Xenarthras: topografia intestinal e relações vasculares com a serosa / [Xenarthras: intestinal topography and vascular relationships with serosa]

Xenarthras (Mammalia, Dasypodidae) das espécies Dasypus novemcinctus e Euphractus sexcinctus tiveram sua anatomia científica estudada em relação à topografia dos intestinos delgado e grosso, suas relações peritoniais, morfologia externa e irrigação. Medidas dos diferentes segmentos intestinais e do número de vasos a eles destinados foram tomadas para fins comparativos. O método previu: fixação (formol 7%); injeção de látex; dissecação e fotodocumentação. Espacialmente, embora os intestinos sejam fixados por dupla membrana peritoneal, como em outros vertebrados, nestes a serosa conectou o duodeno, o jejuno, o íleo e os cólons em um único ligamento fixado no dorso do animal. Duodeno e pâncreas, intraperitoniais, como o reto, fixaram-se nas pelves maior e menor, respectivamente e dorsalmente. Vasos derivados do tronco celíaco mesentérico e da aorta percorreram o interior do mesoduodeno, do mesentério comum, do mesocólon e do mesorreto, estando estes, ao longo de seus trajetos, relacionados às cadeias linfonodulares intestinais. O modelo de rotação peritoneal, a morfologia externa, bem como o modelo de vascularização intestinal, foram interpretados como basais, diferindo dos vertebrados recentes, conforme o suporte literário.(AU)

Xenarthras (Mammalia, Dasypodidae) of the species Dasypus novemcinctus and Euphractus sexcinctus had their scientific anatomy studied in relation to the topography of the small and large intestines, their peritoneal relationships, external morphology and irrigation. Measurements of the different intestinal segments and the number of vessels destined for them were taken for comparative purposes. The method predicted: fixation (7% formaldehyde); latex injection; dissection and photo documentation. Spatially, the intestines, although fixed by a double peritoneal membrane, as in other vertebrates, in these, the serosa connected the duodenum, jejunum, ileum, and the colon in a single ligament fixed to the animal's back. Duodenum and pancreas, intraperitoneal, like the rectum, were fixed in the major and minor pelvis respectively and dorsally. Vessels derived from the mesenteric celiac trunk and the aorta traveled through the interior of the mesoduodenum, common mesentery, mesocolon and mesoride, being related to the lymph node chains along their pathways. The peritoneal rotation model, the external morphology as well as the model of intestinal vascularization were interpreted as basal, differing from recent vertebrates, according to literary support.(AU)

Membrana de látex natural de Hevea brasiliensis auxilia no processo de reparação tecidual em bovinos / Natural latex rubber from Hevea brasiliensis aids tissue repair of bovine

Feridas cutâneas em bovinos são um constante desafio clínico cirúrgico por desencadearem perdas econômicas bastante significativas. O látex proveniente da seiva da seringueira (Hevea brasiliensis) apresenta potencial terapêutico para incrementar o processo de reparação tecidual. Portanto, pretendeu-se com esse estudo avaliar o tipo de reação tecidual e os possíveis mecanismos de angiogênese desencadeados pelo implante de uma membrana de látex natural em bovinos. Para tal, foram utilizados seis bovinos da raça Nelore, submetidos ao implante subcutâneo experimental de três fragmentos de membranas de látex natural. Foram coletadas amostras de tecido e da membrana aos 15, 30 e 45 dias após a implantação, para avaliações histológicas, ultraestruturais por microscopia eletrônica de varredura e imunoistoquímicas com anticorpos antimarcador de macrófagos (MAC), CYR 61 e VEGF. O implante de látex proporcionou aumento da angiogênese e reparação tecidual em bovinos, não mediada pela expressão do VEGF e CYR 61.(AU)

Cattle wounds are a constant surgical and clinical challenge, leading to important economical losses. The latex from the sap of the rubber tree (Hevea brasiliensis) has therapeutic potential to enhance tissue repair process. Therefore, we evaluated the type of tissue reaction and possible mechanisms of angiogenesis triggered by implanting natural latex rubber in bovine species. Six Nelore bovines were subjected to subcutaneous experimental implant of three fragments of natural rubber latex membranes. Tissue and rubber membrane samples were harvested at 15, 30 and 45 days implantation for histology, scanning electron microscopy and immunohistochemical evaluation with anti macrophage marker (MAC), anti CYR 61, anti VEGF antibodies. The latex membrane estimulates tissue reaction and repair and significant angiogenesis stimuli without activating CYR 61 and VEGF pathways.(AU)

Membrana de látex natural de Hevea brasiliensis auxilia no processo de reparação tecidual em bovinos / Natural latex rubber from Hevea brasiliensis aids tissue repair of bovine

Feridas cutâneas em bovinos são um constante desafio clínico cirúrgico por desencadearem perdas econômicas bastante significativas. O látex proveniente da seiva da seringueira (Hevea brasiliensis) apresenta potencial terapêutico para incrementar o processo de reparação tecidual. Portanto, pretendeu-se com esse estudo avaliar o tipo de reação tecidual e os possíveis mecanismos de angiogênese desencadeados pelo implante de uma membrana de látex natural em bovinos. Para tal, foram utilizados seis bovinos da raça Nelore, submetidos ao implante subcutâneo experimental de três fragmentos de membranas de látex natural. Foram coletadas amostras de tecido e da membrana aos 15, 30 e 45 dias após a implantação, para avaliações histológicas, ultraestruturais por microscopia eletrônica de varredura e imunoistoquímicas com anticorpos antimarcador de macrófagos (MAC), CYR 61 e VEGF. O implante de látex proporcionou aumento da angiogênese e reparação tecidual em bovinos, não mediada pela expressão do VEGF e CYR 61.(AU)

Cattle wounds are a constant surgical and clinical challenge, leading to important economical losses. The latex from the sap of the rubber tree (Hevea brasiliensis) has therapeutic potential to enhance tissue repair process. Therefore, we evaluated the type of tissue reaction and possible mechanisms of angiogenesis triggered by implanting natural latex rubber in bovine species. Six Nelore bovines were subjected to subcutaneous experimental implant of three fragments of natural rubber latex membranes. Tissue and rubber membrane samples were harvested at 15, 30 and 45 days implantation for histology, scanning electron microscopy and immunohistochemical evaluation with anti macrophage marker (MAC), anti CYR 61, anti VEGF antibodies. The latex membrane estimulates tissue reaction and repair and significant angiogenesis stimuli without activating CYR 61 and VEGF pathways.(AU)

Estudo de biocompatibilidade da membrana à base de polissacarídeo de Anacardium occidentale L. e álcool polivinílico após implante subcutâneo em ratos

A busca por novos biomateriais que auxiliem a cicatrização é desejável para potencializar o tratamento. Membranas poliméricas são uma opção viável e sustentável para a indústria biotecnológica, sob o ponto de vista econômico e ambiental. Neste trabalho, avaliamos a resposta e tolerância do tecido à implantação de membrana polimérica, preparada com o polissacarídeo extraído da goma do Anacardium occidentale L. (CGP) associado a poli (álcool vinílico), PVA. O objetivo desta pesquisa foi caracterizar in vivo a biocompatibilidade da membrana CGP/PVA. Para tal, foram utilizados 36 ratos, machos, adultos, da linhagem wistar distribuídos em três tempos experimentais: 15, 30 e 60 dias. Foi realizado implante dos materiais teste na região dorsal, sendo grupo membrana (GM) animais submetidos ao procedimento cirúrgico seguido da implantação da membrana de CGP/PVA, grupo SHAM (GSHAM), procedimento falso cirúrgico usado para avaliar o impacto do procedimento no tecido envolvido, não sofrendo, contudo, implantação de membranas, onde GM e GSHAM realizados no mesmo animal. No grupo látex (GL) os animais foram submetidos a implantação da membrana de látex, utilizada como controle por promover resposta adequadamente positiva no sistema de teste de incompatibilidade do biomaterial. Necropsias excisionais foram coletadas ao final de cada período experimental e processadas histologicamente para análise da interação material-tecido hospedeiro, seguindo critérios de avaliação da norma ISO 10993-6. Os dados obtidos do grupo GM foram comparados aos grupos GL (controle positivo) e GSHAM (controle negativo). Após 15, 30 e 60 dias a membrana CGP/PVA apresentou moderada reação tecidual, com padrão de irritação não irritante, capsula fibrosa mais fina e menor quantidade de colágeno em relação ao GL, aos 30 e 60 dias apresentou quantidade semelhante de mastócitos a observada no grupo GSHAM. Os dados obtidos demonstram que a membrana CGP/PVA apresentou biocompatibilidade de acordo com a norma ISO10993-6.

The search for new biomaterials that aid healing is desirable to enhance treatment. Polymer membranes are a viable and sustainable option for the biotechnological industry, from an economic and environmental point of view. In this work, we evaluated the tissue response and tolerance to polymer membrane implantation, prepared with polysaccharide extracted from anacardium occidentale L. (CGP) gum associated with poly (vinyl alcohol), PVA. The objective of this research was to characterize in vivo the biocompatibility and biodegradability of CGP/PVA membrane. For this, 36 male, adult wistar rats were used, distributed in three experimental times: 15, 30 and 60 days. The test materials were implanted in the dorsal region, being membrane group (GM) animals submitted to the surgical procedure followed by the implantation of the CGP/PVA membrane, SHAM group (GSHAM), false surgical procedure used to evaluate the impact of the procedure on the tissue involved, not suffering, however, membrane implantation, where GM and GSHAM performed in the same animal. In the latex (GL) group the animals were submitted to latex membrane implantation, used as control for promoting adequately positive response in the biomaterial incompatibility test system. Excisional necropsies were collected at the end of each experimental period and histologically processed for analysis of the host material-tissue interaction, following criteria for evaluation of ISO 10993-6. The data obtained from the GM group were compared to the GL (positive control) and GSHAM (negative control) groups. After 15, 30 and 60 days the CGP/PVA membrane presented moderate tissue reaction, with non-irritating irritation pattern, thinner fibrous capsule and lower amount of collagen in relation to GL, at 30 and 60 days presented similar amount of mast cells to that observed in the GSHAM group. The data obtained show that the CGP/PVA membrane presented biocompatibility according to ISO10993-6.

Angiogenic activity of latex from Euphorbia tirucalliLinnaeus 1753 (Plantae, Euphorbiaceae) / Atividade angiogênica do látex da Euphorbia tirucalliLinnaeus 1753 (Plantae, Euphorbiaceae)

To assess the pro-angiogenic activity of Euphorbia tirucalli, commonly known as “avelós” plant, we performed a series of tests by applying an aqueous E. tirucalli latex solution (10 mg/mL) to the chorioallantoic membranes (CAMs) of 80 fertilized chicken eggs incubated in a temperature- and humidity-controlled automatic incubator. The results indicated that the aqueous latex solution increased vascular network formation compared to that with the negative control (p < 0.05) and the inhibitor control (p < 0.05). This suggests that under the experimental conditions tested, the aqueous latex solution induced an inflammatory response leading to neoangiogenesis.(AU)

Com o objetivo de analisar a atividade angiogênica apresentada pela Euphorbia tirucalli, popularmente conhecida comumente como “avelós”, foram realizados ensaios utilizando solução aquosa de látex na concentração de 10 mg/ml, aplicada em membrana corioalantóide (MCA) de 80 ovos férteis de galinha, incubado em estufa automática com temperatura e umidade controladas. Os resultados apontaram que a ação da solução aquosa provocou aumento da percentagem da rede vascular formada em relação aos controles negativo (p<0,05) e inibidor (p<0,05), indicando que nas condições deste experimento, foi responsável pela ativação da resposta inflamatória e crescimento de novos vasos sanguíneos.(AU)

Aplicação da membrana de látex natural e do extrato da pele de rã (Lithobates catesbiana) em feridas cirúrgicas cutâneas de ratos Wistar / Application of natural latex membrane and extract of frog skin (Lithobates catesbiana) (Shaw, 1802) in cutaneous surgical wounds of Wistar rats

Implantou-se a membrana de látex natural e o extrato da pele de rã individualmente e em conjunto em feridas cutâneas de ratos com o intuito de se avaliar o processo de reparação tecidual e possíveis complicações. Utilizou-se 60 ratos da linhagem Wistar divididos em grupos experimentais: grupo controle (GC), grupo membrana de látex (GM), grupo óleo do extrato da pele de rã (GO) e grupo membrana de látex e óleo de rã (GMO), cada um com 15 animais. Aos três, cinco, sete, 14 e 21 dias de pós-operatório, foi realizada eutanásia dos animais para avaliações macroscópicas e histológicas da região lesionada. Nas feridas dos animais do GM e do GC a cicatrização ocorreu mais cedo, no último tempo de avaliação o sinal de lesão era mínimo, já no GMO, a cicatrização não foi completa e no GO a ferida teve o pior resultado, com presença de crosta no 21º dia. Foram observadas, à microscopia de luz, células normais envolvidas no processo de reparação tecidual e formação de neovasos em todos os grupos.  Conclui-se que em todos os grupos não houve rejeição dos biomateriais testados, todavia o grupo GM proporcionou melhor cicatrização com menos efeitos adversos quando comparada aos demais grupos testados.(AU)

In this study, the membrane of the natural latex and extract of the skin frog, isolated and together, where implanted to replacea cutaneous in the mice, with purpose for evaluating the tissue repair process and possible complication. Sixty Wistar rats eredivided in four experimental groups: control group (GC), membrane of the latex group (GM), oil of the frog group (GO) and groupmembrane of latex with oil of the frog group (GMO), each one with 15 animals. The animals were euthanized at three, five, seven,14 and 21 days post-operative, followed by macroscopic and microscopic evaluations of the area of the lesion. In the wounds ofthe GM and GC, healing occurred earlier, in the latter evaluation time the signal was minimal injury, in the GMO healing was notcomplete and the wound GO had the worst outcome with presence of crust on the 21st day. There were observed by microscopic,normal cells involved in the tissue repair process and neovascularization in all groups. We conclude that in all groups there wasno rejection of the biomaterials tested, however the GM group gave better healing with fewer adverse effects when compared to the other groups tested.(AU)

Aplicação da membrana de látex natural e do extrato da pele de rã (Lithobates catesbiana) em feridas cirúrgicas cutâneas de ratos Wistar / Application of natural latex membrane and extract of frog skin (Lithobates catesbiana) (Shaw, 1802) in cutaneous surgical wounds of Wistar rats

Implantou-se a membrana de látex natural e o extrato da pele de rã individualmente e em conjunto em feridas cutâneas de ratos com o intuito de se avaliar o processo de reparação tecidual e possíveis complicações. Utilizou-se 60 ratos da linhagem Wistar divididos em grupos experimentais: grupo controle (GC), grupo membrana de látex (GM), grupo óleo do extrato da pele de rã (GO) e grupo membrana de látex e óleo de rã (GMO), cada um com 15 animais. Aos três, cinco, sete, 14 e 21 dias de pós-operatório, foi realizada eutanásia dos animais para avaliações macroscópicas e histológicas da região lesionada. Nas feridas dos animais do GM e do GC a cicatrização ocorreu mais cedo, no último tempo de avaliação o sinal de lesão era mínimo, já no GMO, a cicatrização não foi completa e no GO a ferida teve o pior resultado, com presença de crosta no 21º dia. Foram observadas, à microscopia de luz, células normais envolvidas no processo de reparação tecidual e formação de neovasos em todos os grupos.  Conclui-se que em todos os grupos não houve rejeição dos biomateriais testados, todavia o grupo GM proporcionou melhor cicatrização com menos efeitos adversos quando comparada aos demais grupos testados.

In this study, the membrane of the natural latex and extract of the skin frog, isolated and together, where implanted to replacea cutaneous in the mice, with purpose for evaluating the tissue repair process and possible complication. Sixty Wistar rats eredivided in four experimental groups: control group (GC), membrane of the latex group (GM), oil of the frog group (GO) and groupmembrane of latex with oil of the frog group (GMO), each one with 15 animals. The animals were euthanized at three, five, seven,14 and 21 days post-operative, followed by macroscopic and microscopic evaluations of the area of the lesion. In the wounds ofthe GM and GC, healing occurred earlier, in the latter evaluation time the signal was minimal injury, in the GMO healing was notcomplete and the wound GO had the worst outcome with presence of crust on the 21st day. There were observed by microscopic,normal cells involved in the tissue repair process and neovascularization in all groups. We conclude that in all groups there wasno rejection of the biomaterials tested, however the GM group gave better healing with fewer adverse effects when compared to the other groups tested.

Development and assessment of a latex agglutination test based on recombinant MSP5 to detect antibodies against Anaplasma marginale in cattle

The recombinant protein MSP5 has been established as an important antigen for serological diagnosis of Anaplasma marginale by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). However, due to the high cost of specialized equipment, this technique is not accessible to all laboratories, especially in developing countries in areas where the disease is endemic. The present study describes the standardization of a latex agglutination test (LAT) to detect antibodies against A. marginale based on recombinant MSP5. Compared with indirect enzyme-linked immunosorbent assay (iELISA), the relative sensitivity and specificity of the LAT were 95.21% and 91.86% respectively, with an almost perfect agreement between tests (kappa index = 0.863). These results can be considered important for the serological diagnosis of A. marginale, as they indicate that the test represents a rapid and low cost alternative to ELISA.(AU)

LÁTEX DE Synadenium grantii HOOK F. (EUPHORBIACEAE): CITOTOXICIDADE SOBRE CÉLULAS DE CARCINOMA PROSTÁTICO CANINO E AÇÃO ANTIANGIOGÊNICA EM OVOS EMBRIONADOS DE GALINHA

O carcinoma prostático (CP) é a neoplasia maligna que afeta a próstata de machos de diferentes espécies, a exemplo da canina e humana. No caso do cão possui comportamento agressivo, ocorrência espontânea e apresentação em estágio avançado da doença. A carcinogênese é um processo complexo em que se estuda e avalia o desenvolvimento das neoplasias, entendimento e assim ao tratamento. Atualmente, a pesquisa por novos agentes terapêuticos contra o câncer tem sido constante. Nesse sentido, plantas da família Euphorbiaceae são frequentemente utilizadas na medicina popular no combate às neoplasias, porém, com escassa validação científica. A espécie Synadenium grantii (HOOK F.), pertencente à família Euphorbiaceae, especialmente seu látex diluído em água, é empiricamente utilizado para o tratamento de doenças neoplásicas, embora ações citotóxicas in vitro e antitumoral in vivo sejam relatadas. Dessa forma, este estudo teve por objetivo realizar a caracterização físico- química do látex de S. grantii colhido de plantas provenientes do estado de Goiás e investigar no látex compostos ativos a partir da técnica de espectrofotometria de massas de alta resolução (EMAR). Somado a isso, avaliar sua ação citotóxica in vitro (ensaio de viabilidade celular), utilizando diferentes concentrações (0,75;1;1,5;3 e 6 mg/ml), em cultivo celular de duas linhagens primárias de carcinoma prostático canino (CP1 e CP2), aos tempos de 24, 48 e 72 horas (G24, G48 e G72); e realizar teste in vivo em membrana corioalantoide de embrião de galinha (MCA) para avaliar quanto ao potencial efeito antiangiogênico do látex de S. grantii. No teste físico-químico o látex não apresentou compostos fenólicos, mas alcaloides foram detectados. No EMAR foram identificados quatro fragmentos de ésteres de forbol. Na linhagem CP2 o látex promoveu efeito citotóxico, eliminando 50% das células neoplásicas na concentração de 6 mg/ml, ao tempo de 24 horas, e de 3 mg/ml, ao tempo de 72 horas. Ainda, sobre as células de CP2 foi observado efeito dose-dependente com a alíquota de 1 mg/ml. No ensaio de MCA foi constatado efeito antiangiogênico. Conclui-se que o látex de S. grantii possui ésteres de forbol em sua composição, bem como a solução aquosa do mesmo látex possui efeito citotóxico in vitro sobre células de CP canino metastático e efeito dose dependente in vivo sobre a angiogênese em MCA de ovos embrionados de galinha, com ação angiogênica e antiangiogênica à menor e maior concentração testada, respectivamente. Avaliações adicionais do látex de S. grantii são necessárias para averiguar outros efeitos biológicos, assim como identificar os componentes bioativos e seus mecanismos de ação.

Prostate carcinoma (PC) is the malignant neoplasm that affects the prostate of males of different species, such as canine and human. In the case of the dog it has aggressive behavior, spontaneous occurrence and presentation at an advanced stage of the disease. Carcinogenesis is a complex process in which the development of neoplasia is studied and evaluated, as well as its heterogeneity, establishing itself as essential to its understanding and thus to the treatment. Nowadays the research for new cancer therapy agents has been ongoing. In this sense, plants of the Euphorbiaceae family have a notable participation in folk medicine in the fight against neoplasia, but with little scientific basis. Synadenium grantii (HOOK F.) is a species belonging to the family Euphorbiaceae and its latex diluted in water is empirically used for the treatment of neoplastic diseases, although its cytotoxic actions in vitro and antitumor in vivo are reported. The aim of this study was to perform the physico-chemical characterization of latex of Synadenium grantii harvested in the state of Goiás and investigate active compounds with high resolution mass spectrometry (HRMS). Add to that, to evaluate its in vitro cytotoxic action (cellular viability assay) using different concentrations (0.75, 1, 1 , 5, 3 and 6 mg / ml), in cell culture of two different cell lineages of primary canine prostatic cell carcinoma (PC1 and PC2), at 24, 48 and 72 hours (G24, G48, and G72), and perform an in vivo essay in chorioallantoic membrane assay (CAM assay) to access its antiangiogenic activity . In the physical-chemical test the latex showed alkaloid compounds, but not phenolic hydroxyls. At HRMS four fragments of phorbol ester were identified. In the CP2 line the latex promoted a cytotoxic effect, eliminating 50% of the cells at doses of 6 mg / ml at 24 hours and 3 mg / ml at 72 hours. Also, in CP2, a dose-dependent effect was observed with the 1 mg / ml aliquot. At CAM assay an antiangiogenic effect was observed. It is concluded that S. grantii latex has phorbol esters on its composition, as well its aqueous solution has a cytotoxic effect on metastatic canine PC cells and a dose-dependent effect in vivo on angiogenesis at CAM assay, with angiogenic and antiangiogenic action at lower and higher concentration tested, respectively. New evaluations of S. grantii latex are necessary to investigate other possible biological effects, as well as the identification of its bioactive components and it´s mechanism of action.

Avaliação macroscópica e microscópica de implante de Biomembrana em estômago de coelhos (Oryctolagus cuniculus) / Macroscopic and microscopic evaluation biomembrane implant in the stomach of rabbits (Oryctolagus cuniculus)

Neste estudo foi implantado um retalho de biomembrana de látex natural em substituição a um fragmento da parede de estômago de coelhos albinos, raça Nova Zelândia, adultos, machos não castrados (n=12), com o intuito de avaliar o processo de reparação tecidual no que se refere à biocompatibilidade, à capacidade de reparação tecidual e a possíveis complicações. Aos 15, 30 e 60 dias de pós-operatório, os animais foram sacrificados, mediante o emprego de tiopental sódico (200mg kg-1), para posterior avaliação macroscópica e análise histopatológica da interface do implante com o tecido nativo. Macroscopicamente, aos 15, 30 e 60 dias de pós-operatório observou-se presença de aderências na face serosa. Aos 60 dias de pós-operatório, em todos os animais avaliados, a biomembrana não foi encontrada. Sob microscopia de luz, aos 15 e 30 dias, verificaram-se descontinuidade das camadas muscular e mucosa, presença de infiltrado inflamatório polimorfonuclear. Foram visualizados vasos sanguíneos e fibras musculares. Aos 60 dias, as camadas mucosa, muscular estavam completamente reconstituídas. O implante foi biocompatível e forneceu arcabouço para orientação e desenvolvimento das camadas teciduais do estômago, mediante processos de reparação, restabelecendo a estrutura do órgão.(AU)

In this study, biomembrane of natural latex was utilized to replace a section of the stomach wall of New Zealand rabbits, adult and non-castrated males (n=12), in order to evaluate the tissue repair process in regards to its biocompatility, scar formation ability and possible complications. The animals were euthanized at fifteen, 30 and 60 days post operation, by use of sodium thiopental (200mg kg-1), followed by macroscopic and histopathological analysis of the implant interface with the native tissue. Macroscopically, at fifteen, 30, and 60 days post operation adherence was observed in the serosal wall. At 60 days post operation, the biomembrane is not in the stomach. Under light microscopy, at fifteen and 30 days, discontinuity of muscle layer and mucosa layer, and presence of polimorfonuclear population of inflammatory cells was observed. New vessels and muscle fibers were observed. At 60 days, the mucosa and muscle layers were complete reconstituted. The implants were biocompatible and had provided the mainframe for orientation and development of the tissue layers through repairing processes, thus reestablishing the organ structure.(AU)

TRAUMA RAQUIMEDULAR: AVALIAÇÃO DO POTENCIAL NEUROREGENERADOR E NEUROPROTETOR DA FRAÇÃO PROTEICA EXTRAÍDA DO LÁTEX

A lesão medular não é um evento incomum na medicina humana e veterinária e resulta em disfunções neurológicas de graus variados. Apesar dos esforços no tratamento, lesões medulares frequentemente causam sequelas permanentes, desde déficit proprioceptivo isolado até paralisia completa de membros. A membrana confeccionada à base de látex natural extraído da seringueira Hevea brasiliensis tem sido utilizada com sucesso para regeneração de tecidos, e seu potencial regenerador foi reconhecido como sendo de uma fração proteica conhecida como proteína P1. Este novo biomaterial foi eficaz em vários testes de regeneração em animais de experimentação e humanos, e, ainda que tenha mostrado potencial regenerador em teste de lesão de nervo periférico, a proteína ainda não foi testada em Sistema Nervoso Central. Objetivou-se avaliar o potencial regenerador da fração proteica extraída do látex natural (P1) na hemissecção da medula espinhal em ratos. Foram utilizados 18 ratos machos adultos submetidos à hemissecção medular no segmento medular T13 subdivididos em dois grupos: GHP (tratados com proteína P1 em gel de ácido hialurônico) e GHSP (tratado somente com ácido hialurônico). Foram realizadas análises neuroclínicas, bem como avaliação funcional da marcha em plataforma de acrílico. Após oito semanas os animais foram submetidos à eutanásia e os segmentos medulares envolvidos foram avaliados por histoquímica pela coloração Tricrômico de Masson e Luxol Fast Blue, além de avaliação da reação astroglial por imunoistoquímica. Não houve diferença significativa entre os dois grupos para as avaliações neuroclínicas, não sendo observado melhora clínica satisfatória para as variáveis analisadas, porém, em relação à análise histológica foi notada diferença importante entre os grupos, evidenciando menor reação cicatricial e degeneração do tecido medular restante, além de presença de hipercelularidade organizada e menor reação astroglial nos animais tratados com a fração protéica P1. Apesar da não evidência de melhora nos parâmetro neuroclínicos com o uso da proteína P1, houve alterações histológicas notórias e relevantes nos animais em que foi utilizada, além de ser benéfica como indutora de neuroproteção.

Spinal cord injury is not an uncommon event in human and veterinary medicine and results in neurological dysfunctions of varying degrees. Despite efforts in treatment, spinal cord injuries often cause permanent sequelae, ranging from isolated proprioceptive deficit to complete limb paralysis. The membrane made from natural latex extracted from the rubber tree Hevea brasiliensis has been successfully used for tissue regeneration and its regenerative potential has been recognized as being of a protein fraction known as P1 protein. This new biomaterial has been effective in several regeneration tests in experimental animals and humans, and although it has shown a potential regenerator in a peripheral nerve injury test, the protein has not yet been tested in the Central Nervous System. The objective of this study was to evaluate the regenerative potential of the protein fraction extracted from natural latex (P1) in the hemisection of the spinal cord in rats. Eighteen adult male rats submitted to medullary hemisection in the T13 medullary segment were subdivided into two groups: GHP (treated with protein P1 in hyaluronic acid gel) and GHSP (treated with hyaluronic acid only). Neuroclinical analyzes were performed as well as functional evaluation of gait on acrylic platform. After eight weeks the animals were submitted to euthanasia and the involved spinal segments were evaluated by histochemistry by Masson and Luxol Fast Blue Trichrome staining, as well as evaluation of the astroglial reaction by immunohistochemistry. There was no significant difference between the two groups for the neuroclinical evaluations, and no satisfactory clinical improvement was observed for the analyzed variables; however, in relation to the histological analysis, an important difference between the groups was observed, evidencing a smaller cicatricial reaction and degeneration of the remaining spinal cord tissue, besides the presence of organized hypercellularity and less astroglial reaction in the animals treated with the protein fraction P1. Although there was no evidence of improvement in the neuroclinical parameters with the use of the P1 protein, there were significant and relevant histological changes in the animals in which it was used, besides being beneficial as inducer of neuroprotection.

Palatoplastia com biomembrana natural de látex com polilisina 0, 1% em cães com defeito palatino experimentalmente induzido / Palatoplasty with latex biomembrane with polilisine 0, 1% in canine experimental palatal defect

A palatoplastia é uma cirurgia de correção para restabelecer o isolamento entre as cavidades oral e nasal impedindo assim que alimentos sejam aspirados. O tamanho da fenda limita seu fechamento, mas existem várias técnicas descritas para isso, a maioria, realizadas com retalhos autólogos da mucosa do palato, ou ainda enxertos e próteses. Trabalhos científicos realizados com a Biomembrana Natural de Látex com Polilisina 0,1% tornaram conhecidas suas propriedades de favorecimento e aceleração do processo cicatricial, de estimulação da neovascularização, de crescimento tecidual organizado em diferentes órgãos e tecidos e de biocompatibilidade. Foi provocado um defeito no palato secundário de sete cães, dos quais, cinco foram recobertos com a biomembrana de látex, os outros (dois) foram escolhidos como controle e tiveram o fechamento por segunda intenção. No período pós-operatório foram realizadas observações clínicas e macroscópicas para avaliação dos resultados. A membrana foi um fator de aceleração do processo de reparação, visto que os animais do grupo controle demoraram mais tempo para ter o defeito totalmente fechado em relação aos outros.(AU)

The palatoplasty is a correction surgery to restore the isolation between the oral and nasal cavity, avoid breath of food. There are many techniques to repair palatal defects, and the most used is mucoperiosteal flap. Grafts and prothesis, can be used too. Scientific works with Natural Latex Biomembrane with 0,1% Polylisine reveals properties like biocompatibility, improve and accelerate the cicatricial process, the stimulation of new vessels and organized tissue growth in different organs. Seven dogs were arranged in two groups and were submitted to experimental hard palate cleft. Five dogs received palatal repair with the natural latex biomembrane with 0,1% polylisine. Two animals did not receive any repair (control group) and the defect healing by second intention. After surgery, the groups were observed macroscopically and clinically to evaluate the results. The healling of cleft palate of group I was faster than control group, and this fact suggests that the biomembrane is an accelerator factor for cicatricial process.(AU)

ORIGEM E DISTRIBUIÇÃO DAS ARTÉRIAS DA COXA E DA PERNA DE JAVALI (Sus scrofa LINNAEUS, 1758)

Objetivou-se estudar neste trabalho a origem e distribuição das artérias da coxa e da perna de javali (Sus scrofa LINNAEUS, 1758). Foram utilizados vinte e cinco animais, de idades variadas, procedentes de doações. O sistema arterial de cada animal foi marcado com látex a 50%, corada com pigmento específico vermelho. A fixação dos animais ocorreu mediante injeções intramusculares, subcutâneas e intracavitárias de solução aquosa de formaldeído a 10%. A artéria ilíaca externa, emitiu, ventralmente ao corpo das duas últimas vértebras lombares, a artéria femoral profunda que teve seu trajeto entre as faces mediais dos músculos vasto medial e pectíneo. A artéria femoral profunda se ramificou no terço proximal do membro pélvico em tronco pudendoepigástrico e artéria circunflexa medial do fêmur. Em 10% dos casos não houve formação do tronco comum para a origem das artérias pudenda externa e epigástrica caudal. A artéria femoral foi o segmento distal da artéria ilíaca externa na coxa, emitiu a artéria circunflexa lateral do fêmur no terço proximal do membro e se ramificou em dois ramos, ascendente e descendente, se distribuindo no músculo vasto medial e reto da coxa. No terço médio da face medial da coxa observou-se a artéria safena. Na porção distal da coxa, a artéria femoral caudal distribuiu um ramo ascendente e outro descendente. A artéria poplítea, foi a continuação da artéria femoral ao atravessar a fossa popítea na perna. Ao percorrer a cabeça medial do músculo gastrocnêmio, emitiu a artéria tibial cranial e a artéria tibial caudal. Antes de chegar a cabeça medial do músculo gastrocnêmio, a artéria poplítea emite a artéria proximal lateral do joelho, artéria média do joelho, artéria distal lateral do joelho e a artéria medial do joelho. No terço proximal da perna, a artéria tibial cranial perfurou a membrana interóssea do osso da tíbia e ao alcançar a porção craniolateral da perna, deu procedência a artéria recorrente tibial cranial e continuou seu trajeto até a região distal da perna. A artéria tibial caudal inicialmente ao seu trajeto realizou uma trifurcação e seus ramos se distribuíram através dos músculos gastrocnêmio, sóleo, poplíteo, flexor profundo dos dedos e flexor superficial dos dedos.

The aim of this study was to study the distribution of the arteries of the thigh and the boar leg (Sus scrofa LINNAEUS, 1758). Twenty-five animals of varying generations from donations were used. The arterial system of each animal was marked with a 50% latex stained with specific red pigment. Binding of the animals was achieved by intramuscular, subcutaneous and intracavitary injections of aqueous 10% formaldehyde solution. The external iliac artery emitted the body of the last two lumbar vertebrae, a deep femoral artery that had its direction between the medial faces of the vastus medialis and pectineum muscles. The deep femoral artery branched into the proximal third of the pelvic limb in the pudendoepigastric trunk and medial circumflex artery of the femur. In 10% of the cases, the cases did not occur in relation to culture of the pudendal and caudal epigastric arteries. The femoral artery was the distal segment of the external iliac artery in the thigh, a lateral circumflex artery was emitted from the femur in the proximal third of the limb and branched into two branches, ascending and descending, distributing in the vastus medialis and rectus muscle of the thigh. No middle third of the medial aspect of the thigh was observed the saphenous artery. The distal portion of the thigh, the caudal femoral artery is distributed by one ascending and the other descending. The popliteal artery was a continuation of femoral art when crossing a pop fossa in the leg. When a medial head of the gastrocnemius muscle was passed, a cranial tibial artery and a caudal tibial artery were emitted. Before reaching the head of the gastrocnemius muscle, a popliteal artery emits a lateral artery of the knee, medial artery of the knee, lateral distal artery of the knee and a medial artery of the knee. In the proximal third of the leg, a cranial cranial perforating the interosseous membrane of the leg bone and a lateral skull of the leg, gave rise to a recurrent tibial cranial technique and continued its mission to a distal region of the leg. The caudal tibial artery prior to its movement is a trifurcation and its branches distribute through the gastrocnemius, soleus, popliteal, flexor digitorum, and flexor digitorum muscles.

Anatomical and functional evaluation of tympanoplasty using a transitory natural latex biomembrane implant from the rubber tree Hevea brasiliensis / Avaliação anatômica e funcional da timpanoplastia com a utilização de implante transitório de biomembrana natural de látex proveniente da seringueira Hevea brasiliensis

PURPOSE: To compare the role of transitory latex and sylastic® implants in tympanoplasty on the closure of tympanic perforations. METHODS: A randomized double-blind prospective study was conducted on 107 patients with chronic otitis media submitted to underlay tympanoplasty and divided at random into three groups: control with no transitory implant, latex membrane group, and sylastic® membrane group. RESULTS: Greater graft vascularization occurred in the latex membrane group (p<0.05). Good biocompatibility was obtained with the use of the latex and silicone implants, with no effect on the occurrence of infection, otorrhea or otorragy. CONCLUSION: The use of a transitory latex implant induced greater graft vascularization, with a biocompatible interaction with the tissue of the human tympanic membrane.(AU)

OBJETIVO: Investigar os efeitos da biomembrana de látex e silicone no fechamento de perfurações timpânicas. METODOS: Foram estudados 107 pacientes com otite média cronica simples submetidos à cirurgia de timpanoplastia. Os pacientes foram classificados aleatoriamente, por sorteio, em três grupos. Até o final da cirurgia, os cirurgiões não tomavam conhecimento se seria ou não utilizado qualquer material externamente ao enxerto de fáscia temporal. Neste momento, o paciente que fora previamente classificado por uma ordem aleatória de entrada como participante do estudo foi identificado como participante do grupo 1, 2 ou 3, sendo, respectivamente, ausência de implante transitório no primeiro, membrana de látex no segundo e membrana de sylastic® no terceiro grupo. RESULTADOS: Houve uma maior vascularização do enxerto no grupo em que foi utilizado implante transitório de membrana de látex (p<0,05). Obteve-se boa biocompatibilidade com uso de implantes de látex e silicone sem afetar as taxas de ocorrência de infecção, otorreia ou otorragia. A porcentagem de cicatrização da membrana timpânica foi equivalente nos três grupos, assim como a melhora auditiva (p<0,01). CONCLUSÃO: O uso do implante transitório de látex provocou um maior processo de vascularização do enxerto, com interação satisfatória com os tecidos da membrana timpânica humana.(AU)

Sciatic nerve regeneration in rats by a nerve conduit engineering with a membrane derived from natural latex / Regeneração do nervo ciático em ratos através de um conduto confeccionado com uma membrana de látex natural

PURPOSE: To evaluate the capacity of natural latex membrane to accelerate and improve the regeneration quality of the of rat sciatic nerves. METHODS: Forty male adult Wistar rats were used, anesthetized and operated to cut the sciatic nerve and receive an autograft or a conduit made with a membrane derived from natural latex (Hevea brasiliensis). Four or eight weeks after surgery, to investigate motor nerve recovery, we analyzed the neurological function by walking pattern (footprints analysis and computerized treadmill), electrophysiological evaluation and histological analysis of regenerated nerve (autologous nerve graft or tissue cables between the nerve stumps), and anterior tibial and gastrocnemius muscles. RESULTS: All functional and morphological analysis showed that the rats transplanted with latex conduit had a better neurological recovery than those operated with autologous nerve: quality of footprints, performance on treadmill (p<0.01), electrophysiological response (p<0.05), and quality of histological aspects on neural regeneration. CONCLUSION: The data reported showed behavioral and functional recovery in rats implanted with latex conduit for sciatic nerve repair, supporting a complete morphological and physiological regeneration of the nerve.(AU)

OBJETIVO: Avaliar a capacidade de uma membrana de látex natural em acelerar e melhorar a qualidade da regeneração do nervo ciático seccionado de ratos. MÉTODOS: Foram utilizados 40 ratos machos adultos da linhagem Wistar, anestesiados e operados com autoenxerto ou com interposição de um tubo confeccionado com uma membrana derivada do latex natural (Havea brasiliensis). Quatro ou oito semanas após a cirurgia, para investigar a recuperação motora do nervo, foram analisadas a função neurológica através do padrão da marcha (análise das pegadas e esteira computadorizada), avaliação eletrofisiológica e análise histológica do nervo regenerado (enxerto de nervo autólogo ou formação de nervo novo entre os cotos nervosos) e músculos gastrocnêmio e tibial anterior. RESULTADOS: Todas as análises morfológicas e funcionais demonstraram que os ratos transplantados com o conduto de látex tiveram recuperação melhor do que aqueles operados com nervo autólogo: qualidade das pegadas impressas, desempenho em esteira (p<0,01), resposta eletrofisiológica (p<0,05), e qualidade histológica da regeneração nervosa. CONCLUSÃO: Os dados apresentados demonstraram recuperação comportamental e funcional nos ratos implantados com o conduto de látex para a reparação do nervo ciático por meio de uma completa regeneração morfológica e fisiológica do nervo.(AU)

Angiogenic activity of Synadenium umbellatum Pax latex / Atividade angiogênica do látex de Synadenium umbellatum Pax

Synadenium umbellatum Pax, popularly known as "cola-nota", is a medicinal plant that grows in tropical regions. Latex of this plant is used to treat various diseases such as diabetes mellitus, Hansenïs disease, tripanosomiases, leukemia and several malignant tumors. In the present study, the angiogenic activity of S. umbellatum latex was evaluated using the chick embryo chorioallantoic membrane (CAM) assay. Results showed significant increase of the vascular net (p < 0.05) compared to the negative control (H2O). The histological analysis was in accordance with the results obtained. In conclusion, our data indicate that S. umbellatum latex, under the conditions of this research, presented angiogenic effect.(AU)

Synadenium umbellatum Pax, popularmente conhecida como "cola-nota", é uma planta medicinal que cresce em regiões tropicais. O látex desta planta tem sido utilizado no tratamento de várias doenças, como diabetes mellitus, hanseníase, tripanossomíases, leucemia e vários tumores malignos. No presente estudo, a atividade angiogênica do látex de S. umbellatum foi avaliada pelo ensaio da membrana corio-alantóide (MCA) de ovo embrionado de galinha. Os resultados mostraram aumento significativo da rede vascular (p < 0.05) em relação ao controle negativo (H2O). A análise histológica está em concordância com os resultados obtidos. Em conclusão, os dados indicaram que, nas condições experimentais deste estudo, o látex de S. umbellatum exibiu efeito angiogênico.(AU)

Membranas de látex natural na herniorrafia diafragmática experimental em cães / Natural latex membranes in experimental diaphragmatic hernioplasty in dogs

Utilizaram-se membranas de látex para o reparo de defeitos diafragmáticos em 12 cães, distribuídos em três grupos: no G1 utilizou-se membrana comercial e no G2, membrana experimental. O G3 foi usado como controle. Foi feito um defeito retangular no músculo diafragma, com 4cm de comprimento por 3cm de largura, que nos grupos G1 e G2 foi substituído pelo implante da membrana de látex correspondente. Os animais foram avaliados por estudo radiográfico, hemograma, videocirurgia e análise histológica. Os resultados mostraram que a membrana de látex do grupo 2 foi eficiente na correção de defeito no diafragma, promovendo a reparação e neovascularização tecidual local, sem causar rejeição durante o período de avaliação.(AU)

Latex membranes were experimentally used to repair diaphragmatic defects in 12 dogs, distributed in 3 groups. In group 1, a commercial membrane was used, and in group 2, an experimental membrane. Group 3, animals were used as control. A rectangular defect (4cm in length and 3cm in width) was surgically performed in the diaphragm muscle, which was substituted, in group 1 and 2, by the implantation of corresponding latex membrane. The animals were evaluated by radiography, blood count, video-surgery, and histologic study. Results showed that the latex membrane of group 2, were efficient in the correction of the defect in the diaphragm, promoting the repairing and local neovascularization, without causing rejection during the evaluated period.(AU)

Teste de biocompatibilidade e resistência de membranas de látex em cães

The natural latex extracted of the Rubber Tree, has properties to induce characteristics of tissue vascularization and regeneration that had been comproved in different species and tissues. This study tested the biocompatibility of three latex membranes in six dogs. Two of these membranes have not been used yet, while one of them has been tested in previous studies. Membranes were implanted between the cutaneous and the rectum of the abdomen muscles by a surgical procedure. In a forty five days period, the animals were evaluated for pain, clinical and macroscopic alterations of the membranes and, after the membranes were removed in order to submit them to histological exams. Mechanical traction tests were realized in control membranes to measure deformation and resistance. The results indicated that membranes are compatible, and able to substitute the muscular sheath in dogs, excepting membrane 2, because of it rejecting characteristics.

O látex natural extraído da seringueira (Hevea brasiliensis) possui propriedades indutoras de neovascularização e regeneração tecidual, comprovadas em várias espécies e em diferentes tecidos do organismo. Este estudo testou a biocompatibilidade e a resistência de três membranas de látex em seis cadelas, sendo duas dessas membranas ainda não utilizadas e uma já testada em estudos prévios. Os implantes foram colocados entre os músculos cutâneo e reto do abdome através de procedimento cirúrgico e, após 45 dias, foram removidos e submetidos a exames histológicos. Durante esse período, os animais foram avaliados quanto à dor e às alterações clínicas e macroscópicas nas membranas. Testes mecânicos de tração para determinação de deformação e resistência foram efetuados em amostras-controle. Pelos resultados obtidos, concluiu-se que as membranas testadas são compatíveis para substituir a bainha muscular em cães, exceto a membrana 2, por apresentar características de rejeição.

Teste de biocompatibilidade e resistência de membranas de látex em cães

The natural latex extracted of the Rubber Tree, has properties to induce characteristics of tissue vascularization and regeneration that had been comproved in different species and tissues. This study tested the biocompatibility of three latex membranes in six dogs. Two of these membranes have not been used yet, while one of them has been tested in previous studies. Membranes were implanted between the cutaneous and the rectum of the abdomen muscles by a surgical procedure. In a forty five days period, the animals were evaluated for pain, clinical and macroscopic alterations of the membranes and, after the membranes were removed in order to submit them to histological exams. Mechanical traction tests were realized in control membranes to measure deformation and resistance. The results indicated that membranes are compatible, and able to substitute the muscular sheath in dogs, excepting membrane 2, because of it rejecting characteristics.

O látex natural extraído da seringueira (Hevea brasiliensis) possui propriedades indutoras de neovascularização e regeneração tecidual, comprovadas em várias espécies e em diferentes tecidos do organismo. Este estudo testou a biocompatibilidade e a resistência de três membranas de látex em seis cadelas, sendo duas dessas membranas ainda não utilizadas e uma já testada em estudos prévios. Os implantes foram colocados entre os músculos cutâneo e reto do abdome através de procedimento cirúrgico e, após 45 dias, foram removidos e submetidos a exames histológicos. Durante esse período, os animais foram avaliados quanto à dor e às alterações clínicas e macroscópicas nas membranas. Testes mecânicos de tração para determinação de deformação e resistência foram efetuados em amostras-controle. Pelos resultados obtidos, concluiu-se que as membranas testadas são compatíveis para substituir a bainha muscular em cães, exceto a membrana 2, por apresentar características de rejeição.

Membrana de látex da seringueira (Hevea brasiliensis), com e sem polilisina a 0, 1 % e tela de marlex na reconstrução de defeitos iatrogênicos da parede abdominal de ratos / Seringueira's latex membrane (Hevea brasiliensis) with and without polylysine 0, 1 % and marlex mesh for the reconstruction of iatrogenics abdominal wall defects in rats

OBJETIVO: Comparar o implante de membrana de látex da seringueira sem e com polilisina 0,1 por cento e tela de marlex na reparação de defeitos abdominais iatrogênicos em ratos. MÉTODOS: Ressectou-se em bloco um segmento circular de aproximadamente três centímetros de diâmetro da parede muscular abdominal ventral de 31 ratos Wistar, preservando-se a pele. Os animais foram divididos em 3 grupos: grupo látex sem polilisina, grupo látex com polilisina 0,1 por cento e grupo marlex. Os animais foram sacrificados aos cinco e aos 120 dias após o procedimento cirúrgico. Fragmentos da parede abdominal foram coletados e submetidos à avaliação histopatológica. RESULTADOS: As principais alterações observadas nos grupos tratados com as membranas de látex sem e com polilisina 0,1 por cento foram deiscência (21 animais) e evisceração (dois animais). A eliminação dos implantes nos grupos tratados com látex ocorreu, em média, aos 13,8 dias. Nestes animais ocorreu a formação de tecido conjuntivo fibroso, similar ao observado no grupo que recebeu o marlex. Outras alterações notadas foram aderências viscero-parietais em todos os grupos avaliados. CONCLUSAO: A membrana de látex da seringueira com e sem polilisina a 0,1 por cento, quando utilizada para reconstrução de defeitos abdominais em ratos é eliminada, em média, aos 13,8 dias após a sua implantação, deixando uma base fibrosa de reparação, similar à observada após a implantação da tela de marlex. (AU)

PURPOSE: To compare seringueira latex membrane implant, with and without polilysine at 0.1% and marlex mesh on the repair of iatrogenic abdominal defects in rats.METHODS: A circular segment block of approximate three centimeters of diameter was sectioned out of the ventral adominal muscle wall of 31 Wistar rats. The skin was preserved. The animals were divided into three experimental groups: only latex, latex and polilysine at 0.1%, and marlex mesh. Some rats underwent eutranasia at five and some at 120 days after surgery. Fragments of abdominal wall were collected and submitted at histophatologic analysis.RESULTS: The main alterations observed in groups treated with the latex membrane with and without polilysine were dehiscence (21 animals) and evisceration (two animals). The elimination of implant occurred at an average of 13,8 days. These animals presented fiber conjunctive tissue formation, similar to that observed in the group which received the marlex mesh. Other alterations noted were viscera-parietal adherences in all evaluated groups.CONCLUSION: The seringueira' s latex membrane, with or without polilysine 0,1%, when used on the reconstruction of abdominal defects in rats is eliminated at 13.8 days after its implantation, leaving a fiber base of reparation, similar to that observed after marlex mesh implantation.