Intertubular morphometric and ultrastructural testes analyses in mdx mice

Duchenne Muscular Dystrophy (DMD) reproductive alterations and the influence of antioxidant treatments may aid in understanding morphometry testicular quantification. In this context, the aim of the present study was to characterize the intertubular compartment (ITC) morphometry of animal testes in mdx mice supplemented with ascorbic acid (AA). Sixteen mice were used, namely the C57BL/10 (non-dystrophic) and C57BL/10Mdx (dystrophic) lineages, distributed into the following groups: Control (C60), Dystrophic (D60), Control supplemented with AA (CS60), Dystrophic supplemented with AA (DS60). A total of 200 mg/kg of AA were administered to mice for 30 days. Subsequently, the testicles were collected, weighed, and fragmented. The obtained fragments were fixed in Karnovsky's solution (pH 7.2) and embedded in historesin for morphometric and transmission electron microscopy assessments. Leydig cells were hypertrophic in the D60 group, but was reverted by AA supplementation in the DS60 group. The DS60 group also exhibited increased intertubular volume compared to the CS60 group. The ultrastructural images identified multilamellar bodies in dystrophic animals (lipid storage) and telocyte cells (transport substances) in both control and dystrophic animals. Morphometric alterations were, therefore, noted in the intertubular compartment due to Duchenne muscular dystrophy (DMD), with AA administration capable of altering Leydig cells in this condition.(AU)

Morphometry of bovine blastocysts produced in vitro in culture media with antioxidants cysteamine or oily extract of Lippia origanoides / [Morfometria de blastocistos bovinos produzidos in vitro em meio de cultura com antioxidantes cisteamina ou extrato oleoso de Lippia origanoides]

This study aimed to evaluate the ultrastructural morphometry of bovine embryos produced in vitro grown at different concentrations of antioxidants. After in vitro maturation and fertilization, the presumptive zygotes were assigned into five treatments. T1) without the addition of any antioxidants (negative control); T2) addition of 50µM/mL cysteamine; and T3, T4 and T5) adding 2.5µg/mL, 5.0µg/mL or 10.0µg/mL of the antioxidants derived from the oily extract from Lippia origanoides, respectively. On D7 of culture, the embryos in the blastocyst stage were fixed and prepared for electron transmission microscopy. These were evaluated for the proportion of cytoplasm-to-nucleus, cytoplasm-to-mitochondria, cytoplasm-to-vacuoles, cytoplasm-to-autophagic vacuoles and cytoplasm-to-lipid droplets. Blastocysts cultured in media containing oily extract of Lippia origanoides presented morphological characteristics such as high cell:mitochondria ratio and low cell:vacuoles and cell:autophagic vacuole ratio, possibly been morphological indicators of embryonic quality. Inner cell mass (ICM) from blastocysts cultured in media without any antioxidants had the highest cell:vacuole ratio. Similar results were found in the trophectoderm (TE) cells of blastocysts from treatment 2. Embryo culture media supplemented with antioxidants derived from Lippia origanoides oil produced embryos with a higher cytoplasmic proportion of organelles, such as mitochondria. Also, treatments without any antioxidants or with the addition of cysteamine presented cytoplasmic vacuolization, a characteristic related to production of poor-quality embryos.(AU)

Este estudo teve como objetivo avaliar a morfometria ultraestrutural de embriões bovinos produzidos in vitro e cultivados em diferentes concentrações de antioxidantes. Após a maturação e a fertilização in vitro, os possíveis zigotos foram divididos em cinco tratamentos: T1) sem adição de antioxidantes (controle negativo); T2) adição de 50µM/mL de cisteamina; e T3, T4 e T5) adição de 2,5µg/mL, 5,0µg/mL ou 10,0µg/mL dos antioxidantes derivados do extrato oleoso de Lippia origanoides, respectivamente. No D7 de cultivo, os embriões em estágio de blastocisto foram fixados e preparados para microscopia eletrônica de transmissão. Estes foram avaliados para a proporção entre citoplasma e núcleo, citoplasma e mitocôndria, citoplasma e vacúolos, citoplasma e vacúolos autofágicos e citoplasma e gotículas lipídicas. Blastocistos cultivados em meio contendo extrato oleoso de Lippia origanoides apresentaram características morfológicas como alta relação célula:mitocôndria e baixa relação célula:vacúolos e célula:vacúolo autofágico, possíveis indicadores morfológicos de qualidade embrionária. A massa celular interna (MCI) de blastocistos cultivados em meio sem quaisquer antioxidantes teve a maior razão célula:vacúolo. Resultados semelhantes foram encontrados nas células do trofectoderma (TE) de blastocistos do tratamento 2. Portanto, o meio de cultivo embrionário suplementado com antioxidantes derivados do óleo de Lippia origanoides produziu embriões com maior proporção citoplasmática de organelas, como mitocôndrias. Além disso, tratamentos sem antioxidantes ou com adição de cisteamina apresentaram vacuolização citoplasmática, característica relacionada à produção de embriões de baixa qualidade.(AU)

Ultrastructural and morphometric description of the ear skin and cartilage of two South American wild histricognate rodents (Dasyprocta leporina and Galea spixii) / Descrição ultraestrutural e morfométrica da pele e cartilagem auricular de dois roedores histricognatos silvestres da América do Sul (Dasyprocta leporina e Galea spixii)

Skin and cartilage have been the main source for the recovery of somatic cells to be used in conservation strategies in wild mammals. In this sense, an important step for the cryopreservation of these samples is to recognize the properties of the skin and cartilage. Thus, knowing that the skin may differ among species and aiming to contribute to the establishment of cryobanks, the study examined the differences in the ear skin and cartilage of wild rodents from South America, agouti (Dasyprocta leporina) and spix's yellow-toothed cavy (Galea spixii). Ultrastructural and quantitative methods were used to measure skin and cartilage thickness, density of collagen and elastic fibers, cell type number and distribution, and proliferative activity. Although ultrastructural analysis revealed a similar pattern between species, morphometric analysis of the skin and cartilage showed differences between agoutis and cavies regarding thickness of epidermis layers (corneum: 5.3±2.5μm vs. 3.9±0.6μm; intermediate: 16.4±6.2μm vs. 23.4±8.1μm; basal: 9.9±2.1μm vs. 4.8±0.5μm), dermis (183.1±44.0μm vs. 258.2±22.9μm), total skin (211.8±46.0μm vs. 290.3±23.7μm) and perichondrium (27.6±6.1μm vs. 10.5±1.8μm). A greater number of epidermal cells (61.7±15.2 vs. 24.8±7.6) and chondrocytes (32.7±9.0 vs. 27.5±4.7) were observed in agouti, while the cavy presented a greater number of melanocytes (12.6±4.7 vs. 29.9±6.2), keratinocytes (14.7±4.2 vs. 29.8±7.6), and fibroblasts (103.6±24.7 vs. 112.2±11.3). Moreover, a higher percentage of collagen fibers and proliferative activity was observed in the skin of cavies, when compared to the skin of agoutis. Therefore, there are differences between agouti and cavy for ear skin and cartilage, requiring the establishment of species-specific cryopreservation protocols.(AU)

A pele e cartilagem têm sido uma importante fonte de recuperação de células somáticas a serem utilizadas em estratégias de conservação em mamíferos silvestres. Nesse contexto, uma importante etapa para criopreservação é conhecer, inicialmente, as propriedades que compõem a pele e cartilagem. Sabendo, então, que a pele pode diferir-se entre espécies e com o objetivo de contribuir para o estabelecimento de criobancos, o estudo evidenciou as diferenças da pele e da cartilagem do pavilhão auricular apical de cutias (Dasyprocta leporina) e preás (Galea spixii) que são roedores silvestres presentes na América do Sul. Para tanto, métodos ultraestruturais e quantitativos foram utilizados para mensurar a espessura da pele e da cartilagem, densidade de fibras colágenas e elásticas, número e distribuição dos tipos celulares e atividade proliferativa. Embora as propriedades ultraestruturais em cutias e preás tenham se mostrado semelhantes, avaliações acerca da morfometria da pele e da cartilagem demonstrou diferenças, especialmente nas camadas epidérmicas (córnea: 5,3±2,5μm vs. 3,9±0,6μm; espinhosa: 16,4±6,2μm vs. 23,4±8,1μm; basal: 9,9±2,1μm vs. 4,8±0,5μm), derme (183,1±44,0μm vs. 258,2±22,9μm), pele total (211,8±46,0μm vs. 290,3±23,7μm) e pericôndrio (27,6±6,1μm vs. 10,5±1,8μm). Além disso, um número maior de células epidérmicas (61,7±15,2 vs. 24,8±7,6) e condrócitos (32,7±9,0 vs. 27,5±4,7) foram observados em cutias, enquanto em preás um maior número de melanócitos (12,6±4,7 vs. 29,9±6,2), queratinócitos (14,7±4,2 vs. 29,8±7,6) e fibroblastos (103,6±24,7 vs. 112,2±11,3) foram evidenciados. Ainda, em preás, uma maior porcentagem de fibras colágenas e da atividade proliferativa foram observadas quando comparadas a pele de cutias. Portanto, existem diferenças entre cutias e preás para pele e cartilagem do pavilhão auricular, exigindo desta forma um estabelecimento de protocolos de criopreservação específica para cada uma destas espécies.(AU)

Ultrastructural and morphometric description of the ear skin and cartilage of two South American wild histricognate rodents (Dasyprocta leporina and Galea spixii) / Descrição ultraestrutural e morfométrica da pele e cartilagem auricular de dois roedores histricognatos silvestres da América do Sul (Dasyprocta leporina e Galea spixii)

Skin and cartilage have been the main source for the recovery of somatic cells to be used in conservation strategies in wild mammals. In this sense, an important step for the cryopreservation of these samples is to recognize the properties of the skin and cartilage. Thus, knowing that the skin may differ among species and aiming to contribute to the establishment of cryobanks, the study examined the differences in the ear skin and cartilage of wild rodents from South America, agouti (Dasyprocta leporina) and spix's yellow-toothed cavy (Galea spixii). Ultrastructural and quantitative methods were used to measure skin and cartilage thickness, density of collagen and elastic fibers, cell type number and distribution, and proliferative activity. Although ultrastructural analysis revealed a similar pattern between species, morphometric analysis of the skin and cartilage showed differences between agoutis and cavies regarding thickness of epidermis layers (corneum: 5.3±2.5μm vs. 3.9±0.6μm; intermediate: 16.4±6.2μm vs. 23.4±8.1μm; basal: 9.9±2.1μm vs. 4.8±0.5μm), dermis (183.1±44.0μm vs. 258.2±22.9μm), total skin (211.8±46.0μm vs. 290.3±23.7μm) and perichondrium (27.6±6.1μm vs. 10.5±1.8μm). A greater number of epidermal cells (61.7±15.2 vs. 24.8±7.6) and chondrocytes (32.7±9.0 vs. 27.5±4.7) were observed in agouti, while the cavy presented a greater number of melanocytes (12.6±4.7 vs. 29.9±6.2), keratinocytes (14.7±4.2 vs. 29.8±7.6), and fibroblasts (103.6±24.7 vs. 112.2±11.3). Moreover, a higher percentage of collagen fibers and proliferative activity was observed in the skin of cavies, when compared to the skin of agoutis. Therefore, there are differences between agouti and cavy for ear skin and cartilage, requiring the establishment of species-specific cryopreservation protocols.(AU)

A pele e cartilagem têm sido uma importante fonte de recuperação de células somáticas a serem utilizadas em estratégias de conservação em mamíferos silvestres. Nesse contexto, uma importante etapa para criopreservação é conhecer, inicialmente, as propriedades que compõem a pele e cartilagem. Sabendo, então, que a pele pode diferir-se entre espécies e com o objetivo de contribuir para o estabelecimento de criobancos, o estudo evidenciou as diferenças da pele e da cartilagem do pavilhão auricular apical de cutias (Dasyprocta leporina) e preás (Galea spixii) que são roedores silvestres presentes na América do Sul. Para tanto, métodos ultraestruturais e quantitativos foram utilizados para mensurar a espessura da pele e da cartilagem, densidade de fibras colágenas e elásticas, número e distribuição dos tipos celulares e atividade proliferativa. Embora as propriedades ultraestruturais em cutias e preás tenham se mostrado semelhantes, avaliações acerca da morfometria da pele e da cartilagem demonstrou diferenças, especialmente nas camadas epidérmicas (córnea: 5,3±2,5μm vs. 3,9±0,6μm; espinhosa: 16,4±6,2μm vs. 23,4±8,1μm; basal: 9,9±2,1μm vs. 4,8±0,5μm), derme (183,1±44,0μm vs. 258,2±22,9μm), pele total (211,8±46,0μm vs. 290,3±23,7μm) e pericôndrio (27,6±6,1μm vs. 10,5±1,8μm). Além disso, um número maior de células epidérmicas (61,7±15,2 vs. 24,8±7,6) e condrócitos (32,7±9,0 vs. 27,5±4,7) foram observados em cutias, enquanto em preás um maior número de melanócitos (12,6±4,7 vs. 29,9±6,2), queratinócitos (14,7±4,2 vs. 29,8±7,6) e fibroblastos (103,6±24,7 vs. 112,2±11,3) foram evidenciados. Ainda, em preás, uma maior porcentagem de fibras colágenas e da atividade proliferativa foram observadas quando comparadas a pele de cutias. Portanto, existem diferenças entre cutias e preás para pele e cartilagem do pavilhão auricular, exigindo desta forma um estabelecimento de protocolos de criopreservação específica para cada uma destas espécies.(AU)

Estimation, morphometry and ultrastructure of ovarian preantral follicle population in agouti (Dasyprocta leporina)

ABSTRACT: The aim of this study was to characterize the preantral ovarian follicular population in agoutis (D. leporina) by estimating the number of follicles at each developmental category, and also describe the morphometry and the specific features of the follicle and the oocyte by using light and transmission electron microscopy. The length of each ovary was measured using a caliper rule, longitudinally sectioned into two halves and both were immediately fixed to perform the estimation of follicular population and ultrastructural analysis. The mean (±S.E.M.) population of follicular per pair of ovary was estimated at 4419.8±532.26 and 5397.52±574.91 for right and left ovaries, respectively, but no differences were observed between them. The diameters for follicles, oocyte and nuclei were: 18.62±3.40m, 12.28±2.37m and 6.10±0.93m for primordial, 23.75±5.70m, 14.22±3.00m and 6.70±1.24m for primary and 88.55±17.61m, 52.85±17.56m and 22.33±17.61m for secondary follicles, respectively. The most of the follicles found belonged to the primordial category (86.63%), followed by primary (13.01%) and secondary (0.35%) one. Additionally, polyovular follicles were observed in all the animals and they represented 7.51% of the total follicles counted. The ultrastructural analysis showed that the oocyte presented a central and regular nuclei, displaying a homogenous mass. Among the organelles, the mitochondria were the most abundant and the oocyte Golgi apparatus was rarely observed. In conclusion, this work shows for the first time the characterization of the population of preantral follicles in the ovary of Dasyprocta leporina. Those information will be useful for further development and adaptation of biotechniques such as germplasm cryopreservation and in vitro gametes manipulation.

RESUMO: O objetivo deste trabalho foi caracterizar a população folicular ovariana pré-antral em cutias (D. leporina) estimando o número de folículos em cada categoria de desenvolvimento, e também descrever a morfometria e as características específicas do folículo e oócito usando microscopia de luz e eletrônica de transmissão. O comprimento de cada ovário foi medido utilizando um paquímetro, seccionados longitudinalmente em duas metades e ambos foram imediatamente fixados para realizar a estimativa da população folicular e análise ultraestrutural. A média (±S.E.M.) da população folicular por par de ovário foi estimada em 4419,8±532,26 e 5397,52±574,91 nos ovários direito e esquerdo, respectivamente, mas não foram observadas diferenças entre eles. Os diâmetros dos folículos, oócito e núcleos, respectivamente, foram: 18,62±3,40m, 12,28±2.37m e 6,10±0,93m para primordial, 23,75±5,70m, 14,22±3,00m e 6,70±1,24m para primário e 88,55±17,61m, 52,85±17,56m e 22,33±17,61m de folículos secundários. A maioria dos folículos encontrados pertencia à categoria primordial (86,63%), seguido pelo primário (13,01%) e um secundário (0,35%). Adicionalmente, os folículos poliovulares foram observados em todos os animais e representavam 7,51% do total de folículos contados. A análise ultra-estrutural mostrou que o oócito apresentou núcleos centrais e regulares, exibindo uma massa homogênea. Dentre as organelas, as mitocôndrias foram as mais abundantes e o aparelho de Golgi do oócito foi raramente observado. Em conclusão, este trabalho mostra pela primeira vez a caracterização da população de folículos pré-antrais do ovário da Dasyprocta leporina. Essas informações serão úteis para o desenvolvimento e adaptação de biotécnicas, como a criopreservação de germoplasma e manipulação de gametas in vitro.

Estimation, morphometry and ultrastructure of ovarian preantral follicle population in agouti (Dasyprocta leporina) / Morfometria, estimativa e ultraestrutura da população folicular ovariana preantral de cutia (Dasyprocta leporina)

The aim of this study was to characterize the preantral ovarian follicular population in agoutis (D. leporina) by estimating the number of follicles at each developmental category, and also describe the morphometry and the specific features of the follicle and the oocyte by using light and transmission electron microscopy. The length of each ovary was measured using a caliper rule, longitudinally sectioned into two halves and both were immediately fixed to perform the estimation of follicular population and ultrastructural analysis. The mean (±S.E.M.) population of follicular per pair of ovary was estimated at 4419.8±532.26 and 5397.52±574.91 for right and left ovaries, respectively, but no differences were observed between them. The diameters for follicles, oocyte and nuclei were: 18.62±3.40µm, 12.28±2.37µm and 6.10±0.93µm for primordial, 23.75±5.70µm, 14.22±3.00µm and 6.70±1.24µm for primary and 88.55±17.61µm, 52.85±17.56µm and 22.33±17.61µm for secondary follicles, respectively. The most of the follicles found belonged to the primordial category (86.63%), followed by primary (13.01%) and secondary (0.35%) one. Additionally, polyovular follicles were observed in all the animals and they represented 7.51% of the total follicles counted. The ultrastructural analysis showed that the oocyte presented a central and regular nuclei, displaying a homogenous mass. Among the organelles, the mitochondria were the most abundant and the oocyte Golgi apparatus was rarely observed. In conclusion, this work shows for the first time the characterization of the population of preantral follicles in the ovary of Dasyprocta leporina. Those information will be useful for further development and adaptation of biotechniques such as germplasm cryopreservation and in vitro gametes manipulation.(AU)

O objetivo deste trabalho foi caracterizar a população folicular ovariana pré-antral em cutias (D. leporina) estimando o número de folículos em cada categoria de desenvolvimento, e também descrever a morfometria e as características específicas do folículo e oócito usando microscopia de luz e eletrônica de transmissão. O comprimento de cada ovário foi medido utilizando um paquímetro, seccionados longitudinalmente em duas metades e ambos foram imediatamente fixados para realizar a estimativa da população folicular e análise ultraestrutural. A média (±S.E.M.) da população folicular por par de ovário foi estimada em 4419,8±532,26 e 5397,52±574,91 nos ovários direito e esquerdo, respectivamente, mas não foram observadas diferenças entre eles. Os diâmetros dos folículos, oócito e núcleos, respectivamente, foram: 18,62±3,40µm, 12,28±2.37µm e 6,10±0,93µm para primordial, 23,75±5,70µm, 14,22±3,00µm e 6,70±1,24µm para primário e 88,55±17,61µm, 52,85±17,56µm e 22,33±17,61µm de folículos secundários. A maioria dos folículos encontrados pertencia à categoria primordial (86,63%), seguido pelo primário (13,01%) e um secundário (0,35%). Adicionalmente, os folículos poliovulares foram observados em todos os animais e representavam 7,51% do total de folículos contados. A análise ultra-estrutural mostrou que o oócito apresentou núcleos centrais e regulares, exibindo uma massa homogênea. Dentre as organelas, as mitocôndrias foram as mais abundantes e o aparelho de Golgi do oócito foi raramente observado. Em conclusão, este trabalho mostra pela primeira vez a caracterização da população de folículos pré-antrais do ovário da Dasyprocta leporina. Essas informações serão úteis para o desenvolvimento e adaptação de biotécnicas, como a criopreservação de germoplasma e manipulação de gametas in vitro.(AU)

Estimation, morphometry and ultrastructure of ovarian preantral follicle population in agouti (Dasyprocta leporina) / Morfometria, estimativa e ultraestrutura da população folicular ovariana preantral de cutia (Dasyprocta leporina)

The aim of this study was to characterize the preantral ovarian follicular population in agoutis (D. leporina) by estimating the number of follicles at each developmental category, and also describe the morphometry and the specific features of the follicle and the oocyte by using light and transmission electron microscopy. The length of each ovary was measured using a caliper rule, longitudinally sectioned into two halves and both were immediately fixed to perform the estimation of follicular population and ultrastructural analysis. The mean (±S.E.M.) population of follicular per pair of ovary was estimated at 4419.8±532.26 and 5397.52±574.91 for right and left ovaries, respectively, but no differences were observed between them. The diameters for follicles, oocyte and nuclei were: 18.62±3.40µm, 12.28±2.37µm and 6.10±0.93µm for primordial, 23.75±5.70µm, 14.22±3.00µm and 6.70±1.24µm for primary and 88.55±17.61µm, 52.85±17.56µm and 22.33±17.61µm for secondary follicles, respectively. The most of the follicles found belonged to the primordial category (86.63%), followed by primary (13.01%) and secondary (0.35%) one. Additionally, polyovular follicles were observed in all the animals and they represented 7.51% of the total follicles counted. The ultrastructural analysis showed that the oocyte presented a central and regular nuclei, displaying a homogenous mass. Among the organelles, the mitochondria were the most abundant and the oocyte Golgi apparatus was rarely observed. In conclusion, this work shows for the first time the characterization of the population of preantral follicles in the ovary of Dasyprocta leporina. Those information will be useful for further development and adaptation of biotechniques such as germplasm cryopreservation and in vitro gametes manipulation.(AU)

O objetivo deste trabalho foi caracterizar a população folicular ovariana pré-antral em cutias (D. leporina) estimando o número de folículos em cada categoria de desenvolvimento, e também descrever a morfometria e as características específicas do folículo e oócito usando microscopia de luz e eletrônica de transmissão. O comprimento de cada ovário foi medido utilizando um paquímetro, seccionados longitudinalmente em duas metades e ambos foram imediatamente fixados para realizar a estimativa da população folicular e análise ultraestrutural. A média (±S.E.M.) da população folicular por par de ovário foi estimada em 4419,8±532,26 e 5397,52±574,91 nos ovários direito e esquerdo, respectivamente, mas não foram observadas diferenças entre eles. Os diâmetros dos folículos, oócito e núcleos, respectivamente, foram: 18,62±3,40µm, 12,28±2.37µm e 6,10±0,93µm para primordial, 23,75±5,70µm, 14,22±3,00µm e 6,70±1,24µm para primário e 88,55±17,61µm, 52,85±17,56µm e 22,33±17,61µm de folículos secundários. A maioria dos folículos encontrados pertencia à categoria primordial (86,63%), seguido pelo primário (13,01%) e um secundário (0,35%). Adicionalmente, os folículos poliovulares foram observados em todos os animais e representavam 7,51% do total de folículos contados. A análise ultra-estrutural mostrou que o oócito apresentou núcleos centrais e regulares, exibindo uma massa homogênea. Dentre as organelas, as mitocôndrias foram as mais abundantes e o aparelho de Golgi do oócito foi raramente observado. Em conclusão, este trabalho mostra pela primeira vez a caracterização da população de folículos pré-antrais do ovário da Dasyprocta leporina. Essas informações serão úteis para o desenvolvimento e adaptação de biotécnicas, como a criopreservação de germoplasma e manipulação de gametas in vitro.(AU)

Caracterização do sistema imune de juvenis de tainha Mugil liza

A tainha Mugil liza é um animal com grande potencial para a produção aquícola, no entanto, informações sobre sua biologia ainda são limitantes para a expansão da atividade. O conhecimento sobre o seu sistema imunológico é essencial para desenvolvimento de ferramentas diagnósticas e protetivas à saúde dos peixes. Neste trabalho foi realizada uma caracterização do sistema imunológico de juvenis da tainha M. liza, utilizando técnicas de microscopia eletrônica, histologia, histoquímica e imunohistoquímicas para estudar os órgãos linfoides. O primeiro capítulo caracteriza macroscópica e microscopicamente os órgãos linfoides, junto com outras variáveis de importância imunológica, como a quantificação de células T CD3+ e CD4+ e melanomacrófagos, incluindo a presença de pigmentos relacionados a estes, assim como, o perfil leucocitário do sangue periférico. O segundo capítulo apresenta uma avaliação ultraestrutural do timo de juvenis de M. liza. No primeiro capítulo, o baço se apresentou como o menor órgão linfo-hematopoiético enquanto o rim pronefro o maior órgão. Não houve diferenças entre a área relativa de melanomacrófagos presentes no baço e no rim pronefro. Os linfócitos apresentaram uma predominância de 60% em relação aos demais leucócitos contabilizados. Nas análises de imunohistoquímicas, apenas a área relativa de CD4+ presente no baço foi superior àquelas apresentadas no timo e no rim pronefro. Ainda neste capítulo, estabeleceram-se relações entre alguns dos parâmetros imunológicos avaliados, aportando evidências sobre as dinâmicas entre os diferentes agentes imunes. Além disso, a morfometria e morfologia dos órgãos, que se demonstrou como um importante biomarcador à saúde vital das tainhas. Com a análise de ultraestrutura do timo foram identificados três tipos celulares: linfócitos, células reticular epiteliais e macrófagos. Os linfócitos presentes possuíam núcleo com cromatina compacta e citoplasma como muitos ribossomos livres. As células epiteliais geralmente identificadas pela presença de desmossomos e tonofibrilas, algumas sem uma identificação clara, mas com cromatina periférica agrupada em um padrão semelhante à dos linfócitos. Os macrófagos foram identificados pelos lisossomos presentes. Com base nas observações, na ultraestrutura do timo, é possível sugerir uma origem de natureza epitelial. Este estudo fornece dados fundamentais sobre o sistema imune da tainha e cria uma base para estudos posteriores em imunologia e patologia aplicada à aquicultura.

The Mugil liza mullet is an animal with great potential for aquaculture production, however, information about its biology is still limiting for the expansion of the activity. Knowledge about your immune system is essential for developing diagnostic and protective tools for fish health. In this work, a characterization of the immune system of juveniles of the mullet M. liza was performed, using techniques of electron microscopy, histology, histochemistry, and immunohistochemistry to study the lymphoid organs. The first chapter characterizes macroscopically and microscopically the lymphoid organs, together with other variables of immunological importance, such as the quantification of CD3+ and CD4+ T cells and melanomacrophages, including the presence of pigments related to these, as well as the leukocyte profile of the peripheral blood. In the second chapter, an ultrastructural evaluation of the thymus of M. liza juveniles was carried out. In the first chapter, the spleen is presented as the smallest lymphohematopoietic organ, while the kidney is the largest organ. There were no differences between the relative melanomacrophages area present in the spleen and the pronephros kidney. The lymphocytes had a 60% majority of other counted leukocytes. In immunohistochemical analyses, only the CD4+ relative area present in the spleen was higher than those related to the thymus and pronephros kidney. Also in this chapter, relationships were established between some of the evaluated immunological parameters, providing evidence on the dynamics between different immune agents. Furthermore, the morphometry and morphology of the organs proved to be an important biomarker for mullets' vital health. The thymus ultrastructure analysis showed, three cell types were identified: lymphocytes, epithelial reticular cells, and macrophages. The lymphocytes present had a nucleus with compact chromatin and cytoplasm like many free ribosomes. Epithelial cells are usually identified for the presence of desmosomes and tonofibrils, some without clear identification, but with peripheral chromatin clustered in a lymphocyte-like pattern. Macrophages were identified for the lysosomes present. Based on the reasons, in the ultrastructure of the thymus, it is possible to suggest an origin of an epithelial nature. This study provides fundamental data on the mullet's immune system and lays the foundation for further studies in immunology and pathology applied to aquaculture.

ESTUDO ULTRASSONOGRÁFICO DA PERFUSÃO RENAL EM CADELAS COM CARCINOMA MAMÁRIO TRATADAS COM CARPROFENO POR LONGOS PERÍODOS

A córnea atua como principal elemento refrativo do olho, para tal tem que manter-se transparente. O endotélio corneal é um peça chave para essa manutenção, possuindo mecanismos como a bomba de Na+ e K+ que ajudam a garantir a desturgescência corneal. Descompensações endoteliais constituem uma importante indicação de transplante da córnea, uma vez que as células endoteliais corneais apresentam limitada capacidade proliferativa. Entretanto, transplantes são procedimentos cirúrgicos complicados e de elevado custo. Alternativas e coadjuvantes medicamentosos vêm sendo estudadas. O fucoidam é uma substância que, dentre outras propriedades, promove migração e proliferação celular, portanto objetivou-se, com a presente pesquisa, avaliar seus efeitos sobre a morfologia, a ploidia e o metabolismo de células endoteliais da córnea de coelhos, após criolesão experimental. Para tal, foram realizadas avaliações quanto à morfologia e viabilidade celular empregando-se dupla marcação com corantes vitais (alizarina vermelha e azul de tripan) e ultraestrutural pela microscopia eletrônica de transmissão e de varredura. Outrossim, avaliou-se a morfometria in vivo e in vitro de seguintes parâmetros: número de células, densidade, hexagonalidade e coeficiente de variação celulares. Estudou- se o metabolismo dessas células empregando-se a imunofluorescência com observação em confocal dos anticorpos Ki-67, Na+K+/ATPase, n-Caderina e Zo-1, conjugados com Alexafluor-488. Visando-se a conseguirem conhecimentos adicionais relativos à atividade nuclear durante o processo de cicatrização do endotélio corneal na presença de fucoidam foram analisados, a partir da reação de feulgen, perímetro e área nucleares, além da supraorganização da cromatina. A criolesão ensejou piora de todos parâmetros morfométricos, com diminuição das células, densidade celular, do percentagem de células padrão com 6 lados e aumento no coeficiente de variação, a retomada aos valores normais com o decorrer do tempo foi melhor em olhos tratados com fucoidam. Nas córneas que não receberam fucoidam observou-se células desvitalizadas em todo decorer do tempo de avaliação. Houve diminuição da expressão das proteínas de junção celular (n-Caderina e Zo-1) logo após a lesão e aumento progressivo no decorrer do tempo, em contrapartida o contrário ocorreu com Ki-67, revelando aumento na proliferação celular após lesão e baixa das expressão das demais proteínas, com notável estimulação na presença do fucoidam. As características do comportamento nuclear, como descompactação da cromatina na presença do fucoidam puderam ratificar essa proliferação. O fucoidam atuou na modulação à reparação cicatricial, revelando cicatrizes menos opacas, estimulando a proliferação celular e mediando a expressão das proteínas de ligação e atuando na proteção contra morte celular.

The cornea as the main refractive element of the eye, which has to remain transparent. The corneal endothelium is a key piece for this maintenance, having mechanisms such as the Na + and K + pump that help to ensure corneal dysurgescence. Endothelial decompensations are an important indication for corneal transplantation, since the corneal endothelial cells have limited proliferative capacity. However, transplants are complicated and expensive surgical procedures. Alternatives and drug coadjuvants have been studied. Fucoidam is a substance that, among other properties, promotes cell migration and proliferation, therefore, the objective of this research was to evaluate its effects on the morphology, ploidy and metabolism of rabbit cornea endothelial cells after experimental cryoinjury. For this, evaluations were made for morphology and cell viability using double labeling with vital dye (alizarin red and tripan blue) and ultrastructural analysis by transmission and scanning electron microscopy. Morphometry (in vivo and in vitro) of the following parameters were also evaluated: cell number, cell density, hexagonality and coefficient of variation. The metabolism of these cells was studied using immunofluorescence with confocal observation of the Ki-67, Na + K + / ATPase, n- Caderin and Zo-1 antibodies, conjugated to Alexafluor-488. In order to obtain additional knowledge regarding the nuclear activity during the healing process of the corneal endothelium in the presence of fucoidam were analyzed, from the feulgen reaction, nuclear perimeter and area, in addition to the chromatin supraorganization. Cryoinjury resulted in worsening of all morphometric parameters, with cell decrease, cell density, the percentage of standard cells with 6 sides and increase in coefficient of variation, the recovery to normal values with time was better in eyes treated with fucoidam. In the corneas that did not receive fucoidam devitalised cells were observed throughout the evaluation time. There was a decrease in the expression of the cellular junction proteins (n-Caderin and Zo-1) shortly after injury and progressive increase over time, whereas the opposite occurred with Ki-67, revealing increased cell proliferation after injury and low expression of the other proteins, with remarkable stimulation in the presence of fucoidam. The characteristics of nuclear behavior, such as the decomposition of chromatin in the presence of fucoidam, could confirm this proliferation. Fucoidam has been involved in modulation of scar repair, revealing less opaque scars, stimulating cell proliferation and mediating the expression of binding proteins, and acting to protect against cell death.

CARACTERIZAÇÃO E CRIOPRESERVAÇÃO DE SÊMEN DE ONÇA-PINTADA (Panthera onca)

Um dos principais pontos da biotecnologia reprodutiva é a criopreservação de sêmen, que possibilita a criação de um banco genético de fácil acesso, bem como permite maximizar a utilização dos gametas masculinos. Portanto, objetivou-se primeiramente descrever as características morfológicas e ultraestruturais do sêmen fresco de onça-pintada e, posteriormente, comparar a qualidade do sêmen pós-descongelação, utilizando-se os diluidores à base de TRIS ou água de coco em pó (ACP-117c). Para tanto, foram utilizados cinco machos de onça-pintada que foram submetidos a duas coletas seminais por eletroejaculação. O sêmen foi avaliado quanto à motilidade total, vigor, funcionalidade da membrana espermática, atividade mitocondrial por meio do 3,3-diaminobenzidina (DAB) e morfologia dos espermatozoides, além das avaliações ultraestruturais por microscopia eletrônica de varredura (MEV) e transmissão (MET), como também a análise morfométrica por meio do software Image J. Em seguida, foi realizado o processamento das amostras para criopreservação. Após o término das coletas, as amostras foram descongeladas e, realizadas as mesmas análises feitas nas amostras frescas, exceto a morfometria, além da avaliação computadorizada do sêmen (CASA), como também análise da integridade das membranas celulares por meio de análise de fluorescência e o teste de interação com membrana perivitelínea de ovo de galinha. Os resultados estão expressos na forma de média ± erro médio padrão. Os principais resultados do sêmen fresco foram: motilidade; vigor. As principais alterações morfológicas encontradas foram: na cabeça dos espermatozoides (9,0 ± 1,7%) e defeitos de cauda (12,5 ± 3,3%). A largura e o comprimento da cabeça foram 3,60 ± 0,03 m e 4,9 ± 0,02 m, respectivamente, peça intermediária 9,7 ± 0,3 m, cauda 54,5 ± 4,4 m, e o comprimento total do espermatozoide foi de 59,5 ± 0,1 m. Regiões electronlucentes foram encontradas na região do núcleo e aproximadamente 54 espirais mitocondriais na peça intermediária foram identificadas usando microscopia eletrônica. As maiores porcentagens de células foram classificadas como DAB I (46,6 ± 4,9%) e DAB II (38,0 ± 4,4%). No tocante à criopreservação, as amostras preservadas no TRIS apresentaram melhor resultado do que as preservadas no ACP-117c: maior motilidade pós-descongelação (46,0 ± 7,7% vs 20,9 ± 5,4% de espermatozoides móveis; p=), melhor funcionalidade da membrana (60,5 ± 4,2% vs 47,1 ± 2,5% de membrana funcional; p=) e maior atividade mitocondrial (21,5 ± 3,7% vs 11,8 ± 1,7%; p=). Em relação às avaliações ultraestruturais, a MEV mostrou que ambos os diluidores foram capazes de preservar o plasmalema espermático, mas a MET revelou a ocorrência de pontos electronlucentes, especialmente em amostras preservadas em ACP-117c. Além disso, um maior número de espermatozoides ligados à membrana perivitelina foi observado com as amostras diluídas em TRIS em comparação com o ACP-117c (29,5 ± 3,3% vs 18,6 ± 1,5%; p=). Em conclusão, o diluidor TRIS apresentou melhores resultados do que o diluidor ACP-117c, para a criopreservação de sêmen de onça-pintada.

One of the main points of reproductive biotechnology is semen cryopreservation, which allows the creation of an easily accessible genetic bank, as well as maximizing the use of male gametes. Therefore, the objective was first to describe the morphological and ultrastructural characteristics of jaguar fresh semen, and then to compare the quality of the post-thawed semen using TRIS or powdered coconut water (ACP-117c) extender. For this, five male jaguars were submitted to two seminal collections by electroejaculation. Semen was evaluated for total motility, vigor, sperm membrane functionality, mitochondrial activity by 3,3'-diaminobenzidine (DAB) and sperm morphology, plus ultrastructural evaluation by scanning electron microscopy (SEM) and transmission (TEM), as well as morphometric analysis using a software (Image J). Then, the samples were cryopreserved. After the end of all collections, the samples were thawed and first performed the same analyzes made on fresh samples, except for morphometry, as well as computerized semen evaluation (CASA), as well as analysis of cell membrane integrity by fluorescence, and the interaction test with perivitelline chicken egg membrane. The main results of fresh semen were morphological abnormalities in sperm head (9 ± 1.7%) and tail defects (12.5 ± 3.3%). Head width and length were 3.6 ± 0.03 m and 4.9 ± 0.02 m, respectively, middle piece 9.7 ± 0.3 m, tail 54.5 ± 4.4 m, and the total sperm length was 59.5 ± 0.1 m. Electronlucent regions were found in the nucleus region and approximately 54 mitochondrial spirals in the middle piece were identified using TEM. The highest cell percentages were classified as DAB I (46.6 ± 4.9%) and DAB II (38 ± 4.4%). Regarding cryopreservation, samples preserved in TRIS showed better post-thaw motility (46.0 ± 7.7%) and membrane functionality (60.5 ± 4.2%) and greater mitochondrial activity (21.5 ± 3.7, respectively) than those preserved in ACP-117c (20.9 ± 5.4% mobile sperm; 47.1 ± 2.5% functional membrane; 11.8 ± 1.7% mitochondrial activity). Regarding ultrastructural evaluations, SEM showed that both extenders were able to preserve sperm membrane, but MET revealed electronlucent points, especially in samples preserved in ACP-117c. In addition, a higher number of perivitelline membrane-bound sperm (29.5 ± 3.3%) was observed with samples diluted in TRIS compared with ACP-117c (18.6 ± 1.5%). In conclusion, we suggest the TRIS extender for jaguar semen cryopreservation.

Morfologia radicular da dentição permanente de Sapajus apella: morfometria, anatomia macroscópica, ultraestrutura e propriedades físicas / Root morphology of the permanent dentition Sapajus apella: morphometry, gross anatomy, ultrastructure and physical properties

O objetivo desse trabalho foi contribuir com o estudo anatômico, morfométrico, ultraestrutural e propriedades físicas dos dentes permanentes do primata Sapajus apella. Para tal, foram utilizados 10 animais adultos e machos. Os dentes foram avaliados quanto ao seu comprimento e quanto à anatomia radicular externa e interna considerando número de raízes e canais, forma e direção radicular e forma do canal, assim como análise da densidade e diâmetro tubular do canal radicular, composição e microdureza dentinária. A anatomia radicular desse primata apresentou especificidades, como o número de raízes do segundo pré-molar superior e a presença do terceiro pré-molar. Quanto à densidade e o diâmetro dos túbulos dentinários, observou-se uma diminuição do número e diâmetro de túbulos ao longo do canal radicular, havendo diferença estatisticamente significante ao se comparar o terço apical com as regiões cervical e média, padrão de densidade e tamanho semelhantes a dentes humanos. Semelhanças também foram encontradas com dentes humanos quando comparados os valores de microdureza e proporção de elementos químicos encontrados na dentina radicular.(AU)

This paper aimed the anatomical study including morphometric, ultrastructural and physical properties of permanent teeth of Sapajus apella primate. Ten adult male monkeys were studied. The teeth were evaluated for their length, root anatomy (external and internal considering the number of roots and canals), direction and shape of the root canal, density and diameter of the tubular root canal, dentin microhardness, and composition. The root anatomy showed specificity regarding the number of roots of the second premolar and the presence of the third premolar. We observed a decrease in the number and diameter of dentinal tubules along the root canal, a statistically significant difference when compared with the apical and cervical regions. Similarities with human teeth were found in regard to microhardness values and proportion of chemical elements in the root dentin.(AU)

ASPECTOS HISTOMORFOMÉTRICOS, HISTOQUÍMICOS E ULTRAESTRUTURAIS DO INTESTINO GROSSO DE CAPIVARAS (Hydrochoerus sp)

Esta pesquisa teve como objetivo geral descrever os aspectos histológicos e histoquímicos do intestino grosso de Hydrochoerus hydrochaeris (Linnaeus, 1766) e Hydrochoerus isthmius (Goldman, 1912) adultas, bem como as características ultraestruturais dos grânulos secretores das células argirófilas e argentafins no intestino grosso de H. hydrochaeris. Para este fim, foram coletados vários fragmentos do ceco (9), cólon (9) e reto (3) de cada animal, fixados por 24h em líquido de Bouin, para coloração pelas técnicas de Hematoxilina-Eosina (H-E), Acido Periódico de Schiff (P.A.S.), Grimelius, em formol 10% tamponado para técnica de Masson-Fontana modificada, e em glutaraldeído 5% em tampão fosfato de sódio 0,1 M pH 7,3, para as análises ultraestruturais dos grânulos citoplasmáticos das células endócrinas. Histologicamente, o intestino grosso das duas espécies de capivaras é semelhante ao da maioria dos mamíferos quanto à estrutura da sua parede sendo constituída por quatro camadas, mucosa, submucosa, muscular e serosa. A mucosa é revestida por epitélio simples cilíndrico com células caliciformes PAS-positivas, que se apresentam em maior quantidade no reto. A presença de pregas longitudinais também foi observada nos três segmentos. A camada submucosa nas duas espécies é constituída por tecido conjuntivo frouxo com vasos sanguíneos de vários calibres, nódulos linfoides isolados ou associados e gânglios nervosos. A muscular constituída por fibras musculares lisas é organizada em duas subcamadas, a circular interna e a longitudinal externa, sendo que entre as duas se evidenciaram gânglios nervosos desenvolvidos. Esta camada aumenta sua espessura em direção ao reto. A camada serosa é constituída de uma delgada camada de tecido conjuntivo frouxo, revestida por mesotélio. Histoquimicamente foram identificadas células endócrinas argirófilas e argentafins, as quais foram do tipo aberto e do tipo fechado estando presentes em todos os segmentos do intestino grosso das duas espécies. Ultraestruturalmente os grânulos de secreção analisados nas células endócrinas evidenciaram formas e tamanhos variados, sendo classificados em maduros e imaturos dependendo da sua eletrodensidade. Por meio do programa Image-Pro®Plus (versão 7.0), foram obtidas as espessuras das camadas histológicas constatando que houve diferença significativa entre as duas espécies. Também foi feita a quantificação dos gânglios submucosos e mioentéricos por unidade de área (mm2) e o número de células endócrinas argentafins e argirófilas das duas espécies por unidade de área (mm2) da mucosa A morfometria dos grânulos de secreção para sua classificação também foi obtida.

The aim of this research was to describe the histological and histochemical aspects of the adult large intestine of Hydrochoerus hydrochaeris (Linnaeus, 1766) and Hydrochoerus isthmius (Goldman, 1912), as well as the ultrastructural characteristics of the secretory granules of argirophil and argentafins cells in the large intestine in these animals. To this, several fragments of the cecum, colon and rectum of each animal were collected for 24h in Bouin's liquid for staining by Hematoxylin-Eosin (HE), PAS, Grimelius and in 10% formalin buffered for modified Masson-Fontana technique and in 5% glutaraldehyde in 0.1 M sodium phosphate buffer, pH 7.3, postfixed in 1% osmium tetroxide, for the ultrastructural analysis of the intracytoplasmic granules of the endocrine cells. Histologically, the large intestine of the two species of capybaras is similar to that of most mammals in terms of the structure. The wall, consisting of four layers, mucosa, submucosa, muscular and serous. The mucosa is covered by simple cylindrical epithelium with PAS-positive goblet cells, which present in greater quantity in the rectum. The presence of longitudinal folds was also observed in the three segments. The submucosal layer in both species consists of loose connective tissue which contains blood vessels of various calibers and isolated or associated lymphoid nodules and nerve plexuses. The muscular constituted by smooth muscle fibers is organized in two sub-layers with internal and external longitudinal circular, between the two developed nerve plexus developed. This layer increases its thickness towards the rectum. The serous layer consists of a thin layer of loose connective tissue, coated by mesothelium. Histochemically, argyrophilic and argentaffin endocrine cells were identified, which were of the "open type" and "closed type" being present in all segments of the large intestine of the two species. Ultrastructurally, the secretory granules analyzed in the endocrine cells showed varied shapes and sizes, being classified in mature and immature depending on their electrondensity. Using Image-Pro®Plus Program (version 7.0), thicknesses of the histological layers were obtained, confirming that there were significant differences between the two species. Similarly the quantification of submucosal and myenteric plexuses per unit of area (mm2) was performed, the number of argirophilic and argentafins endocrine cells of the two capybaras species per unit of area (mm2) of the mucosa was also obtained, and morphometry of the secretory granules for classification.

ASSOCIAÇÃO DE -GLUCANOS E MANANOLIGOSSACARÍDEOS (MOS) COMO ALTERNATIVAS AOS ANTIMICROBIANOS MELHORADORES DE DESEMPENHO PARA LEITÕES RECÉM-DESMAMADOS

O mercado suinícola vem crescendo progressivamente e, para otimizar a produção animal, faz-se uso de antimicrobianos melhoradores de desempenho. Contudo, o uso sem restrições vem ocasionando preocupações com os resíduos na carne e a possível resistência bacteriana cruzada. Dessa forma, iniciou-se a proibição total do uso desses aditivos na Uniao Europeia, levando os pesquisadores a buscarem por alternativas que venham trazer os mesmos benefícios dos tradicionais antimicrobianos melhoradores de desempenho. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da associação de -glucanos + mananoligossacarídeos (MOS) e de um antimicrobiano melhorador de desempenho (clorohidroxiquinolina), adicionados à ração de leitões desmamados, sobre o desempenho zootécnico, ocorrência de diarreia, morfologia do epitélio intestinal, pH do conteúdo digestório, morfometria de órgãos e parâmetros hematológicos. Foram utilizados 120 leitões desmamados aos 21 dias de idade com peso inicial de 6,33 ± 0,49 kg e peso final de 18,71 ± 2,41kg, machos e fêmeas, distribuídos em um delineamento em blocos completos casualizados, recebendo cinco tratamentos com seis repetições (blocos) por tratamento e quatro leitões por unidade experimental. Os tratamentos estudados foram: 120 mg/kg de clorohidroxiquinolina (tratamento antimicrobiano - ANT); 0 (controle negativo); 1000, 2000 e 3000 mg/kg de -glucanos + MOS, adicionados a uma dieta basal. Ao final do período experimental de 35 dias, após jejum sólido de 8h, foi abatido um animal por unidade experimental para coleta de tecidos e órgãos. Para determinar os efeitos da associação de -glucanos + mananoligossacarídeos (MOS) na dieta, assim como para comparar o tratamento antimicrobiano com os demais tratamentos foram utilizados a ANOVA (software R Core Team (2015)), os contrastes ortogonais (C1 - ANT vs 0; C2 - ANT vs 1000, 2000 e 3000; C3 - 0 vs 1000, 2000 e 3000) e o teste de Dunnet. Para o desempenho zootécnico, os leitões do tratamento antimicrobiano apresentaram melhor conversão alimentar que os do tratamento 3000 mg/kg (P<0,05). Não foram observadas diferenças entre os tratamentos (P>0,05) sobre a ocorrência de diarreia (OD) e o pH do conteúdo digestório. De maneira geral, para a morfologia estrutural, o grupo ANT possibilitou maior profundidade de criptas no duodeno dos leitões (P<0,05), quando comparado com os do grupo controle negativo e os do grupo 3000 mg/kg. Na morfologia ultraestrutural, os leitões alimentados com 3000 mg/kg apresentaram maior densidade de vilos (DV) no duodeno (P<0,01) comparado aos alimentados com dietas contendo ANT. No jejuno, a maior DV (P<0,01) foi constatada nos leitões do grupo ANT quando comparado aos do tratamento 1000 e 3000 mg/kg. Para a morfometria de órgãos, os animais dos tratamentos ANT, 1000 e 3000 mg/kg apresentaram maior peso relativo do baço (P<0,05) em relação aos do tratamento controle negativo. Para a análise hematológica, os leitões do grupo 3000 mg/kg apresentaram maior contagem de eosinófilos (P<0,01) quando comparados com os do grupo ANT. O nível 3000 mg/kg de -glucanos + MOS, assim como a clorohidroxiquinolina destacaram-se de maneira positiva e negativa dentro dos parâmetros analisados. Dessa forma, ainda não foi possível definir através desse estudo um nível de inclusão ideal entre a associação de -glucanos + MOS para ser utilizado como melhorador de desempenho na alimentação de leitões.

The swine's market is growing progressively. To optimize animal production, antimicrobial growth promoters (AGPs) are being used, though its unrestricted use has led to concerns about residues in meat and possible cross-bacterial resistance. In this way, was iniciated a total ban on the use of these additives in the European Union, leading researchers to seek for alternatives that bring the same benefits as AGPs. The main goal of this essay was to evaluate the effects of the association of -glucans + mananoligosaccharides (MOS) and an AGP (chlorohydroxyquinoline), added to the diet of weaned piglets, on growth performance, diarrhea ocurrence, intestinal morphology pH of the digestive contents, organ morphometry and haematological parameters. A total of 120 weaned piglets (age, 21 days, body weigh, 6.33 ± 0.49 kg and final weigh de 18,71 ± 2,41kg), male and female, were distributed in a randomized complete block design, receiving five treatments with six replicates (blocks) per treatment and four piglets per experimental unit. The treatments studied were: 120 mg/kg of chlorohydroxyquinoline (antimicrobial treatment - ANT); 0 (negative control); 1,000; 2,000 and 3,000 mg/kg of -glucans + MOS, added in a basal diet. At the end of the 35-day experimental period, after an 8-h fast, one animal per experimental unit was slaughtered for tissue and organ collection. To determine the effects of the association of -glucans + mannanoligosaccharides (MOS) in the diet, as well as to compare the antimicrobial treatment with the other treatments, ANOVA (software R Core Team (2015), orthogonal contrasts (C1 - ANT vs 0; C2- ANT vs 1000, 2000 and 3000 mg/kg; C3-0 vs 1000, 2000 and 3000 mg/kg) and the Dunnet test were used. For the growth performance, the piglets of antimicrobial treatment presented better feed conversion than those of the treatment 3,000 mg/kg (P<0.05). There were no differences betwen the treatments (P>0.05) on the diarrhea ocurrence (OD) and pH of the digestive contents. In general, for the structural morphology, the ANT group allowed a greater depth of crypts in the duodenum of the piglets (P<0.05) when compared to the piglets of the negative control group and the 3,000 mg/kg group. In the ultrastructural morphology, piglets fed 3,000 mg/kg presented higher villus density (DV) in the duodenum (P<0.01) compared to those fed ANT diets. In the jejunum, the highest DV (P<0.01) was observed in piglets of the ANT group when compared to those of treatment 1,000 and 3,000 mg/kg. For organ morphometry, animals of the ANT treatments, 1,000 and 3,000 mg/kg had a higher relative spleen weight (P<0.05) than the animals of negative control treatment. For the hematological analysis, the piglets of the 3,000 mg/kg group had a higher eosinophil count (P<0.01) when compared to the ANT group. The 3,000 mg/kg level of -glucans + MOS, as well as a chlorohydroxyquinoline, stood out positively and negatively within the parameters analyzed. Thus, it is not yet possible to define an ideal inclusion level of -glucan + MOS association to be used as a growth promoter in piglet feeding.

Morphology, morphometry and ultrastructure of the Amazonian manatee (Sirenia: Trichechidae) spermatozoa

This study describes the morphological, morphometric and ultrastructural characteristics of the Amazonian manatee Trichechus inunguis (Natterer, 1883) spermatozoon. The spermatozoa were obtained from a urine sample of an adult T. inunguis kept in captivity. The spermatozoa were analyzed by light and transmission electron microscopy. The head of Amazonian manatee spermatozoa had a flat oval shape and a well distinguishable midpiece. The mean dimensions of the spermatozoa were: head length, 7.49 ± 0.24 µm; head width, 3.53 ± 0.19 µm; head thickness, 1.61 ± 0.13 µm; midpiece length, 11.36 ± 0.34 µm; flagellum length, 40.91 ± 1.94 µm; total tail length, 52.16 ± 1.06 µm; total spermatozoon length, 60.08 ± 1.40 µm. The Amazonian manatee spermatozoa were similar in shape to other sirenian spermatozoa; however, presenting a different size. This study describes, for the first time, the morphometric and ultrastructural characteristics of the Amazonian manatee spermatozoa, and also demonstrates the possible use of spermatozoa retrieved from urine samples for biological studies.

Morphology, morphometry and ultrastructure of the Amazonian manatee (Sirenia: Trichechidae) spermatozoa

This study describes the morphological, morphometric and ultrastructural characteristics of the Amazonian manatee Trichechus inunguis (Natterer, 1883) spermatozoon. The spermatozoa were obtained from a urine sample of an adult T. inunguis kept in captivity. The spermatozoa were analyzed by light and transmission electron microscopy. The head of Amazonian manatee spermatozoa had a flat oval shape and a well distinguishable midpiece. The mean dimensions of the spermatozoa were: head length, 7.49 ± 0.24 µm; head width, 3.53 ± 0.19 µm; head thickness, 1.61 ± 0.13 µm; midpiece length, 11.36 ± 0.34 µm; flagellum length, 40.91 ± 1.94 µm; total tail length, 52.16 ± 1.06 µm; total spermatozoon length, 60.08 ± 1.40 µm. The Amazonian manatee spermatozoa were similar in shape to other sirenian spermatozoa; however, presenting a different size. This study describes, for the first time, the morphometric and ultrastructural characteristics of the Amazonian manatee spermatozoa, and also demonstrates the possible use of spermatozoa retrieved from urine samples for biological studies.

Morphology, morphometry and ultrastructure of the Amazonian manatee (Sirenia: Trichechidae) spermatozoa

This study describes the morphological, morphometric and ultrastructural characteristics of the Amazonian manatee Trichechus inunguis (Natterer, 1883) spermatozoon. The spermatozoa were obtained from a urine sample of an adult T. inunguis kept in captivity. The spermatozoa were analyzed by light and transmission electron microscopy. The head of Amazonian manatee spermatozoa had a flat oval shape and a well distinguishable midpiece. The mean dimensions of the spermatozoa were: head length, 7.49 ± 0.24 µm; head width, 3.53 ± 0.19 µm; head thickness, 1.61 ± 0.13 µm; midpiece length, 11.36 ± 0.34 µm; flagellum length, 40.91 ± 1.94 µm; total tail length, 52.16 ± 1.06 µm; total spermatozoon length, 60.08 ± 1.40 µm. The Amazonian manatee spermatozoa were similar in shape to other sirenian spermatozoa; however, presenting a different size. This study describes, for the first time, the morphometric and ultrastructural characteristics of the Amazonian manatee spermatozoa, and also demonstrates the possible use of spermatozoa retrieved from urine samples for biological studies.

MORFOLOGIA DAS CÉLULAS ESPERMÁTICAS DE QUATIS (Nasua nasua Linnaeus, 1766)

O conhecimento das características reprodutivas de uma espécie é importante para a aplicação de biotécnicas da reprodução que buscam sua preservação, ou mesmo para o controle de sua reprodução nas áreas onde possam ser considerados como pragas. Em procionídeos, praticamente não existem estudos acerca de biotécnicas reprodutivas. Portanto, o presente trabalho propôs realizar as análises morfológicas, morfométricas e ultraestruturais das células espermáticas de quatis (Nasua nasua). Foram utilizados quatro quatis adultos que apresentaram volume seminal médio de 60 ± 22,2 L, motilidade total de 91,3 ± 9,2% e vigor de 4,5 ± 0,6, além de concentração espermática de 197,5 ± 204,9 espermatozoides/mL e 73,1 ± 14,5% de espermatozoides vivos. Para as análises morfométricas e morfológicas foram utilizadas lâminas coradas com Rosa Bengala. Foram mensurados largura e comprimento da cabeça, comprimento da peça intermediária, da cauda e comprimento total do espermatozoide. Para análise ultraestrutural foram utilizadas as microscopias eletrônicas de varredura e de transmissão. As alterações morfológicas mais evidentes foram cauda enrolada (6,1 ± 8,7%) e acrossoma ausente (5,4 ± 4,4%). No tocante à morfometria, os tamanhos de cabeça (largura x comprimento), peça intermediária (comprimento) e cauda (comprimento) foram de 6,2 ± 0,4 m x 8,1 ± 0,6 m; 14,1 ± 0,5m; 63,9 ± 4,1 m, respectivamente, o comprimento total do espermatozoide de 86,1 ± 4,3 m. Através de microscopia eletrônica, foi identificada a presença de pontos eletrolucentes no núcleo e a presença de aproximadamente 55 espirais mitocondriais na peça intermediária. Os dados encontrados neste estudo fornecem informações acerca das características espermáticas de quatis, como também podem contribuir em pesquisas futuras de conservação de germoplasma, tanto desta espécie, quanto de demais procionídeos ameaçados de extinção.

Knowledge about species reproductive characteristics is important for the application of reproductive biotechnologies seeking its preservation, or even to control their reproduction in areas where they can be considered as pests. In procyonids, there are few studies on reproductive biotechnologies. Therefore, this paper evaluated the morphology, morphometry and sperm ultrastructure of ringed tail coati sperm (Nasua nasua). Four adults coatis were used, which an average seminal of volume 60 ± 22.2 uL, total motility 91.3 ± 9.2% and vigor 4.5 ± 0.6, sperm concentration of 197.5 ± 204.9 sperm/ml and 73.1 ± 14.5% of live sperm. For the morphometric and morphologic analysis slides were stained with Rose Bengal. The length and width of the head were measured, as well as the length of the midpiece and tail and the total length of the sperm. Scanning and transmission electronic microscopy were used for the ultrastructural analyses. The most common morphological changes were coiled tails (6.1 ± 8.7%) and acrosome absent (5.4 ± 4.4%). Regarding the morphometry, the measurements of the head (length x width), midpiece (length) and tail (length) were 6.2 ± 0.4 m x 8.1 ± 0.6 m; 14.1 ± 0.5m; 63.9 ± 4.1 m respectively, and the total length of the sperm measured 86.1 ± 4.3 m. Through electron microscopy, the presence of electron-lucent points in the nucleus and the presence of approximately 55 mitochondrial spirals in the midpiece were identified. The present study provide detailed information on the sperm characteristics of coatis and may inform future research on germplasm conservation, both for this species and other threatened procyonids.

Avaliação morfofuncional do desenvolvimento da articulação do joelho em fetos humanos

A articulação do joelho tem sido vastamente estudada nas ultimas décadas. Este intenso interesse pode ser visto sob o foco da complexidade desta articulação e de sua importância clínica. No entanto, nota-se escassa informação a respeito de aspectos morfológicos e ultraestruturais sobre o desenvolvimento desta articulação, em fetos humanos de diferentes faixas etárias, o que poderia servir de base teórica para estratégias de reparo da cartilagem e engenharia de tecidos, bem como contribuir para uma melhor compreensão de doenças e malformações ao longo do desenvolvimento dos componentes articulares. Desse modo, considerando-se a importância do conhecimento sobre aspectos morfofuncionais do desenvolvimento normal dos tecidos cartilagíneos na articulação do joelho humano, realizou-se a presente pesquisa com fetos humanos abrangendo a faixa etária da 16ª a 31ª semanas de vida intrauterina. Foram utilizados 20 fetos, os quais foram divididos em 4 grupos (n=5) da seguinte forma: grupo 1 (G1): 16-19 semanas de vida intrauterina (VIU); grupo 2 (G2): 20-23 semanas VIU; grupo 3 (G3): 24-27 semanas VIU e grupo 4 (G4): 28-31 semanas VIU, em que foram realizadas análises morfométricas da cartilagem das epífises do fêmur e tíbia na articulação do joelho, para os parâmetros: área dos condrócitos, densidade de condrócitos e matriz extracelular, análise estereológica para o volume dos condrócitos, e análise qualitativa da distribuição, organização e tipificação de fibras colágenas com uso de Picro-sirius sob análise com luz polarizada. Também se analisou a ultraestrutura através de microscopia eletrônica de varredura (MEV). Frente à metodologia proposta e os resultados obtidos a respeito da avaliação morfofuncional, concluiu-se que a área e o volume dos condrócitos, bem como a densidade da matriz extracelular, na região média das epífises cartilagíneas, tanto do fêmur quanto da tíbia, aumentaram com o avançar da faixa etária, enquanto a densidade dos condrócitos diminuiu. Na região média das epífises, a cartilagem imatura dos fetos mais jovens, inicialmente com características 15 de uma zona de proliferação, passa a apresentar, em fetos com idade mais avançada, características de uma zona de maturação, com condrócitos maiores e mais distantes uns dos outros. Na camada superficial da epífise a organização e orientação das fibras de colágeno modificam-se nos diferentes grupos, passando de uma orientação irregular no grupo dos fetos mais jovens, para uma organização pantográfica no grupo de fetos mais desenvolvidos. Finalmente, verifica-se a clara relação entre o amadurecimento da cartilagem e as alterações na organização e orientação das fibras colágenas, as quais contribuem para as propriedades requeridas na cartilagem em cada fase de seu desenvolvimento, tais como resistência à tensão, resistência à compressão e habilidade para distribuir cargas.

The knee joint has been widely studied in recent decades. This intense interest can be seen from the perspective of the joint complexity and its clinical importance. However, there is little information about morphological and ultrastructural aspects of the development of this joint, particularly in human fetuses within different age, which could serve as a theoretical basis for cartilage repair strategies and tissue engineering, as well as contributing for a better understanding of diseases and malformation during the development of joint components. Thus, considering the importance of morphological and functional aspects of normal cartilaginous tissue development in the human knee joint, this research was performed with human fetuses covering the age range 16 to 31 weeks of intrauterine life. Twenty (20) fetuses were divided into 4 groups (n = 5) as follows: Group 1 (G1): 16-19 weeks, Group 2 (G2): 20-23 weeks, Group 3 (G3): 24-27 weeks and Group 4 (G4): 28-31 weeks. For the femoral and tibial epiphysis cartilage in the knee joint, it was performed morphometric analysis regarding area of chondrocytes, percent density of chondrocytes and extracellular matrix, stereological analysis of the chondrocytes volume and qualitative analysis of the distribution, organization and characterization of collagen fibers using picrosirius staining under analysis with polarized light. It was also analyzed the ultrastructure by scanning electron microscopy. Facing the proposed methodology and the results regarding the morphological evaluation of the middle region of both femur and tibia epiphysis, it was concluded that the area and the volume of the chondrocytes, as well as the density of extracellular matrix increased with advancing age, while the percent density of chondrocytes decreased. In the middle region of the epiphysis, immature cartilage of younger fetuses, initially with characteristics of a proliferation zone starts to present, in older fetuses, characteristics of maturation zone, presenting larger chondrocytes and more distant from each other. In the epiphysis cartilage surface, the organization and orientation 17 of the collagen fibers changed in different groups, from an irregular orientation in the younger fetuses group, to a pantograph organization in the most developed fetuses group. Finally, it was observed the relationship between the cartilage development and the changes in the collagen fibers organization and orientation in order to obtain the cartilage properties required at each stage of the development, such as tensile strength, resistance to compression and ability to distribute loads.

EFEITO DA INOCULAÇÃO DE PROBIOTICO IN OVO SOBRE A MORFOMETRIA INTESTINAL E CONTROLE DE Salmonella Enteritidis

EFEITO DE DIFERENTES VIAS DE APLICAÇÃO DE PROBIÓTICO SOBRE O DESEMPENHO DE FRANGOS DE CORTE Resumo ¿ Com o objetivo de avaliar o desempenho zootécnico, a biometria entérica e o rendimento de carcaça e cortes comerciais de frangos de corte, um experimento foi realizado com 720 pintos machos, de um dia de idade da linhagem Cobb ® , com densidade populacional de 12 aves/m 2 . O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com 3 tratamentos e 8 repetições de 30 aves cada. Os tratamentos foram: T1 (controle): pintos provenientes de ovos vacinados in ovo no 18º dia de incubação contra a doença de Marek ; T2: pintos provenientes de ovos inoculados com probiótico no 18º dia de incubação utilizando como diluente a vacina de Marek; T3: pintos provenientes de ovos vacinados in ovo no 18º dia de incubação contra a doença de Marek e pulverizados ao nascimento com solução contendo probiótico. Foi avaliado o ganho de peso, consumo de ração, conversão alimentar e viabilidade aos 7, 21, 35 e 42 dias de idade; e índice de eficiência produtiva ao final do período de criação. As análises de biometria entérica foram realizadas ao nascimento, 7, 21, 35 e 42 dias de idade, sendo utilizado 15 aves por tratamento, totalizando 45 aves por abate. Aos 42 dias de idade para as análises de rendimento de carcaça foram coletadas, ao acaso, 25 aves por tratamento. Os resultados foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5%. A conversão alimentar na fase pré-inicial de criação, apresentou diferença; sendo que as aves submetidas à inoculação de probiótico in ovo apresentaram melhor conversão alimentar quando comparado com as aves que receberam probiótico pulverizado via spray, mas sem diferirem do tratamento controle. Aos 21 dias de idade observou-se diferença no comprimento do segmento de jejuno, sendo os maiores comprimentos encontrados no tratamento in ovo, porém sem diferir do tratamento pulverizado via spray. O uso de probiótico não influenciou o rendimento de carc aça e cortes comerciais. Assim, a utilização de probióticos apresentou melhor conversão alimentar para as aves submetidas à inoculação de probiótico in ovo na primeira semana pós-eclosão, e atuou na biometria entérica aos 21 dias de idade. HISTOMORFOMETRIA E ULTRAESTRUTURA DA MUCOSA INTESTINAL EM FRANGOS DE CORTE SUBMETIDOS A DIFERENTES VIAS DE APLICAÇÃO DE PROBIÓTICO E DESAFIADOS COM Salmonella Enteritidis Resumo ¿ Com o objetivo de avaliar histomorfometria, a integridade entérica de frangos de corte e a eficácia do probiótico frente ao desafio com Salmonella Enteritidis, foram alojados 720 pintos em aviário experimental e 45 pintos em infectório, machos, de um dia, da linhagem Cobb ® . O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com 3 tratamentos para ambos os estudos, constando 8 repetições de 30 aves cada para a avaliação sem desafio e de 15 aves cada para a avaliação com desafio. Foram utilizadas amostras de Salmonella Enteritidis e as aves foram desafiadas por inoculação intraesofágica, no 3 o dia de idade. Os tratamentos foram : T1 (controle): pintos provenientes de ovos vacinados in ovo no 18º dia de incubação contra a doença de Marek; T2: pintos provenientes de ovos inoculados com probiótico no 18º dia de incubação utilizando como diluente a vacina de Marek; T3: pintos provenientes de ovos vacinados in ovo no 18º dia de incubação contra a doença de Marek e pulverizados ao nascimento com solução contendo probiótico. Foram utilizadas 15 aves por experimento nas diversas fases estudadas, para as análises histomorfométricas, contagem do número de células, integridade intestinal e avaliação microbiológica. Os resultados foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5%, sendo os dados de contagem de células e análise microbiológica submetidos a teste de Kruskal-Wallis. O probiótico influenciou a contagem do número de células caliciformes, porém sem alterar a morfometri a e o número de enterócitos. A integridade da mucosa cecal das aves submetidas aos tratamentos com probiótico mostrou-se melhor preservada quando comparada a mucosa cecal das aves do tratamento controle. A avaliação microbiológica do conteúdo cecal aos 7 dias de idade, mostrou que o tratamento com probiótico pulverizado via spray apresentou menor contagem para Salmonella spp. quando comparado com os demais tratamentos. A utilização de probiótico melhorou a integridade da mucosa cecal de frangos de corte nas diferentes fases de criação e mostrou maior eficácia em estabelecer microbiota protetora no controle de Salmonella Enteritidis aos 7 dias de idade.

EFFECTS OF DIFFERENT ROUTES OF ADMINISTRATION OF PROBIOTICS ON BROILER PERFORMANCE A trial was conducted to evaluate broiler performance, intestinal biometric parameters, carcass and commercial cuts yield. Day-old male Cobb ® chicks (720; stocking density 12 birds/m 2 ) were allotted to one of three treatments (T1, T2 and T3; eight replications per treatment; 30 birds per pen) in a completely randomized design. Chicks were vaccinated in ovo against Marek¿s disease on day 18 of incubation (T1, control), inoculated in ovo with probiotics diluted in Marek¿s disease vaccine on day 18 of incubation (T2), or vaccinated in ovo against Marek¿s disease on day 18 of incubation and sprayed with probiotic solution at hatching (T3). Weight gain, feed intake, feed conversion rate (FCR) and livability were evaluated at 7, 21, 35 and 42 days of age; production efficiency factor was determined at the end of the rearing period. Intestinal biometric analysis (15 birds per treatment; 45 birds per slaughter) was performed at hatching and at 7, 21, 35 and 42 days of age; 42 day-old birds (25 birds per treatment) were randomly selected for carcass yield determination. Data were analyzed using analysis of variance and means compared using the Tukey test at a 5% significance level. In the pre-starter phase, birds submitted to T2 had significantly higher FCR than birds submitted to T3, but similar FCR to birds submitted to T1 (control). At 21 days of age, birds submitted to T2 or T3 had significantly longer jejunal segments than birds submitted to T1 (control). Probiotic inoculation in ovo improved feed conversion rates in the first week of life and affected intestinal biometric parameters at 21 days of age. Probiotic treatment had no impact on carcass or commercial cuts yield. Keywords: alternative feed additives, b roilers, competitive exclusion, gastrointestinal tract, in ovo nutrition. HISTOMORPHOMETRIC AND ULTRASTRUCTURAL ANALYSIS OF INTESTINAL MUCOSA OF BROILERS SUBMITTED TO PROBIOTIC TREATMENT BY DIFFERENT ROUTES AND CHALLENGED WITH Salmonella Enteritidis This study evaluated intestinal integrity and histomorphometric aspects of broilers treated with probiotics and compared the efficacy of probiotics in broilers challenged or not with Salmonella Enteritidis. Day-old male Cobb ® chicks were housed in experimental poultry house or quarantine facilities (n=720 and n=45 respectively); all chicks were assigned to one of three treatments, with eight replications per treatment and 30 (non-challenged) or 15 (challenged) birds per pen in a completely randomized design. Treatments consisted of vaccination in ovo against Marek¿s disease on day 18 of incubation (T1, control), inoculation in ovo with probiotics diluted in Marek¿s disease vaccine on day 18 of incubation (T2), or vaccination in ovo against Marek¿s disease on day 18 of incubation and spraying with probiotic solution at hatching (T3). Birds were challenged via intraesophageal inoculation of Salmonella Enteritidis samples at 3 days of age. Fifteen challenged and 15 non-challenged birds (5 birds per treatment group respectively) were submitted to histomorphometric analysis, cell counting, intestinal integrity determination and microbiological assessment at the different time points considered. Data were treated using analysis of variance and means compared using the Tukey test (5% significance level); cell counting and mi crobiological data were analyzed using the Kruskal-Wallis test. Probiotic treatment affected goblet cell counts, but not enterocyte counts and morphometry. Cecal mucosa integrity was better preserved in probiotic treated birds compared to birds submitted t o the control treatment. Microbiological analysis of cecal contents at 7 days of age revealed significantly lower Salmonella spp. counts in birds submitted to T3 than in birds submitted to T2 or T1 (control). Probiotic treatment enhanced cecal mucosa integrity of broilers at different stages of rearing and was more effective in fostering the establishment of microbiota protective against Salmonella Enteritidis at 7 days of age. Keywords: broilers, competitive exclusion, enterocytes, goblet cells, trophic agen.

Ultrastructural morphology and morphometry of the normal corneal endothelium of adult crossbred pig / Morfologia ultraestrutural e morfometria do endotélio corneal normal de suínos adultos mestiços

Corneal endothelium constitutes a monolayer of polygonal cells. The integrity and health of this layer are essential for the maintenance of normal corneal transparency. This study reported by the first time in a detailed way the ultrastructural morphology and morphometry of the corneal endothelium in normal adult crossbred pigs by using scanning electron microscopy (SEM). A regular pattern of polygonal cells, with predominantly hexagonal cells and clear cell borders, was observed. An oval nucleus that bulges in the centre of the cell, cilia (2-4) in a few peripheral cells, openings of the pinocytotic vesicles, microvilli, borders bars and interdigitated cell borders were observed. The mean endothelial cell area was significantly higher (P<0.05) in the centre than in periphery, with a lower variation coefficient in the former. The mean cell density in periphery was significantly higher (P<0.05) than in centre and 43.9 percent higher than data formerly reported by other authors using specular microscopy, showing the significant shrinkage caused by sample processing for SEM. The mean value of cell sides (pleomorfism) was 5.9, ie. predominant hexagonal shape. The percentage of hexagonal cells was significantly higher in central region (P<0.01), determining a more homogeneous structure. The parameters obtained in this study will be a basement for future investigations about the effect on pig corneal endothelium of drugs, intracamerular surgeries and storage solutions for transplants.(AU)

O endotélio corneal é uma monocamada de células poligonais. A integridade e saúde dessa camada são essenciais para a manutenção da transparência corneal normal. Este estudo reportou pela primeira vez, de forma detalhada, a morfologia ultra-estrutural e a morfometria do endotélio corneal de suínos adultos mestiços à microscopia eletrônica de varredura (MEV). A superfície endothelial corneal apresentou um padrão regular de células poligonais, com predomínio da forma hexagonal e de bordas celulares nítidas. O núcleo foi observado como protuberância arredondada no centro da célula. Também foram observados os cílios (2-4) em apenas algumas células da região periférica da córnea, as aberturas das vesículas pinocitóticas na proximidade dos cílios, as microvilosidades, as varas da borda e as bordas celulares em formato de zigzag. A área celular média foi significativamente maior (P<0,05) no centro da córnea do que na periferia, com um coeficiente de variação menor no centro da córnea. A densidade celular média foi significativamente maior na periferia (P<0,05) e 43,9 por cento maior que os dados reportados por outros autores na microscopia especular, o que demonstra o efeito da retração celular durante o processamento das amostras. O valor médio do número de lados das células (pleomorfismo) foi de 5,9, o que evidencia um predomínio do formato hexagonal. A percentagem de células hexagonais foi significativamente maior no centro (P<0,001). Os parâmetros obtidos nesta pesquisa servirão de base para estudos futuros sobre o efeito de medicamentos, cirurgias intracamerulares ou soluções para armazenamento de córneas para transplantes no endotélio corneal do suíno.(AU)