Lipopolysaccharide effects on activation and apoptosis of primordial ovarian follicles in heifers / Efeitos de lipopolissacarídeos na ativação e apoptose de folículos ovarianos primordiais em novilhas

The objective of the present study was to evaluate the effect of lipopolysaccharide (LPS) administration on activation and apoptosis of primordial follicles. There was no difference in the total number of follicles as well as in the different types of follicles. Furthermore, the LPS challenge didn't modulate the expression of genes related with ovarian reserve (HAM), oocyte survival (Survivin), activation rate (Pten, KIT, KITL1, KITL2, AKT1, SIRT1), and follicular abnormalities. Therefore, the LPS exposure with 24h interval had no effect on activation rate and primordial follicles abnormalities, and also had no effect on expression of anti-apoptotic genes and genes related with ovarian reserve, oocyte survival, activation rate, and primordial follicles abnormalities.

O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da administração de lipopolissacarídeo (LPS) na ativação e a apoptose de folículos primordiais. Dez novilhas saudáveis (Bos taurus taurus), com idade média de 14 meses, alojadas em sistema de confinamento e alimentadas com TMR, foram utilizadas neste experimento. Os animais foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos: grupo LPS (LPS; n = 5), que recebeu duas injeções intravenosas de 0,5µg/kg de peso corporal de lipopolissacarídeo (Sigma Aldrich®) diluído em 2mL de solução salina (0,9% de NaCl), com intervalo de 24h; e grupo controle (CTR; n = 5), que recebeu duas injeções intravenosas de 2mL de solução salina (0,9% de NaCl), com intervalo de 24h. A primeira injeção de LPS foi realizada no d 1, e no d 5 os animais foram abatidos, os ovários foram pesados e as amostras dos ovários foram coletadas para avaliação histológica e molecular. Não houve diferença no número total de folículos, bem como nos diferentes tipos de folículos. Além disso, o desafio com LPS não modulou a expressão de genes relacionados à reserva ovariana (HAM), à sobrevivência oocitária (Survivin), à taxa de ativação (Pten, KIT, KITL1, KITL2, AKT1, SIRT1) e às anormalidades foliculares. Portanto, a exposição ao LPS com intervalo de 24h não teve efeito sobre a taxa de ativação e as anormalidades dos folículos primordiais, bem como não teve efeito sobre a expressão de genes antiapoptóticos e de genes relacionados com a reserva ovariana, a sobrevivência oocitária, a taxa de ativação e as anormalidades dos folículos primordiais.

Influência das espécies reativas de oxigênio durante o cultivo in vitro de oócitos e folículos ovarianos de mamíferos domésticos / Influence of reactive oxygen species during in vitro culture of ovarian oocytes and follicles of domestic mammals

Sistemas de cultivo in vitro de folículos pré-antrais e de complexos cumulus-oócitos (CCOs) se tornaram uma poderosa ferramenta capaz de subsidiar diversas biotécnicas reprodutivas, bem como possibilitar estudos do efeito de substâncias sobre a dinâmica folicular. No entanto, esses sistemas podem resultar em estresse oxidativo e na diminuição da proteção antioxidante das células, distúrbio associado a altas taxas de morte celular durante o cultivo in vitro. Para contornar esses efeitos adversos, a adição de substâncias antioxidantes aos meios de cultivo tem sido proposta. Abrangendo diferentes classes e mecanismos de ação, compostos antioxidantes têm por função interferir no processo de oxidação para inibir ou retardar o dano oxidativo causado pelos radicais livres às biomoléculas. Além de antioxidantes que têm sido rotineiramente utilizados com esse propósito, recentemente, substâncias alternativas de origem natural como extratos vegetais e óleos essenciais têm ganhado destaque. Dessa forma, diante da influência do estresse oxidativo e da importância do uso de antioxidantes no cultivo celular, a presente revisão objetiva abordar os principais mecanismos de síntese e atuação dos radicais livres bem como o papel dos antioxidantes em protocolos de cultivo in vitro de folículos ovarianos e de CCOs de animais domésticos.(AU)

In vitro culture systems for preantral follicles and cumulus-oocyte complexes (COCs) have become a powerful tool capable of subsidizing several reproductive biotechniques, as well as enabling studies of the effect of substances on follicular dynamics. However, these systems can favor oxidative stress and decrease the antioxidant protection of cells, a disorder associated with high rates of cell death during in vitro culture. To overcome these adverse effects, the addition of antioxidant substances to the culture media has been proposed. Covering different classes and mechanisms of action, these antioxidant compounds have the function of interfering in the oxidation process to inhibit or delay the oxidative damage caused by free radicals to biomolecules. In addition to antioxidants that have been commonly used for this purpose, recently, alternative substances of natural origin such as plant extracts and essential oils have gained prominence. Thus, given the influence of oxidative stress and the importance of using antioxidants in cell culture, this review aims to address the main mechanisms of synthesis and action of free radicals as well as the role of antioxidants in in vitro protocols for ovarian follicles and COCs in domestic animals.(AU)

Relative transcript level of BMP15, BAX and CASP3 with qRT-PCR in vitrified equine immature cumulus-oocytes complexes / Relative transcript level of BMP15, BAX and CASP3 with qRT-PCR in vitrified equine immature cumulus-oocytes complexes

Research focused on female gamete vitrification has increased attention to develop a reliable cryopreservation method to preserve immature equine oocytes. Despite the intensive implementation of biotechnological procedures for horse breeding, vitrification of immature equine cumulus-oocyte complexes (COCs) remain to be clearly elucidated. We aimed to determine the relative transcript level of target genes Bone morphogenetic protein 15 (BMP15); Bcl-2-associated X protein (BAX); and Caspase 3 (CASP3) in equine COCs prior to and after vitrification. Ovarian follicles were aspirated from ovaries collected from an abattoir. A total of 240 COCs were collected and distributed into vitrified COCs (VIT, n=120) and nonvitrified (Non-VIT, n=120) groups. Then, COCs were preserved and relative transcript expressions of BMP15, BAX, CASP3 were measured and normalized against GAPDH performed by qRT-PCR. In addition, 38 COCs were evaluated to assess chromatin configuration of germinal vesicl e stage prior and after vitrification by exposure to 10 µg/ml of bisbenzimide. A difference was observed in the COCs' mRNA level of abundance for the BAX gene between the VIT (2.05 ± 0.47) and (0.85 ± 0.08) Non-VIT groups. There was no difference in mRNA relative transcript level of CASP3 and BMP15 in Non-VIT (0.63 ± 0.20 and 1.55 ± 0.73, respectively) compared to VIT (0.64 ± 0.01 and 2.84 ± 2.20, respectively) equine COCs. All COCs where considered at immature stage of development even though COCs in Non-VIT group showed higher condensed chromatin configuration compared to VIT (100% vs 60.7%, respectively). We demonstrate that BMP15 and CASP3 are detected in VIT and Non-VIT immature COCs. In conclusion, BAX is expressed highly in vitrified immature equine COCs and indicates that activation of apoptosis signaling cascades in cells exposed to vitrification.(AU)

Pesquisas sobre a vitrificação de gametas femininos estão sendo realizadas para o desenvolvimento de um método confiável de criopreservação dos complexos cumulus-oócitos (CCOs) na espécie equina. Apesar da implementação intensiva de biotecnologias reprodutivas em equinos, a vitrificação dos CCOs imaturos permanece em estágio experimental em relação à competência celular. O objetivo do estudo foi determinar o nível de transcrição relativo dos genes Proteína morfogenética óssea 15 (BMP15); Proteína X associada a Bcl-2 (BAX); e Caspase 3 (CASP3) em CCOs equinos antes e após a vitrificação. Folículos ovarianos foram aspirados de ovários coletados em matadouro. O total de 240 CCOs foi coletado e distribuído em grupos vitrificados (VIT, n=120) e não vitrificados (N-VIT, n=120). Os CCOs foram preservados e as expressões transcritas relativas de BMP15, BAX, CASP3 foram determinadas pela técnica de qRT-PCR sendo normalizadas em relação ao GAPDH. Além disso, 38 CCOs foram avaliados para determinar a configuração da cromatina no estágio de vesícula germinativa antes e após a vitrificação pela exposição a 10 µg/ml de bisbenzimida. Os resultados mostraram uma diferença no nível de abundância de mRNA dos CCOs para o gene BAX entre os grupos VIT (2,05 ± 0,47) e N-VIT (0,85 ± 0,08). Não houve diferença no nível de transcrição relativa do mRNA de CASP3 e BMP15 nos CCOs do grupo N-VIT (0,63 ± 0,20 e 1,55 ± 0,73, respectivamente) em comparação com VIT (0,64 ± 0,01 e 2,84 ± 2,20, respectivamente). Todos os CCOs foram considerados em estágio imaturo de desenvolvimento, embora os CCOs no grupo N-VIT apresentaram a configuração de cromatina condensada em maior número de células avaliadas em comparação com VIT (100% vs 60,7%, respectivamente). Demonstramos que BMP15 e CASP3 são detectados em CCOs imaturos em VIT e N-VIT. Conclui-se que o BAX é altamente expresso em CCOs equinos imaturos vitrificados sendo relacionado à sinalização de apoptose em células expostas ao processo de vitrificação.(AU)

Cultivo in vitro de folículos pré-antrais bovinos: revisão, desafios, conquistas e perspectivas futuras / In vitro culture of bovine preantral follicles: review, challenges, achievements and future perspectives

A reprodução animal incide diretamente na eficiência e rentabilidade econômica de um rebanho, sendo considerada um dos fatores de maior importância para os sistemas de produção. Consequentemente, o desenvolvimento e a utilização de biotecnologia são indispensáveis para o aumento da eficiência reprodutiva, do melhoramento genético, da produção de alimentos e geração de riquezas. Nas últimas décadas várias foram as biotécnicas associadas à reprodução animal que apresentaram um grande potencial para a geração de genética, especialmente, ao que se referem aos avanços da reprodução assistida. Estes progressos possibilitaram a utilização de folículos pré-antrais como fonte de oócitos para biotecnologias reprodutivas. Deste modo, a técnica de cultivo in vitro proporciona a retomada do desenvolvimento dos folículos presente na reserva ovariana pela ativação in vitro forçada simulando a ocorrência de distúrbios na foliculogênesse. Até então, apenas a especie murina obteve descendentes vivos através dos folículos primordiais cultivados in vitro. Infelizmente, não há relatos de sucesso em outras espécies, tornando o desenvolvimento de sistemas ideias de cultivo in vitro um desafio. Portanto, o objetivo desta revisão é descrever e discutir os principais avanços da situação atual da pesquisa com folículos pré-antrais inclusos em folículos ovarianos.(AU)

Animal reproduction directly affects the efficiency and economic profitability of a herd, being considered one of the most important factors for production systems. Consequently, the development and use of biotechnology are indispensable for increasing reproductive efficiency, genetic improvement, food production and wealth generation. In the last few decades, biotechnologies associated with animal reproduction have shown great potential for the generation of genetics, especially with regard to advances in assisted reproduction. These advances have enabled the use of pre-antral follicles as a source of oocytes for reproductive biotechnologies. Thus, the in vitro culture technique provides the resumption of the development of follicles present in the ovarian reserve by forced in vitro activation, simulating the occurrence of disturbances in folliculogenesis. Until then, only the murine species obtained living descendants through primordial follicles cultivated in vitro. Unfortunately, there are no reports of success in other species, making the development of ideal in vitro culture systems a challenge.Therefore, the purpose of this review is to describe and discuss the main advances in the current research situation with preantral follicles included in ovarian follicles.(AU)

Cultivo in vitro de folículos pré-antrais bovinos: revisão, desafios, conquistas e perspectivas futuras / In vitro culture of bovine preantral follicles: review, challenges, achievements and future perspectives

A reprodução animal incide diretamente na eficiência e rentabilidade econômica de um rebanho, sendo considerada um dos fatores de maior importância para os sistemas de produção. Consequentemente, o desenvolvimento e a utilização de biotecnologia são indispensáveis para o aumento da eficiência reprodutiva, do melhoramento genético, da produção de alimentos e geração de riquezas. Nas últimas décadas várias foram as biotécnicas associadas à reprodução animal que apresentaram um grande potencial para a geração de genética, especialmente, ao que se referem aos avanços da reprodução assistida. Estes progressos possibilitaram a utilização de folículos pré-antrais como fonte de oócitos para biotecnologias reprodutivas. Deste modo, a técnica de cultivo in vitro proporciona a retomada do desenvolvimento dos folículos presente na reserva ovariana pela ativação in vitro forçada simulando a ocorrência de distúrbios na foliculogênesse. Até então, apenas a especie murina obteve descendentes vivos através dos folículos primordiais cultivados in vitro. Infelizmente, não há relatos de sucesso em outras espécies, tornando o desenvolvimento de sistemas ideias de cultivo in vitro um desafio. Portanto, o objetivo desta revisão é descrever e discutir os principais avanços da situação atual da pesquisa com folículos pré-antrais inclusos em folículos ovarianos.

Animal reproduction directly affects the efficiency and economic profitability of a herd, being considered one of the most important factors for production systems. Consequently, the development and use of biotechnology are indispensable for increasing reproductive efficiency, genetic improvement, food production and wealth generation. In the last few decades, biotechnologies associated with animal reproduction have shown great potential for the generation of genetics, especially with regard to advances in assisted reproduction. These advances have enabled the use of pre-antral follicles as a source of oocytes for reproductive biotechnologies. Thus, the in vitro culture technique provides the resumption of the development of follicles present in the ovarian reserve by forced in vitro activation, simulating the occurrence of disturbances in folliculogenesis. Until then, only the murine species obtained living descendants through primordial follicles cultivated in vitro. Unfortunately, there are no reports of success in other species, making the development of ideal in vitro culture systems a challenge.Therefore, the purpose of this review is to describe and discuss the main advances in the current research situation with preantral follicles included in ovarian follicles.

Qualitative and quantitative aspects of atresia during mammalian folliculogenesis / Aspectos qualitativos e quantitativos da atresia durante a foliculogênese em mamíferos

Durante a foliculogênese ovariana, cerca de 99,9% dos folículos morrem pelo processo de atresia folicular. O processo de atresia pode ocorrer pelas vias degenerativa ou apoptótica. Este processo compromete todos os estágios de desenvolvimento folicular, sendo os folículos antrais os mais afetados. Por outro lado, os folículos préantrais são mais resistentes, em função de sua menor taxa metabólica, bem como do número reduzido de células e camadas de células somáticas, células da granulosa e/ou da teca. Embora folículos pré-antrais sejam menos afetados pelo processo de atresia, quando este evento ocorre, pode-se classificá-lo de duas formas, degeneração do tipo I e degeneração do tipo II. Na degeneração do tipo I, o oócito é o compartimento mais comprometido, apresentando núcleo picnótico, embora suas células da granulosa apresentem-se bem organizadas e sem picnose nuclear. Já na degeneração do tipo II, os folículos apresentam oócito retraído e células da granulosa edemaciadas, desorganizadas e sem aderência à membrana basal e ao oócito. É importante destacar que a degeneração do tipo I é mais comum em folículos primordiais e primários, enquanto folículos secundários apresentam mais degeneração do tipo II, ou seja, a medida que os folículos evoluem, a degeneração do tipo II é mais frequente. Considerando todos os aspectos aqui relacionados, essa revisão de literatura abordará aspectos relacionados aos processos de foliculogênese e atresia folicular, bem como as substâncias que induzem a atresia durante a foliculogenese in vitro e in vivo e, ainda, os métodos e parâmetros para análise da atresia em folículos ovarianos. Isto se deve a necessidade de desenvolvimento de protocolos mais eficientes de recuperação dos folículos ovarianos, prevenindo essa grande perda folicular e otimizando as possibilidades de utilização desses materiais biológicos no futuro.

During ovarian foliculogenesis, about 99.9% of follicles die by the follicle atresia process. The atresia process can occur via degeneration or apoptosis. This process compromises all the follicle development stages, with antral follicles being those most affected. On the other hand, the preantral follicles are more residents, since their slow metabolic rate, as well as the reduced number and layers of somatic cells, granulosa and/or thecal cells. Although preantral follicles are less affected by the atresia process, when the event occurs, we can classify it in two ways, type I or type II degenerated follicles. In the type I degeneration the oocyte is the most compromised compartment, showing the picnotic nuclei, although its granulosa cells presented well organized and no picnosis. Already in the type II degeneration, the follicles presented shrunken in the oocyte, and swollen, disorganization and no adhered granulosa cells from the basal membrane and oocyte. It is important to highlight that type I degeneration is the most common in primordial and primary follicles, while in secondary follicles present more type II degeneration, which means that the as follicle evolve, type II degeneration is more frequent. Considering all the aspects related here, this literature review will address aspects related to the folliculogenesis and the process of follicle atresia, as well as substances that induce atresia during in vitro and in vivo folliculogenesis and methods and parameters for analyzing atresia in ovarian follicles. This is due to the need to develop more efficient ovarian follicle recovery protocols, which can prevent this great follicular loss and optimizing the possibilities of use of these biological materials in the future.

Oogênese e Foliculogênese em Bovinos / Oogenesis and Folliculogenesis in Cattle

Os ovários desempenham papéis relevantes para o sistema reprodutivo, no qual a função exócrina (ou gametogênica) realiza a maturação e liberação do oócito para a fecundação e a função endócrina (ou esteroidogênica) afeta a síntese, secreção de hormônios e fatores de crescimento. Além disso, existe uma interação entre os fatores endócrinos, autócrinos e parácrinos, atuando em associação com o processo de desenvolvimento folicular e oocitário durante a vida reprodutiva da fêmea. O córtex, porção mais externa do ovário, representa a região funcional onde se localizam os folículos ovarianos e as estruturas lúteas, em diferentes estágios de desenvolvimento e/ou atresia. A região medular localiza-se mais internamente, na maioria das espécies, e sua principal função é nutrir e sustentar o ovário. Apesar da numerosa população folicular presente nos ovários, estabelecida durante a vida fetal, quase todos os folículos encontrados no pool de reserva ovariana, ou seja, 99,9%, não atingem a ovulação. Esses folículos passam por um processo de morte celular conhecido como atresia folicular, tornando o ovário um órgão de baixa produtividade. A elucidação dos mecanismos que regulam a foliculogênese, incluindo o processo de atresia, é importante para o melhor aproveitamento dos folículos na melhoria da eficiência reprodutiva de animais de produção.

The ovaries play roles relevant to the reproductive system, in which the exocrine (or gametogenic) function carries out the maturation and release of the oocyte for fertilization and the endocrine (or steroidogenic) function effects the synthesis and secretion of hormones and growth factors. In addition, there is an interaction between endocrine, autocrine and paracrine factors, acting in association with the follicular and oocyte development process during the female's reproductive life. The cortex, the outermost portion of the ovary, represents the functional region where the ovarian follicles and luteal structures are located, at different stages of development and/or atresia. The medullary region is located more internally, in most species, and its main function is to nourish and support the ovary. Despite the numerous follicular population present in the ovaries, established during fetal life, almost all follicles found in the ovarian reserve pool, i.e., 99.9%, do not reach ovulation. These follicles undergo a process of cell death known as follicular atresia, making the ovary a low-productivity organ. The elucidation of the mechanisms that regulate folliculogenesis, including the atresia process, is important for the better use of follicles in improving the reproductive efficiency of production animals.

Ultrasonographic characterization of the organs in the middle third and caudal coelomic cavity of snakes in the Boidae Family

ABSTRACT: The aim of this study was the ultrasonographic evaluation of the organs in the middle third and caudal coelomic cavity of healthy snakes in the Boidae family. For such, 15 adult snakes from five species were evaluated: Boa constrictor amarali, Boa constrictor constrictor, Eunectes murinus, Epicrates assisi and Epicrates crassus. The animals were physically restrained for examination. After the application of acoustic gel over the scales the transducer was positioned in the frontal plane of the coelomic cavity. Microconvex and linear transducers at 10MHz were used. The ultrasound examination was conducted in the craniocaudal direction, with longitudinal and transversal sections to assess syntropy, echogenicity and echotexture of the organs. The liver was bilobulated, hyperechoic, homogeneous echotexture, hyperechoic capsule, with a hepatic lobe measuring 1.15±0.64cm wide, and the presence of a central hepatic vein, measuring 0.44±0.21cm in diameter. The gallbladder was characterized as an anechoic structure with echogenic walls and dimensions of 2.91±1.18cm x 1.38±0.84cm (length x width). The stomach showed a pleated and linear texture, echogenic, with hypoechoic walls measuring 0.3±0.07cm wide. The splenopancreas was a circular and echogenic structure, homogeneous echotexture and measuring 1.18±0.62cm in width and 1.56±0.88cm in length. The kidneys were characterized by elongated, lobulated, hypoechoic structures, an echogenic capsule and an echogenic central line, measuring 1.05±0.7cm in width. The testis were characterized by fusiform, hypoechoic structures, homogeneous echotexture, measuring 2.31±0.79cm in length and 0.6±0.23cm in width. Ovarian follicles were seen in different stages, 0.67±0.39cm wide and 0.73±0.38cm long. No differences were found between species of syntropy, echogenicity and echotexture of the organs of the coelomic cavity. The ultrasound examination proved to be a safe, non-invasive and efficient technique for characterizing the organs of the coelomic cavity of snakes.

RESUMO: O objetivo do estudo foi realizar a avaliação ultrassonográfica de órgãos do terço médio e caudal da cavidade celomática de serpentes hígidas da família Boidae. Para isto, foram avaliadas 15 serpentes adultas de cinco espécies: Boa constrictor amarali, Boa constrictor constrictor, Eunectes murinus, Epicrates assisi e Epicrates crassus. Os animais foram contidos fisicamente para a realização do exame. Após aplicação de gel acústico sobre as escamas, o transdutor foi posicionado no plano frontal da cavidade celomática. Foram utilizados transdutores microconvexo e linear em 10MHz. O exame ultrassonográfico foi conduzido no sentido craniocaudal, com cortes longitudinais e transversais para avaliar sintopia, ecogenicidade e ecotextura dos órgãos. O fígado se apresentou bilobulado, hiperecoico, ecotextura homogênea, cápsula hiperecoica, com lobo hepático medindo 1,15±0,64cm de largura, e presença de uma veia central hepática, medindo 0,44±0,21cm de diâmetro. A vesícula biliar foi caracterizada como uma estrutura anecoica de paredes ecogênicas e dimensões de 2,91±1,18cm x 1,38±0,84cm(comprimento x largura). O estômago apresentou-se com o aspecto pregueado e linear, ecogênico, com paredes hipoecoicas medindo 0,3±0,07cm de largura. O esplenopâncreasse apresentou como uma estrutura circular e ecogênica, ecotextura homogênea e medindo de 1,18±0,62cm de largura e 1,56±0,88cm de comprimento. Os rins se caracterizaram por estruturas alongadas, lobuladas, hipoecoicas, cápsula ecogênica e uma linha central ecogênica, medindo 1,05±0,7cm de largura. Os testículos foram caracterizados por estruturas fusiformes, hipoecoicas, ecotextura homogênea, medindo 2,31±0,79cm de comprimento e 0,6±0,23cm de largura. Foram visualizados folículos ovarianos em diferentes estágios, de 0,67±0,39cm de largura e 0,73±0,38cm de comprimento. Não foram encontradas diferenças entre espécies de sintopia, ecogenicidade e ecotextura dos órgãos da cavidade celomática. O exame ultrassonográfico demonstrou-se uma técnica segura, não invasiva e eficiente para caracterização dos órgãos da cavidade celomática de serpentes.

Ultrasonographic characterization of the organs in the middle third and caudal coelomic cavity of snakes in the Boidae Family / Caracterização ultrassonográfica dos órgãos do terço médio e caudal da cavidade celomática de serpentes da família Boidae

The aim of this study was the ultrasonographic evaluation of the organs in the middle third and caudal coelomic cavity of healthy snakes in the Boidae family. For such, 15 adult snakes from five species were evaluated: Boa constrictor amarali, Boa constrictor constrictor, Eunectes murinus, Epicrates assisi and Epicrates crassus. The animals were physically restrained for examination. After the application of acoustic gel over the scales the transducer was positioned in the frontal plane of the coelomic cavity. Microconvex and linear transducers at 10MHz were used. The ultrasound examination was conducted in the craniocaudal direction, with longitudinal and transversal sections to assess syntropy, echogenicity and echotexture of the organs. The liver was bilobulated, hyperechoic, homogeneous echotexture, hyperechoic capsule, with a hepatic lobe measuring 1.15±0.64cm wide, and the presence of a central hepatic vein, measuring 0.44±0.21cm in diameter. The gallbladder was characterized as an anechoic structure with echogenic walls and dimensions of 2.91±1.18cm x 1.38±0.84cm (length x width). The stomach showed a pleated and linear texture, echogenic, with hypoechoic walls measuring 0.3±0.07cm wide. The splenopancreas was a circular and echogenic structure, homogeneous echotexture and measuring 1.18±0.62cm in width and 1.56±0.88cm in length. The kidneys were characterized by elongated, lobulated, hypoechoic structures, an echogenic capsule and an echogenic central line, measuring 1.05±0.7cm in width. The testis were characterized by fusiform, hypoechoic structures, homogeneous echotexture, measuring 2.31±0.79cm in length and 0.6±0.23cm in width. Ovarian follicles were seen in different stages, 0.67±0.39cm wide and 0.73±0.38cm long. No differences were found between species of syntropy, echogenicity and echotexture of the organs of the coelomic cavity. The ultrasound examination proved to be a safe, non-invasive and efficient technique for characterizing the organs of the coelomic cavity of snakes.(AU)

O objetivo do estudo foi realizar a avaliação ultrassonográfica de órgãos do terço médio e caudal da cavidade celomática de serpentes hígidas da família Boidae. Para isto, foram avaliadas 15 serpentes adultas de cinco espécies: Boa constrictor amarali, Boa constrictor constrictor, Eunectes murinus, Epicrates assisi e Epicrates crassus. Os animais foram contidos fisicamente para a realização do exame. Após aplicação de gel acústico sobre as escamas, o transdutor foi posicionado no plano frontal da cavidade celomática. Foram utilizados transdutores microconvexo e linear em 10MHz. O exame ultrassonográfico foi conduzido no sentido craniocaudal, com cortes longitudinais e transversais para avaliar sintopia, ecogenicidade e ecotextura dos órgãos. O fígado se apresentou bilobulado, hiperecoico, ecotextura homogênea, cápsula hiperecoica, com lobo hepático medindo 1,15±0,64cm de largura, e presença de uma veia central hepática, medindo 0,44±0,21cm de diâmetro. A vesícula biliar foi caracterizada como uma estrutura anecoica de paredes ecogênicas e dimensões de 2,91±1,18cm x 1,38±0,84cm(comprimento x largura). O estômago apresentou-se com o aspecto pregueado e linear, ecogênico, com paredes hipoecoicas medindo 0,3±0,07cm de largura. O esplenopâncreasse apresentou como uma estrutura circular e ecogênica, ecotextura homogênea e medindo de 1,18±0,62cm de largura e 1,56±0,88cm de comprimento. Os rins se caracterizaram por estruturas alongadas, lobuladas, hipoecoicas, cápsula ecogênica e uma linha central ecogênica, medindo 1,05±0,7cm de largura. Os testículos foram caracterizados por estruturas fusiformes, hipoecoicas, ecotextura homogênea, medindo 2,31±0,79cm de comprimento e 0,6±0,23cm de largura. Foram visualizados folículos ovarianos em diferentes estágios, de 0,67±0,39cm de largura e 0,73±0,38cm de comprimento. Não foram encontradas diferenças entre espécies de sintopia, ecogenicidade e ecotextura dos órgãos da cavidade celomática. O exame ultrassonográfico demonstrou-se uma técnica segura, não invasiva e eficiente para caracterização dos órgãos da cavidade celomática de serpentes.(AU)

Ultrasonographic characterization of the organs in the middle third and caudal coelomic cavity of snakes in the Boidae Family / Caracterização ultrassonográfica dos órgãos do terço médio e caudal da cavidade celomática de serpentes da família Boidae

The aim of this study was the ultrasonographic evaluation of the organs in the middle third and caudal coelomic cavity of healthy snakes in the Boidae family. For such, 15 adult snakes from five species were evaluated: Boa constrictor amarali, Boa constrictor constrictor, Eunectes murinus, Epicrates assisi and Epicrates crassus. The animals were physically restrained for examination. After the application of acoustic gel over the scales the transducer was positioned in the frontal plane of the coelomic cavity. Microconvex and linear transducers at 10MHz were used. The ultrasound examination was conducted in the craniocaudal direction, with longitudinal and transversal sections to assess syntropy, echogenicity and echotexture of the organs. The liver was bilobulated, hyperechoic, homogeneous echotexture, hyperechoic capsule, with a hepatic lobe measuring 1.15±0.64cm wide, and the presence of a central hepatic vein, measuring 0.44±0.21cm in diameter. The gallbladder was characterized as an anechoic structure with echogenic walls and dimensions of 2.91±1.18cm x 1.38±0.84cm (length x width). The stomach showed a pleated and linear texture, echogenic, with hypoechoic walls measuring 0.3±0.07cm wide. The splenopancreas was a circular and echogenic structure, homogeneous echotexture and measuring 1.18±0.62cm in width and 1.56±0.88cm in length. The kidneys were characterized by elongated, lobulated, hypoechoic structures, an echogenic capsule and an echogenic central line, measuring 1.05±0.7cm in width. The testis were characterized by fusiform, hypoechoic structures, homogeneous echotexture, measuring 2.31±0.79cm in length and 0.6±0.23cm in width. Ovarian follicles were seen in different stages, 0.67±0.39cm wide and 0.73±0.38cm long. No differences were found between species of syntropy, echogenicity and echotexture of the organs of the coelomic cavity. The ultrasound examination proved to be a safe, non-invasive and efficient technique for characterizing the organs of the coelomic cavity of snakes.(AU)

O objetivo do estudo foi realizar a avaliação ultrassonográfica de órgãos do terço médio e caudal da cavidade celomática de serpentes hígidas da família Boidae. Para isto, foram avaliadas 15 serpentes adultas de cinco espécies: Boa constrictor amarali, Boa constrictor constrictor, Eunectes murinus, Epicrates assisi e Epicrates crassus. Os animais foram contidos fisicamente para a realização do exame. Após aplicação de gel acústico sobre as escamas, o transdutor foi posicionado no plano frontal da cavidade celomática. Foram utilizados transdutores microconvexo e linear em 10MHz. O exame ultrassonográfico foi conduzido no sentido craniocaudal, com cortes longitudinais e transversais para avaliar sintopia, ecogenicidade e ecotextura dos órgãos. O fígado se apresentou bilobulado, hiperecoico, ecotextura homogênea, cápsula hiperecoica, com lobo hepático medindo 1,15±0,64cm de largura, e presença de uma veia central hepática, medindo 0,44±0,21cm de diâmetro. A vesícula biliar foi caracterizada como uma estrutura anecoica de paredes ecogênicas e dimensões de 2,91±1,18cm x 1,38±0,84cm(comprimento x largura). O estômago apresentou-se com o aspecto pregueado e linear, ecogênico, com paredes hipoecoicas medindo 0,3±0,07cm de largura. O esplenopâncreasse apresentou como uma estrutura circular e ecogênica, ecotextura homogênea e medindo de 1,18±0,62cm de largura e 1,56±0,88cm de comprimento. Os rins se caracterizaram por estruturas alongadas, lobuladas, hipoecoicas, cápsula ecogênica e uma linha central ecogênica, medindo 1,05±0,7cm de largura. Os testículos foram caracterizados por estruturas fusiformes, hipoecoicas, ecotextura homogênea, medindo 2,31±0,79cm de comprimento e 0,6±0,23cm de largura. Foram visualizados folículos ovarianos em diferentes estágios, de 0,67±0,39cm de largura e 0,73±0,38cm de comprimento. Não foram encontradas diferenças entre espécies de sintopia, ecogenicidade e ecotextura dos órgãos da cavidade celomática. O exame ultrassonográfico demonstrou-se uma técnica segura, não invasiva e eficiente para caracterização dos órgãos da cavidade celomática de serpentes.(AU)

Induction of accessory corpus luteum in goats and sheep: From physiological basis to reproductive effects / Indução de corpo lúteo acessório em caprinos e ovinos: Das bases fisiológicas aos efeitos reprodutivos

A identificação das ondas foliculares ovarianas e de seu padrão hormonal revelou que os folículos ovarianos dominantes da onda ovulatória (FDOO) crescem em ambiente hormonal com predominância crescente de estradiol, diferentemente daqueles da primeira (FDPO) e das ondas foliculares intermediárias (FDOI), que crescem sob forte impacto da progesterona (P4). O hormônio luteinizante (LH) é considerado o hormônio gonadotrófico decisivo para direcionar se um folículo dominante ovulará (↑ LH) ou não (↓ LH). Estratégias foram desenvolvidas para aumentar o LH endógeno (administração de GnRH) ou fornecer LH exógeno de origem suína (pLH) ou, ainda, gonadotrofinas semelhantes ao LH, como gonadotrofina coriônica humana (hCG). Estas medidas são capazes de disponibilizar LH para maturação final, ovulação e/ou luteinização de FDPO ou FDOI, formando corpos lúteos acessórios (CLa). Como consequência, a P4 aumenta e favorece o estabelecimento da gestação, sobretudo em condições em que a P4 for o fator limitante para a implantação e manutenção embrionária. Em ovelhas e cabras, em diferentes estudos, a hCG foi administrada de cinco a sete dias após o início do estro e revelou que o FDPO responde positivamente à administração de hCG, formando CLa e/ou promovendo a hipertrofia do CL formado originalmente, aumentando a área luteal. O incremento da P4 normalmente acompanha o aumento de área do tecido luteal. Como efeito final e mais desejável, a gestação e o nascimento de cordeiros/cabritos também aumentam. Esses conceitos serão discutidos na presente revisão sobre indução de CLa em ovinos e caprinos.

The identification of ovarian follicular waves and associated hormonal milieux has revealed that dominant follicles of the ovulatory wave (OWDF) grow in a hormonal environment where there is an increasing predominance of estradiol, unlike first-wave dominant follicles (FWDF) and intermediatewave dominant follicles (IWDF), which grow under increasing progesterone (P4) concentrations. The luteinizing hormone (LH) is considered the decisive gonadotropic hormone to direct whether a dominant follicle will (↑ LH) or will not (↓ LH) ovulate. Based on this, strategies have been developed to either increase endogenous LH (GnRH administration) or provide exogenous LH of porcine origin (pLH) or LH-like gonadotropins, such as human chorionic gonadotropin (hCG). Such strategies are able to provide LH for final maturation, ovulation, and/or luteinization of the FWDF or IWDF, forming accessory corpora lutea (aCL). As a consequence, P4 increases and favors the establishment of pregnancy, particularly when P4 is the limiting factor for the success of the conceptus implantation and maintenance. In sheep and goats, previous studies have administered hCG five to seven days after the onset of estrus and revealed that FWDF positively respond to hCG administration by either forming aCLs and/or promoting hypertrofia of the original CL which, in turn, increases its luteal tissue area. Normally, P4 synthesis increases along with the increase in luteal tissue area. As a final and most desirable outcome, pregnancy and the birth of lambs/kids also increase. These concepts will be discussed in this review, focusing on aCL induction in sheep and goats.

A interface entre a saúde humana e a reprodução assistida em primatas não humanos / The interface between human health and assisted reproductive technologies in non-human primates

Os primatas não-humanos (PNHs) são tidos como importantes modelos para estudos biomédicos devido à sua grande similaridade biológica com os seres humanos. As técnicas de reprodução assistida (TRAs) constituem uma importante ferramenta para realização de estudos que envolvam infertilidade, desenvolvimento de contraceptivos, gestação e desenvolvimento fetal, preservação da fertilidade em pacientes com câncer, geração de modelos experimentais por meio de técnicas de edição gênica, entre outros. O objetivo dessa revisão é discutir as principais TRAs utilizadas em PNHs e suas aplicações. Dentre as técnicas mais utilizadas em PNHs, podem-se citar colheita e criopreservação de sêmen, monitoramento do ciclo ovariano, estimulação ovariana controlada e aspiração de folículos ovarianos, fecundação in vitro, injeção intracitoplasmática de espermatozoides, inseminação artificial, microinjeção para injeção gênica, biopsia embrionária, criopreservação de embriões, transferência de embriões, diagnóstico de gestação, enxerto de gônadas e clonagem. Os estudos apresentados nesta revisão mostram a evolução das TRAs e suas diferentes aplicações. Particularmente, os estudos de edição gênica e clonagem representam um grande avanço na utilização combinada de diversas TRAs para geração de modelos biomédicos para doenças humanas, demostrando o papel dessas técnicas para avanços científicos no que diz respeito à saúde humana.

Nonhuman Primates (NHPs) are considered important models for biomedical studies due to their high biological proximity with humans. The Assisted Reproductive Technologies (ARTs) represent an important tool to perform studies related to infertility, development of contraceptives, gestation and fetal development, fertility preservation in cancer patients, generation of experimental models through gene editing techniques, among others. The objective of this review is to discuss the main ARTs used in NHPs and their application. Among the most used techniques in NHPs, we can include collection and cryopreservation of semen, ovarian cycle monitoring, controlled ovarian stimulation and follicle aspiration, in vitro fertilization, intracytoplasmic sperm injection, artificial insemination, microinjections for gene editing, embryo biopsy, embryo cryopreservation, embryo transfer, pregnancy diagnosis, grafting of gonadal tissue, and cloning. The studies cited in this review illustrate the evolution of the ARTs and their applications. The gene editing and cloning studies, in particular, represent the great advancements on the combined use of several different ARTs for the generation of biomedical models for human diseases, demonstrating the role of these techniques in the scientific advancement with regards to human health.

Hormônio antimülleriano como marcador de fertilidade em fêmeas suínas / Anti-Müllerian hormone as a fertility marker in swine females

O hormônio antimülleriano é conhecido por seu papel na regressão dos ductos de Müller durante a fase de diferenciação sexual dos machos. Ainda assim, esse hormônio atua de forma ainda mais ampla no desenvolvimento de ambos os sexos. O hormônio antimülleriano é diferencialmente expresso em machos e fêmeas durante toda a vida. Nas fêmeas esse hormônio é produzido pelas células da granulosa dos folículos ovarianos e atua modulando os processos de secreção de gonadotrofinas, foliculogênese e esteroidogênese, sendo considerado um biomarcador confiável para fertilidade em diferentes espécies. Apesar de pouquíssimo estudado na espécie suína, alguns trabalhos vêm demonstrando a existência de associações entre os níveis séricos do hormônio antimülleriano e os fenótipos de maior fertilidade. De forma que, o objetivo desta revisão é fazer um levantamento do conhecimento já acumulado acerca da temática, demostrando a importância do desenvolvimento de novos estudos; tendo em vista que o aprofundamento do conhecimento sobre as funções do hormônio antimülleriano nas fêmeas da espécie suína pode contribuir para o melhor entendimento da fisiologia da espécie(AU)

The anti-Müllerian hormone (AMH) is known for its role in the regression of Muller ducts during the phase of sexual differentiation in males. Notwithstanding, this hormone acts more broadly on the development of both sexes. The AMH is differentially expressed both in males and females throughout life. In females, this hormone is produced by granulosa cells of ovarian follicles and modulates the gonadotropin secretion, folliculogenesis, and steroidogenesis, and is considered a reliable fertility biomarker in different species. Despite the lack of studies in the swine species, some reports demonstrated the association between serum levels of AMH and more fertile phenotypes. Therefore, this review aims to survey the current knowledge about this theme, demonstrating the importance of the development of new research, since the strengthening of the knowledge on the functions of the AMH in swine females may contribute to understanding the physiology of the species.(AU)

Hormônio antimülleriano como marcador de fertilidade em fêmeas suínas / Anti-Müllerian hormone as a fertility marker in swine females

O hormônio antimülleriano é conhecido por seu papel na regressão dos ductos de Müller durante a fase de diferenciação sexual dos machos. Ainda assim, esse hormônio atua de forma ainda mais ampla no desenvolvimento de ambos os sexos. O hormônio antimülleriano é diferencialmente expresso em machos e fêmeas durante toda a vida. Nas fêmeas esse hormônio é produzido pelas células da granulosa dos folículos ovarianos e atua modulando os processos de secreção de gonadotrofinas, foliculogênese e esteroidogênese, sendo considerado um biomarcador confiável para fertilidade em diferentes espécies. Apesar de pouquíssimo estudado na espécie suína, alguns trabalhos vêm demonstrando a existência de associações entre os níveis séricos do hormônio antimülleriano e os fenótipos de maior fertilidade. De forma que, o objetivo desta revisão é fazer um levantamento do conhecimento já acumulado acerca da temática, demostrando a importância do desenvolvimento de novos estudos; tendo em vista que o aprofundamento do conhecimento sobre as funções do hormônio antimülleriano nas fêmeas da espécie suína pode contribuir para o melhor entendimento da fisiologia da espécie

The anti-Müllerian hormone (AMH) is known for its role in the regression of Muller ducts during the phase of sexual differentiation in males. Notwithstanding, this hormone acts more broadly on the development of both sexes. The AMH is differentially expressed both in males and females throughout life. In females, this hormone is produced by granulosa cells of ovarian follicles and modulates the gonadotropin secretion, folliculogenesis, and steroidogenesis, and is considered a reliable fertility biomarker in different species. Despite the lack of studies in the swine species, some reports demonstrated the association between serum levels of AMH and more fertile phenotypes. Therefore, this review aims to survey the current knowledge about this theme, demonstrating the importance of the development of new research, since the strengthening of the knowledge on the functions of the AMH in swine females may contribute to understanding the physiology of the species.

Reproductive biology, morphology, and morphometry of ovaries and oviducts of Trachemys scripta elegans in Brazilian Cerrado / Biologia reprodutiva, morfologia e morfometriade ovários e ovidutos de Trachemys scripta elegans no Cerrado Brasileiro

Although Trachemys scripta elegans is an exotic species popular as a pet in Brazil, studies on reproductive biology and capacity are non-existent in the Brazilian Cerrado. This study analyzed ovarian and oviduct characteristics and the egg production capacity of T. scripta elegans grown in this biome. The findings will associate with the size of the specimens and the sexual maturity, aiming at comparisons with native and exotic populations, as well as interspecific and contributing to the understanding of its impact on the invaded ecosystems and the establishment of eradication programs. Thus, 39 females had evaluated the body biometry and the morphology and morphometry of the ovaries and oviducts. G2 (N=20): with Class I (>5-10mm) follicles, with Class I and Class II (>10-fold) follicles, 25mm) and G3 (N=9) with Class I, Class II and Class III (>25mm) follicles. Analysis of variance, Scott-Knott's test, and Pearson's correlation analysis showed that there was no significant difference between the groups in body biometry; in the mean gonadosomatic index and gonadal morphometry, only the width of the oviducts in the right antimer and the mass and width in the left antimer were higher in G3, the only one that presented eggs. There was positive and harmonic development between body mass, carapace, and plastron, and gonadal growth occurred concomitantly with body growth, indicating a higher reproductive potential and a positive relationship between the size of the litter and the female litter. The gonadosomatic index proved to be an excellent reproductive indicator, and the ovarian evaluation was a better indicator of sexual maturity than the maximum carapace length.(AU)

Embora Trachemys scripta elegans seja uma espécie exótica popular como animal de estimação no Brasil, estudos sobre biologia e capacidade reprodutivas são inexistentes no Cerrado brasileiro. Este estudo analisou características ovarianas e do oviduto e a capacidade de produção de ovos em T. scripta elegans criadas neste bioma, correlacionando estes achados ao tamanho dos espécimes e a maturidade sexual, visando comparações com populações nativas e exóticas, bem como interespecíficas e contribuir para a compreensão de seu impacto nos ecossistemas invadidos e com o estabelecimento de programas de erradicação. Assim, 39 fêmeas tiveram avaliadas a biometria corporal e a morfologia e morfometria dos ovários e ovidutos. De acordo com o tamanho dos folículos ovarianos as fêmeas foram separadas em G1 (N= 10): com folículos Classe I (>5-10 mm), G2 (N= 20): com folículos Classe I e Classe II (>10-25 mm) e G3 (N= 9) com folículos Classe I, Classe II e Classe III (>25 mm). À análise de variância, teste de Scott-Knott e à análise de correlação de Pearson verificou-se que não houve diferença significativa entre os grupos na biometria corporal; no índice gonadossomático médio e na morfometria gonadal, apenas a largura dos ovidutos no antímero direito e a massa e a largura no antímero esquerdo foram maiores no G3, o único que apresentou ovos. Houve desenvolvimento positivo e harmônico entre massa corporal, carapaça e plastrão e o crescimento gonadal ocorreu concomitante ao crescimento corporal, indicando maior potencial reprodutivo e relação positiva entre o tamanho da ninhada de ovos e o da fêmea. O índice gonadossomático mostrou-se um bom indicador reprodutivo e a avaliação ovariana um melhor indicador da maturidade sexual que o comprimento máximo da carapaça. (AU)

Reproductive biology, morphology, and morphometry of ovaries and oviducts of Trachemys scripta elegans in Brazilian Cerrado / Biologia reprodutiva, morfologia e morfometriade ovários e ovidutos de Trachemys scripta elegans no Cerrado Brasileiro

Although Trachemys scripta elegans is an exotic species popular as a pet in Brazil, studies on reproductive biology and capacity are non-existent in the Brazilian Cerrado. This study analyzed ovarian and oviduct characteristics and the egg production capacity of T. scripta elegans grown in this biome. The findings will associate with the size of the specimens and the sexual maturity, aiming at comparisons with native and exotic populations, as well as interspecific and contributing to the understanding of its impact on the invaded ecosystems and the establishment of eradication programs. Thus, 39 females had evaluated the body biometry and the morphology and morphometry of the ovaries and oviducts. G2 (N=20): with Class I (>5-10mm) follicles, with Class I and Class II (>10-fold) follicles, 25mm) and G3 (N=9) with Class I, Class II and Class III (>25mm) follicles. Analysis of variance, Scott-Knott's test, and Pearson's correlation analysis showed that there was no significant difference between the groups in body biometry; in the mean gonadosomatic index and gonadal morphometry, only the width of the oviducts in the right antimer and the mass and width in the left antimer were higher in G3, the only one that presented eggs. There was positive and harmonic development between body mass, carapace, and plastron, and gonadal growth occurred concomitantly with body growth, indicating a higher reproductive potential and a positive relationship between the size of the litter and the female litter. The gonadosomatic index proved to be an excellent reproductive indicator, and the ovarian evaluation was a better indicator of sexual maturity than the maximum carapace length. Ovaries were irregular structures, without delimitation between the cortical and medullary regions and filled with vitelogenic follicles of different diameters, atresic follicles, and corpora lutea, which reflected the ovarian complexity of the species and the presence of follicular hierarchy. In the scarce stroma, two germinative beds were observed per ovary and the presence of gaps very close to the follicles and associated with the blood vessels. Analysis of gonadal tissue revealed three types of oocytes according to cytoplasmic characteristics: homogeneous, vesicular or vesicular in the cortex with apparent granules. Oviducts were functional and separated, joining only in the final portion to form the cloaca and subdivided into infundibulum, tuba, isthmus, uterus, and vagina. The structure of the uterine tube was composed of serosa, muscular and mucous, which was full of glands. The presence of eggs in the oviducts indicated that the specimens can reproduce in the Brazilian Cerrado. This study provides necessary and relevant information on the reproductive biology and capacity of T. scripta elegans in the Brazilian Cerrado and can contribute to the understanding of its impact on the invaded ecosystems and the establishment of eradication programs. The extraction of females with capacity can reduce the annual reproductive yield of the species and decrease its effect on local biodiversity.(AU)

Embora Trachemys scripta elegans seja uma espécie exótica popular como animal de estimação no Brasil, estudos sobre biologia e capacidade reprodutivas são inexistentes no Cerrado brasileiro. Este estudo analisou características ovarianas e do oviduto e a capacidade de produção de ovos em T. scripta elegans criadas neste bioma, correlacionando estes achados ao tamanho dos espécimes e a maturidade sexual, visando comparações com populações nativas e exóticas, bem como interespecíficas e contribuir para a compreensão de seu impacto nos ecossistemas invadidos e com o estabelecimento de programas de erradicação. Assim, 39 fêmeas tiveram avaliadas a biometria corporal e a morfologia e morfometria dos ovários e ovidutos. De acordo com o tamanho dos folículos ovarianos as fêmeas foram separadas em G1 (N= 10): com folículos Classe I (>5-10 mm), G2 (N= 20): com folículos Classe I e Classe II (>10-25 mm) e G3 (N= 9) com folículos Classe I, Classe II e Classe III (>25 mm). À análise de variância, teste de Scott-Knott e à análise de correlação de Pearson verificou-se que não houve diferença significativa entre os grupos na biometria corporal; no índice gonadossomático médio e na morfometria gonadal, apenas a largura dos ovidutos no antímero direito e a massa e a largura no antímero esquerdo foram maiores no G3, o único que apresentou ovos. Houve desenvolvimento positivo e harmônico entre massa corporal, carapaça e plastrão e o crescimento gonadal ocorreu concomitante ao crescimento corporal, indicando maior potencial reprodutivo e relação positiva entre o tamanho da ninhada de ovos e o da fêmea. O índice gonadossomático mostrou-se um bom indicador reprodutivo e a avaliação ovariana um melhor indicador da maturidade sexual que o comprimento máximo da carapaça. Ovários foram estruturas irregulares, sem delimitação entre a região cortical e medular e repletos de folículos vitelogênicos de diferentes diâmetros, folículos atrésicos e corpos lúteos, que refletiram a complexidade ovariana da espécie e a presença de hierarquia folicular. No estroma escasso foram observados dois leitos germinativos por ovário e a presença de lacunas muito próximas aos folículos e associadas aos vasos sanguíneos. A análise do tecido gonadal revelou três tipos de oócitos de acordo com as características do citoplasma: homogêneo, vesicular ou vesicular no córtex com grânulos aparentes. Ovidutos eram funcionais e separados, unindo-se apenas na porção final para formar a cloaca e subdividiam-se em infundíbulo, tuba uterina, istmo, útero e vagina. A estrutura da tuba uterina era constituída de serosa, muscular e mucosa, a qual era repleta de glândulas. A presença de ovos nos ovidutos indicou que os espécimes podem se reproduzir no cerrado brasileiro. Este estudo fornece informações básicas e relevantes da biologia e capacidade reprodutivas de T. scripta elegans no Cerrado brasileiro e pode contribuir com a compreensão de seu impacto nos ecossistemas invadidos e com o estabelecimento de programas de erradicação, uma vez que a extração de fêmeas com capacidade reprodutiva pode contribuir com a diminuição do rendimento reprodutivo anual da espécie e diminuir seu efeito sobre a biodiversidade local.(AU)

Anatomia do sistema reprodutor feminino de Alouatta belzebul (Linnaeus, 1766) / [Anatomy of the female reproductive system of the Alouatta belzebul (Linnaeus, 1766)]

O conhecimento da anatomia de qualquer animal silvestre é de fundamental importância para sua preservação e proteção. Neste contexto, o presente estudo objetivou descrever a morfologia do sistema reprodutor feminino de Alouatta belzebul. Foram utilizados seis espécimes de A. belzebul, fêmeas, adultas, e livres de lesões. Observou-se macroscopicamente que os ovários têm características morfológicas em formato ovoides, com superfície lisa, e, na análise histológica na região de córtex, evidenciou-se folículos ovarianos em diferentes estágios de desenvolvimento. As tubas uterinas anatomicamente são finas e curvilíneas, apresentando uma camada mucosa, uma muscular e outra serosa. O útero possui formato simples, com fundo globoso, com um miométrio altamente vascularizado, sendo organizado em feixes de fibras musculares lisas. A estrutura anatômica da vagina apresentou-se como um tubo muscular longo de paredes finas, onde, na região vestibular, o óstio externo da uretra é marcado por uma papila uretral bilobada e, na região de vulva, em sua porção caudal, contatou-se um clitóris bem desenvolvido. No que concerne à análise histológica da vagina, verificou-se, em região de mucosa vaginal, um extrato basal composto por epitélio estratificado pavimentoso não queratinizado atrófico. As descrições morfológicas fornecem, de forma inédita, informações importantes relativas à anatomia macroscópica e microscópica do sistema reprodutor feminino dessa espécie.(AU)

Knowledge of the anatomy of any wild animal is of fundamental importance for its preservation and protection. In this context the present study aimed to describe the morphology of the female reproductive system of A. belzebul. We used 6 specimens of A. belzebul, female, adult and free of lesions. It was macroscopically observed that the ovaries are ovoid with smooth surface and the histological analysis in cortical region showed ovarian follicles in different stages of development. The fallopian tubes are anatomically thin and curvilinear, with one mucous layer, one muscular and one serous layer. The uterus was presented in a simple format with a globular fundus, with a highly vascularized myometrium, being organized in bundles of smooth muscle fibers. The anatomical structure of the vagina presented itself as a long thin-walled muscular tube where in the vestibular region the external orifice of the urethra is marked by a bilobed urethral papilla and in the caudal portion in its caudal portion a well-developed clitoris. Regarding the histological analysis of the vagina, a basal extract composed of atrophic non-keratinized stratified squamous epithelium was found in the vaginal mucosa region. The morphological descriptions provide important information regarding the macroscopic and microscopic anatomy of the female reproductive system of this species in an unprecedented way.(AU)

Criopreservação de tecido ovariano e/ou folículos pré-antrais: uma alternativa para salvaguardar o material genético e a fertilidade de ovelhas e cabras valiosas / Cryopreservation of ovarian tissue and/or preantral follicles: an alternative to safeguard the genetic material and fertility of valuable sheep and goats

A redução da biodiversidade tem levado a uma preocupação emergencial frente a conservação do material biológico de animais geneticamente valiosos. Para tanto, a implantação de bancos de germoplasma, como embriões, gametas e tecido gonadal e somáticos, tem sido uma alternativa para auxiliar na manutenção da biodiversidade. No tocante ao material genético de fêmeas, a criopreservação de folículos pré-antrais isolados ou inclusos no tecido ovariano associada ao uso de tecnologias de reprodução assistida, como cultivo, fertilização in vitro e produção de embriões in vitro, poderá auxiliar na conservação da fertilidade de animais domésticos de interesse econômico com dificuldades reprodutivas ou animais ameaçados de extinção. Além disso, a criopreservação de tecido ovariano seguida de transplante pode ser uma alternativa promissora, uma vez que permite a restauração da função ovariana e reprodutiva. Estudos realizados em humanos relataram o nascimento de 130 indivíduos após o transplante de tecido ovariano previamente criopreservado. Apesar desse sucesso, a criopreservação de ovário ainda é considerada uma técnica experimental. Especialmente em caprinos e ovinos, a grande maioria dos estudos tem usado essas espécies como modelo experimental para a espécie humana. Nessas espécies, o sucesso da criopreservação de folículos ovarianos já foi evidenciado, o que nos dá esperança para o uso dessa tecnologia, vislumbrando, não somente a conservação do material genético, mas a obtenção de embriões e nascimento de crias mesmo após a morte de um animal geneticamente valioso. Assim, todos os esforços atuais estão voltados para a avaliação adequada da qualidade de protocolos de criopreservação que assegurem que esses recursos genéticos permaneçam como parte funcional dos sistemas de produção e conservação das espécies.(AU)

Reducing biodiversity has led to an emergency concern over the conservation of biological material from genetically valuable animals. Therefore, the establishment of gene banks, such as embryos, gametes and somatic and ovarian tissue has been an alternative to assist in maintaining biodiversity. Concerning the genetic material of females, the cryopreservation of preantral follicles isolated or included in the ovarian tissue associated with the use of assisted reproduction technologies, such as culture, in vitro fertilization and in vitro embryo production, may help to preserve the fertility of domestic animals of economic interest with reproductive difficulties or animals threatened with extinction. In addition, cryopreservation of ovarian tissue followed by transplantation may be a promising alternative, since it allows the restoration of ovarian and reproductive function. Studies in humans have reported the birth of 130 individuals after previously cryopreserved ovarian tissue transplantation. Despite this success, ovary cryopreservation is still considered an experimental technique. Especially in goats and sheep, the vast majority of studies have used these species as an experimental model for the human species. In these species, the success of cryopreservation of ovarian follicles has already been shown, which gives us hope for the use of this technology, noting not only the conservation of the genetic material, but the obtaining of embryos and the birth of youngsters even after the death of a genetically valuable animal. Thus, all current efforts are focused on the proper evaluation of the quality of cryopreservation protocols that ensure that these genetic resources remain as a functional part of the systems of production and conservation of the species.(AU)

Criopreservação de tecido ovariano e/ou folículos pré-antrais: uma alternativa para salvaguardar o material genético e a fertilidade de ovelhas e cabras valiosas / Cryopreservation of ovarian tissue and/or preantral follicles: an alternative to safeguard the genetic material and fertility of valuable sheep and goats

A redução da biodiversidade tem levado a uma preocupação emergencial frente a conservação do material biológico de animais geneticamente valiosos. Para tanto, a implantação de bancos de germoplasma, como embriões, gametas e tecido gonadal e somáticos, tem sido uma alternativa para auxiliar na manutenção da biodiversidade. No tocante ao material genético de fêmeas, a criopreservação de folículos pré-antrais isolados ou inclusos no tecido ovariano associada ao uso de tecnologias de reprodução assistida, como cultivo, fertilização in vitro e produção de embriões in vitro, poderá auxiliar na conservação da fertilidade de animais domésticos de interesse econômico com dificuldades reprodutivas ou animais ameaçados de extinção. Além disso, a criopreservação de tecido ovariano seguida de transplante pode ser uma alternativa promissora, uma vez que permite a restauração da função ovariana e reprodutiva. Estudos realizados em humanos relataram o nascimento de 130 indivíduos após o transplante de tecido ovariano previamente criopreservado. Apesar desse sucesso, a criopreservação de ovário ainda é considerada uma técnica experimental. Especialmente em caprinos e ovinos, a grande maioria dos estudos tem usado essas espécies como modelo experimental para a espécie humana. Nessas espécies, o sucesso da criopreservação de folículos ovarianos já foi evidenciado, o que nos dá esperança para o uso dessa tecnologia, vislumbrando, não somente a conservação do material genético, mas a obtenção de embriões e nascimento de crias mesmo após a morte de um animal geneticamente valioso. Assim, todos os esforços atuais estão voltados para a avaliação adequada da qualidade de protocolos de criopreservação que assegurem que esses recursos genéticos permaneçam como parte funcional dos sistemas de produção e conservação das espécies.

Reducing biodiversity has led to an emergency concern over the conservation of biological material from genetically valuable animals. Therefore, the establishment of gene banks, such as embryos, gametes and somatic and ovarian tissue has been an alternative to assist in maintaining biodiversity. Concerning the genetic material of females, the cryopreservation of preantral follicles isolated or included in the ovarian tissue associated with the use of assisted reproduction technologies, such as culture, in vitro fertilization and in vitro embryo production, may help to preserve the fertility of domestic animals of economic interest with reproductive difficulties or animals threatened with extinction. In addition, cryopreservation of ovarian tissue followed by transplantation may be a promising alternative, since it allows the restoration of ovarian and reproductive function. Studies in humans have reported the birth of 130 individuals after previously cryopreserved ovarian tissue transplantation. Despite this success, ovary cryopreservation is still considered an experimental technique. Especially in goats and sheep, the vast majority of studies have used these species as an experimental model for the human species. In these species, the success of cryopreservation of ovarian follicles has already been shown, which gives us hope for the use of this technology, noting not only the conservation of the genetic material, but the obtaining of embryos and the birth of youngsters even after the death of a genetically valuable animal. Thus, all current efforts are focused on the proper evaluation of the quality of cryopreservation protocols that ensure that these genetic resources remain as a functional part of the systems of production and conservation of the species.

Resposta ovariana em catetos submetidos a dois tratamentos hormonais com gonadototrofinas / Ovarian response in hicks submitted to two hormonal treatments with gonadototrophins

A resposta ovariana de catetos tratados com eCG/hCG foi analisada pelo desenvolvimento folicular e pela expressão gênica. O tratamento DS (dose utilizada em suínos) e DA (dose ajustada alometricamente) foram comparados. Todas as fêmeas apresentaram corpos hemorrágicos (CHs) e as taxas de ovulação foram semelhantes entre DS (4,00±1,17) e DA (2,50±0,43). O número de folículos por animal e as quantidades de folículos P (≤3mm), M (3-5mm) e G (≥5mm) foram similares entre os grupos. Os folículos ovarianos do mesmo tamanho expressaram FSHR e LHCGR em níveis similares entre os grupos. FSHR foi mais expresso na fase inicial, e LHCGR, na fase tardia da foliculogênese ovariana de cateto. A expressão de LHCGR nos CHs foi igual entre os tratamentos e entre os ovários direito e esquerdo.

The ovarian response of catches treated with eCG/hCG was analyzed by follicular development and gene expression. The treatment DS (dose used in pigs) and AD (dose adjusted alometrically) were compared. All females showed hemorrhagic bodies (CHs) and ovulation rates were similar between DS (4.00±1.17) and AD (2.50±0.43). The number of follicles per animal and the numbers of follicles P (≤3mm), M (3-5mm) and G (≥5mm) were similar between the groups. Ovarian follicles of the same size expressed FSHR and LHCGR at similar levels between groups. FSHR was more expressed in the early phase, and LHCGR, in the late phase of ovarian catheter folliculogenesis. LHCGR expression in CHs was equal between treatments and between right and left ovary.