Correlation of Clinical, Histopathological and Histomorphometric Features of Canine Soft Tissue Sarcomas

Sarcomas de partes moles (STS) representam um grupo heterogêneo de tumores com características histológicas e comportamento biológico semelhantes. Este estudo teve como objetivo descrever a correlação entre as características clínicas, histopatológicas e histomorfométricas do STS em cães. Os registros médicos foram revisados ​​para identificar todos os cães nos quais um STS foi diagnosticado entre 2006-2017. Trinta casos foram incluídos, e amostras de tumor e prontuários médicos foram recuperados. A maioria dos cães era mestiça (40%) e 80% dos STS localizavam-se no tecido conjuntivo subcutâneo. A classificação histopatológica mostrou que sarcoma indiferenciado (17%) e tumor de bainha de nervo periférico (30%) foram os STS mais comuns. O STS de grau I foi obtido em 50% dos casos (15/30), e os tumores de grau II ou III comprometeram 43% (13/30) e 7% (2/30), respectivamente. O índice mitótico variou de zero a 26 (5,8 ± 7,5). A razão núcleo: citoplasma aumentada foi moderadamente associada com maior grau de tumor (p = 0,05; rS = 0,361) e índice mitótico (p = 0,05; rS = 0,355), enquanto o número de microvasos foi positivamente correlacionado com o grau de diferenciação (p = 0,05 ; rS = 0,362) e pleomorfismo nuclear (p = 0,036; rS = 0,384). A histomorfometria mostrou-se útil na avaliação do STS, representando uma ferramenta adicional correlacionada a fatores prognósticos bem estabelecidos (grau histopatológico, grau de diferenciação, pleomorfismo nuclear). enquanto o número de microvasos foi positivamente correlacionado com o grau de diferenciação (p = 0,05; rS = 0,362) e pleomorfismo nuclear (p = 0,036; rS = 0,384). A histomorfometria mostrou-se útil na avaliação do STS, representando uma ferramenta adicional correlacionada a fatores prognósticos bem estabelecidos (grau histopatológico, grau de diferenciação, pleomorfismo nuclear). enquanto o número de microvasos foi positivamente correlacionado com o grau de diferenciação (p = 0,05; rS = 0,362) e pleomorfismo nuclear (p = 0,036; rS = 0,384). A histomorfometria mostrou-se útil na avaliação do STS, representando uma ferramenta adicional correlacionada a fatores prognósticos bem estabelecidos (grau histopatológico, grau de diferenciação, pleomorfismo nuclear).

Correlation of Clinical, Histopathological and Histomorphometric Features of Canine Soft Tissue Sarcomas

Sarcomas de partes moles (STS) representam um grupo heterogêneo de tumores com características histológicas e comportamento biológico semelhantes. Este estudo teve como objetivo descrever a correlação entre as características clínicas, histopatológicas e histomorfométricas do STS em cães. Os registros médicos foram revisados ​​para identificar todos os cães nos quais um STS foi diagnosticado entre 2006-2017. Trinta casos foram incluídos, e amostras de tumor e prontuários médicos foram recuperados. A maioria dos cães era mestiça (40%) e 80% dos STS localizavam-se no tecido conjuntivo subcutâneo. A classificação histopatológica mostrou que sarcoma indiferenciado (17%) e tumor de bainha de nervo periférico (30%) foram os STS mais comuns. O STS de grau I foi obtido em 50% dos casos (15/30), e os tumores de grau II ou III comprometeram 43% (13/30) e 7% (2/30), respectivamente. O índice mitótico variou de zero a 26 (5,8 ± 7,5). A razão núcleo: citoplasma aumentada foi moderadamente associada com maior grau de tumor (p = 0,05; rS = 0,361) e índice mitótico (p = 0,05; rS = 0,355), enquanto o número de microvasos foi positivamente correlacionado com o grau de diferenciação (p = 0,05 ; rS = 0,362) e pleomorfismo nuclear (p = 0,036; rS = 0,384). A histomorfometria mostrou-se útil na avaliação do STS, representando uma ferramenta adicional correlacionada a fatores prognósticos bem estabelecidos (grau histopatológico, grau de diferenciação, pleomorfismo nuclear). enquanto o número de microvasos foi positivamente correlacionado com o grau de diferenciação (p = 0,05; rS = 0,362) e pleomorfismo nuclear (p = 0,036; rS = 0,384). A histomorfometria mostrou-se útil na avaliação do STS, representando uma ferramenta adicional correlacionada a fatores prognósticos bem estabelecidos (grau histopatológico, grau de diferenciação, pleomorfismo nuclear). enquanto o número de microvasos foi positivamente correlacionado com o grau de diferenciação (p = 0,05; rS = 0,362) e pleomorfismo nuclear (p = 0,036; rS = 0,384). A histomorfometria mostrou-se útil na avaliação do STS, representando uma ferramenta adicional correlacionada a fatores prognósticos bem estabelecidos (grau histopatológico, grau de diferenciação, pleomorfismo nuclear).(AU)

Microvessel density assessment in canine mammary carcinomas as a predictive factor for metronomic chemotherapy / Mensuração da densidade microvascular em carcinomas mamários caninos como fator preditivo à quimioterapia metronômica

The canine mammary tumor is the neoplasia that most commonly affects intact female dogs (not spayed) in routine veterinary practice. Canine mammary tumor therapy is a challenge because only few effective treatments have been described for high-grade tumors in veterinary medicine. One such therapeutic option that slows down tumor growth is metronomic chemotherapy (MC), a therapeutic modality that acts by decreasing tumor angiogenesis. Quantification of intratumoral microvessel density (MVD) has been proposed as a means to evaluate the effectiveness of MC in human and canine tumors. In this study, MVD is proposed as a predictive factor for the effectiveness of MC in canine mammary tumors. Twenty female dogs with mammary carcinoma were equally distributed into a mastectomy group treated only with mastectomy, and a MC group treated with MC (cyclophosphamide and piroxicam) orally and daily for 28 days followed by mastectomy. Mammary tumors were classified and graded histologically. MVD was ascertained by CD31 immunostaining. The analysis showed statistically significant difference in MVD scores between groups, corroborating a quantitative reduction in tumor microvasculature in the group treated with MC. Our findings suggest that MVD may be an important predictive factor for the selection of female dogs with malignant mammary tumors that may benefit from MC.(AU)

O tumor mamário canino é a neoplasia que mais comumente acomete cadelas não castradas na rotina veterinária. A terapia para a neoplasia mamária canina é um desafio, com poucos tratamentos eficazes descritos em medicina veterinária, especialmente para as neoplasias de alto grau. Uma opção terapêutica que diminui o crescimento tumoral é a quimioterapia metronômica (QM). A QM é uma modalidade terapêutica que age pelo decréscimo da angiogênese tumoral. Para avaliação da eficácia da QM tem sido proposta a quantificação da densidade microvascular (DMV) em neoplasias caninas. Neste estudo foi proposta a mensuração da DMV como fator preditivo à utilização da QM em neoplasias mamárias caninas. Foram utilizadas 20 (vinte) cadelas com carcinomas mamários malignos sendo um grupo mastectomia, tratado somente por mastectomia, e um grupo QM, em que foi empregada a QM (ciclofosfamida e piroxicam) ambos oralmente e de uso diário por 28 dias seguida de mastectomia. As neoplasias mamárias foram histologicamente classificadas e graduadas. A DMV foi obtida por imunomarcação utilizando o anticorpo CD31. A análise estatística mostrou diferença na DMV entre os grupos, evidenciando redução quantitativa na microvasculatura tumoral no grupo tratado com quimioterapia metronômica. Com base neste resultado é possível afirmar que a DMV pode vir a ser um fator preditivo de importância para a seleção de cadelas portadoras de neoplasia mamária maligna que possam vir a se beneficiar da quimioterapia metronômica.(AU)

Microvessel density assessment in canine mammary carcinomas as a predictive factor for metronomic chemotherapy / Mensuração da densidade microvascular em carcinomas mamários caninos como fator preditivo à quimioterapia metronômica

The canine mammary tumor is the neoplasia that most commonly affects intact female dogs (not spayed) in routine veterinary practice. Canine mammary tumor therapy is a challenge because only few effective treatments have been described for high-grade tumors in veterinary medicine. One such therapeutic option that slows down tumor growth is metronomic chemotherapy (MC), a therapeutic modality that acts by decreasing tumor angiogenesis. Quantification of intratumoral microvessel density (MVD) has been proposed as a means to evaluate the effectiveness of MC in human and canine tumors. In this study, MVD is proposed as a predictive factor for the effectiveness of MC in canine mammary tumors. Twenty female dogs with mammary carcinoma were equally distributed into a mastectomy group treated only with mastectomy, and a MC group treated with MC (cyclophosphamide and piroxicam) orally and daily for 28 days followed by mastectomy. Mammary tumors were classified and graded histologically. MVD was ascertained by CD31 immunostaining. The analysis showed statistically significant difference in MVD scores between groups, corroborating a quantitative reduction in tumor microvasculature in the group treated with MC. Our findings suggest that MVD may be an important predictive factor for the selection of female dogs with malignant mammary tumors that may benefit from MC.

O tumor mamário canino é a neoplasia que mais comumente acomete cadelas não castradas na rotina veterinária. A terapia para a neoplasia mamária canina é um desafio, com poucos tratamentos eficazes descritos em medicina veterinária, especialmente para as neoplasias de alto grau. Uma opção terapêutica que diminui o crescimento tumoral é a quimioterapia metronômica (QM). A QM é uma modalidade terapêutica que age pelo decréscimo da angiogênese tumoral. Para avaliação da eficácia da QM tem sido proposta a quantificação da densidade microvascular (DMV) em neoplasias caninas. Neste estudo foi proposta a mensuração da DMV como fator preditivo à utilização da QM em neoplasias mamárias caninas. Foram utilizadas 20 (vinte) cadelas com carcinomas mamários malignos sendo um grupo mastectomia, tratado somente por mastectomia, e um grupo QM, em que foi empregada a QM (ciclofosfamida e piroxicam) ambos oralmente e de uso diário por 28 dias seguida de mastectomia. As neoplasias mamárias foram histologicamente classificadas e graduadas. A DMV foi obtida por imunomarcação utilizando o anticorpo CD31. A análise estatística mostrou diferença na DMV entre os grupos, evidenciando redução quantitativa na microvasculatura tumoral no grupo tratado com quimioterapia metronômica. Com base neste resultado é possível afirmar que a DMV pode vir a ser um fator preditivo de importância para a seleção de cadelas portadoras de neoplasia mamária maligna que possam vir a se beneficiar da quimioterapia metronômica.

IMUNOMARCAÇÃO DE VEGF, CD31 E BMP-2 EM NEOPLASIAS MAMÁRIAS MALIGNAS DE CADELAS

Neoplasias malignas em cadelas é uma das enfermidades mais frequentes em animais domésticos no Brasil. Tais neoplasias apresentam uma grande similaridade com neoplasias de mamas em mulheres e, devido a esse fato, o entendimento da patogênese e das características biológicas visando a identificação de fatores prognósticos e preditivos são necessários para a melhoria de tratamentos e diagnósticos mais eficazes. Estudos recentes buscam correlacionar a densidade microvascular (DMV) e a quantidade de células estromais através da quantificação de imunomarcadores considerados fatores prognósticos do câncer mamário. Nesse contexto, o objetivo deste estudo foi avaliar a densidade de microvasos, por meio da contagem de vasos marcados por CD31, além de correlacionar a imunomarcação por VEGF-A e BMP2 com o subtipo histológico e grau de malignidade de neoplasias malignas mamárias de cadelas. Para tal, neoplasias malignas de mama em cadelas foram separadas quanto ao grau de malignidade em alto e baixo. Foi realizada imuno-histoquímica para os anticorpos anti-CD31, VEGF-A e BMP2, seguindo recomendações do fabricante do kit DAKO EnVision FLEX+. As amostras utilizadas no estudo foram provenientes de diagnóstico histopatológico de clínicas veterinárias da cidade de Goiânia-GO. Foram construídos blocos de microarranjo de tecido para otimização dos experimentos. Os testes estatísticos foram feitos com o software GraphPad Prism 7.0, considerando o nível de significância de 5%. A imunomarcação de CD31 foi diferente em todos os grupos analisados, assim como a marcação por VEGF-A e BMP2. Carcinomas com baixo grau de malignidade apresentaram maior imunomarcação por VEGF-A e BMP2, bem como maior DMV por CD31. O presente estudo demonstrou que carcinomas de baixo grau apresentaram uma maior imunomarcação pelos marcadores angiogênicos VEGF-A e CD31, bem como uma maior imunomarcação por BMP2, e tal achado reforça a ideia de que o VEGF-A é uma molécula envolvida na formação vascular e que BMP2 pode agir estimulando a angiogênese, principalmente por liberação de VEGF-A. Os nossos achados também sugerem a importância de outros fatores angiogênicos do microambiente do tumor na regulação da angiogênese tumoral em tumores mamários caninos. A realização deste trabalho demonstrou a importância da avaliação angiogênica por imuno-histoquímica na determinação de fatores prognósticos associados à neoplasias malignas mamárias caninas.

Malignant neoplasms in dogs is one of the most frequent diseases in domestic animals in Brazil. Such neoplasms have a great similarity with breast neoplasms in women and, due to this fact, an understanding of the pathogenesis and biological characteristics aiming at the identification of prognostic and predictive factors are necessary for the improvement of more effective treatments and diagnoses. Recent studies seek to demonstrate the microvascular density and the amount of stromal cells through the quantification of immunomarkers considered prognostic factors for breast cancer. In this context, the objective of this study was to evaluate the microvessel density, by counting vessels marked by CD31, in addition to correlating immunomarking by VEGF-A and BMP2 with the histological subtype and degree of malignancy of dogs' malignant neoplasms. For this, malignant breast neoplasms in dogs were separated as to the degree of malignancy in high and low. Immunohistochemistry was performed for anti-CD31, VEGF-A and BMP2 antibodies, following recommendations from the DAKO EnVision FLEX + kit manufacturer. The samples used in the study came from the histopathological diagnosis of veterinary clinics in the city of Goiânia-GO. Tissue microarray blocks were built to optimize the experiments. Statistical tests were performed using the GraphPad Prism 7.0 software, considering the significance level of 5%. The immunostaining of CD31 was different in all groups analyzed, as well as the staining by VEGF-A and BMP2. Carcinomas with a low degree of malignancy showed greater immunostaining by VEGF-A and BMP2, as well as greater MVD by CD31. The present study demonstrated that low-grade carcinomas show greater immunostaining by angiogenic markers VEGF-A and CD31, as well as greater immunostaining by BMP2, and this finding reinforces the idea that VEGF-A is a molecule involved in vascular formation and that BMP2 can act by stimulating angiogenesis, mainly by releasing VEGF-A. Our findings also suggest the importance of other angiogenic factors of the tumor microenvironment in the regulation of tumor angiogenesis in canine mammary tumors. This work demonstrated the importance of angiogenic evaluation by immunohistochemistry in determining prognostic factors associated with canine mammary malignancies.

Efeitos da quimioterapia metronômica sobre a angiogênese e linfangiogênese de carcinomas mamários de cadelas

Nas últimas décadas biomarcadores de angiogênese e linfangiogênese tumoral sãoalvos de estudos e, em humanos, estes aspectos da vasculatura tumoral já sãoutilizados como fatores prognósticos em neoplasias mamárias. Em cadelas não háestudossuficientes para demonstraro significado clínico-patológico dalinfangiogênese em neoplasias mamárias. De maneira similar, não há estudos quedemonstrem efeitos antilinfangiogênicos de terapias como a quimioterapiametronômica (QM), classicamente caracterizada como uma terapia antiangiogênica.Este estudo teve como objetivos estabeleceros efeitos da QM naangiogênese elinfangiogênese tumoral destas neoplasias, assim como obtero significado clínico-patológico da densidade de vasos linfáticos em neoplasias mamárias caninas. Foramutilizadas 40 cadelas portadoras de carcinomas mamários, divididas em dois grupos,sendo um tratado somente com mastectomia e outro tratado com quimioterapiametronômica (QM) seguida de mastectomia. A biópsia do linfonodo sentinela foipreconizada para estabelecimento do status do tecido linfoide sentinela. Após, foirealizada a classificação e graduação histopatológica das neoplasias,eprocedeu-sea imunomarcação paradeterminara densidade de vasos linfáticos (DVL),a densidademicrovascular(DMV),índice de proliferação celular (IP),índice apoptótico (IA), escorede COX-2, grau dofator de crescimento endotelial vascular(VEGF)e metástasenodal. As imunomarcações foram comparadas entre os grupos e a DVL comparadacom aspectos clínico-patológicos. Foram observados efeitos antiangiogênicos e pró-apoptóticos no grupo tratado com QM, porém sem efeitosantilinfangiogênicos nomesmo grupo. Foi observada associação da DVL com metástase nodal, VEGF e fortecorrelação comIPdemonstrando possíveisefeitos da linfangiogênese tumoral comprognóstico e progressão tumoral.Obteve-se maior sobrevida global no grupo tratadocom QM demonstrando eficácia da terapiapara neoplasias mamárias caninas.

In recent decades biomarkers of tumor angiogenesis and lymphangiogenesis havebeen studied and, in humans, these aspects of tumor vasculature are already used asprognostic factors in breast cancer.In bitches there are no studies that prove theclinicopathological significance of lymphangiogenesis in mammary neoplasms.Similarly, there are no studiesdemonstrating anti-lymphangiogenic effects of therapiessuch as metronomic chemotherapy (MC), classically characterized as anti-angiogenictherapy.This study aimed to establish the effects ofMContumorangiogenesis andlymphangiogenesis of these neoplasms, as well as to obtain the clinical-pathologicalsignificance of lymphaticvessel density in canine mammarytumors.Forty bitches withmammary carcinomas were used, divided into two groups, one treated withmastectomy and the other treated with MC followed by mastectomy. Sentinel lymphnode biopsy was recommended for establishing the status of the sentinel lymph node.Afterwards, classification and histopathological graduation of the neoplasms wasperformed, followed by immunostaining and determination of lymphatic vessel density (LVD),microvascular density (MVD), cell proliferation index (PI),apoptotic index (AI),COX-2 score,andvascular endothelial growth factor (VEGF)grade.Immunostainwerecompared between the groups and the LVD compared to clinicopathological aspects.Antiangiogenic and pro-apoptotic effects were observed in the group treated with MC,but without anti-lymphangiogenic effects in the same group.It was observed anassociation of LVD with nodal metastasis, VEGF and a strong correlation withPIdemonstrating possible effects of tumor lymphangiogenesis and association withprognosis and tumor progression.Longeroverall survival was obtained in the grouptreated with MCdemonstrating efficacy of the therapyfor canine mammary tumors.

REDUÇÃO DO CRESCIMENTO TUMORAL E MODULAÇÃO MICROAMBIENTAL EM CAMUNDONGOS SUBMETIDOS A MODELO DE ESQUIZOFRENIA

A esquizofrenia é uma desordem psiquiátrica de origem multifatorial que acomete cerca de 1% da população mundial. Estudos epidemiológicos indicam menor incidência de câncer em pacientes esquizofrênicos. Além de um importante componente genético, aspectos ambientais estão relacionados ao aparecimento da condição, sendo a infecção materna durante a prenhez um dos fatores de risco. Neste estudo foi avaliado o crescimento tumoral em animais submetidos ou não a modelo murino de esquizofrenia, fundamentado na influência permanente de infecção pré-natal sobre a prole de camundongos, em um período com efeitos que simulam a esquizofrenia. Os parâmetros avaliados foram o volume neoplásico, histopatologia, atividade proliferativa tumoral, vascularização, matriz extracelular e expressão de COX-2 por leucócitos infiltrantes. Foram utilizadas as progênies de camundongos Swiss, totalizando 54 animais, machos e fêmeas. As matrizes foram inoculadas ou não ao nono dia de prenhez com Poli-I:C. Aos 2 meses de idade suas progênies receberam subcutaneamente suspensão contendo 5,0 x 106 células do tumor de Ehrlich. Após 30 dias de inoculação, os tumores foram excisionados, mensurados e submetidos à avaliação histológica, histoquímica e imuno-histoquímica. Houve diferença estatisticamente significante relativa ao volume tumoral, porém sem diferença quanto à atividade proliferativa de suas células, sendo os tumores presentes em animais do grupo experimental em média menores, com maior densidade microvascular, maior deposição de matriz extracelular e menor expressão de COX-2. Tais achados corroboram os relatos de restrição ao crescimento tumoral em pacientes esquizofrênicos, reforçando a ação do Poli-I:C no nono dia de prenhez como modelo desse transtorno psiquiátrico. Particularmente, as alterações na quantidade e padrão de deposição de elementos da matriz extracelular podem alterar as interações mecânicas e potencialmente a expressão gênica nesse microambiente, interferindo na sinalização celular e na evolução tumoral. Também a resposta inflamatória apresenta sinais de modulação, com uma menor expressão leucocitária de COX-2 no microambiente tumoral no grupo experimental, interferindo potencialmente na sobrevida das células tumorais. Por fim, merece referência a presença de alterações também na composição da matriz extracelular em regiões encefálicas no paciente esquizofrênico, sugerindo uma participação ativa da matriz extracelular na modulação de diferentes processos no paciente esquizofrênico.

Schizophrenia is a psychiatric disorder of multifactorial origin, which affects about 1% of the world population. Epidemiological studies indicate a lower incidence of cancer in schizophrenic patients. In addition to an important genetic component, environmental aspects are related to the onset of the condition, and maternal infection during pregnancy is one of the risk factors. In this study the tumor growth was evaluated in animals submitted or not to the murine model of schizophrenia, based on the permanent influence of prenatal infection on the offspring of mice, in a period with effects that simulate schizophrenia. The parameters evaluated were neoplastic volume, histopathology, tumor proliferative activity, vascularization, extracellular matrix and expression of COX-2 by infiltrating leukocytes. Progenies of swiss mice were used, totalizing 54 animals, males and females. The matrices were or were not inoculated on the ninth day of pregnancy with Poly-I: C. At 2 months of age, their progenies received subcutaneously suspension containing 5.0 x 106 Ehrlich tumor cells. After 30 days of inoculation the tumors were excised, measured and submitted to histological, histochemical and immunohistochemical evaluation. There was a statistically significant difference regarding the tumor volume, but no difference in the proliferative activity of the cells. Tumors were present in animals of the experimental group, on average, with a higher microvascular density, higher deposition of extracellular matrix and lower expression of COX-2. These findings corroborate the reports of restriction to tumor growth in schizophrenic patients, reinforcing the action of Poli-I: C on the ninth day of pregnancy as a model of this psychiatric disorder. Particularly changes in the amount and pattern of deposition of extracellular matrix elements may alter the mechanical interactions and potentially the gene expression in this microenvironment, interfering with cell signaling and tumor evolution. Also, the inflammatory response shows signs of modulation, with a lower leukocyte expression of COX-2 in the tumor microenvironment of the experimental group, potentially interfering in tumor cell survival. Finally, the presence of alterations in the composition of the extracellular matrix in brain regions in the schizophrenic patient deserve mention, suggesting an active participation of the extracellular matrix in the modulation of different processes in the schizophrenic patient.

Angiogenesis inhibition by green propolis and the angiogenic effect of L-lysine on bladder cancer in rats / Inibição da angiogênese pela própolis verde e efeito angiogênico da L-lisina no câncer de bexiga em ratos

PURPOSE: To determine the effects of water-soluble derivative of green propolis in bladder cancer angiogenesis in rats given N-butyl-(-4-hydroxybutyl) nitrosamine (BBN). METHODS: Nine groups were established, where six of them (Groups 1 to 6), the animals received 0.05% BBN in their drinking water for 14 weeks. From the 32nd to the 40th week, Groups 1, 2, 3 and 4 were treated respectively with water, L-lysine (300 mg/kg/day), celecoxib (30 mg/kg/day) and propolis (300 mg/kg/day). Groups 5 and 6 were given propolis and L-lysine from the 1st to the 40th week (150 mg/kg/day). Microvascular density was determined by histological sections stained for the marker CD-31 and analyzed with specific software. RESULTS: The microvascular density in bladder carcinomas was lower (p<0.01) in rats receiving propolis than in controls given carcinogen only. On the other hand, the microvascular density of tumors in rats receiving carcinogen and L-lysine for 40 weeks from the beginning of carcinogen treatment was significantly higher (p<0.01) than in the corresponding controls. CONCLUSION: Water-soluble derivative of propolis inhibits angiogenesis in BBN-induced rat bladder cancer, while L-lysine treatment stimulates angiogenesis if initiated concurrently with BBN.(AU)

OBJETIVO: Determinar os efeitos da própolis verde solúvel em água na angiogênese de câncer de bexiga em ratos que receberam n-butil-(-4-hidroxibutil) nitrosamina (BBN). METODOS: Nove grupos foram estabelecidos, onde em seis destes (grupos de 1 a 6) os animais receberam BBN a 0,05% em água de beber por 14 semanas. Na 32ª semana das 40 semanas, os grupos 1, 2, 3 e 4 foram tratados respectivamente com água, L lisina (300 mg/kg/dia), celecoxibe (30 mg/kg/dia) e própolis (300 mg/kg/dia). Os grupos 5 e 6 receberam própolis e L lisina da 1ª a 40ª semana (150 mg/ kg/dia). A densidade microvascular foi determinada por cortes histológicos corados pelo CD-31 e analisados por programa de computador específico. RESULTADOS: A densidade microvascular em carcinomas de bexiga foi menor com p<0,01 nos ratos que receberam própolis do que nos carcinomas do grupo controle que recebeu apenas carcinógeno. Por outro lado, a densidade microvascular de tumores de ratos que receberam carcinógeno e L-Lisina por 40 semanas desde o início do carcinógeno foi significantemente maior com p<0,01 que a densidade microvascular dos tumores de seu respectivo grupo controle. CONCLUSÃO: A própolis verde solúvel em água inibiu a angiogênese em câncer de bexiga induzido pelo BBN, enquanto a L- lisina estimulou a angiogênese quando iniciada juntamente com o BBN.(AU)

Effect of hyperbaric oxygen therapy on the intestinal ischemia reperfusion injury / Efeito da oxigenoterapia hiperbárica na lesão por isquemia reperfusão intestinal

PURPOSE: Adequate tissue oxygenation is essential for healing. Hyperbaric oxygen therapy (HBOT) has potential clinical applications to treat ischemic pathologies, however the exact nature of any protective effects are unclear at present. We therefore investigated the potential role of HBOT in modulating the ischemia/reperfusion (I/R) injury response in intestinal model of I/R injury. METHODS: Male Wistar rats were subjected to surgery for the induction of intestinal ischemia followed by reperfusion. HBOT was provided before and/or after intestinal ischemia. Cell viability in the intestinal tissue was assessed using the MTT assay and by measuring serum malondealdehyde (MDA). Microvascular density and apoptosis were evaluated by immunohistochemistry. RESULTS: The results indicate that HBOT treatment pre- and post-ischemia reduces lesion size to the intestinal tissue. This treatment increases cell viability and reduces the activation of caspase-3, which is associated with increased number of tissue CD34 cells and enhanced VEGF expression. CONCLUSION: The hyperbaric oxygen therapy can limit tissue damage due to ischemia/reperfusion injury, by inducing reparative signaling pathways.(AU)

OBJETIVO: Oxigenação tissular adequada é essencial para cicatrização. Oxigenoterapia hiperbárica (HBOT) tem aplicação clínica para tratar lesões isquêmicas, entretanto a natureza exata dos mecanismos envolvidos permanece incerta. Procuramos investigar o papel potencial da HBOT na modulação da resposta a uma lesão por isquemia reperfusão (I/R) intestinal em modelo de lesão de I/R. MÉTODOS: Ratos machos Wistar foram submetidos à cirurgia para a indução da isquemia intestinal seguida de reperfusão. HBOT foi fornecido antes e / ou após a isquemia intestinal. A viabilidade das células no tecido intestinal foi avaliada através do ensaio de MTT e pela medição malondealdeido (MDA) no plasma. Densidade microvascular e apoptose foram avaliados por imuno-histoquímica. RESULTADOS: Os resultados indicam que o tratamento HBOT pré e pós-isquemia reduz o tamanho da lesão ao tecido intestinal. Este tratamento aumenta a viabilidade celular e reduz a ativação da caspase-3, que está associada com aumento do número de células CD 34 no tecido e da expressão da VEGF. CONCLUSÃO: A oxigenoterapia hiperbárica pode limitar os danos do tecido devido à lesão por isquemia/reperfusão, induzindo às vias de sinalização reparadora.(AU)

Avaliação do comportamento vascular do tumor de Ehrlich na forma sólida em camundongos submetidos à eletroquimioterapia com bleomicina

A eletroquimioterapia (EQT) é uma modalidade de tratamento recente que se baseia na associação de quimioterápicos potencializados pela eletroporação. Possui indicação para neoplasias sólidas de origens histológicas distintas, apresentando baixa morbidade e elevada eficiência. A ação da EQT ocorre em múltiplos sítios, tanto envolvendo a quebra da molécula de DNA, quanto exercendo efeito sobre a vasculatura tumoral. No presente estudo buscou-se maior compreensão dos eventos vasculares, avaliando-se qualitativamente e quantitativamente, com auxílio de marcação imunológica, com fator VIII e VEGF-A, a vascularização do tumor de Ehrlich implantado na forma sólida em camundongos, não tratados e submetidos à EQT com bleomicina, após sete dias de tratamento. No intuito de melhor elucidar os fenômenos vasculares, também foi investigado o efeito do resveratrol associado à EQT. O resveratrol, presente em vegetais como as uvas, possui efeitos de inibição do HIF1-a, reconhecida proteina que estimula a angiogênese em condições de hipoxia tumoral. Os animais submetidos à quimioterapia com bleomicina não apresentaram redução de volume tumoral, ao contrário dos que sofreram EQT com o mesmo fármaco. Evidenciou-se maior densidade microvascular tumoral em animais tratados com quimioterapia, quando comparados aos não tratados e aos submetidos à EQT. O tratamento com resveratrol diminuiu a expressão de VEGF-A e obteve efeito mais pronunciado quando associado à EQT com bleomicina. Através dos fenômenos pesquisados pôde-se evidenciar que a EQT com bleomicina foi efetiva na redução do volume do tumor de Ehrlich e que houve redução da atividade proliferativa assim como da densidade microvascular tumoral. Também observou-se que o resveratrol, ainda mais quando associado à EQT com bleomicina, reduz a proliferação tumoral e a expressão de VEGF-A.

The electrochemotherapy (EQT) is a new treatment modality based on the association of chemotherapy potentiated by electroporation. Has indication for solid neoplasms of histological distinct origins, presenting low morbidity and high efficiency. The action of the EQT occurs in multiple sites, both involving the breakage of the DNA molecule, as having an effect on the tumor vasculature. The present study aimed at better understanding of vascular events, evaluating qualitatively and quantitatively, using immune labeling, with factor VIII and VEGF-A, the vascularization of the Ehrlich tumor implanted in solid form in mice, untreated and submitted to EQT with bleomycin, after seven days of treatment. In order to better elucidate the vascular phenomena, was also investigated the effect of resveratrol associated with EQT. The resveratrol present in plants such as grapes, has inhibitory effects of HIF1-, a protein that is recognized to stimulates angiogenesis in tumor hypoxia. The animals submitted to chemotherapy with bleomycin showed no reduction of tumor volume, unlike those who suffered EQT with the same drug. It was evidenced increased microvessel density tumor in animals treated with chemotherapy, when compared to untreated and those submitted to EQT. The treatment with resveratrol decreased the expression of VEGF-A and obtained effect was more pronounced when associated to the EQT with bleomycin. This research can prove that the EQT with bleomycin was effective in reducing the volume of Ehrlich tumor and that there was a reduction of proliferative activity as well as of microvascular density tumor. Also it was observed that the resveratrol, even more when associated with EQT with bleomycin, reduces the tumor proliferation and the expression of VEGF-A.

Mast cells and angiogenesis in canine mammary tumor / Mastócitos e angiogênese nos tumores mamários caninos

The correlation between microvessel density and mast cells density in canine mammary tumors was studied. Sixty-five samples of canine mammary tumors, being 24 benign and 41 malignant, were analyzed. The routine Toluidine Blue staining method was used to assess the mast cells. To evaluate angiogenesis, the immunohistochemical expression of CD31 was assessed. There was no significant difference in either mast cells (P=0.44) or microvessel density (P=0.77) between malignant and benign tumors. A positive correlation was observed between microvessel density and mast cells (r=0.39; P=0.011) in malignant tumors. These results suggest that mast cells may play a role in canine mammary malignant tumors development, promoting angiogenesis, similar to some tumors described in the human species.(AU)

Estimou-se a correlação entre a densidade de microvasos e a densidade de mastócitos em tumores mamários caninos. Sessenta e cinco amostras de tumores mamários caninos - 24 benignos e 41 malignos - foram analisadas, pela técnica rotineira de coloração com Azul de Toluidina para avaliação da densidade de mastócitos. Para a avaliação da angiogênese, foi utilizada a técnica de imunoistoquímica para expressão de CD31. Não foram observadas diferenças significativas de mastócitos (P=0.44) ou densidade microvascular (P=0.77) entre tumores malignos e benignos. A correlação entre densidade microvascular e densidade de mastócitos foi positiva (r=0,39; P=0,011) em tumores malignos. Estes resultados sugerem que os mastócitos podem exercer um importante papel no desenvolvimento de tumores mamários malignos caninos mediante promoção da angiogênese, similarmente a alguns tumores descritos na espécie humana.(AU)

DNA flow cytometry of canine mammary tumors: comparative aspects with human breast tumors

Flow cytometric analysis of DNA content was performed on 28 samples of canine mammary tumors. Nine of them were benign and 19 were malignant. All benign tumors and 11 malignant tumors (57.9%) were diploid (P 0.05). Form the aneuploid tumors, five (26.3%) were hyperdiploid, one (5.3%) hypodiploid, one (5.3%) near triploid and one (5.3%) multiploid. The analysis of the expression of the markers PR and CD31 revealed a significant difference between diploid and aneuploid tumors (P 0.05). The immunoreactivity of PR was higher in diploid tumors, while the immunoreactivity of CD31 was stronger in aneuploid tumors. No difference between the markers MIB-1, c-erbB2, p53 and Cyclin D1 was observed (P>0.05). Using the flow cytometry analysis and immunohistochemistry, it was found a close relationship between aneuploidy and malignant character of neoplasias, progesterone receptor (PR) negative immunostaining and higher microvases density. No correlation between DNA content and S phase or immunoreactivity for the markers MIB-1, p53, c-erbB2 and Cyclin D1 was observed.

Análise por citometria de fluxo de DNA foi realizada em 28 amostras de tumores mamários de cadela. Nove eram benignos e 19 malignos, sendo todos os benignos e 11 malignos (57,9%) diplóides (P 0,05). Dos tumores aneuploides, cinco (26,3%) eram hiperdiploides, um (5,3%) hipodiploide, um (5,3%) triploide e um (5,3%) multiploide. A análise dos marcadores de expressão PR e CD31 revelaram significativa diferença entre tumores diploides e aneuploides (P 0,05). A imunorreatividade do PR foi maior em tumores diplóides e a imunoreatividade do CD 31 maior em tumores aneuploides. Para os marcadores MIB-1, c-erbB-2, p53 e Ciclina D1 não foi observada diferença significativa (P>0,05). Pela citometria de fluxo e pela imunoistoquímica verificaram-se uma relação entre aneuploidia e características malignas das neoplasias, receptor de progesterona imunoreação negativa e alta densidade de microvascular. Não foi observada correlação entre conteúdo de DNA e a fase S ou imunorreatividade para os marcadores MIB-1, c-erbB-2, p53 e Ciclina D1.

DNA flow cytometry of canine mammary tumors: comparative aspects with human breast tumors / Citometria de fluxo de DNA em tumores mamários da cadela:aspectos comparativos com tumores mamários humano

Flow cytometric analysis of DNA content was performed on 28 samples of canine mammary tumors. Nine of them were benign and 19 were malignant. All benign tumors and 11 malignant tumors (57.9 percent) were diploid (P<0.05). Form the aneuploid tumors, five (26.3 percent) were hyperdiploid, one (5.3 percent) hypodiploid, one (5.3 percent) near triploid and one (5.3 percent) multiploid. The analysis of the expression of the markers PR and CD31 revealed a significant difference between diploid and aneuploid tumors (P<0.05). The immunoreactivity of PR was higher in diploid tumors, while the immunoreactivity of CD31 was stronger in aneuploid tumors. No difference between the markers MIB-1, c-erbB2, p53 and Cyclin D1 was observed (P>0.05). Using the flow cytometry analysis and immunohistochemistry, it was found a close relationship between aneuploidy and malignant character of neoplasias, progesterone receptor (PR) negative immunostaining and higher microvases density. No correlation between DNA content and S phase or immunoreactivity for the markers MIB-1, p53, c-erbB2 and Cyclin D1 was observed(AU)

Análise por citometria de fluxo de DNA foi realizada em 28 amostras de tumores mamários de cadela. Nove eram benignos e 19 malignos, sendo todos os benignos e 11 malignos (57,9 por cento) diplóides (P<0,05). Dos tumores aneuploides, cinco (26,3 por cento) eram hiperdiploides, um (5,3 por cento) hipodiploide, um (5,3 por cento) triploide e um (5,3 por cento) multiploide. A análise dos marcadores de expressão PR e CD31 revelaram significativa diferença entre tumores diploides e aneuploides (P<0,05). A imunorreatividade do PR foi maior em tumores diplóides e a imunoreatividade do CD 31 maior em tumores aneuploides. Para os marcadores MIB-1, c-erbB-2, p53 e Ciclina D1 não foi observada diferença significativa (P>0,05). Pela citometria de fluxo e pela imunoistoquímica verificaram-se uma relação entre aneuploidia e características malignas das neoplasias, receptor de progesterona imunoreação negativa e alta densidade de microvascular. Não foi observada correlação entre conteúdo de DNA e a fase S ou imunorreatividade para os marcadores MIB-1, c-erbB-2, p53 e Ciclina D1(AU)

Assessment of angiogenesis expression and its relationship with prognosis of colorectal cancer by conventional and computer-assisted histopathological image analysis / Investigação da expressão da angiogênese e sua relação com o prognóstico do câncer colorretal pela análise convencional e informatizada da imagem histopatológica

PURPOSE: To quantify the degree of angiogenesis by conventional method (microvessel density, MVD) and computerized method (endothelial area, EA), and to evaluate their relationships with the prognosis of patients operated on for colorectal adenocarcinoma. METHODS: Tumoral angiogenesis was studied by means of an immunohistochemical technique, using CD 34, on 126 patients; to quantify the angiogenesis, MVD (defined as number of microvessels per mm²) and EA measurement (defined as the area occupied by EA in the microscope field). A computerized method, IMAGELab software was utilized to quantify endothelial area. RESULTS: The mean number of microvessels was 128.6 MV/mm² (SD = 44.5) and the mean EA was 4.3 percent (SD = 2.1). The Pearson method demonstrated a low correlation coefficient between MVD and EA (r = 0.429). No relationship between MVD and EA was observed with regard to relapse-free interval and overall survival. CONCLUSION: The histological analysis of angiogenesis expression in patients with colorectal adenocarcinoma can be performed either by computer-assisted image analysis of endothelial area or by conventional microvessels counting. Both methods did not show any significant relationship between these angiogenesis parameters with relapse-free interval and overall survival.(AU)

OBJETIVO: Quantificar a intensidade da angiogênese pelo método convencional (densidade microvasal, DMV) e pelo método informatizado, área endothelial (AE) e avaliar a sua correlação com o prognóstico de doentes operados por adenocarcinoma colorretal. MÉTODOS: A angiogênese tumoral foi investigada por meio de técnica imuno-histoquímica, utilizando-se CD-34, em 126 doentes; para quantificar a angiogênese, a microdensidade vascular, definida como o número de microvasos por mm² e a medida da área endotelial, definida como a área ocupada pelo endotélio vascular identificada no campo microscópico foram empregadas. Um programa computadorizado, o IMAGELab foi empregado para a quantificação da área endothelial. RESULTADOS: A media do número de microvasos foi de 128,6 MV/mm ² (d esvio padrão de 44,5). O método do coeficiente de Pearson demonstrou uma baixa correlação entre a DMV e a AE (r=0,429). Nenhuma correlação entre a DMV e AE com o intervalo livre de doença e tempo global de sobrevida foi observada. CONCLUSÃO: A análise histológica da expressão angiogênica em doentes com adenocarcinoma colorretal pode ser realizada tanto da forma informatizada, na quantificação da área endotelial, como pela convencional, na contagem dos microvasos. Ambos métodos não demonstraram relação estatisticamente significante entre estes parâmetros de angiogênese e o intervalo livre de doença e a sobrevida global.(AU)

Utilização de Doppler como fator prognóstico e suas correlações com marcadores imunoistoquímicos no mastocitoma cutâneo canino

O mastocitoma (MCT) cutâneo é uma das neoplasias malignas mais comuns em cães, representa 11% dos tumores de pele nesta espécie e apresenta comportamento biológico variável. Este trabalho dá continuidade a pesquisas com biomarcadores prognósticos em MCTs cutâneos em cães. Foi realizado um estudo em busca de critérios complementares ao exame clínico (ultrassonografia pelo método Doppler), que auxiliem na determinação do potencial de recidiva e metástase do tumor, correlacionando-os com a expressão da proteína KIT, densidade microvascular (DMI), tamanho, número de tumores, tempo de evolução, ulceração, tempo de sobrevida e graduação histopatológica. Além disso, foi realizada uma análise dos parâmetros clínicos, incluindo dados epidemiológicos, achados histológicos e moleculares e a correlação destes com o comportamento biológico do MCT. Foram avaliados 20 cães, que totalizaram 28 tumores. A ultrassonografia (US) pelo método Doppler permitiu a identificação de vasos em 54% dos tumores. Não houve correlação entre a presença de vasos e a DMI, a localização da proteína KIT, os graus histológicos, o tempo de evolução, o tamanho, a ocorrência de recidivas e metástases, e o tempo de sobrevida, mas sim com a presença de ulceração tumoral. Observou-se correlação estatística entre o grau histológico, a DMI, a presença de ulceração e o número de tumores e também da expressão de Ki-67 com os padrões de marcação da proteína KIT. O grau histológico no MCT cutâneo canino não deve ser avaliado isoladamente, mas sim em conjunto com a expressão da proteína KIT, DMI, proliferação celular, presença de ulceração, número de tumores e ocorrência de recidivas e metástases. Indicamos que estudos adicionais...

Cutaneous mast cell tumor (MCT) is one of the most common malignant neoplasms in dogs, representing 11% of skin tumors in this species and shows a variable biological behavior. This article maintains the search on prognostic biomarkers in cutaneous MCTs in dogs. A study was conducted to find additional criteria to the clinical examination (Doppler ultrasound) to add in determining the potential for recurrence and metastasis of tumors, correlating them with KIT protein expression, intratumoral microvessel density (IMD), size, number of tumors, duration time, ulceration, survival rates and histological classification. In addition, we performed an analysis of clinical parameters, including epidemiological data, histological and molecular ones and correlate them with the biological behavior of MCT. We evaluated 20 dogs, in a total of 28 tumors. The Doppler ultrasound (US) allowed the identification of vessels in 54% of tumors. There was no correlation between the presence of vessels and IMD, KIT protein location, histological grades, duration time, tumor size, recurrence and metastasis, and survival rates, but with ulceration. We have observed statistical correlation between histological grade, IDM, presence of ulceration and number of tumors and also the expression of Ki-67 with patterns of KIT protein. The histological grade in canine cutaneous MCT should not be assessed in isolation but in conjunction with expression of KIT protein, IDM, cell proliferation, presence of ulceration, number of tumors and recurrences and metastases rates. We suggest that additional studies should be done to further evaluate the use of Doppler US as a noninvasive method to chacarterize the vascularization and blood flow in...

NEOPLASIA INTRA-EPITELIAL PROSTÁTICA: ASPECTOS MORFOLÓGICOS E MOLECULARES

A neoplasia intra-epitelial prostática (PIN) é uma lesão não-invasiva da próstata que apresenta anormalidades genéticas, perda de controle das funções celulares e características fenotípicas do câncer invasivo. Microscopicamente essa neoplasia consiste de alterações histo e citológicas no epitélio de revestimento ductal ou ácinos pré-existentes, exibindo geralmente distribuição multifocal. A lesão pode ser classificada em PIN de baixo (LGPIN) ou alto grau (HGPIN). Os aspectos morfológicos que incluem ruptura da camada de células basais, aumento da capacidade proliferativa epitelial e da densidade microvascular, sugerem que o HGPIN é um estágio intermediário de progressão do epitélio benigno a carcinoma. Palavras-chave: neoplasia intra-epitelial prostática (PIN), próstata, cão, imunoistoquímica. PROSTATIC INTRAEPITHELIAL NEOPLASIA: MORPHOLOGICAL AND MOLECULAR ASPECTS ABSTRACT Prostatic intraepithelial neoplasia (PIN) is a non-invasive prostatic lesion that shows genetic abnormalities, cellular functions changes and phenotypic invasive cancer pattern. Histopathological exam shows histo and cytological changes in pre existing ducts and acines, mostly in a multifocal way. The lesion can be classified as low grade PIN (LGPIN) or high grade PIN (HGPIN). Morphological aspects, including basal membrane rupture, higher proliferative index and micro vascular density are suggest

Neoplasia intra-epitelial prostática: aspectos morfológicos e moleculares

A neoplasia intra-epitelial prostática (PIN) é uma lesão não-invasiva da próstata que apresenta anormalidades genéticas, perda de controle das funções celulares e características fenotípicas do câncer invasivo. Microscopicamente essa neoplasia consiste de alterações histo e citológicas no epitélio de revestimento ductal ou ácinos pré-existentes, exibindo geralmente distribuição multifocal. A lesão pode ser classificada em PIN de baixo (LGPIN) ou alto grau (HGPIN). Os aspectos morfológicos que incluem ruptura da camada de células basais, aumento da capacidade proliferativa epitelial e da densidade microvascular, sugerem que o HGPIN é um estágio intermediário de progressão do epitélio benigno a carcinoma. Palavras-chave: neoplasia intra-epitelial prostática (PIN), próstata, cão, imunoistoquímica. PROSTATIC INTRAEPITHELIAL NEOPLASIA: MORPHOLOGICAL AND MOLECULAR ASPECTS ABSTRACT Prostatic intraepithelial neoplasia (PIN) is a non-invasive prostatic lesion that shows genetic abnormalities, cellular functions changes and phenotypic invasive cancer pattern. Histopathological exam shows histo and cytological changes in pre existing ducts and acines, mostly in a multifocal way. The lesion can be classified as low grade PIN (LGPIN) or high grade PIN (HGPIN). Morphological aspects, including basal membrane rupture, higher proliferative index and micro vascular density are suggest

Avaliação da expressão e dos níveis séricos do fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) e da densidade de microvasos em cães portadores de sarcomas de tecidos moles submetidos à excisão cirúrgica / Evaluation of the expression and serum level of the vascular endothelial growth factor (VEGF) and of the microvascular density in dogs with soft tissue sarcoma submitted to surgical excision

No indivíduo adulto, a angiogênese ocorre particularmente em situações patológicas como nos tumores em crescimento, no desenvolvimento de metástases e no processo de cicatrização, sendo o fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) o principal fator envolvido na angiogênese tumoral. Por essa razão, o presente estudo teve como objetivo avaliar os níveis circulantes de VEGF no soro de cães com sarcoma de tecidos moles e sua relação com as células sanguineas, comparados com um grupo de animais sem câncer (controle), a expressão do VEGF e a densidade de microvasos nos espécimes tumorais dos cães com sarcoma de tecidos moles. O grupo controle foi composto de 30 cães machos e o grupo de animais com sarcoma de tecidos moles foi de 25 cães (18 machos e 7 fêmeas castradas) os quais foram avaliados prospectivamente. A coleta sangüínea foi realizada apenas uma vez no grupo controle e em três tempos nos animais com sarcoma (pré-operatório, duas semanas e três meses de pós-operatório) da mesma maneira. Após a colheita o sangue foi processado, para extração do soro e determinação dos níveis de VEGF a partir de um método quantitativo ELISA (enzime-linked immunosorbent assay). A expressão do VEGF e a densidade de microvasos foi investigada por meio da prova de imunoistoquiímica utilizando-se anticorpos anti-VEGF e anti-fator VIII respectivemente. Não houve diferença entre o nível sérico de VEGF dos animais controles e portadores de sarcoma de tecidos moles no tempo pré-operatório. O nível de VEGF sérico no pré-operatório mostrou-se discretamente aumentado em relação a duas semanas e três meses de pós-operatório. Houve correlação positiva entre VEGF sérico e contagem neutrófilos e correlação negativa entre o VEGF e quantidade de hemoglobina nos animais com sarcoma. Houve uma tendência dos animais com hemangiopericitoma apresentarem níveis maiores de VEGF sérico em relação aos portadores de tumor maligno da bainha neural periférica. Houve expressão do VEGF em 65% dos casos, sendo o hemangiopericitoma aquele que expressou maior quantidade de VEGF intratumoral. Não houve diferença na densidade de microvasos entre os tumores negativos e positivos ao VEGF. Os resultados encontrados sugerem contribuição das células do sangue circulante para os níveis de VEGF do soro de cães portadores de sarcomas de tecidos moles, células tumorais e outros tipos celulares parecem ser responsáveis pela angiogênese tumoral, mas não contribuem para elevação da concentração sérica desse fator

In adult individual, angiogenesis occurs particularly in pathological situations as tumors growth, development of metastasis and in the wound healing process. The vascular endothelial growth factor (VEGF) is the main agent involved in tumor angiogenesis. Therefore, the aim of the present study was to evaluate the circulating levels of VEGF in the serum of dogs suffering from soft tissue sarcoma and its relation with the blood cells, and also the expression of VEGF and the micro vascular density in tumors specimens. A group of health animals was used as control. The control group and treatment group were composed of 30 male dogs 25 dogs (18 males and 7 castrated females) respectively. The blood collection was carried once in the control group and three times in the animals with sarcoma (timely, pre-surgery, two weeks and three months post-surgery) following the same protocol. The blood was processed and a quantitative method ELISA (enzime-linked immunosorbent assay) was used to determinate of the levels of VEGF. The expression of the VEGF and the microvascular density were investigated by means of the immunohistochemical test using anti-VEGF and anti-factor VIII antibodies respectively. There was no difference between serum level of VEGF of the controls animals and serum level of VEGF in the animal with soft tissue sarcoma in pre-surgical time. Serum level of VEGF in pre-surgical time revealed discrete increased in relation the two weeks and three months of post-surgery. There was a positive correlation between serum VEGF and neutrophils counting and negative correlation between the VEGF and amount of haemoglobin in the animals with sarcoma. The animals with hemangiopericytoma showed a trend to higher levels of VEGF in relation to the malignant peripheral nerve sheath tumor. The expression of the VEGF was detected in 65% of the cases; the hemangiopericytoma is the one that expressed greater intratumoral amount of VEGF. There was no difference in the microvascular density between the negative and positive tumors to the VEGF. The results suggest contribution of the circulating blood cells for the levels of serum VEGF of the of the dogs with of soft tissue sarcomas, tumors cells and other cells types seem to be responsible for tumor angiogenesis, but they don\'t contribute for rise serum level of VEGF