Aspergilose em calopsita (Nymphicus hollandicus) / Aspergillosis in a cockatiel (Nymphicus hollandicus)

Background: Aspergillosis is a defiance in avian medicine, however between of Aspergillus species, 3 are the most frequently observed (A. flavus, A. fumigatus and A. niger). Psittaciformes present medical conditions related to the 3 species, however A. fumigatus is the most observed. The defiance of the diagnosis is related to fungus characteristics (they are saprophytic in healthy birds), the clinical signs and lesions, which are common to various respiratory diseases, and the difficulty to access specific diagnostic methods. Thus, we report a case of aspergillosis in a cockatiel, whose clinical diagnosis was confirmed by fungal culture of cloacal swab, and treatment with a fungistatic drug. Case: A female cockatiel, 2-month-old, not dewormed, presented diarrhea, sneezing and difficulty to gain weight, although eating well (extruded feed and supplementation with fruits and vegetables). At a clinical examination revealed body score (BCS) of 3 (scale 1 at 5), cloacal temperature (CT) of 40 ºC, dilated nostrils and edema in the left eye region associated to evident hyperemia. Due to it has lived with another animal, was inferred that was hypovitaminosis A, by food dispute and/ or dominance, or endoparasitosis, being prescribed vitamin A supplementation and deworming with ivermectin. The bird returned 15 days later, showing maintenance of weight loss, BCS 2, ruffled feathers and areas suggestive of apteriolysis in both forelimbs, respiratory difficulty and pulmonary and cranial air sacs rales, in addition presented wound in the pygostyle region and ventus, occasioned by attempted attack of a dog, and aggravated by self-mutilation. Due the worsening of the clinical condition, an oral cavity and cloacal swabs were collected to bacteriological and fungal culture. As treatment was prescribed: a natural tranquilizer, seeking to control the self-mutilation; doxycycline oral suspension, to treat a probable bacterial respiratory infection; and oral itraconazole suspension, manipulated and with a dose calculated by allometric scaling, being placed an elizabethan collar in order to prevent biting the pygostyle and ventus. With a positive result of the cloacal swab fungal culture for A. fumigatus, the doxycycline was discontinued. After the first 30 days of treatment with itraconazole, the patient returns to alert, weighing 95 g, BCS 3, with absence of respiratory signs and with signs of recent molting process. New swabs (oral and cloacal) were collected for repetition of bacterial and fungal cultures, being maintained the treatment with itraconazole. The results of both bacterial and fungal cultures were negative. At the end of the treatment with itraconazole, the patient returns demonstrating weight gain, EEC 3, CT of 42ºC, uniform feather coverage and absence of any respiratory sign, being released by the clinician. Discussion: A preponderant factor in the treatment of various respiratory diseases in birds is the diagnosis, since many of diseases present the same clinical signs. Thus, the use of fungal culture was essential to determine the origin of the signs. Still, even with an accurate diagnosis, the clinician often comes up against the difficulty of treatment, especially in cases of mycotic infections. The knowledge about the best drug, considering the pharmacology, as well as the availability of concentrations and dosages marketed, in addition to the long period of treatment, can difficult or make impossible the case resolution. In fact, this is confirmed by the literature, where the most of aspergillosis diagnosis are post mortem, resulting from the delay in seeking veterinary care or in the administration of ineffective drugs. Thus, with this report, we sought to present a diagnostic tool, sometimes neglected, and a compilation with the main drugs and their effectiveness in the treatment of aspergillosis in Psittaciformes.

Fungal diseases in dogs and cats in Northeastern Brazil / Doenças fúngicas em cães e gatos no Nordeste do Brasil

ABSTRACT: In this retrospective study, the clinical and anatomopathological findings of fungal diseases in dogs and cats in Northeastern Brazil are described. During the study period, 6,827 histopathological examinations (4,090 necropsies and 2,737 biopsies) of companion animals were reviewed, and fungal infections were diagnosed in 54 cases. Of these, 32 cases were diagnosed in cats and 22 in dogs. Sporotrichosis was the most prevalent mycosis (19/54), followed by dermatophytosis (9/54), cryptococcosis (8/54), candidiasis (7/54), and phaeohyphomycosis (4/54). Other diseases had two cases each, including aspergillosis, mucormycosis, and histoplasmosis, whereas coccidioidomycosis occurred once. Mycoses were diagnosed through microscopic lesions associated with the histomorphological characteristics of the agent, as evidenced by routine and special histochemical stains. They were occasionally confirmed by immunohistochemistry and microbiological cultivation. This retrospective study showed that despite being uncommon, fungal diseases are important causes of death in dogs and cats in the region, with cats being the most affected species and sporotrichosis being the most prevalent mycosis. Clinical signs were correlated with the portal of entry of the infection associated with localized or disseminated superficial and deep skin lesions or affecting parenchymal organs, especially in systemic infections. Microscopic lesions were mainly characterized by pyogranulomatous inflammation associated with fungal structures. In dogs, mycoses occurred mainly owing to an immunological impairment secondary to canine distemper virus co-infection.

RESUMO: Neste estudo retrospectivo, são descritos os achados clínicos e anatomopatológicos das doenças fúngicas em cães e gatos no Nordeste do Brasil. Durante o período de estudo, foram revisados 6.827 exames histopatológicos (4.090 necropsias e 2.737 biópsias) de animais de companhia e diagnosticados 54 casos de infecções fúngicas. Destes, 32 casos foram diagnosticados em gatos e 22 em cães. A esporotricose foi a micose mais prevalente (19/54), seguida pela dermatofitose (9/54), criptococose (8/54), candidíase (7/54) e feo-hifomicose (4/54). Outras doenças tiveram dois casos cada, incluindo aspergilose, mucormicose e histoplasmose, enquanto a coccidioidomicose ocorreu uma vez. As micoses foram diagnosticadas por meio das lesões microscópicas associadas às características histomorfológicas do agente, evidenciadas pelas colorações de rotina e histoquímicas especiais, e ocasionalmente confirmadas pela imuno-histoquímica e cultivo microbiológico. Esse estudo retrospectivo demonstrou que apesar de incomuns, as doenças fúngicas são importantes causas de morte em cães e gatos da região, sendo os gatos a espécie mais afetada e a esporotricose, a micose mais prevalente. Os sinais clínicos estavam correlacionados com a porta de entrada da infecção, associados a lesões cutâneas localizadas ou disseminadas superficiais e profundas ou afetando órgãos parenquimatosos, especialmente em infecções sistêmicas. As lesões microscópicas eram caracterizadas principalmente por inflamação piogranulomatosa associada a estruturas fúngicas. Nos cães, as micoses ocorreram principalmente devido ao comprometimento imunológico secundária a coinfecção pelo vírus da cinomose canina.

Pathological and mycological characterization of pulmonary Aspergillus fumigatus infection producing gliotoxin in a captive African grey parrot (Psittacus erithacus)

Aspergillosis, the main causative agent of which is Aspergillus fumigatus, causes mortality in all types of birds. Gliotoxin (GT), one of the multiple virulence factors of A. fumigatus, has a variety of immunosuppressive effects. The corpse of an African grey parrot (Psittacus erithacus) was sent for necropsy and diagnostic rule-out. The lungs were enlarged, firm, and had dark-red coloration, on the parietal faces of both lungs, some semi-circular caseous necrosis areas were observed. The caudal thoracic and abdominal air sacs were thickened and contained a fibrin-heterophilic exudate. Histopathologically, a necrotic and granulomatous bronchopneumonia was observed with intralesional hyphae with characteristics compatible with Aspergillus sp. that were positive with Grocott´s staining. Fibrinous and heterophilic airsacculitis was found in the air sacs. A. fumigatus was isolated from lungs, characterized using serial microcultures, and confirmed using polymerase chain reaction. In addition, GT production was detected in vitro from the culture filtrate in which the isolate was grown; the organic extract was analysed via thin-layer chromatography. This is the first detection of GT in a case of pulmonary aspergillosis in a parrot, which could help to understand the pathogenesis of the disease in psittacines.(AU)

Multiparametric assay of screening for the diagnosis of mycoses of interest in Public Health: standardization of methodology / Ensaio multiparamétrico de triagem para diagnóstico de micoses de interesse em Saúde Pública: padronização da metodologia

The standardization and validation of a multiplex assay requires the combination of important parameters such as sensitivity and specificity, acceptable levels of performance, robustness, and reproducibility. We standardized a multiparametric Dot-blot aimed at the serological screening of paracoccidioidomycosis, histoplasmosis, and aspergillosis. A total of 148 serum were evaluated: 10 from healthy subjects, 36 from patients with paracoccidioidomycosis, 62 from patients with histoplasmosis, and 40 from patients with aspergillosis. It was found that the multiparametric Dot-blot showed a high percentage of cross-reactivity. However, when evaluated individually, in the serological screening of histoplasmosis, a good performance was observed when compared to the double immunodiffusion assay, considered the gold standard test, with 100% co-positivity and 83.3% co-negativity. The performance of serological screening for aspergillosis was not satisfactory when compared to double immunodiffusion, showing 71.4% co-positivity and 100% co-negativity. The evaluation of the stability of nitrocellulose membranes showed that membranes sensitized with H. capsulatum antigen remained stable for 90 days and those sensitized with A. fumigatus antigen for 30 days. We conclude that the use of crude antigens was not suitable for the standardization of the multiparametric Dot-blot assay, due to the high cross-reactivity, and that further tests should be performed with purified proteins (AU).

A padronização e validação de um ensaio multiplex requer a combinação de parâmetros importantes, como sensibilidade e especificidade, níveis aceitáveis de desempenho, robustez e reprodutibilidade. Este trabalho padronizou um Dot-blot multiparamétrico visando a triagem sorológica da paracoccidioidomicose, histoplasmose e aspergilose. Foram avaliadas 148 amostras de soro: 10 de indivíduos saudáveis, 36 de pacientes com paracoccidioidomicose, 62 de pacientes com histoplasmose e 40 de pacientes com aspergilose. Verificou-se que o Dot-blot multiparamétrico apresentou elevado percentual de reatividade cruzada. Entretanto, quando avaliado individualmente, na triagem sorológica da histoplasmose observou-se bom desempenho quando comparado ao ensaio de imunodifusão dupla, considerado o teste padrão ouro, com 100% de co-positividade e 83,3% de co-negatividade. O desempenho da triagem sorológica da aspergilose não foi satisfatório quando comparado a imunodifusão dupla, apresentando 71,4% de co-positividade e 100% de co-negatividade. A avaliação da estabilidade das membranas de nitrocelulose mostrou que membranas sensibilizadas com antígeno de H. capsulatum permaneceram estáveis por 90 dias e as sensibilizadas com antígeno de A. fumigatus, por 30 dias. Concluímos que o uso de antígenos brutos não foi adequado para a padronização do ensaio de Dot-blot multiparamétrico, devido ao alto índice de reatividade cruzada, e que novos testes devem ser realizados com proteínas purificadas (AU).

In vitro antifungal and antibacterial potentials of organic extracts of Avicennia marina collected from Rabigh Lagoon, Red Sea Coasts in Saudi Arabia / Potenciais antifúngica e antibacteriana in vitro de extratos orgânicos de Avicennia marina coletados da Lagoa Rabigh, Red Sea Coasts na Arábia Saudita

Mangrove shrub Avicennia marina (Forsk.) Vierh was used to test the antifungal and antibacterial activities of aerial fractions in vitro. Aspergillus sp, Candida sp and Gram positive bacteria have all been found to be sensitive to mangrove extracts, whereas Gram negative bacteria have been found to be resistant to them. Agar disc diffusion and well-cut diffusion were employed to conduct antifungal and antibacterial activities. The MICs (minimum inhibitory concentrations) for each assay have been established. Several extracts from Mangrove reduced fungus growth (diameters fluctuated between 11 and 41 mm). The Ethyl acetate fraction showed particularly strong inhibition of C. tropicalis, C. albicanis, and A. fumigatus. They had 41, 40, and 25 mm-diameter inhibition zones, respectively. Nesoral, a synthetic antifungal medication, showed no significant changes in its MICs compared to different extracts. Enterococcus faecalis and Bacillus subtilis were inhibited by Petroleum Ether extracts at MICs of 0.78 and 0.35 mg/mL, respectively. It is possible that A. marina extracts may be exploited as a viable natural alternative that may be employed in the management of various infections, notably nosocomial bacterial infections, as anti-candidiasis and as anti-aspergillosis agents.

Arbusto de mangue Avicennia marina (Forsk.) Vierh foi usado para testar as atividades antifúngicas e antibacterianas de frações aéreas in vitro. As bactérias Aspergillus sp, Candida sp e Gram-positivas mostraram-se sensíveis aos extratos de mangue, enquanto as bactérias Gram-negativas mostraram-se resistentes a eles. Difusão em disco de ágar e difusão bem cortada foram empregadas para realizar atividades antifúngicas e antibacterianas. Para cada ensaio foram estabelecidas as CIMs (concentrações inibitórias mínimas). Vários extratos de mangue reduziram o crescimento do fungo (os diâmetros variaram entre 11 e 41 mm). A fração acetato de etila mostrou inibição particularmente forte de C. tropicalis, C. albicanis e A. fumigatus. Eles tinham zonas de inibição de 41, 40 e 25 mm de diâmetro, respectivamente. Nesoral, um medicamento antifúngico sintético, não apresentou alterações significativas em suas CIMs em comparação com diferentes extratos Enterococcus faecalis e Bacillus subtilis foram inibidos por extratos de éter de petróleo em MICs de 0,78 e 0,35 mg/mL, respectivamente. É possível que os extratos de A. marina possam ser explorados como uma alternativa natural viável que pode ser empregada no manejo de várias infecções, notadamente infecções bacterianas nosocomiais, como agentes anti-candidíase e anti-aspergilose.

Aspergilose sistêmica em potro (Equus caballus) / Systemic aspergillosis in a foals - Equus caballus

O gênero Aspergillus compreende espécies de fungos saprotróficos, globalmente distribuídos, sendo os Aspergillus seção Fumigati conhecidos por causarem doença em humanos e animais imunocomprometidos. Os sinais clínicos dependem do sistema acometido, podendo apresentar febre branda, cólicas intensas, pneumonias, micose de bolsa gutural, e, ocasionalmente, lesões no sistema nervoso central. O presente trabalho objetiva relatar os sinais clínicos, os achados de necropsia e a histologia de um caso de aspergilose sistêmica em um potro de oito meses de idade. O animal apresentava refluxo enterogástrico, peristaltismo aumentado, fezes pastosas, dor abdominal e desidratação intensa. O quadro clínico evoluiu para óbito e o cadáver foi encaminhado para a necropsia. Macroscopicamente, havia sufusões e equimoses na serosa do trato gastrointestinal e ulcerações na mucosa do intestino delgado. No pulmão, havia nódulos multifocais, esbranquiçados e firmes que, ao corte, apresentavam-se císticos, com revestimento interno vinhoso e friável. O coração exibia áreas esbranquiçadas multifocais no miocárdio e os rins continham nódulos avermelhados nas regiões cortical e medular. No encéfalo, havia áreas multifocais amareladas e hemorrágicas com bordos avermelhados. Microscopicamente, observaram-se áreas multifocais de necrose com infiltrado inflamatório granulomatoso no intestino, pulmão, encéfalo, miocárdio e nos rins. Hifas fúngicas intralesionais e intravasculares foram observadas no encéfalo e no pulmão. Estruturas de fenótipo compatível com Aspergillus fumigatus foram observadas na cultura fúngica. Amostras encaminhadas para virologia apresentaram-se positivas para Herpesvírus Equino (HVE) tipo 1 e 4. O diagnóstico de aspergilose sistêmica foi determinado pelo histórico clínico, imunossupressão, achados macroscópicos, histológicos, isolamento do fungo e à infecção concomitante por HVE.

The Aspergillus genus comprises globally distributed species of saprotrophic fungi, with the Aspergillus section Fumigatus known to cause diseases in humans and immunocompromised animals. Clinical signs depend on the affected system, exhibiting mild fever, severe colic, pneumonia, guttural bag mycosis and occasionally lesions in the central nervous system. The present work aims to report the clinical signs, necropsy findings and histology of a case of systemic aspergillosis in an eight-months-old foal. The animal had enterogastric reflux, increased peristalsis, pasty feces, abdominal pain and severe dehydration. The condition evolved to death and the cadaver was sent for necropsy. Macroscopically, there were suffusions and ecchymosis in the serosa of the gastrointestinal tract and ulcerations in the mucosa of the small intestines. In the lung, there were multifocal, whitish and firm nodules that were cystic when cut with a friable winey internal lining. The heart had whitish multifocal areas in the myocardium and the kidneys contained reddish nodules in the cortical and medullary regions. In the brain there were yellowish and hemorrhagic multifocal areas with reddish borders. Microscopically, multifocal areas of necrosis with granulomatous inflammatory infiltrate were observed in the intestine, lung, brain, myocardium and kidneys. Intralesional and intravascular fungal were observed in the brain and lung. Structures with phenotype compatible with Aspergillus fumigatus were observed in the fungal culture. In virology, samples were positive for equine herpesvirus (HVE) types 1 and 4. The diagnosis of systemic aspergillosis was determined due to the clinical history, immunosuppression, macroscopic and histological findings, fungal isolation and concomitant HVE infection.

Aspergilose sistêmica em potro (Equus caballus) / Systemic aspergillosis in a foals - Equus caballus

O gênero Aspergillus compreende espécies de fungos saprotróficos, globalmente distribuídos, sendo os Aspergillus seção Fumigati conhecidos por causarem doença em humanos e animais imunocomprometidos. Os sinais clínicos dependem do sistema acometido, podendo apresentar febre branda, cólicas intensas, pneumonias, micose de bolsa gutural, e, ocasionalmente, lesões no sistema nervoso central. O presente trabalho objetiva relatar os sinais clínicos, os achados de necropsia e a histologia de um caso de aspergilose sistêmica em um potro de oito meses de idade. O animal apresentava refluxo enterogástrico, peristaltismo aumentado, fezes pastosas, dor abdominal e desidratação intensa. O quadro clínico evoluiu para óbito e o cadáver foi encaminhado para a necropsia. Macroscopicamente, havia sufusões e equimoses na serosa do trato gastrointestinal e ulcerações na mucosa do intestino delgado. No pulmão, havia nódulos multifocais, esbranquiçados e firmes que, ao corte, apresentavam-se císticos, com revestimento interno vinhoso e friável. O coração exibia áreas esbranquiçadas multifocais no miocárdio e os rins continham nódulos avermelhados nas regiões cortical e medular. No encéfalo, havia áreas multifocais amareladas e hemorrágicas com bordos avermelhados. Microscopicamente, observaram-se áreas multifocais de necrose com infiltrado inflamatório granulomatoso no intestino, pulmão, encéfalo, miocárdio e nos rins. Hifas fúngicas intralesionais e intravasculares foram observadas no encéfalo e no pulmão. Estruturas de fenótipo compatível com Aspergillus fumigatus foram observadas na cultura fúngica. Amostras encaminhadas para virologia apresentaram-se positivas para Herpesvírus Equino (HVE) tipo 1 e 4. O diagnóstico de aspergilose sistêmica foi determinado pelo histórico clínico, imunossupressão, achados macroscópicos, histológicos, isolamento do fungo e à infecção concomitante por HVE.(AU)

The Aspergillus genus comprises globally distributed species of saprotrophic fungi, with the Aspergillus section Fumigatus known to cause diseases in humans and immunocompromised animals. Clinical signs depend on the affected system, exhibiting mild fever, severe colic, pneumonia, guttural bag mycosis and occasionally lesions in the central nervous system. The present work aims to report the clinical signs, necropsy findings and histology of a case of systemic aspergillosis in an eight-months-old foal. The animal had enterogastric reflux, increased peristalsis, pasty feces, abdominal pain and severe dehydration. The condition evolved to death and the cadaver was sent for necropsy. Macroscopically, there were suffusions and ecchymosis in the serosa of the gastrointestinal tract and ulcerations in the mucosa of the small intestines. In the lung, there were multifocal, whitish and firm nodules that were cystic when cut with a friable winey internal lining. The heart had whitish multifocal areas in the myocardium and the kidneys contained reddish nodules in the cortical and medullary regions. In the brain there were yellowish and hemorrhagic multifocal areas with reddish borders. Microscopically, multifocal areas of necrosis with granulomatous inflammatory infiltrate were observed in the intestine, lung, brain, myocardium and kidneys. Intralesional and intravascular fungal were observed in the brain and lung. Structures with phenotype compatible with Aspergillus fumigatus were observed in the fungal culture. In virology, samples were positive for equine herpesvirus (HVE) types 1 and 4. The diagnosis of systemic aspergillosis was determined due to the clinical history, immunosuppression, macroscopic and histological findings, fungal isolation and concomitant HVE infection.(AU)

Aspergilose sistêmica em um cavalo - relato de caso / Systemic aspergilosis in a horse - case report

O presente trabalho relata o caso de aspergilose sistêmica em um cavalo da raça Quarto de Milha. O animal apresentava quadro de emagrecimento progressivo e alopecia. Os parâmetros avaliados durante o exame clínico encontravam-se de acordo com os valores normais para a espécie. No hemograma verificou-se leucocitose por neutrofilia, sem desvio à esquerda, proteínas plasmáticas totais elevadas e aumento do fibrinogênio, indicando um processo inflamatório acompanhado de desidratação. Os exames bioquímicos séricos demonstraram aumento no valor da ureia. Apesar dos exames realizados e da terapia instituída com antibióticos de amplo espectro e suporte nutricional, após 51 dias de internamento o quadro clínico evoluiu para caquexia e decúbito permanente do paciente, o qual foi submetido à eutanásia seguida de necropsia. Com base nos achados nos exames necroscópico e histopatológico, diagnosticou-se infecção sistêmica por Aspergillus sp., acometendo pulmões, fígado, rins, peritônio parietal e encéfalo. Dentre os fatores predisponentes à relatada infecção fúngica sistêmica, destaca-se o status imunológico debilitado do paciente, possivelmente proporcionado por tratamentos prolongados com antibióticos e anti-inflamatórios esteroidais. O presente trabalho relata o primeiro caso descrito de arpergilose sistêmica no Brasil. O diagnóstico definitivo só foi possível após necropsia e histopatologia, visto que os sinais clínicos inespecíficos não foram determinantes para o diagnóstico em vida.(AU)

This paper reports the case of systemic aspergillosis on a Quarter Horse. The animal had progressive weight loss and alopecia. The parameters evaluated during the clinical examination were in agreement with the normal values for the species. The hemogram showed neutrophilic leukocytosis, without left-sided, elevated total plasma proteins and an increase in fibrinogen, indicating an inflammatory process accompanied by dehydration. Serum biochemical tests showed an increase in the value of urea. Despite the performed tests and established therapy with broad spectrum antibiotics and nutritional support, after 51 days of hospitalization the clinical condition evolved into cachexia and permanent decubitus of the patient which underwent to euthanasia and necropsy. From the findings of necropsy and histopathology, systemic infection was diagnosed by Aspergillus sp., affecting the lungs, liver, kidneys, parietal peritoneum and encephalon. Among the factors predisposing to the reported systemic fungal infection, the patient's weakened immune status is highlighted, possibly due to prolonged antibiotic and steroidal anti-inflammatory treatments. This paper reports the first case described of systemic aspergillosis in Brazil. Definitive diagnosis was only possible after necropsy and histopathology, since nonspecific clinical signs were not determinant for the diagnosis in life.(AU)

Aspergilose sistêmica em um cavalo - relato de caso / Systemic aspergilosis in a horse - case report

O presente trabalho relata o caso de aspergilose sistêmica em um cavalo da raça Quarto de Milha. O animal apresentava quadro de emagrecimento progressivo e alopecia. Os parâmetros avaliados durante o exame clínico encontravam-se de acordo com os valores normais para a espécie. No hemograma verificou-se leucocitose por neutrofilia, sem desvio à esquerda, proteínas plasmáticas totais elevadas e aumento do fibrinogênio, indicando um processo inflamatório acompanhado de desidratação. Os exames bioquímicos séricos demonstraram aumento no valor da ureia. Apesar dos exames realizados e da terapia instituída com antibióticos de amplo espectro e suporte nutricional, após 51 dias de internamento o quadro clínico evoluiu para caquexia e decúbito permanente do paciente, o qual foi submetido à eutanásia seguida de necropsia. Com base nos achados nos exames necroscópico e histopatológico, diagnosticou-se infecção sistêmica por Aspergillus sp., acometendo pulmões, fígado, rins, peritônio parietal e encéfalo. Dentre os fatores predisponentes à relatada infecção fúngica sistêmica, destaca-se o status imunológico debilitado do paciente, possivelmente proporcionado por tratamentos prolongados com antibióticos e anti-inflamatórios esteroidais. O presente trabalho relata o primeiro caso descrito de arpergilose sistêmica no Brasil. O diagnóstico definitivo só foi possível após necropsia e histopatologia, visto que os sinais clínicos inespecíficos não foram determinantes para o diagnóstico em vida.(AU)

This paper reports the case of systemic aspergillosis on a Quarter Horse. The animal had progressive weight loss and alopecia. The parameters evaluated during the clinical examination were in agreement with the normal values for the species. The hemogram showed neutrophilic leukocytosis, without left-sided, elevated total plasma proteins and an increase in fibrinogen, indicating an inflammatory process accompanied by dehydration. Serum biochemical tests showed an increase in the value of urea. Despite the performed tests and established therapy with broad spectrum antibiotics and nutritional support, after 51 days of hospitalization the clinical condition evolved into cachexia and permanent decubitus of the patient which underwent to euthanasia and necropsy. From the findings of necropsy and histopathology, systemic infection was diagnosed by Aspergillus sp., affecting the lungs, liver, kidneys, parietal peritoneum and encephalon. Among the factors predisposing to the reported systemic fungal infection, the patient's weakened immune status is highlighted, possibly due to prolonged antibiotic and steroidal anti-inflammatory treatments. This paper reports the first case described of systemic aspergillosis in Brazil. Definitive diagnosis was only possible after necropsy and histopathology, since nonspecific clinical signs were not determinant for the diagnosis in life.(AU)

Reduction in the frequency of Aspergillus spp. in broiler facilities subjected to cleaning and disinfection / Redução na frequência de Aspergillus ssp. em instalações para frangos de corte submetidas à limpeza e desinfecção

The present study analyzes influence of two cleaning and disinfection protocols on frequency of Aspergillus spp. in broiler facilities. We conducted an observational study, applying two cleaning and disinfection protocols before housing 960 one-day-old broilers randomly allocated in 32 boxes with 30 birds. We considered two types of housing as independent experiments, which differed as to the bedding. First experiment consisted of new bedding materials, which we reused in second experiment. We applied two different treatments, Common treatment included sweeping organic matter, humidifying residual material with low pressure water, washing with water and neutral detergent, with posterior rinsing. European treatment was according to the standards of the manufacturer of disinfectants. Procedures included dry and humid organic matter removal, humidification, washing with high pressure water, application of detergent, rinsing, and application of two compound disinfectants: glutaraldehyde (250 g/L) + formaldehyde (185 g/L); p-chloro-m-cresol (210 g/L). To evaluate the presence of Aspergillus spp., we collected samples from surfaces and equipment before and after cleaning and disinfection, at 7, 14, 28, and 42 days of experimental period. Mycological assessment included streaking on Petri dishes containing AFPA (Aspergillus Flavus and Parasiticus Agar, Sigma Aldrich®). Common cleaning and disinfection treatment led to a higher presence of fungus in floors and walls (83% vs. 0% p = 0.0030 and 50% vs. 0% p = 0.0450) in first and second experiments, respectively. As this study demonstrates by using the European procedures, performing a detailed cleaning and disinfection protocol reduces the presence of Aspergillus spp. in broiler facilities.(AU)

O presente estudo analisou a influência de dois protocolos de limpeza e desinfecção na frequência de Aspergillus spp. em instalações de frangos de corte. Realizou-se estudo observacional, aplicando-se dois protocolos de limpeza e desinfecção antes do alojamento de 960 pintainhos de um dia distribuídos aleatoriamente em 32 boxes com 30 aves. Foram realizados 2 experimentos independentes, que diferiam quanto ao material de cama, sendo nova no primeiro e reutilizada no segundo. Realizou-se dois tratamentos: Comum que incluiu varrição da matéria orgânica, umidificação do material residual com água sob baixa pressão, lavagem com detergente neutro e enxágue. O tratamento Europeu seguiu as recomendações do fabricante dos desinfetantes, incluindo remoção de matéria orgânica seca e úmida, umidificação, lavagem com água sob alta pressão, aplicação de detergente, enxágue e aplicação de dois desinfetantes compostos: glutaraldeído (250 g / L) + formaldeído (185 g / L); p-cloro-m-cresol (210 g / L). Foram coletadas amostras de superfícies e equipamentos antes e após a limpeza e desinfecção, aos 7, 14, 28 e 42 dias do período experimental para avaliação micológica, realizada em placas de Petri contendo AFPA (Aspergillus Flavus e Parasiticus Agar, Sigma Aldrich®). O tratamento Comum obteve maior presença de fungos nos pisos e paredes (83% vs. 0% p = 0,0030 e 50% vs. 0% p = 0,0450) no primeiro e segundo experimentos, respectivamente. Este estudo demonstra que a execução de um protocolo detalhado de limpeza e desinfecção, como o tratamento Europeu, reduz a presença de Aspergillus spp. em instalações de frangos de corte.(AU)

Reduction in the frequency of Aspergillus spp. in broiler facilities subjected to cleaning and disinfection / Redução na frequência de Aspergillus ssp. em instalações para frangos de corte submetidas à limpeza e desinfecção

The present study analyzes influence of two cleaning and disinfection protocols on frequency of Aspergillus spp. in broiler facilities. We conducted an observational study, applying two cleaning and disinfection protocols before housing 960 one-day-old broilers randomly allocated in 32 boxes with 30 birds. We considered two types of housing as independent experiments, which differed as to the bedding. First experiment consisted of new bedding materials, which we reused in second experiment. We applied two different treatments, Common treatment included sweeping organic matter, humidifying residual material with low pressure water, washing with water and neutral detergent, with posterior rinsing. European treatment was according to the standards of the manufacturer of disinfectants. Procedures included dry and humid organic matter removal, humidification, washing with high pressure water, application of detergent, rinsing, and application of two compound disinfectants: glutaraldehyde (250 g/L) + formaldehyde (185 g/L); p-chloro-m-cresol (210 g/L). To evaluate the presence of Aspergillus spp., we collected samples from surfaces and equipment before and after cleaning and disinfection, at 7, 14, 28, and 42 days of experimental period. Mycological assessment included streaking on Petri dishes containing AFPA (Aspergillus Flavus and Parasiticus Agar, Sigma Aldrich®). Common cleaning and disinfection treatment led to a higher presence of fungus in floors and walls (83% vs. 0% p = 0.0030 and 50% vs. 0% p = 0.0450) in first and second experiments, respectively. As this study demonstrates by using the European procedures, performing a detailed cleaning and disinfection protocol reduces the presence of Aspergillus spp. in broiler facilities.

O presente estudo analisou a influência de dois protocolos de limpeza e desinfecção na frequência de Aspergillus spp. em instalações de frangos de corte. Realizou-se estudo observacional, aplicando-se dois protocolos de limpeza e desinfecção antes do alojamento de 960 pintainhos de um dia distribuídos aleatoriamente em 32 boxes com 30 aves. Foram realizados 2 experimentos independentes, que diferiam quanto ao material de cama, sendo nova no primeiro e reutilizada no segundo. Realizou-se dois tratamentos: Comum que incluiu varrição da matéria orgânica, umidificação do material residual com água sob baixa pressão, lavagem com detergente neutro e enxágue. O tratamento Europeu seguiu as recomendações do fabricante dos desinfetantes, incluindo remoção de matéria orgânica seca e úmida, umidificação, lavagem com água sob alta pressão, aplicação de detergente, enxágue e aplicação de dois desinfetantes compostos: glutaraldeído (250 g / L) + formaldeído (185 g / L); p-cloro-m-cresol (210 g / L). Foram coletadas amostras de superfícies e equipamentos antes e após a limpeza e desinfecção, aos 7, 14, 28 e 42 dias do período experimental para avaliação micológica, realizada em placas de Petri contendo AFPA (Aspergillus Flavus e Parasiticus Agar, Sigma Aldrich®). O tratamento Comum obteve maior presença de fungos nos pisos e paredes (83% vs. 0% p = 0,0030 e 50% vs. 0% p = 0,0450) no primeiro e segundo experimentos, respectivamente. Este estudo demonstra que a execução de um protocolo detalhado de limpeza e desinfecção, como o tratamento Europeu, reduz a presença de Aspergillus spp. em instalações de frangos de corte.

Pulmonary Aspergillis in the dolphin (Pontoporia blainvillei)

Fungal infections that affect marine mammals, like most fungal infections, can be secondary to environmental stress or other infectious diseases. This article describes a case of pulmonary infection by Aspergillus spp. in a specimen of Pontoporia blainvillei found dead near the town of San Clemente de Tuyu and near the bay of Samborombón, BuenosAires, Argentina. The lung was collapsed with necrotic foci, fragments were collected, fixed in 10% formalin and submitted to histopathological examination. Microscopically, a marked change of the pulmonary architecture was observed, with total alveolar collapse, extensive necrotic areas, where septal hyphae were observed weakly, when stained with H-E and clearly evidenced with Grocott staining. Since the potential causes of immunosuppression were not evident, the authors consider it probable that infection by Aspergillus spp. was established in the lungs that presented a primary, possibly bacterial pneumonia, as a result of some degree of immunosuppression.(AU)

Pulmonary Aspergillis in the dolphin (Pontoporia blainvillei)

Fungal infections that affect marine mammals, like most fungal infections, can be secondary to environmental stress or other infectious diseases. This article describes a case of pulmonary infection by Aspergillus spp. in a specimen of Pontoporia blainvillei found dead near the town of San Clemente de Tuyu and near the bay of Samborombón, BuenosAires, Argentina. The lung was collapsed with necrotic foci, fragments were collected, fixed in 10% formalin and submitted to histopathological examination. Microscopically, a marked change of the pulmonary architecture was observed, with total alveolar collapse, extensive necrotic areas, where septal hyphae were observed weakly, when stained with H-E and clearly evidenced with Grocott staining. Since the potential causes of immunosuppression were not evident, the authors consider it probable that infection by Aspergillus spp. was established in the lungs that presented a primary, possibly bacterial pneumonia, as a result of some degree of immunosuppression.

Outbreak of avian aspergillosis in colonial-bred chicks (Isa Brown) in southern Rio Grande do Sul - case report / [Surto de aspergilose aviária em pintainhas (Isa Brown) de criação colonial na região sul do Rio Grande do Sul - relato de caso]

In this study we describe the epidemiology, clinical signs, and pathology of an outbreak of avian aspergillosis in alternative breeding in the southern region of Rio Grande do Sul, Brazil. Between the fifth and tenth day of life, 360 chicks from a flock of 4000 developed unspecific clinical signs and died. The birds were housed in a reused aviary litter, without previous treatment. In 11 six-day-old female ISA Brown chicks (Gallus gallus domesticus), necropsy revealed firm, yellowish-white, multinodular lesions extending from the pleura to the lung parenchyma. Histologically, a granulomatous, multifocal to coalescent pneumonia was observed. Granulomas were characterized by central necrosis, with heterophil and epithelioid macrophage infiltration and presence of countless Y-shaped intralesional septate hyphae morphologically compatible with Aspergillus spp. The diagnosis through isolation confirmed Aspergillus fumigatus. We highlight the importance of aspergillosis as a primary cause of diseases in the respiratory tract of young birds in alternative breeding. Measures to prevent aspergillosis mainly regarding the reuse of aviary litter are essential in poultry husbandry to prevent economic losses, reduce environmental contamination and mitigate the potential risk to public health.(AU)

Descrevem-se os aspectos epidemiológicos e patológicos de um surto de aspergilose aviária em criação alternativa na região sul do Rio Grande do Sul, Brasil. De um lote de 4000 pintainhas, entre o quinto e o 10º dia de vida, 360 aves apresentaram sinais clínicos inespecíficos e morreram. As aves foram alojadas em cama reutilizada do aviário, sem tratamento prévio. Na necropsia de 11 pintainhas (Gallus gallus domesticus), fêmeas, seis dias de idade da linhagem Isa Brown, foram observadas no pulmão lesões multinodulares, branco-amareladas e firmes, que se estendiam da pleura ao parênquima. Histologicamente foi observada pneumonia granulomatosa, multifocal a coalescente. Os granulomas eram caracterizados por necrose central, com infiltrado inflamatório de heterófilos, macrófagos, células epitelioides com presença de inúmeras hifas septadas intralesionais, semelhantes à letra "Y", morfologicamente compatíveis com Aspergillus spp. O diagnóstico foi confirmado pelo isolamento de Aspergillus fumigatus. Alerta-se para a importância da aspergilose como causa primária de afecções no trato respiratório de aves jovens em criações alternativas. Medidas preventivas relacionadas ao manejo dessas aves são indispensáveis principalmente quanto à reutilização da cama dos aviários, a fim de evitar perdas econômicas, reduzir a contaminação ambiental e o potencial risco à saúde pública.(AU)

Outbreak of avian aspergillosis in colonial-bred chicks (Isa Brown) in southern Rio Grande do Sul - case report / [Surto de aspergilose aviária em pintainhas (Isa Brown) de criação colonial na região sul do Rio Grande do Sul - relato de caso]

In this study we describe the epidemiology, clinical signs, and pathology of an outbreak of avian aspergillosis in alternative breeding in the southern region of Rio Grande do Sul, Brazil. Between the fifth and tenth day of life, 360 chicks from a flock of 4000 developed unspecific clinical signs and died. The birds were housed in a reused aviary litter, without previous treatment. In 11 six-day-old female ISA Brown chicks (Gallus gallus domesticus), necropsy revealed firm, yellowish-white, multinodular lesions extending from the pleura to the lung parenchyma. Histologically, a granulomatous, multifocal to coalescent pneumonia was observed. Granulomas were characterized by central necrosis, with heterophil and epithelioid macrophage infiltration and presence of countless Y-shaped intralesional septate hyphae morphologically compatible with Aspergillus spp. The diagnosis through isolation confirmed Aspergillus fumigatus. We highlight the importance of aspergillosis as a primary cause of diseases in the respiratory tract of young birds in alternative breeding. Measures to prevent aspergillosis mainly regarding the reuse of aviary litter are essential in poultry husbandry to prevent economic losses, reduce environmental contamination and mitigate the potential risk to public health.(AU)

Descrevem-se os aspectos epidemiológicos e patológicos de um surto de aspergilose aviária em criação alternativa na região sul do Rio Grande do Sul, Brasil. De um lote de 4000 pintainhas, entre o quinto e o 10º dia de vida, 360 aves apresentaram sinais clínicos inespecíficos e morreram. As aves foram alojadas em cama reutilizada do aviário, sem tratamento prévio. Na necropsia de 11 pintainhas (Gallus gallus domesticus), fêmeas, seis dias de idade da linhagem Isa Brown, foram observadas no pulmão lesões multinodulares, branco-amareladas e firmes, que se estendiam da pleura ao parênquima. Histologicamente foi observada pneumonia granulomatosa, multifocal a coalescente. Os granulomas eram caracterizados por necrose central, com infiltrado inflamatório de heterófilos, macrófagos, células epitelioides com presença de inúmeras hifas septadas intralesionais, semelhantes à letra "Y", morfologicamente compatíveis com Aspergillus spp. O diagnóstico foi confirmado pelo isolamento de Aspergillus fumigatus. Alerta-se para a importância da aspergilose como causa primária de afecções no trato respiratório de aves jovens em criações alternativas. Medidas preventivas relacionadas ao manejo dessas aves são indispensáveis principalmente quanto à reutilização da cama dos aviários, a fim de evitar perdas econômicas, reduzir a contaminação ambiental e o potencial risco à saúde pública.(AU)

Antifungal susceptibility profile of Aspergillus fumigatus isolates from avian lungs / Perfil de suscetibilidade antifúngica de isolados de Aspergillus fumigatus provenientes de pulmões de aves

Susceptibility testing is essential to inform the correct management of Aspergillus infections. In this study we present antifungal susceptibility profile of A. fumigatus isolates recovered from lungs of birds with and without aspergillosis. Fifty three isolates were tested for their antifungal susceptibility to voriconazole (VRC), itraconazole (ITZ), amphotericin (AMB) and caspofungin (CSP) using the M38-A2 broth microdilution reference method. Five isolates were resistant to more than one antifungal drug (CSP + AMB, VRC + ITZ and AMB + ITZ). Fifteen (28%) isolates with susceptible increased exposure (I) to ITZ were sensible to VRC. Resistance to AMB (>2µg/mL) was observed in only four isolates. Eleven (21%) A. fumigatus present resistance to ITZ (13%) and VRC (8%). Fungal isolation from respiratory samples has been regarded as being of limited usefulness in the ante mortem diagnosis of aspergillosis in birds. However, the results suggest that the detection and antifungal susceptibility profile may be helpful for monitoring of therapy for avian species and where antifungal resistance might be emerging and what conditions are associated to the event.(AU)

Os testes de suscetibilidade são essenciais para informar o correto manejo das infecções por Aspergillus. Neste estudo apresentamos o perfil antifúngico de isolados de A. fumigatus provenientes de pulmões de aves com e sem aspergilose. Cinqüenta e três isolados foram testados quanto à susceptibilidade antifúngica ao voriconazol (VRC), itraconazol (ITZ), anfotericina B (AMB) e caspofungina (CSP) pelo método de referência de microdiluição do caldo M38-A2. Cinco isolados foram resistentes a mais de um antifúngico (CSP + AMB, VRC + ITZ e AMB + ITZ). Quinze (28%) isolados suscetíveis - com exposição aumentada (I) ao ITZ foram sensíveis ao VRC. A resistência ao AMB (>2µg/mL) foi observada em apenas quatro isolados. Onze (21%) A. fumigatus apresentaram resistência a ITZ (13%) e VRC (8%). O isolamento de fungos de amostras respiratórias tem sido considerado de utilidade limitada no diagnóstico ante mortem de aspergilose em aves. No entanto, os resultados sugerem que a detecção e o perfil de suscetibilidade a antifúngicos podem ser úteis para o monitoramento da terapia de espécies aviárias, assim como a emergência da resistência antifúngica e quais condições podem estar associadas ao evento.(AU)

Antifungal susceptibility profile of Aspergillus fumigatus isolates from avian lungs / Perfil de suscetibilidade antifúngica de isolados de Aspergillus fumigatus provenientes de pulmões de aves

Susceptibility testing is essential to inform the correct management of Aspergillus infections. In this study we present antifungal susceptibility profile of A. fumigatus isolates recovered from lungs of birds with and without aspergillosis. Fifty three isolates were tested for their antifungal susceptibility to voriconazole (VRC), itraconazole (ITZ), amphotericin (AMB) and caspofungin (CSP) using the M38-A2 broth microdilution reference method. Five isolates were resistant to more than one antifungal drug (CSP + AMB, VRC + ITZ and AMB + ITZ). Fifteen (28%) isolates with susceptible increased exposure (I) to ITZ were sensible to VRC. Resistance to AMB (>2µg/mL) was observed in only four isolates. Eleven (21%) A. fumigatus present resistance to ITZ (13%) and VRC (8%). Fungal isolation from respiratory samples has been regarded as being of limited usefulness in the ante mortem diagnosis of aspergillosis in birds. However, the results suggest that the detection and antifungal susceptibility profile may be helpful for monitoring of therapy for avian species and where antifungal resistance might be emerging and what conditions are associated to the event.(AU)

Os testes de suscetibilidade são essenciais para informar o correto manejo das infecções por Aspergillus. Neste estudo apresentamos o perfil antifúngico de isolados de A. fumigatus provenientes de pulmões de aves com e sem aspergilose. Cinqüenta e três isolados foram testados quanto à susceptibilidade antifúngica ao voriconazol (VRC), itraconazol (ITZ), anfotericina B (AMB) e caspofungina (CSP) pelo método de referência de microdiluição do caldo M38-A2. Cinco isolados foram resistentes a mais de um antifúngico (CSP + AMB, VRC + ITZ e AMB + ITZ). Quinze (28%) isolados suscetíveis - com exposição aumentada (I) ao ITZ foram sensíveis ao VRC. A resistência ao AMB (>2µg/mL) foi observada em apenas quatro isolados. Onze (21%) A. fumigatus apresentaram resistência a ITZ (13%) e VRC (8%). O isolamento de fungos de amostras respiratórias tem sido considerado de utilidade limitada no diagnóstico ante mortem de aspergilose em aves. No entanto, os resultados sugerem que a detecção e o perfil de suscetibilidade a antifúngicos podem ser úteis para o monitoramento da terapia de espécies aviárias, assim como a emergência da resistência antifúngica e quais condições podem estar associadas ao evento.(AU)

Aspergillosis in domestic and wild birds from Argentina / Aspergilose em aves domésticas e silvestres da Argentina

Aspergillus species are widely distributed throughout the world and can develop parasitic and saprophytic ways of life, allowing Aspergillus to infect living hosts, including plants, insects, birds and mammals. The most common form of aspergillosis in poultry and other birds is respiratory infection. Clinical manifestations depend on the infective dose, pre-existing diseases, and the immune response of the host. The aim of the present research was to study aspergillosis in domestic and wild birds from Argentina. We carried out morphological and molecular identification, and determination of antifungal susceptibility against seven antifungal drugs. Six birds from different cities of Buenos Aires Province of Argentina were studied. Three of the samples belonged to broiler chicks, while the other three belonged to an eagle, a pheasant, and a kelp gull. Two isolates were identified as Aspergillus fumigatus by morphological characteristics and growth at 50 C. Morphology and BenA sequencing enabled us to identify three isolates as Aspergillus flavus, and one as Aspergillus sydowii. All antifungal drugs tested showed low MIC values, ranging from 0.008 to 1 mg/L. Aspergillosis in birds causes high economic losses and could be controlled by sanitation, avoidance of moldy food, nest and litter and reducing stress factors.

As espécies de Aspergillus são amplamente distribuídas em todo o mundo e são capazes de desenvolver formas de vida parasitárias e saprófitas, permitindo que Aspergillus infecte hospedeiros vivos, incluindo plantas, insetos, pássaros e mamíferos. A forma mais comum de aspergilose em aves domésticas e outras aves são infecções respiratórias. As manifestações clínicas dependem da dose infecciosa, doenças pré-existentes e da resposta imune do hospedeiro. O objetivo da presente investigação foi estudar aspergilose em aves domésticas e silvestres da Argentina. Foi realizada a identificação morfológica e molecular, assim como a determinação do teste de suscetibilidade contra sete drogas antifúngicas. Foram estudadas seis aves pertencentes a diferentes cidades da província argentina de Buenos Aires. Três das amostras pertenciam a frangos de corte, enquanto as outras três amostras pertenciam a uma águia, um faisão e uma gaivota. Dois isolados foram identificados como Aspergillus fumigatus por características morfológicas e crescimento a 50 C. A morfologia e o sequenciamento de BenA permitiram identificar três isolados como Aspergillus flavus e um como Aspergillus sydowii. Todos os antifúngicos testados apresentaram baixos valores de CIM, variando de 0,008 a 1 mg/L. Aspergilose em aves causam altas perdas econômicas e podem ser controladas por práticas de higiene, evitando alimentos, ni

Aspergillosis in domestic and wild birds from Argentina / Aspergilose em aves domésticas e silvestres da Argentina

Aspergillus species are widely distributed throughout the world and can develop parasitic and saprophytic ways of life, allowing Aspergillus to infect living hosts, including plants, insects, birds and mammals. The most common form of aspergillosis in poultry and other birds is respiratory infection. Clinical manifestations depend on the infective dose, pre-existing diseases, and the immune response of the host. The aim of the present research was to study aspergillosis in domestic and wild birds from Argentina. We carried out morphological and molecular identification, and determination of antifungal susceptibility against seven antifungal drugs. Six birds from different cities of Buenos Aires Province of Argentina were studied. Three of the samples belonged to broiler chicks, while the other three belonged to an eagle, a pheasant, and a kelp gull. Two isolates were identified as Aspergillus fumigatus by morphological characteristics and growth at 50 °C. Morphology and BenA sequencing enabled us to identify three isolates as Aspergillus flavus, and one as Aspergillus sydowii. All antifungal drugs tested showed low MIC values, ranging from 0.008 to 1 mg/L. Aspergillosis in birds causes high economic losses and could be controlled by sanitation, avoidance of moldy food, nest and litter and reducing stress factors.

As espécies de Aspergillus são amplamente distribuídas em todo o mundo e são capazes de desenvolver formas de vida parasitárias e saprófitas, permitindo que Aspergillus infecte hospedeiros vivos, incluindo plantas, insetos, pássaros e mamíferos. A forma mais comum de aspergilose em aves domésticas e outras aves são infecções respiratórias. As manifestações clínicas dependem da dose infecciosa, doenças pré-existentes e da resposta imune do hospedeiro. O objetivo da presente investigação foi estudar aspergilose em aves domésticas e silvestres da Argentina. Foi realizada a identificação morfológica e molecular, assim como a determinação do teste de suscetibilidade contra sete drogas antifúngicas. Foram estudadas seis aves pertencentes a diferentes cidades da província argentina de Buenos Aires. Três das amostras pertenciam a frangos de corte, enquanto as outras três amostras pertenciam a uma águia, um faisão e uma gaivota. Dois isolados foram identificados como Aspergillus fumigatus por características morfológicas e crescimento a 50 °C. A morfologia e o sequenciamento de BenA permitiram identificar três isolados como Aspergillus flavus e um como Aspergillus sydowii. Todos os antifúngicos testados apresentaram baixos valores de CIM, variando de 0,008 a 1 mg/L. Aspergilose em aves causam altas perdas econômicas e podem ser controladas por práticas de higiene, evitando alimentos, ni

Applicability of the Platelia EIA® Aspergillus test for the diagnosis of aspergilosis in penguins / Aplicabilidade do Platelia EIA® Aspergillus como teste diagnostico da aspergilose em pinguins

Even today, an effective diagnostic test for aspergillosis in penguins is unknown, being the gold standard post-mortem examinations. The fungal antigen galactomannan (GM) has been used as a biomarker of disease in humans and is detected by the Platelia Aspergillus EIA (BioRad)®, a commercial kit based on the sandwich ELISA technique. It is standardized for use in neutropenic patients, however studies have demonstrated its usefulness also possible for birds. The aim of our study was to evaluate the effectiveness of Platelia Aspergillus EIA® test (BioRad-US) in the diagnosis of aspergillosis in Magellanic penguins, determining sensitivity, specificity, and positive and negative predictive values for different cut-off points. Were included in the study, blood serum samples (n = 29) Magellanic penguins in captivity that died by aspergillosis. Detection of GM was performed following manufacturer's instructions and the GM index was obtained by dividing the average value of OD of the duplicate of the clinical sample by duplicate OD of the average value of the cut-off sample provided by the kit. Through information database results were obtained for the presence of anti-Aspergillus fumigatus antibodies detected by agar gel immunodiffusion (AGID) for all serum samples. Results were analyzed using chi-square test and Kruskal-Wallis from SPSS 20.0, IBM®. ROC curve was obtained and from this, rates of sensitivity, specificity, positive and negative predictive values were also calculated based on four different cutoff points (0.5, 1.0, 1.5 and 2.0). The serum GM index did not differ between animals of the case and control group (pkw =0.097). In determining the ROC curve for serum GM detection the value of area under the curve was 0.635. From the values determined by the coordinate of the curve, four different cut points (0.5, 1.0, 1.5 and 2.0) were analyzed, resulting in sensitivity rates ranging from 86.2 to 34.5% % and specificity between 87% and 26.1%. By comparing the serum GM index in group case as the presence or absence of antibodies detected by AGID was found p=0.503. The detection of GM the Platelia Aspergillus EIA® test seems is not be useful for the diagnosis of aspergillosis in naturally infected penguins.(AU)

Ainda hoje, um teste diagnóstico eficaz para aspergilose em pinguins não é conhecido, sendo o padrão-ouro os exames post-mortem. O antígeno fúngico galactomanana (GM) tem sido utilizado como biomarcador da doença em humanos, sendo detectado pelo Platelia Aspergillus EIA (BioRad)®, um kit comercial que se baseia na técnica ELISA sanduíche. É padronizado para utilização em pacientes neutropênicos, no entanto estudos tem demonstrado sua possível utilidade também para aves.O objetivo de nosso estudo foi avaliar a eficácia do teste Platelia Aspergillus EIA® (BioRad-US) no diagnóstico da aspergilose em pinguins-de-Magalhães, determinando sensibilidade, especificidade e valores preditivos positivos e negativos em diferentes pontos de corte. Foram incluídas no estudo, amostras de soro sanguíneo (n=29) de pinguins-de-Magalhães em cativeiro que vieram a óbito por aspergilose. A detecção de GM foi realizada seguindo instruções do fabricante e o índice de GM foi obtido dividindo o valor da média da DO da duplicata da amostra clínica pelo valor da média da DO da duplicata da amostra de cut-off fornecida pelo kit. Através de informações em banco de dados foram obtidos resultados sobre a presença de anticorpos anti-Aspergillus fumigatus, detectada por Imunodifusão em gel de ágar (IDGA) em todas as amostras séricas. Os resultados foram analisados utilizando-se teste de qui-quadrado e Kruskal-Wallis a partir do programa estatístico SPSS 20.0, IBM®. Curva ROC foi obtida e a partir desta, taxas de sensibilidade, especificidade, valores preditivo positivo e negativo foram igualmente calculados considerando quatro diferentes pontos de corte (0.5, 1.0, 1.5 e 2.0). O índice de GM sérica não diferiu entre os animais do grupo caso e controle (pKW = 0.097). Na determinação da curva ROC para detecção de GM sérica o valor da área sobre a curva foi de 0.635. A partir dos valores determinados pelas coordenadas da curva, quatro diferentes pontos de corte (0.5, 1.0, 1.5 e 2.0) foram analisados, resultando em taxas de sensibilidade variando de 86.2% a 34.5%, e de especificidade entre 87% e 26.1%. Ao comparar o índice de GM sérica nos animais do grupo caso quanto a presença ou não de anticorpos detectados pela IDGA foi encontrado p=0.503. A detecção de GM pelo teste Platelia Aspergillus EIA® não parece ser útil para o diagnóstico da aspergilose em pinguins naturalmente infectados.(AU)