior of the immune defenses of aureus and non-aureus staphylococcus isolates, considering phagocytosis and the inhibition of ROS production by PMNL from the blood of Santa Inês sheep.We observed a higher intensity of phagocytosis of S. aureus by PMNL from multiparous ewes and no effect of parity on the functionality of blood PMNL was found. The phagocytosis behavior was different between the Santa Inês and Lacaune breeds and the antibody mediated S. aureus opsonization was associated with a lower intensity of phagocytosis by primiparous sheep. The PMNL of Lacaune ewes led to the highest geometric mean fluorescence intensity (GMFI) of intracellular ROS production when stimulated with S. aureus, suggesting that greater microbicidal activity and / or inflammation could be triggered in these ewes. Our results show that multiparous sheep phagocytized more than primiparous ewes and that phagocytized more non-aureus Staphylococcus (ANS) than S. aureus. Among SNA isolates, Staphylococcus chromogenes was the one with the highest geometric mean fluorescence intensity (GMFI) of phagocytosis. All species, except S. devriesi, presented a higher percentage of opsonized phagocytosis than non-opsonized. For the first time, we demonstrated that multiparous ewes phagocytosed more than primiparous ewes, in addition to observing a higher intensity of phagocytosis of S. chromogenes by sheep PMNLs. Thus, our study provides new insights into the functionality of PMNLs in primiparous and multiparous ewes, which could affect their health, along with other possible variables such as herd management and health conditions.

CARACTERÍSTICAS DE MANEJO E REBANHO DA BOVINOCULTURA LEITEIRA DO SUDOESTE DO PARANÁ E SUA RELAÇÃO COM O EXAME BACTERIOLÓGICO DO LEITE

A atividade leiteira no Brasil movimenta grande parte da economia e a região do Sudoeste do Paraná vem se destacando devido a sua crescente produção leiteira, porém esta atividade muitas vezes passa por entraves que comprometem a sua viabilidade. O objetivo da presente pesquisa foi conhecer as características da atividade leiteira da região Sudoeste do Paraná, obtendo-se informações sobre: o manejo empregado na linha de ordenha e período seco, monitoramento da saúde da glândula mamária, controle da mastite, qualidade do leite, características do rebanho, produção leiteira e isolamento de microrganismos presentes no tanque de refrigeração. Estas informações foram obtidas por meio da aplicação de questionário e análises laboratoriais. Foram entrevistados um total de cento e sessenta e três produtores e nessas mesmas propriedades foram coletadas amostras de leite do tanque de refrigeração de forma asséptica para realização de contagem bacteriana total (CBT), contagem de células somáticas (CCS) e exame bacteriológico, este último foi realizado pela técnica de espectrometria de massa (MALDI-TOF) ou pela metodologia convencional. Os dados obtidos foram organizados em Tabela Dinâmica do Excel e realizado uma estatística descritiva. A partir dos resultados obtidos foi possível observar que na linha de ordenha somente 18,8% dos produtores fazem uso de caneca de fundo escuro, 14,5% utilizam pré-dipping, 26,1% usam pós-dipping e 81,2% usam toalha comum a todas as vacas para a secagem dos tetos. Referente a qualidade do leite, 34,8% dos produtores tem CBT <300.000 UFC/mL e 47,8% tem CCS < 500.000 cél/mL. As principais bactérias isoladas do leite do tanque de refrigeração pela técnica de MALDI-TOF foram Macrococcus spp., Staphylococcus spp. e Lactococcus spp., entre outros. Além disso, pode-se observar que as propriedades com até 15 animais (53,2%) foram a maioria, 47,9% utilizam ordenha mecânica balde ao pé, 57,4% tem uma produção de leite diária de até 150 litros. Com relação ao exame bacteriológico convencional 61,7% das propriedades tiveram presença no leite de enterobactérias, 76,6% Staphylococcusspp., e 47,9% Streptococcus agalactiae. Pode-se concluir que na região há o predomínio de pequenos e médios produtores, apresenta deficiências de manejo durante a linha de ordenha, a qualidade do leite está aquém do esperado e existe uma grande diversidade de bactérias isoladas do leite. Portanto, é necessária adoção de medidas públicas que orientem os produtores para que estes se adequem aos valores de qualidade exigidos pelas normativas vigentes.

Dairy activity in Brazil moves a large part of the economy and the Southwestern of Paraná State region has stood out due to its growing dairy production, however the activity often goes through obstacles that compromise its viability. The objective of the present research was to know the characteristics of the dairy activity of the Southwestern of Paraná State, obtaining information on: the management used in the milking line and dry period, monitoring of the mammary gland health, mastitis control, milk quality, herd characteristics, dairy production and isolate microorganisms present in the cooling tank. This information was obtained through the application of a questionnaire and laboratory analysis. A total of one hundred and sixty-three producers were interviewed, where in these same properties samples of milk were collected from the refrigeration tank aseptically to perform total bacterial count (TBC), somatic cell count (SCC) and bacteriological examination, this the latter being carried out by the mass spectrometry technique (MALDI-TOF) or by the conventional methodology. The data obtained were organized in Excel's Dynamic Table and a descriptive statistic was performed. From the results obtained, it was observed that in the milking line, only 18.8% of the producers use a black background mug test, 14.5% use predip, 26.1% use postdip and 81.2% use common towel a all cows for drying the teat. Regarding milk quality, 34.8% of producers have TBC less 300,000 CFU / mL and 47.8% have SCC less 500,000 cells / mL. The main bacteria isolated from milk in the cooling tank by the MALDI-TOF technique were Macrococcus spp., Staphylococcus spp. and Lactococcus spp., among others. Other results obtained are that the properties have up to 15 animals (53.2%), 47.9% use milking machine bucket at the foot, 57.4% have a daily milk production of up to 150 liters. Regarding the conventional bacteriological examination, 61.7% of the properties were present in the milk of enterobacteria, 76.6% Staphylococcus spp., and 47.9% Streptococcus agalactiae. It can be concluded that the region has a predominance of small and medium producers, has management deficiencies during the milking line, the quality of the milk is below expectations and there is a great diversity of bacteria being isolated from the milk. Therefore, it is necessary to adopt public measures to guide producers so that they conform to the quality values required by current regulations.

MONITORAMENTO DA RESISTÊNCIA À ANTIMICROBIANOS NA AQUICULTURA: ISOLAMENTO E INFECÇÃO EXPERIMENTAL DE TILAPIA DO NILO COM Klebsiella pneumoniae

O surgimento de enfermidades em peixes, principalmente de origem bacteriana, tem aumentado significativamente nos últimos anos. Esse fato, está associado a fatores, como a intensificação da produção aquícola, manejos errôneos, ausência de medidas sanitárias preventivas e principalmente, má qualidade de água. Sabe-se que, a microbiota dos peixes é idêntica a microbiota da água em que está inserido, o que tem provocado o aumento crescente do número de gêneros bacterianos encontrados nos peixes, incluindo a ocorrência de patógenos de interesse em saúde pública. Coliformes termotolerantes, Enterococcus, Clostridium perfringens,Staphylococcusspp., Salmonella, Citrobacter freundii, Enterobacter aerogenes, Acinetobacter spp., Escherichia coli e Klebsiella pneumoniaesão alguns dos inúmeros patógenos que acometem humanos severamente e estão sendo encontrados comumente em organismos aquáticos. Essas bactérias em contato com humanos seja através de contato tópico direto e manipulação com feriadas abertas, ou mesmo com a ingestão de pescado cru ou mal cozido, podem ocasionar danos severos, inclusive com risco de morte. Dentre estes, destaca-se a K. pneumoniae,um patógeno oportunista que compõe naturalmente a microbiota do trato gastrointestinal de humanos e animais saudáveis e está associado a infecções no trato urinário, além de apresentarem resistência a um elevado número de antimicrobianos, e vem sendo relatado em diversos países. Com intuito de combater esses microrganismos, evitar danos severos aos peixes, e consequentemente aos consumidores, antimicrobianos são utilizados para o tratamento desses patógenos. Entretanto, no Brasil, existem apenas duas moléculas licenciados para uso na aquicultura, o florfenicol e a oxitetraciclina. Devido a carência de produtos licenciados, a prática errônea de se utilizar produtos não licenciados torna-se cada vez mais comum. Assim, a utilização de antimicrobianos na produção animal de forma indiscriminada e sem critérios tem contribuído para o aumento da resistência antimicrobiana,contaminação ambiental e consequentemente a qualidade inadequada do pescado, pontuando a necessidade de medidas alternativas que visem solucionar esta problemática. Diante do exposto, a utilização de fitoterápicos, que são medicamentos à base de plantas medicinais, utilizados no controle de doenças vem ganhando força ao longo dos anos. A utilização desses compostos como alternativa para o tratamento de doenças em peixes está amplamente relacionada às suas ações antioxidantes e efeitos anti-inflamatórios, além de ser utilizado no tratamento de patógenos, também são fornecidos aos animais como imunoestimulantes, melhorando a resistência a doenças e prevenindo infecções.

The appearance of diseases in fish, mainly of bacterial origin, has increased significantly in recent years. This fact is associated with factors such as the intensification of aquaculture production, mismanagement, the absence of preventive sanitary measures and, mainly, poor water quality. It is known that the fish microbiota is identical to the water microbiota in which it is inserted, which has caused an increasing increase in the number of bacterial genera found in fish, including the occurrence of pathogens of public health interest. Thermotolerant coliforms, Enterococcus, Clostridium perfringens, Staphylococcus spp., Salmonella, Citrobacter freundii, Enterobacter aerogenes, Acinetobacter spp., Escherichia coliand Klebsiella pneumoniaeare some of thenumerous pathogens that severely affect humans and are commonly found in organisms. These bacteria in contact with humans, either through direct topical contact and handling open holidays, or even eating raw or undercooked fish, can cause severe damage, including the risk of death. Among these, K. pneumoniaestands out, an opportunistic pathogen that naturally composes the microbiota of the gastrointestinal tract of healthy humans and animals and is associated with urinary tract infections, in addition to being resistant to a high number of antimicrobials, and has been reported in several countries. In order to combat these microorganisms, avoid severe damage to fish, and consequently to consumers, antimicrobials are used to treat these pathogens. However, in Brazil, there are only two molecules licensed for use in aquaculture, florfenicol and oxytetracycline. Due to the lack of licensed products, the erroneous practice of using unlicensed products is becoming increasingly common. Thus, the use of antimicrobials in animal production indiscriminately and without criteria has contributed to the increase in antimicrobial resistance, environmental contamination and, consequently, the inadequate quality of the fish, emphasizing the need for alternative measures tosolve this problem. Given the above, the use of herbal medicines, which are medicines based on medicinal plants, used in disease control has been gaining strength over the years. The use of these compounds as an alternative for the treatment of diseases in fish is largely related to their antioxidant and anti-inflammatory effects, in addition to being used in the treatment of pathogens, they are also provided to animals as immunostimulants, improving resistance to diseases and preventing infections

Conteo de células somáticas y la viabilidad celular en cabras con mastitis subclínica por Staphylococcus spp / Somatic cell count and cell viability in goats with subclinical mastitis by Staphylococcus spp / Contagem de células somáticas e viabilidade celular em cabras com mastite subclínica por Staphylococcus spp

La investigación ha demostrado que existe un aumento em la viabilidad celular cuando se produce un aumento en el conteo de células somáticas (CCS) en infecciones de la glándula mamaria en animales. El principal microorganismo aislado en la mastitis subclínica en el ganado caprino es Staphylococcus spp. Los objetivos de este estúdio son determinar el CCS, células viables y relacionar los con Staphylococcus spp. aislado de las muestras de leche de cabras con mastitis subclínica. Se cosecharon três alícuotas de las muestras de leche de cabras reactivas para CMT (CaliforniaMastitis Test) para la realización de la viabilidad celular, la microbiología y de CCS. Se determino la viabilidad de las células después de la centrifugación de las muestras de leche y la visualización de las células bajo un microscópio, utilizando colorante azul de Trypan, y la cantidad de CCS a través del equipo de citometría de flujo. De las muestras, 104 no estaban aislando microorganismos y 110 mostraron aislamiento de Staphylococcus spp., de los cuales el detectado con mayor frecuencia fueron: S. epidermidis, S. intermedius y S. lugdunensis. Hubo una diferencia estadísticamente significativa entre el CCS y la viabilidad celular de las muestras en las que no había aislamiento de Staphylococcus spp. y muestras sin crecimiento bacteriano, que mostraron un aumento en CCS y la viabilidad celular en las muestras de leche de cabras con mastitis subclínica causada por Staphylococcus spp.(AU)

Research has shown that there is an increase in cell viability when a growth in somatic cell count (SCC) in infections of the mammary gland occurs. The main microorganism isolated from subclinical mastitis in goats is Staphylococcus spp. The aims of this study were determined SCC, viable cells and relate them with Staphylococcus spp. isolated from milk samples of goats with subclinical mastitis. Three aliquots of milk samples from goats reagents to CMT test (California Mastitis Test) were collected for performing cell viability, microbiology and SCC. Cell viability, after centrifugation of milk samples and viewing the cells under a microscope, using Trypan blue dye, and the amount of SCC, through the flow cytometry equipment, were determinated. A total of 104 samples had no isolation of microorganisms and 110 showed isolation of Staphylococcusspp., of which the most frequently detected were: S. epidermidis, S. intermedius and S. lugdunensis. There was a statistically significant difference between SCC and cell viability of samples in which there was isolation of Staphylococcus spp. and samples without bacterial growth, that showed an increase in SCC and cell viability in milk samples of goats with subclinical mastitis caused by Staphylococcus spp.(AU)

Pesquisas têm demonstrado que há uma elevação na viabilidade celular quando ocorre aumento na contagem de células somáticas (CCS) em infecções da glândula mamária em animais. O principal micro-organismo isolado em mastite subclínica dos caprinos é Staphylococcus spp. Os objetivos do presente estudo foram determinar a CCS, células viáveis e relacioná-las com Staphylococcus spp. isolados de amostras de leite de cabras com mastite subclínica. Foram colhidas três alíquotas de amostras de leite de cabras reagentes ao teste do CMT (CaliforniaMastitis Test) para a realização da viabilidade celular, exame microbiológico e CCS. Determinou-se a viabilidade celular, após centrifugações das amostras de leite e visualização das células em microscópio, utilizando o corante azul de Trypan e a quantidade de CCS, utilizando equipamento de citometria de fluxo. Das amostras analisadas, 104 não tiveram isolamento de micro-organismos e 110 apresentaram isolamento de Staphylococcus spp., dos quais os mais frequentemente detectados foram: S. epidermidis, S. intermedius e S. lugdunensis. Foi observada diferença estatisticamente significante entre a CCS e a viabilidade celular das amostras nas quais houve isolamento de Staphylococcus spp. e as amostras sem crescimento bacteriano, o que demonstrou um aumento da CCS e da viabilidade celular nas amostras de leite de cabras com mastite subclínica por Staphylococcus spp.(AU)

FATORES DE PATOGENICIDADE DE Staphylococcus spp. EM LEITE DE VACAS COM TRATAMENTO NÃO CONVENCIONAL DA MASTITE

Objetivou-se caracterizar e comparar a formação de biofilme, suscetibilidade a antimicrobianos in vitro, presença e distribuição de genes de virulência e de resistência antimicrobiana, além de determinar a diversidade clonal de estirpes de Staphylococcus spp. isoladas em leite de vacas tratadas e não tratadas com homeopatia. Os isolados de Staphylococcus spp. foram identificados por reação em cadeia da polimerase-espaço transcrito interno (ITS-PCR) e foram investigados quanto a presença dos genes sea, seb, sec, sed, see, tsst-1, pvl e eta codificadores de toxinas, dos genes icaABCD, bap, aap, atlE e bhp relacionados com a produção de biofilme e dos genes blaZ e mecA associados com a resistência antimicrobiana. Amostras mecA positivas foram tipadas para o tipo SCCmec por Multiplex Polymerase Chain Reaction (PCR Multiplex), enquanto a pesquisa de produção in vitro de bioflme ocorreu pelo método de aderência em placas de poliestireno. O perfil de resistência antimicrobiana foi determinado pelo método de disco-difusão em ágar e o perfil de restrição enzimática por Pulsed-Field Gel Electroforesis (PFGE). Clusters de S. aureus e S. epidermidis com três ou mais isolados tiveram uma linhagem selecionada para tipagem por Multilocus Sequence Typing (MLST), cujas sequências foram analisadas por banco de dados (http://www.mlst.net). Verificou-se prevalência de S. aureus (50,5%), que apresentou distribuição semelhante nos dois grupos, enquanto Staphylococcus spp. coagulase-negativos (CoNS) (70,8%) foram frequentes em vacas tratadas (p=0,036). O gene sec ocorreu apenas em S. chromogenes, com maior frequência em animais tratados (p=0,004) e o gene pvl foi encontrado em 66,7% de S. aureus. O operon icaADBC e os genes icaA e icaD associados prevaleceram em S. aureus, porém o gene icaD foi predominante no grupo de vacas tratadas (p=0,012). Os genes atlE e aap foram carreados apenas por S. epidermidis. Entre as estirpes com produção de biofilme in vitro, 76,8% continham pelo menos um gene relacionado com esta característica. Os genes mecA e Blaz apresentaram distribuição similar em vacas tratadas e não tratadas, porém mecA foi identificado apenas em S. epidermidis (12,1%), todos tipados como SCCmec tipo I. A susceptibilidade antimicrobiana revelou um perfil de multirresistência em 29,3% das estirpes. Houve predominância de um cluster majoritário em S. epidermidis e S. chromogenes, o que não ocorreu para S. aureus. A sequência do tipo (ST) 81 foi predominante em S. epidermidis, enquanto as STs 1, 5 e 126 em S. aureus. A presença de genes de toxinas, resistência antimicrobiana e biofilme, bem como a produção in vitro deste fator de patogenicidade, aliados à persistência de perfis clonais bacterianos, demonstram que sistemas em transição para manejos orgânicos podem representar risco à saúde pública pela circulação de patógenos zoonóticos em leite bovino. Medidas eficazes devem ser tomadas no controle dos produtos lácteos e manejo dos animais.

The present study aimed to characterize and compare biofilm formation, in vitro antimicrobial susceptibility, and the presence and distribution of virulence and antimicrobial resistance genes, as well as to determine the clonal diversity of Staphylococcus spp. strains isolated in milk from cows treated or not with homeopathy. The Staphylococcus spp. isolates were identified by polymerase chain reaction targeting the internal transcribed spacer (ITS-PCR) and were investigated regarding the presence of the sea, seb, sec, sed, see, tsst-1, pvl, and eta toxin-encoding genes, the icaABCD, bap, aap, atlE, and bhp genes, related to the production of biofilm, and the blaZ and mecA genes, which are associated with antimicrobial resistance. mecA-positive samples were typed for SCCmec by Multiplex Polymerase Chain Reaction (Multiplex PCR), while the assessment of in vitro biofilm production was carried out using the polystyrene plate adhesion method. The antimicrobial resistance profile was determined using the agar disc diffusion method, and the enzyme restriction profile, by Pulsed-Field Gel Electrophoresis (PFGE). Clusters of S. aureus and S. epidermidis with three or more isolates had one strain selected for typing by Multilocus Sequence Typing (MLST), and the sequences were analyzed on an online database (http://www.mlst.net). A 50.5% prevalence of S. aureus was observed, with similar distribution in both groups, while coagulase-negative Staphylococcus spp. (CoNS) were frequent (70.8%) in treated cows (p=0.036). The sec gene was found only in S. chromogenes and more frequently in treated animals (p=0.004), while the pvl gene was observed in 66.7% of the S. aureus. The icaADBC operon and the associated icaA and icaD genes prevailed in S. aureus, although the icaD gene was predominant in the treated cows group (p=0.012). The atlE and aap genes were carried only by S. epidermidis. Among the strains presenting in vitro biofilm production, 76.8% had at least one gene related to this trait. The mecA and Blaz genes exhibited similar distribution in treated and untreated cows, although mecA was identified only in S. epidermidis (12.1%), all of which were typed as SCCmec type I. The antimicrobial susceptibility assay revealed a multiresistance profile in 29.3% of the strains. There was a predominance of a major cluster in S. epidermidis and S. chromogenes, which did not occur for S. aureus. Sequence type (ST) 81 was predominant in S. epidermidis, while STs 1, 5, and 126 were prevalent in S. aureus. The presence of genes related to toxin production, antimicrobial resistance, and biofilm formation, as well as the in vitro production of this pathogenicity factor, combined with the persistence of bacterial clonal profiles, demonstrate that systems in transition to organic management can represent a risk to public health due to the circulation of zoonotic pathogens in bovine milk. Effective measures must be taken to control dairy products and animal management.

Microbiological quality of beef cuts used in the preparation of sundried meat in the North of Minas Gerais, Brazil, submitted to different conservation technologies / Qualidade microbiológica de cortes cárneos utilizados para elaboração de carne de sol no Norte de Minas Gerais submetidos a diferentes tecnologias de conservação

Sun-dried meat is a product obtained through slight salted and dehydrated by the atmospheric air of cuts of beef, which is a product much appreciated in the North of Minas Gerais. Deficient technical regulations and use of appropriate technology for processing and storage contribute to a low health quality and endangers the health of the consumer. The aim of this study was to evaluate and compare the microbiological contamination between samples of beef - Biceps femoris, used in the preparation of sun-dried meat, in different places and storage conditions. 15 samples were analyzed. The results of coliforms obtained in the study ranged from 3.0 NMP/g to > 1100 NMP/g. Staphylococcusspp counts ranged from 5.5 x 103 to 2.9 x 106 UFC/g. The presence of Escherichia coli was confirmed in 66.67% and Staphylococcus positive coagulase in 26.67% of the samples analyzed. The product is not appropriate for consumption because it showed high counts of pathogenic microorganisms sufficient to cause foodborne outbreaks, furthermore the possibility of compromising the quality of final product.(AU)

Carne de sol é um produto obtido pela salga leve e discreta e posterior desidratação pelo ar atmosférico dos cortes cárneos de bovinos, sendo um produto muito apreciado no Norte de Minas Gerais. A falta de regulamentação técnica e utilização de tecnologia adequada para o processamento e armazenamento contribuem para baixa qualidade sanitária e coloca em risco a saúde do consumidor. O objetivo deste trabalho foi avaliar e comparar a contaminação microbiológica entre amostras de carne bovina chã de fora (coxão duro), utilizadas no preparo da carne de sol, em diferentes locais e condições de armazenamento. Foram analisadas 15 amostras. Os resultados obtidos na pesquisa de coliformes variaram de 3,0 NMP/g a >1100 NMP/g. Foram constatadas contagens de Staphylococcus spp., variando de 5,5 x 103 a 2,9 x 106 UFC/g. A presença de Escherichia coli foi confirmada em 66,67% e de Staphylococcus coagulase positiva em 26,67% das amostras analisadas. O produto não está adequado para o consumo, pois apresentou elevada contagem de micro-organismos patogênicos capazes de causar surtos alimentares, além da possibilidade de comprometer a qualidade do produto final.(AU)

Qualidade higiênico-sanitária e prevalência de sorovares de Salmonella em linguiças frescais produzidas artesanalmente e inspecionadas, comercializadas no oeste do Paraná, Brasil

The manufacture of fresh pork sausage requires a series of manipulation steps, which increases the chances of contamination by several species of micro-organisms, be them pathogenic or deteriorating. This may compromise the microbiological quality of the final product and transmit diseases with consumption. In the period from April to September 2009, the microbiological quality of 40 samples of fresh handmade sausage inspected by the Inspection State and Federal Service in the cities of Cascavel and Toledo (PR) was assessed, through the quantification of thermotolerant coliforms, Staphylococcus spp., viable facultative and strict mesophilic aerobic bacteria, Salmonella spp., Campylobacterspp., Bacillus cereus, Clostridium sulfite reducers, molds and yeasts. The results revealed that 55% of the analyzed samples of fresh handmade and inspected sausages were not in accordance with the parameters established by Resolution RDC Nº 12, of January 2nd, 2001, from ANVISA, in at least one of the studied groups of micro-organisms. Therefore, we can say the sausages sold in western regions, may present a risk to public health.

A fabricação de linguiça do tipo frescal requer uma série de etapas de manipulação, o que eleva as possibilidades de contaminação por diversas espécies de micro-organismos patogênicos ou deterioradores. Isso pode comprometer a qualidade microbiológica do produto final e veicular enfermidades a partir de seu consumo. No período de abril a setembro de 2009, foi avaliada a qualidade microbiológica de 40 amostras de linguiça tipo frescal produzidas artesanalmente e inspecionadas pelo Serviço de Inspeção Estadual e Federal nos municípios de Cascavel e Toledo (PR), através da quantificação de coliformes termotolerantes, contagem de Staphylococcus spp., bactérias mesófilas aeróbias estritas e facultativas viáveis, pesquisa de Salmonellaspp., Campylobacter spp., Bacillus cereus, Clostridium sulfito-redutores e bolores e leveduras. Os resultados revelaram que 55% das amostras analisadas de linguiça tipo frescal inspecionadas e artesanais apresentaram-se fora dos parâmetros estabelecidos pela Resolução RDC nº 12, de 2 de janeiro de 2001, da Agência Nacional de Vigilância Sanitária (Anvisa), em pelo menos um dos grupos de micro-organismos estudados. Portanto, pode-se dizer que a linguiça tipo frescal comercializada no oeste do Paraná pode oferecer riscos à saúde da população.

Atividade antimicrobiana do extrato etanólico de Commiphora leptophloeos (Mat.) J. B. Gillett. frente a Staphylococcus spp. isolados de casos de mastite em ruminantes

A mastite constitui-se como um dos problemas de maior relevância para a pecuária leiteira, acarretando sérios prejuízos, como diminuição da produção e alteração físico-química do leite. O grande problema para os produtores de leite é o fracasso no tratamento da mastite relacionado principalmente, a resistência bacteriana aos antimicrobianos convencionais.Visando o potencial terapêutico das plantas medicinais como alternativas a antibioticoterapia, a pesquisa teve como objetivo avaliar a atividade antimicrobiana da Commiphoraleptophloeosfrente a isolados de Staphylococcusspp. provenientes de leite de ruminantes com mastite. Para isso, foi preparado o extrato etanólico bruto das cascas e folhas da Commiphoraleptophloeos. Na sequência, os extratos foram avaliados quanto aos seus efeitos antimicrobianos, frente a isolados de Staphylococcusspp. através da técnica de microdiluição em caldo para determinação da concentração bactericida mínima.Além disso, os extratos foram avaliados quanto a sua capacidade em interferir com a formação do biofilme e com o biofilme já consolidado. Embora todos os extratos testados tenham exibido ação antimicrobiana, melhor atividade foi registrada para o extrato da casca. O extrato da folha apresentou maior atividade na concentração 3,125 g/ml (36 /60) e o EEB da casca na concentração 781,2 g/ml (25/60). Os extratos da cascas e folhas foram capazes de interferir com as etapas iniciais da formação do biofilme, por outro lado não foi observada interferência do extrato no biofilme já consolidado. Observou-se uma alta sensibilidade dos Staphylococcusspp. provenientes de casos de mastites em ruminantes, quando submetidos aos extratos da folha e casca da Commiphoraleptophloeos, bem como a capacidade dos extratos em interferir na formação do biofilme, indicando seu potencial para uso na terapia das mastites em ruminantes.

Mastitis is constituted as one of the major problems for the dairy industry, causing serious damage, such as decreased production and physicochemical changes of milk. The major problem for dairy farmers is the failure to treat mainly related mastitis, bacterial resistance to conventional antibiotics. Seeking the therapeutic potential of medicinal plants as alternatives to antibiotic therapy, the research aims to evaluate the antimicrobial activity of Commiphoraleptophloeosover Staphylococcus spp. from ruminant mastitis. For this, we prepared the ethanol extract of the bark and leaves of Commiphoraleptophloeos. Then, the extracts were evaluated for its antimicrobial effects over Staphylococcus spp., through the microdilution technique in broth to determine the minimum bactericidal concentration (MBC). Moreover, the extracts were evaluated for their ability to interfere with biofilm formation and consolidated biofilm. Although all the extracts tested have exhibited antimicrobial action, MBC lower values were recorded for the bark extract. The leaf showed a higher active in 3.125 mg / ml (36/60) concentration and the barks Gross Ethanolic Extract (GEE) in 781.2 g / ml concentration (25/60). The extracts of bark and leaves were able to interfere with the initial steps of biofilm formation. On the other hand the extract did not interfered in the consolidated biofilm. Staphylococcus spp. from ruminants with mastitis showed a high sensitivity, when subjected to Commiphoralepthophloeosleaf and bark extract, as well the ability to interfere with biofilm formation, indicating its therapeutic potential in ruminant mastitis.

CONDIÇÕES HIGIÊNICO-SANITÁRIAS DE CARNES SERVIDAS EM ESCOLAS DO RIO GRANDE DO NORTE

A produção de alimentos seguros é prática necessária, em especial nas escolas públicas, onde a maior parte dos consumidores são crianças que, devido à imaturidade do seu sistema imunitário, têm maior risco de complicações pelas Doenças Transmitidas pelos Alimentos (DTA). Objetivou-se avaliar as condições higiênico-sanitárias e qualidade das carnes servidas na merenda escolar de escolas públicas estaduais e municipais no Rio Grande do Norte. A pesquisa foi de caráter observatório, sendo desenvolvida em escolas da rede municipal e estadual das cidades de Mossoró-RN e regiões adjacentes, um total de em 47 escolas, onde 20 eram municipais e 27 estaduais, sendo realizada no período de Maio a Agosto do ano de 2014. Foi aplicado o Checklist SIM-PNAE, dividido em blocos de A (edifícios e instalações da área de preparo de alimentos), B (presença de equipamentos e utensílios na cozinha das escolas), C (manipuladores), D (processos e procedimentos) e E (higienização ambiental), com o propósito de averiguar as condições higiênico-sanitárias. Para análise microbiológica foram submetidas às técnicas recomendadas para contagem de Staphylococcus spp., Número Mais Provável de coliformes Totais e Termotolerantes e pesquisa de Salmonellas pp. Não foi verificada presença de Salmonella spp., no entanto foram detectadas presença de coliformes a Totais e termotolerantes em 24 amostras (82,74%) e 12 amostras (41,37%) respectivamente. Com relação a pesquisa de Staphylococcus spp., foi observada a presença em todas as amostras. Nas análises físico-químicas a maioria dos parâmetros encontra-se de acordo com a legislação, porém foi classificada como carnes duras. É extremamente importante a adequação com as normas e Resoluções, assim como a atuação da fiscalização dos procedimentos e execução, com a finalidade de uma educação continuada e uma importância maior para o público alvo que é o aluno. Conclui-se que as unidades de alimentação e nutrição das escolas investigadas cumpriram apenas parcialmente as exigências legais, não garantindo, assim, a segurança desejada para a qualidade da alimentação escolar.

The production of safe food is a necessary practice, especially in public schools, where the majority of consumers are children who, due to the immaturity of their immune system, are at risk of complications by the Foodborne Diseases (DTA). This study aimed to evaluate the hygienic and sanitary conditions and quality of the meat served in public school lunches of the state and municipalities in Rio Grande do Norte. The research was an observation, being developed in the municipal and state schools in the cities of Mossoró-RN and adjacent regions, a total of 47 schools, where 20 belonged to the municipalities and 27 to the state, being held from May to August 2014. Checklist SIM-PNAE was applied, divided into: A (buildings and facilities of the food preparation area), B (presence of equipment and utensils in the kitchen of schools), C (handlers), D (processes and procedures) and E (environmental sanitation), in order to ascertain the sanitary hygienic conditions. The microbiological analyses were submitted to the recommended techniques for Staphylococcusspp counting. The most probable number of total and thermotolerant fecal coliforms and Salmonella spp. Physical-chemical moisture and ash content, pH, weight loss by cooking, color and softness were assessed. There was no presence of Salmonella spp. However, the study showed the presence of coliforms and thermotolerant in 24 samples (82.74%) and 12 samples (41.37%) respectively. Regarding the Staphylococcus spp.research, they were also found in all samples. The physicochemical analyzes had most of the parameters is in accordance with the law, but the meat surveyed was classified as hard. It is extremely important to comply with compulsory standards and resolutions, as well as to perform the inspection procedures and implementation, in order to have a continuing education, considering that the target audience is students. The food and nutrition units for the investigated schools met only partially the legal requirements, thus, not ensuring the desired security for the quality of school meals.

Avaliação in vitro da eficácia de desinfetantes comerciais utilizados no pré e pós-dippingfrente amostras de Staphylococcus spp. isoladas de mastite bovina: [revisão] / In vitro evaluation of the efficacy of commercial disinfectants used in pre and post-dipping against Staphylococcus spp. isolated from bovine mastitis: [revision]

Objetivou-se com este estudo avaliar a sensibilidade in vitro de Staphylococcus spp. frente a alguns desinfetantes comerciais utilizados no pré e pós-dipping em vacas leiteiras. Foram testados um total de 60 isoladosde Staphylococcus spp. identificados como S. aureus (50) e Staphylococcus coagulase positiva (10) recuperados deglândulas mamárias de vacas com mastite subclínica procedentes das regiões Metropolitana do Recife, Agreste e Zona da Mata do Estado de Pernambuco. O estudo da eficáciados desinfetantes utilizados no pré e pós-dipping foi realizado utilizando-se os seguintes princípios ativos: cloro(2,5%), iodo (0,57%), clorexidine (2,0%), amônia quaternária (4,0%) e ácido lático (2,0%) em quatro temposdistintos (15", 30", 60" e 300"). Observou-se que 100% de S. aureus foram sensíveis ao iodo, 93,3% sensíveis a clorexidine, 80% sensíveis a amônia, 35,6% sensíveis ao ácido lático e 97,8% resistentes ao cloro no tempo de 60". Com relação a Staphylococcus coagulase positiva (SCP), 100% dos isolados foram sensíveis ao iodo, 81,8% sensíveis a amônia quaternária, 99,9% sensíveis ao ácido lático, 72,7% sensíveis a clorexidine e 100% resistentes ao cloro no tempo de 60". Conclui-se que a maior atividade desinfetante in vitro foi verificada para o iodo e clorexidine frente a S. aureus e do iodo e ácido lático frente aos SCP e que há necessidade de avaliação periódica dos desinfetantes utilizadosnas propriedades leiteiras nas regiões estudadas, pois, existem variações no perfil de sensibilidade e resistênciaaos desinfetantes que podem comprometer os programas de controle da mastite bovina causada por Staphylococcusspp.(AU)

The objective of this investigation was to evaluate the in vitro sensibility ofStaphylococcus spp. to several commercially available disinfectants used for pre and post dipping. A total of 60 isolates of Staphylococcus spp., identified as Staphylococcus aureus (50) and Positive coagulase Staphylococcus (10) were obtained from the mammary glands of dairy cows with subclinical mastitis in the regions of Metropolitan Recife, the Agreste and the Zona da Mata of the State of Pernambuco, Brazil. As active ingredients were used a chlorine base (25%), iodine (0.6%), chlorhexidine (2.0%), quaternary ammonium (4.0%), and lactic acid (2.0%) at four specific intervals (15", 30", 60", and 300"). One hundred percent of S. aureus was found to be sensitive to iodine, 93.3% tochlorhexidine, 80% to ammonia, 35.6% to lactic acid, and 97.8% were resistant to chlorine at a 60-minute interval. With respect to the Positive coagulase Staphylococcus (SCP), 100.0% of the isolates were sensitive to iodine, 81.8% to quaternary ammonium, 99.9% to lactic acid, 72.7% to chlorhexidine, and 100% was resistant to chlorine at an interval of 60 minutes. It can be concluded that the highest disinfectant activity in vitro was found to be with iodine and chlorhexidine for S. aureus, and with iodine and lactic acid for SCP. Afurther conclusion was that it is important to undertake a periodic evaluation of the disinfectants used on the dairy properties in the regions studied, given the variety of sensibilities and resistance to disinfectants used, which may prejudice the control ofbovine mastitis caused by Staphylococcus spp.(AU)

Suscetibilidade in vitro a antibióticos de cepas de Staphylococcus spp e Micrococcus spp isoladas a partir de mucosa oral de macacos-pregos (Cebusapella) mantidos em cativeiro / In vitro susceptibility to antibiotics in Staphylococcus sppe Micrococcus spp strains isolated from oral mucosae ofcaptive capuchin monkeys (Cebus apella)

O estudo foi realizado com 29 macacos-pregos (Cebus apella). Foramcolhidas 50 amostras de suabe da mucosa oral, junto à transiçãomuco-gengival maxilar, com auxílio de zaragatoas esterilizadas,embebidas em caldo Brain Heart Infusion (BHI). Todos os animaisforam submetidos a exame clínico para avaliação periodontal. Asamostras obtidas foram cultivadas em meios apropriados: caldosimples, caldo BHI, e ágar sangue para o isolamento de cocosGram-positivos aeróbios da família Micrococcaceae. Para suaclassificação utilizou-se as provas de catalase, Staphy-test (testerápido para caracterização de Staphylococcus aureus) e sensibilidade àbacitracina. Foram identificados 73,1% de Staphylococcus spp; 15,4%de Staphylococcus aureus; e 11,5% Micrococcus spp. As cepas isoladasforam testadas em relação à sua suscetibilidade a antibióticos pelatécnica de difusão em ágar. Verificou-se para as cepas deStaphylococcus spp, 94,7% de sensibilidade a cefalotina e resistênciade 89,5% à penicilina, 97,4% à oxacilina, 55,3% à tetraciclina, 57,9%à clindamicina e 63,2% à amoxicilina. Os dados obtidosdemonstraram que a cefalotina foi o antibiótico para o qual asamsotras de Staphylococcus spp estudadas apresentaram, in vitro, maiorgrau de sensibilidade.(AU)

Twenty-nine capuchin monkeys (Cebus apella) were used in thisstudy. Fifty samples of oral mucous membrane were collected inarea next to their muco-gingival-maxilar transition using sterilizedswabs soaked in Brain Heart Infusion (BHI). All animals wereclinically examined for periodontal evaluation. The samples werecultivated in appropriate media, namely: simple broth, BHI brothand, blood agar in order to get aerobic Gram positive cocos,from the Micrococcaceae family, isolated. Catalase test, Staphy-test(a quick-test for Staphylococcus aureus characterization) andbactracin-sensitivity test were the tools employed for theirclassification. Data were follows: 73.1% of them were Staphylococcusspp; 15.4% Staphylococcus aureus; and, 11.5% Micrococcus spp. Theisolated were strains tested for their in vitro susceptible toantibiotics by the agar diffusion technique. Concerning theStaphylococcus spp strains, 94.7% were susceptibility to cephalotin;however, 89.5% of them were resistant to penicillin; 97.4% tooxacilin; 55.3% to tetracicline; 57.9% to clindamicine; and 63.2%to amoxiciline. Staphylococcus spp strains studied presented thehighest in vitro sensitivity degree to cephalotin.(AU)