Occurrence of IgG antibodies against Toxoplasma gondii, Neospora caninum, and Leptospira spp. in goats and sheep from an indigenous village in Pernambuco, Brazil / Ocorrência de anticorpos IgG contra Toxoplasma gondii, Neospora caninum e Leptospira spp. em caprinos e ovinos de uma aldeia indígena em Pernambuco, Brasil

This study aimed to determine the occurrence of anti-Toxoplasma gondii, Neospora caninum, and Leptospira spp. antibodies in sheep and goats raised in villages of the Xukuru do Ororubá indigenous community, Pernambuco, Brazil. A total of 180 serum samples from sheep and 108 serum samples from goats of both sexes and different ages were analyzed. For antibody research, indirect immunofluorescence antibody test (IFAT) were used for the protozoa T. gondii and N. caninum, and microscopic agglutination test (MAT) for Leptospira spp., with a cutoff titer of 1:64, 1:50 and 1:100, respectively. The frequency of anti-T. gondii antibodies was 16.6% (30/180) for sheep and 11.1% (12/108) for goats. The frequency of anti-N. caninum antibodies was 10.55% (19/180) for sheep, and 20.37% (22/108) for goats, while for Leptospira spp., 2.2% (4/180) of sheep and 1.85% (2/108) of goats reacted positively. The results obtained in this study are unprecedented in indigenous communities in the country and serve as an alert for monitoring goats and sheep from the Xukuru do Ororubá indigenous village regarding the occurrence and productive impact of infections by T. gondii, N. caninum, and Leptospira spp., in addition to the occurrence of the zoonosis toxoplasmosis and leptospirosis in the indigenous community.(AU)

Objetivou-se determinar a ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii, Neospora caninum e Leptospira spp., em ovinos e caprinos criados em aldeias da comunidade indígena Xukuru do Ororubá, Pernambuco, Brasil. Foram analisadas 180 amostras de soro de ovinos e 108 amostras de soro de caprinos de ambos os sexos e diferentes idades. Para a pesquisa de anticorpos foi utilizada a técnica de Reação de Imunofluorescência indireta (RIFI), para os protozoários T. gondii e N. caninum e Aglutinação Microscópica (MAT) para Leptospira spp., com ponto de corte de 1:64, 1:50 e 1:100, respectivamente. A frequência de anticorpos anti-T gondii foi de 16,6% (30/180) em ovinos e 11,1% (12/108) em caprinos. A frequência de anticorpos anti-N. caninum foi de 10,55% (19/180) para ovinos e 20,37% (22/108) para caprinos, enquanto para Leptospira spp., 2,2% (4/180) dos ovinos e 1,85% (2/108) dos caprinos reagiram positivamente. Os resultados obtidos neste estudo são inéditos em comunidades indígenas do país e alertam para o monitoramento de caprinos e ovinos da aldeia indígena Xukuru do Ororubá, quanto à ocorrência e impacto produtivo de infecções por T. gondii, N. caninum e Leptospira spp., além da ocorrência de zoonoses como a toxoplasmose e leptospirose na comunidade indígena.(AU)

Reproducibility of double agar gel immunodiffusion test using stored serum and plasma from paracoccidioidomycosis patients

Background: Serological evaluation performed by double agar gel immunodiffusion test (DID) is used for diagnosis, evaluation of severity, management of paracoccidioidomycosis patients, and development of new clinical studies. For these reasons, the Botucatu Medical School of UNESP maintains a serum bank at the Experimental Research Unit with patient clinical data. This study aimed to evaluate the influence of the freeze-thaw cycle and different blood matrices on the titration of circulating antibodies. Methods: The study included 207 patients with confirmed (etiology-demonstrated) or probable (serology-demonstrated) paracoccidioidomycosis, and DID was performed with culture filtrate from Paracoccidioides brasiliensis B339 as antigen. First experiment: the antibody levels were determined in serum samples from 160 patients with the chronic form and 20 with the acute/subacute form, stored at ­80o C for more than six months. Second experiment: titers of 81 samples of serum and plasma with ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) or heparin, from 27 patients, were compared according to matrix and effect of storage at ­20o C for up to six months. Differences of titers higher than one dilution were considered discordant. Results: First experiment: test and retest presented concordant results in serum stored for up to three years, and discordant titers in low incidence in storage for four to six years but high incidence when stored for more than six years, including conversion from reagent test to non-reagent retest. Second experiment: serum, plasma-EDTA and plasma-heparin samples showed concordant titers, presenting direct correlation, with no interference of storage for up to six months. Conclusions: Storage at ­80o C for up to six years has no or little influence on the serum titers determined by DID, permitting its safe use in studies depending on this parameter. The concordant titrations in different blood matrices demonstrated that the plasma can be used for immunodiffusion test in paracoccidioidomycosis, with stability for at least six months after storage at ­20o C.(AU)

Comparison between immunofluorescence and immunohistochemistry for Listeria monocytogenes detection in formalin-fixed paraffin-embedded tissues / Comparação entre imunofluorescência e imuno-histoquímica para detecção de Listeria monocytogenes em tecidos fixados e parafinizados

Listeria monocytogenes is a bacterium that infect humans and animals and causes a zoonotic disease characterized by encephalitis, septicemia or abortion. In addition, listeriosis leads to significant economic losses due to animal death and sacrifice. This research compared the technique of immunofluorescence (IF) and immunohistochemistry (IHC) for the diagnosis of L. monocytogenes in formalin-fixed and paraffin-embedded (FFPE) tissues. A total of 30 tissue blocks from 15 animals with history and/or lesions compatible with listeriosis were selected. For both IHC and IF, the same diluted (1:200) polyclonal primary antibody was used against L. monocytogenes serotypes 1 and 4. For IHC, a polymer secondary antibody conjugated to peroxidase (HRP) was used. For IF, samples were incubated with a fluorescein-labeled anti-rabbit IgG secondary antibody. Each sample was classified according to the presence and percentage of immunolabeling area. From 30 samples, 10 were positive at least for one technique, whereas eight samples were positive for both IHC and IF with similar score. There was strong immunolabeling in tissue samples from bovines experimentally infected with L. monocytogenes ATCC 7644, as well as in nervous tissues from naturally infected ruminants. Additionally, IF did not show any difference in sensitivity when compared to IHC. Using processed biological materials for IF, instead of fresh tissues, is a quite unique technique, since there are few protocols described. Therefore, this study demonstrated that both techniques are efficient to detect L. monocytogenes in FFPE tissues.

Listeria monocytogenes é uma bactéria que infecta humanos e animais, podendo causar uma doença zoonótica caracterizada por encefalite, septicemia e abortos. Além disso, a listeriose resulta em perdas econômicas significativas pela morte e sacrifício de animais. O objetivo deste trabalho foi comparar a técnica de imunofluorescência (IF) e imuno-histoquímica (IHQ) para detecção de L. monocytogenes em tecidos fixados e parafinizados. Foram selecionados 30 blocos de tecidos de 15 animais com histórico e/ou lesões compatíveis com listeriose. Para ambas as técnicas, foi utilizado o mesmo anticorpo primário policlonal diluído (1:200) para detecção de L. monocytogenes sorotipos 1 e 4. Para a IHQ foi utilizado anticorpo secundário em polímero acoplado a peroxidase (HRP). Para a IF, as amostras foram incubadas com anticorpo secundário anti-IgG de coelho marcado com fluoresceína. Cada amostra foi classificada quanto à presença de imunomarcação e porcentagem de área positiva. Das 30 amostras, 10 foram positivas em pelo menos uma das técnicas, sendo oito amostras positivas em ambas IHQ e IF com o mesmo escore. Houve forte imunomarcação tanto em amostras de bovino experimentalmente infectado com L. monocytogenes ATCC 7644, como em amostras de tecido nervoso de ruminantes naturalmente infectados. Além disso, a IF não apresentou diferença na sensibilidade quando comparada com a IHQ. O uso de materiais biológicos processados para IF, ao invés de tecidos frescos, é algo inovador, uma vez que existem poucos protocolos descritos. Portanto, este estudo demonstrou que as duas técnicas foram eficientes para detectar L. monocytogenes em tecidos fixados em formol e parafinizados.

Evaluation of maternal antibodies against rabies in puppies and kittens in Mazandaran Province, Iran / [Avaliação de anticorpos maternos contra a raiva em filhotes de cachorro e gatos na província de Mazandaran, Irã]

Rabies is a critical zoonotic high-risk disease, which has emerged as an important public-health problem. There are limited investigations that explore maternally derived antibody (MDA) in puppies and kittens from around the world. Furthermore, there is no such research in any province of Iran. This study measured the serum level of MDA in 10 puppies and their vaccinated bitches (n=20), 10 puppies and their unvaccinated bitches (n=20), 10 kittens with vaccinated queens and 10 kittens with unvaccinated queens. Antibodies against rabies were measured using quantitative, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Our results showed that 90% (9 out of 10) of puppies from vaccinated bitches were positive for anti-rabies antibodies, while test results for all puppies from non-vaccinated bitches were negative (P=0.001). Moreover, puppies' titers were significantly higher in the vaccinated group than the non-vaccinated group (P=0.003). There was a similar condition between vaccinated and non-vaccinated bitches (P=0.008). Although kittens' titers were significantly higher in the vaccinated group than the non-vaccinated group (P=0.03), only 20 percent of the kittens with vaccinated queens showed positive results, while all kittens from non-vaccinated queens were negative for anti-rabies antibodies (P=0.137).

A raiva é uma doença zoonótica crítica de alto risco, que surgiu como um importante problema de saúde pública. Há investigações limitadas que exploram anticorpos derivados da maternidade (MDA) em filhotes e gatos de todo o mundo. Além disso, não existe tal pesquisa em nenhuma província do Irã. Este estudo mediu o nível sérico do MDA em 10 filhotes e suas cadelas vacinadas (n=20), 10 filhotes e suas cadelas não vacinadas (n=20), 10 filhotes com rainhas vacinadas e 10 filhotes com rainhas não vacinadas. Os anticorpos contra a raiva foram medidos usando o ensaio quantitativo de imunoabsorção enzimática (ELISA). Nossos resultados mostraram que 90% (9 em cada 10) dos filhotes de cadelas vacinadas foram positivos para anticorpos anti-rábicos, enquanto os resultados dos testes para todos os filhotes de cadelas não vacinadas foram negativos (P=0,001). Além disso, os títulos dos filhotes foram significativamente mais altos no grupo vacinado do que no grupo não vacinado (P=0,003). Havia uma condição similar entre cadelas vacinadas e não vacinadas (P=0,008). Embora os títulos dos filhotes fossem significativamente mais altos no grupo vacinado do que no grupo não vacinado (P=0,03), apenas 20% dos filhotes com rainhas vacinadas apresentaram resultados positivos, enquanto todos os filhotes de rainhas não vacinadas foram negativos para anticorpos anti-rábicos (P=0,137).

Effects of Dietary Supplementations of Synbiotics on Growth Performance, Carcass Characteristics and Nutrient Digestibility of Broiler Chicken

ABSTRACT The study aimed to explore the effect of dietary supplementation of synbiotics on growth performance, carcass characteristics and nutrient digestibility in broiler chicken. For this purpose, three hundred 1-day-old Cobb-500 broiler chicks were purchased from the hatchery and randomly distributed into five dietary treatment groups. Each treatment had six replicates, each containing 10 chicks. The experimental diets were supplemented with 0, 700, 1200, 1700 or 2200 g/ton of feed synbiotics and respectively designated as A, B, C, D and E, with A being the control diet. Feed intake, weight gain and feed conversion ratio data were recorded on a weekly basis. At the research trials end, two birds from each pen were randomly selected and slaughtered to get data on carcass characteristics. Results showed that group Cs feed intake was reduced (p 0.05) when compared to control. Body weight was similar (p>0.05) among all treatments. However, feed conversion ratio was significantly improved (p 0.05) in group C as compared to other dietary treatments. Nutrient digestibility was improved (p 0.05) in group B and C, as compared to control. Carcass characteristics were not significantly affected and remained the same across all treatments. However, liver weight decreased in birds fed diet C. Meat quality and antibody titer were not affected in any of the dietary treatments. It is concluded that synbiotics can be safely used up to 1200 g/ton of feed, improving bird performance without harmful effects on bird health.

Immunological and biossensory techniques for detection of Salmonella spp. in food derived from fish farming- review / Técnicas imunológicas e biossensoriais para detecção de Salmonella spp. em alimentos derivados da piscicultura ­ revisão de literatura / Técnicas inmunológicas y biosensoriales para detección de Salmonella spp. en alimentos derivados de piscicultura - revisión de literatura

Salmonellosis is the world's most common foodborne illness. In Brazil, foods contaminated by salmonella lead the statistics. Therefore, the aim of this study is, through biotechnological knowledge, to compile alternative and innovative techniques for the detection of salmonella in foods, such as fish-farming derivatives, immunological and biosensorial techniques. This is a descriptive exploratory data survey of a qualitative nature, aiming at data analysis. Research and data collection were carried out in bibliographic databases: Academic Google, Scielo, CAPES journals and institutional repositories using specific descriptors - in Portuguese and English, with words and terms separated by the Boolean operators 'AND' and 'OR'. Some innovative and alternative methods are available to identify the presence of salmonella in food. Immunological and biosensory techniques, despite being less frequent in the scientific literature than molecular methods, are techniques that present high specificity and sensitivity. These techniques have been the most developed alternative methods in fish in recent years. And, they can employ both molecular and immunological techniques in biorecognition, which is characterized as an advantage of not having a requirement for pre-enrichment of the sample. According to the literature found, the techniques covered in this study are quick to respond, which speeds up decision-making by researchers and technicians, which makes the techniques very promising for industrial application.(AU)

A salmonelose é uma enfermidade de maior ocorrência no mundo veiculada por alimentos. No Brasil, alimentos contaminados por salmonelas lideram as estatísticas. Por isso, o objetivo desse estudo é através dos conhecimentos biotecnológicos compilar técnicas alternativas e inovadoras para a detecção de salmonelas em alimentos, como os derivados da piscicultura, as técnicas imunológicas e biossensoriais. Trata-se de um estudo de levantamento de dados descritivo exploratório de de caráter qualitativo, visando à análise dos dados. As pesquisas e coletas de dados foram realizadas nas bases bibliográficas: Google Acadêmico, Scielo, periódicos da CAPES e repositórios institucionais utilizando os descritores específicos - nos idiomas português e inglês, com palavras e termos separados pelos operadores booleanos 'AND' e 'OR'. São disponibilizados alguns métodos inovadores e alternativos para identificação da presença de salmonelas em alimentos. As técnicas imunológicas e biossensoriais, apesar de serem menos frequentes na literatura científica do que os métodos moleculares são técnicas que apresentaram elevada especificidade e sensibilidade. Essas técnicas têm sido os métodos alternativos mais desenvolvidos em peixes nos últimos anos. E, podem empregar tanto técnicas moleculares como imunológicas no biorreconhecimento, o que se caracteriza como vantagem de não haver requerimento de pré-enriquecimento da amostra. Conforme a literatura encontrada, as técnicas abordadas por esse estudo apresentam rapidez de resposta o que agiliza as tomadas de decisões dos pesquisadores e técnicos, o que torna as técnicas bastante promissora para aplicação industrial.(AU)

La salmonelosis es la enfermedad transmitida por alimentos más común del mundo. En Brasil, los alimentos contaminados por salmonelas lideran las estadísticas. Por tanto, el objetivo de ese estudio fue a través de conocimientos biotecnológicos recopilar técnicas alternativas e innovadoras para la detección de salmonelas en los alimentos, como los derivados de la piscicultura, las técnicas inmunológicas y biosensoriales. Se trata de una encuesta de datos exploratorio descriptivo de carácter cualitativo, cuyo objetivo es el análisis de datos. Las investigaciones y recopilaciones de datos se realizaron en bases de datos bibliográficas: Google Académico, Scielo, revistas CAPES y repositorios institucionales utilizando descriptores específicos, en portugués e inglés, con palabras y términos separados por los operadores booleanos 'AND' y 'OR'. Se encuentran disponibles algunos métodos innovadores y alternativos para identificar la presencia de salmonela en los alimentos. Las técnicas inmunológicas y biosensoriales, a pesar de ser menos frecuentes en la literatura científica que los métodos moleculares, son técnicas de alta especificidad y sensibilidad. Esas técnicas han sido los métodos alternativos más desarrollados en peces en los últimos años. Y pueden emplear técnicas tanto moleculares como inmunológicas en el biorreconocimiento, que se caracteriza por la ventaja de no tener un requisito de preenriquecimiento de la muestra. Según la literatura encontrada, las técnicas abordadas en este estudio son de rápida respuesta, lo que agiliza la toma de decisiones por parte de investigadores y técnicos, lo que hace que las técnicas sean muy prometedoras para la aplicación industrial.(AU)

Immunological and biossensory techniques for detection of Salmonella spp. in food derived from fish farming- review / Técnicas imunológicas e biossensoriais para detecção de Salmonella spp. em alimentos derivados da piscicultura ­ revisão de literatura / Técnicas inmunológicas y biosensoriales para detección de Salmonella spp. en alimentos derivados de piscicultura - revisión de literatura

Salmonellosis is the world's most common foodborne illness. In Brazil, foods contaminated by salmonella lead the statistics. Therefore, the aim of this study is, through biotechnological knowledge, to compile alternative and innovative techniques for the detection of salmonella in foods, such as fish-farming derivatives, immunological and biosensorial techniques. This is a descriptive exploratory data survey of a qualitative nature, aiming at data analysis. Research and data collection were carried out in bibliographic databases: Academic Google, Scielo, CAPES journals and institutional repositories using specific descriptors - in Portuguese and English, with words and terms separated by the Boolean operators 'AND' and 'OR'. Some innovative and alternative methods are available to identify the presence of salmonella in food. Immunological and biosensory techniques, despite being less frequent in the scientific literature than molecular methods, are techniques that present high specificity and sensitivity. These techniques have been the most developed alternative methods in fish in recent years. And, they can employ both molecular and immunological techniques in biorecognition, which is characterized as an advantage of not having a requirement for pre-enrichment of the sample. According to the literature found, the techniques covered in this study are quick to respond, which speeds up decision-making by researchers and technicians, which makes the techniques very promising for industrial application.(AU)

A salmonelose é uma enfermidade de maior ocorrência no mundo veiculada por alimentos. No Brasil, alimentos contaminados por salmonelas lideram as estatísticas. Por isso, o objetivo desse estudo é através dos conhecimentos biotecnológicos compilar técnicas alternativas e inovadoras para a detecção de salmonelas em alimentos, como os derivados da piscicultura, as técnicas imunológicas e biossensoriais. Trata-se de um estudo de levantamento de dados descritivo exploratório de de caráter qualitativo, visando à análise dos dados. As pesquisas e coletas de dados foram realizadas nas bases bibliográficas: Google Acadêmico, Scielo, periódicos da CAPES e repositórios institucionais utilizando os descritores específicos - nos idiomas português e inglês, com palavras e termos separados pelos operadores booleanos 'AND' e 'OR'. São disponibilizados alguns métodos inovadores e alternativos para identificação da presença de salmonelas em alimentos. As técnicas imunológicas e biossensoriais, apesar de serem menos frequentes na literatura científica do que os métodos moleculares são técnicas que apresentaram elevada especificidade e sensibilidade. Essas técnicas têm sido os métodos alternativos mais desenvolvidos em peixes nos últimos anos. E, podem empregar tanto técnicas moleculares como imunológicas no biorreconhecimento, o que se caracteriza como vantagem de não haver requerimento de pré-enriquecimento da amostra. Conforme a literatura encontrada, as técnicas abordadas por esse estudo apresentam rapidez de resposta o que agiliza as tomadas de decisões dos pesquisadores e técnicos, o que torna as técnicas bastante promissora para aplicação industrial.(AU)

La salmonelosis es la enfermedad transmitida por alimentos más común del mundo. En Brasil, los alimentos contaminados por salmonelas lideran las estadísticas. Por tanto, el objetivo de ese estudio fue a través de conocimientos biotecnológicos recopilar técnicas alternativas e innovadoras para la detección de salmonelas en los alimentos, como los derivados de la piscicultura, las técnicas inmunológicas y biosensoriales. Se trata de una encuesta de datos exploratorio descriptivo de carácter cualitativo, cuyo objetivo es el análisis de datos. Las investigaciones y recopilaciones de datos se realizaron en bases de datos bibliográficas: Google Académico, Scielo, revistas CAPES y repositorios institucionales utilizando descriptores específicos, en portugués e inglés, con palabras y términos separados por los operadores booleanos 'AND' y 'OR'. Se encuentran disponibles algunos métodos innovadores y alternativos para identificar la presencia de salmonela en los alimentos. Las técnicas inmunológicas y biosensoriales, a pesar de ser menos frecuentes en la literatura científica que los métodos moleculares, son técnicas de alta especificidad y sensibilidad. Esas técnicas han sido los métodos alternativos más desarrollados en peces en los últimos años. Y pueden emplear técnicas tanto moleculares como inmunológicas en el biorreconocimiento, que se caracteriza por la ventaja de no tener un requisito de preenriquecimiento de la muestra. Según la literatura encontrada, las técnicas abordadas en este estudio son de rápida respuesta, lo que agiliza la toma de decisiones por parte de investigadores y técnicos, lo que hace que las técnicas sean muy prometedoras para la aplicación industrial.(AU)

Influence of euthanasia, the intensity of inflammatory lesion and viral load in the laboratory diagnosis of rabies in cattle / Influência da eutanásia, intensidade da lesão inflamatória e carga viral no diagnóstico laboratorial da raiva em bovinos

This research reports the use of different diagnostic tests in cattle, naturally infected by Rabies lyssavirus (RABV), and correlates the positivity of the tests with the clinical moment of euthanasia, the intensity of the inflammatory lesion and viral load. It also highlights the possibility of euthanasia in early stages of the disease as a way to improve animal welfare. For that, samples of 34 bovine brains were collected for analysis, preserved in 10% buffered formaline and refrigerated with subsequent freezing. The samples were subjected to direct immunofluorescence antibody technique (DFAT) tests, viral isolation in cell culture (VICC), histopathology with hematoxylin and eosin staining (HE), immunohistochemistry (IHC), Shorr stainied neural tissue smears (DSS), Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and polymerase chain reaction by quantitative reverse transcriptase (qRT-PCR). The areas used for analysis were the cerebellum, parietal telencephalon and thalamus. Samples with Negri bodies (NBs) or immunostaining in at least one of the analyzed areas were considered positive. For the study of the intensity of histological lesions, the lesions were classified into grades 0, 1, 2 and 3 and the positivity of the test in the presence or absence of NBs in one of the three areas analyzed. To verify the influence of the disease clinical evolution, 4-four groups of analysis were created according to the animal's clinical status at moment of the euthanasia, being: M1 = animal euthanized while standing, M2 = euthanized when in sternal recumbence, M3 = euthanized when in lateral recumbence, M4 = animal with natural death. Of the 34 brains evaluated, IHC was positive in 100% of cases, DFAT was positive in 97.05% of them, and in this negative sample the presence of RABV was confirmed by VICC. NBs ere seen in 88.23% of the cases, and the DSS test was positive in 82.35% of them.(AU)

Esta pesquisa relata a utilização de diferentes testes de diagnóstico em bovinos, naturalmente infectados pelo Rabies lyssavirus (RABV), e correlaciona a positividade dos testes com o momento clínico da eutanásia, a intensidade da lesão inflamatória, e a carga viral. Salienta também a possibilidade da eutanásia em estágios precoces da doença como forma de melhorar o bem-estar animal. Para isso amostras de 34 encéfalos bovinos foram coletados para análise, conservadas em formol tamponado 10% e sob refrigeração com posterior congelamento. As amostras foram submetidas aos testes de imunofluorescência direta (IFD), isolamento viral em cultivo de células (IVCC), histopatologia com coloração de hematoxilina e eosina (HE), imuno-histoquímica (IHQ), esfregaço direto com coloração de Shorr (EDS), reação da polimerase em cadeia por transcriptase reversa (RT-PCR) e reação da polimerase em cadeia por transcriptase reversa quantitativo (qRT-PCR). As áreas utilizadas para análise foram o cerebelo, telencéfalo parietal e tálamo. Foram consideradas positivas as amostras que apresentaram Corpúsculo de Negri (CNs) ou imuno-marcação em ao menos uma das áreas analisadas. Para o estudo da intensidade das lesões histológicas, as lesões foram classificadas em graus 0, 1, 2 e 3 e a positividade do teste na presença ou ausência de CN em uma das três áreas analisadas.(AU)

Influence of euthanasia, the intensity of inflammatory lesion and viral load in the laboratory diagnosis of rabies in cattle / Influência da eutanásia, intensidade da lesão inflamatória e carga viral no diagnóstico laboratorial da raiva em bovinos

This research reports the use of different diagnostic tests in cattle, naturally infected by Rabies lyssavirus (RABV), and correlates the positivity of the tests with the clinical moment of euthanasia, the intensity of the inflammatory lesion and viral load. It also highlights the possibility of euthanasia in early stages of the disease as a way to improve animal welfare. For that, samples of 34 bovine brains were collected for analysis, preserved in 10% buffered formaline and refrigerated with subsequent freezing. The samples were subjected to direct immunofluorescence antibody technique (DFAT) tests, viral isolation in cell culture (VICC), histopathology with hematoxylin and eosin staining (HE), immunohistochemistry (IHC), Shorr stainied neural tissue smears (DSS), Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and polymerase chain reaction by quantitative reverse transcriptase (qRT-PCR). The areas used for analysis were the cerebellum, parietal telencephalon and thalamus. Samples with Negri bodies (NBs) or immunostaining in at least one of the analyzed areas were considered positive. For the study of the intensity of histological lesions, the lesions were classified into grades 0, 1, 2 and 3 and the positivity of the test in the presence or absence of NBs in one of the three areas analyzed. To verify the influence of the disease clinical evolution, 4-four groups of analysis were created according to the animal's clinical status at moment of the euthanasia, being: M1 = animal euthanized while standing, M2 = euthanized when in sternal recumbence, M3 = euthanized when in lateral recumbence, M4 = animal with natural death. Of the 34 brains evaluated, IHC was positive in 100% of cases, DFAT was positive in 97.05% of them, and in this negative sample the presence of RABV was confirmed by VICC. NBs ere seen in 88.23% of the cases, and the DSS test was positive in 82.35% of them. All diagnostic techniques showed positive cases in all groups analyzed. Each case was positive in at least two diagnostic methods. All cases that contained NBs were positive for rabies in the other tests. In this study, it was observed that the variables analyzed (intensity of injury and clinical evolution at the moment of euthanasia) had an influence only on HE and DSS techniques, which are based on NB research to form the diagnosis, but did not interfere with the effectiveness of the diagnosis performed by detecting the viral antigen performed by DFAT and IHC. All isolated RABV samples included in the present study have a genetic lineage characteristic of hematophagous bats Desmodus rotundus. The evaluation of qRT-PCR showed that the amount of virus did not interfere in the positivity of the tests. This work shows that IHC and DFAT are safe diagnostic techniques. They are capable of detecting RABV even in euthanized animals in the early stages of clinical evolution with mild intensities of histological lesions.(AU)

Esta pesquisa relata a utilização de diferentes testes de diagnóstico em bovinos, naturalmente infectados pelo Rabies lyssavirus (RABV), e correlaciona a positividade dos testes com o momento clínico da eutanásia, a intensidade da lesão inflamatória, e a carga viral. Salienta também a possibilidade da eutanásia em estágios precoces da doença como forma de melhorar o bem-estar animal. Para isso amostras de 34 encéfalos bovinos foram coletados para análise, conservadas em formol tamponado 10% e sob refrigeração com posterior congelamento. As amostras foram submetidas aos testes de imunofluorescência direta (IFD), isolamento viral em cultivo de células (IVCC), histopatologia com coloração de hematoxilina e eosina (HE), imuno-histoquímica (IHQ), esfregaço direto com coloração de Shorr (EDS), reação da polimerase em cadeia por transcriptase reversa (RT-PCR) e reação da polimerase em cadeia por transcriptase reversa quantitativo (qRT-PCR). As áreas utilizadas para análise foram o cerebelo, telencéfalo parietal e tálamo. Foram consideradas positivas as amostras que apresentaram Corpúsculo de Negri (CNs) ou imuno-marcação em ao menos uma das áreas analisadas. Para o estudo da intensidade das lesões histológicas, as lesões foram classificadas em graus 0, 1, 2 e 3 e a positividade do teste na presença ou ausência de CN em uma das três áreas analisadas. Para verificar a influência da evolução clínica da doença foram criados 4 grupos de análise conforme o estado clínico do animal no momento da eutanásia, sendo: M1 = animal eutanasiado em estação, M2 = eutanasiado em decúbito esternal, M3 = eutanasiado em decúbito lateral, M4 = animal com morte natural. Dos 34 encéfalos avaliados a IHQ foi positiva em 100% dos casos, a IFD foi positiva em 97,05%, sendo que na amostra negativa a presença de RABV foi confirmada por IVCC. A histologia com HE, através da visualização das CNs, foi positiva em 88,23 % dos casos, e o teste de EDS, foi positivo em 82,35%. Todas as técnicas de diagnóstico apresentaram casos positivos em todos os grupos analisados. Cada caso foi positivo em, pelo menos, dois métodos de diagnóstico. Todos os casos que continham CN foram positivos para raiva nos demais testes. Nesse estudo observou-se que as variáveis analisadas intensidade de lesão e evolução clínica no momento da eutanásia tiveram influência somente nas técnicas de HE e EDS, que se baseiam na pesquisa do CN para formação do diagnóstico, mas não interferiram na eficácia do diagnóstico realizado através da detecção do antígeno viral realizado por IFD e IHQ. Todas as amostras RABV isoladas incluídas no presente estudo apresentam linhagem genética característica de morcegos hematófagos Desmodus rotundus. A avaliação de qRT-PCR demostrou que a quantidade de vírus não interferiu na positividade dos testes. Esse trabalho mostra que a IHQ e a IFD são técnicas seguras de diagnóstico e que mesmo em animais eutanasiados em estágios iniciais de evolução clínica com intensidades leve de lesões histológicas, são capazes de detectar o RABV.(AU)

Influence of euthanasia, the intensity of inflammatory lesion and viral load in the laboratory diagnosis of rabies in cattle

ABSTRACT: This research reports the use of different diagnostic tests in cattle, naturally infected by Rabies lyssavirus (RABV), and correlates the positivity of the tests with the clinical moment of euthanasia, the intensity of the inflammatory lesion and viral load. It also highlights the possibility of euthanasia in early stages of the disease as a way to improve animal welfare. For that, samples of 34 bovine brains were collected for analysis, preserved in 10% buffered formaline and refrigerated with subsequent freezing. The samples were subjected to direct immunofluorescence antibody technique (DFAT) tests, viral isolation in cell culture (VICC), histopathology with hematoxylin and eosin staining (HE), immunohistochemistry (IHC), Shorr stainied neural tissue smears (DSS), Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and polymerase chain reaction by quantitative reverse transcriptase (qRT-PCR). The areas used for analysis were the cerebellum, parietal telencephalon and thalamus. Samples with Negri bodies (NBs) or immunostaining in at least one of the analyzed areas were considered positive. For the study of the intensity of histological lesions, the lesions were classified into grades 0, 1, 2 and 3 and the positivity of the test in the presence or absence of NBs in one of the three areas analyzed. To verify the influence of the disease clinical evolution, 4-four groups of analysis were created according to the animals clinical status at moment of the euthanasia, being: M1 = animal euthanized while standing, M2 = euthanized when in sternal recumbence, M3 = euthanized when in lateral recumbence, M4 = animal with natural death. Of the 34 brains evaluated, IHC was positive in 100% of cases, DFAT was positive in 97.05% of them, and in this negative sample the presence of RABV was confirmed by VICC. NBs ere seen in 88.23% of the cases, and the DSS test was positive in 82.35% of them. All diagnostic techniques showed positive cases in all groups analyzed. Each case was positive in at least two diagnostic methods. All cases that contained NBs were positive for rabies in the other tests. In this study, it was observed that the variables analyzed (intensity of injury and clinical evolution at the moment of euthanasia) had an influence only on HE and DSS techniques, which are based on NB research to form the diagnosis, but did not interfere with the effectiveness of the diagnosis performed by detecting the viral antigen performed by DFAT and IHC. All isolated RABV samples included in the present study have a genetic lineage characteristic of hematophagous bats Desmodus rotundus. The evaluation of qRT-PCR showed that the amount of virus did not interfere in the positivity of the tests. This work shows that IHC and DFAT are safe diagnostic techniques. They are capable of detecting RABV even in euthanized animals in the early stages of clinical evolution with mild intensities of histological lesions.

RESUMO: Esta pesquisa relata a utilização de diferentes testes de diagnóstico em bovinos, naturalmente infectados pelo Rabies lyssavirus (RABV), e correlaciona a positividade dos testes com o momento clínico da eutanásia, a intensidade da lesão inflamatória, e a carga viral. Salienta também a possibilidade da eutanásia em estágios precoces da doença como forma de melhorar o bem-estar animal. Para isso amostras de 34 encéfalos bovinos foram coletados para análise, conservadas em formol tamponado 10% e sob refrigeração com posterior congelamento. As amostras foram submetidas aos testes de imunofluorescência direta (IFD), isolamento viral em cultivo de células (IVCC), histopatologia com coloração de hematoxilina e eosina (HE), imuno-histoquímica (IHQ), esfregaço direto com coloração de Shorr (EDS), reação da polimerase em cadeia por transcriptase reversa (RT-PCR) e reação da polimerase em cadeia por transcriptase reversa quantitativo (qRT-PCR). As áreas utilizadas para análise foram o cerebelo, telencéfalo parietal e tálamo. Foram consideradas positivas as amostras que apresentaram Corpúsculo de Negri (CNs) ou imuno-marcação em ao menos uma das áreas analisadas. Para o estudo da intensidade das lesões histológicas, as lesões foram classificadas em graus 0, 1, 2 e 3 e a positividade do teste na presença ou ausência de CN em uma das três áreas analisadas. Para verificar a influência da evolução clínica da doença foram criados 4 grupos de análise conforme o estado clínico do animal no momento da eutanásia, sendo: M1 = animal eutanasiado em estação, M2 = eutanasiado em decúbito esternal, M3 = eutanasiado em decúbito lateral, M4 = animal com morte natural. Dos 34 encéfalos avaliados a IHQ foi positiva em 100% dos casos, a IFD foi positiva em 97,05%, sendo que na amostra negativa a presença de RABV foi confirmada por IVCC. A histologia com HE, através da visualização das CNs, foi positiva em 88,23 % dos casos, e o teste de EDS, foi positivo em 82,35%. Todas as técnicas de diagnóstico apresentaram casos positivos em todos os grupos analisados. Cada caso foi positivo em, pelo menos, dois métodos de diagnóstico. Todos os casos que continham CN foram positivos para raiva nos demais testes. Nesse estudo observou-se que as variáveis analisadas intensidade de lesão e evolução clínica no momento da eutanásia tiveram influência somente nas técnicas de HE e EDS, que se baseiam na pesquisa do CN para formação do diagnóstico, mas não interferiram na eficácia do diagnóstico realizado através da detecção do antígeno viral realizado por IFD e IHQ. Todas as amostras RABV isoladas incluídas no presente estudo apresentam linhagem genética característica de morcegos hematófagos Desmodus rotundus. A avaliação de qRT-PCR demostrou que a quantidade de vírus não interferiu na positividade dos testes. Esse trabalho mostra que a IHQ e a IFD são técnicas seguras de diagnóstico e que mesmo em animais eutanasiados em estágios iniciais de evolução clínica com intensidades leve de lesões histológicas, são capazes de detectar o RABV.

Sarcocystis neurona, seroprevalence of antibodies in equines and research of oocystis in opossum in Ilhéus - Itabuna microregion, Bahia, Brazil / Sarcocystis neurona, seroprevalência de anticorpos em equinos e pesquisa de oocistos em gambás na microrregião de Ilhéus - Itabuna, Bahia, Brasil

Abstract The aims of this study were to determine the seroprevalence of Sarcocystis neurona antibodies in equines in the Ilhéus-Itabuna microregion (BA), and identify possible factors associated with infection. The presence of sporocysts/oocysts of Sarcocystis spp. was also verified in Didelphis spp. A total of 669 serum samples were collected from equines in 56 properties located in 12 municipalities in the region. Indirect fluorescent antibody test was performed with slides containing merozoites of the S. neurona, using a cut-off titer of 1:80. Occurrence of 7.92% of anti-S. neurona antibodies was observed in the sampled equines. The purposes trade and work were significantly associated with the presence of antibodies (p<0.05), and being used for the purpose of work (21.6%) was considered a risk factor, while being used for the purpose of trade (3.6%) was a protective factor. A total of 25 Didelphis spp. was captured for research on sporocysts/oocysts in stool samples and intestinal scrapings, being all negative. Didelphis spp. were all negative for the presence of Sarcocystis spp. and this circumstance does not change the fact that seroprevalence of S. neurona has been observed in horses raised in the southern Bahia.

Resumo O presente estudo foi realizado na microrregião de Ilhéus-Itabuna, Bahia. Os objetivos deste estudo foram determinar a soroprevalência de anticorpos contra Sarcocystis neurona em equinos da microrregião Ilhéus-Itabuna (BA) e identificar possíveis fatores associados à infecção. A presença de esporocistos/oocistos de Sarcocystis spp. também foi pesquisada em Didelphis spp. Foram coletadas 669 amostras de soro de equinos em 56 propriedades localizadas em 12 municípios da região. Foi utilizada a reação de imunofluorescência indireta (RIFI), utilizando-se lâminas confeccionadas com merozoítos de Sarcocystis neurona (cepa SN138) e ponto de corte na diluição de 1:80. A ocorrência de anticorpos anti- S. neurona, nos equinos amostrados, foi de 7,92%. As finalidades dos animais - comércio e trabalho - apresentaram-se significativas (p<0.05), sendo que a finalidade trabalho (21,6%) foi considerada fator de risco, enquanto a finalidade comércio (3,6%) foi considerada fator de proteção. Foram capturados 25 Didelphis spp., para pesquisa de esporocistos/oocistos em amostras de fezes e raspado de mucosa intestinal. Todos os Didelphis spp. foram negativos para a presença de Sarcocystis spp., mesmo assim essa circunstância não alterou o fato da ocorrência de S. neurona ter sido observada em cavalos criados na mesorregião do sul da Bahia.

São Paulo School of Advanced Sciences on Vaccines: an overview

Two years ago, we held an exciting event entitled the São Paulo School of Advanced Sciences on Vaccines (SPSASV). Sixty-eight Ph.D. students, postdoctoral fellows and independent researchers from 37 different countries met at the Mendes Plaza Hotel located in the city of Santos, SP - Brazil to discuss the challenges and the new frontiers of vaccinology. The SPSASV provided a critical and comprehensive view of vaccine research from basics to the current state-of-the-art techniques performed worldwide. For 10 days, we discussed all the aspects of vaccine development in 36 lectures, 53 oral presentations and 2 poster sessions. At the end of the course, participants were further encouraged to present a model of a grant proposal related to vaccine development against individual pathogens. Among the targeted pathogens were viruses (Chikungunya, HIV, RSV, and Influenza), bacteria (Mycobacterium tuberculosis and Streptococcus pyogenes), parasites (Plasmodium falciparum or Plasmodium vivax), and the worm Strongyloides stercoralis. This report highlights some of the knowledge shared at the SPSASV.(AU)

Seroprevalence of ovine brucellosis in the microregion of Teresina, Piauí, Brazil / Soroprevalência da brucelose ovina na microrregião de Teresina, Piauí

Among the diseases that affect the reproductive system of domestic animals, brucellosis in the sheep species is important because it generates significant economic losses to sheep rearing. Thus, it is a threat to the growth and productivity of sheep herds. In the face of this problem, the objective of the present research was to identify the prevalence of ovine brucellosis in herds in municipalities of the Teresina, Piauí, Brazil microregion by using the agar gel immunodiffusion assay (AGID) and indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) serological tests. Fourteen municipalities were included in the research. Blood samples were collected from 521 pubescent animals by puncturing the jugular vein. After collection, the samples were submitted to the serological techniques, AGID and indirect ELISA, to detect anti B. ovis antibody. Of the 521 samples submitted to the AGIDtest, 23 (4.41%) were sera reagent and 498 (95.58%) negative. The indirect ELISA tests, 24 (4.61%) suspect samples and 497 (95.39%) negative samples were obtained, and there were no reagent animals in this test, only suspect. The seroprevalence of ovine brucellosis in the Teresina, Piauí microregion was 4.41%. Thus, it is possible to identify sheep with reagent serology to infection by B. ovis, that is present in municipalities in the state of Piauí, Brazil. Furthermore, AGIDwas shown to be more sensitive in detecting animals that had had contact with the etiological agent of the disease.(AU)

Dentre as enfermidades que acometem o sistema reprodutivo dos animais domésticos, a brucelose na espécie ovina tem se destacado por gerar prejuízos econômicos significativos à ovinocultura. Dessa forma, apresenta-se como uma ameaça ao crescimento e à produtividade dos rebanhos ovinos. Diante de tal problemática, objetivou-se, por meio desta pesquisa, identificar a prevalência de brucelose ovina em rebanhos pertencentes a municípios da microrregião de Teresina, Piauí, por meio dos testes sorológicos, imunodifusão em gel de ágar (IDGA) e ensaio imunoenzimático (ELISA) indireto. Quatorze municípios foram incluídos na pesquisa. Para sua execução, colheram-se, por punção venosa da jugular, amostras sanguíneas de 521 animais púberes. Após colheita, as amostras foram submetidas às técnicas sorológicas, IDGA e ELISA indireto, para a detecção de anticorpos anti-B. ovis. Das 521 amostras submetidas ao teste de IDGA, 23 (4,41%) foram sororreagentes e 498 (95,58%) negativas. Quanto ao teste ELISA indireto, obtiveram-se 24 (4,61%) amostras suspeitas e 497 (95,39%) amostras negativas, não havendo animais reagentes neste teste, apenas suspeitos. A soroprevalência da brucelose ovina na microrregião homogênea de Teresina, Piauí, foi de 4,41%. Assim, foi possível identificar ovinos com sorologia reagente à infecção por B. ovis, presente em municípios do estado do Piauí. Além disso, a IDGA mostrou-se mais sensível em detectar animais que tiveram contato com o agente etiológico da doença.(AU)

Seroprevalence of ovine brucellosis in the microregion of Teresina, Piauí, Brazil / Soroprevalência da brucelose ovina na microrregião de Teresina, Piauí

Among the diseases that affect the reproductive system of domestic animals, brucellosis in the sheep species is important because it generates significant economic losses to sheep rearing. Thus, it is a threat to the growth and productivity of sheep herds. In the face of this problem, the objective of the present research was to identify the prevalence of ovine brucellosis in herds in municipalities of the Teresina, Piauí, Brazil microregion by using the agar gel immunodiffusion assay (AGID) and indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) serological tests. Fourteen municipalities were included in the research. Blood samples were collected from 521 pubescent animals by puncturing the jugular vein. After collection, the samples were submitted to the serological techniques, AGID and indirect ELISA, to detect anti B. ovis antibody. Of the 521 samples submitted to the AGIDtest, 23 (4.41%) were sera reagent and 498 (95.58%) negative. The indirect ELISA tests, 24 (4.61%) suspect samples and 497 (95.39%) negative samples were obtained, and there were no reagent animals in this test, only suspect. The seroprevalence of ovine brucellosis in the Teresina, Piauí microregion was 4.41%. Thus, it is possible to identify sheep with reagent serology to infection by B. ovis, that is present in municipalities in the state of Piauí, Brazil. Furthermore, AGIDwas shown to be more sensitive in detecting animals that had had contact with the etiological agent of the disease.(AU)

Dentre as enfermidades que acometem o sistema reprodutivo dos animais domésticos, a brucelose na espécie ovina tem se destacado por gerar prejuízos econômicos significativos à ovinocultura. Dessa forma, apresenta-se como uma ameaça ao crescimento e à produtividade dos rebanhos ovinos. Diante de tal problemática, objetivou-se, por meio desta pesquisa, identificar a prevalência de brucelose ovina em rebanhos pertencentes a municípios da microrregião de Teresina, Piauí, por meio dos testes sorológicos, imunodifusão em gel de ágar (IDGA) e ensaio imunoenzimático (ELISA) indireto. Quatorze municípios foram incluídos na pesquisa. Para sua execução, colheram-se, por punção venosa da jugular, amostras sanguíneas de 521 animais púberes. Após colheita, as amostras foram submetidas às técnicas sorológicas, IDGA e ELISA indireto, para a detecção de anticorpos anti-B. ovis. Das 521 amostras submetidas ao teste de IDGA, 23 (4,41%) foram sororreagentes e 498 (95,58%) negativas. Quanto ao teste ELISA indireto, obtiveram-se 24 (4,61%) amostras suspeitas e 497 (95,39%) amostras negativas, não havendo animais reagentes neste teste, apenas suspeitos. A soroprevalência da brucelose ovina na microrregião homogênea de Teresina, Piauí, foi de 4,41%. Assim, foi possível identificar ovinos com sorologia reagente à infecção por B. ovis, presente em municípios do estado do Piauí. Além disso, a IDGA mostrou-se mais sensível em detectar animais que tiveram contato com o agente etiológico da doença.(AU)

Efeito dos anticorpos maternos sobre a resposta imune induzida pela vacinação em bezerros Holandeses / Effect of maternal antibodies on vaccine-induced immune responses in Holstein calves

Objetivou-se avaliar o efeito dos anticorpos (ACs) maternos sobre resposta imune humoral induzida pela vacinação em bezerros Holandeses. Bezerros foram distribuídos aleatoriamente em quatro grupos: G1 - vacinados no D14 e D44 (n=6); G2 - vacinados no D90 e D120 (n=5); G3 - vacinados no D180 e D210 (n=8); controle: não vacinado (n=5). Utilizaram-se 5mL de vacina comercial (Cattle Master Gold FP5+L5® - Zoetis, Brasil), por via subcutânea. Foi realizada vírus neutralização (VN) no momento da vacinação, booster e 30 dias após a revacinação. Não foram observadas diferenças entre controle e G1 ou G2 para a frequência de soropositivos ou títulos de ACs contra os vírus respiratórios (P≥0,05). G3 apresentou maior produção de ACs em relação ao controle para BoHV-1 (P<0,01), BRSV (P<0,01) e BPIV-3 (P=0,02) após o booster (D240). A análise no tempo também demonstrou aumento nos títulos de ACs no G3 (P≤0,05). O perfil clínico revelou broncopneumonia apenas no grupo controle (n=4/5) entre 80-135 dias de vida. A imunidade colostral e a vacinal apresentaram perfis inversamente proporcionais, com maior produção de ACs aos seis meses de idade. Devido à precocidade da doença respiratória, estudos complementares são necessários para esclarecer o papel da resposta imune celular na vacinação diante dos ACs maternos.(AU)

This research aimed to evaluate the effect of colostral antibodies (ABs) on the humoral immune response induced by vaccination in Holstein calves. Twenty-four calves were randomly assigned into four groups: G1 - vaccinated on D14 and D44 (n= 6); G2 - on D90 and D120 (n= 5); G3 - on D180 and D210 (n= 8); Control: unvaccinated (n= 5). Commercial vaccine (Cattle Master Gold FP5+L5® - Zoetis, Brazil) was administered subcutaneously (5mL). Virus neutralization test (VN) was performed at the time of vaccination, booster and 30 days after booster to determine AB titers. No differences were observed between control and G1 or G2 for seropositive frequencies and ABs titers (P≥ 0.05). G3 showed higher AB production than control for BoHV-1 (P< 0.01), BRSV (P< 0.01) and BPIV-3 (P= 0.02) after booster (D240). Overtime analysis also exhibited increase in AB titers in G3 (P≤ 0,05). Bronchopneumonia was identified in the control group (n= 4/5) between 80-135 days of life. The colostral and vaccinal immunity presented inversely proportional profiles, with higher production of ABs at 6 months of age. Due to the precocity of respiratory disease further studies are required to clarify the role of cellular immune response to vaccination in face of maternal ABs.(AU)

Efeito dos anticorpos maternos sobre a resposta imune induzida pela vacinação em bezerros Holandeses / Effect of maternal antibodies on vaccine-induced immune responses in Holstein calves

Objetivou-se avaliar o efeito dos anticorpos (ACs) maternos sobre resposta imune humoral induzida pela vacinação em bezerros Holandeses. Bezerros foram distribuídos aleatoriamente em quatro grupos: G1 - vacinados no D14 e D44 (n=6); G2 - vacinados no D90 e D120 (n=5); G3 - vacinados no D180 e D210 (n=8); controle: não vacinado (n=5). Utilizaram-se 5mL de vacina comercial (Cattle Master Gold FP5+L5® - Zoetis, Brasil), por via subcutânea. Foi realizada vírus neutralização (VN) no momento da vacinação, booster e 30 dias após a revacinação. Não foram observadas diferenças entre controle e G1 ou G2 para a frequência de soropositivos ou títulos de ACs contra os vírus respiratórios (P≥0,05). G3 apresentou maior produção de ACs em relação ao controle para BoHV-1 (P<0,01), BRSV (P<0,01) e BPIV-3 (P=0,02) após o booster (D240). A análise no tempo também demonstrou aumento nos títulos de ACs no G3 (P≤0,05). O perfil clínico revelou broncopneumonia apenas no grupo controle (n=4/5) entre 80-135 dias de vida. A imunidade colostral e a vacinal apresentaram perfis inversamente proporcionais, com maior produção de ACs aos seis meses de idade. Devido à precocidade da doença respiratória, estudos complementares são necessários para esclarecer o papel da resposta imune celular na vacinação diante dos ACs maternos.(AU)

This research aimed to evaluate the effect of colostral antibodies (ABs) on the humoral immune response induced by vaccination in Holstein calves. Twenty-four calves were randomly assigned into four groups: G1 - vaccinated on D14 and D44 (n= 6); G2 - on D90 and D120 (n= 5); G3 - on D180 and D210 (n= 8); Control: unvaccinated (n= 5). Commercial vaccine (Cattle Master Gold FP5+L5® - Zoetis, Brazil) was administered subcutaneously (5mL). Virus neutralization test (VN) was performed at the time of vaccination, booster and 30 days after booster to determine AB titers. No differences were observed between control and G1 or G2 for seropositive frequencies and ABs titers (P≥ 0.05). G3 showed higher AB production than control for BoHV-1 (P< 0.01), BRSV (P< 0.01) and BPIV-3 (P= 0.02) after booster (D240). Overtime analysis also exhibited increase in AB titers in G3 (P≤ 0,05). Bronchopneumonia was identified in the control group (n= 4/5) between 80-135 days of life. The colostral and vaccinal immunity presented inversely proportional profiles, with higher production of ABs at 6 months of age. Due to the precocity of respiratory disease further studies are required to clarify the role of cellular immune response to vaccination in face of maternal ABs.(AU)

Terapia otológica induz imunotoxicidade em cão / Otological therapy induces imunnotoxicity in dog

As farmacodermias podem ser definidas como reações adversas em pele, mucosas e anexos, tendo, por vezes, caráter imunomediado. O diagnóstico baseia-se na avaliação clínico-laboratorial do paciente, envolvendo uma pesquisa acerca de fatores relacionados ao uso do fármaco e seus efeitos adversos. Na medicina veterinária, são escassos os relatos de reações farmacodérmicas. Logo, o objetivo do presente trabalho é relatar uma reação adversa após terapia otológica em cão. Foi atendido um paciente canino, fêmea, 02 anos de idade, com histórico de prurido auricular bilateral com evolução de três semanas. Na ocasião, foi realizado exame citológico auricular, evidenciando presença de elevada quantidade de células leveduriformes e cocos, além de células descamativas. Optou-se, então, por terapia à base de solução otológica composta por Gentamicina, Clotrimazol, Betametasona e Benzocaína. O quadro clínico evoluiu de forma satisfatória até o décimo dia de tratamento, quando a paciente apresentou intenso eritema e secreção melicérica bilateralmente. Repetiu-se o exame citológico, assim como realizou-se cultura de bactérias aeróbicas, sendo evidenciado em tais exames um infiltrado inflamatório piogranulomatoso, com pouca presença de conteúdo bacteriano e fúngico, corroborando com os achados da cultura bacteriana. Diante da suspeita de farmacodermia, procedeu-se com a troca de todos os compostos terapêuticos, tendo a paciente evoluído de forma satisfatória até o término do tratamento. Por tratar-se ainda de uma solução otológica composta, não se pode atribuir a causa da reação a especificamente um dos compostos. Contudo, reforça-se a necessidade de conscientização do médico veterinário acerca da identificação e adequada intervenção nas reações adversas medicamentosas, assim como espera-se sua contribuição científica na difusão dessas informações.

Pharmacodermia can be defined as adverse reactions in skin, mucous membranes and appendages, sometimes having immunomediated character. The diagnosis is based on the patient clinical-laboratorial evaluation, involving a research about factors related to the drug use and its adverse effects. In veterinary medicine, reports of pharmacodermic reactions are scarce. Therefore, the aim of the present study is to report an adverse reaction after otologic therapy in dogs. A 2-year-old female canine patient with a history of bilateral auricular pruritus with a three-week course was attended. At the time, auricular cytology was performed, evidencing the presence of high numbers of yeast cells and cocci, as well as desquamative cells. It was then opted for otologic solution composed of Gentamicin, Clotrimazole, Betamethasone and Benzocaine. The clinical presentation progressed satisfactorily until the tenth day of treatment, when the patient presented intense erythema and meliceric secretion. Cytological examination was repeated, as well as culture of aerobic bacteria. A piogranulomatous inflammatory infiltrate with low bacterial and fungal content was evidenced in these examinations, corroborating with the findings of the bacterial culture. Faced with the suspicion of pharmacodermia, all therapeutic compounds were exchanged, and the patient progressed satisfactorily until the end of the treatment. Because it is still a composed otological solution, the cause of the reaction cannot be attributed to specifically one of the compounds. However, there is a need to raise the awareness of the veterinarian about the identification and appropriate intervention in adverse drug reactions, as well as his scientific contribution to the dissemination of this information.

Terapia otológica induz imunotoxicidade em cão / Otological therapy induces imunnotoxicity in dog

As farmacodermias podem ser definidas como reações adversas em pele, mucosas e anexos, tendo, por vezes, caráter imunomediado. O diagnóstico baseia-se na avaliação clínico-laboratorial do paciente, envolvendo uma pesquisa acerca de fatores relacionados ao uso do fármaco e seus efeitos adversos. Na medicina veterinária, são escassos os relatos de reações farmacodérmicas. Logo, o objetivo do presente trabalho é relatar uma reação adversa após terapia otológica em cão. Foi atendido um paciente canino, fêmea, 02 anos de idade, com histórico de prurido auricular bilateral com evolução de três semanas. Na ocasião, foi realizado exame citológico auricular, evidenciando presença de elevada quantidade de células leveduriformes e cocos, além de células descamativas. Optou-se, então, por terapia à base de solução otológica composta por Gentamicina, Clotrimazol, Betametasona e Benzocaína. O quadro clínico evoluiu de forma satisfatória até o décimo dia de tratamento, quando a paciente apresentou intenso eritema e secreção melicérica bilateralmente. Repetiu-se o exame citológico, assim como realizou-se cultura de bactérias aeróbicas, sendo evidenciado em tais exames um infiltrado inflamatório piogranulomatoso, com pouca presença de conteúdo bacteriano e fúngico, corroborando com os achados da cultura bacteriana. Diante da suspeita de farmacodermia, procedeu-se com a troca de todos os compostos terapêuticos, tendo a paciente evoluído de forma satisfatória até o término do tratamento. Por tratar-se ainda de uma solução otológica composta, não se pode atribuir a causa da reação a especificamente um dos compostos. Contudo, reforça-se a necessidade de conscientização do médico veterinário acerca da identificação e adequada intervenção nas reações adversas medicamentosas, assim como espera-se sua contribuição científica na difusão dessas informações.(AU)

Pharmacodermia can be defined as adverse reactions in skin, mucous membranes and appendages, sometimes having immunomediated character. The diagnosis is based on the patient clinical-laboratorial evaluation, involving a research about factors related to the drug use and its adverse effects. In veterinary medicine, reports of pharmacodermic reactions are scarce. Therefore, the aim of the present study is to report an adverse reaction after otologic therapy in dogs. A 2-year-old female canine patient with a history of bilateral auricular pruritus with a three-week course was attended. At the time, auricular cytology was performed, evidencing the presence of high numbers of yeast cells and cocci, as well as desquamative cells. It was then opted for otologic solution composed of Gentamicin, Clotrimazole, Betamethasone and Benzocaine. The clinical presentation progressed satisfactorily until the tenth day of treatment, when the patient presented intense erythema and meliceric secretion. Cytological examination was repeated, as well as culture of aerobic bacteria. A piogranulomatous inflammatory infiltrate with low bacterial and fungal content was evidenced in these examinations, corroborating with the findings of the bacterial culture. Faced with the suspicion of pharmacodermia, all therapeutic compounds were exchanged, and the patient progressed satisfactorily until the end of the treatment. Because it is still a composed otological solution, the cause of the reaction cannot be attributed to specifically one of the compounds. However, there is a need to raise the awareness of the veterinarian about the identification and appropriate intervention in adverse drug reactions, as well as his scientific contribution to the dissemination of this information. (AU)

Zika virus proteins at an atomic scale: how does structural biology help us to understand and develop vaccines and drugs against Zika virus infection?

In Brazil and in other tropical areas Zika virus infection was directly associated with clinical complications as microcephaly in newborn children whose mothers were infected during pregnancy and the Guillain-Barré syndrome in adults. Recently, research has been focused on developing new vaccines and drug candidates against Zika virus infection since none of those are available. In order to contribute to vaccine and drug development efforts, it becomes important the understanding of the molecular basis of the Zika virus recognition, infection and blockade. To this purpose, it is essential the structural determination of the Zika virus proteins. The genome sequencing of the Zika virus identified ten proteins, being three structural (protein E, protein C and protein prM) and seven non-structural proteins (NS1, NS2A, NS2B, NS3, NS4A, NS4B and NS5). Together, these proteins are the main targets for drugs and antibody recognition. Here we examine new discoveries on high-resolution structural biology of Zika virus, observing the interactions and functions of its proteins identified via state-of-art structural methodologies as X-ray crystallography, nuclear magnetic resonance spectroscopy and cryogenic electronic microscopy. The aim of the present study is to contribute to the understanding of the structural basis of Zika virus infection at an atomic level and to point out similarities and differences to others flaviviruses.(AU)

Zika virus proteins at an atomic scale: how does structural biology help us to understand and develop vaccines and drugs against Zika virus infection?

In Brazil and in other tropical areas Zika virus infection was directly associated with clinical complications as microcephaly in newborn children whose mothers were infected during pregnancy and the Guillain-Barré syndrome in adults. Recently, research has been focused on developing new vaccines and drug candidates against Zika virus infection since none of those are available. In order to contribute to vaccine and drug development efforts, it becomes important the understanding of the molecular basis of the Zika virus recognition, infection and blockade. To this purpose, it is essential the structural determination of the Zika virus proteins. The genome sequencing of the Zika virus identified ten proteins, being three structural (protein E, protein C and protein prM) and seven non-structural proteins (NS1, NS2A, NS2B, NS3, NS4A, NS4B and NS5). Together, these proteins are the main targets for drugs and antibody recognition. Here we examine new discoveries on high-resolution structural biology of Zika virus, observing the interactions and functions of its proteins identified via state-of-art structural methodologies as X-ray crystallography, nuclear magnetic resonance spectroscopy and cryogenic electronic microscopy. The aim of the present study is to contribute to the understanding of the structural basis of Zika virus infection at an atomic level and to point out similarities and differences to others flaviviruses.(AU)