Parasitism capacity of Trichogramma pretiosum Riley, 1879 and Telenomus remus Nixon, 1937 after ingestion of biological pesticides / Capacidade de parasitismo de Trichogramma pretiosum Riley, 1879 e Telenomus remus Nixon, 1937 após ingestão de pesticidas biológicos

Augmentative biological control (ABC) of insect pests is an environmentally sustainable alternative to synthetic insecticides. By performing BC, more than one control agent can be used for the same insect pest that is in different stages of its life cycle or for pests that simultaneously occur in the area. However, this relationship requires biosecurity for the control agents employed. The aim of this study was to evaluate the parasitism capacity of Trichogramma pretiosum Riley, 1879 and Telenomus remus Nixon, 1937 after ingestion of biological pesticides. The entomopathogens, Baculovirus Anticarsia gemmatalis nucleopolyhedrovirus (AgMNPV), Bacillus thuringiensis (Bt) var. kurstaki, Bt var. aizawai, Beauveria bassiana, and Metarhizium anisopliae; the microbiological fungicide, Trichoderma harzianum, at concentrations recommended by the manufacturer; and a negative control (pure honey) were employed in this study. Further, forced ingestion was adopted, with the treatments mixed in honey and offered as food at two dilutions (one-part product: one-part honey and one-part product: nine parts honey). Each treatment consisted of 20 individual females for each parasitoid (T. pretiosum or T. remus). The following parameters were evaluated: female longevity, number of parasitized eggs, egg viability, and number of females and males to determine the sex ratio. For T. pretiosum, B. bassiana (1 × 1013 viable conidia 100 L H2O-1), and T. harzianum (5 × 1012 viable conidia 100 L H2O-1), the longevity of their females was reduced by the 1:1 mixture; however, this mixture did not interfere with other parameters and other biological pesticides compared to the respective controls of both dilutions. The biological pesticides did not negatively influence the parameters evaluated for T. remus. The tested products had low toxicity to the egg parasitoids, T. pretiosum and T. remus. Overall, more work is still required with parasitoids in other stages of development and with other exposure methods to confirm the selectivity of products for egg parasitoids to recommend its combined use in the field.(AU)

O controle biológico aumentativo (CBA) de insetos-praga é uma alternativa ambientalmente sustentável em relação aos inseticidas sintéticos. Com a utilização do CBA, mais de um agente de controle pode ser utilizado para um mesmo inseto-praga que se encontra em diferentes estágios do seu ciclo de vida ou para pragas que ocorrem simultaneamente na área. No entanto, essa relação necessita de biossegurança para os agentes de controle envolvidos. O objetivo do trabalho foi avaliar a capacidade de parasitismo de Trichogramma pretiosum Riley, 1879 e Telenomus remus Nixon, 1937 após a ingestão de pesticidas biológicos. Os entomopatógenos Baculovírus Anticarsia gemmatalis nucleopoliedrovirus (AgMNPV), Bacillus thuringiensis var. kurstaki, Bacillus thuringiensis var. aizawai, Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae, o fungicida microbiológico Trichoderma harzianum nas concentrações recomendadas pelos fabricantes e um controle negativo (mel puro) foram utilizados nos bioensaios. A metodologia empregada foi de ingestão forçada, com os tratamentos misturados ao mel e oferecidos como alimento em duas diluições diferentes (1 parte do produto:1 parte de mel e 1 parte do produto:9 partes de mel). Cada tratamento constou de 20 fêmeas individualizadas de cada parasitoide (T. pretiosum ou T. remus). Os parâmetros avaliados foram: longevidade das fêmeas, número de ovos parasitados, viabilidade dos ovos e número de fêmeas e machos para determinação da razão sexual. Para T. pretiosum, B. bassiana (1×1013 conídios viáveis 100L H2O-1) e T. harzianum (5×1012 conídios viáveis 100L H2O-1) reduziram a longevidade das fêmeas na mistura 1:1, porém não interferiram nos demais parâmetros avaliados, bem como os demais produtos microbiológicos comerciais avaliados, quando comparados às respectivas testemunhas de ambas as diluições. Os pesticidas biológicos não influenciaram negativamente nos parâmetros avaliados de T. remus. Os produtos testados apresentam baixa toxicidade aos parasitoides de ovos T. pretiosum e T. remus. Ainda há necessidade de mais trabalhos com outros estágios de desenvolvimento dos parasitoides e outros métodos de exposição para confirmar a seletividade dos produtos aos parasitoides de ovos, para recomendar o uso conjunto destes no campo.(AU)

Isolates of Bacillus thuringiensis from Maranhão biomes with potential insecticidal action against Aedes aegypti larvae (Diptera, Culicidae) / Isolados de Bacillus thuringiensis de biomas maranhenses com potencial ação inseticida contra larvas de Aedes aegypti (Diptera, Culicidae)

Entomopathogenic agents are viable and effective options due to their selective action against insects but benign effects on humans and the environment. The most promising entomopathogens include subspecies of Bacillus thuringiensis (Bt), which are widely used for the biological control of insects, including mosquito vectors of human pathogens. The efficacy of B. thuringiensis toxicity has led to the search for new potentially toxic isolates in different regions of the world. Therefore, soil samples from the Amazon, Cerrado and Caatinga biomes of the state of Maranhão were evaluated for their potential larvicidal action against Aedes aegypti. The isolates with high toxicity to mosquito larvae, as detected by bioassays, were subjected to histological evaluation under a light microscope to identify the genes potentially responsible for the toxicity. Additionally, the toxic effects of these isolates on the intestinal epithelium were assessed. In the new B. thuringiensis isolates toxic to A. aegypti larvae, cry and cyt genes were amplified at different frequencies, with cry4, cyt1, cry32, cry10 and cry11 being the most frequent (33-55%) among those investigated. These genes encode specific proteins toxic to dipterans and may explain the severe morphological changes in the intestine of A. aegypti larvae caused by the toxins of the isolates.(AU)

Os agentes entomopatógenos são alternativas viáveis e eficazes, devido à sua ação seletiva para insetos sendo inofensivos ao homem e ao meio ambiente. Dentre os entomopatógenos mais promissores, destacam-se as subespécies de Bacillus thuringiensis (Bt) amplamente utilizadas no controle biológico de insetos incluindo espécies de mosquitos vetores de agentes patogênicos ao homem. A eficiência da toxicidade de Bt incentiva a prospecção de novos isolados em diversas regiões do mundo. Desta forma, em busca de novos isolados de B. thuringiensis potencialmente tóxicos, amostras de solo provenientes dos biomas Amazônia, Cerrado e Caatinga do estado do Maranhão foram avaliadas em relação ao seu potencial larvicida para Aedes aegypti. Os isolados que provocaram elevada toxicidade para larvas do mosquito, detectada por bioensaios, foram avaliados em relação aos potenciais genes responsáveis pela atividade tóxica, além da avaliação de efeitos tóxicos no epitélio intestinal através de análises histológicas em microscopia de luz. Os novos isolados de Bt tóxicos para larva de A. aegypti amplificaram frequências diferentes de genes cry e cyt sendo os mais frequentes (55-33%) os cry4, cyt1, cry32, cry10 e cry11 dentre os investigados. Esses genes codificam para proteínas tóxicas específicas para ordem Diptera, e podem explicar as severas alterações morfológicas provocadas pelas toxinas dos isolados observadas no intestino das larvas de A. aegypti.(AU)

Isolates of Bacillus thuringiensis from Maranhão biomes with potential insecticidal action against Aedes aegypti larvae (Diptera, Culicidae)

Abstract Entomopathogenic agents are viable and effective options due to their selective action against insects but benign effects on humans and the environment. The most promising entomopathogens include subspecies of Bacillus thuringiensis (Bt), which are widely used for the biological control of insects, including mosquito vectors of human pathogens. The efficacy of B. thuringiensis toxicity has led to the search for new potentially toxic isolates in different regions of the world. Therefore, soil samples from the Amazon, Cerrado and Caatinga biomes of the state of Maranhão were evaluated for their potential larvicidal action against Aedes aegypti. The isolates with high toxicity to mosquito larvae, as detected by bioassays, were subjected to histological evaluation under a light microscope to identify the genes potentially responsible for the toxicity. Additionally, the toxic effects of these isolates on the intestinal epithelium were assessed. In the new B. thuringiensis isolates toxic to A. aegypti larvae, cry and cyt genes were amplified at different frequencies, with cry4, cyt1, cry32, cry10 and cry11 being the most frequent (33-55%) among those investigated. These genes encode specific proteins toxic to dipterans and may explain the severe morphological changes in the intestine of A. aegypti larvae caused by the toxins of the isolates.

Resumo Os agentes entomopatógenos são alternativas viáveis e eficazes, devido à sua ação seletiva para insetos sendo inofensivos ao homem e ao meio ambiente. Dentre os entomopatógenos mais promissores, destacam-se as subespécies de Bacillus thuringiensis (Bt) amplamente utilizadas no controle biológico de insetos incluindo espécies de mosquitos vetores de agentes patogênicos ao homem. A eficiência da toxicidade de Bt incentiva a prospecção de novos isolados em diversas regiões do mundo. Desta forma, em busca de novos isolados de B. thuringiensis potencialmente tóxicos, amostras de solo provenientes dos biomas Amazônia, Cerrado e Caatinga do estado do Maranhão foram avaliadas em relação ao seu potencial larvicida para Aedes aegypti. Os isolados que provocaram elevada toxicidade para larvas do mosquito, detectada por bioensaios, foram avaliados em relação aos potenciais genes responsáveis pela atividade tóxica, além da avaliação de efeitos tóxicos no epitélio intestinal através de análises histológicas em microscopia de luz. Os novos isolados de Bt tóxicos para larva de A. aegypti amplificaram frequências diferentes de genes cry e cyt sendo os mais frequentes (55-33%) os cry4, cyt1, cry32, cry10 e cry11 dentre os investigados. Esses genes codificam para proteínas tóxicas específicas para ordem Diptera, e podem explicar as severas alterações morfológicas provocadas pelas toxinas dos isolados observadas no intestino das larvas de A. aegypti.

Longevity of Apis mellifera workers fed on a diet incorporating entomopathogens / Longevidade de operárias de Apis mellifera alimentadas com dieta incorporada com entomopatógenos

The present study had the objective of evaluating the longevity of A. mellifera workers fed on a diet incorporating commercial entomopathogens, Beauveria bassiana, and Bacillus thuringiensis. It also aimed at verifying possible morphological alterations in the midgut. To this purpose, the entomopathogens used were B. bassiana (Product A) (5.0 × 1011 viable conidia.kg-1), B. thuringiensis (Product B) (2.5 × 109 viable spores.g-1), and B. thuringiensis (Product C) (1.0 × 109 viable spores.g-1); and two controls: T1: sterilized distilled water, and T2: sterilized distilled water + Tween 80® (0.01%). For the bioassays, 2 mL of each treatment were incorporated into Candy paste. For each treatment, 80 bees were individually in flat bottom glass tubes (2.5 cm Ø) covered with voile, containing a piece of cotton soaked in water and Candy paste. These tubes were stored in a B.O.D (30 ± 2°C, R.H 70% ± 10%, 12 h), and mortality was evaluated every six hours, for 10 days. Soon after verifying mortality, two bees per treatment were selected for the removal of their midgut. Midgut samples were processed using standard methodology for Scanning Electron Microscopy (SEM). It was verified that products A, B, and C reduced the longevity of bees when compared to T1 and T2 controls. In the qualitative analyses carried out using SEM, it was not possible to observe external or internal morphological alterations to midgut tissues. Although products A, B, and C cause a reduction in longevity, their presence was not verified when tissues were analyzed using SEM.(AU)

No presente trabalho objetivou-se avaliar a longevidade de operárias de A. mellifera alimentadas com dieta incorporada com os entomopatógenos comerciais Beauveria bassiana e Bacillus thuringiensis, e verificar possíveis alterações morfológicas em seu mesêntero. Para isso, os entomopatógenos utilizados foram B. bassiana (Produto A) (5,0 × 1011 conídios viáveis.kg-1), B. thuringiensis (Produto B) (2,5 × 109 esporos viáveis.g-1), B. thuringiensis (Produto C) (1,0 × 109 esporos viáveis.g-1); e dois controles: T1: água destilada esterilizada e T2: água destilada esterilizada + Tween 80® (0,01%). Para os bioensaios, 2 mL de cada tratamento foram incorporados à pasta Cândi. Para cada tratamento, 80 abelhas foram acondicionadas, individualmente, em tubos de vidro de fundo chato (2,5 cm Ø), cobertos com voile, contendo um pedaço de algodão embebido em água e pasta Cândi. Os tubos contendo as abelhas foram acondicionados em B.O.D (30 ± 2°C, U.R. 70% ± 10%, 12 h), e a mortalidade foi avaliada a cada seis horas, durante 10 dias. Logo após a verificação da mortalidade, foram separadas duas abelhas por tratamento para a retirada do mesêntero. Essas amostras foram processadas em metodologia padrão para Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Verificou-se que os produtos A, B e C reduziram a longevidade das abelhas quando comparados aos controles T1 e T2. Nas análises qualitativas realizadas com MEV, não foi possível observar alterações morfológicas externas ou internas nos tecidos do mesêntero. Apesar dos produtos A, B e C causarem redução na longevidade, sua presença não foi verificada quando os tecidos foram analisados por MEV.(AU)

Longevity of Apis mellifera workers fed on a diet incorporating entomopathogens / Longevidade de operárias de Apis mellifera alimentadas com dieta incorporada com entomopatógenos

The present study had the objective of evaluating the longevity of A. mellifera workers fed on a diet incorporating commercial entomopathogens, Beauveria bassiana, and Bacillus thuringiensis. It also aimed at verifying possible morphological alterations in the midgut. To this purpose, the entomopathogens used were B. bassiana (Product A) (5.0 × 1011 viable conidia.kg-1), B. thuringiensis (Product B) (2.5 × 109 viable spores.g-1), and B. thuringiensis (Product C) (1.0 × 109 viable spores.g-1); and two controls: T1: sterilized distilled water, and T2: sterilized distilled water + Tween 80® (0.01%). For the bioassays, 2 mL of each treatment were incorporated into Candy paste. For each treatment, 80 bees were individually in flat bottom glass tubes (2.5 cm Ø) covered with voile, containing a piece of cotton soaked in water and Candy paste. These tubes were stored in a B.O.D (30 ± 2°C, R.H 70% ± 10%, 12 h), and mortality was evaluated every six hours, for 10 days. Soon after verifying mortality, two bees per treatment were selected for the removal of their midgut. Midgut samples were processed using standard methodology for Scanning Electron Microscopy (SEM). It was verified that products A, B, and C reduced the longevity of bees when compared to T1 and T2 controls. In the qualitative analyses carried out using SEM, it was not possible to observe external or internal morphological alterations to midgut tissues. Although products A, B, and C cause a reduction in longevity, their presence was not verified when tissues were analyzed using SEM.(AU)

No presente trabalho objetivou-se avaliar a longevidade de operárias de A. mellifera alimentadas com dieta incorporada com os entomopatógenos comerciais Beauveria bassiana e Bacillus thuringiensis, e verificar possíveis alterações morfológicas em seu mesêntero. Para isso, os entomopatógenos utilizados foram B. bassiana (Produto A) (5,0 × 1011 conídios viáveis.kg-1), B. thuringiensis (Produto B) (2,5 × 109 esporos viáveis.g-1), B. thuringiensis (Produto C) (1,0 × 109 esporos viáveis.g-1); e dois controles: T1: água destilada esterilizada e T2: água destilada esterilizada + Tween 80® (0,01%). Para os bioensaios, 2 mL de cada tratamento foram incorporados à pasta Cândi. Para cada tratamento, 80 abelhas foram acondicionadas, individualmente, em tubos de vidro de fundo chato (2,5 cm Ø), cobertos com voile, contendo um pedaço de algodão embebido em água e pasta Cândi. Os tubos contendo as abelhas foram acondicionados em B.O.D (30 ± 2°C, U.R. 70% ± 10%, 12 h), e a mortalidade foi avaliada a cada seis horas, durante 10 dias. Logo após a verificação da mortalidade, foram separadas duas abelhas por tratamento para a retirada do mesêntero. Essas amostras foram processadas em metodologia padrão para Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Verificou-se que os produtos A, B e C reduziram a longevidade das abelhas quando comparados aos controles T1 e T2. Nas análises qualitativas realizadas com MEV, não foi possível observar alterações morfológicas externas ou internas nos tecidos do mesêntero. Apesar dos produtos A, B e C causarem redução na longevidade, sua presença não foi verificada quando os tecidos foram analisados por MEV.(AU)

Mortality of Conotrachelus humeropictus in response to combined application of the nematode Steinernema brazilense and the fungus Beauveria bassiana / Mortalidade de Conotrachelus humeropictus pela aplicação combinada do nematoide Steinernema brazilense com o fungo entomopatogênico Beauveria bassiana

The fruit borer Conotrachelus humeropictus is one of the most important pests of the cupuaçu crop, and can promote yield losses of around 50%. The present study involved the selection of Beauveria bassiana isolates on Conotrachelus psidii larvae, which was used as test insect due to its taxonomic closeness to C. humeropictus. In order to assess their interaction using combined application, we studied the ability of the nematode to carry conidia of B. bassiana and Metarhizium anisopliae to soil layers. This study also aimed to establish a biological control method for cupuaçu borer with the use of the fungus B. bassiana at 10 kg/ha and the entomopathogenic nematode Steinernema brazilense at 1, 3, 9, and 27 IJ/cm2, applied as single and combined treatments. In the selection of B. bassiana strains for C. psidii, the IBCB 276 and IBCB 165 isolates were the most promising ones, causing 86 and 84% mortality, respectively. The IBCB 276 strain was applied in the field to control C. humeropictus. In the study of carriage of conidia in soil, the nematode S. brazilense was found to be capable of carrying conidia of B. bassiana to deep 7 to 10 cm soil layers. This was not observed with M. anisopliae, found only in the topsoil. In field trials against C. humeropictus larvae, B. bassiana promoted 15.6% mortality. The nematode promoted 60.0% mortality at the highest concentration used, and their combined use with B. bassiana (10 kg/ha) increased mortality to 65.6%, with an additive interaction observed between the two entomopathogens.(AU)

A broca-do-cupuaçu, Conotrachelus humeropictus, é uma das principais pragas da cultura, podendo ocasionar perdas de 50% na produção. O presente trabalho envolveu uma seleção prévia de isolados de Beauveria bassiana em larvas de Conotrachelus psidii, utilizado como inseto teste por ser próximo taxonomicamente à C. humeropictus. Com o objetivo de avaliar causa-efeitos da interação na aplicação combinada, foi estudada a capacidade do nematoide carrear conídios de B. bassiana e Metarhizium anisopliae pelas camadas de solo. O trabalho também objetivou avaliar o controle biológico da broca-do-cupuaçu, através do uso do fungo B. bassiana 10 kg/ha, e do nematoide entomopatogênico Steinernema brazilense 1, 3, 9 e 27 JI/cm2, aplicados em tratamentos isolados e em combinação. Na seleção de isolados de B. bassiana para C. psidii, os isolados IBCB 276 e IBCB 165 foram os mais promissores, causando, respectivamente, 86 e 84% de mortalidade confirmada. O isolado IBCB 276 foi aplicado em campo para controlar C. humeropictus. No estudo de carreamento de conídios, o nematoide S. brazilense foi capaz de carrear conídios de B. bassiana para a camada de 7 a 10 cm de profundidade no solo. A mesma ação não foi observada com M. anisopliae, encontrado somente na camada superficial do solo. Nos ensaios de campo contra C. humeropictus, B. bassiana promoveu 15,6% de mortalidade. O nematoide promoveu 60,0% de mortalidade na maior concentração utilizada e, na combinação dessa concentração do NEP com B. bassiana (10 kg/ha), a mortalidade atingiu 65,6%, observando-se interação aditiva entre os dois entomopatógenos.(AU)

Mortality of Conotrachelus humeropictus in response to combined application of the nematode Steinernema brazilense and the fungus Beauveria bassiana / Mortalidade de Conotrachelus humeropictus pela aplicação combinada do nematoide Steinernema brazilense com o fungo entomopatogênico Beauveria bassiana

The fruit borer Conotrachelus humeropictus is one of the most important pests of the cupuaçu crop, and can promote yield losses of around 50%. The present study involved the selection of Beauveria bassiana isolates on Conotrachelus psidii larvae, which was used as test insect due to its taxonomic closeness to C. humeropictus. In order to assess their interaction using combined application, we studied the ability of the nematode to carry conidia of B. bassiana and Metarhizium anisopliae to soil layers. This study also aimed to establish a biological control method for cupuaçu borer with the use of the fungus B. bassiana at 10 kg/ha and the entomopathogenic nematode Steinernema brazilense at 1, 3, 9, and 27 IJ/cm2, applied as single and combined treatments. In the selection of B. bassiana strains for C. psidii, the IBCB 276 and IBCB 165 isolates were the most promising ones, causing 86 and 84% mortality, respectively. The IBCB 276 strain was applied in the field to control C. humeropictus. In the study of carriage of conidia in soil, the nematode S. brazilense was found to be capable of carrying conidia of B. bassiana to deep 7 to 10 cm soil layers. This was not observed with M. anisopliae, found only in the topsoil. In field trials against C. humeropictus larvae, B. bassiana promoted 15.6% mortality. The nematode promoted 60.0% mortality at the highest concentration used, and their combined use with B. bassiana (10 kg/ha) increased mortality to 65.6%, with an additive interaction observed between the two entomopathogens.(AU)

A broca-do-cupuaçu, Conotrachelus humeropictus, é uma das principais pragas da cultura, podendo ocasionar perdas de 50% na produção. O presente trabalho envolveu uma seleção prévia de isolados de Beauveria bassiana em larvas de Conotrachelus psidii, utilizado como inseto teste por ser próximo taxonomicamente à C. humeropictus. Com o objetivo de avaliar causa-efeitos da interação na aplicação combinada, foi estudada a capacidade do nematoide carrear conídios de B. bassiana e Metarhizium anisopliae pelas camadas de solo. O trabalho também objetivou avaliar o controle biológico da broca-do-cupuaçu, através do uso do fungo B. bassiana 10 kg/ha, e do nematoide entomopatogênico Steinernema brazilense 1, 3, 9 e 27 JI/cm2, aplicados em tratamentos isolados e em combinação. Na seleção de isolados de B. bassiana para C. psidii, os isolados IBCB 276 e IBCB 165 foram os mais promissores, causando, respectivamente, 86 e 84% de mortalidade confirmada. O isolado IBCB 276 foi aplicado em campo para controlar C. humeropictus. No estudo de carreamento de conídios, o nematoide S. brazilense foi capaz de carrear conídios de B. bassiana para a camada de 7 a 10 cm de profundidade no solo. A mesma ação não foi observada com M. anisopliae, encontrado somente na camada superficial do solo. Nos ensaios de campo contra C. humeropictus, B. bassiana promoveu 15,6% de mortalidade. O nematoide promoveu 60,0% de mortalidade na maior concentração utilizada e, na combinação dessa concentração do NEP com B. bassiana (10 kg/ha), a mortalidade atingiu 65,6%, observando-se interação aditiva entre os dois entomopatógenos.(AU)

Isolates of Bacillus thuringiensis from Maranhão biomes with potential insecticidal action against Aedes aegypti larvae (Diptera, Culicidae)

Abstract Entomopathogenic agents are viable and effective options due to their selective action against insects but benign effects on humans and the environment. The most promising entomopathogens include subspecies of Bacillus thuringiensis (Bt), which are widely used for the biological control of insects, including mosquito vectors of human pathogens. The efficacy of B. thuringiensis toxicity has led to the search for new potentially toxic isolates in different regions of the world. Therefore, soil samples from the Amazon, Cerrado and Caatinga biomes of the state of Maranhão were evaluated for their potential larvicidal action against Aedes aegypti. The isolates with high toxicity to mosquito larvae, as detected by bioassays, were subjected to histological evaluation under a light microscope to identify the genes potentially responsible for the toxicity. Additionally, the toxic effects of these isolates on the intestinal epithelium were assessed. In the new B. thuringiensis isolates toxic to A. aegypti larvae, cry and cyt genes were amplified at different frequencies, with cry4, cyt1, cry32, cry10 and cry11 being the most frequent (33-55%) among those investigated. These genes encode specific proteins toxic to dipterans and may explain the severe morphological changes in the intestine of A. aegypti larvae caused by the toxins of the isolates.

Resumo Os agentes entomopatógenos são alternativas viáveis e eficazes, devido à sua ação seletiva para insetos sendo inofensivos ao homem e ao meio ambiente. Dentre os entomopatógenos mais promissores, destacam-se as subespécies de Bacillus thuringiensis (Bt) amplamente utilizadas no controle biológico de insetos incluindo espécies de mosquitos vetores de agentes patogênicos ao homem. A eficiência da toxicidade de Bt incentiva a prospecção de novos isolados em diversas regiões do mundo. Desta forma, em busca de novos isolados de B. thuringiensis potencialmente tóxicos, amostras de solo provenientes dos biomas Amazônia, Cerrado e Caatinga do estado do Maranhão foram avaliadas em relação ao seu potencial larvicida para Aedes aegypti. Os isolados que provocaram elevada toxicidade para larvas do mosquito, detectada por bioensaios, foram avaliados em relação aos potenciais genes responsáveis pela atividade tóxica, além da avaliação de efeitos tóxicos no epitélio intestinal através de análises histológicas em microscopia de luz. Os novos isolados de Bt tóxicos para larva de A. aegypti amplificaram frequências diferentes de genes cry e cyt sendo os mais frequentes (55-33%) os cry4, cyt1, cry32, cry10 e cry11 dentre os investigados. Esses genes codificam para proteínas tóxicas específicas para ordem Diptera, e podem explicar as severas alterações morfológicas provocadas pelas toxinas dos isolados observadas no intestino das larvas de A. aegypti.

Control and prevention of white muscardine in Bombyx mori L. (Lepidoptera: Bombycidae) / Controle e prevenção da calcinose branca em Bombyx mori L. (Lepidoptera: Bombycidae)

Entomopathogens are the most important problem from sericulture all over the world, and cause heavy loss to silkworm crops. Calcinosis is a common disease of silkworm, caused by the pathogenic fungus Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. (Ascomycota: Cordycipitaceae). Fungal  diseases of silkworm are easily spread by spores which are carried through the air. Also, temperature and humidity inside the silkworm rearing rooms are favorable to disease development. Practice hygiene measures during silkworm rearing such as disinfection of rearing houses and appliances are recommended. However, contamination is frequent. This paper presents related research on promising antimicrobiotic products for their use in sericulture industry.

Um dos principais problemas enfrentados pelos seri cicultores em todo o mundo são entomopatógenos que causam grandes perdas na produção. Destacase a doença calcinose branca, causada pelo fungo Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. (Ascomycota: Cordycipitaceae). Doenças fúngicas são facilmente disseminadas, já que os conídios são transportados pelo ar. Além disso, as condições de temperatura e umidade nos barracões são favoráveis ao surgimento e à manutenção do fungo, aumentando sua incidência. Práticas de higiene como a desinfecção do barracão e de utensílios são recomen dadas, no entanto a contaminação das lagartas ainda é frequente. Dessa forma, esse artigo reuniu trabalhos voltados para a pesquisa de produtos antimicrobianos alternativos para o uso em sericicultura.

Control and prevention of white muscardine in Bombyx mori L. (Lepidoptera: Bombycidae) / Controle e prevenção da calcinose branca em Bombyx mori L. (Lepidoptera: Bombycidae)

Entomopathogens are the most important problem from sericulture all over the world, and cause heavy loss to silkworm crops. Calcinosis is a common disease of silkworm, caused by the pathogenic fungus Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. (Ascomycota: Cordycipitaceae). Fungal  diseases of silkworm are easily spread by spores which are carried through the air. Also, temperature and humidity inside the silkworm rearing rooms are favorable to disease development. Practice hygiene measures during silkworm rearing such as disinfection of rearing houses and appliances are recommended. However, contamination is frequent. This paper presents related research on promising antimicrobiotic products for their use in sericulture industry.(AU)

Um dos principais problemas enfrentados pelos seri cicultores em todo o mundo são entomopatógenos que causam grandes perdas na produção. Destacase a doença calcinose branca, causada pelo fungo Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. (Ascomycota: Cordycipitaceae). Doenças fúngicas são facilmente disseminadas, já que os conídios são transportados pelo ar. Além disso, as condições de temperatura e umidade nos barracões são favoráveis ao surgimento e à manutenção do fungo, aumentando sua incidência. Práticas de higiene como a desinfecção do barracão e de utensílios são recomen dadas, no entanto a contaminação das lagartas ainda é frequente. Dessa forma, esse artigo reuniu trabalhos voltados para a pesquisa de produtos antimicrobianos alternativos para o uso em sericicultura.(AU)

EFICÁCIA DE FUNGOS E NEMATOIDES ENTOMOPATOGÊNICOS TESTADOS ISOLADAMENTE OU EM COMBINAÇÃO PARA CONTROLE DE Rhipicephalus microplus: DO LABORATÓRIO PARA O CAMPO

Fungos e nematoides entomopatogênicos são agentes bastante investigados para o controle biológico de diversas pragas, entre elas os carrapatos. O presente estudo buscou determinar a eficácia de fungos e nematoides, combinados ou não, contra fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus microplus em ensaios laboratoriais ou de campo. Assim, ensaios em condições controladas avaliaram a patogenicidade do nematoide Heterorhabditis bacteriophora HP88 sobre fêmeas de R. microplus com diferentes níveis de ingurgitamento (150, 200, 250, 300 e 350 mg), e sobre fêmeas provenientes de oito diferentes populações. Além disso, um estudo em condições de campo avaliou a eficácia de H. bacteriophora HP88 formulados em cadáveres de Tenebrio molitor em reduzir a população não parasitária de R. microplus em pastagens. Também buscou-se determinar em condições controladas uma combinação sinérgica entre Metarhizium spp. e H. bacteriophora HP88 sobre fêmeas ingurgitadas, além de determinar uma formulação multiparticulada contendo microescleródios de Metarhizium robertsii IP 146 eficaz em produzir conídios e, por fim, determinar em condições de campo a eficácia da combinação desta formulação granular com juvenis infectantes de H. bacteriophora HP88 para controlar a população não parasitária de R. microplus em pastagens em diferentes estações do ano (chuvosa ou seca). Os testes de patogenicidade do nematoide em fêmeas de R. microplus, não mostraram variação no percentual de controle entre os grupos com diferentes níveis de ingurgitamento (valores entre 98,4% e 97,5%). Também não foram observadas diferenças de suscetibilidade entre as fêmeas provenientes de diferentes populações (percentuais de controle entre 89% e 99%). No teste de campo, a população não parasitária de R. microplus foi reduzida em 73,1% nas parcelas tratadas com H. bacteriophora HP88. Quando Metarhizium spp. foi combinado com H. bacteriophora HP88, todos os tratamentos reduziram os parâmetros biológicos das fêmeas, sendo observado apenas efeito aditivo entre as combinações. Entretanto, quando M. robertsii IP 146 foi combinado com H. bacteriophora HP88 em sub-doses, todos os tratamentos apresentaram sinergismo. O teste de campo conduzido no período chuvoso, reduziu a população de R. microplus nas pastagens, com eficácia de 54,09% (fungo), 38,11% (nematoide) e 46,72% (combinação). No período seco, somente o tratamento fúngico reduziu a população de R. microplus, com eficácia de 26,27%. Conclui-se que os entomopatógenos M. robertsii IP 146 e H. bacteriophora HP88 são agentes promissores de biocontrole da fase não parasitária de R. microplus, apesar da eficácia do tratamento sofrer variação de acordo com a época do ano.

Entomopathogenic fungi and nematodes are biocontrol agents widely investigated for the biological control of several pests, including ticks. This study aimed to determine the efficacy of fungi and nematodes, combined or not combined, against Rhipicephalus microplus engorged females under laboratory and field conditions. Bioassays under controlled conditions were conducted to evaluate the pathogenicity of the nematode Heterorhabditis bacteriophora HP88 against R. microplus females with different weights (150, 200, 250, 300, and 350 mg), and against females from eight different populations. In addition, a study under field conditions were conducted to evaluate the efficacy of H. bacteriophora HP88 formulated on Tenebrio molitor cadavers for controlling non-parasitic R. microplus on infested pastures. Likewise, a study was sought to determine, under controlled conditions, the synergistic combination between Metarhizium spp. and H. bacteriophora HP88 against R. microplus engorged females, as well as to determine a granular formulation containing M. robertsii IP 146 microsclerotia with potential to produce conidia when incubated onto different substrates. Lastly, a study was conducted to determine, under field conditions, the efficacy of combined granular formulation and H. bacteriophora HP88 infective juveniles (third stage) for controlling non-parasitic R. microplus population on infested pastures during different seasons of the year (wet or dry). Nematode pathogenicity to R. microplus females did not show variation of the percent control (98.4% to 97.5%) on the groups with different weights. There were also no differences on susceptibility of females from different populations (percent control between 89% and 99%) to HP88. In the field test, non-parasitic R. microplus population was reduced by 73.1% in the plots treated with H. bacteriophora HP88. Combined treatments with Metarhizium spp. and H. bacteriophora HP88 reduced biological parameters of engorged females, with additive effect detected. However, treatmented with M. robertsii IP 146 combined with H. bacteriophora HP88 sub-doses demonstrated synergism. The field test conducted in the wet season reduced the non-parasitic R. microplus population on infested pastures, with efficacy of 54.09% (fungus only), 38.11% (nematode only), and 46.72% (fungi and nematodes combined). In the dry period, only the fungal treatment reduced R. microplus population, with efficacy of 26.27%. We concluded that M. robertsii IP 146 and H. bacteriophora HP88 are promising agents for biological control of the non-parasitic phase of R. microplus, although the treatment efficacy had varied according to the wet or dry seasons.

Controle e prevenção da calcinose branca em Bombyx mori L. (Lepidoptera: Bombycidae) / Control and prevention of white muscardine in Bombyx mori L. (Lepidoptera: Bombycidae)

Um dos principais problemas enfrentados pelos sericicultores em todo o mundo são entomopatógenos que causam grandes perdas na produção. Destaca-se a doença calcinose branca, causada pelo fungo Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. (Ascomycota: Cordycipitaceae). Doenças fúngicas são facilmente disseminadas, já que os conídios são transportados pelo ar. Além disso, as condições de temperatura e umidade nos barracões são favoráveis ao surgimento e à manutenção do fungo, aumentando sua incidência. Práticas de higiene como a desinfecção do barracão e de utensílios são recomendadas, no entanto a contaminação das lagartas ainda é frequente. Dessa forma, esse artigo reuniu trabalhos voltados para a pesquisa de produtos antimicrobianos alternativos para o uso em sericicultura.(AU)

Entomopathogens are the most important problem from sericulture all over the world, and cause heavy loss to silkworm crops. Calcinosis is a common disease of silkworm, caused by the pathogenic fungus Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. (Ascomycota: Cordycipitaceae). Fungal diseases of silkworm are easily spread by spores which are carried through the air. Also, temperature and humidity inside the silkworm rearing rooms are favorable to disease development. Practice hygiene measures during silkworm rearing such as disinfection of rearing houses and appliances are recommended. However, contamination is frequent. This paper presents related research on promising antimicrobiotic products for their use in sericulture industry.(AU)

Encapsulamento de conídios de Metarhizium anisopliae: avaliação da estabilidade e potencial no controle de Rhipicephalus microplus

Devido aos problemas gerados pelo uso indiscriminado de acaricidas químicos para o controle de carrapatos, métodos alternativos vem sendo desenvolvidos, como o uso de fungos entomopatogênicos. No entanto, estes entomopatógenos têm sua viabilidade comprometida quando aplicados em condições naturais, sendo indispensável o desenvolvimento de formulações. Neste contexto, as tecnologias de microencapsulamento de agentes de biocontrole são promissoras, pois além de propiciar proteção contra fatores ambientais, aumentam a vida útil do microrganismo encapsulado. A gelificação iônica é uma técnica simples e financeiramente viável que vem sendo estudada para o encapsulamento de fungos entomopatogênicos.Assim, o objetivo do presente estudo foi encapsular os conídios de Metarhizium anisopliae (LCM S01) em alginato de sódio a 2 e 3%, utilizando a técnica de gelificação iônica e avaliar as micropartículas quanto a morfologia externa, concentração, viabilidade, tempo de prateleira, tolerância à irradiação UV-B, termotolerância e eficácia no controle de fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus microplus. A morfologia externa das partículas foi caracterizada através de Microscopia Eletrônica de Varredura e a viabilidade dos conídios encapsulados (EC) foi determinada pelo percentual de germinação. Para o tempo de prateleira, os conídios encapsulados em 2 (EC 2%) ou 3% (EC 3%) de alginato de sódio e os não encapsulados (NEC), foram armazenados por 1, 3, 5, 7, 9 e 11 meses em condição ambiente e em freezer. Quanto à tolerância à UV-B, os conídios EC e NEC foram expostos a dose total de 6.0 ou 8.0 kJ m-2, enquanto que para termotolerância foram submetidos a 42 ºC em banho maria por 2, 4 e 6 horas. Ainda, foram avaliados os parâmetros biológicos de fêmeas ingurgitadas expostas a 30, 60 ou 90 mg de micropartículas em condições laboratoriais. As partículas fúngicas de alginato de sódio a 2 e 3% apresentaram-se esféricas com superfície mais homogênea e heterogênea, respectivamente. O encapsulamento não provocou perdas severas de conídios e não afetou sua viabilidade. O encapsulamento aumentou a vida útil dos conídios armazenados em ambiente por 1, 3 e 5 meses em relação aos conídios NEC. Em freezer, os conídios NEC germinaram mais do que os EC. Os conídios EC e NEC apresentaram maior viabilidade em freezer do que em ambiente. A exposição ao calor por 6 horas reduziu a germinação de conídios NEC comparados com os EC 2 e 3%. A exposição às diferentes doses de UV-B também reduziu significativamente a germinação dos conídios NEC em relação aos EC. As partículas foram capazes de reduzir significativamente os parâmetros biológicos das fêmeas ingurgitadas quando comparado aos conídios NEC e ao grupo controle, no entanto não houve diferença significativa entre as diferentes quantidades de partículas avaliadas. De forma geral, não foram observadas diferenças significativas entre as concentrações de alginato de sódio utilizadas. Assim, as formulações desenvolvidas no presente estudo aumentaram o tempo de prateleira, a termotolerâcia e a tolerância à UV-B dos conídios de LCM S01 de M. anisopliae, e foram eficazes no controle de fêmeas ingurgitadas de R. microplus, apresentando potencial promissor no controle deste carrapato.

Due to the problems generated by the indiscriminate use of chemical acaricides to control ticks, alternative methods have been developed, such as the use of entomopathogenic fungi. However, these entomopathogens have their viability compromised when applied under natural conditions, being indispensable the development of formulations. In this context, microencapsulation technologies for biocontrol agents are promising; since it provides protection against environmental factors as well as increased the encapsulated microorganism shelf life. Ionic gelation is a simple and financially viable technique when employed for the entomopathogenic fungi encapsulation. Thus, the aim of the present study was encapsulate the Metarhizium anisopliae conidia (LCM S01) in 2 and 3% sodium alginate, using the ionic gelation technique and, evaluate the external morphology, concentration, viability, shelf life, tolerance of UV-B irradiation, thermotolerance and efficacy of these microparticles in the control of Rhipicephalus microplus engorged females. The external morphology was characterized by ScanningElectron Microscopy (SEM) and the encapsulated conidia (EC) viability was determined by the germination percentage. For shelf life, conidia encapsulated in 2 (EC 2%) or 3% (EC 3%) of sodium alginate and unencapsulated (NEC) were stored for 1, 3, 5, 7, 9 and 11 months at room temperature and in a freezer. For UV-B tolerance assay, EC and NEC were exposed to 6.0 or 8.0 kJ m-2, while for thermotolerance, they were submitted to 42 ºC in a water bath for 2, 4 and 6 hours. Furthermore, the biological parameters of engorged females exposed to 30, 60 or 90 mg of microparticles under laboratory conditions wereevaluated. 2 and 3% sodium alginate fungal particles were spherical with a more homogeneous and heterogeneous surface, respectively. Encapsulation did not cause severe conidia losses and did not affect their viability. Encapsulation increased the conidia shelf life stored at room temperature for 1, 3 and 5 months compared to NEC. In the freezer, NEC germinated more than EC. The EC and NEC showed greater viability in the freezer when compared to room temperature. Heat exposure for 6 hours reduced the NEC germination compared to EC 2 and 3%. Different UV-B doses exposure also significantly reduced the NEC germination compared to EC. The particles were able to reduce significantly the engorged females biological parameters when compared to NEC and the control group, however, there was no significant difference between the particles evaluated. In general, no significant differences were observed between the sodium alginate concentrations used. Thus, the formulations developed in the present study increased M. anisopliae (LCM S01) shelf life, thermotolerance and UV-B tolerance, and were effective in R. microplus engorged females control, showing promising potential to control this tick.

Avaliação quantitativa da contaminação por micro-organismos no ambiente de criação do bicho-da-seda (Bombyx mori L.) na fase de chocadeira

The aim of this study was to evaluate the fungus and bacterial contamination in the silkworm incubatory before and after cleaning and disinfection procedures. Samples from the air and the surface of the floor, walls, mulberry leaves, silkworms, and leaf-trimming machine were collected. The methodology used was the sedimentation plate technique and surface contact with specific culture media such as Nutrient's agar, McConkey's agar and Sabouraud dextrose agar for growth, respectively, of bacteria, enterobacteria and fungi. The results showed that at the end of the two first instars, the fungus and bacterium index on the surface of the floor, the silkworm caterpillar and mulberry leaves had increased. The cleaning and disinfection reduced the level of contamination by microorganisms in the environment from very bad to excellent. The mulberry leaves represented a strong infection potential for the silkworm caterpillar. The counting of bacteria and fungus colonies was a very simple way of monitoring and detecting the incubatory sanitary problems.

O objetivo do presente trabalho foi avaliar a contaminação bacteriana e fúngica em chocadeira antes e após procedimento de limpeza e desinfecção. Foram coletadas amostras do ar e de superfícies do piso, da parede, das folhas de amoreira, das lagartas do bicho-da-seda e da máquina picadeira de folhas. A metodologia empregada seguiu a técnica da placa de sedimentação e contato de superfície com meios de cultura específicos, Ágar Nutriente, Ágar McConkey e Ágar Sabouraud Dextrose para crescimento, respectivamente, de bactérias, de enterobactérias e de fungos. Os resultados demonstraram, ao término dos dois primeiros ínstars, aumento nos índices de contaminação fúngica e bacteriana nas superfícies das lagartas do bicho-da-seda, do piso e das folhas de amoreira. A limpeza e desinfecção reduziram o grau de contaminação por micro-organismos presentes no ambiente, do nível péssimo para o excelente. As folhas de amoreira representaram um forte potencial de infecção para as lagartas do bicho-da-seda. A contagem de colônias fúngicas e bacterianas foi uma forma simples de monitorar e detectar os pontos de problemas sanitários da chocadeira.

Toxicity and residual control of Plutella xylostella L. (Lepidoptera: Plutellidae) with Bacillus thuringiensis Berliner and insecticides

Plutella xylostella L. is the most important worldwide pest of cruciferous plants and indiscriminate use of insecticides has led to the resistance of the species to different groups. This research was conducted to compare the toxicity and persistence of two strains of Bacillus thuringiensis to P. xylostella larvae. Concentrations between 125 and 500g 100L-1 of water of the commercial products were evaluated and compared to the insect growth inhibitor diflubenzuron and to the neurotoxic pyrethroid deltamethrin. The efficacy of the insecticides was compared between treated plants kept indoor greenhouse and outdoor. Third instar larvae were more susceptible to B. thuringiensis than first instar ones. Agree and Dipel showed similar control rates of third instars until 10 days after treatment, but on the 15th day, Agree was significantly more efficient than Dipel. Both B. thuringiensis formulations showed a reduction in mortality after 10 days when the treated plants were exposed to natural weather conditions in comparison to the same treatments kept inside greenhouse. Dimilin (100g 100L-1 of water) and deltamethrin (30ml of commercial product 100L-1 of water) were not efficient to control third instar larvae of P. xylostella. This inefficiency cannot be attributed to a resistant population of P. xylostella since the larval population used in the experiments was not subjected to insecticide pressure, once the crop was organically cultivated all year round. The results showed that both formulations of B. thuringiensis are sound alternatives for the control of the diamondback moth in organically conducted cruciferous crops, considering the high residual control provided under subtropical weather conditions.

Larvas de Plutella xylostella L. são as principais pragas de crucíferas cultivadas e o uso excessivo e indiscriminado de inseticidas tem levado a resistência da espécie para diferentes grupos de inseticidas. Este trabalho foi conduzido para comparar a toxicidade de duas formulações de Bacillus thuringiensis para larvas de primeiro e terceiro ínstar de P. xylostella. Concentrações entre 125 e 500g 100L-1 de água do produto comercial foram avaliadas e comparadas com o inibidor do crescimento diflubenzuron e com o piretroide deltametrina. A eficiência dos inseticidas foi comparada em plantas tratadas e mantidas dentro e fora da casa de vegetação. Larvas de terceiro ínstar foram mais suscetíveis a B. thuringiensis do que larvas de primeiro ínstar. Agree e Dipel apresentaram taxas de controle semelhantes até 10 dias após a aplicação, porém após 15 dias, Agree foi significativamente mais eficiente do que Dipel. Ambas as formulações apresentaram uma redução na mortalidade larval quando as plantas foram expostas às condições climáticas em comparação aos mesmos tratamentos mantidos em casa de vegetação. Dimilin (100g 100L-1 de água) e deltametrina (30ml de produto comercial 100L-1 de água) não foram eficientes para o controle de lagartas de terceiro ínstar de P. xylostella. Tal ineficiência não pode ser atribuída a um possível efeito de resistência da população de P. xylostella a esses produtos, uma vez que a colônia da espécie utilizada nos experimentos não estava sujeita à pressão de seleção, por se tratar de uma população coletada em área conduzida organicamente durante todo o transcorrer do ano. Os resultados mostram que as duas formulações de B. thuringiensis são alternativas viáveis para o controle de P. xylostella em cultivo orgânico de crucíferas, tendo em vista o expressivo controle residual observado para as condições climáticas dos subtrópicos.

Toxicity and residual control of Plutella xylostella L. (Lepidoptera: Plutellidae) with Bacillus thuringiensis Berliner and insecticides

Plutella xylostella L. is the most important worldwide pest of cruciferous plants and indiscriminate use of insecticides has led to the resistance of the species to different groups. This research was conducted to compare the toxicity and persistence of two strains of Bacillus thuringiensis to P. xylostella larvae. Concentrations between 125 and 500g 100L-1 of water of the commercial products were evaluated and compared to the insect growth inhibitor diflubenzuron and to the neurotoxic pyrethroid deltamethrin. The efficacy of the insecticides was compared between treated plants kept indoor greenhouse and outdoor. Third instar larvae were more susceptible to B. thuringiensis than first instar ones. Agree and Dipel showed similar control rates of third instars until 10 days after treatment, but on the 15th day, Agree was significantly more efficient than Dipel. Both B. thuringiensis formulations showed a reduction in mortality after 10 days when the treated plants were exposed to natural weather conditions in comparison to the same treatments kept inside greenhouse. Dimilin (100g 100L-1 of water) and deltamethrin (30ml of commercial product 100L-1 of water) were not efficient to control third instar larvae of P. xylostella. This inefficiency cannot be attributed to a resistant population of P. xylostella since the larval population used in the experiments was not subjected to insecticide pressure, once the crop was organically cultivated all year round. The results showed that both formulations of B. thuringiensis are sound alternatives for the control of the diamondback moth in organically conducted cruciferous crops, considering the high residual control provided under subtropical weather conditions.

Larvas de Plutella xylostella L. são as principais pragas de crucíferas cultivadas e o uso excessivo e indiscriminado de inseticidas tem levado a resistência da espécie para diferentes grupos de inseticidas. Este trabalho foi conduzido para comparar a toxicidade de duas formulações de Bacillus thuringiensis para larvas de primeiro e terceiro ínstar de P. xylostella. Concentrações entre 125 e 500g 100L-1 de água do produto comercial foram avaliadas e comparadas com o inibidor do crescimento diflubenzuron e com o piretroide deltametrina. A eficiência dos inseticidas foi comparada em plantas tratadas e mantidas dentro e fora da casa de vegetação. Larvas de terceiro ínstar foram mais suscetíveis a B. thuringiensis do que larvas de primeiro ínstar. Agree e Dipel apresentaram taxas de controle semelhantes até 10 dias após a aplicação, porém após 15 dias, Agree foi significativamente mais eficiente do que Dipel. Ambas as formulações apresentaram uma redução na mortalidade larval quando as plantas foram expostas às condições climáticas em comparação aos mesmos tratamentos mantidos em casa de vegetação. Dimilin (100g 100L-1 de água) e deltametrina (30ml de produto comercial 100L-1 de água) não foram eficientes para o controle de lagartas de terceiro ínstar de P. xylostella. Tal ineficiência não pode ser atribuída a um possível efeito de resistência da população de P. xylostella a esses produtos, uma vez que a colônia da espécie utilizada nos experimentos não estava sujeita à pressão de seleção, por se tratar de uma população coletada em área conduzida organicamente durante todo o transcorrer do ano. Os resultados mostram que as duas formulações de B. thuringiensis são alternativas viáveis para o controle de P. xylostella em cultivo orgânico de crucíferas, tendo em vista o expressivo controle residual observado para as condições climáticas dos subtrópicos.

Avaliação quantitativa da contaminação por microorganismos no ambiente de criação do bicho-da-seda (Bombyx mori L) na fase de chocadeira / Quantitative evaluation of biological and enviromental contamination by microorganisms on the surface and in the air of incubatory for silkworms (Bombyx mori L)

O objetivo do presente trabalho foi avaliar a contaminação bacteriana e fúngica em chocadeira antes e após procedimento de limpeza e desinfecção. Foram coletadas amostras do ar e de superfícies do piso, da parede, das folhas de amoreira, das lagartas do bicho-da-seda e da máquina picadeira de folhas. A metodologia empregada seguiu a técnica da placa de sedimentação e contato de superfície com meios de cultura específicos, Ágar Nutriente, Ágar McConkey e Ágar Sabouraud Dextrose para crescimento, respectivamente, de bactérias, de enterobactérias e de fungos. Os resultados demonstraram, ao término dos dois primeiros ínstars, aumento nos índices de contaminação fúngica e bacteriana nas superfícies das lagartas do bicho-da-seda, do piso e das folhas de amoreira. A limpeza e desinfecção reduziram o grau de contaminação por micro-organismos presentes no ambiente, do nível péssimo para o excelente. As folhas de amoreira representaram um forte potencial de infecção para as lagartas do bicho-da-seda. A contagem de colônias fúngicas e bacterianas foi uma forma simples de monitorar e detectar os pontos de problemas sanitários da chocadeira.

The aim of this study was to evaluate the fungus and bacterial contamination in the silkworm incubatory before and after cleaning and disinfection procedures. Samples from the air and the surface of the floor, walls, mulberry leaves, silkworms, and leaf-trimming machine were collected. The methodology used was the sedimentation plate technique and surface contact with specific culture media such as Nutrient’s agar, McConkey’s agar and Sabouraud dextrose agar for growth, respectively, of bacteria, enterobacteria and fungi. The results showed that at the end of the two first instars, the fungus and bacterium index on the surface of the floor, the silkworm caterpillar and mulberry leaves had increased. The cleaning and disinfection reduced the level of contamination by microorganisms in the environment from very bad to excellent. The mulberry leaves represented a strong infection potential for the silkworm caterpillar. The counting of bacteria and fungus colonies was a very simple way of monitoring and detecting the incubatory sanitary problems.

Avaliação quantitativa da contaminação por microorganismos no ambiente de criação do bicho-da-seda (Bombyx mori L) na fase de chocadeira / Quantitative evaluation of biological and enviromental contamination by microorganisms on the surface and in the air of incubatory for silkworms (Bombyx mori L)

O objetivo do presente trabalho foi avaliar a contaminação bacteriana e fúngica em chocadeira antes e após procedimento de limpeza e desinfecção. Foram coletadas amostras do ar e de superfícies do piso, da parede, das folhas de amoreira, das lagartas do bicho-da-seda e da máquina picadeira de folhas. A metodologia empregada seguiu a técnica da placa de sedimentação e contato de superfície com meios de cultura específicos, Ágar Nutriente, Ágar McConkey e Ágar Sabouraud Dextrose para crescimento, respectivamente, de bactérias, de enterobactérias e de fungos. Os resultados demonstraram, ao término dos dois primeiros ínstars, aumento nos índices de contaminação fúngica e bacteriana nas superfícies das lagartas do bicho-da-seda, do piso e das folhas de amoreira. A limpeza e desinfecção reduziram o grau de contaminação por micro-organismos presentes no ambiente, do nível péssimo para o excelente. As folhas de amoreira representaram um forte potencial de infecção para as lagartas do bicho-da-seda. A contagem de colônias fúngicas e bacterianas foi uma forma simples de monitorar e detectar os pontos de problemas sanitários da chocadeira.(AU)

The aim of this study was to evaluate the fungus and bacterial contamination in the silkworm incubatory before and after cleaning and disinfection procedures. Samples from the air and the surface of the floor, walls, mulberry leaves, silkworms, and leaf-trimming machine were collected. The methodology used was the sedimentation plate technique and surface contact with specific culture media such as Nutrients agar, McConkeys agar and Sabouraud dextrose agar for growth, respectively, of bacteria, enterobacteria and fungi. The results showed that at the end of the two first instars, the fungus and bacterium index on the surface of the floor, the silkworm caterpillar and mulberry leaves had increased. The cleaning and disinfection reduced the level of contamination by microorganisms in the environment from very bad to excellent. The mulberry leaves represented a strong infection potential for the silkworm caterpillar. The counting of bacteria and fungus colonies was a very simple way of monitoring and detecting the incubatory sanitary problems.(AU)

SELEÇÃO DE ISOLADOS DO FUNGO ENTOMOPATOGÊNICO METARHIZIU. ANISOPLIAE (METSCH.) SOROK. VISANDO O CONTROLE DA BROCA DA CANA-DE-AÇÚCAR DIATRAEA SACCHARALIS (FABR., 1794)

ABSTRACT Aiming to improve the methods for controlling the sugarcane borer, Diatraea saccharalis, this study tested some strains of the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae under laboratory conditions. Initially, the value of the lethal concentration (LC90) was calculated, and set at 5 x 108 conidia/mL. Next, 27 different strains were tested for their pathogenicity and virulence in regard to larvae of D. saccharalis of approximately 1.5 cm, with retesting of the best isolates (confirmed mortalities above 80%) to confirm the results. Next, the values of lethal time (LT50) were calculated for the best strains, which were mass produced on pre-cooked rice, verifying the average sporulation of these isolates. Generally, the mortality confirmed among the 27 isolates ranged from 54 to 100%, with IBCB 167, 351, 383, 384, 410, 417, 418, 425 and 481 able to generate mortality over 80%. In terms of lethal time (LT50), IBCB 383 showed a shorter time of 6.83 days, while the greatest conidiogenesis was recorded for IBCB 417, with 2.52 x 109 conidia/g.

RESUMO Este trabalho teve por objetivo testar alguns isolados do fungo entomopatogênicos Metarhizium anisopliae em condições de laboratório. Inicialmente, foi calculado o valor da concentração letal (CL90), que ficou estabelecido em 5 x 108 conídios/mL. Na continuidade, foram utilizados 27 isolados diferentes, sendo estes testados quanto a sua patogenicidade e virulência em lagartas de Diatraea saccharalis (Lepidoptera: Crambidae) com aproximadamente 1,5 cm, onde os melhores isolados (mortalidades confirmadas acima de 80%) foram novamente testados, a fim de se obter uma confirmação dos resultados. Em seguida, foram calculados os valores do tempo letal (TL50) para os melhores isolados, sendo estes submetidos à produção massal em arroz pré-cozido, verificando-se a esporulação média desses isolados. De uma maneira geral, as mortalidades confirmadas entre os 27 isolados variaram entre 54 a 100%, sendo que os IBCB 167, 351, 383, 384, 410, 417, 418, 425 e 481 foram capazes de provocar mortalidades superiores a 80%. Quanto ao tempo letal (TL50), o IBCB 383 apresentou o menor tempo com 6,83 dias e a maior conidiogênese foi registrada para o IBCB 417 com 2,52 x 109 conídios/g.

Produção semissólida de Metarhizium anisopliae e Beauveria bassiana em diferentes substratos e efeito da radiação ultravioleta e da temperatura sobre propágulos desses entomopatógenos.

ABSTRACT The present study was aimed to evaluate different (semi-solid) media for the production of Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana propagules, and to evaluate the tolerance of these propagules to ultraviolet radiation and temperature. The experiments were performed at the Biological Control Laboratory of the Instituto Biológico at Campinas, São Paulo, Brazil. For both fungi, 6 repetitions were performed for each of the 17 treatments: corn starch, full rice, parboiled rice, type-1 rice, type-2 rice, oat flakes, canjiquinha [grits], wheat flour, raw cassava flour, yellow corn flour, special wheat flour, corn flour, corn in grains, cassava starch, soy in grains, crushed wheat, and turf. The viability analysis was done in plastic plates containing BDA. For the bioassays involving exposure to ultraviolet light and temperature, BDA was also used for viability analysis, and each treatment was exposed to the UV radiation for 0, 25 and 50 seconds, the temperature exposure being at 20, 25, 30 and 35º C. Using a Potter tower, 2 mL of fungus suspension from each treatment was inoculated to the Diatraea saccharalis caterpillars. Regarding the sporulation, the largest concentrations of M. anisopliae and B. bassiana were found for the treatments with parboiled rice, type-1 rice, type-2 rice, yellow corn flour, corn flour and crushed wheat. The viability of all treatments was superior to 94.00%. Also, the longer the duration of the exposition to the UV, the 2Universidade Estadual Paulista, Faculdade de Ciências Agronômicas, Botucatu, SP, Brasil.

RESUMO O trabalho teve os seguintes objetivos: 1) avaliar diferentes substratos para a produção semissólida dos fungos Metarhizium anisopliae e Beauveria bassiana; 2) verificar a tolerância dos conídios produzidos ao efeito da radiação ultravioleta e da temperatura; e 3) avaliar a patogenicidade dos conídios a Diatraea saccharalis. Para ambos os fungos, foram utilizadas 6 repetições para cada tratamento: amido de milho, arroz integral, arroz parboilizado tipo1, arroz tipo 1 e 2, aveia em flocos, canjiquinha, farelo de trigo, farinhas de mandioca crua, de milho amarela e de trigo especial, fubá, milho em grãos, polvilho azedo, soja em grãos, trigo moído e turfa. Os conídios foram quantificados em câmara de Neubauer e a determinação da viabilidade foi realizada através da observação em microscópio, dos conídios germinados e não germinados, após espalhamento da suspensão fúngica em placas de Petri contendo BDA. No ensaio com radiação os fungos foram expostos à radiação por 25 e 50 segundos e foi considerado um tratamento sem exposição; para temperatura os fungos foram expostos a 20, 25, 30 e 35o C. Utilizando a torre de Potter, 2 mL de cada suspensão fúngica dos tratamentos foram pulverizados em lagartas de D. saccharalis. As maiores concentrações de conídios de M. anisopliae e B. bassiana foram encontradas nos tratamentos com arroz parboilizado tipo 1, arroz tipo 1 e 2, farinha de milho amarela, fubá e trigo moído e a viabilidade dos conídios produzidos superou os 94%. Quanto maior o tempo de exposição à radiação menor foi o número de conídios viáveis; também ocorreu perda significativa da viabilidade dos conídios quando expostos à temperatura de 35o C. Os fungos foram patogênicos para D. saccharalis.