Good practices in the rearing and maintenance of zebrafish (Danio rerio) in Brazilian laboratories / Boas práticas na criação e manutenção de zebrafish (Danio rerio) em laboratório no Brasil

Good Laboratory Practice (GLP) is a management quality control system that encompasses the organizational process and conditions under which non-clinical health and environmental studies are carried out. According to the World Health Organization, GLP must contain five topics: resources, characterization, rules, results, and quality control. The aim of this work is to address a review according to WHO standard to the implementation of Good Laboratory Practices in zebrafish (Danio rerio) facility. Considering that the promotion of one health (animal, human, and environmental) associated with an education plan, protocols, and records are fundamental to guarantee the safety and integrity of employees, animals and the environment as well as reliability in the results generated. In a way, Brazil still needs improvements related to the wellfare of aquatic organisms (national laws, international agreements, corporate programs, and others); especially in relation to its use in research and technological development. In this way, the implementation of GLPs provide valuable guidance for improving animal welfare and worker safety, facilitating the standardization of research.

As Boas Práticas de Laboratório (BPL) são um sistema de controle de qualidade gerencial que abrange o processo organizacional e as condições sob as quais os estudos não clínicos de saúde e meio ambiente são desenvolvidos. Conforme a Organização Mundial da Saúde (OMS) as BPL devem conter cinco tópicos: recursos, caracterização, regras, resultados e controle de qualidade. O objetivo deste trabalho foi apresentar uma revisão conforme o padrão da OMS para a implementação das BPL em biotério de zebrafish. Considerando que a promoção da saúde única (animal, humana e ambiental) associada a um plano de educação, protocolos e registros são fundamentais para garantir a segurança e a integridade dos trabalhadores/pesquisadores, animais e meio ambiente assim como confiabilidade nos resultados gerados. De certa forma o Brasil ainda necessita de melhorias relacionadas ao bem-estar de organismos aquáticos (leis nacionais, acordos internacionais, programas corporativos e outros); especialmente em relação à utilização destes na pesquisa e desenvolvimento tecnológico. Desta forma, a implementação de BPL fornece uma orientação valiosa para a melhoria do bem-estar animal, e segurança do trabalhador vindo a facilitar a padronização da pesquisa.

Neurological diseases of viral origin in cattle in the state of Pernambuco, Brazil: clinical and anatomopathological study / Enfermidades neurológicas de origem viral em bovinos no estado de Pernambuco, Brasil: estudo clínico e anatomopatológico

Studies related to neurological diseases are of great importance in Veterinary Medicine, particularly those involving production animals, such as cattle, due to their wide sanitary and public health significance. Therefore, the current study aims to describe the frequency of occurrence of the main clinical, laboratory, and anatomopathological findings of cattle diagnosed with neurological diseases of viral origin. Screening was performed in the general register of patients diagnosed through anatomopathological and/or complementary examination with illnesses of viral origin, admitted (live or dead) to the Clínica de Bovinos de Garanhuns-UFRPE from January 2009 to December 2019. The information recovered was entered in a database created in the computer program Microsoft Excel 2010®, distributed into clinical, laboratory, and anatomopathological data. The clinical findings on neurological diseases of viral etiology were very varied and non-specific, and the anatomopathological findings, together with laboratory methods, were of fundamental importance for the establishment of the diagnosis. The high frequency of rabies cases in this study demonstrates the importance of this disease for cattle rearing, as well as for Public Health. We emphasize the importance of including malignant catarrhal fever and herpes meningoencephalitis in the differential diagnosis of neurological diseases in the region, as well as the adoption of sanitary measures.

Os estudos relacionados as doenças neurológicas assumem grande importância na Medicina Veterinária, particularmente os que envolvem animais de produção como os bovinos, em virtude da grande importância sanitária e de saúde pública. Nesse contexto, este trabalho teve como objetivo descrever a frequência de ocorrência dos principais achados clínicos, laboratoriais e anatomopatológicos dos bovinos diagnosticados com doenças neurológicas de origem viral. Realizou-se a triagem no livro de registro geral dos pacientes com enfermidades que cursaram com sintomatologia neurológica e que foram diagnosticados através de exame anatomopatológico e/ou complementares com enfermidades de origem viral, os quais deram entrada (vivos ou mortos) na Clínica de Bovinos de Garanhuns-UFRPE no período de janeiro de 2009 a dezembro de 2019. As informações obtidas foram inseridas em um banco de dados elaborado no programa de computador Microsoft Excel 2010® distribuídas em dados clínicos, laboratoriais e anatomopatológicos. Os achados clínicos das enfermidades neurológicas de etiologia viral foram muito variados e inespecíficos, sendo os achados anatomopatológicos, aliados aos métodos laboratoriais, de importância fundamental para o estabelecimento do diagnóstico. A elevada frequência dos casos de raiva neste estudo demonstra a importância sanitária desta enfermidade para a pecuária bovina, como também para a saúde pública. Ressalta-se a importância da inclusão da febre catarral maligna e da meningoencefalite herpética no diagnóstico diferencial das doenças neurológicas na região, assim como a adoção de medidas sanitárias.

Assessment of general activity and anxiety-like behavior in mice following tramadol and meloxicam administration for managing immediate post-operative pain

After analgesic administration, we evaluated general activity in the Open-Field and anxiety-like behavior in the Elevated Plus Maze of vasectomized mice. We divided C57BL/6J male mice into eight groups: saline, three non-operated control groups treated with 10 mg/kg meloxicam, 20 mg/kg tramadol, or both intraperitoneally, and four vasectomized mice groups treated with the same analgesic protocol as the control groups. One group of vasectomized mice received both treatments and an additional 10 mg/kg lidocaine at the incision site. We conducted the vasectomy via scrotal approach under isoflurane inhalation anesthesia and performed behavioral tests after full anesthesia recovery. Mice treated with meloxicam demonstrated low ambulation, spontaneous activity, and rearing frequency. Mice treated with tramadol showed spontaneous behavior compared with the saline control. Due to behavior changes demonstrated by meloxicam controls, we were unable to identify whether meloxicam provided adequate analgesia. Vasectomized mice treated with tramadol showed general activity behavior similar to their control but displayed significantly less rearing, suggesting that they were under potential signs of pain or discomfort. In conclusion, the Open Field test and the Elevated Plus Maze can usefully pre-evaluate analgesic protocols to identify possible interference caused by adverse drug effects. For future directions, an appropriate regimen of meloxicam and tramadol for enhancing mice welfare post vasectomy should be better investigated.

Notes on the biological development of the darkling beetle Blaps nefrauensis nefrauensis Seidlitz, 1893 (Coleoptera: Tenebrionidae)

Abstract Several endemic species of Blaps occur in Tunisia, and the species Blaps nefrauensis nefrauensis has been reported in Moulares (urban zone in west-central Tunisia), where it lives and reproduces in home gardens and old buildings. The aim of this work is to study the life cycle of the darkling beetle, considering both field and laboratory rearing conditions. As a result, the beetle species has different developmental stages (egg, larva, prepupa, pupa, and adult) that last about 15 months. Each year during the same period, adults emerge (early summer) and expire (late autumn), larvae hatch (late summer) and pupate (early summer). There is only one generation per year. Females began laying eggs in late July. The eggs were ovoid, white, and about 2.7 mm in length and 1.5 mm in width. Embryogenesis took an average of nine days. The first instar larvae were at initially only 4.5 mm long and ivory white in color. A brief description of the newly egg hatched larva was provided; thus, the nerve fibers innervating the apical setae in the antennae and ligula were detected. Further light microscopic examination of the embryo before hatching from the egg pointed out that the antennal sensilla are protected during the embryogenesis stage.

Resumo Várias espécies endêmicas de Blaps ocorrem na Tunísia, e a espécie Blaps nefrauensis nefrauensis foi relatada em Moulares (zona urbana no centro-oeste da Tunísia), onde vive e se reproduz em jardins domésticos e prédios antigos. O objetivo deste trabalho é estudar o ciclo de vida do besouro escuro, considerando as condições de criação em campo e em laboratório. Como resultado, a espécie de besouro tem diferentes estágios de desenvolvimento (ovo, larva, prepupa, pupa e adulto) que duram cerca de 15 meses. Todos os anos, durante o mesmo período, os adultos emergem (início do verão) e expiram (final do outono), as larvas eclodem (final do verão) e se tornam pupas (início do verão). Existe apenas uma geração por ano. As fêmeas começaram a botar ovos no final de julho. Os ovos eram ovóides, brancos, com cerca de 2,7 mm de comprimento e 1,5 mm de largura. A embriogênese demorou em média nove dias. As larvas de primeiro instar tinham inicialmente apenas 4,5 mm de comprimento e uma cor branca marfim. Foi fornecida uma breve descrição da larva recém-eclodida; assim, as fibras nervosas que inervam as cerdas apicais nas antenas e ligulas foram detectadas. Um exame microscópico de luz posterior do embrião antes da eclosão do ovo mostrou que as sensilas antenais são protegidas durante o estágio de embriogênese.

Notes on the biological development of the darkling beetle Blaps nefrauensis nefrauensis Seidlitz, 1893 (Coleoptera: Tenebrionidae) / Notas sobre o desenvolvimento biológico do besouro escuro Blaps nefrauensis nefrauensis Seidlitz, 1893 (Coleoptera: Tenebrionidae)

Several endemic species of Blaps occur in Tunisia, and the species Blaps nefrauensis nefrauensis has been reported in Moulares (urban zone in west-central Tunisia), where it lives and reproduces in home gardens and old buildings. The aim of this work is to study the life cycle of the darkling beetle, considering both field and laboratory rearing conditions. As a result, the beetle species has different developmental stages (egg, larva, prepupa, pupa, and adult) that last about 15 months. Each year during the same period, adults emerge (early summer) and expire (late autumn), larvae hatch (late summer) and pupate (early summer). There is only one generation per year. Females began laying eggs in late July. The eggs were ovoid, white, and about 2.7 mm in length and 1.5 mm in width. Embryogenesis took an average of nine days. The first instar larvae were at initially only 4.5 mm long and ivory white in color. A brief description of the newly egg hatched larva was provided; thus, the nerve fibers innervating the apical setae in the antennae and ligula were detected. Further light microscopic examination of the embryo before hatching from the egg pointed out that the antennal sensilla are protected during the embryogenesis stage.

Várias espécies endêmicas de Blaps ocorrem na Tunísia, e a espécie Blaps nefrauensis nefrauensis foi relatada em Moulares (zona urbana no centro-oeste da Tunísia), onde vive e se reproduz em jardins domésticos e prédios antigos. O objetivo deste trabalho é estudar o ciclo de vida do besouro escuro, considerando as condições de criação em campo e em laboratório. Como resultado, a espécie de besouro tem diferentes estágios de desenvolvimento (ovo, larva, prepupa, pupa e adulto) que duram cerca de 15 meses. Todos os anos, durante o mesmo período, os adultos emergem (início do verão) e expiram (final do outono), as larvas eclodem (final do verão) e se tornam pupas (início do verão). Existe apenas uma geração por ano. As fêmeas começaram a botar ovos no final de julho. Os ovos eram ovóides, brancos, com cerca de 2,7 mm de comprimento e 1,5 mm de largura. A embriogênese demorou em média nove dias. As larvas de primeiro instar tinham inicialmente apenas 4,5 mm de comprimento e uma cor branca marfim. Foi fornecida uma breve descrição da larva recém-eclodida; assim, as fibras nervosas que inervam as cerdas apicais nas antenas e ligulas foram detectadas. Um exame microscópico de luz posterior do embrião antes da eclosão do ovo mostrou que as sensilas antenais são protegidas durante o estágio de embriogênese.

Notes on the biological development of the darkling beetle Blaps nefrauensis nefrauensis Seidlitz, 1893 (Coleoptera: Tenebrionidae) / Notas sobre o desenvolvimento biológico do besouro escuro Blaps nefrauensis nefrauensis Seidlitz, 1893 (Coleoptera: Tenebrionidae)

Several endemic species of Blaps occur in Tunisia, and the species Blaps nefrauensis nefrauensis has been reported in Moulares (urban zone in west-central Tunisia), where it lives and reproduces in home gardens and old buildings. The aim of this work is to study the life cycle of the darkling beetle, considering both field and laboratory rearing conditions. As a result, the beetle species has different developmental stages (egg, larva, prepupa, pupa, and adult) that last about 15 months. Each year during the same period, adults emerge (early summer) and expire (late autumn), larvae hatch (late summer) and pupate (early summer). There is only one generation per year. Females began laying eggs in late July. The eggs were ovoid, white, and about 2.7 mm in length and 1.5 mm in width. Embryogenesis took an average of nine days. The first instar larvae were at initially only 4.5 mm long and ivory white in color. A brief description of the newly egg hatched larva was provided; thus, the nerve fibers innervating the apical setae in the antennae and ligula were detected. Further light microscopic examination of the embryo before hatching from the egg pointed out that the antennal sensilla are protected during the embryogenesis stage.

Várias espécies endêmicas de Blaps ocorrem na Tunísia, e a espécie Blaps nefrauensis nefrauensis foi relatada em Moulares (zona urbana no centro-oeste da Tunísia), onde vive e se reproduz em jardins domésticos e prédios antigos. O objetivo deste trabalho é estudar o ciclo de vida do besouro escuro, considerando as condições de criação em campo e em laboratório. Como resultado, a espécie de besouro tem diferentes estágios de desenvolvimento (ovo, larva, prepupa, pupa e adulto) que duram cerca de 15 meses. Todos os anos, durante o mesmo período, os adultos emergem (início do verão) e expiram (final do outono), as larvas eclodem (final do verão) e se tornam pupas (início do verão). Existe apenas uma geração por ano. As fêmeas começaram a botar ovos no final de julho. Os ovos eram ovóides, brancos, com cerca de 2,7 mm de comprimento e 1,5 mm de largura. A embriogênese demorou em média nove dias. As larvas de primeiro instar tinham inicialmente apenas 4,5 mm de comprimento e uma cor branca marfim. Foi fornecida uma breve descrição da larva recém-eclodida; assim, as fibras nervosas que inervam as cerdas apicais nas antenas e ligulas foram detectadas. Um exame microscópico de luz posterior do embrião antes da eclosão do ovo mostrou que as sensilas antenais são protegidas durante o estágio de embriogênese.

Biomorphometry of Automeris liberia Cramer (Lepidoptera: Saturniidae) in oil palm in the Amazon / Biomorfometria de Automeris liberia Cramer (Lepidoptera: Saturniidae) em palma de óleo, Amazônia Oriental

Automeris liberia Cramer are found in South America, with documented sightings in Ecuador, Peru, some regions of Mexico and, more recently, the Brazilian Amazon. These moths cause damage to several plant species. We designed an experiment to study the biology and morphometry of A. liberia in the laboratory and provide information for the management of the pest in oil palm cultivation in the Brazilian Amazon. Caterpillars for rearing were collected from commercial areas of oil palm cultivation, where they cause defoliation of the plant. They were fed a natural diet of oil palm leaves of the Tenera variety and observed from second generation onwards. Sex, behavior, posture, mass, body length, wingspan, body diameter, sex ratio, average growth ratio, and antenna were quantified. The embryonic stage lasted 14 days, followed by seven larval instar stages over 36 days. The pupal stage lasted 21 days. Adults had a longevity of 4.5 and 6 days and a total biological cycle of 78.5 and 80 days, for males and females, respectively. The growth ratio was 1.49. The antennae showed sexual dimorphism, with bipectinate morphology in males and filiform in females. In the adult stage, morphological variables were evaluated (body length, thoracic diameter, wingspan, forewing length, forewing height, hindwing length, hindwing height, antenna length, number of antennomeres, and body mass), and they showed significant differences between males and females (Newman-Keuls test, P < 0.05).(AU)

A espécie Automeris liberia Cramer tem ocorrência na América do Sul, com registro no Equador, Peru, algumas regiões no México e, mais recentemente, na Amazônia brasileira, causando danos a várias espécies de plantas. Objetivou-se estudar pioneiramente a biologia e a morfometria de A. liberia em laboratório, visando subsidiar informações para o manejo da praga na cultura da palma de óleo, na Amazônia brasileira. A criação, foi oriunda de lagartas coletadas em áreas comerciais de palma de óleo, onde as quais estavam causando desfolhamentos. Foram alimentadas com dieta natural a base de folhas de palma de óleo da var. Tenera. As observações foram iniciadas a partir da segunda geração. Foram avaliados sexagem, comportamento, posturas, massa, comprimento, envergadura, diâmetro do corpo, razão sexual, razão da média de crescimento e antena. O estágio embrionário durou 14 dias e o larval apresentou sete instares em 36 dias. O estágio pupal foi de 21 dias. Os adultos apresentaram longevidade de 4,5 e 6 dias e ciclo biológico total de 78,5 e 80 dias, para machos e fêmeas, respectivamente. A razão de crescimento foi de 1,49. As antenas apresentaram dimorfismo sexual, sendo do macho tipo bipectinada e da fêmea filiforme. Na fase adulta foram avaliadas variáveis morfológicas (comprimento do corpo, diâmetro do tórax, envergadura, comprimento da asa anterior, altura da asa anterior, comprimento da asa posterior, altura da asa posterior, comprimento da antena, número de antenômeros e massa corpórea) entre machos e fêmeas, as quais apresentaram diferença estatística pelo teste Newman-Keuls (P < 0,05).(AU)

Notes on the biological development of the darkling beetle Blaps nefrauensis nefrauensis Seidlitz, 1893 (Coleoptera: Tenebrionidae) / Notas sobre o desenvolvimento biológico do besouro escuro Blaps nefrauensis nefrauensis Seidlitz, 1893 (Coleoptera: Tenebrionidae)

Several endemic species of Blaps occur in Tunisia, and the species Blaps nefrauensis nefrauensis has been reported in Moulares (urban zone in west-central Tunisia), where it lives and reproduces in home gardens and old buildings. The aim of this work is to study the life cycle of the darkling beetle, considering both field and laboratory rearing conditions. As a result, the beetle species has different developmental stages (egg, larva, prepupa, pupa, and adult) that last about 15 months. Each year during the same period, adults emerge (early summer) and expire (late autumn), larvae hatch (late summer) and pupate (early summer). There is only one generation per year. Females began laying eggs in late July. The eggs were ovoid, white, and about 2.7 mm in length and 1.5 mm in width. Embryogenesis took an average of nine days. The first instar larvae were at initially only 4.5 mm long and ivory white in color. A brief description of the newly egg hatched larva was provided; thus, the nerve fibers innervating the apical setae in the antennae and ligula were detected. Further light microscopic examination of the embryo before hatching from the egg pointed out that the antennal sensilla are protected during the embryogenesis stage.(AU)

Várias espécies endêmicas de Blaps ocorrem na Tunísia, e a espécie Blaps nefrauensis nefrauensis foi relatada em Moulares (zona urbana no centro-oeste da Tunísia), onde vive e se reproduz em jardins domésticos e prédios antigos. O objetivo deste trabalho é estudar o ciclo de vida do besouro escuro, considerando as condições de criação em campo e em laboratório. Como resultado, a espécie de besouro tem diferentes estágios de desenvolvimento (ovo, larva, prepupa, pupa e adulto) que duram cerca de 15 meses. Todos os anos, durante o mesmo período, os adultos emergem (início do verão) e expiram (final do outono), as larvas eclodem (final do verão) e se tornam pupas (início do verão). Existe apenas uma geração por ano. As fêmeas começaram a botar ovos no final de julho. Os ovos eram ovóides, brancos, com cerca de 2,7 mm de comprimento e 1,5 mm de largura. A embriogênese demorou em média nove dias. As larvas de primeiro instar tinham inicialmente apenas 4,5 mm de comprimento e uma cor branca marfim. Foi fornecida uma breve descrição da larva recém-eclodida; assim, as fibras nervosas que inervam as cerdas apicais nas antenas e ligulas foram detectadas. Um exame microscópico de luz posterior do embrião antes da eclosão do ovo mostrou que as sensilas antenais são protegidas durante o estágio de embriogênese.(AU)

Risk factors associated with seroprevalence of Chlamydia abortus in sheep farms in Ceará, Brazil

Background: Chlamydia abortus infections (Chlamydiosis) can cause reproductive problems in sheep, such as abortionsand birth defects, leading to farm productivity loss. The symptoms, which are similar to other reproductive diseases, andthe microbial pathogenesis make the clinical diagnosis difficult. Chlamydia abortus is a zoonotic pathogen, making it apublic health issue because it can infect and induce abortions in humans. This study investigated anti-C. abortus antibodylevels and infection risk factors in sheep in the State of Ceará, Brazil.Materials, Methods & Results: Forty-three properties from 10 municipalities in 4 mesoregions in the State of Ceará, Brazil(Sertões, metropolitan Fortaleza, North Ceará and Northwest Ceará) with sheep, goats, cattle, and horses were visited.Five hundred and four serological samples from sheep were collected and tested for anti-C. abortus antibodies using anEnzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) [IDEXX®, Australia] and all procedures were performed in accordancewith the manufacturer’s instructions at the Clinical Pathology Laboratory of EMBRAPA Goats and Sheep (Sobral, Brazil). Individual questionnaires were completed about sheep breeding practices and to identify possible C. abortus risks.Seropositive results were found in 18.45 % (93/504 individuals) of sheep, and 88.37 % (38/43 properties) of the herds hadat least one seropositive animal. The number of seropositive individuals was significantly different between adults andewes [P < 0.01; Odds Ratio (OR) = 0.510; 95% confidence interval (CI) = 0.306 - 0.850]. Logistic regression modelingidentified a missing health certificate request for newly acquired animals as a chlamydiosis risk factor [P = 0.038; OR =2.672; 95% CI = 1.058 - 6.749].Discussion: The prevalence of anti-C. abortus...

Risk factors associated with seroprevalence of Chlamydia abortus in sheep farms in Ceará, Brazil

Background: Chlamydia abortus infections (Chlamydiosis) can cause reproductive problems in sheep, such as abortionsand birth defects, leading to farm productivity loss. The symptoms, which are similar to other reproductive diseases, andthe microbial pathogenesis make the clinical diagnosis difficult. Chlamydia abortus is a zoonotic pathogen, making it apublic health issue because it can infect and induce abortions in humans. This study investigated anti-C. abortus antibodylevels and infection risk factors in sheep in the State of Ceará, Brazil.Materials, Methods & Results: Forty-three properties from 10 municipalities in 4 mesoregions in the State of Ceará, Brazil(Sertões, metropolitan Fortaleza, North Ceará and Northwest Ceará) with sheep, goats, cattle, and horses were visited.Five hundred and four serological samples from sheep were collected and tested for anti-C. abortus antibodies using anEnzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) [IDEXX®, Australia] and all procedures were performed in accordancewith the manufacturers instructions at the Clinical Pathology Laboratory of EMBRAPA Goats and Sheep (Sobral, Brazil). Individual questionnaires were completed about sheep breeding practices and to identify possible C. abortus risks.Seropositive results were found in 18.45 % (93/504 individuals) of sheep, and 88.37 % (38/43 properties) of the herds hadat least one seropositive animal. The number of seropositive individuals was significantly different between adults andewes [P < 0.01; Odds Ratio (OR) = 0.510; 95% confidence interval (CI) = 0.306 - 0.850]. Logistic regression modelingidentified a missing health certificate request for newly acquired animals as a chlamydiosis risk factor [P = 0.038; OR =2.672; 95% CI = 1.058 - 6.749].Discussion: The prevalence of anti-C. abortus...(AU)

Standard culture of Paratanytarsus grimmii Schneider, 1885 (Diptera: Chironomidae), for its use in toxicity bioassays / Cultura padrão de Paratanytarsus grimmii Schneider, 1885 (Diptera: Chironomidae), para uso em bioensaios de toxicidade

The management and use of native species under laboratory conditions is the main difficult for species proposal for its use in bioassays. The present study showed the results about management under controlled conditions of Paratanytarsus grimmii (Diptera: Chironomidae), that is a parthenogenetic species with wide geographical distribution. It obtained its eggs from a pre Andean river from Araucania region (39° S), and it determined the conditions for larval rearing under artificial food, adults getting (manipulation), eggs (hatching sincronization) and larvae getting after hatching. The P.grimmii life cycle had larvae that late 23 days in get the pupa stage (stage I to IV), the adult within the next 48 hours deposits the eggs that hatched at 72 hours. It stablished laboratory conditions: incubation room temperature, water pH, and artificial feeding, photoperiod and larvae and eggs management techniques. In according to obtained results it managed all life cycles under laboratory conditions that can propose the use of this species as potential biological material for toxicity bioassays.(AU)

O manejo e o uso de espécies nativas em condições de laboratório são as principais dificuldades para a proposta de uso de espécies em bioensaios. O presente estudo mostrou os resultados acerca do manejo sob condições controladas de Paratanytarsus grimmii (Diptera: Chironomidae), espécie partenogenética com ampla distribuição geográfica. Foram obtidos seus ovos de um rio pré-andino da região de Araucanía (39º S) e determinadas as condições para criação de larvas sob alimentação artificial, obtenção de adultos (manipulação), de ovos (sincronização de eclosão) e de larvas após a eclosão. O ciclo de vida de P. grimmii teve larvas que, ao final dos 23 dias, atingiram o estágio de pupa (estágio I a IV). O adulto depositou nas 48 horas seguintes os ovos que eclodiram às 72 horas. Foram estabelecidas condições laboratoriais: temperatura da sala de incubação, pH da água e alimentação artificial, fotoperíodo e técnicas de manejo de larvas e ovos. De acordo com os resultados obtidos, foram gerenciados todos os ciclos de vida em condições de laboratório que podem propor o uso dessa espécie como material biológico potencial para bioensaios de toxicidade.(AU)

A new species of Clinodiplosis Kieffer (Diptera, Cecidomyiidae) associated with Cecropia sp. (Urticaceae) in Brazil

Clinodiplosis cecropiae Proença & Maia a new species of Cecidomyiidae (Insecta: Diptera) is described and illustrated herein (larva, pupal exuviae, male and female). Samples of gall and host plant were collected in Amazon Rainforest areas, in Monte Negro municipality, Rondônia state, Brazil. The galler was obtained by rearing in laboratory and the specimens were mounted on microscope slides. The type material is deposited in the Cecidomyiidae collection of Museu Nacional/Universidade Federal do Rio de Janeiro. The new species induces globoid galls on leaf petiole of Cecropia sp. (Urticaceae). This is the first record of a Clinodiplosis species inducing galls on Urticaceae plants.

A new species of Clinodiplosis Kieffer (Diptera, Cecidomyiidae) associated with Cecropia sp. (Urticaceae) in Brazil

Clinodiplosis cecropiae Proença & Maia a new species of Cecidomyiidae (Insecta: Diptera) is described and illustrated herein (larva, pupal exuviae, male and female). Samples of gall and host plant were collected in Amazon Rainforest areas, in Monte Negro municipality, Rondônia state, Brazil. The galler was obtained by rearing in laboratory and the specimens were mounted on microscope slides. The type material is deposited in the Cecidomyiidae collection of Museu Nacional/Universidade Federal do Rio de Janeiro. The new species induces globoid galls on leaf petiole of Cecropia sp. (Urticaceae). This is the first record of a Clinodiplosis species inducing galls on Urticaceae plants.(AU)

Palmistichus elaeisis (Hymenoptera: Eulophidae) rearing in Tenebrio molitor (Coleoptera: Tenebrionidae) submitted to different diets / Palmistichus elaeisis (Hymenoptera: Eulophidae) criado em Tenebrio molitor (Coleoptera: Tenebrionidae) submetido a diferentes dietas

The ecological, physiological and behavioral processes of insects are linked to their nutrition. The diet of host insects can modify the development of natural enemies and affect their reproductive performance. The objective of this work was to evaluate the development and reproduction of Palmistichus elaeisis Delvare & LaSalle, 1993 (Hymenoptera: Eulophidae) parasitizing pupae of Tenebrio molitor Linnaeus, 1785 (Coleoptera: Tenebrionidae) rearing in different diets. Pupae of T. molitor generated in six different diets (wheat bran, cornmeal, pelleted feed for rabbits, and bran, pelleted or crushed feed for laying hens) were individually placed in plastic pots and exposed to parasitism by six females of P. elaeisis during 72 h. The biological variables of P. elaeisis were observed and bromatological analyses were performed with pupae of T. molitor and the diets used. The percentage of parasitism and emergency was 100% in all treatments. There was no difference in the life cycle, the offspring number and longevity of the parasitoid. Pupae of T. molitor obtained from larvae fed with cornmeal were smaller and generated P. elaeisis offspring with low sex ratio and shorter length of the tibia. The T. molitor diet based on cornmeal was not suitable for the reproduction of P. elaeisis in the laboratory.(AU)

Parte dos processos ecológicos, fisiológicos e comportamentais dos insetos está ligada à sua nutrição. O tipo de dieta pode influenciar o desenvolvimento do inimigo natural e afetar seu desempenho reprodutivo. Objetivou-se neste trabalho avaliar o desenvolvimento e reprodução de Palmistichus elaeisis Delvare & LaSalle, 1993 (Hymenoptera: Eulophidae) parasitando pupas de Tenebrio molitor Linnaeus, 1785 (Coleoptera: Tenebrionidae) criadas em diferentes dietas. Pupas de T. molitor geradas em seis diferentes dietas (farelo de trigo, fubá de milho, ração peletizada para coelhos, ração para aves poedeiras: farelada, peletizada e triturada) foram individualizadas em potes plásticos e expostas ao parasitismo por seis fêmeas de P. elaeisis durante 72 h. Foram observadas as variáveis biológicas de P. elaeisis e realizadas análises bromatológicas com pupas de T. molitor e as dietas utilizadas. A porcentagem de parasitismo e emergência de P. elaeisis foi de 100% em todos os tratamentos. Não houve diferença no ciclo de vida, número da prole e longevidade do parasitoide. Pupas de T. molitor formadas com fubá de milho foram menores e geraram prole de P. elaeisis com menor razão sexual e menor comprimento da tíbia. A dieta para T. molitor à base de fubá de milho não foi adequada para a reprodução de P. elaeisis em laboratório.(AU)

Palmistichus elaeisis (Hymenoptera: Eulophidae) rearing in Tenebrio molitor (Coleoptera: Tenebrionidae) submitted to different diets / Palmistichus elaeisis (Hymenoptera: Eulophidae) criado em Tenebrio molitor (Coleoptera: Tenebrionidae) submetido a diferentes dietas

The ecological, physiological and behavioral processes of insects are linked to their nutrition. The diet of host insects can modify the development of natural enemies and affect their reproductive performance. The objective of this work was to evaluate the development and reproduction of Palmistichus elaeisis Delvare & LaSalle, 1993 (Hymenoptera: Eulophidae) parasitizing pupae of Tenebrio molitor Linnaeus, 1785 (Coleoptera: Tenebrionidae) rearing in different diets. Pupae of T. molitor generated in six different diets (wheat bran, cornmeal, pelleted feed for rabbits, and bran, pelleted or crushed feed for laying hens) were individually placed in plastic pots and exposed to parasitism by six females of P. elaeisis during 72 h. The biological variables of P. elaeisis were observed and bromatological analyses were performed with pupae of T. molitor and the diets used. The percentage of parasitism and emergency was 100% in all treatments. There was no difference in the life cycle, the offspring number and longevity of the parasitoid. Pupae of T. molitor obtained from larvae fed with cornmeal were smaller and generated P. elaeisis offspring with low sex ratio and shorter length of the tibia. The T. molitor diet based on cornmeal was not suitable for the reproduction of P. elaeisis in the laboratory.(AU)

Parte dos processos ecológicos, fisiológicos e comportamentais dos insetos está ligada à sua nutrição. O tipo de dieta pode influenciar o desenvolvimento do inimigo natural e afetar seu desempenho reprodutivo. Objetivou-se neste trabalho avaliar o desenvolvimento e reprodução de Palmistichus elaeisis Delvare & LaSalle, 1993 (Hymenoptera: Eulophidae) parasitando pupas de Tenebrio molitor Linnaeus, 1785 (Coleoptera: Tenebrionidae) criadas em diferentes dietas. Pupas de T. molitor geradas em seis diferentes dietas (farelo de trigo, fubá de milho, ração peletizada para coelhos, ração para aves poedeiras: farelada, peletizada e triturada) foram individualizadas em potes plásticos e expostas ao parasitismo por seis fêmeas de P. elaeisis durante 72 h. Foram observadas as variáveis biológicas de P. elaeisis e realizadas análises bromatológicas com pupas de T. molitor e as dietas utilizadas. A porcentagem de parasitismo e emergência de P. elaeisis foi de 100% em todos os tratamentos. Não houve diferença no ciclo de vida, número da prole e longevidade do parasitoide. Pupas de T. molitor formadas com fubá de milho foram menores e geraram prole de P. elaeisis com menor razão sexual e menor comprimento da tíbia. A dieta para T. molitor à base de fubá de milho não foi adequada para a reprodução de P. elaeisis em laboratório.(AU)

Standard culture of Paratanytarsus grimmii Schneider, 1885 (Diptera: Chironomidae), for its use in toxicity bioassays.

Abstract The management and use of native species under laboratory conditions is the main difficult for species proposal for its use in bioassays. The present study showed the results about management under controlled conditions of Paratanytarsus grimmii (Diptera: Chironomidae), that is a parthenogenetic species with wide geographical distribution. It obtained its eggs from a pre Andean river from Araucania region (39° S), and it determined the conditions for larval rearing under artificial food, adults getting (manipulation), eggs (hatching sincronization) and larvae getting after hatching. The P.grimmii life cycle had larvae that late 23 days in get the pupa stage (stage I to IV), the adult within the next 48 hours deposits the eggs that hatched at 72 hours. It stablished laboratory conditions: incubation room temperature, water pH, and artificial feeding, photoperiod and larvae and eggs management techniques. In according to obtained results it managed all life cycles under laboratory conditions that can propose the use of this species as potential biological material for toxicity bioassays.

Resumo O manejo e o uso de espécies nativas em condições de laboratório são as principais dificuldades para a proposta de uso de espécies em bioensaios. O presente estudo mostrou os resultados acerca do manejo sob condições controladas de Paratanytarsus grimmii (Diptera: Chironomidae), espécie partenogenética com ampla distribuição geográfica. Foram obtidos seus ovos de um rio pré-andino da região de Araucanía (39º S) e determinadas as condições para criação de larvas sob alimentação artificial, obtenção de adultos (manipulação), de ovos (sincronização de eclosão) e de larvas após a eclosão. O ciclo de vida de P. grimmii teve larvas que, ao final dos 23 dias, atingiram o estágio de pupa (estágio I a IV). O adulto depositou nas 48 horas seguintes os ovos que eclodiram às 72 horas. Foram estabelecidas condições laboratoriais: temperatura da sala de incubação, pH da água e alimentação artificial, fotoperíodo e técnicas de manejo de larvas e ovos. De acordo com os resultados obtidos, foram gerenciados todos os ciclos de vida em condições de laboratório que podem propor o uso dessa espécie como material biológico potencial para bioensaios de toxicidade.

Rearing technique and demographic parameters of Tetrastichus giffardianus Silvestre (Hymenoptera: Eulophidae) / Técnica de criação e parâmetros demográficos de Tetrastichus giffardianus Silvestre (Hymenoptera: Eulophidae)

Tetrastichus giffardianus Silvestri (Hymenoptera: Eulophidae) is a gregarious koinobiont endoparasitoid of frugivorous dipterans. In recent years, T. giffardianus has been detected parasitizing Ceratitis capitata (Wiedemann) (Diptera: Tephritidae) in different Brazilian semiarid sites. Thus, T. giffardianus has potential to be used in the biological control of C. capitata in semi-arid conditions. However, one of the factors limiting the use of this parasitoid is the lack of detailed information on rearing methods and bioecological aspects. Thus, the main objectives of this study were to demonstrate a rearing technique for T. giffardianus and to determine its population increase potential in laboratory. For this specimens of T. giffardianus were obtained in the field through of the collection of chestnut fruits (Terminalia catappa L. - Combretaceae) infested with C. capitata. The specimens obtained were used to adapt a rearing methodology for T. giffardianus under laboratory conditions (temperature: 25 ± 2ºC; relative humidity: 60 ± 10%; 12 h photophase). Information on demographic parameters for a T. giffardianus population was obtained using the same methodology. Based on the parameters evaluated, we found that the intrinsic rate of population increase of T. giffardianus was 0.34, the average time of one generation was 19.7 days, the population doubling time was 2.03 days and the finite rate of population increase (λ) was 1.41. The demographic parameters obtained demonstrated that, with the rearing technique used, it is possible to maintain populations of T. giffardianus and enable them to multiply in laboratory.

Tetrastichus giffardianus Silvestri (Hymenoptera: Eulophidae) é um endoparasitoide coinobionte gregário de dípteros frugívoros. Nos últimos anos, T. giffardianus tem sido detectado parasitando Ceratitis capitata (Wiedemann) (Diptera: Tephritidae) em diferentes locais do semiárido brasileiro. Assim, T. giffardianus tem potencial para ser utilizado no controle biológico de C. capitata nas condições do semiárido. Entretanto, um dos fatores limitantes para uso deste parasitoide é a falta de informações detalhadas sobre sua metodologia de criação e seus aspectos bioecológicos. Portanto, o principal objetivo deste estudo foi demonstrar uma técnica de criação para T. giffardianus e determinar seu potencial de crescimento populacional, em laboratório. Para isto, espécimens de T. giffardianus foram obtidos em campo, através da coleta de frutos de castanhola (Terminalia catappa - Combretaceae) infestados com C. capitata. Os exemplares obtidos foram utilizados para adaptar uma metodologia de criação para T. giffardianus em condições de laboratório (temperatura de 25 ± 2ºC, umidade relativa de 60 ± 10% e fotofase de 12 horas). As informações sobre os parâmetros demográficos para uma populacional de T. giffardianus foram obtidas usando a mesma metodologia. Com base nos parâmetros avaliados foi constatado que a taxa intrínseca de aumento populacional de T. giffardianus foi de 0,34, o tempo médio de uma geração foi de 19,7 dias, o tempo de duplicação da população foi de 2,03 dias e a taxa finita de aumento populacional (λ) foi de 1,41. Os parâmetros demográficos obtidos demonstraram que, com a técnica de criação utilizada, é possível manter populações de T. giffardianus e multiplicá-las em laboratório.

Rearing technique and demographic parameters of Tetrastichus giffardianus Silvestre (Hymenoptera: Eulophidae) / Técnica de criação e parâmetros demográficos de Tetrastichus giffardianus Silvestre (Hymenoptera: Eulophidae)

Tetrastichus giffardianus Silvestri (Hymenoptera: Eulophidae) is a gregarious koinobiont endoparasitoid of frugivorous dipterans. In recent years, T. giffardianus has been detected parasitizing Ceratitis capitata (Wiedemann) (Diptera: Tephritidae) in different Brazilian semiarid sites. Thus, T. giffardianus has potential to be used in the biological control of C. capitata in semi-arid conditions. However, one of the factors limiting the use of this parasitoid is the lack of detailed information on rearing methods and bioecological aspects. Thus, the main objectives of this study were to demonstrate a rearing technique for T. giffardianus and to determine its population increase potential in laboratory. For this specimens of T. giffardianus were obtained in the field through of the collection of chestnut fruits (Terminalia catappa L. - Combretaceae) infested with C. capitata. The specimens obtained were used to adapt a rearing methodology for T. giffardianus under laboratory conditions (temperature: 25 ± 2ºC; relative humidity: 60 ± 10%; 12 h photophase). Information on demographic parameters for a T. giffardianus population was obtained using the same methodology. Based on the parameters evaluated, we found that the intrinsic rate of population increase of T. giffardianus was 0.34, the average time of one generation was 19.7 days, the population doubling time was 2.03 days and the finite rate of population increase (λ) was 1.41. The demographic parameters obtained demonstrated that, with the rearing technique used, it is possible to maintain populations of T. giffardianus and enable them to multiply in laboratory.(AU)

Tetrastichus giffardianus Silvestri (Hymenoptera: Eulophidae) é um endoparasitoide coinobionte gregário de dípteros frugívoros. Nos últimos anos, T. giffardianus tem sido detectado parasitando Ceratitis capitata (Wiedemann) (Diptera: Tephritidae) em diferentes locais do semiárido brasileiro. Assim, T. giffardianus tem potencial para ser utilizado no controle biológico de C. capitata nas condições do semiárido. Entretanto, um dos fatores limitantes para uso deste parasitoide é a falta de informações detalhadas sobre sua metodologia de criação e seus aspectos bioecológicos. Portanto, o principal objetivo deste estudo foi demonstrar uma técnica de criação para T. giffardianus e determinar seu potencial de crescimento populacional, em laboratório. Para isto, espécimens de T. giffardianus foram obtidos em campo, através da coleta de frutos de castanhola (Terminalia catappa - Combretaceae) infestados com C. capitata. Os exemplares obtidos foram utilizados para adaptar uma metodologia de criação para T. giffardianus em condições de laboratório (temperatura de 25 ± 2ºC, umidade relativa de 60 ± 10% e fotofase de 12 horas). As informações sobre os parâmetros demográficos para uma populacional de T. giffardianus foram obtidas usando a mesma metodologia. Com base nos parâmetros avaliados foi constatado que a taxa intrínseca de aumento populacional de T. giffardianus foi de 0,34, o tempo médio de uma geração foi de 19,7 dias, o tempo de duplicação da população foi de 2,03 dias e a taxa finita de aumento populacional (λ) foi de 1,41. Os parâmetros demográficos obtidos demonstraram que, com a técnica de criação utilizada, é possível manter populações de T. giffardianus e multiplicá-las em laboratório.(AU)

Rearing two fruit flies pests on artificial diet with variable pH / Criação de duas moscas-das-frutas praga em dieta artificial com variação de pH

Fruit flies (Diptera: Tephritidae) are considered the main fruit pests worldwide. In Brazil, two species are predominant: the South American fruit fly, Anastrepha fraterculus and the Mediterranean fruit fly, Ceratitis capitata. In this study, we evaluated the effect of artificial diets with variable pH in their larval development and adult performance. The experiments were carried out in the laboratory at 25 ± 2 °C, 70 ± 10% RH and 12:12h (L:D) photoperiod. Semisolid diets with pH values of 6.0, 5.0, 4.0, 3.0, 2.0, 1.5, and 1.0, adjusted by adding hydrochloric acid were tested. Results indicated that the diet with pH 6.0 did not support larval development of both species of fruit fly. Diets with greater acidic pH values did not allow egg, larvae or pupae development and adult reproduction of A. fraterculus. For C. capitata , the pH of artificial diet exerts greater influence compared to A. fraterculus on the duration and viability of the larval stage, number of pupae, sex ratio and longevity of males.(AU)

As moscas-das-frutas (Diptera: Tephritidae) são consideradas as principais pragas da fruticultura mundial. No Brasil, duas espécies são predomindantes: a mosca-das-frutas Sul-americana, Anastrepha fraterculus e a mosca-do-Mediterrâneo, Ceratitis capitata. Neste estudo avaliamos o efeito de dietas artificiais com pH variável no seu desenvolvimento larval e performance de adultos. Os experimentos foram realizados em laboratório a 25 ± 2 °C, 70 ± 10% UR e fotoperíodo de 12:12 horas. Foram testadas dietas semi-sólidas com valores de pH de 6,0; 5,0; 4,0; 3,0; 2,0; 1,5 e 1,0, ajustados pela adição de ácido clorídrico. Os resultados indicaram que a dieta com pH 6,0 não suportou o desenvolvimento larval de ambas as espécies de mosca-das-frutas. As dietas com pH ácido não permitiram o desenvolvimento de ovos, larvas ou pupas e a reprodução de adultos de A. fraterculus. Para C. capitata o pH da dieta artificial exerceu maior influência do que para A. fraterculus nos parâmetros de duração e viabilidade do estágio larval, número de pupas, razão sexual e longevidade de machos.(AU)

Experimental infection by Anaplasma marginale in buffaloes and cattle: clinical, hematological, molecular and pathological aspects

ABSTRACT: The study aimed to evaluate and compare the clinical, laboratory and pathological aspects of buffalo and bovine experimentally infected with AmRio 2 strain of Anaplasma marginale. Four Murrah buffaloes and four crossbred cattle were used in the experiment, which two animals of each species were splenectomized. Strain AmRio 2 of A. marginale was inoculated in all experimental animals. Clinical exams, Packed Cell Volume (PCV), blood counts, blood smears, rickettsemia, necropsy and histopathology were performed in all cases. Semi-Nested-PCR (snPCR) for the msp5 and snPCR for the msp1 target gene for identification of A. marginale in blood samples from animals was done. From positive samples for msp1 snPCR, samples were analyzed for the amino acid sequences of this gene. Two splenectomized cattle presented apathy, pale mucous membranes, jaundice, hyperthermia, and severe anemia. The remaining experimental animals did not show clinical signs. The rickettsemia in all animals was less than 1%. The mean PCV of the splenectomized cattle was below 20% at two-time points after infection. On the blood count, the main changes were observed in splenectomized calves and were characterized by a decrease in red blood cells, hemoglobin, PCV and platelets (p 0.05). All animals presented leukocyte elevation by increased lymphocytes, however, with no significant difference. The average prepatent period was two days in all the animals. The average incubation period in cattle that became ill was 25.5 days, and death occurred, on average, 63 days after inoculation of the strain. The necropsy findings were characterized by pale carcass, ascites, enlarged liver, distended gallbladder, and thick bile. Histopathological findings included infiltration of macrophages and lymphocytes in various organs, hepatic sinusoidal dilatation, and necrosis of the large intestine. In snPCR for the msp5 gene, 100% of the animals were positive in at least one evaluation. And in the snPCR for the infection of the msp1 target gene was also found in all animals in at least one sample evaluated. However, sequencing revealed only five animals, including the bovine which died, with a similarity of the amino acid sequences with AmRio 2 strain of A. marginale. It is concluded that the splenectomized cattle died due to anaplasmosis caused by the inoculated strain and the buffalo were more resistant compared to cattle. Buffaloes can be an alternative to cattle rearing in areas with a high occurrence of clinical cases of anaplasmosis.

RESUMO: O estudo teve como objetivo avaliar e comparar os aspectos clínicos, laboratoriais e patológicos de búfalos e bovinos infectados experimentalmente com estirpe AmRio 2 de Anaplasma marginale. Para isso, foram utilizados quatro bubalinos Murrah e quatro bovinos mestiços, sendo dois animais de cada espécie, esplenectomizados. Estirpe AmRio 2 de A. marginale foi inoculada em todos os animais. Foram realizados exames clínicos, hematócrito, hemograma, esfregaço sanguíneo com avaliação de riquetsemia, necropsia e histopatologia, além de, Semi-Nested-PCR (snPCR) para o gene alvo msp5 e snPCR para o gene alvo msp1 para identificação de A. marginale nas amostras de sangue dos ruminantes. A partir das amostras positivas na snPCR msp1, foram selecionadas amostras para análise das sequências de aminoácidos deste gene. Dois bovinos esplenectomizados apresentaram apatia, mucosas pálidas, icterícia, hipertermia e anemia severa. O restante dos animais não apresentou sintomatologia clínica. A riquetsemia em todos os animais foi menor que 1%. A média do hematócrito dos bovinos esplenectomizados esteve abaixo de 20% em dois momentos após infecção. Ao hemograma, as principais alterações observadas foram nos bovinos esplenectomizados e caracterizaram-se por redução de hemácias, hemoglobina, hematócrito e plaquetas (p 0,05). Todos os animais apresentaram elevação de leucócitos por aumento de linfócitos, porém, sem diferença significativa. O período pré-patente médio foi de dois dias em todos os animais. O período de incubação médio nos bovinos que adoeceram foi de 25,5 dias e estes morreram em média 63 dias após inoculação da estirpe. Os achados de necropsia caracterizaram-se por carcaça pálida, ascite, aumento de volume do fígado, vesícula biliar distendida e bile espessa. À histopatologia, verificou-se infiltração de macrófagos e linfócitos em diversos órgãos, dilatação dos sinusoides hepáticos e necrose do intestino grosso. A snPCR para o gene msp5, revelou 100% dos animais positivos em pelo menos um momento de avaliação. E na snPCR para o gene alvo msp1 também verificou-se infecção em todos os animais em pelo menos uma amostra avaliada. Entretanto, o sequenciamento revelou apenas cinco animais, incluindo os bovinos que morreram, com similaridade das sequências de aminoácidos com estirpe AmRio 2 de A. marginale. Conclui-se que os bovinos esplenectomizados morreram em virtude de anaplasmose provocada pela estirpe inoculada e os bubalinos foram mais resistentes em comparação aos bovinos. Finalmente, os búfalos podem ser uma alternativa à criação de bovinos em áreas com alta ocorrência de casos clínicos de anaplasmose.