Resumo
ABSTRACT: The present study provides the first information about the safety of a new influenza viral vector vaccine expressing the Brucella ribosomal protein L7/L12 or Omp16 containing the adjuvant Montanide Gel01 in pregnant heifers. Immunization of pregnant heifers was conducted via the conjunctival (n=10) or subcutaneous (n=10) route using cross prime and booster vaccination schedules at an interval of 28 days. The vector vaccine was evaluated in comparison with positive control groups vaccinated with B. abortus S19 (n=10) or B. abortus RB51 (n=10) and a negative (PBS+Montanide Gel01; n=10) control group. Clinical studies, thermometry, assessment of local reactogenicity and observation of abortion showed that the vector vaccine via the conjunctival or subcutaneous route was completely safe for pregnant heifers compared to the commercial vaccines B. abortus S19 or B. abortus RB51. The only single adverse event was the formation of infiltration at the site of subcutaneous injection; this reaction was not observed for the conjunctival route.
RESUMO: O presente estudo fornece as primeiras informações sobre a segurança de uma nova vacina usando o vetor viral influenza para expressar as proteínas de Brucella L7/L12 ou Omp16, contendo o adjuvante Montanide Gel01 em novilhas prenhes. A imunização de novilhas prenhes foi realizada através das vias conjuntiva (n=10) ou subcutânea (n=10), empregadas na primovacinação e na dose de reforço. O intervalo foi de 28 dias. A vacina empregando o vetor foi comparada com os grupos de controle positivo, vacinados com B. abortus B19 (n=10) ou B. abortus RB51 (n=10) e um grupo de controle negativo (PBS + Montanide Gel01; n=10). Os estudos clínicos, termometria, reação local e observação do aborto mostraram que a vacina empregando o vetor, aplicada pela via conjuntival ou subcutânea, foi completamente segura para novilhas prenhes, em comparação com as vacinas comerciais B. abortus B19 ou B. abortus RB51. O único efeito adverso foi a formação de infiltrado no local da administração subcutânea; essa reação não foi observada no grupo vacinado pela via conjuntival.
Resumo
ABSTRACT: The present study provides the first information about the safety of a new influenza viral vector vaccine expressing the Brucella ribosomal protein L7/L12 or Omp16 containing the adjuvant Montanide Gel01 in pregnant heifers. Immunization of pregnant heifers was conducted via the conjunctival (n=10) or subcutaneous (n=10) route using cross prime and booster vaccination schedules at an interval of 28 days. The vector vaccine was evaluated in comparison with positive control groups vaccinated with B. abortus S19 (n=10) or B. abortus RB51 (n=10) and a negative (PBS+Montanide Gel01; n=10) control group. Clinical studies, thermometry, assessment of local reactogenicity and observation of abortion showed that the vector vaccine via the conjunctival or subcutaneous route was completely safe for pregnant heifers compared to the commercial vaccines B. abortus S19 or B. abortus RB51. The only single adverse event was the formation of infiltration at the site of subcutaneous injection; this reaction was not observed for the conjunctival route.
RESUMO: O presente estudo fornece as primeiras informações sobre a segurança de uma nova vacina usando o vetor viral influenza para expressar as proteínas de Brucella L7/L12 ou Omp16, contendo o adjuvante Montanide Gel01 em novilhas prenhes. A imunização de novilhas prenhes foi realizada através das vias conjuntiva (n=10) ou subcutânea (n=10), empregadas na primovacinação e na dose de reforço. O intervalo foi de 28 dias. A vacina empregando o vetor foi comparada com os grupos de controle positivo, vacinados com B. abortus B19 (n=10) ou B. abortus RB51 (n=10) e um grupo de controle negativo (PBS + Montanide Gel01; n=10). Os estudos clínicos, termometria, reação local e observação do aborto mostraram que a vacina empregando o vetor, aplicada pela via conjuntival ou subcutânea, foi completamente segura para novilhas prenhes, em comparação com as vacinas comerciais B. abortus B19 ou B. abortus RB51. O único efeito adverso foi a formação de infiltrado no local da administração subcutânea; essa reação não foi observada no grupo vacinado pela via conjuntival.
Resumo
The present study provides the first information about the safety of a new influenza viral vector vaccine expressing the Brucella ribosomal protein L7/L12 or Omp16 containing the adjuvant Montanide Gel01 in pregnant heifers. Immunization of pregnant heifers was conducted via the conjunctival (n=10) or subcutaneous (n=10) route using cross prime and booster vaccination schedules at an interval of 28 days. The vector vaccine was evaluated in comparison with positive control groups vaccinated with B. abortus S19 (n=10) or B. abortus RB51 (n=10) and a negative (PBS+Montanide Gel01; n=10) control group. Clinical studies, thermometry, assessment of local reactogenicity and observation of abortion showed that the vector vaccine via the conjunctival or subcutaneous route was completely safe for pregnant heifers compared to the commercial vaccines B. abortus S19 or B. abortus RB51. The only single adverse event was the formation of infiltration at the site of subcutaneous injection; this reaction was not observed for the conjunctival route.(AU)
O presente estudo fornece as primeiras informações sobre a segurança de uma nova vacina usando o vetor viral influenza para expressar as proteínas de Brucella L7/L12 ou Omp16, contendo o adjuvante Montanide Gel01 em novilhas prenhes. A imunização de novilhas prenhes foi realizada através das vias conjuntiva (n=10) ou subcutânea (n=10), empregadas na primovacinação e na dose de reforço. O intervalo foi de 28 dias. A vacina empregando o vetor foi comparada com os grupos de controle positivo, vacinados com B. abortus B19 (n=10) ou B. abortus RB51 (n=10) e um grupo de controle negativo (PBS + Montanide Gel01; n=10). Os estudos clínicos, termometria, reação local e observação do aborto mostraram que a vacina empregando o vetor, aplicada pela via conjuntival ou subcutânea, foi completamente segura para novilhas prenhes, em comparação com as vacinas comerciais B. abortus B19 ou B. abortus RB51. O único efeito adverso foi a formação de infiltrado no local da administração subcutânea; essa reação não foi observada no grupo vacinado pela via conjuntival.(AU)
Assuntos
Animais , Bovinos , Imunização , Brucelose Bovina , Testes ImunológicosResumo
Human adenoviruses (HAdV), members of the
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Adulto Jovem , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Infecções por Adenovirus Humanos/epidemiologia , Adenovírus Humanos/genética , Adenovírus Humanos/isolamento & purificação , Fezes/virologia , Infecções por Adenovirus Humanos/virologia , Adenovírus Humanos/classificação , Brasil , Norovirus/genética , Norovirus/isolamento & purificação , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real , Rotavirus/genética , Rotavirus/isolamento & purificação , Estações do AnoResumo
A maioria das informações sobre a leptospirose foi obtida a partir de infecções experimentais com roedores, que, apesar de relevantes, não fornecem todas as respostas sobre a patogênese da doença nos animais e seres humanos. Sabe-se que para avançar no controle e na prevenção da leptospirose é necessário conhecer melhor a interação existente entre o agente e cada hospedeiro animal. Dessa forma, buscou-se contribuir para a compreensão da interação hospedeiro-parasita, transmissão da doença e o papel portador dos ovinos da raça Santa Inês e mestiços experimentalmente infectados por Leptospira sp., assim como registrar alterações clínicas e hemato-bioquímicas que possam auxiliar no diagnóstico prévio da doença nessa espécie. Para isso, esta é composta de três capítulos. No Capítulo I foi realizada uma infecção experimental com Leptospira interrogans sorogrupo Pomona sorovar Kennewicki em ovelhas, buscando analisar um modelo natural de infecção e o comportamento da interação agente-hospedeiro de acordo com a raça de ovelhas desafiadas. No total, 12 ovelhas foram utilizadas, sendo seis mestiças e seis da raça Santa Inês. As ovelhas foram comparadas com base na sorologia, diagnóstico molecular e microbiológico. No Capítulo II, objetivou-se reproduzir a doença aguda em ovelhas da raça Santa Inês e mestiças por meio da inoculação por via intraperitoneal de L. interrogans sorogrupo Pomona sorovar Kennewicki, verificando possíveis diferenças na resposta à infecção nas ovelhas desafiadas. No total, 10 ovelhas foram utilizadas, sendo cinco mestiças e cinco da raça Santa Inês. As ovelhas foram comparadas com base na sorologia, diagnóstico molecular e microbiológico. No Capítulo III, procurou-se determinar a influência da infecção por L. interrogans sorogrupo Pomona sorovar Kennewicki nos parâmetros clínicos e hemato-bioquímicos de acordo com a via de inoculação e a raça de ovelhas experimentalmente infectadas. Utilizou-se 24 ovelhas para realização deste experimento, estas foram divididas igualmente em dois grupos: mestiças (grupo A) e Santa Inês (grupo B). Em ambos os grupos os animais foram desafiados por via intraperitoneal ou por via conjuntival. As ovelhas foram comparadas com base nos sinais clínicos, hemograma, bioquímica sérica e urinálise. Tanto a via conjuntival como a via intraperitoneal foram eficientes em reproduzir a infecção nas ovelhas infectadas, mas a via intraperitoneal apresentou alterações mais contundentes nos parâmetros hematológicos e bioquímicos. Os ovinos da raça Santa Inês apresentaram maior concentração e duração dos títulos. Nenhuma ovelha apresentou sinais clínicos compatíveis com a infecção por Leptospira sp, portanto a avaliação clínica se mostrou insuficiente para determinar com confiança animais infectados. Os achados enfatizam a importância do trato genital como um local extra urinário de infecção e indicam a possibilidade de transmissão venérea na espécie. É possível que tanto as ovelhas da raça Santa Inês como as mestiças possam exercer uma relação de resistência e serem capazes de participar na transmissão de cepas do sorogrupo Pomona, sendo que as mestiças parecem ser mais resistentes à infecção.
Most of the information on leptospirosis was obtained from experimental rodent infections, which, while relevant, do not provide all the answers about the pathogenesis of the disease in animals and humans. It is known that to advance in the control and prevention of leptospirosis it is necessary to know better on the interaction between the agent and each animal host. Thus, we sought to contribute to the understanding of host-parasite interaction, disease transmission and the carrier role of Santa Inês and crossbred sheep experimentally infected with Leptospira sp., as well as to register clinical and hemato-biochemical changes that may help in the previous diagnosis of the disease in this species. For this purpose, this Thesis is composed of three chapters. In Chapter I an experimental infection with Leptospira interrogans serogroup Pomona serovar Kennewicki was carried out in sheep, seeking to analyze a natural model of infection and the behavior of the agent-host interaction according to the breed of challenged sheep. In total, 12 sheep were used, six crossbred and six Santa Inês breed. The ewes were compared on the basis of serology, molecular and microbiological diagnosis. In Chapter II, the objective of the study was to reproduce the acute disease in Santa Inês sheep and crossbred ewes by intraperitoneal inoculation of L. interrogans serogroup Pomona serovar Kennewicki, verifying possible differences in response to infection in challenged ewes. In total, 10 ewes were used, five crossbred and five Santa Ines. The ewes were compared on the basis of serology, molecular and microbiological diagnosis. In Chapter III, the influence of infection by L. interrogans serogroup Pomona serovar Kennewicki on clinical and haemato- biochemical parameters was determined according to the route of inoculation and the breed of experimentally infected sheep. Twenty-four sheep were used to carry out this experiment, which were divided into two groups: crossbred (group A) and Santa Inês (group B). In both groups the animals were challenged intraperitoneally and conjunctivally. The ewes were compared on the basis of clinical signs, blood count, serum biochemistry and urinalysis. Both the conjunctival and intraperitoneal routes were efficient in reproducing the infection in the infected sheep, but the intraperitoneal route presented more strong alterations in hematological and biochemical parameters. Santa Inês sheep presented higher concentration and duration of the antibody titers. No sheep presented clinical signs compatible with Leptospira sp. infection, so clinical evaluation was insufficient to reliably determine infected animals. The findings emphasize the importance of the genital tract as an extra urinary infection site and indicate the possibility of venereal transmission in the species. It is possible that both Santa Inês and crossbred sheep can exercise a resistance relationship and be able to participate in the transmission of strains of the Pomona serogroup, with the crossbred sheep seeming to be more resistant to infection.
Resumo
Brucelose é uma das principais doenças infecciosas de caráter zoonótico que resulta em significativas perdas econômicas para animais de produção. O controle e a prevenção da brucelose animal são em grande parte baseados na vacinação com cepas vivas atenuadas. Inicialmente, foram realizados estudos de meta-análise do campo de vacinologia de Brucella no camundongo e hospedeiros naturais preferenciais, com objetivo de avaliar de forma temporal o índice de proteção de diferentes categorias vacinais e a influência de diversas variáveis na proteção vacinal. A meta-análise no modelo murino estudou 117 publicações de vacinas experimentais indexadas no PubMed, totalizando 782 experimentos analisados, que demonstraram na análise temporal que não houve melhoria dos índices de proteção ao longo das últimas três décadas. O modelo de meta-regressão desenvolvido, incluiu as categorias de vacinas (atenuada, DNA, inativada, mutante, subunidade e vetorizada) considerando o índice de proteção como a variável dependente e os outros parâmetros (linhagem de camundongo, via de vacinação, número de vacinações, uso de adjuvante, desafio com espécies de Brucella) como variáveis independentes. As vacinas de subunidades e vetorizadas proporcionaram índices de proteção significativamente menores quando comparados com vacinas atenuadas. Outras variáveis influenciaram positivamente o índice de proteção, tais como duas imunizações e desafio com B. melitensis, B. ovis e B. suis, por outro lado, o uso de adjuvante não teve efeito significativo no índice de proteção. O estudo de meta-análise em hospedeiros naturais, avaliou 45 publicações indexadas no PubMed e Scopus, representando 116 experimentos individuais. Adotou-se como medida de proteção, o valor de diferença de risco, calculado baseado na prevenção de abortos e infecção em órgãos de animais imunizados e não imunizados. A análise temporal neste estudo demonstrou que não houve melhorias na proteção vacinal nas últimas décadas. O modelo de meta-regressão desenvolvido para os hospedeiros naturais, incluiu as categorias de vacinas (atenuada, inativada, mutante, subunidade e vetorizadas), considerando o valor de diferença de risco como a variável dependente. Algumas variáveis demonstraram influenciar a proteção vacinal, sendo a via de vacinação subcutânea significativamente mais protetiva do que a via intramuscular e oral, além da via subcutânea ter proporcionado maior valor de diferença de risco que a via conjuntival, quando utilizada no desafio. As vacinas de subunidades proporcionaram significativamente menor proteção, enquanto que as vacinas inativadas foram mais protetivas que as vacinas atenuadas. Foi desenvolvido um estudo avaliando a cepa mutante B. ovis abcBA como potencial vetor de múltiplos epítopos de Brucella preditos de células T. Este estudo avaliou a expressão in vitro da expressão de uma proteína quimérica recombinante na cepa vetorial, analisando o perfil de atenuação em macrófagos e camundongos, e sua eficácia protetiva contra diferentes espécies virulentas de Brucella. A cepa B. ovis abcBA demonstrou ser um promissor vetor vacinal, sendo capaz de expressar a proteína quimérica recombinante PRB14 e manter o perfil de atenuação. Sendo assim, a cepa B. ovis abcBA PRB14 induziu proteção contra o desafio com patógeno B. ovis, entretanto, não demonstrou proteção contra desafio experimental com B. abortus e B. suis. Com o objetivo de avaliar o papel isolado da PRB14 de induzir resposta imune protetiva contra a infecção por Brucella em camundongos BALB/c, finalmente produzimos essa proteína quimérica em E. coli e a utilizamos como antígeno vacinal associado a adjuvante de Freud. No entanto, esta proteína não se mostrou protetiva contra a infecção por B. abortus, B. ovis e B. suis em camundongos.
Brucellosis is one of the major zoonotic infectious diseases that results in significant economic losses for animals production. The control and prevention of animal brucellosis are largely based on vaccination with live attenuated strains. Initially, meta-analysis studies were conducted addressing the subject of Brucella vaccinology in mice and preferred natural hosts, aiming to evaluate the protection index of different vaccine categories and the influence of several variables on vaccine protection. The meta-analysis in the murine model studied 117 publications of experimental vaccines indexed in PubMed, in total 782 experiments analyzed, which demonstrated in the temporal analysis that there was no improvement in protection indexes over the last three decades. The meta-regression model developed included the categories of vaccines (attenuated, DNA, inactivated, mutant, subunit and vector) considering the protection index as the dependent variable and the other parameters (mouse lineage, vaccination route, number of vaccinations, use of adjuvant, challenge with Brucella species) as independent variables. Subunit and vectorized vaccines provided significantly lower protection rates when compared to attenuated vaccines, and other variables positively influenced the protection index, such as two immunizations and challenge with B. melitensis, B. ovis and B. suis, on the other hand, the use of adjuvant had no significant effect on the protection index. The meta-analysis study in natural hosts evaluated 45 publications indexed in PubMed and Scopus, representing 116 individual experiments. The value of risk difference, calculated based on the prevention of abortions and infection in organs of immunized and non-immunized animals, was adopted as a protection measure. The temporal analysis in this study demonstrated that there were no improvements in vaccine protection in the last decades. The meta-regression model developed for the natural hosts included the vaccine categories (attenuated, inactivated, mutant, subunit and vectorized) considering the value of risk difference as the dependent variable, and some variables demonstrated to influence vaccine protection, such as the subcutaneous route of vaccination was significantly more protective than the intramuscular and oral route, and the subcutaneous route provided a higher risk difference value than the conjunctival route when used in the challenge. Subunit vaccines provided significantly less protection, while inactivated vaccines were more protective than attenuated vaccines. A study was carried out evaluating the mutant strain B. ovis abcBA as a potential vector of multiple predicted T cell epitopes. This study evaluated the expression in vitro of the expression of a recombinant chimeric protein in the vector strain by analyzing the attenuation profile in macrophages and mice, and their protective efficacy against different virulent Brucella species. B. ovis abcBA strain was shown to be a promising vaccine vector, capable of expressing the recombinant chimeric protein and maintaining the attenuation profile. Therefore, the B. ovis abcBA PRB14 strain induced protection against the challenge with B. ovis, however, did not demonstrate protection against experimental challenge with B. abortus and B. suis. In order to evaluate the role of PRB14 in inducing a protective immune response against Brucella infection in BALB/c mice, we finally produced this chimeric protein in E. coli and used it as a vaccine antigen associated with Freud's adjuvant. However, this protein was not shown to be protective against B. abortus, B. ovis and B. suis infection in mice.
Resumo
Efficacy of carprofen, administered by different routes, was studied in experimental uveitis in dogs. Anterior chamber paracenteses was accomplished at two different moments (M0 and M1), with a five hour interval between them. At M0 and M1, 0.2mL of aqueous humor was collected and quantitation of total protein and prostaglandin E2 (PGE2) were determined. Four groups were formed (n=8), which received carprofen at the end of M0, by the following routes: subcutaneous (GIm), subconjunctival (GII), and topical (GIII). A fourth group that received no treatment was instituted (Control). Conjunctival histopathology of the GII animals was performed. In all groups, values of protein and PGE2 significantly enhanced at M1; however, they did not significantly change among groups at M1. Inflammatory exudate of acute character and mild hemorrhage were seen at histopathology after carprofen administration. Carprofen was unable to inhibit PGE2 synthesis and the protein influx to the anterior chamber by any of the tested routes. However, the reduction of 44 percent in protein levels (topical) suggests that the agent can be used by this route as an adjuvant to control uveitis in dogs.(AU)
Estudaram-se os efeitos do carprofeno, aplicado por diferentes vias, em uveítes experimentais em cães. Realizou-se paracentese de câmara anterior em dois momentos (M0 e M1), com intervalo de cinco horas entre si. Em M0 e M1, colheram-se 0,2mL de humor aquoso e determinaram-se as concentrações de proteína total e de prostaglandina E2 (PGE2). Constituíram-se quatro grupos (n = 8), que receberam carprofeno ao final de M0 pelas vias subcutânea (GI), subconjuntival (GII) e tópica (GIII). Um quarto grupo não recebeu tratamento (controle). Procedeu-se à avaliação histopatológica nos indivíduos do GII. Em todos os grupos, encontrou-se aumento significativo dos níveis proteicos e de PGE2 em M1. Não se observou diferença significativa, em M1, entre os grupos para nenhum dos parâmetros estudados. Exsudado inflamatório de caráter agudo e hemorragia discreta foram vistos à histopatologia após a aplicação do fármaco. O carprofeno foi ineficaz em inibir a síntese de PGE2 e o influxo de proteínas para a câmara anterior, por qualquer uma das vias testadas. Contudo, a redução de 44 por cento nos níveis de proteínas (via tópica), sugere que por esta via ele pode ser utilizado como adjuvante no controle da uveíte em cães.(AU)
Assuntos
Cães , Uveíte/prevenção & controle , Uveíte/veterinária , Paracentese/métodos , Paracentese/tendências , Paracentese/veterinária , Câmara Anterior/patologia , Cães , Humor Aquoso/microbiologia , Dinoprostona/análiseResumo
A leishmaniose visceral canina (LVC) é uma zoonose causada pelo agente Leishmania infantum. O cão se destaca por seu importante papel na cadeia epidemiológica da doença, porquanto é o principal reservatório urbano da infecção, cuja transmissão é dependente de populações de Lutzomyia longipalpis. A enfermidade é multissistêmica e de patogenia complexa, envolvendo diferentes mecanismos imunológicos. A despeito do grande número de estudos sobre a patogenia e lesões que ocorrem na leishmaniose visceral canina, a fisiopatologia da lesão ocular ainda permanece obscura. O objetivo deste estudo foi detectar a presença de células inflamatórias e de formas amastigotas de L. Infantum pela imuno-histoquímica em olhos de cães experimentalmente infectados via ocular tópica. Constituiu-se um grupo inoculado (GI) composto por sete cães, que receberam a instilação de cultura de Leishmania infantum por via conjuntival, e um grupo controle (GC) composto por três cães, nos quais a instilação tópica foi realizada com solução salina. Após 60 dias, os tecidos oculares foram analisados utilizando-se as técnicas de coloração em Hematoxilina e Eosina (HE) e a reação de imuno-histoquímica pela streptoavidina-peroxidase. A análise histopatológica revelou uma resposta inflamatória com predomínio de plasmócitos e linfócitos, perivasculite, congestão vascular e hiperplasia das células caliciformes em conjuntiva. As glândulas lacrimais da terceira pálpebra apresentaram infiltrado inflamatório com atrofia focal e desorganização do estroma. Formas amastigotas de L. infantum foram observadas através da detecção imuno-histoquímica em 100% das amostras do grupo infectado
Canine visceral leishmaniasis (CVL) is an infection caused by Leishmania infantum agent. The dog stands out for its important role in the epidemiology of the disease, since it is the main urban reservoir of infection, whose transmission is dependent on populations of Lutzomyia longipalpis. The disease is multisystemic and complex pathogenesis, involving different immunological mechanisms. Despite the large number of studies regarding the pathogenesis and lesions that occur in canine leishmaniasis, the pathophysiology of a ocular lesion still remains obscure. The goal of this study was to evaluate the inflammatory cells and immunohistochemical detection of L. infantum in eyes from dogs experimentally infected by topical ocular infection. Constituted an inoculated group (IG), composed of seven dogs that received instillation of culture of Leishmania infantum by conjunctival route, and a control group (CG) composed of three dogs, in which the topical instillation was performed with saline. After 60 days, the ocular tissues were analyzed using the techniques of staining in hematoxylin and eosin (HE) and immunohistochemical reaction for streptoavidin-peroxidase. Histopathological analysis revealed an inflammatory response characterized by the presence of plasma cells, lymphocytes, congestion, perivasculitis and hyperplasia of the goblet cells in conjuctiva. In the lachrymal gland of the third eyelid were observed inflammatory response with focal atrophy and stromal disorganization. Amastigotes forms of L. infantum were observed by immunohistochemical detection in 100% of samples from infected group
Resumo
O herpesvírus bovino tipo 5 (BoHV-5) é um agente importante de meningoencefalite em bovinos. Após replicação na mucosa nasal, acredita-se que o vírus invada o cérebro principalmente pela via olfatória. Para investigar a importância dessa via na patogenia da infecção neurológica em um modelo animal, coelhos recém-desmamados (30 dias) foram submetidos à ablação cirúrgica dos bulbos olfatórios (BOs) e posteriormente inoculados pela via intranasal (IN) ou no saco conjuntival (IC) com uma cepa altamente neurovirulenta do BoHV-5 (SV-507). Após inoculação IN, 10/10 coelhos no Grupo Controle (com BOs) desenvolveram enfermidade neurológica, com início dos sinais clínicos entre os dias 5 e 10 pós-inoculação (pi) (média de 7,5 dias); em contraste, no grupo submetido à ablação dos BOs (n=11), apenas um animal (9,1%) desenvolveu doença neurológica (início no dia 17pi). Administração de dexametasona aos animais sobreviventes (n=10) no dia 50 pi resultou em excreção viral em secreções nasais e/ou oculares por oito destes, demonstrando que o vírus foi capaz de atingir o gânglio trigêmeo (TG) durante a infecção aguda. Esses resultados demonstram que a rota olfatória representa a via principal, mas não única, de acesso ao cérebro de coelhos após inoculação IN. Para investigar o papel de uma segunda possível via de acesso, grupos de coelhos controle (n=12) ou submetidos à ablação dos BOs (n=12) foram inoculados no saco conjuntival (IC), após o qual o vírus poderia utilizar o ramo oftálmico do nervo trigêmeo para invadir o cérebro. Dez coelhos controle (83,3 %) desenvolveram doença neurológica após inoculação IC, com início dos sinais entre os dias 11 e 20 (média 15,3 dias). A ablação prévia dos BOs não afetou a freqüência ou o curso da doença neurológica nesse grupo: 10/12 coelhos (83,3 %) sem os BOs desenvolveram a doença neurológica, com os sinais iniciando entre os dias 9 e 15pi (média 12,7 dias)... (AU)
Bovine herpesvirus type 5 (BoHV-5) is a major etiological agent of meningoencephalitis in cattle. Following replication in the nasal mucosa, viral invasion of the brain is thought to occur mainly by the olfactory pathway. To address the role of this pathway in the pathogenesis of neurological infection in a laboratory model, 30 days old rabbits had the main olfactory bulbs (MOBs) surgically removed and were subsequently inoculated intranasally (IN) or conjunctivally (IC) with a highly neurovirulent BoHV-5 strain (SV-507). Following IN inoculation, 10 out of 10 (100 %) control rabbits developed neurological disease. The clinical onset ranged from day 5 to 10 post-inoculation (pi, average 7.5 days); nine being euthanized in extremis and one recovering after a mild clinical course. In contrast, only one rabbit (9.1 %) of the group lacking the MOBs (n=11) developed neurological disease (onset at day 17 pi). Dexamethasone administration to the survivors (n=10) at day 50pi was followed by virus shedding in nasal and/or ocular secretions by 8 animals, demonstrating that the virus was able to reach the trigeminal ganglia (TG) during acute infection. These results demonstrate that the olfactory route provides the main, yet not the sole access to the brain of rabbits following IN inoculation. To address the role of a second pathway, groups of control (n=12) or MOB-lacking rabbits (n=12) were inoculated into the conjunctival sac (IC), following which the virus would be expected to use the ophtalmic branch of the trigeminal nerve to reach the brain. Ten control rabbits (83.3 %) developed neurological disease upon IC inoculation (onset 15.3 days 11 to 20). Previous ablation of the MOBs did not affect the frequency and course of neurological disease: ten out of 12 rabbits (83.3 %) lacking the MOBs developed neurological disease (onset 9 to 15 dpi, average: 12.7 days) upon IC inoculation... (AU)
Assuntos
Animais , Herpesvirus Bovino 5 , Meningoencefalite/veterinária , Doenças do Sistema Nervoso/complicações , CoelhosResumo
The live B. melitensis Rev.1 strain is considered the best vaccine available for the prophylaxis of brucellosis in small ruminants, especially when used at the standard dose by the conjunctival route. In the present study a 1´ 109 CFU dose for both sheep and goats conjunctivally vaccinated was tested to evaluate the duration of serological responses. Conjunctival vaccination with Rev. 1 performed in adult animals induced a rapid rise in serological titres as measured by Rose Bengal Plate Test (RBPT), Complement Fixation Test (CF) and Modified Rose Bengal Plate Test (MRBPT). Titres then decreased and became negative in most animals by four months after vaccination (except MRBPT). The goats responded better to the vaccination than the sheep as one month after vaccination 100% of the goats revealed positive results to RB and RBM and 93.4% to FC test. The RBM was the one that detected more positive animals along the study.(AU)
Assuntos
Animais , Adulto , Cabras , Ovinos , Brucella melitensis , Vacinação , VacinasResumo
Coelhos são susceptíveis à infecção pelo herpes-vírus bovino tipo 5 (BHV-5) e freqüentemente desenvolvem enfermidade neurológica aguda fatal após inoculação intranasal. A cinética da invasão do sistema nervoso central (SNC) de coelhos pelo BHV-5 foi estudada através de pesquisa de vírus em secções do SNC a diferentes intervalos pós-inoculação. Após inoculação intranasal, o vírus foi inicialmente detectado no bulbo olfatório às 48h, seguido do córtex olfatório às 48/72h. Às 72/96h o vírus foi detectado também no gânglio trigêmeo, ponte e córtex cerebral. Dois experimentos foram realizados para avaliar a importância do sistema olfatório na invasão do SNC de coelhos pelo BHV-5. No primeiro experimento, coelhos foram inoculados com duas amostras do BHV-5 no saco conjuntival. Coelhos inoculados por essa via também desenvolveram a enfermidade neurológica, porém com menor freqüência com curso clínico tardio. No segundo experimento, doze coelhos foram submetidos à ablação cirúrgica do bulbo olfatório e posteriormente inoculados com o BHV-5 pela via intranasal. Onze de 12 coelhos controle (91,6 por cento), não submetidos à cirurgia, desenvolveram a doença neurológica, contra quatro de 12 (33,3 por cento) dos animals submetidos à remoção cirúrgica do bulbo olfatório. Esses resultados demonstram que o sistema olfatório constitui-se na principal via de acesso do BHV-5 ao encéfalo de coelhos após inoculação intranasal. No entanto, o desenvolvimento de infecção neurológica em coelhos inoculados pela via conjuntival e em coelhos sem o bulbo olfatório indica que o BHV-5 pode utilizar outras vias para invadir o SNC, provavelmente as fibras sensoriais e autonômicas que compõe o nervo trigêmeo. Os efeitos da imunização com vírus homólogo (BHV-5) e heterólogo (BHV-1) na proteção à infecção neurológica foram investigados. Cinco entre 10 coelhos (50 por cento) imunizados com o BHV-5 apresentaram sinais neurológicos discretos e transitórios e um morreu após o desafio ... (AU)
Rabbits are susceptible to bovine herpesvirus type 5 (BHV-5) infection and often develop an acute and fatal neurological disease upon intranasal inoculation. The kinetics of viral infection of the central nervous system (CNS) was investigated by testing serial brain sections for infectivity at intervals after virus inoculation. The virus was first detected in the main olfactory bulb at 48h, followed by the olfactory cortex at 48/72h. At 72/96h infectivity was also detected in the trigeminal ganglia, pons and cerebral cortex. Two experiments were conducted to investigate the role of the olfactory system in the invasion of the rabbits' CNS by BHV-5. In the first experiment, rabbits were inoculated with two BHV-5 isolates in the conjunctival sac. Rabbits inoculated by this route developed the neurological disease, yet with a reduced frequency and delayed clinical course. In a second experiment, twelve rabbits were submitted to surgical removal of the olfactory bulb and subsequently inoculated intranasally with BHV-5. Eleven out of 12 (91.6%) of the control rabbits developed the disease, against four out of 12 (33.3%) of the animals lacking the olfactory bulb. These results suggest that the olfactory system is the main pathway utilized by BHV-5 to reach the CNS of rabbits after intranasal inoculation. Nevertheless, the development of neurological infection in rabbits inoculated in the conjunctival sac and in rabbits lacking the olfactory bulb indicate that BHV-5 may utilize an alternative route to invade the CNS, probably the sensory and autonomic fibers of the trigeminal nerve. The effects of immunization with homologous (BHV-5) and heterologous (BHV-1) strains in prevention of neurological disease by BHV-5 were investigated. Five out of 10 rabbits (50%) immunized with BHV-5 showed mild and transient neurological signs and one died upon challenge. Interestingly, the degree of protection against BHV-5 challenge was higher in rabbits immunized with BHV-1: only...(AU)
Assuntos
Animais , Centro Latino-Americano e do Caribe de Informação em Ciências da Saúde , Herpesvirus Bovino 5/isolamento & purificação , Meningoencefalite/complicações , Meningoencefalite/epidemiologia , Vírus/metabolismo , Modelos Animais , CoelhosResumo
Avaliaram-se as alterações oftálmicas, protéicas do humor aquoso, sorológicas e histopatológicas em cães infectados experimentalmente com Leishmania (Leishmania) chagasi por via conjuntival. Selecionaram-se dez cães saudáveis após exame clínico, prova sorológica de ELISA para Leishmania sp e microscopia de luz de esfregaços de medula óssea. Dois grupos de cães compuseram o estudo. O Grupo Inoculado (GI) foi constituído por sete animais, que receberam 150æL de uma solução de cultura de Leishmania (Leishmania) chagasi por via conjuntival, e o Grupo Controle (GC) por três animais, inoculados com solução salina fisiológica, pela mesma via. Os cães foram monitorados quanto às alterações oculares às 2, 4, 6, 12 e 24h após a instilação. Em seguida, diariamente por uma semana, e a partir daí, uma vez por semana, até que se completassem os 60 dias pós-infecção. Amostras de sangue e de humor aquoso de ambos os olhos e esfregaços de medula óssea foram coletados aos 60 dias, para sorologia, análise protéica e parasitologia, respectivamente. Todos os animais do GI mostraram sinais oculares unilaterais ou bilaterais, particularmente opacidades corneais. Não somente os resultados dos anticorpos anti-Leishmania sp no soro e no humor aquoso, como também a parasitologia, resultaram negativos. A histopatologia dos olhos de cães do grupo infectado por Leishmania revelou resposta inflamatória caracterizada por infiltração de macrófagos, linfócitos e células plasmáticas, notadamente na terceira pálpebra, na conjuntiva e na glândula lacrimal. Edema, congestão e perivasculite difusa envolvendo o trato uveal, igualmente foram observados
The aim of this study was to evaluate the ocular signs protein of aqueous humour, serological and structural changes in the dogs' eyes infected experimentally by the conjunctival route of exposure with Leishmania (Leishmania) chagasi. A total of 10 healthy dogs were submitted to clinical examination, assayed by the ELISA test for anti- Leishmania sp antibodies and also microscopic examination of bone marrow smears. Two groups of dogs were studied. The first, Inoculated Group (IG) consisted of seven animal which one received a 150æL of Leishmania (Leishmania) chagasi suspension by the conjunctival route and the Control Group (CG) consisted of three animals inoculated by the saline physiological solution at the same route. The dogs were ophthalmology monitored at 2, 4, 6, 12 e 24 hours pos instilation. After this period, they were monitored once a day for one week and then, once a week until 60 days were complete. Blood samples, aqueous humor of both eyes and bone marrow smears were collected at 60 days for serology , protein of aqueous humour analyses and parasitological examination. All animals from IG showed unilateral or bilateral ocular signs, particularly corneal opacification. Not only the results of anti- Leishmania sp antibodies in sera and aqueous humor but also the parasitological examinations were negative. The histopathologic evaluation of eyes in the Leishmaniainfected dogs revealed inflammatory response characterized by macrophages infiltration, lymphocytes and plasma cells particularly on the third eyelid, the conjunctive tissue and lacrimal gland. Edema, congestion and a diffuse perivasculitis involving the uveal tract were also observed
Resumo
Estudou-se a eficácia do meloxicam e do carprofeno, aplicados por diferentes vias, em uveítes experimentais em cães. Realizou paracentese de câmara anterior em dois momentos (M0 e M1), com intervalo de cinco horas entre si. Em M0 e M1, colheram-se 0,2 ml de humor aquoso e determinou-se a concentração de proteína total e de prostaglandina E2 (PGE2). Em um primeiro período, constituíram-se quatro grupos (n = 5), que receberam meloxicam ao final de M0 pelas vias subcutânea (GIm), subconjuntival (GIIm) e tópica (GIIIm). Um quarto grupo não recebeu tratamento (Controle). Decorridos sete dias, os animais foram submetidos aos mesmos procedimentos adotados previamente e receberam carprofeno. Avaliação clínica foi também realizada, assim como histopatologia da conjuntiva dos animais dos grupos GIIm e GIIc. Os resultados foram avaliados estatisticamente (p LÜ 0,05). Em todos os grupos, encontrou-se aumento significativo dos níveis protéicos e de PGE2 em M1 (p < 0,001). Não se observou diferença significativa entre os grupos para os valores de proteína total e de PGE2 em M1 (p > 0,05). Observou-se correlação positiva entre proteína total e PGE2 (p < 0,05) apenas no GIm, GIc, GIIIm, GIIIc e GIIm. Exsudado inflamatório de caráter agudo e hemorragia discreta foram vistos à histopatologia após a aplicação de ambos os fármacos (p > 0,05). O meloxicam e o carprofeno foram ineficazes em inibir a síntese de PGE2 e o influxo de proteínas para a câmara anterior, por qualquer uma das vias testadas. A redução nos níveis de 44% proteínas, quando o carprofeno foi utilizado pela via tópica, sugere que por esta via, ele pode ser utilizado como adjuvante no controle da uveíte em cães
Efficacy of meloxican and carprofen, administered by different routes, in experimental uveitis in dogs were studied. Anterior chamber paracenteses was accomplished at two different moments (M0 and M1), with a five hour interval among them. At M0 and M1, 0,2 ml of aqueous humor were collected and total protein and prostaglandin E2 (PGE2) concentration was determined. Four groups were formed in a first period (n = 5), which received meloxican at the end of M0, by the following routes: subcutaneous (GIm), subconjunctival (GIIm), and topical (GIIIm). A fourth group that received no treatment was instituted (Control). Seven days after, animals underwent the same procedures described previously and received carprofen. Clinical evaluation was also performed, as well as conjunctival histopathology of the conjunctiva of the animals of GIIm and GIIc. Results were evaluated statistically (p LÜ 0,05). In all groups, protein and PGE2 values enhanced significantly in M1 (p < 0,001). Protein and PGE2 values, did not change significantly between groups at M1 (p > 0,05). Positive correlation among total protein and PGE2 (p < 0,05) was only noted in GIm, GIc, GIIIm, GIIIc and GIIm. Inflammatory exudate of acute character and mild hemorrhage were seen at histopathology, after both agents were administered. Meloxican and carpofen were unable to inhibit PGE2 synthesis and the protein influx to the anterior chamber by any of the tested routes. The lowering of 44% in protein levels, when carprofen was used by the topical route, suggests that by this route, it can be used as an adjuvant to control uveitis in dogs