Fixation of pfcrt chloroquine resistance alleles in Plasmodium falciparum clinical isolates collected from unrest tribal agencies of Pakistan / Fixação de alelos de resistência à cloroquina pfcrt em isolados clínicos de Plasmodium falciparum coletados de agitações de agências tribais do Paquistão

Abstract Plasmodium falciparum resistance to Chloroquine (CQ) is a significant cause of mortality and morbidity worldwide. There is a paucity of documented data on the prevalence of CQ-resistant mutant haplotypes of Pfcrt and Pfmdr1 genes from malaria-endemic war effected Federally Administered Tribal Areas of Pakistan. The objective of this study was to investigate the prevalence of P. falciparum CQ-resistance in this area. Clinical isolates were collected between May 2017 and May 2018 from North Waziristan and South Waziristan agencies of Federally Administrated Trial Area. Subsequently, Giemsa-stained blood smears were examined to detect Plasmodium falciparum. Extraction of malarial DNA was done from microscopy positive P. falciparum samples, and P. falciparum infections were confirmed by nested PCR (targeting Plasmodium small subunit ribosomal ribonucleic acid (ssrRNA) genes). All PCR confirmed P. falciparum samples were sequenced by pyrosequencing to find out mutation in Pfcrt gene at codon K76T and in pfmdr1 at codons N86Y, Y184F, N1042D, and D1246Y. Out of 121 microscopies positive P. falciparum cases, 109 samples were positive for P. falciparum by nested PCR. Pfcrt K76T mutation was found in 96% of isolates, Pfmdr1 N86Y mutation was observed in 20%, and 11% harboured Y184F mutation. All samples were wild type for Pfmdr1 codon N1042D and D1246Y. In the FATA, Pakistan, the frequency of resistant allele 76T remained high despite the removal of CQ. However, current findings of the study suggest complete fixation of P. falciparum CQ-resistant genotype in the study area.

Resumo A resistência do Plasmodium falciparum à cloroquina (CQ) é uma causa significativa de mortalidade e morbidade em todo o mundo. Há uma escassez de dados documentados sobre a prevalência de haplótipos mutantes CQ-resistentes dos genes Pfcrt e Pfmdr1 da guerra endêmica da malária em áreas tribais administradas pelo governo federal do Paquistão. O objetivo deste estudo foi investigar a prevalência de resistência a CQ de P. falciparum nesta área. Isolados clínicos foram coletados entre maio de 2017 e maio de 2018 nas agências do Waziristão do Norte e do Waziristão do Sul da Área de Ensaio Administrada Federalmente. Posteriormente, esfregaços de sangue corados com Giemsa foram examinados para detectar Plasmodium falciparum. A extração do DNA da malária foi feita a partir de amostras de P. falciparum positivas para microscopia, e as infecções por P. falciparum foram confirmadas por nested PCR (visando genes de ácido ribonucleico ribossômico de subunidade pequena de Plasmodium (ssrRNA)). Todas as amostras de P. falciparum confirmadas por PCR foram sequenciadas por pirosequenciamento para descobrir a mutação no gene Pfcrt no códon K76T e em pfmdr1 nos códons N86Y, Y184F, N1042D e D1246Y. De 121 microscopias de casos positivos de P. falciparum, 109 amostras foram positivas para P. falciparum por nested PCR. A mutação Pfcrt K76T foi encontrada em 96% dos isolados, a mutação Pfmdr1 N86Y foi observada em 20% e 11% abrigou a mutação Y184F. Todas as amostras eram do tipo selvagem para o códon N1042D e D1246Y de Pfmdr1. No FATA, Paquistão, a frequência do alelo resistente 76T permaneceu alta apesar da remoção de CQ. No entanto, as descobertas atuais do estudo sugerem a fixação completa do genótipo resistente a CQ de P. falciparum na área de estudo.

Infusão contínua de fentanil e cetamina para controle de dor no transcirurgico: relato de caso / Continuous infusion of fentanyl and ketamine for trans-surgical pain control: case report

O paciente da espécie canina, sem raça definida, com 5 anos, deu entrada a clínica veterinária particular apresentando quadro de dor aguda e intensa em cavidade abdominal associada a prostração. Foram realizados exames de sangue, ultrassonografia e radiografia de abdômen, cuja suspeita foi torção parcial do estômago, com esplenomegalia, além de gastrite e enterite. O paciente foi submetido imediatamente ao procedimento cirúrgico para alívio, reposicionamento do órgão e gastropexia. O animal foi medicado previamente com metadona, tramadol e dipirona duas horas antes do ato cirúrgico, portanto não foram utilizadas medicações pré-anestésicas e optou-se pelo propofol e cetamina para a indução anestésica, além da infusão contínua com cetamina e fentanil para se obter a analgesia multimodal. Os parâmetros de dor foram avaliados por meio das frequências cardíaca e respiratória, traçado eletrocardiográfico, pressão arterial sistólica e média, aferição da temperatura retal e coloração de mucosas, a cada 5 minutos. Os mesmos indicaram boa estabilidade hemodinâmica, segurança e analgesia, sem necessidade de alterar as doses estabelecidas durante o procedimento. Pode ser observada também redução do requerimento de isoflurano para manutenção do plano cirúrgico. O paciente acordou sem sinais de dor no pós-operatório imediato evitando estresse sistêmico, o que conferiu o bom resultado do protocolo analgésico instituído.

The patient (Caramel) canine, mixed breed, approximately 5 years old, weighing 26kg was seen at the Ame Vet veterinary clinic, with severe abdominal pain, apathy, anorexia, prostration. Blood tests, abdominal ultrasound and abdominal x-ray were performed according to the tests a suspicion of partial torsion of the stomach and splenomegaly with right displacement, in addition to gastritis and enteritis. It was decided by the clinic and surgeon to perform laparotomy and prophylactic gastropexy. The animal was previously medicated by the clinic that treated the animal for analgesia with methadone, tramadol and dipyrone two hours before the beginning of the surgical procedure, therefore, pre-anesthetic medications, anesthetic induction with propofol, and ketamine were not used, aiming to perform analgesia. Multimodal with continuous infusion of ketamine and fentanyl, that is, more than one different mechanism of action, acting synergistically and reducing dose-dependent adverse effects and monitoring hemostasis and patient parameters, presenting its efficacy and safety in intraoperative pain control. The parameters addressed were heart rate (HR), respiratory rate (RR), electrocardiographic tracing, Spo2, systolic blood pressure (SBP), mean arterial pressure (MAP), temperature and mucosal color, evaluated every 5 minutes. The parameters evaluated indicated good hemodynamic stability, safety and analgesia, with no need to change the doses established during the procedure. A reduction in the requirement of isoflurane to maintain the surgical plan can also be observed. The patient woke up without signs of pain in the immediate postoperative period, thus avoiding systemic stress. which conferred the good result of the analgesic protocol instituted.

Allelopathic bioactivity of fresh and infused aqueous extracts of Brazilian cherry (Eugenia uniflora L. ) on lettuce and maize / Bioatividade alelopática de extrato aquoso fresco e infuso de pitangueira (Eugenia uniflora L. ) sobre alface e milho

This study aimed to analyse the allelopathic bioactivity of fresh and infused aqueous extracts of Brazilian cherry leaves on the germination of lettuce and the initial development of maize. Brazilian cherry leaves were used to prepare a fresh aqueous extract (200 g L-1) and an infused extract (100 g L-1), which were diluted to concentrations of 0.4, 0.8, 1.2, 1.6 or 2.0% w/v. The variables evaluated in lettuce were the germination rate (GR), germination time index (GTI), germination speed index (GSI) and root length (RL). To determine the effect on the initial development of maize, we measured the shoot (SL) and root (RL) length. The experimental design included a factorial 2 × 5 design (two extracts and five concentrations), in addition to a control treatment (no extract). In general, the allelopathic bioactivity differed between the fresh and infused extracts. The fresh extract was more phytotoxic for the GR and RL of lettuce. Some beneficial results were observed for the infused extract, including an increase in the RL of lettuce and SL of maize. These effects were dependent on the extract concentration. Thus, there is evidence that Brazilian cherry extracts have allelopathic bioactivity.

O presente trabalho tem por objetivo em analisar a bioatividade alelopática do extrato fresco e infuso de pitangueira sobre a germinação de alface e no desenvolvimento inicial de milho. Para tanto, utilizaram-se folhas frescas de pitangueira para preparação de extratos aquosos fresco (200 g L-1) e infuso (100 g L-1), diluídos em 0,4; 0,6; 1,2; 1,6 e 2,0% p/v de concentração. Os parâmetros avaliados em alface foram porcentagem (PG), tempo médio (TMG) e velocidade média de germinação (VMG) e comprimento de raiz (CR). Já no desenvolvimento inicial do milho, obteve-se o comprimento de raiz (CR) e parte aérea (CPA). Os experimentos foram conduzidos em esquema fatorial 2x5 + tratamento controle (ausência de extrato), com dois tipos de extratos e cinco concentrações. De modo geral, a bioatividade alelopática dos extratos frescos e infusos foi diferente, sendo que o extrato fresco mostrou-se fitotóxico sobre a PG e CR de alface. Alguns resultados benéficos foram observados com o extrato infuso como aumento no CR de alface e no CPA de milho. Os efeitos desses extratos dependem das concentrações onde são testados. Dessa forma, há evidência de que os extratos de pitangueira possuem bioatividade alelopática.

Allelopathic bioactivity of fresh and infused aqueous extracts of Brazilian cherry (Eugenia uniflora L. ) on lettuce and maize / Bioatividade alelopática de extrato aquoso fresco e infuso de pitangueira (Eugenia uniflora L. ) sobre alface e milho

This study aimed to analyse the allelopathic bioactivity of fresh and infused aqueous extracts of Brazilian cherry leaves on the germination of lettuce and the initial development of maize. Brazilian cherry leaves were used to prepare a fresh aqueous extract (200 g L-1) and an infused extract (100 g L-1), which were diluted to concentrations of 0.4, 0.8, 1.2, 1.6 or 2.0% w/v. The variables evaluated in lettuce were the germination rate (GR), germination time index (GTI), germination speed index (GSI) and root length (RL). To determine the effect on the initial development of maize, we measured the shoot (SL) and root (RL) length. The experimental design included a factorial 2 × 5 design (two extracts and five concentrations), in addition to a control treatment (no extract). In general, the allelopathic bioactivity differed between the fresh and infused extracts. The fresh extract was more phytotoxic for the GR and RL of lettuce. Some beneficial results were observed for the infused extract, including an increase in the RL of lettuce and SL of maize. These effects were dependent on the extract concentration. Thus, there is evidence that Brazilian cherry extracts have allelopathic bioactivity.(AU)

O presente trabalho tem por objetivo em analisar a bioatividade alelopática do extrato fresco e infuso de pitangueira sobre a germinação de alface e no desenvolvimento inicial de milho. Para tanto, utilizaram-se folhas frescas de pitangueira para preparação de extratos aquosos fresco (200 g L-1) e infuso (100 g L-1), diluídos em 0,4; 0,6; 1,2; 1,6 e 2,0% p/v de concentração. Os parâmetros avaliados em alface foram porcentagem (PG), tempo médio (TMG) e velocidade média de germinação (VMG) e comprimento de raiz (CR). Já no desenvolvimento inicial do milho, obteve-se o comprimento de raiz (CR) e parte aérea (CPA). Os experimentos foram conduzidos em esquema fatorial 2x5 + tratamento controle (ausência de extrato), com dois tipos de extratos e cinco concentrações. De modo geral, a bioatividade alelopática dos extratos frescos e infusos foi diferente, sendo que o extrato fresco mostrou-se fitotóxico sobre a PG e CR de alface. Alguns resultados benéficos foram observados com o extrato infuso como aumento no CR de alface e no CPA de milho. Os efeitos desses extratos dependem das concentrações onde são testados. Dessa forma, há evidência de que os extratos de pitangueira possuem bioatividade alelopática.(AU)

DELIMITAÇÃO DAS MARGENS TUMORAIS DO CÂNCER DE MAMA POR IMAGEM VIDEOTERMOMÉTRICA E A SUA RELAÇÃO COM A ATIVIDADE DAS BOMBAS DE PRÓTONS - PROJETO MART

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Pesquisa de genes de resistência aos compostos de amônia quaternária (QAC) em estirpes de Escherichia coli isoladas de aves comerciais

Compostos de amônia quaternária (Quaternary ammonium compounds QAC) são bioativos catiônicos surfactantes utilizados como detergentes e desinfetantes, com atividade contra fungos, bactérias Gram positivas, Gram negativas e vírus envelopados. Os desinfetantes a base de cloreto de benzalcônio (composto de amônia quaternária) são amplamente utilizados na avicultura brasileira. Relatos de resistência a QAC estão cada vez mais frequentes, de forma cosmopolita, sendo relacionados a mutação de genes ou transferência horizontal de elementos genéticos móveis. O objetivo deste trabalho foi analisar a presença de genes de resistência a QAC em estirpes de Escherichia coli isoladas de aves comerciais. Amostras cloacais e clínicas foram coletadas para isolamento de E. coli. A pesquisa dos genes qacE e sugE, codificadores de bombas de efluxo, foi realizada por meio de PCR convencional. Foram analisadas 422 estirpes, 302 de origem cloacal e 120 de origem clínica. Um total de 271 (64,21%) estirpes foram positivas para qacE e 180 (42,65%) foram positivas para sugE. O gene qacE foi detectado em isolados de amostras fecais (62,25%) e clínicas (69,16%). Em menor frequência, foram detectados isolados positivos para sugE em isolados fecais (37,41%) e clínicos (55, 83%). Os resultados encontrados confirmam a importância de bombas de efluxo na resistência a QAC e a presença desses genes na cadeia produtiva de aves.

Quaternary ammonium compounds (QAC) are cationic bioactive surfactants used as detergents and disinfectants, with activity against fungi, Gram positive and negative bacteria and enveloped viruses. Disinfectants based on benzalkonium chloride (quaternary ammonium compound) are widely used in Brazilian aviculture. Reports of QAC resistance are frequent increasing, in a cosmopolitan way, through gene mutation or horizontal transfer of mobile genetic elements. The aim of this study was to analyze the presence of QAC resistance genes in strains of Escherichia coli isolated from poultry. Cloacal and clinical samples were collected to isolate E. coli. The research for genes qacE and sugE, encoders of efflux pumps, was carried out by conventional PCR. 422 strains were analyzed, 302 from cloacal samples and 120 from clinical samples. 271 total strains (64.21%) were positive for qacE and 180 (42.65%) were positive for sugE(c). The qacE gene was detected among fecal isolates (62.25%) and clinical strains (69.16%). In a lower frequency, were detected positive sugE(c) strains from fecal samples (37.41%) and clinical samples (55.83%). The results found confirm the importance of efflux pumps in QAC resistance and the presence of these genes in the poultry production.

Caracterização do perfil de resistência a antibióticos de isolados de Salmonella enterica obtidos na cadeia produtiva de aves

Alimentos de origem animal são importantes fontes de disseminação de micro-organismos resistentes a antibióticos, um desafio global que deve ser gerenciado considerando uma abordagem em Saúde Única. A cadeia produtiva de aves, em especial, contribui de maneira relevante para esse problema, com destaque para Salmonella enterica devido a sua patogenicidade, prevalência e emergência de cepas resistentes a antibióticos. O objetivo deste estudo foi caracterizar o perfil de resistência de isolados de S. enterica obtidos em uma cadeia produtiva de aves. O estudo foi dividido em duas fases: 1) determinação dos perfis fenotípicos e genotípicos de resistência e 2) avaliação da atividade de bombas de efluxo dos isolados considerados multidroga-resistentes (MDR). Isolados de S. enterica (n = 96) foram selecionados de um estudo prévio de caracterização da distribuição desse patógeno em uma cadeia produtiva de aves, e submetidos a caracterização da resistência fenotípica pelo teste de diluição em caldo e determinação da concentração inibitória mínima (MIC) de 11 antibióticos e da associação trimetoprim-sulfametoxazole. Ainda, os isolados foram avaliados quanto a presença de 21 genes associados a resistência pela técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Isolados com resultados positivos para gyrA, gyrB parC e parE (associados a resistência a ciprofloxacina) foram submetidos a High Resolution Melting (HRM) para detecção de mutações e os produtos de amplificação foram posteriormente sequenciados para caracterizar as mutações identificadas. A atividade de bombas de efluxo foi mensurada pela avaliação em ágar da exportação de brometo de etídeo (BrEt). Os principais fenótipos de resistência encontrados foram à estreptomicina (n = 33, 34,4%), ampicilina (n = 11, 11,4%) e cefoxitina (n = 6, 6,3%). Ciprofloxacina apresentou um perfil intermediário de resistência em que 94 (97,9%) isolados apresentaram MIC 0,0125 g/mL. Dentre os genes pesquisados, 51 (53,1%) isolados apresentaram aphA e 94 (97,9%) qnrB. aphA foi detectado nos isolados resistentes à kanamicina e qnrB foi observado somente nos isolados com MIC 0,0125 g/mL para ciprofloxacina. Entre os isolados que apresentaram resultados positivos para gyrA (n = 94, 97,9%), gyrB (n = 96, 100%), parC (n = 95, 99%) e parE (n = 96, 100%), variações por HRM foram detectadas e foram selecionados sequências de gyrA, gyrB e parC para sequenciamento. Não foram detectadas mutações nas sequências de gyrA, os amplicons de gyrB apresentaram mutações silenciosas e os três amplicons de parC apresentaram a mutação Thr57Ser. Seis isolados caracterizados como MDR foram selecionados e quatro deles apresentaram atividade de bomba efluxo na concentração 0,4 mg/L de BrEt; na concentração de 0,8 mg/L não foi detectada atividade de bomba efluxo em nenhum dos isolados. Os resultados deste estudo evidenciam a redução da susceptibilidade de S. enterica à ciprofloxacina, associada à distribuição de qnrB e de mutação em parC, sendo um alerta preocupante, visto a importância desse antibiótico para a saúde humana. A atividade de bombas de efluxo multidroga foi caracterizada em alguns isolados MDR, o que ressalta a importância desse mecanismo como uma alternativa para o desenvolvimento de resistência a antibióticos por Salmonella.

Animal foods are important sources for spreading antibiotic resistant microorganisms, a global challenge that must be managed considering an approach based on One Health. The poultry production chain, in particular, contributes significantly to this problem, with emphasis to Salmonella enterica due to its pathogenicity, prevalence and emergence of antibiotic resistant strains. The aim of this study was to characterize the resistance profile of S. enterica isolates obtained from a poultry production chain. The study was divided into two steps: 1) determination of phenotypic and genotypic resistance profiles and 2) evaluation of the efflux pumps activity of isolates considered multidrug resistant (MDR). S. enterica isolates (n = 96) were selected from a previous study to characterize the distribution of this pathogen in a poultry production chain, and subjected to the characterization of phenotypic resistance by the broth dilution test and determination of the minimum inhibitory concentration (MIC) to 11 antibiotics and to the trimethoprim-sulfamethoxazole association. Moreover, the isolates were evaluated for the presence of 21 genes associated with resistance by Polymerase Chain Reaction (PCR). Isolates with positive results for gyrA, gyrB, parC, and parE (associated with ciprofloxacin resistance) were subjected to High Resolution Melting (HRM) to detect mutations and the amplification products were subsequently sequenced to characterize the identified mutations. The efflux pumps activity was measured by evaluating the export of ethidium bromide (EtBr) on agar. The main resistance phenotypes found were streptomycin (n = 33, 34,4%), ampicillin (n = 11, 11,4%) and cefoxitin (n = 6, 6,3%). Ciprofloxacin showed an intermediate resistance profile in which 94 (97,9%) isolates had MIC 0.0125 g/mL. Among the researched genes, 51 (53,1%) isolates harbored aphA and 94 (97,9%) qnrB. aphA was detected in isolates resistant to kanamycin and qnrB was observed only in isolates with MIC 0.0125 g/mL for ciprofloxacin. Among the isolates that showed positive results for gyrA (n = 94, 97,9%), gyrB (n = 96, 100%), parC (n = 95, 99%), and parE (n = 96, 100%), variations by HRM were detected and were selected sequences of gyrA, gyrB and parC for sequencing. None mutation was detected in the gyrA sequences, the gyrB amplicons showed silent mutations and the three parC amplicons showed the Thr57Ser mutation. Six isolates characterized as MDR were selected and four of them showed efflux pump activity at a concentration of 0,4 mg/L of EtBr; at a concentration of 0,8 mg/L, none efflux pump activity was detected in any of the isolates. The results of this study show a reduction in the susceptibility of S. enterica to ciprofloxacin, associated with the distribution of qnrB and mutation in parC, being a worrying alert, given the importance of this antibiotic for human health. The activity of multidrug efflux pumps was characterized in some MDR isolates, which highlights the importance of this mechanism as an alternative for the development of antibiotic resistance by Salmonella.

Pressure compensation by a floppy disk in a sprinkler with rotation by centrifugal action / Disco flexível como compensador de pressão em aspersor com rotação por ação centrífuga

Water wastage is a great concern worldwide. Water is effectively utilized by using equipment and systems that have more uniform water distribution. The objective of this study was to evaluate the performance of the FR Super 10 sprinkler with a pressure compensator under different pressures, spacing, and installation heights. The tests were performed in the laboratory, and pressure was controlled with two gauges calibrated with a mercury column. The distribution uniformity was measured using the Christiansen uniformity coefficient (CUC) and distribution uniformity coefficient (CUD). Four spray nozzles were utilized for the Super 10 sprinkler, at two heights (0.6 and 1.2 m), six pressures (25, 30, 35, 40, 45, and 50 m H2O), and six spacings (9 × 9, 9 × 10, 10 × 10, 9 × 12, 10 × 12, and 12 × 12 m). The blue, yellow, and red nozzles presented self-compensating features and the green nozzle was not fully self-compensating. The manufacturing coefficients of variations were lower in the nozzles with smaller apertures (blue and yellow) compared to those with larger apertures. Increasing the sprinkler height provided better water distribution uniformity and a better radial distribution profile, lowering the application rate near the sprinkler. Since this sprinkler compensates for pressure changes, pressure did not influence the sprinkler range.

Atualmente há grande preocupação com o desperdício de água. Utilizando equipamentos e sistemas que possuem maior uniformidade de distribuição de água, obtém-se melhor aproveitamento da água aplicada. O objetivo deste trabalho foi avaliar o desempenho do aspersor modelo FR Super 10 com compensador de pressão, sob diferentes pressões de trabalho, espaçamentos e alturas de instalação. Os testes foram realizados em laboratório, controlando-se a pressão com dois manômetros previamente calibrados com coluna de mercúrio e a uniformidade de distribuição avaliada utilizando-se o Coeficiente de Uniformidade de Christiansen (CUC) e o Coeficiente de Uniformidade de Distribuição (CUD). Foram utilizados quatro bocais do aspersor Super 10, duas alturas (0,6 e 1,2 m), seis pressões (25, 30, 35, 40, 45 e 50 m.c.a.) e seis espaçamentos (9x9, 9x10, 10x10, 9x12, 10x12 e 12x12 m). Os bocais azul, amarelo e vermelho apresentaram características autocompensantes e o bocal verde não foi totalmente autocompensante, os coeficientes de variação de fabricação (CV) foram maiores nos bocais com menor abertura (azul e amarelo) comparados com os bocais de maior abertura. Aumentando-se da altura de instalação do aspersor, de 0,6 para 1,2 m, proporciona melhoria da uniformidade e do perfil radial de distribuição, diminuindo a intensidade de aplicação próximo do aspersor. Como este aspersor possui compensador de pressão a variação de pressão não influenciou no raio de alcance do aspersor.

Pressure compensation by a floppy disk in a sprinkler with rotation by centrifugal action / Disco flexível como compensador de pressão em aspersor com rotação por ação centrífuga

Water wastage is a great concern worldwide. Water is effectively utilized by using equipment and systems that have more uniform water distribution. The objective of this study was to evaluate the performance of the FR Super 10 sprinkler with a pressure compensator under different pressures, spacing, and installation heights. The tests were performed in the laboratory, and pressure was controlled with two gauges calibrated with a mercury column. The distribution uniformity was measured using the Christiansen uniformity coefficient (CUC) and distribution uniformity coefficient (CUD). Four spray nozzles were utilized for the Super 10 sprinkler, at two heights (0.6 and 1.2 m), six pressures (25, 30, 35, 40, 45, and 50 m H2O), and six spacings (9 × 9, 9 × 10, 10 × 10, 9 × 12, 10 × 12, and 12 × 12 m). The blue, yellow, and red nozzles presented self-compensating features and the green nozzle was not fully self-compensating. The manufacturing coefficients of variations were lower in the nozzles with smaller apertures (blue and yellow) compared to those with larger apertures. Increasing the sprinkler height provided better water distribution uniformity and a better radial distribution profile, lowering the application rate near the sprinkler. Since this sprinkler compensates for pressure changes, pressure did not influence the sprinkler range.(AU)

Atualmente há grande preocupação com o desperdício de água. Utilizando equipamentos e sistemas que possuem maior uniformidade de distribuição de água, obtém-se melhor aproveitamento da água aplicada. O objetivo deste trabalho foi avaliar o desempenho do aspersor modelo FR Super 10 com compensador de pressão, sob diferentes pressões de trabalho, espaçamentos e alturas de instalação. Os testes foram realizados em laboratório, controlando-se a pressão com dois manômetros previamente calibrados com coluna de mercúrio e a uniformidade de distribuição avaliada utilizando-se o Coeficiente de Uniformidade de Christiansen (CUC) e o Coeficiente de Uniformidade de Distribuição (CUD). Foram utilizados quatro bocais do aspersor Super 10, duas alturas (0,6 e 1,2 m), seis pressões (25, 30, 35, 40, 45 e 50 m.c.a.) e seis espaçamentos (9x9, 9x10, 10x10, 9x12, 10x12 e 12x12 m). Os bocais azul, amarelo e vermelho apresentaram características autocompensantes e o bocal verde não foi totalmente autocompensante, os coeficientes de variação de fabricação (CV) foram maiores nos bocais com menor abertura (azul e amarelo) comparados com os bocais de maior abertura. Aumentando-se da altura de instalação do aspersor, de 0,6 para 1,2 m, proporciona melhoria da uniformidade e do perfil radial de distribuição, diminuindo a intensidade de aplicação próximo do aspersor. Como este aspersor possui compensador de pressão a variação de pressão não influenciou no raio de alcance do aspersor.(AU)

EFEITO DA TEMPERATURA, DENSIDADE DE ESTOCAGEM E SÓLIDOS SUSPENSOS TOTAIS NO CONSUMO DO OXIGÊNIO DO CAMARÃO BRANCO Litopenaeus vannamei (BOONE, 1931) EM SISTEMA DE BIOFLOCOS

A criação de novos sistemas de cultivo para camarões como a tecnologia de bioflocos (BFT) tem permitido incrementar as densidades de cultivo, e junto com esse incremento tem aumentado o requerimento de oxigênio dissolvido (OD). Já que esses sistemas dependem de tecnologias como sopradores e bombas hidráulicas, que tem o potencial risco de falha que pode levar a uma queda do OD. O objetivo do trabalho é gerar um protocolo de segurança para OD em cultivos do camarão L. vannamei em sistemas BFT após a ocorrência de uma quebra no suprimento de aeração, em diferentes condições ambientais de cultivo. O delineamento experimental consistiu em 2 fases. A primeira com 5 temperaturas (22, 24, 26, 28, 30°C) para verificar o tempo para atingir a hipóxia com diferentes densidades de camarões (150, 300, 450 e 600 cam/m³) e de sólidos suspensos totais (0, 100, 500 e 1000 mg/L), com três repetições. Na segunda fase foi testada a reoxigenação em 28°C. Os Juvenis de camarão tinham peso individual de 12g. Foi determinando o tempo necessário para a chegada ao ponto crítico (OD 0,6 mg/L) e para o ponto de alarme (OD 2,0 mg/L). Os resultados mostraram que tanto a densidade do camarão, os SST e a temperatura têm efeitos significativos no consumo do oxigênio. Nas análises de peroxidação lipídica (TBARS) mostraram que após a hipóxia o músculo tem uma recuperação em 72h, já no hepatopâncreas em 72h o dano se manteve. Os resultados evidenciaram que em um cultivo em sistema BFT atualmente utilizado por produtores com densidades variando entre 300-450 cam/m³, em temperaturas de 30 a 28°C e com os SST em 500 mg/L, o OD pode diminuir drasticamente após a quebra no fornecimento de aeração causando grandes mortalidades, entre 60 minutos e 100 minutos.

The creation of new cultivation systems for shrimp such as the biofloc technology (BFT) has allowed the increase in cultivation densities, and along with this increase the requirement for dissolved oxygen (DO) also has increased. Since these systems rely on technologies such as blowers and hydraulic pumps, the risk of failure that could lead to a fall in OD is latent. The objective of the work is to generate a security protocol for DO in L. vannamei cultivations in BFT systems after a break in the aeration supply, under different environmental conditions of cultivation. The experimental design consisted of 2 phases. The first with 5 temperatures (22, 24, 26, 28, 30 ° C) to check the time to reach hypoxia with different densities of shrimp (150, 300, 450 and 600 cam / m³) and total suspended solids (0, 100, 500 and 1000 mg / L), each with three repetitions. In the second phase, reoxygenation at 28 ° C was tested. Shrimp juveniles individual weight was 12g. The time needed to reach the critical point (OD 0.6 mg / L) and the alarm point (OD 2.0 mg / L) was determined. The results showed that shrimp density, SST, and temperature have significant effects on oxygen consumption. In the analysis of lipid peroxidation (TBARS) it is showed that after reaching hypoxia the muscle has a recovery in 72h, in the hepatopancreas in 72h the damage was maintained. The results showed that in a BFT system cultivation currently used by producers with densities ranging between 300-450 cam/m³, at temperatures of 30 to 28°C and SST at 500 mg / L, the OD can decrease dramatically after the supply failure of aeration causing great mortalities between 60 minutes and 100 minutes.

MICROBIOTA E PERFIL DE RESISTÊNCIA A ANTIMICROBIANOS EM CARCAÇAS CONGELADAS DE FRANGO DE PRODUÇÃO CONVENCIONAL E CERTIFICADAS COMO DE CRIAÇÃO COM RESTRIÇÃO DE USO DE ANTIMICROBIANOS

O aumento e disseminação de bactérias resistentes a antimicrobianos é considerado um problema global de saúde pública. Entre as causas desse problema são frequentemente citados o uso indiscriminado de antimicrobianos em humanos, animais de produção e agricultura. Estudos têm demonstrado os animais de produção como importantes reservatórios de bactérias resistentes a antimicrobianos devido à pressão de seleção exercida pelo uso de antibióticos durante sua criação. Os alimentos de origem animal podem servir de veículo para micro-organismos patogênicos resistentes a antimicrobianos, ou mesmo para bactérias comensais portadoras de genes de resistência, os quais podem ser transmitidos para a microbiota de humanos. As soluções propostas para esse problema vão desde o banimento do uso de antimicrobianos importantes para a saúde humana com a finalidade de aditivos zootécnico em animais até a mudança para sistemas de criação alternativos como as produções orgânica e livre de antibióticos. O impacto dessas medidas em animais de criação intensiva como o frango ainda está sendo avaliado, bem como as possíveis diferenças em termos da presença de marcadores fenotípicos e genotípicos de resistência a antimicrobianos nos produtos originados de sistemas alternativos. Sendo assim, o presente estudo objetivou comparar grupos de carcaças congeladas de frango com selo de produção orgânica (GO) ou livre de antibióticos (GL) em relação àqueles de produção convencional (GC), nos seguintes aspectos: i) diferença de padrões de resistência a antimicrobianos em Escherichia coli genérica isoladas a partir das carcaças; ii) presença de bactérias produtoras de beta-lactamases de espectro estendido (ESBL); e iii) diferença da microbiota e dos perfis de genes de resistência a antimicrobianos presentes nas carcaças. Para tanto, 24 frangos congelados embalados na indústria pertencentes a cada um dos três grupos foram adquiridos no comércio varejista, descongelados e submetidos individualmente à lavagem com água peptonada. Para avaliação do perfil fenotípico de resistência, 216 cepas de E. coli isoladas do líquido de lavagem foram avaliadas frente à 12 antimicrobianos. A pesquisa de E. coli-ESBL foi realizada por isolamento seletivo a partir do líquido de lavagem, de acordo com o protocolo elaborado pela European Union Reference Laboratory Antimicrobial Resistance, seguido da avaliação do perfil fenotípico de resistência a 19 antimicrobianos nas cepas confirmadas como produtoras de ESBL. Um total de 24 cepas de E. coli produtoras de ESBL foram escolhidas, submetidas a sequenciamento completo do genoma e avaliadas in sílico quanto à filogenia e a presença de genes de resistência a antimicrobianos. A caracterização da microbiota bacteriana e do metarresistoma foram realizadas por metagenômica shotgun, a partir do sequenciamento de alto desempenho do DNA total dos produtos de lavagem das carcaças. A resistência a pelo menos um antimicrobiano foi observada em 59,2% (128/216) do total das cepas de E. coli independente do grupo. As maiores frequências de resistência foram à tetraciclina (TET; 32,4%), trimetoprima (TRI; 28,2%), ampicilina (AMP; 25,0%) e ácido nalidíxico (NAL; 18,5%). Não foram detectadas cepas resistentes à colistina, meropenem e tigeciclina. Os valores de MIC50 ficaram abaixo do ponto de corte clínico (CLSI, 2020) e do ponto de corte epidemiológico (ECOFF) nos três grupos de amostras. Em relação aos valores de MIC90, NAL, AMP e TET apresentaram valores acima do ponto de corte clínico e epidemiológico independente do grupo. Além disso, o grupo GO apresentou MIC90 acima do ponto de corte clínico para gentamicina e GL ultrapassou este ponto de corte para gentamicina e cefotaxima. A partir do modelo de regressão de Poisson verificou-se que, tomando GC como referência, houve diferença no sentido de maior ocorrência de cepas de E. coli totalmente suscetíveis, menor frequência de multirresistência, e menor número de cepas resistentes à ampicilina e ácido nalidíxico em GO. Em GL, apenas a menor frequência de resistentes à ampicilina em relação a GC foi demonstrada. Escherichia coli-ESBL foi encontrada em 39% dos frangos analisados. Oito carcaças apresentaram o perfil fenotípico ESBL/pAmpC, representando 23,2% (17/73) das cepas ESBL. As maiores frequências de resistência em E. coli-ESBL foram detectadas frente a ácido nalidíxico, ceftiofur, cefepime, sulfametoxazol+trimetoprim e tetraciclina. A frequência de E. coli-ESBL multirresistente foi de 76,7%. Todos os isolados foram suscetíveis à meropenem, amicacina, nitrofurantoína e colistina. O resistoma das cepas E. coli-ESBL sequenciadas identificou a presença de 95 genes de resistência distintos. Dentre os genes que conferem resistência aos betalactâmicos, foram identificados genes codificadores de enzimas do tipo AmpC (blaCMY-2) e ESBL (blaCTX-M-2, blaCTX-M-8, blaCTX-M-55, blaSHV-2A e blaTEM-141-1). Foram identificados 18 Tipos de Sequência (ST) e 15 sorotipos distintos nessas cepas, dentre eles ST131 e ST648, os quais são importantes patógenos para humanos. Quanto à caracterização da microbiota das amostras, não houve diferença entre os grupos em relação a abundância dos principais filos e classes presentes. O principal filo identificado foi Proteobacteria, enquanto as famílias Pseudomonadaceae, Moraxellaceae e Enterobacteriaceae foram as mais frequentes. As análises do metarresistoma demonstraram maior abundância de genes de resistência em GC. Os genes mais frequentemente identificados codificam resistência a betalactâmicos e aminoglicosídeos. Vinte e nove genes foram comuns aos três grupos, incluindo os genes que conferem resistência a betalactâmicos, aminoglicosídeos e tetraciclinas, além de genes de bombas de efluxo que podem conferir resistência a mais de uma categoria de antimicrobianos. Conclui-se que frangos congelados com selo de produção orgânica e livre de antibióticos apresentam perfis de genes de resistência, microbiota, presença de E. coli produtora de ESBL e prevalência de resistência fenotípica a antimicrobianos semelhantes ao encontrado em frangos de criação convencional. Entretanto, frangos com selo de produção orgânica apresentam maior prevalência de E. coli genérica totalmente suscetível a antimicrobianos importantes para humanos, menor prevalência de cepas multirresistentes e menor frequência de cepas resistentes à ampicilina e ácido nalidíxico do que frangos de produção convencional. De forma similar, a abundância de genes de resistência presentes em frangos congelados de produção orgânica é menor do que a encontrada em frangos de produção convencional. Essas observações indicam que há menor pressão de seleção de resistência a antimicrobianos nos sistemas de produção orgânica e que esse fato tem reflexo no produto ofertado ao consumidor.

ABSTRACT The increase and dissemination of antimicrobial resistant bacteria is considered a global public health problem. Among their causes the indiscriminate use of antimicrobials in humans, animal production and agriculture are often cited. Studies have pointed out food-animals as important reservoirs of bacteria resistant to antimicrobials caused by the selection pressure exerted by the use of antibiotics during their rearing. Meat and other foods of animal origin, in turn, can be a vehicle for pathogenic or commensal microorganisms that, in this way, can reach the consumer, disseminating resistance genes in the human microbiota. The proposed solutions to this problem can range from banning the use of antimicrobials important for human health in animals, to the adoption of alternative farming systems such as organic production. The impact of these measures on intensive reared livestock, such as poultry, as well as the differences in terms of the presence of phenotypic and genotypic markers of antimicrobial resistance in products originating from alternative systems have been studied. Thus, the present study aimed at comparing groups of frozen chicken carcasses certificated as from organic production (GO) or antibiotic-free production (GL) with those of conventional production (GC), in the following aspects: i) difference in antimicrobial resistance patterns of generic E. coli isolated from carcasses; ii) presence of extended-spectrum -lactamase producing bacteria (ESBL); and iii) difference in the microbiota and profiles of antimicrobial resistance genes present in the carcasses. For this purpose, 24 frozen chicken packaged in the industry belonging to each of the three groups were purchased in supermarkets, thawed and subjected to individual peptone water rinsing. For the determination of the phenotypic resistance profile of E. coli, 216 strains isolated from the rinsing liquid were evaluated against 12 antimicrobials according to CLSI/2020 and EUCAST. The E. coli-ESBL survey was carried out by selective isolation, according to the protocol elaborated by the European Union Reference Laboratory Antimicrobial Resistance, followed by the evaluation of the phenotypic resistance profile to 19 antimicrobials in the strains confirmed as ESB-producers. A total of 23 strains of ESBL-producer E. coli were chosen, subjected to genomic sequencing and analyzed for the presence of antimicrobial resistance genes and phylogenetics. The characterization of the bacterial microbiota and the metarresistoma were carried out by sequencing the DNA obtained from pooled rinse-fluids of carcasses from each group, using the shotgun approach. Resistance to at least one antimicrobial was observed in 59.2% (128/216) of E. coli strains regardless of the group. The highest frequencies of resistant strains were reported to tetracycline (TET; 32.4%), trimethoprim (TRI; 28.2%), ampicillin (AMP; 25.0%) and nalidixic acid (NAL; 18.5%). Strains resistant to colistin, meropenem and tigecycline were not detected. The MIC50 was below both the clinical cutoff point (CLSI, 2020) and the epidemiological cutoff point (ECOFF) in E. coli strains belonging to the three sample groups. Regarding the MIC90, NAL, AMP and TET presented values above the clinical and epidemiological cutoff point regardless of the group. In addition, the GO group presented MIC90 above the clinical cutoff point for gentamicin and GL exceeded this cutoff point for gentamicin and cefotaxime (GL). The Poisson regression model, using GC as the reference, showed a higher frequency fully susceptible, and lower frequency of multidrug resistance, and fewer strains resistant to ampicillin and nalidixic acid. in E. coli strains from GO. In GL, only the lowest frequency of ampicillin resistant compared to GC was demonstrated. ESBL-producer E. coli was found in 39% of the chickens analyzed. Eight carcasses showed the ESBL/pAmpC phenotypic profile, accounting for 23.2% (17/73) of the ESBL-producer strains. The highest frequencies of resistance in E. coli-ESBL were detected against nalidixic acid, ceftiofur, cefepime, sulfamethoxazole + trimethoprim and tetracycline. The frequency of multidrug-resistant E. coli-ESBL was 76.7%. All isolates were susceptible to meropenem, amikacin, nitrofurantoin and colistin. The resistome of the sequenced E. coli-ESBL strains identified the presence of 95 distinct resistance genes. Among the genes that confer resistance to beta-lactams, genes encoding enzymes of the AmpC-type (blaCMY-2) and ESBL (blaCTX-M-2, blaCTX-M-8, blaCTX-M-55, blaSHV-2A and blaTEM- 141-1) were found. Eighteen Sequence Types (ST) and 15 distinct serotypes were identified in these strains, among them ST131 and ST648, which are important pathogens for humans. As for the characterization of microbiota, there was no difference between groups regarding the abundance of the main phyla and classes present. The main phylum identified was Proteobacteria, while the families Pseudomonadaceae, Moraxellaceae and Enterobacteriaceae were the most frequent. The analysis of the metarresistoma demonstrated a greater abundance of resistance genes in GC. The most frequently identified genes code for resistance to beta-lactams and aminoglycosides. Twenty-nine genes were common to the three groups, including genes that confer resistance to beta-lactams, aminoglycosides and tetracyclines, as well as efflux pump genes that can confer resistance to more than one category of antimicrobials. It is concluded that frozen chickens with certification of organic production or free of antibiotics have profiles of resistance genes, microbiota, presence of ESBL-producing E. coli and prevalence of phenotypic resistance to antimicrobials similar to that found in conventionally reared chickens. However, chickens certificated as from organic production have a higher prevalence of generic E. coli that is full susceptible to important antimicrobials for humans, less prevalence of multidrug-resistant strains and less frequency of strains resistant to ampicillin and nalidixic acid than conventionally produced chickens. Similarly, the abundance of resistance genes present in frozen organic chickens is lower than that found in conventionally produced chickens. These observations indicate that there may be less pressure to select resistance to antimicrobials in organic production systems and that this fact has impact in the product offered to the consumer.

CONSUMO E DIGESTIBILIDADE DE SILAGENS DE MILHO REIDRATADO E UREIA POR OVINOS

Objetivou-se avaliar a utilização de silagem de milho reidratado com inclusão de ureia convencional ou protegida e o tratamento do milho inteiro tratado com ureia convencional ou protegida no consumo voluntário e na digestiblidade das dietas, e avaliar a eficiência econômica na alimentação de ovinos. Foram utilizados 5 ovinos machos não castrados, adultos da raça Morada Nova. Os animais foram distribuídos em delineamento Quadrado Latino 5 x 5 x 5 (cinco animais, cinco períodos e cinco tratamentos), sendo elaborado 5 dietas experimentais: controle, milho moído (MM) silagem de milho moído com suplementação no cocho com 30 g/animal/dia de ureia convencional, (SMM+UC), silagem de milho moído com suplementação no cocho de 30 g/animal/dia de ureia protegida (SMM+UP), milho inteiro tratado com ureia convencional (MIUC), milho inteiro tratado com ureia protegida (MIUP). O volumoso foi a base de silagem de sorgo e a fonte proteica foi a base de farelo de soja. O milho foi ensilado utilizando 30% de água e 70% de milho moído e ensilado em bombas de plástico. O milho inteiro foi tratado com 3% de ureia com base na matéria natural, diluindo a ureia em água (20% da matéria natural) e ensilado em bombas plásticas. Os dois tratamentos foram abertos após 30 dias da confecção. O experimento foi dividido em cinco períodos de 14 dias. Não houve diferença significativa (P>0,05) entre os consumos de matéria seca (CMS), matéria orgânica (CMO), proteína bruta (CPB), extrato etéreo (CEE), consumo de celulose (CCEL), Hemicelulose (CHEM), fibra em detergente ácido (CFDA), fibra em detergente neutro (CFDN) e proteína insolúvel em detergente neutro (CPIDN), entre tanto, houve diferença significativa (P<0,05) no consumo de proteína insolúvel em detergente ácido (CPIDA), carboidratos não fibrosos (CCNF) e carboidratos totais (CCHT) sendo maiores nos tratamentos MIUC e MIUP. Não houve diferença (P>0,05) no coeficiente de digestiblidade da proteína bruta (CDPB). Entre tanto, houve diferença significativa (P<0,05) para coeficiente de digestibilidade da matéria seca (CDMS), matéria orgânica (CDMO), extrato etéreo (CDEE), fibra em detergente neutro (CDFDN), carboidratos totais (CDCHT) e carboidratos não fibrosos (CDCFN). A avaliação econômica indicou que os tratamentos contendo a silagem de milho moído reidratado (SMM) apresentou melhor índice de eficiência econômica, índice de custo e apresentou economia com milho de 30% em relação ao milho moído seco silagens de milho reidratado não foram eficientes em melhorar a digestiblidade da matéria seca e demais nutrientes para ovinos com o nível de inclusão de concentrado utilizado neste tratamento, porém foi possível obter uma economia de 30%.

The objective was to evaluate the use of rehydrated corn silage with the inclusion of conventional or protected urea and the treatment of whole corn treated with conventional or protected urea in voluntary consumption and digestibility of diets, and to evaluate the economic efficiency in feeding sheep. Five non-castrated male sheep, adults of the Morada Nova breed, were used. The animals were distributed in a Latin Square design 5 x 5 x 5 (five animals, five periods and five treatments), with 5 experimental diets being elaborated: control, ground corn (MM) ground corn silage with supplementation in the trough with 30 g / animal / day of conventional urea, (SMM + UC), ground corn silage supplemented in a 30 g trough / animal / day of protected urea (SMM + UP), whole corn treated with conventional urea (MIUC), whole corn treated with protected urea (MIUP). The roughage was based on sorghum silage and the protein source was based on soybean meal. The corn was ensiled using 30% water and 70% ground corn and ensiled in plastic pumps. Whole corn was treated with 3% urea based on natural matter, diluting urea in water (20% natural matter) and ensiled in plastic pumps. The two treatments were opened after 30 days of preparation. The experiment was divided into five periods of 14 days. There was no significant difference (P> 0.05) between dry matter (CMS), organic matter (CMO), crude protein (CPB), ether extract (EEC), cellulose consumption (CCEL), Hemicellulose (CHEM) , acid detergent fiber (CFDA), neutral detergent fiber (CFDN) and neutral detergent insoluble protein (CPIDN), however, there was a significant difference (P <0.05) in the consumption of acid detergent insoluble protein (CPIDA), non-fibrous carbohydrates ( CCNF) and total carbohydrates (CCHT) being higher in the MIUC and MIUP treatments. There was no difference (P> 0.05) in the crude protein digestibility coefficient (CDPB). However, there was a significant difference (P<0.05) for dry matter digestibility coefficient (CDMS), organic matter (CDMO), ether extract (CDEE), neutral detergent fiber (CDFDN), total carbohydrates (CDCHT) and non-fibrous carbohydrates (CDCFN). The economic evaluation indicated that the treatments containing rehydrated corn maize silage (SMM) showed a better economic efficiency index, cost index and showed savings with corn of 30% in relation to dry milled corn silages of rehydrated corn were not efficient in improving the digestibility of dry matter and other nutrients for sheep with the level of inclusion of concentrate used in this treatment, however it was possible to obtain savings of 30%.

Genotypic and phenotypic detection of efflux pump in Rhodococcus equi

The req_39680 gene, associated to a putative efflux system, was detected in 60% (54/90) of R. equi isolates by PCR. The phenotypic expression of efflux mechanism was verified in 20% of the isolates using ethidium bromide. For the first time, the expression of efflux mechanism was demonstrated in R. equi.

A PRODUÇÃO INTEGRADA NA CARCINICULTURA BRASILEIRA

O camarão é considerado uma iguaria gastronômica, amplamente aceito e demandado pelos consumidores de diferentes regiões do Brasil e do mundo. Grande parte do camarão produzido no Brasil vem de um ramo específico da aquicultura chamado de carcinicultura. A cadeia produtiva da carcinicultura marinha é fundamentalmente composta por três elos centrais, que lhe conferem características de agronegócio e que precisam ser operacionalizados de forma integrada: (i) o segmento de reprodução e larvicultura; (ii) as fazendas de crescimento e engorda; (iii) as unidades de processamento/beneficiamento e comercialização do produto final para o mercado consumidor. O processo produtivo de camarões em viveiros é relativamente complexo, envolve mão de obra qualificada e implica em significativos investimentos financeiros. No entanto, a atividade enfrenta uma série de desafios no Brasil, como morosidade e grande burocracia relacionadas ao processo de licenciamento ambiental; conflitos com outros usuários de áreas costeiras, como jangadeiros, marisqueiras, pescadores artesanais, e com outras atividades extrativistas; problemas relacionados ao potencial poluidor da atividade, principalmente devido aos efluentes provenientes dos sistemas de cultivo e ainda, nos últimos anos, os produtores brasileiros passaram ainda a conviver com graves surtos de enfermidades que afetam os camarões cultivados, como é o caso da Síndrome da Mancha Branca (WSSV). Diante deste cenário instável e desafiador, os carcinicultores brasileiros passaram a buscar alternativas para aumentar a eficiência do processo produtivo. Nesse contexto surge a Produção Integrada (PI), um regime voluntário de produção que visa melhoria do controle sanitário, proporcionando maior eficiência e domínio sobre o processo produtivo e, ainda, atendendo as exigências dos mercados internacionais. O principal objetivo desse trabalho foi caracterizar a cadeia produtiva da carcinicultura marinha brasileira na fase de engorda e avaliar os desafios e potencialidades do regime de produção integrada (PI) como alternativa para promover o desenvolvimento do setor. Por meio de levantamento bibliográfico sistemático (metodologia PRISMA - preferred reporting items for systematic reviews and meta-analyses) foi possível a caracterização do sistema de engorda de camarões marinhos no Brasil e também a contabilização do uso de energia nos principais processos operacionais envolvidos nessa fase do cultivo. Essa análise gerou os dados utilizados na elaboração de duas fazendas hipotéticas de camarão, uma gerida e operada nos moldes convencionais e outra de acordo com os princípios da produção integrada. Ambas as fazendas têm 18 ha de área total e possuem quatro berçários (55 m3 cada) e nove viveiros de 1 ha; utilizam ração e fertilizantes; possuem como estruturas acessórias depósitos, refeitório, banheiros, vestiários, garagem e vias de acesso principais e secundárias. Nelas, o bombeamento de água (bombas de 20 hp) e a aeração (aerador tipo pá 4hp) são realizados mecanicamente. Ambas adotam ainda sistema operacional bifásico e regime de produção semi-intensivo. Na fazenda convencional a densidade inicial média é de 43 camarões/m2, ciclo de cultivo de 90 dias e produtividade estimada em 3.500,00 kg/ha. Com base nessas características, o custo total de energia calculado foi de 834.483,87 MJ. Após realização de revisão bibliográfica, foram estabelecidos critérios para a aplicação prática dos princípios da PI para a carcinicultura. Em seguida, analisou-se de forma conceitual comparativa, a PI e a produção convencional (PC), avaliando, sob aspectos sociais, econômicos, ambientais e de gestão, a utilização da PI como ferramenta para o desenvolvimento setorial da carcinicultura no Brasil. Os resultados indicam que os principais desafios para o sucesso da PI no Brasil são: i) ausência de padrões técnicos específicos para a certificação de fazendas de camarão; ii) possibilidade de aumentar os custos de investimento envolvidos na instalação e operação de empreendimentos certificados; e (iii) não diferenciação no mercado interno de produtos certificados e não certificados. Por outro lado, a PI introduz forças superiores à da PC: i) adoção de uma visão sistêmica da cadeia produtiva; ii) rastreabilidade de produtos e processos; iii) redução de barreiras ao licenciamento ambiental de fazendas de aquicultura; iv) redução de riscos e danos causados por doenças; e v) otimização no uso de recursos naturais, insumos e energia. Por fim, foram realizadas simulações para análise de viabilidade econômica entre os regimes de PC, utilizando-se a fazenda hipotética supracitada, e de PI de camarões marinhos em viveiros. A PI apresentou indicadores microeconômicos inferiores aos da PC, no entanto, os resultados obtidos não decretam a sua inviabilidade, pelo contrário, apontam um caminho a ser trilhado e aperfeiçoado. Nesse sentido, os resultados aqui obtidos poderão ser úteis como ponto de partida para a redução das diferenças entre empreendimentos convencionais e integrados e para a viabilização da produção integrada na carcinicultura.

Shrimp is considered a gastronomic delicacy, widely accepted and demanded by consumers from different regions of Brazil and the world. Most of the shrimp produced in Brazil comes from a specific part of the aquaculture called "shrimp farming". The production chain of marine shrimp farming consists in three central links, which confers the agribusiness characteristics and which need to be operated in an integrated way: (i) the reproduction and larviculture segment; (ii) growth-out phase farms; (iii) the processing and marketing units of the final product for the consumer market. The nursery process of cultivated shrimp is a relatively complex activity and requires technical known-how and significant financial investments. However, the activity faces a series of challenges in Brazil, such as bureaucracy and delaying related to the environmental licensing process; conflicts with users of the coastal areas, such as shellfish collectors, artisanal fishermen, and other extractive activities; problems related to the polluting potential of the activity, mainly as a result of the production of effluents at the cultivation systems. Another challenge that Brazilian shrimp farmers have been facing recently is related with the emergence of diseases, such as the white spot syndrome virus (WSSV), that caused serious outbreaks on the shrimp production. Faced with this unstable and challenging scenario, the Brazilian farmers started to look for alternatives to increase the efficiency of the production process. In this context, the integrated production (IP) regime emerges. The IP is a voluntary production regime that aim to improve sanitary control, subsidize the increase of efficiency and known-how to the production process and, also, meet the demands of international markets. The main objective of this work was to characterize the production chain of Brazilian marine shrimp farming, during growth-out phase, and to evaluate the challenges and potentialities of the IP regime as an alternative to promote the development of the sector. Through a systematic literature review (PRISMA methodology), it was possible to characterize the Brazilian shrimp growth-out phase system and also determinate the use of energy in the main operational processes involved in this phase of the cultivation. The analysis generated data used for the elaboration of two hypothetical shrimp farms, one managed and operated in the conventional way and the other according to the principles of IP. Both farms have 18 ha of total area and have four nurseries (55 m3 each) and nine ponds of 1 ha; use feed and fertilizer; have as accessory structures deposits, refectory, bathrooms, changing rooms, garage and main and secondary access roads. In these farms, water pumping (20 hp pumps) and aeration (paddle aerator - 4 hp) are performed mechanically. They both also adopt two-phase operating system and semi-intensive production regime. In the conventional farm, the average initial density is 43 shrimps/m2, 90 days growing-cycle and estimated productivity of 3,500,00 kg/ha. Based on these characteristics, the total energy cost calculated was 834,483.87 MJ. After a bibliographic review, we established the criteria for the practical application of IP principles for shrimp farming. Next, the IP and conventional production (CP) regimes were analyzed in a comparative conceptual way, evaluating, under social, economic, environmental and management aspects, the use of IP as a tool for the development of shrimp farming in Brazil. The main challenges for the success of IP in Brazil are: i) lack of specific technical standards for the certification of shrimp farms; ii) the possibility of increasing the investment costs involved in the implementation and operation of certified enterprises; and (iii) non-differentiation in the internal market of certified and non-certified products. On the other hand, IP introduces forces superior to the PC: i) adoption of a systemic view of the production chain; ii) traceability of products and processes; iii) reduction of barriers to environmental licensing of the farms; iv)reduction of risks and damages caused by diseases; and v) optimization in the use of natural resources, production inputs and energy. Finally, simulations were carried out to analyze the economic viability among the PC regime, using the hypothetical farm mentioned above, and the IP of shrimp farming during the growth-out phase. The PI presented microeconomic indicators lower than those of the CP. However, the results obtained do not decree its lack of feasibility, on the contrary, they point a way to be traced and perfected. Thus, the results obtained here may be useful as a base foundation for reducing differences between CP and IP farms and for the viability of the implementation of the IP regime at shrimp farming in Brazil.

P-glycoprotein and MRP1 expression in tissues from dogs with visceral leishmaniasis / Expressão da glicoproteína-P e MRP1 em tecidos de cães com leishmaniose visceral

P-Glycoprotein (P-gp) and multidrug resistance-associated protein 1 (MRP1) are efflux pumps responsible for the MDR phenotype (multidrug resistance). In this work, we will investigate the immunohistochemical expression of P-gp and MRP1 in 24 tissue samples from dogs with Leishmania infantum (syn. L. chagasi) and evaluate whether canine visceral leishmaniasis (CVL) induces MDR in dogs. The expectation is that the results obtained from this research may offer prospects for a safer and more effective therapeutic approach for this disease. Findings illustrated that the expression of P-gp in CVL affected tissue samples (p<0.05) was greater than those of the control group, with the exception of skin tissue samples which did not differ. However, only the adrenal gland samples affected by LVC expressed significantly more MRP1 (p<0.05) than the control group. The expressions of P-gp and MRP1 were lower (p<0.05) in LVC positive spleen and skin samples in comparison with other tissues. These results suggest that the lack of a parasitological cure could be due to the high expression of P-gp and MRP1 in the liver, adrenal glands, and kidneys, which block the action of parasitacidal drugs recommended in treatment.

Glicoproteína-P (gp-P) e proteína de resistência a múltiplas drogas (MRP1) são bombas de efluxo responsáveis pelo fenótipo MDR (resistência a múltiplas drogas). Neste trabalho, investigamos a expressão por imuno-histoquímica da gp-P e MRP1 em amostras de tecidos de 24 cães com Leishmania infantum (syn. L. chagasi), e avaliamos se a leishmaniose visceral canina (LVC) induz a MDR em cães, tendo a expectativa de que os resultados obtidos possam oferecer perspectivas de uma abordagem terapêutica mais segura e eficaz nesta doença. Os resultados mostraram que a expressão da gp-P nas amostras de cães com LVC foi maior (p<0,05) em todos os tecidos em comparação ao grupo controle, com exceção da pele, que não diferiu. Entretanto, apenas as glândulas adrenais nas amostras LVC, em comparação as controle, expressaram significativamente mais MRP1 (p<0,05). As expressões de gp-P e MRP1 foram menores (p<0,05) no baço e pele das amostras LVC positivas, em comparação aos demais tecidos. Os resultados sugerem que a falha da cura parasitológica poderia ser devido à alta expressão da gp-P e MRP1 no fígado, adrenal e rins, por impedir a ação parasiticida dos fármacos recomendados no tratamento.

P-glycoprotein and MRP1 expression in tissues from dogs with visceral leishmaniasis / Expressão da glicoproteína-P e MRP1 em tecidos de cães com leishmaniose visceral

P-Glycoprotein (P-gp) and multidrug resistance-associated protein 1 (MRP1) are efflux pumps responsible for the MDR phenotype (multidrug resistance). In this work, we will investigate the immunohistochemical expression of P-gp and MRP1 in 24 tissue samples from dogs with Leishmania infantum (syn. L. chagasi) and evaluate whether canine visceral leishmaniasis (CVL) induces MDR in dogs. The expectation is that the results obtained from this research may offer prospects for a safer and more effective therapeutic approach for this disease. Findings illustrated that the expression of P-gp in CVL affected tissue samples (p<0.05) was greater than those of the control group, with the exception of skin tissue samples which did not differ. However, only the adrenal gland samples affected by LVC expressed significantly more MRP1 (p<0.05) than the control group. The expressions of P-gp and MRP1 were lower (p<0.05) in LVC positive spleen and skin samples in comparison with other tissues. These results suggest that the lack of a parasitological cure could be due to the high expression of P-gp and MRP1 in the liver, adrenal glands, and kidneys, which block the action of parasitacidal drugs recommended in treatment.(AU)

Glicoproteína-P (gp-P) e proteína de resistência a múltiplas drogas (MRP1) são bombas de efluxo responsáveis pelo fenótipo MDR (resistência a múltiplas drogas). Neste trabalho, investigamos a expressão por imuno-histoquímica da gp-P e MRP1 em amostras de tecidos de 24 cães com Leishmania infantum (syn. L. chagasi), e avaliamos se a leishmaniose visceral canina (LVC) induz a MDR em cães, tendo a expectativa de que os resultados obtidos possam oferecer perspectivas de uma abordagem terapêutica mais segura e eficaz nesta doença. Os resultados mostraram que a expressão da gp-P nas amostras de cães com LVC foi maior (p<0,05) em todos os tecidos em comparação ao grupo controle, com exceção da pele, que não diferiu. Entretanto, apenas as glândulas adrenais nas amostras LVC, em comparação as controle, expressaram significativamente mais MRP1 (p<0,05). As expressões de gp-P e MRP1 foram menores (p<0,05) no baço e pele das amostras LVC positivas, em comparação aos demais tecidos. Os resultados sugerem que a falha da cura parasitológica poderia ser devido à alta expressão da gp-P e MRP1 no fígado, adrenal e rins, por impedir a ação parasiticida dos fármacos recomendados no tratamento.(AU)

Aeromonas spp.: fatores de virulência e perfis de resistência a antimicrobianos e metais pesados

Bacteria from Aeromonas spp. genus are considered as opportunistic pathogens that can carry many virulence factors. The resistance phenomenon to antimicrobial drugs and heavy metals is another problem and may occurs by several factors, as the indiscriminate usage, environmental pollution and the presence of resistance determinants as efflux pumps, being many of them transmitted by genetic mobile elements as plasmid. The purpose of this article is to review about the virulence factors, antimicrobial and heavy metal resistance, as well as the mechanisms that can help its transfer among Aeromonas genus bacteria. Studies of the resistance mechanisms associated to molecular biology could produce information about control and prophylaxis methods to this disease of impact on aquatic organisms, man and environment.

As bactérias do gênero Aeromonas spp. são considerados como patógenos oportunistas carreadores de múltiplos fatores de virulência. O fenômeno da resistência aos antimicrobianos e metais pesados constitui outro problema, podendo ocorrer por diferentes fatores, dentre eles o uso indiscriminado de agentes antimicrobianos, poluição ambiental e a presença de mecanismos de resistência, como bombas de efluxo, sendo que muitos destes podem ser transmitidos por elementos genéticos móveis como os plasmídeos. O objetivo desse artigo é fazer uma revisão bibliográfica sobre os fatores de virulência, resistência a antimicrobianos e metais pesados, bem como os mecanismos que podem intervir nessa resistência e sua transferência entre bactérias do gênero Aeromonas. Os estudos dos fatores envolvidos no mecanismo de surgimento da resistência, aliado aos estudos de biologia molecular, fornecem subsídios para elaboração de métodos de controle e profilaxia dessas enfermidades de impacto aos organismos aquáticos, seres humanos e meio ambiente.

COMBINAÇÃO DE TÉCNICAS FENOTÍPICAS PARA DISTINGUIR Candida albicans DE Candida dubliniensis E UMA INVESTIGAÇÃO DOS MECANISMOS DE RESISTÊNCIA A DERIVADOS AZÓLICOS EM ISOLADOS DE Candida albicans DE ORIGEM ANIMAL

Leveduras do gênero Candida constituem os principais patógenos fúngicos para homens e animais. Embora Candida albicans ainda ocupe uma posição de destaque entre os casos de infeções, espécies não-albicans vem tendo importância aumentada nas últimas décadas. Além disso, isolados de C. albicans resistentes a derivados azólicos tem sido descritos na prática clínica humana e em cepas de origem veterinária. O presente estudo teve como objetivo reabordar a identificação laboratorial de isolados veterinários de C. albicans resistentes a derivados azólicos, propondo combinação de métodos fenotípicos para distinguir as espécies crípticas C. albicans e Candida dubliniensis. Além disso, almejou-se investigar os mecanismos de resistência das cepas estudadas. Para tanto, trinta e sete cepas veterinárias de C. albicans resistentes a derivados azólicos e três cepas humanas de C. dubliniensis foram submetidas à identificação fenotípica por prova do tubo germinativo, microcultivo em ágar cornmeal, semeadura em ágar cromogênico, semeadura em ágar semente de girassol, prova de opacificação em ágar Tween 80 e reação em cadeia da polimerase (PCR) espécie-específica. Para estudo dos mecanismos de resistência, cepas de C. albicans foram estudadas com testes de efluxo de rodamina 6G (n = 11), determinação do conteúdo de ergosterol (n = 6) e testes de expressão dos genes CDR1, CDR2, MDR1 e ERG11 (n = 30). As cepas estudadas apresentaram prova do tubo germinativo positiva e produção de clamidoconídios em ágar cornmeal. Trinta e cinco cepas (35/37) apresentaram coloração verde em ágar cromogênico. Em ágar semente de girassol, 36 cepas (36/37) apresentaram padrão de colônia lisa, e no ágar Tween 80, 34 (34/37) apresentaram opacificação em menos de 5 dias. Todas as cepas testadas apresentaram produto específico na PCR, sendo confirmadas como C. albicans. As cepas de C. dubliniensis apresentaram colônias de coloração verde no ChromoAgar Candida, aspecto rugoso no ágar girassol, não opacificaram o meio em ágar Tween 80 em até 12 dias e não apresentaram produto específico na PCR. Nos estudos de resistência, as cepas resistentes aos azólicos apresentaram valores de diferença de unidade de fluorescência relativa maiores que os isolados sensíveis nos estudos com rodamina 6G, demonstrando assim maior atividade de bombas de efluxo ATP-dependentes. Não houve diferença significativa no conteúdo de ergosterol entre as cepas estudadas. Foi verificado que 73,3% (22/30) dos isolados apresentaram superexpressão de um ou mais genes, sendo 40,9%, 18,2%, 59,1% e 54,5% superexpressão de CDR1, CDR2, MDR1 e ERG11, respectivamente. Nenhum isolado superexpressou os quatro genes simultaneamente. Por fim, conclui-se que a combinação de técnicas fenotípicas leva à distinção confiável entre C. albicans e C. dubliniensis, reservando as técnicas moleculares para contextos mais específicos. O padrão de resistência a derivados azólicos apresentado pelas cepas estudadas é multifatorial, incluindo, no mínimo, atividade elevada de bombas de efluxo e a superexpressão gênica.

Yeasts of genus Candida are the main fungal pathogens for humans and animals. Although Candida albicans still occupies a prominent position among cases of infections, non-albicans species have increased in the last decades. In addition, azole-resistant C. albicans have been described in human clinical practice and in strains of veterinary origin. The objective of this study was to reevaluate laboratory identification of azole-resistant C. albicans from veterinary isolates, proposing a combination of phenotypic methods for the reliable identification of the species. In addition, this study aimed to investigate the resistance mechanisms of the strains. Thirty-seven veterinary strains of azole-resistant C. albicans and three human strains of C. dubliniensis were submitted to phenotypic identification by germ tube test, micromorphological analysis on cornmeal agar, growth on chromogenic agar, growth on sunflower seed agar, opacification test on Tween 80 agar and species-specific PCR. For the study of resistance mechanisms, C. albicans strains were evaluated for efflux of 6G rhodamine (n=11), determination of ergosterol content (n=6) and expression of CDR1, CDR2, MDR1 and ERG11 genes (n=30). All studied strains presented positive germ tube test and production of chlamydoconidia on cornmeal agar. Thirty five strains (35/37) showed green colonies on chromogenic agar. On sunflower seed agar, 36 strains (36/37) presented a smooth colony pattern, and on Tween 80 agar, 34 (34/37) had opacification in less than 5 days. All strains tested showed specific product on PCR, which confirmed their identity as C. albicans. C. dubliniensis strains showed green colonies on ChromoAgar Candida, a rough appearance on sunflower agar, did not form opacification zone on Tween 80 agar, after up to 12 days, and did not present specific products in PCR. In resistance studies, azole resistant strains showed higher relative fluorescence unit difference values than sensitive isolates in efflux of 6G rhodamine tests, thus demonstrating increased activity of ATP-dependent efflux pumps. There was no significant difference in ergosterol content among the studied strains. It was verified that 73.3% (22/30) of the isolates presented overexpression of one or more genes, of which 40.9%, 18.2%, 59.1% and 54.5% strains overexpressed CDR1, CDR2, MDR1 and ERG11, respectively. No isolate overexpressed simultaneously the four genes. Finally, we conclude that the combination of phenotypic techniques leads to reliable differentiation of C. albicans and C. dubliniensis, reserving molecular techniques for more specific contexts. Resistance mechanisms to azole derivatives of the studied strains is multifactorial, including, at a minimum, the enhanced activity of efflux pump activity and the gene overexpression.

Aeromonas spp. fatores de virulência e perfis de resistência a antimicrobianos e metais pesados / Aeromonas spp. virulence factors and resistance patterns to antimicrobial and heavy metals

As bactérias do gênero Aeromonas spp. são considerados como patógenos oportunistas carreadores de múltiplos fatores de virulência. O fenômeno da resistência aos antimicrobianos e metais pesados constitui outro problema, podendo ocorrer por diferentes fatores, dentre eles o uso indiscriminado de agentes antimicrobianos, poluição ambiental e a presença de mecanismos de resistência, como bombas de efluxo, sendo que muitos destes podem ser transmitidos por elementos genéticos móveis como os plasmídeos. O objetivo desse artigo é fazer uma revisão bibliográfica sobre os fatores de virulência, resistência a antimicrobianos e metais pesados, bem como os mecanismos que podem intervir nessa resistência e sua transferência entre bactérias do gênero Aeromonas. Os estudos dos fatores envolvidos no mecanismo de surgimento da resistência, aliado aos estudos de biologia molecular, fornecem subsídios para elaboração de métodos de controle e profilaxia dessas enfermidades de impacto aos organismos aquáticos, seres humanos e meio ambiente.

AEROMONAS SPP.: VIRULENCE FACTORS AND RESISTANCE PATTERNS TO ANTIMICROBIAL AND HEAVY METALS. Bacteria from Aeromonas spp. genus are considered as opportunistic pathogens that can carry many virulence factors. The resistance phenomenon to antimicrobial drugs and heavy metals is another problem and may occurs by several factors, as the indiscriminate usage, environmental pollution and the presence of resistance determinants as efflux pumps, being many of them transmitted by genetic mobile elements as plasmid. The purpose of this article is to review about the virulence factors, antimicrobial and heavy metal resistance, as well as the mechanisms that can help its transfer among Aeromonas genus bacteria. Studies of the resistance mechanisms associated to molecular biology could produce information about control and prophylaxis methods to this disease of impact on aquatic organisms, man and environment.

Aeromonas spp. fatores de virulência e perfis de resistência a antimicrobianos e metais pesados / Aeromonas spp. virulence factors and resistance patterns to antimicrobial and heavy metals

As bactérias do gênero Aeromonas spp. são considerados como patógenos oportunistas carreadores de múltiplos fatores de virulência. O fenômeno da resistência aos antimicrobianos e metais pesados constitui outro problema, podendo ocorrer por diferentes fatores, dentre eles o uso indiscriminado de agentes antimicrobianos, poluição ambiental e a presença de mecanismos de resistência, como bombas de efluxo, sendo que muitos destes podem ser transmitidos por elementos genéticos móveis como os plasmídeos. O objetivo desse artigo é fazer uma revisão bibliográfica sobre os fatores de virulência, resistência a antimicrobianos e metais pesados, bem como os mecanismos que podem intervir nessa resistência e sua transferência entre bactérias do gênero Aeromonas. Os estudos dos fatores envolvidos no mecanismo de surgimento da resistência, aliado aos estudos de biologia molecular, fornecem subsídios para elaboração de métodos de controle e profilaxia dessas enfermidades de impacto aos organismos aquáticos, seres humanos e meio ambiente.(AU)

AEROMONAS SPP.: VIRULENCE FACTORS AND RESISTANCE PATTERNS TO ANTIMICROBIAL AND HEAVY METALS. Bacteria from Aeromonas spp. genus are considered as opportunistic pathogens that can carry many virulence factors. The resistance phenomenon to antimicrobial drugs and heavy metals is another problem and may occurs by several factors, as the indiscriminate usage, environmental pollution and the presence of resistance determinants as efflux pumps, being many of them transmitted by genetic mobile elements as plasmid. The purpose of this article is to review about the virulence factors, antimicrobial and heavy metal resistance, as well as the mechanisms that can help its transfer among Aeromonas genus bacteria. Studies of the resistance mechanisms associated to molecular biology could produce information about control and prophylaxis methods to this disease of impact on aquatic organisms, man and environment. (AU)