PREVALÊNCIA DA MUTAÇÃO E321G NO GENE MYH1, ASSOCIADA A MIOSITE IMUNOMEDIADA, EM CAVALOS QUARTO DE MILHA NO BRASIL

A miosite imunomediada (IMM) causa atrofia muscular aguda e infiltração lin-focítica de miofibras. Em cavalos Quarto-de-milha (QM), uma mutação missen-se E321G em gene MYH1 está altamente associada à suscetibilidade ao de-senvolvimento de IMM. O objetivo deste estudo foi investigar a frequência alé-lica da variante E321G em gene MYH1 em QMs no Brasil. Dos 299 QMs geno-tipados, 44 animais (14,7%) foram identificados como heterozigotos (N/My) pa-ra a variante E321G em gene MYH1 e 255 (85,3%) foram homozigotos para o alelo wild type (N/N); portanto, a frequência do alelo foi de 0,074. Cavalos da linhagem de rédeas mostraram uma frequência de heterozigotos significativa-mente maior do que outras linhagens. Não houve associação entre miopatia de armazenamento de polissacarídeos tipo 1 ou hipertermia maligna e a vari-ante E321G em gene MYH1 nos animais avaliados. Além disso, aqui, descre-vemos aqui pela primeira vez no Brasil dois potros (N/My) com sinais clínicos de IMM. Este estudo destaca a importância de medidas de controle para evitar um aumento na incidência de IMM associado ao E321G em gene MYH1 em QMs no Brasil, principalmente em cavalos de rédeas.

In Quarter horses (QHs), myosin heavy chain myopathy (MYHM), characterized by nonexertional rhabdomyolysis or immune-mediated myositis (IMM) with acute mus-cle atrophy, is highly associated with a missense E321G MYH1 mu-tation. We identified two related QH foals in Brazil with the E321G MYH1 muta-tion that had clinical signs of MYHM, with the histological confirmation of IMM in one foal. This prompted an investigation into the allele frequency of the E321G MYH1 variant across performance QHs using a DNA archive in Brazil. Of 299 genotyped QHs, 44 animals (14.7%) were identified as heterozygous (My/N) for the E321G MYH1 variant, and 255 (85.3%) were homozygous for the wild-type allele (N/N), with an allele frequency of 0.074. Reining horses showed a significantly higher prevalence of heterozygosity than those in other disciplines (P=0.008). The prevalence of type 1 polysaccharide storage myopa-thy was 0.032, with only two E321G MYH1 heterozygotes possessing the GYS1 mutation. This study highlights the existence of MYHM and the high prevalence of the MYH1 mutation in QHs in Brazil, especially in reining QHs, underlining the importance of control measures to prevent an increase in the incidence of MYHM in QHs in Brazil.

Alteração nas frações das proteínas miofibrilares e maciez do músculo Longissimus de bovinos no período post mortem

The objective of this study was to identify by electrophoresis the changes in the fractions of muscle proteins during the post mortem period of different genetic groups and analyse the tenderness of meat samples refrigerated for 24 hours (not aged) and aged for 7 days. Were used forty-eight samples of Longissimus muscle from bovines of 4 genetic groups: 12 Nelore; 12 crossed ½ Aberdeen-Angus ½ Nelore x Brahman; 12 Brangus; 12 crossed ½ Aberdeen-Angus ½ Nelore x Pardo submitted to superprecoce biological model. From each sample two slices was retired, one of them was not aged and the other was aged for 7 days at 2ºC. In the analysis of shear force, both the non-aged samples, as those subjected to seven days of maturation did not differ on meat tenderness, but all of them showed acceptable tenderness, which can be explained by the low age at slaughter, which was provided by the fattening system that these animals were submitted. In the eletrophoretic analysis of bands of protein was noted degradation of myosin heavy chain and Troponin-T and the appearance of the 30 kDa fragment for all genetic groups after the 7 days period of aging. All the genetic groups showed good meat tenderness, regardless the ageing time.

Objetivou-se com o estudo identificar por eletroforese as mudanças nas frações das proteínas musculares durante período postmortem de bovinos de diferentes grupos genéticos e analisar a maciez da carne em amostras resfriadas por 24 horas (não maturadas) e maturadas por 7 dias. Foram utilizadas amostras do musculo Longissimus de quarenta e oito bovinos pertencentes a 4 grupos genéticos: 12 Nelore; 12 cruzados ½ Nelore ½ Aberdeen-Angus x Brahman; 12 Brangus; 12 cruzados ½ nelore ½ Aberdeen-Angus x Pardo, submetidos ao modelo biológico superprecoce. De cada uma delas foram retiradas duas fatias, uma não foi maturada e a outra maturada por 7 dias, a 2ºC. Na análise da força de cisalhamento, tanto as amostras não maturadas, quanto as submetidas a 7 dias de maturação não diferiram quanto à maciez da carne, mas todas apresentaram maciez aceitável, o que pode ser explicado pela baixa idade dos animais no momento do abate, o que foi proporcionado pelo sistema de engorda a que estes animais foram submetidos. Na análise das bandas de proteínas da carne, medida pela eletroforese, notou-se degradação da cadeia pesada da miosina e da Troponina -T e o aparecimento do fragmento de 30 kDa para todos os grupos genéticos após o período de 7 dias de maturação.Todos os grupos genéticos apresentaram boa maciez da carne, independentemente do tempo de maturação.

Changes in the fractions of myofibrillar proteins and tenderness of Longissimus muscle of cattle in the post mortem period / Alteração nas frações das proteínas miofibrilares e maciez do músculo "Longissimus" de bovinos no período "post mortem"

The objective of this study was to identify by electrophoresis the changes in the fractions of muscle proteins during the post mortem period of different genetic groups and analyse the tenderness of meat samples refrigerated for 24 hours (not aged) and aged for 7 days. Were used forty-eight samples of Longissimus muscle from bovines of 4 genetic groups: 12 Nelore; 12 crossed ½ Aberdeen-Angus ½ Nelore x Brahman; 12 Brangus; 12 crossed ½ Aberdeen-Angus ½ Nelore x Pardo submitted to superprecoce biological model. From each sample two slices was retired, one of them was not aged and the other was aged for 7 days at 2oC. In the analysis of shear force, both the non-aged samples, as those subjected to seven days of maturation did not differ on meat tenderness, but all of them showed acceptable tenderness, which can be explained by the low age at slaughter, which was provided by the fattening system that these animals were submitted. In the eletrophoretic analysis of bands of protein was noted degradation of myosin heavy chain and Troponin-T and the appearance of the 30 kDa fragment for all genetic groups after the 7 days period of aging. All the genetic groups showed good meat tenderness, regardless the ageing time.(AU)

Objetivou-se com o estudo identificar por eletroforese as mudanças nas frações das proteínas musculares durante período postmortem de bovinos de diferentes grupos genéticos e analisar a maciez da carne em amostras resfriadas por 24 horas (não maturadas) e maturadas por 7 dias. Foram utilizadas amostras do musculo Longissimus de quarenta e oito bovinos pertencentes a 4 grupos genéticos: 12 Nelore; 12 cruzados ½ Nelore ½ Aberdeen-Angus x Brahman; 12 Brangus; 12 cruzados ½ nelore ½ Aberdeen-Angus x Pardo, submetidos ao modelo biológico superprecoce. De cada uma delas foram retiradas duas fatias, uma não foi maturada e a outra maturada por 7 dias, a 2oC. Na análise da força de cisalhamento, tanto as amostras não maturadas, quanto as submetidas a 7 dias de maturação não diferiram quanto à maciez da carne, mas todas apresentaram maciez aceitável, o que pode ser explicado pela baixa idade dos animais no momento do abate, o que foi proporcionado pelo sistema de engorda a que estes animais foram submetidos. Na análise das bandas de proteínas da carne, medida pela eletroforese, notou-se degradação da cadeia pesada da miosina e da Troponina T e o aparecimento do fragmento de 30 kDa para todos os grupos genéticos após o período de 7 dias de maturação.Todos os grupos genéticos apresentaram boa maciez da carne, independentemente do tempo de maturação.(AU)

Changes in the fractions of myofibrillar proteins and tenderness of Longissimus muscle of cattle in the post mortem period / Alteração nas frações das proteínas miofibrilares e maciez do músculo "Longissimus" de bovinos no período "post mortem"

The objective of this study was to identify by electrophoresis the changes in the fractions of muscle proteins during the post mortem period of different genetic groups and analyse the tenderness of meat samples refrigerated for 24 hours (not aged) and aged for 7 days. Were used forty-eight samples of Longissimus muscle from bovines of 4 genetic groups: 12 Nelore; 12 crossed ½ Aberdeen-Angus ½ Nelore x Brahman; 12 Brangus; 12 crossed ½ Aberdeen-Angus ½ Nelore x Pardo submitted to superprecoce biological model. From each sample two slices was retired, one of them was not aged and the other was aged for 7 days at 2oC. In the analysis of shear force, both the non-aged samples, as those subjected to seven days of maturation did not differ on meat tenderness, but all of them showed acceptable tenderness, which can be explained by the low age at slaughter, which was provided by the fattening system that these animals were submitted. In the eletrophoretic analysis of bands of protein was noted degradation of myosin heavy chain and Troponin-T and the appearance of the 30 kDa fragment for all genetic groups after the 7 days period of aging. All the genetic groups showed good meat tenderness, regardless the ageing time.

Objetivou-se com o estudo identificar por eletroforese as mudanças nas frações das proteínas musculares durante período postmortem de bovinos de diferentes grupos genéticos e analisar a maciez da carne em amostras resfriadas por 24 horas (não maturadas) e maturadas por 7 dias. Foram utilizadas amostras do musculo Longissimus de quarenta e oito bovinos pertencentes a 4 grupos genéticos: 12 Nelore; 12 cruzados ½ Nelore ½ Aberdeen-Angus x Brahman; 12 Brangus; 12 cruzados ½ nelore ½ Aberdeen-Angus x Pardo, submetidos ao modelo biológico superprecoce. De cada uma delas foram retiradas duas fatias, uma não foi maturada e a outra maturada por 7 dias, a 2oC. Na análise da força de cisalhamento, tanto as amostras não maturadas, quanto as submetidas a 7 dias de maturação não diferiram quanto à maciez da carne, mas todas apresentaram maciez aceitável, o que pode ser explicado pela baixa idade dos animais no momento do abate, o que foi proporcionado pelo sistema de engorda a que estes animais foram submetidos. Na análise das bandas de proteínas da carne, medida pela eletroforese, notou-se degradação da cadeia pesada da miosina e da Troponina T e o aparecimento do fragmento de 30 kDa para todos os grupos genéticos após o período de 7 dias de maturação.Todos os grupos genéticos apresentaram boa maciez da carne, independentemente do tempo de maturação.

Avaliação do colágeno e das miosinas cardíacas em ratos com hipertensão arterial pulmonar submetidos a treinamento preventivo

O objetivo deste estudo foi investigar na fase inicial (pré-clínica) da Hipertensão Arterial Pulmonar (HAP) o efeito do treino aeróbio preventivo no colágeno e nas miosinas cardíacas. Foram utilizados 32 ratos Wistar machos, separados em 4 grupos de 8 animais, grupo 1: sedentário controle (S); grupo 2: treino controle (T); grupo 3: sedentário Hipertensão Arterial Pulmonar (SHAP); grupo 4: treino Hipertensão Arterial Pulmonar (THAP). Os animais treinaram por treze semanas em esteira rolante, com duas semanas de adaptação com duração de 15 minutos à 45 minutos e velocidade da esteira de 0,6 km/h à 0,9 km/h, já no treinamento o tempo aumentou para 60 minutos e a velocidade para 1,1km/h. A HAP foi induzida por aplicação da monocrotalina, com consequente disfunção ventricular direita após a décima semana de treinamento, e os animais controles foram submetidos a aplicação de solução salina. Foram realizados dois testes do limiar do lactato, 24 horas e 14 dias, após a aplicação da monocrotalina. Ao final da décima terceira semana foi realizado o ecocardiograma para comprovar a disfunção cardíaca. Esses animais foram posteriormente eutanasiados, e o ventrículo direito (VD) retirado para análises morfológica e de expressão gênica. O VD foi analisado por meio da coloração de cortes histológicos por Picrosirius red para o conteúdo de colágeno, e por PCR quantitativa após transcrição reversa (RT-qPCR em tempo real), para a expressão gênica de col1a1 (collagen type I alpha 1chain), col1a2 (collagen type I alpha 2 chain), myh6 (myosin heavy chain 6) e myh7 (myosin heavy chain 7). Houve disfunção cardíaca comprovada pela redução da velocidade máxima da artéria pulmonar e do tempo de aceleração da artéria pulmonar. Os resultados não mostraram diferença em relação à fração de colágeno intersticial. Houve aumento dos genes col1a1 (p=0,008) entre os grupos SHAP e THAP vs. S, THAP vs T, e myh7 (p=0,0242) entre os grupos THAP vs S. Concluímos que no início da disfunção cardíaca por HAP já ocorre aumento dos genes myh7 e col1a1 sem aumento da fração de colágeno, porém o treinamento preventivo não amenizou essas alterações gênicas.

The purpose of this study was to investigate the effect of preventive aerobic training on collagen and cardiac myosin in the early phase (preclinical) of Pulmonary Arterial Hypertension (PAH). Thirty-two male Wistar rats were used, divided into 4 groups of 8 animals, group 1: sedentary control (S); Group 2: training control (T); Group 3: sedentary Pulmonary Arterial Hypertension (SPAH); Group 4: training Pulmonary Arterial Hypertension (TPAH). The animals trained for thirteen weeks on a treadmill, with two weeks of adaptation lasting from 15 minutes to 45 minutes and speed of the treadmill from 0.6 km / h to 0.9 km / h, while in training the time increased to 60 Minutes and the speed to 1.1km / h. PAH was induced by the application of monocrotaline, with consequent right ventricular dysfunction after the tenth week of training, and the control animals were submitted to saline solution. Two tests of the lactate threshold were performed, 24 hours and 14 days, after the application of monocrotaline. At the end of the thirteenth week, an echocardiogram was performed to confirm cardiac dysfunction. These animals were later euthanized, and the right ventricle (RV) removed for morphological and gene expression analyzes. The RV was analyzed by staining of Picrosirius red histological sections for collagen content and by quantitative PCR after reverse transcription (RT-qPCR in real time) for the gene expression of col1a1 (collagen type I alpha 1chain), Col1a2 (collagen type I alpha 2 chain), myh6 (myosin heavy chain 6) and myh7 (myosin heavy chain 7). There was confirmed cardiac dysfunction by the reduction of the maximum velocity of the pulmonary artery and the time of acceleration of the pulmonary artery. The results showed no difference in relation to the fraction of interstitial collagen. There was an increase of the col1a1 genes (p = 0.008) between the SPAH and TPAH groups. S, TPAH vs T, and myh7 (p = 0.0242) between the TPAH vs S groups. We conclude that at the beginning of the cardiac dysfunction by PAH increases myh7 and col1a1 genes without increasing the collagen fraction, but preventive training did not soften these gene alterations.

"Mudanças no transcriptoma associadas com o crescimento muscular e do tecido conjuntivo intramuscular em vacas de descarte submetidas a diferentes taxas de recuperação do ganho"

A taxa de renovação do estroma e proteínas miofibrilares define o crescimento muscular, e pode afetar a qualidade da carne, afetando turnover de colágeno e taxa proteolítica. Há uma falta de informação sobre as mudanças no processo de remodelação de proteína muscular em resposta à taxa de recuperação do ganho de peso, observada durante a "realimentação" depois de subnutrição, o que pode ser alterado em animais mais velhos. Alterações no tecido muscular durante o período de recuperação pode ser indicada pelo perfil de expressão diferencial de genes, pela técnica de sequenciamento de RNA. Os objetivos deste trabalho foram avaliar as alterações do transcriptoma na musculatura de vacas de descarte Nelore submetidas a: 1) a recuperação do peso em condições de pastejo; e 2) a recuperação da desnutrição em diferentes taxas de ganho de pesos. No primeiro experimento, os animais foram divididos em: grupo de manutenção (manutenção de peso e de alta escore corporal); Recuperação do ganho (recuperação de baixo escore corporal com o ganho de peso corporal moderado em 0,6 kg / dia sob pastejo). No segundo experimento, os animais foram divididos em três grupos em confinamento: Controle (abatidos com baixo escore de condição corporal), ganho moderado (0,6 kg de ganho de peso vivo por dia) durante a estação seca e alta recuperação de ganho (1,2 kg de ganho de peso vivo por dia) durante a estação seca. Nos dois estudos, amostras do Longissimus dorsi foram coletadas após o abate e imediatamente congeladas até à análise de sequenciamento ser realizada. No primeiro experimento, os genes encontrados no tratamento de recuperação do ganho foram relacionados com a resposta inflamatória como: 4A semaphorin (SEMA4A), solute carrier family 11 member 1 (SLC11A1), Ficolin 2 (FCN2) e placental growth factor (PGF). No segundo experimento, o osteonectina (SPARC), colágeno tipo IV subunidades 1 (COL4A1) foram alguns dos genes mais expressos para ambas as taxas de ganho de recuperação de remodelação do tecido conjuntivo. Para ganho moderado, foram identificadas proteínas miofibrilares estruturais como: Myosin IE (MYO1E), Myosin, Heavy Chain 11 (MYH11), (MYOG) and actinin, alpha 4 (ACTN4). No tratamento de alta recuperação de ganho, genes como CLL de célula B / 9 linfoma (BCL9), peroxisome proliferator-activated receptor alpha (PPARA), Diacylglycerol O-Acyltransferase 2 (DGAT2) and Phosphatidylinositol 4-Kinase, Catalytic, Beta (PI4KB) indicam maior deposição de tecido adiposo. Em resumo, observou-se que a deposição muscular durante a recuperação do ganho de peso envolve a regulação da expressão de vários genes relacionados com a matriz extracelular (ECM), corroborando com modelos de inflamação e similar a fibrose observada em animais maduros. Além disso, no grupo HG, genes relacionados com a síntese de colágeno e a deposição de gordura, também foram encontrados, indicando contribuição do tecido conjuntivo durante o crescimento muscular. Estes resultados são importantes para a compreensão do desenvolvimento do tecido como um todo, e auxiliam no progresso do conhecimento científico sobre a remodelação muscular durante a recuperação do ganho de peso e sua influência sobre estruturas de proteínas e vias intracelulares.

The renewal rate of stromal and myofibrillar proteins defines muscle growth, and can affect the quality of meat, by affecting collagen turnover and proteolytic rate. There is a lack of information on changes in the muscle protein remodeling process in response to the recovery weight gain rate observed during "realimentation" after undernutrition, which may be altered in older animals. Changes in muscle tissue during the recovery period may be indicated by the differential expression profile of genes after RNA sequencing. The objectives of this study were to evaluate transcriptome changes in the muscle of Nellore cull cows subjected to: 1) recovery weight gain under grazing conditions; and 2) recovery from undernutrition at different weight gain rates. In the first experiment, the animals were divided into two groups and subjected to one of two nutritional managements under grazing conditions: maintenance (maintenance of weight and high body condition score under grazing conditions) and recovery gain (recovery from low body condition score with moderate body weight gain of 0.6 kg/day under grazing conditions). In the second experiment, the animals were divided into three groups and subjected to one of three nutritional managements under feedlot conditions: control (slaughtered at low body condition score), moderate recovery gain (MG; 0.6 kg of daily live weight gain) during the dry season, and high recovery gain (HG; 1.2 kg of daily live weight gain) during the dry season. In both experiments, samples of longissimus dorsi muscle were collected after slaughter and immediately frozen until sequencing analysis could be performed. In the first experiment, genes related to inflammatory response, such as semaphorin 4A (SEMA4A), solute carrier family 11 member 1 (SLC11A1), ficolin-2 (FCN2), and placental growth factor (PGF), were expressed at higher levels during recovery gain. In the second experiment, osteonectin (SPARC) and collagen type IV subunits 1 (COL4A1) were expressed at higher levels in both recovery gain and connective tissue remodeling. For MG, structural myofibrillar proteins such as myosin IE (MYO1E), myosin, heavy chain 11 (MYH11), myogenin (MYOG), and actinin, alpha 4 (ACTN4) were identified. In the HG treatment, the B-cell CLL/lymphoma 9 (BCL9), peroxisome proliferator-activated receptor alpha (PPARA), diacylglycerol O-Acyltransferase 2 (DGAT2), and phosphatidylinositol 4-Kinase, catalytic, and beta (PI4KB) genes indicated more deposition of adipose tissue. In summary, we observed that muscular deposition during recovery weight gain involved the regulation of expression of several genes related to the extracellular matrix (ECM), corroborating the inflammatory and -like models observed in mature animals. Moreover, in the HG group, genes related to collagen synthesis and fat deposition were also found, indicating the important contribution of connective tissue during muscle growth. These results are important for understanding tissue development as a whole, and will assist in the progress of scientific knowledge on muscle remodeling during recovery weight gain and its influence on protein structures and intracellular routes.

POLIMORFISMO E EXPRESSÃO DE GENES CANDIDATOS E SUAS RELAÇÕES COM O CRESCIMENTO E AS CARACTERISTICAS DA CARNE EM BOVINOS NELORE (Bos indicus)

Com o intuito de estudar o potencial de aplicação de genes candidatos na seleção animal para o melhoramento genético da qualidade de carne de bovinos Nelore (Bos indicus), o presente trabalho teve como objetivos principais: (1) Avaliar em bovinos Nelore e cruzamentos Nelore x Bos taurus a ocorrência de associações entre o SNP g.98535683A>G:BTAU7 do gene CAST e as características da carne produzida e (2) quantificar a expressão gênica e proteica da cadeia pesada da miosina em bovinos Nelore com características fenotípicas contrastantes de crescimento e maciez da carne. Para o desenvolvimento do primeiro objetivo, 500 animais foram genotipados para o SNP g.98535683A>G:BTAU7 e fenotipados para força de cisalhamento (FC), índice de fragmentação miofibrilar (MFI), área de olho de lombo (AOL), espessura de gordura subcutânea (EGS) e lipídeos totais (LIP). Associação significativa entre o SNP e a maciez da carne foi observada. O genótipo AA apresentou os melhores valores em relação a esta característica. As diferenças encontradas entre os genótipos AA e AG (AA - AG) foram de - 0,19 kg e 5,31 para FC e MFI, respectivamente. O SNP não mostrou associação significativa com AOL, EGS e LIP. Para a execução do segundo objetivo, 90 bovinos Nelore terminados em confinamento foram utilizados. Levando em consideração o peso final ao abate (PF) e a FC dos 90 animais, 24 indivíduos com características contrastantes de peso e maciez da carne foram selecionados e divididos em quatro grupos experimentais (6 animais/grupo). Os grupos corresponderam a animais leves com carne macia (PF = 493,50 kg e FC = 3,76 kg), animais leves com carne dura (PF = 515,66 kg e FC = 8,06 kg), animais pesados com carne macia (PF = 604,33 kg e FC = 3,99) e animais pesados com carne dura (PF = 605,33 kg e FC = 7,83 kg). Em cada grupo, foram avaliadas características fenotípicas como MFI, AOL, EGS, LIP, índice de marmorização (IM), coloração instrumental (L*, a*, b*) e perdas por cozimento (PT). A análise de expressão dos genes MYH7, MYH2 e MYH1 foi feita por PCR em tempo real (RT-qPCR). A caracterização e quantificação proteica das isoformas da MyHC (MyHC-I, MyHC-IIa e MyHC-IIx/d) foi realizada por eletroforese SDS-PAGE. Em todas as análises (qualidade da carne e expressão gênica e proteica) não foi observada interação significativa entre crescimento e maciez da carne. Nas características AOL, EGS, IM e LIP não foi observado efeito significativo do crescimento e a maciez da carne. Porém, os animais pesados apresentaram maiores valores de L*, a* e b* em relação aos animais leves. Na maciez, o grupo de carne macia mostrou maiores valores de L* (32,29 ± 2,78) que o grupo de carne dura (29,10 ± 2,61). Por outro lado, maiores PT foram observadas em animais com carne dura em relação a animais com carne macia. Nos resultados de expressão gênica, o gene MYH7 não mostrou diferenças entre animais leves e pesados. Entretanto, a expressão dos genes MYH2 e MYH1 foi significativamente menor nos animais pesados em relação aos animais leves. Quanto à maciez da carne, a expressão dos três genes não diferiram significativamente entre grupos de carne dura e macia. Na expressão proteica, as três isoformas (MyHC-I, IIa e IIx), não mostraram diferença significativa entre animais leves e pesados. No entanto, as proporções da MyHC-I foram significativamente maiores no grupo de carne dura (16,51 ± 5,47) em relação ao grupo de carne macia (9,12 ± 3,16) e pelo contrário, as proporções da MyHC-IIa foram maiores no grupo de carne macia (73,78 ± 4,45) em relação ao grupo de carne dura (65,45 ± 8,79). A isoforma MyHC-IIx/d não mostrou efeito significativo sobre a maciez. Os resultados deste trabalho mostraram o potencial de aplicação do SNP g.98535683A>G:BTAU7 do gene CAST e da isoforma MyHC-IIa na seleção de animais para o melhoramento da maciez da carne de bovinos Nelore, além de, manifestar o diferencial de expressão dos genes MYH1 e MYH2 entre animais pesados e leves.

In order to study the potential of application of candidate genes in animal selection for breeding meat of Nellore cattle, this work had as main objectives: (1) Assess in Nellore cattle (Bos indicus) and crosses Nellore x Bos taurus the occurrence of associations between the g.98535683A>G:BTAU7 SNP in the CAST gene and traits of the meat produced and (2) quantify the gene and protein expression of myosin heavy chain in Nellore cattle with contrasting phenotypic traits of growth and meat tenderness. For the development of first objective, 500 animals were genotyped for the g.98535683A>G:BTAU7 SNP and phenotyped for shear force (SF), myofibrillar fragmentation index (MFI), ribeye area (RA), backfat thickness (BT) and total lipids (TL). Significant association between the SNP and meat tenderness was observed. The AA genotype showed the best values in relation to this trait. The differences found between genotypes AA and AG (AA - AG) were 0.19 kg and 5.31 for SF and MFI, respectively. The SNP did not show significant association with RA, BT and TL. For the execution of the second aim, 90 feedlot Nellore cattle were used. Considering the final slaughter weight (FW) and the SF of the 90 animals, 24 individuals with contrasting characteristics of weight and tenderness of meat were selected and divided into four experimental groups (6 animals / group). The groups corresponded to lightweight animals with tender meat (FW = 493.50 kg and SF = 3.76 kg), lightweight animals with tough meat (FW = 515.66 kg and SF = 8.06 kg), heavy animals with tender meat (FW = 604.33 kg and SF = 3.99) and heavy animals with tough meat (FW = 605.33 kg and SF = 7.83 kg). In each group, were evaluated phenotypic characteristics as MFI, RA, BT, TL, marbling índex (MI), instrumental color (L*, a*, b*) and cooking losses (CL). The expression analysis of the MYH7, MYH2 and MYH1 genes was performed by Real-Time PCR (RT-qPCR). The characterization and quantification of the MyHC isoforms (MyHC-I, MyHC-IIa and MyHC-IIx/d) was carried out by SDS-PAGE. In all analyzes (meat quality and gene and protein expression) there was no significant interaction between growth and meat tenderness. In the traits MFI, RA, BT, IM and TL it was not observed significant effect of the growth and the tenderness of meat. However, the heavy animals showed higher values of L*, a* and b* than lightweight animals. In the tenderness, the tender meat group showed higher values of the L* (32.29 ± 2.78) than the tough meat group (29.10 ± 2.61). On the other hand, higher CL were observed in animals with tough meat than animals with tender meat. In the results of gene expression, the MYH7 gene did not show differences between lightweight and heavy animals. However, the expression of the MYH2 and MYH1 genes was significantly lower in heavy animals than lightweight animals. As for meat tenderness, the expression of the three genes did not differ significantly between tough and tender meat groups. In the protein expression, the three isoforms (MHC-I, IIa and IIx), did not show significant difference between lightweight and heavy animals. Nevertheless, the MyHC-I proportions were significantly higher in the tough meat group (16.51 ± 5.47) than tender meat group (9.12 ± 3.16) and on the contrary, the proportions of the MyHC-IIa were higher in tender meat group (73.78 ± 4.45) than tough meat group (65.45 ± 8.79). The MyHC-IIx isoform did not show significant effect on tenderness meat. The results of this work showed the potential of application of the g.98535683A>G:BTAU7 SNP in gene CAST and the MyHC-IIa isoform in animal selection to improve meat tenderness of Nellore cattle, in addition, it showed the differential expression of MYH1 and MYH2 genes between heavy and lightweight animals

EFFECTS OF NUTRITIONAL PLANS AND GENETIC GROUPS ON QUANTITATIVE TRAITS OF PIGS

A seleção de genótipos para alto desempenho teve como consequência redução do teor gordura e perda na qualidade da carne. Uma alternativa para melhorar a qualidade da carne é o cruzamento de raças locais, como o Piau, com raças melhoradas como Duroc, Pietrain e Large White. Contudo, as diferenças nas taxas de crescimento e de deposição de gordura apresentadas pelos suínos indicam que os grupos genéticos tenham diferentes necessidades nutricionais. A genética e o ambiente são importantes na expressão das características de desempenho e qualidade da carne, principalmente quando há variações nas taxas de deposição de tecido magro e gordo. Essas variações podem causar interferência no perfil de expressão dos genes que atuam nas vias metabólicas ou hormonais das características relacionadas à qualidade da carne. Objetivou-se, com este trabalho, avaliar o efeito do grupo genético paterno (Piau, Base-Duroc e Pietrain) e dos planos nutricionais contendo diferentes níveis de lisina digestível (Baixo, Médio e Alto) sobre as características de desempenho, carcaça e qualidade da carne; o padrão de expressão gênica das isoformas da cadeia pesada da miosina (MyHC) nos músculos Longissimus e Psoas; e a expressão diferencial dos genes relacionados com o metabolismo lipídico (FAS, H-FABP, SCD, PRKAG1, PRKAG3 e HSL) no músculo Longissimus de suínos. Os machos castrados e as fêmeas cruzadas Pietrain e Duroc foram similares nas características de desempenho e carcaça e tiveram os melhores valores em comparação aos suínos cruzados Piau. Com relação à qualidade da carne, a perda por gotejamento foi maior nos machos castrados e fêmeas cruzadas Pietrain em comparação com os suínos cruzados Duroc e Pietrain. O consumo diário de lisina digestível dos animais foi maior no plano nutricional Alto, em relação aos planos nutricionais Médio e Baixo. A maioria das características de desempenho, carcaça e qualidade da carne avaliadas nos machos castrados e fêmeas não foram afetadas pelos planos nutricionais. Os níveis de expressão do H-FABP e SCD foram maiores nos suínos Duroc e Pietrain. Maior expressão do gene PRKAG3 foi observada nos machos castrados cruzados alimentados com o plano nutricional Baixo em comparação com os suínos alimentados com plano nutricional Médio e Alto. Houve maior expressão do gene MyHC IIb no músculo Longissimus dos suínos alimentados com os planos nutricionais contendo maiores níveis de lisina digestível em relação aos suínos cruzados que receberam plano nutricional contendo menores níveis de lisina digestível. Os níveis de expressão do gene MyHC IIb no músculo Longissimus foi maior nos machos castrados cruzados Duroc e Pietrain em comparação aos machos castrados cruzados Piau (P < 0,05). Em geral, os suínos cruzados Duroc e Pietrain tiveram melhor desempenho e rendimento de carcaça em comparação aos cruzados Piau. O atual estudo indica que o genótipo tem forte influencia sobre a deposição do conteúdo de gordura intramuscular, principalmente pela regulação da expressão gênica lipogênica intramuscular. A expressão diferencial das isoformas MyHC nos músculos podem ser os fatores mais importantes que influenciam o conteúdo de gordura intramuscular e a perda por gotejamento em suínos. Estes resultados podem fornecer informações valiosas para o entendimento das diferenças na qualidade da carne de diferentes grupos genéticos de suínos.

Selection of genotypes for high performance led to a fat level reduction and loss of meat quality as consequence. An alternative to improve meat quality is the crossbreeding of non-selected local pig breed, such as Piau, with improved breeds such as Duroc, Pietrain and Large White. However, growth rate and fat deposition differences in pigs indicate that genetic groups have different nutritional needs. Genetic and environment are important in expression of performance and meat quality traits, mainly when variations in deposition of lean and fat tissue rates are observed. These variations may affect genes expression profile that acts in metabolic or hormonal pathways of meat quality related traits. In this work, we aimed to evaluate the effects of paternal genetic group (Piau, Duroc-based and Pietrain) and nutritional plans with different digestible lysine levels (Low, Medium and High) on performance, carcass and meat quality traits; gene expression pattern of myosin heavy chain isoforms (MyHC) in Longissimus and Psoas muscles; and differential expression of lipid metabolism-related genes (FAS, H-FABP, SCD, PRKAG1, PRKAG3 and HSL) in Longissimus muscle of pigs. Pietrain and Duroc crossbred barrows and gilts were similar in performance and carcass traits and had greatest values compared to Piau crossbred pigs. Regarding the meat quality, drip loss was greater in Pietrain crossbred barrows and gilts compared to Duroc and Piau crossbred pigs. Daily digestible lysine intake was greater in High nutritional plan animals in relation to Medium and Low nutritional plans. Most of performance, carcass and meat quality traits evaluated in barrows and gilts were not affected by nutritional plans. Expression levels of H-FABP and SCD were higher in Duroc and Pietrain pigs. Higher expression of PRKAG3 gene in barrows fed with Low nutritional plan compared with pigs fed with Medium and High nutritional plan was observed. There was a higher expression of MyHC IIb gene in Longissimus muscle of crossbred barrows fed with greater digestible lysine levels compared to crossbred barrows that received nutritional plan with lower digestible lysine levels. The mRNA expression levels of MyHC IIb in Longissimus muscle was higher in Duroc and Pietrain crossbred compared to Piau crossbred barrows (P < 0.05). In general, Duroc and Pietrain crossbred pigs had greater performance and carcass rate compared to Piau crossbred pigs. The present study indicated that genotype has a strong effect on intramuscular fat content deposition mainly by up-regulation of intramuscular lipogenic gene expression. The differentially expression of MyHC isoforms in muscles may be the most important factors affecting intramuscular fat content and drip loss in pig. These results may provide valuable information to the understanding of meat quality differences in divergent genetic groups of pigs.

Estudo comparativo da contratilidade e das propriedades passivas do músculo diafragma do mdx, mdx/utrn+/- e C57Bl10 com diferentes idades

A Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) é uma importante e severa doença músculo degenerativa causada pela mutação do gene da distrofina. Na ausência da distrofina, o sarcolema das células torna-se vulnerável devido a danos induzidos por ciclos contínuos de degeneração e regeneração. Consequentemente, a força muscular diminui e as miofibras são substituídas por tecido fibrótico. Dentre os músculos esqueléticos afetados, o diafragma, destaca-se por ser o principal músculo respiratório acometido na DMD. Similarmente a DMD humana, o modelo mdx, apesar de exibir um fenótipo suave, este apresenta um severo acometimento no músculo diafragma, assim como observado em nosso estudo prévio, aqui descritos. Entretanto, este é considerado um modelo pobre, porque ele não consegue reproduzir, o fenótipo severo observado nos pacientes. O camundongo mdx/utrn+/- (dystrophin-null heterozygous urtrophin mice) com haploinsuficiência da utrofina, tem sido hipotetizado como um modelo com um fenótipo intermediário, ganhando popularidade nos laboratórios. Porém, infelizmente, até os dias de hoje, não existe evidências fisiológicas e funcionais suficientes que justifiquem a escolha deste modelo para as terapias experimentais. Portanto, neste estudo objetivou-se esclarecer a real contribuição do camundongo mdx/utrn+/- para as terapias experimentais. Para testar esta hipótese, elegeu-se analisar a morfologia e a função muscular do músculo diafragma do mdx e mdx/utrn+/- com 2 e 6 meses de idade. Para elucidar a morfopatologia do diafragma foi utilizado microscopia de luz e análises de imunohistoquímica. A função muscular do diafragma foi analisada através da avaliação das propriedades contráteis e passivas. A forma de como executar a função muscular do diafragma foi atualizada através da criação de dois clips, os quais permitiram avaliar o músculo de forma segura. A adaptação de um novo protocolo de avaliação da função muscular mostrou-se eficaz e capaz de ser utilizada para avaliar as propriedades contráteis e passivas. Aos 2 meses de idade, as colorações de Hematoxilina e eosina, Tricômio de Masson e Alizarina vermelha revelaram que o mdx/utrn+ apresentou maior quantidade de infiltrado inflamatório, tecido conectivo e áreas de calcificação do que o mdx. Já aos 6 meses de idade, não houve diferença morfológica entre o mdx e o mdx/utrn+/-. Na análise de imunohistoquímica para eMyHC (miosina embrionária de cadeia pesada eMyHC), não foi observada diferença entre o mdx e o mdx/utrn+/-aos 2 e 6 meses de idade. Entretanto, os resultados obtidos em ambas as idades, demonstraram a presença de regeneração muscular. Na marcação da proteína distrofina e utrofina, as células inflamatórias e os tipos de fibras musculares também foram detectados por imunohistoquímicas. A marcação da proteína distrofina, mostrou-se ausente no mdx e mdx/utrn+/- com 2 e 6 meses de idade. A marcação da proteína utrofina mostrou-se mais evidente no mdx do que no mdx/utrn+/-, evidenciando a haploinsuficiência nos mdx/utrn+/-. Macrófagos foram encontrados em maior quantidade no camundongo mdx/utrn+/- com 2 e 6 meses do que no mdx, mostrando que o processo de inflamação encontrou-se aumentado nos mdx/utrn+/- Neutrófilos encontraram-se aumentados no mdx/utrn+/- com 2 meses, evidenciando a fase aguda da inflamação. Entretanto nos animais de 6 meses, quantidades semelhantes de neutrófilos foram detectadas no mdx/utrn+/- e mdx. Fibras marcadas pelas isoformas MyHC- I, IIa e IIx foram detectadas em maior porcentagem no BL10 do que no mdx e mdx/utrn+/- aos 2 meses de idade, demonstrando que a diminuição destas, no mdx e mdx/utrn+/- pode colaborar para a diminuição da força nestes animais. Aos 6 meses, porcentagem similares de MyHC- I foram detectadas no BL10, mdx e mdx/utrn+/-. MyHC-IIa não foram encontradas nos animais de 6 meses. MyHC-IIx encontraram-se em maior porcentagem no BL10 do que no mdx e mdx/utrn+/- com 6 meses de idade. Baixa porcentagem de isoformas de MyHC- I/IIa foram detectadas no mdx e mdx/utrn+/- aos 2 e 6 meses de idade e encontraram-se ausentes no BL10 de mesma idade. Fibras marcadas pela isoformas MyHC-IIa/IIx apresentaram-se aumentadas no mdx e mdx/utrn+/- aos 2 e 6 meses, podendo este aumento auxiliar na manutenção da força muscular. MyHC-IIx-IIb foram detectadas em maior porcentagem no mdx, reduzidas no BL10 e ausentes no mdx/utrn+/- com 2 meses de idade. Estas não foram identificadas nos animais de 6 meses. As propriedades contráteis do camundongo mdx/utrn+/- aos 2 meses de idade apresentaram-se mais comprometidas do que no mdx. Pt (contração isométrica máxima), sPt (força específica de Pt), Po (Força tetânica máxima) e sPo (força específica de Po) exibiramse mais afetadas no mdx/utrn+/- do que no mdx. Porém aos 6 meses de idade não houve diferença significativa de força entre o mdx/utrn+/- e o mdx. As propriedades passivas do mdx/utrn+/- com 2 meses apresentou mais acometida do que no mdx. Entretanto, aos 6 meses, esta propriedade não se diferenciou entre o mdx/utrn+/- e o mdx. Em suma, conclui-se que o mdx/utrn+/- representa um modelo superior ao mdx com 2 meses de idade, uma vez que este apresentou morfologia, propriedades contráteis e passiva mais comprometidas do que no mdx. Aos 6 meses as propriedades contráteis e passivas e morfológicas do camundongo mdx/utrn+/- não se diferenciou do mdx. Sugerimos que o uso do mdx/utrn+/- com 2 meses de idade pode potencializar os testes pré-clinicos.

Duchenne Muscular Dystrophy (DMD) is an important and severe muscle wasting disease caused by a dystrophin mutation. In the absence of dystrophin, sarcolemma becomes vulnerable to damage due a damage caused by continuous cycles of degenerationregeneration. Consequently, the muscle force reduces and the myofibers are replaced by fibrotic tissue. Between the skeletal muscles, the diaphragm is main affected muscle in DMD. Similarly, to a human DMD, despite the mdx model exhibit a milder phenotype, he presents the diaphragm muscle severely affected, as it was observed in our previous study, here described. However, it is also considered a poor model because it cannot reproduce the severe dystrophic phenotype seen in patients. An utrophin heterozygous utrophin mice (mdx/utrn+/- ), has been hypothesized as an intermediate model and they are gaining popularity in many laboratories. However unfortunately there is currently, no physiological enough evidence to justify the choice of this model for experimental therapies. Therefore, in this study, we aimed to elucidate the real contribution of the mdx/utrn+/- for the experimental therapies. To test this hypothesis, we evaluated the diaphragm muscle morphology and muscle function of the mdx and mdx/utrn+/- with 2 and 6 months. To elucidate the diaphragm morphology, we used light microscopy techniques and immunostaining analysis. Muscle function was evaluated through the active and passive properties. The clamps allowed to safe evaluate the diaphragm function. The update of the new protocol was efficient and able to evaluate the active and passive properties. At 2 months, the Hematoxylin and eosin, Masson Thrichome, Alisarine red, revealed that the mdx/utrn+ showed more inflammatory infiltrate, connective tissue and more areas with calcification than mdx model. At 6 months, there was no significant differences between mdx and mdx/utrn+. In the immunohistochemical analysis for eMyHC (embryonic myosin heavy chain), there was no difference between mdx and mdx/utrn+/- at 2 and 6 months. However, the results obtained in both ages, showed muscle regeneration Marking for dystrophin and utrophin protein, inflammatory cells and fiber type were also detected by immunohistochemistry. Marking for dystrophin was absent in mdx and mdx/utrn+/- with 2 and 6 months. Marking for utrophin protein was more evident in mdx than in mdx/utrn+/- mice, evidencing the utrophin haploinsufficiency in mdx/utr+/-. Macrophages were increased in mdx/utrn+/- than in mdx mice with 2 and 6 months, showing an inflammation. Neutrophils were increased in mdx/utrn+/- at 2 month-old, evidencing the acute phase of inflammation. However, at 6 months similar amounts of neutrophil were detected in mdx and mdx/utrn+/-. Fibers marked by MyHC-I, IIa and IIx were detected in a higher percentage in BL10 than in mdx and mdx/utrn+/- at 2 months, showing that this change could collaborate with force decrease in these animals. At 6 months, similar percentage of MyHC-I was detected in BL10, mdx and mdx/utrn+/-. MyHC-IIa animals were not found at 6 months. Higher percentage of MyHC-IIx was found in BL10 than in mdx and mdx/utrn+/- with 6 months. Low percentage of MyHC- I/IIa was detected in mdx and mdx/utrn+/- at 2 and 6 months and it was absent in BL10 in the same age. Fibers marked by MyHC-IIa/IIx isoforms were increased in mdx and mdx/utrn+/- with 2 and 6 months. These changes could help to maintain the muscle force. MyHC-IIx-IIb was detected in higher percentage in mdx, reduced the BL10 and it was absent in mdx/utrn+/- with 2 months. MyHC-IIx-IIb was not identified in the animals with 6 months. Contractile properties in mdx/utrn+/- at 2 months were more affected than in mdx mice. Pt (maximal twitch force), sPt (specific twitch force), Po (maximal tetanic force) and sPo (specific tetanic force) showed more severely affected in mdx/utrn+/- than in mdx mice. At 6 months there were no significant difference in Pt, sPt, Po and sPo between mdx/utrn+/- and mdx mice. Passive properties of mdx/utrn+/- with 2 months presented more affected than the in mdx mice. However, at 6 months, this property did not differ between mdx/utrn+/- and mdx mice. In summary, we concluded that the mdx/utrn+/- at 2 month represent a superior model than the mdx with matched-age, since they presented morphology and contractile and passive properties more compromised than mdx mice. At 6 months, the mdx/utrn+/-contractile and the passive properties and morphology did not differ from the mdx mice age-matched. We suggest that the use of mdx/utrn+/- with 2 months-old would represent would represent a better model to test the potential of the therapies than mdx mice.

ESTUDO MIOGÊNICO DE PROGÊNIES DE MATRIZES SUÍNAS: EFEITO DO CLORIDRATO DE RACTOPAMINA E DO GRUPO GENÉTICO

Objetivou-se com este estudo analisar o efeito do cloridrato de ractopamina (RAC) administrada durante a gestação, na hiperplasia miogênica fetal e na expressão gênica de fatores miogênicos, do receptor adrenérgico 2 (ADRB2), genes da cadeia pesada da Miosina e parâmetros qualitativos de carne. Foram utilizados 14 matrizes suínas, da raça Piau (n=6) e de linhagem comercial (n=8), recebendo dieta com 20ppm RAC durante o período de 30 aos 60 dias de gestação. Aos 60 dias de gestação foram abatidas 6 matrizes (3 comerciais (2 com RAC e 1 controle)) e 3 Piaus (2 com RAC e 1 controle)) e coletados 6 fetos (3 machos e 3 fêmeas) por matriz (n=36 fetos). Foram retiradas amostras do músculo Longissímus dorsi (LD) para análise histológica e perfil de expressão gênica. As demais matrizes foram acompanhadas até o momento do parto, sendo suas progênies monitoradas até atingirem 140 dias de idade, e então abatidos 18 animais Piau, (6 machos e 6 fêmeas com RAC e 3 machos e 3 fêmeas correspondente ao tratamento materno sem RAC) e 30 animais de linhagem comercial (3 machos e 3 fêmeas correspondentes ao tratamento materno sem RAC) foram retiradas amostras do músculo LD para análise histológica e perfil de expressão gênica. A pós 24 horas de resfriamento das carcaças, foram coletadas amostras de carne da região das três últimas costelas para avaliação de parâmetros qualitativos da carne. A RAC influenciou o número de fibras musculares primárias nos fetos de 60 dias e influenciou o número de fibras musculares nos animais aos 140 dias de idade com efeito mais acentuado em machos da raça Piau, com incremento de 30% no número total de fibras e redução no diâmetro das fibras musculares em média de 14,4%. Não se observou diferenças na expressão gênica do receptor 2- (ADRB2) entre os tratamentos maternos (com e sem RAC), sugerindo que a ação da RAC parece ser mediada de forma indireta, possivelmente maior aporte de glicose poderia ser destinado aos fetos pela síntese de novo a partir de compostos lipídicos da fêmea gestante, promovendo a liberação de IGF fetal que tem um efeito direto sobre os mioblastos com consequente aumento no número de fibras musculares. A RAC não interferiu nos parâmetros qualitativos de carne (extrato etéreo e força de cisalhamento) e não foram observadas diferenças de expressão para os genes das isoformas da cadeia pesada da Miosina (MyHC), (MYHC IIA), (MYHC IIB), (MYHC I) e (MYHC2X).

The objective with this study was to analyze the effect of ractopamine hydrochloride (RAC) administered during pregnancy, in fetal hyperplasia, in gene expression of myogenic factors and qualitative parameters of meat. Were used 14 sows, of Piau race (n = 6) and commercial line (n = 8) receiving a diet with 20ppm RAC during the period 30 to 60 days of gestation. With 60 days of gestation were slaughtered 6 sows (3 commercials lines (2 with RAC and 1 control)) and 3 Piaus (2 with RAC and 1 control)) and collected six fetuses (3 males and 3 females) per sows (n = 36 fetuses). Samples were taken from Longissimus dorsi (LD) for histological analysis and gene expression profile. The other sows were maintained up until the moment of birth, their progeny were monitored until they reach 140 days of age, and slaughtered 18 Piau animals (6 males and 6 females with RAC and 3 males and 3 females corresponding to maternal treatment without RAC) and 30 commercial animals (3 males and 3 females corresponding to maternal treatment without RAC) samples were taken from the LD muscle for histological analysis and gene expression profile. After 24 hours cooling of carcasses, meat samples were colected from the region the three last ribs for evaluation of qualitative parameters of meat. The RAC influenced the number of primary muscle fibers in the fetuses of 60 days of age and influenced the number of muscle fibers in animals at 140 days of age with greater effect in males Piau breed, an increase of 30% in total number of muscle fibers and reduction of 14.4% in the diameter of muscle fibers on average. There was no differences in gene expression 2 receptor (ADRB2) between maternal treatments (with and without RAC), suggesting that the action of the RAC is mediated indirectly, possibly with greater glucose input could be designed to fetuses, by synthesis again from lipid compounds of the pregnant female, with fetal release of IGF that has a direct effect on the myoblasts with a consequent increase in the number of muscle fibers. The RAC did not affect meat quality parameters (ether extract and shear force) and did not were observed expression differences for genes of isoforms of myosin heavy chain (MyHC), (MyHC IIA), (IIB MyHC) (MyHC I) and (MYHC2X).

ALT-C, a disintegrin-like Cys-rich protein from Bothrops alternatus, increases skeletal myoblast viability

ALT-C, an ECD motif (glutamic acid, cysteine, aspartic acid) disintegrin from Bothrops alternatus snake venom, induces 21 integrin-mediated signaling and neutrophil chemotaxis. In vitro, in human umbilical vein endothelial cells (HUVEC), ALT-C induces cell proliferation, thus showing an interesting potential for tissue regeneration studies. This work aimed to evaluate the influence of ALT-C in myoblast viability and differentiation. Myoblasts were obtained from hind limb muscles of 3 to 4-day old Wistar rats. The cells were incubated with ALT-C at different concentrations and incubation periods were followed by total RNA isolation. cDNA synthesis and real time polymerase chain reaction (PCR) were performed with primers of myoD as well as of both (slow and fast) myosin heavy chain isoforms (MHC). ECD-disintegrin increased myoblast viability in a dose-dependent way, mostly with 50 to 100 nM concentrations, and such effect was more prevalent after 48 hours. No changes in gene expression of both MHC isoforms were observed in ALT-C-treated cells. MyoD expression was not detected, which suggests that myoblasts were in mature stages. Protease activity and cytokine array tested in a medium of 50 nM ALT-C-treated cells after 48 hours were not different from controls. In conclusion, it was shown that myoblats are sensitive to ALT-C indicating an integrin-mediated intracellular signaling that increases cell viability.

Respostas produtivas e expressão gênica induzidas por períodos de fornecimento de ractopamina para suínos em terminação / Production responses and gene expression induced by ractopamine feeding duration for finishing pigs

O agonista beta-adrenérgico ractopamina (RAC) modifica a composição da carcaça suína por aumentar a massa muscular e reduzir a deposição de gordura. O objetivo neste estudo foi avaliar os efeitos do tempo de fornecimento de RAC sobre o desempenho, concentração de ureia plasmática (CUP), características de carcaça e expressão gênica dos receptores beta- adrenérgicos (beta-AR) e das isoformas da cadeia pesada de miosina (MyHC) em suínos em terminação. Oitenta suínos, machos castrados (PV inicial = 69,42 ± 1,24 kg), foram utilizados em um experimento em blocos completos casualizados com cinco tratamentos, oito repetições por tratamento e dois animais por unidade experimental (baia). Os tratamentos consistiram de rações sem RAC (controle) ou com 10 ppm de RAC fornecidas por 7, 14, 21 ou 28 dias préabate. O PV individual e o consumo de ração por baia foram obtidos para determinar o ganho diário de peso (GDP), o consumo diário de ração (CDR) e a conversão alimentar (CA). Amostras de sangue foram coletadas para determinação da CUP. No final do experimento, os animais (PV final = 102,46 ± 1,44 kg) foram abatidos e amostras de pelos e do músculo Longissimus dorsi coletadas. As carcaças foram avaliadas 24 horas post-mortem. As amostras de pelos foram utilizadas para detecção da mutação no gene do receptor de rianodina do tipo 1 (RYR1). A expressão gênica dos beta-AR (subtipos beta1 e beta2) e das isoformas MyHC (I, IIa, IIx/d e IIb) foi quantificada nas amostras de músculo. As análises estatísticas foram realizadas apenas com os animais homozigotos dominantes para a mutação no gene do RYR1. O aumento no período de fornecimento de RAC não afetou (P > 0,05) o PV final, o GDP e o CDR, porém resultou em melhora linear (P 0,05) sobre a expressão gênica dos beta1-AR e das isoformas MyHC IIa e MyHC IIx/d, porém o aumento no período de fornecimento de RAC tendeu a reduzir linearmente (P = 0,08) a expressão gênica dos beta2-AR. Embora os níveis de RNAm da isoforma MyHC I tenham sido reduzidos linearmente (P < 0,01), a expressão gênica da isoforma MyHC IIb aumentou linearmente (P < 0,01) com o aumento na duração do tratamento com RAC. Portanto, as melhores respostas de desempenho e carcaça ocorreram quando a RAC foi fornecida por 21 e 28 dias, respectivamente. Além disso, o agonista alterou a expressão gênica das isoformas MyHC, e é possível que a ação da RAC esteja relacionada com a população de beta2-AR

The beta-adrenergic agonist ractopamine (RAC) modifies the swine carcass composition by increasing muscle mass and decreasing fat deposition. The objective in this study was to evaluate the effects of RAC feeding duration on performance, plasma urea nitrogen (PUN) concentration, carcass traits, and gene expression of beta-adrenergic receptors (beta-AR) and myosin heavy chain (MyHC) isoforms in finishing pigs. Eighty barrows (initial BW = 69.42 ± 1.24 kg) were used in a randomized complete block design experiment with five treatments, eight replicates per treatment, and two animals per experimental unit (pen). The dietary treatments consisted of diets containing no RAC (control) or 10 ppm RAC fed for 7, 14, 21, or 28 days before slaughter. Individual pig BW and pen feed disappearance were obtained to determine average daily gain (ADG), average daily feed intake (ADFI), and feed to gain ratio (F:G). Blood samples were collected for determination of PUN concentrations. At the end of the experiment, pigs (final BW = 102.46 ± 1.44 kg) were slaughtered and hair and Longissimus dorsi muscle samples collected. The carcasses were evaluated 24 hours postmortem. Hair samples were used to detect the mutation of the ryanodine receptor type 1 (RYR1) gene. Gene expression of beta-AR (beta1- and beta2-subtypes) and MyHC isoforms (I, IIa, IIx/d, and IIb) was quantified in the muscle samples. Statistical analyses were performed using only the homozygous dominant pigs for the RYR1 gene mutation. Increasing RAC feeding period did not affect (P > 0.05) final BW, ADG, and ADFI, but resulted in a linear improvement (P 0.05) were detected for beta1-AR and for isoforms of MyHC IIa and MyHC IIx/d gene expression, but increasing RAC feeding period tended to linearly decrease (P = 0.08) beta2-AR gene expression. Even though mRNA levels of MyHC I isoform decreased linearly (P < 0.01), gene expression of MyHC IIb isoform increased linearly (P < 0.01) as RAC treatment duration increased. Therefore, greater growth and carcass responses occurred when RAC was fed for 21 and 28 days, respectively. Furthermore, the agonist altered the MyHC gene expression and the RAC action may be related to the beta2-AR population

Respostas produtivas e expressão gênica induzidas por períodos de fornecimento de ractopamina para suínos em terminação / Production responses and gene expression induced by ractopamine feeding duration for finishing pigs

O agonista beta-adrenérgico ractopamina (RAC) modifica a composição da carcaça suína por aumentar a massa muscular e reduzir a deposição de gordura. O objetivo neste estudo foi avaliar os efeitos do tempo de fornecimento de RAC sobre o desempenho, concentração de ureia plasmática (CUP), características de carcaça e expressão gênica dos receptores beta- adrenérgicos (beta-AR) e das isoformas da cadeia pesada de miosina (MyHC) em suínos em terminação. Oitenta suínos, machos castrados (PV inicial = 69,42 ± 1,24 kg), foram utilizados em um experimento em blocos completos casualizados com cinco tratamentos, oito repetições por tratamento e dois animais por unidade experimental (baia). Os tratamentos consistiram de rações sem RAC (controle) ou com 10 ppm de RAC fornecidas por 7, 14, 21 ou 28 dias préabate. O PV individual e o consumo de ração por baia foram obtidos para determinar o ganho diário de peso (GDP), o consumo diário de ração (CDR) e a conversão alimentar (CA). Amostras de sangue foram coletadas para determinação da CUP. No final do experimento, os animais (PV final = 102,46 ± 1,44 kg) foram abatidos e amostras de pelos e do músculo Longissimus dorsi coletadas. As carcaças foram avaliadas 24 horas post-mortem. As amostras de pelos foram utilizadas para detecção da mutação no gene do receptor de rianodina do tipo 1 (RYR1). A expressão gênica dos beta-AR (subtipos beta1 e beta2) e das isoformas MyHC (I, IIa, IIx/d e IIb) foi quantificada nas amostras de músculo. As análises estatísticas foram realizadas apenas com os animais homozigotos dominantes para a mutação no gene do RYR1. O aumento no período de fornecimento de RAC não afetou (P > 0,05) o PV final, o GDP e o CDR, porém resultou em melhora linear (P < 0,01) na CA. Melhoras (P < 0,05) nas médias semanais de GDP e CA foram observadas durante os primeiros 21 dias de fornecimento de RAC, no entanto, o crescimento animal declinou (P < 0,05) na 4ª semana de tratamento. A CUP apresentou efeito quadrático (P < 0,01) com o aumento na duração do fornecimento de RAC. Houve aumento linear (P <= 0,01) no peso da carcaça quente, na profundidade do músculo Longissimus dorsi, na área de olho de lombo e na relação carne:gordura com o aumento na duração do tratamento com RAC. Não foram detectados efeitos da RAC (P > 0,05) sobre a expressão gênica dos beta1-AR e das isoformas MyHC IIa e MyHC IIx/d, porém o aumento no período de fornecimento de RAC tendeu a reduzir linearmente (P = 0,08) a expressão gênica dos beta2-AR. Embora os níveis de RNAm da isoforma MyHC I tenham sido reduzidos linearmente (P < 0,01), a expressão gênica da isoforma MyHC IIb aumentou linearmente (P < 0,01) com o aumento na duração do tratamento com RAC. Portanto, as melhores respostas de desempenho e carcaça ocorreram quando a RAC foi fornecida por 21 e 28 dias, respectivamente. Além disso, o agonista alterou a expressão gênica das isoformas MyHC, e é possível que a ação da RAC esteja relacionada com a população de beta2-AR (AU)

The beta-adrenergic agonist ractopamine (RAC) modifies the swine carcass composition by increasing muscle mass and decreasing fat deposition. The objective in this study was to evaluate the effects of RAC feeding duration on performance, plasma urea nitrogen (PUN) concentration, carcass traits, and gene expression of beta-adrenergic receptors (beta-AR) and myosin heavy chain (MyHC) isoforms in finishing pigs. Eighty barrows (initial BW = 69.42 ± 1.24 kg) were used in a randomized complete block design experiment with five treatments, eight replicates per treatment, and two animals per experimental unit (pen). The dietary treatments consisted of diets containing no RAC (control) or 10 ppm RAC fed for 7, 14, 21, or 28 days before slaughter. Individual pig BW and pen feed disappearance were obtained to determine average daily gain (ADG), average daily feed intake (ADFI), and feed to gain ratio (F:G). Blood samples were collected for determination of PUN concentrations. At the end of the experiment, pigs (final BW = 102.46 ± 1.44 kg) were slaughtered and hair and Longissimus dorsi muscle samples collected. The carcasses were evaluated 24 hours postmortem. Hair samples were used to detect the mutation of the ryanodine receptor type 1 (RYR1) gene. Gene expression of beta-AR (beta1- and beta2-subtypes) and MyHC isoforms (I, IIa, IIx/d, and IIb) was quantified in the muscle samples. Statistical analyses were performed using only the homozygous dominant pigs for the RYR1 gene mutation. Increasing RAC feeding period did not affect (P > 0.05) final BW, ADG, and ADFI, but resulted in a linear improvement (P < 0.01) in F:G. Average weekly improvements (P < 0.05) in ADG and F:G were observed during the first 21 days of RAC feeding, however, animal growth declined (P < 0.05) in the 4th week of treatment. The PUN concentrations showed a quadratic effect (P < 0.01) as RAC feeding duration increased. There were linear increases (P <= 0.01) in hot carcass weight, Longissimus dorsi muscle depth, loin eye area, and muscle to fat ratio as RAC treatment duration increased. No effects of RAC feeding (P > 0.05) were detected for beta1-AR and for isoforms of MyHC IIa and MyHC IIx/d gene expression, but increasing RAC feeding period tended to linearly decrease (P = 0.08) beta2-AR gene expression. Even though mRNA levels of MyHC I isoform decreased linearly (P < 0.01), gene expression of MyHC IIb isoform increased linearly (P < 0.01) as RAC treatment duration increased. Therefore, greater growth and carcass responses occurred when RAC was fed for 21 and 28 days, respectively. Furthermore, the agonist altered the MyHC gene expression and the RAC action may be related to the beta2-AR population (AU)

Resposta das fibras musculares esqueléticas de equinos da raça puro sangue árabe ao treinamento de enduro

As fibras musculares esqueléticas são entidades versáteis, capazes de alterar seus fenótipos de acordo com a demanda energética. Para avaliar os efeitos do exercício de enduro no músculo esquelético, foram utilizados neste estudo 36 equinos da raça Puro Sangue Árabe divididos em dois grupos: treinados e não treinados para enduro. Foram obtidos fragmentos musculares da região profunda do músculo glúteo médio e processados para técnicas histoquímicas e imunoistoquímica, utilizando-se anticorpos específicos contra isoformas de cadeia pesada de miosina (MyHC) lenta e rápida. As fibras identificadas pela histoquímica e imunoistoquímica foram analisadas uma a uma. Determinou-se a porcentagem dos diferentes tipos de fibras musculares, e avaliou-se que, a porcentagem das fibras do tipo IIA foi significativamente mais alta do que a porcentagem das fibras dos tipos I e IIX no grupo não treinado (P<0,05). Em contra partida, a porcentagem das fibras do tipo I foi significativamente mais alta do que a porcentagem das fibras dos tipo IIA e IIX no grupo treinado (P<0,05). Também foram analisados, a média da área de corte transversal e o menor diâmetro da fibra e observou-se que, a média de corte transversal das fibras do tipo IIX foi significativamente maior comparada à média de corte de transversal das fibras dos tipos I e IIA em ambos os grupos. Em conclusão pode-se afirmar que, o exercício de enduro em equinos aumenta a população das fibras de contração lenta, em detrimento da população de fibras de contração rápida

The skeletal muscle fibers are versatile entities capable to change their phonotype according to energy demand. To evaluate the effects of exercise over equine skeletal muscle in this study, 36 Arabian horses divided in 2 groups trained and untrained for endurance were used. The samples was obtained from de deep region of the gluteus medius muscle and processed for histochemistry and immunohistochemistry using specific monoclonal antibodies to selected fast and slow isoforms myosin heavy chain (MyHC). The histochemical and immunohistochemical categorization of the muscle fiber types were compared fiber by fiber. It was analyzed the percentage of different fiber types where, in the untrained group, the percentage of the fiber type IIA was higher significantly than the percentage of fiber types I and IIX (P<0.05). Unlike, the group trained showed a higher proportion of fiber type I than the fiber type IIX (P<0.05). The cross section area and lesser fiber diameter were also analyzed, and showed that, CSA of fiber type IIX was higher significantly than fibers I and IIA (P<0.05) in both groups. In conclusion, endurance exercise in equines increase the population of slow-twitch fibers in detriment of fast-twitch fibers

Expressão gênica e protéica de isoformas de cadeia pesada de miosina e maciez da carne de bovinos de diferentes grupos genéticos

Sabendo que o processo de transformação do músculo em carne no estágio postmortem é largamente governado pela proporção de distintos tipos de fibras, e tendo em vista a necessidade de suprir as demandas do setor da pecuária bem como as exigências do consumidor por um produto de maior qualidade, inclusive da carne, o presente projeto objetivou relacionar a maciez da carne do músculo Longissimus dorsi (LD) com a expressão gênica e protéica das isoformas da cadeia pesada da miosina (MHC) em dois grupos genéticos de bovinos. Foram analisados 28 bovinos jovens de dois grupos genéticos, 14 Nelores e 14 Canchins. Os animais receberam a mesma dieta, o mesmo manejo no mesmo ambiente, com a finalidade de mantê-los no mesmo estado fisiológico. Atingindo o tempo pré-estabelecido de confinamento de 140 dias, os animais foram abatidos e amostras do músculo LD foram coletadas para análise da maciez da carne e também para a quantificação das expressões gênicas e protéicas das isoformas de MHC através das técnicas de RT-qPCR e de separação eletroforética (SDS-PAGE) respectivamente. O grupo Canchim apresentou maior maciez da carne em relação ao grupo Nelore em ambas as metodologias utilizadas, força de cisalhamento e índice de fragmentação miofibrilar, bem como uma menor expressão gênica da isoforma de MHC 2X. Foi verificada uma correlação negativa da expressão das isoformas 2A e 2X e uma correlação positiva da expressão da isoforma de MHC Slow com a maciez da carne nos dois grupos genéticos. Os resultados sugerem que a menor maciez da carne do grupo Nelore em relação ao grupo Canchim possa estar relacionada com a maior expressão gênica da isoforma de MHC 2X no grupo Nelore

Knowing that the meat tenderness process that turns muscle in meat on postmortem are largely governed by the proportion of different fiber types, and in view of the need to supply the needs of livestock industry and consumer demands for a higher quality product, including meat, this project aimed to relate meat tenderness of Longissimus dorsi muscle (LD) with gene and protein expression of myosin heavy chain (MHC) isoforms in two genetic groups of cattle. Twenty-eight steers of two genetic groups, 14 Nellores and 14 Canchins were used. The animals received the same feed, the same management in the same environment, in order to keep them in the same physiological state. After 140 days of feedlot, the animals were slaughtered and LD muscle samples were collected for meat tenderness analysis and also for gene and protein expression quantification of MHC isoforms using RT-qPCR and electrophoretic separation (SDS-PAGE) technique, respectively. The Canchim group had better meat tenderness in relation to Nellore group in both methodologies used, shear force and myofibrillar fragmentation index and lower MHC 2X isoform gene expression. It was observed a negative correlation between 2A and 2X isoforms expression and a positive correlation of MHC Slow isoform expression to meat tenderness in the two genetic groups. The results suggest that lower meat tenderness of Nellore group in relation to Canchim group may be related to higher gene expression of MHC 2X isoform in Nellore group

Caracterização histológica e bioquímica dos músculos longissimus dorsi e semitendinosus de bubalinos mediterrâneo abatidos em diferentes pesos

Sabendo-se do grande potencial dos bubalinos como produtores de carne e da importância da análise das fibras musculares para a caracterização da qualidade da carne, objetivou-se neste estudo avaliar as isoformas da miosina de cadeia pesada (MyHC) e os tipos de fibras dos músculos Longissimus dorsi (LD) e Semitendinosus (ST) de 28 bubalinos Mediterrâneo não-castrados e a possível modulação de acordo com os diferentes pesos de abate (450, 480, 510 e 540 kg). Amostras dos músculos foram coletadas e submetidas às técnicas de eletroforese (SDS-PAGE), m-ATPase e NADH-TR. Foram analisadas a porcentagem relativa das isoformas de MyHC, assim como, frequência, área e diâmetro das fibras musculares. Constatou-se que bubalinos Mediterrâneo não possuem a isoforma MyHC IIb, apresentando somente três isoformas de MyHC (IIa, IIx/d e I), cujas porcentagens não variaram significativamente (P > 0,05) entre os pesos de abate. A presença de fibras musculares híbridas (IIA/X) nos músculos LD e ST permitiu a classificação dos tipos de fibras pela atividade contrátil, em fast e slow. Para ambos os músculos, a frequência foi maior para as fibras fast em todas as categorias avaliadas, porém houve diferença (P < 0,05) na frequência dos tipos de fibras dos músculos LD e ST de acordo com os pesos de abate. Os animais abatidos aos 540 kg obtiveram maiores valores para área e diâmetro das fibras, tanto para o LD quanto para o ST. O músculo ST apresentou maiores valores de área e diâmetro que o músculo LD para todos os pesos de abate avaliados, revelando o crescimento mais tardio

Knowing of the great productive potential of the water buffalo as meat producer and of the importance of the research of muscle fiber types for the characterization of the meat quality, the aim of the study was to evaluate Myosin Heavy Chain Isoforms (MyHC) and the muscle fiber types of Longissimus dorsi (LD) and Semitendinosus (ST) muscles of 28 Mediterranean buffaloes not-castrated and its possible modulation according with the different slaughter weights (450, 480, 510 and 540 kg). Samples of the muscles were collected and submitted the electrophoresis (SDS-PAGE), m- ATPase and NADH-TR techniques. The relative percentage of isoforms MyHC were measured, as well as, frequency, area and diameter of muscle fiber types. The absence of MyHC IIb isoform in Mediterranean buffaloes was evidenced, which had only three MyHC isoforms (IIa, IIx/d and I), whose percentage had not varied significantly (P > 0.05) between the slaughter weights. The presence of hybrid fibers (IIA/X) in muscles LD and ST allowed to the classification of the fiber types for a contraction activity, in fast and slow. For both muscles, the frequency was higher for fiber fast in all the evaluated categories, however had differences (P < 0.05) in the frequency of muscle fiber types LD and ST in the slaughter weights evalueted. The animals of slaughter weight 540 kg showed higher values for area and diameter of the fibers, as much for the LD as well as the ST. Muscle ST presented greater values of area and diameter then muscle LD for all slaughtered weights evaluated, disclosing the more delayed growth

Pectoralis and semimembranosus muscle fiber alterations in migrating bird (Branta leucopsis) during embryonic, neonatal and adult stages

Some migrating birds, although young, develop musculature capable of sustaining prolonged flights. Such physical capacitation involves muscle fibers alterations which occur in a short space of time between hatching and migration. Considering that myosin is the major contractile protein of the muscle fiber, the myosin heavy chain (MHC) behaviour in pectoralis and semimembranosus muscles of a migratory bird (barnacle goose - Branta leucopsis Bechstein) is evaluated in this paper, using different monoclonal antibodies. The EB165 and B103 monoclonal antibodies were used for the immunocytochemical recognition of MHC isoforms of fast-twitch fibers of two populations (captive and wild) of the barnacle goose during different stages of development. Distinct fiber types of the pectoralis and semimembranosus muscles were recognized through variations in the reactions of the antibodies with the MHC during the embryonic, neonatal and adult stages of the migrating and captive barnacle geese. Differences regarding the antibodies reactivity between the two populations were not observed.

Pectoralis and semimembranosus muscle fiber alterations in migrating bird (Branta leucopsis) during embryonic, neonatal and adult stages

Some migrating birds, although young, develop musculature capable of sustaining prolonged flights. Such physical capacitation involves muscle fibers alterations which occur in a short space of time between hatching and migration. Considering that myosin is the major contractile protein of the muscle fiber, the myosin heavy chain (MHC) behaviour in pectoralis and semimembranosus muscles of a migratory bird (barnacle goose - Branta leucopsis Bechstein) is evaluated in this paper, using different monoclonal antibodies. The EB165 and B103 monoclonal antibodies were used for the immunocytochemical recognition of MHC isoforms of fast-twitch fibers of two populations (captive and wild) of the barnacle goose during different stages of development. Distinct fiber types of the pectoralis and semimembranosus muscles were recognized through variations in the reactions of the antibodies with the MHC during the embryonic, neonatal and adult stages of the migrating and captive barnacle geese. Differences regarding the antibodies reactivity between the two populations were not observed.

Sistemas de criação e linhagens de frangos de corte : desempenho, rendimento, qualidade de carne e perfil de miosinas de cadeia pesada no músculo esquelético

Um fator atualmente relevante no estudo da qualidade da carne é o estudo da miosina, que é a proteína mais abundante no músculo, envolvida no crescimento muscular, desenvolvimento do animal, geração de força (contração muscular) e maciez da carne. Com este trabalho objetivou-se avaliar a qualidade de carne e aspectos morfológicos das fibras musculares esqueléticas e perfil de miosina de cadeia pesada do músculo flexor longo do hálux, de quatro linhagens de frangos de corte, criados nos sistemas confinado e semi-confinado. O delineamento foi conduzido em fatorial 4x2, quatro linhagens (Ross 308, Máster Gris, Label Rouge e Vermelhão Pesado), dois sistemas de criação (confinamento e semi-confinamento), com quatro repetições por tratamento. Aos 28 e 84 dias de idade, foram abatidas quatro aves por tratamento, totalizando 64 aves. A técnica eletroforética separou somente duas isoformas de miosinas, tipo MyHC-I e MyHC-II, no músculo flexor longo do hálux dos frangos de corte. Com aumento da idade, aumentou a isoforma da miosina de cadeia pesada MyHC II e diminuiu a MyHC I. A expressão das isoformas de miosina de cadeia pesada não foram influenciadas pela linhagem e sistema de criação. Não se encontrou influencia do sistema de criação para pH, cor do peito e da coxa e características físicas do peito. Em relação às características físicas do peito, a linhagem Ross foi superior, e entre as linhagens tipo caipira, a vermelhão Pesado é que se destacou. Aves da linhagem Ross apresentaram maior peso vivo, peso de perna, peso e área do músculo flexor longo do hálux, em comparação as do tipo caipira. O maior teor de luminosidade ocorreu com aumento do pH. Com a maior porcentagem de MyHC-II, ocorreu o aumento do teor de luminosidade (L*) e de amarelo (b*), já com MyHC-I, ocorreu o inverso

A factor now important in the study of the quality of the meat it is the study of the myosin, that is the most abundant protein in the muscle, involved in the muscular growth, development of the animal, generation of force (muscular contraction) and softness of the meat.This experiment aimed to evaluate meat quality and morphologic aspects of the skeletal muscular fibers and profile of heavy chain myosin of the flexor hallucis longus of the muscle, of four strains of cut chickens, servants in the systems confined and semi-confined. The experiment was conduted in factorial design 4x2, four strains (Ross 305, Máster Gris, Label Rouge and Vermelhao Pesado), two production systems (confinement and semi-confinement), with four replicates each treatment. To the 28, 84 days of age, they were maybe removed to the 4 birds for treatment, totaling 64 birds. With the technique applied electrophoresis, it was only possible to observe the separation of the myosins of the type MyHC-I and MyHC-II. With increase of the age it was observed an increase of the isoform of the heavy chain myosin MyHC II and decrease of MyHC I. the strain and the creation system did not influence the variable of heavy chain myosin (MyHC-I and MyHC-II). The creation system not influence the pH, color of the chest and of the thigh and characteristics physics of the chest. In relation to the characteristics physics of the chest, the commercial strain (Ross) it was higher, and enter the tacky strain the Heavy vermelhão it is that stood out. For the characteristics of alive weight, leg weight, weight and area of the muscle Flexor Long Hállucis, Ross was superior, and enter the strains tacky type there was not difference. And the color L* it was correlated with the pH. With the increase of the proportion of MyHC-II, it also increases

Caracterização dos tipos de fibras musculares e das isoformas da MyHC e suas relações com a qualidade da carne de bovinos nelore superprecoces

O objetivo do presente estudo foi identificar as isoformas da Cadeia Pesada de Miosina (Myosin Heavy Chain - MyHC) por eletroforese (SDS-PAGE), nos músculos Semitendinosus por biopsia durante o crescimento e ao abate e no músculo Longissimus dorsi ao abate. Foram utilizados 20 bovinos inteiros da raça Nelore submetidos ao modelo biológico superprecoce em um delineamento inteiramente casualizado. Foi realizada a caracterização morfológica das fibras musculares quanto ao tipo (SO, FOG e FG) e diâmetro nos mesmos músculos. Em relação ao músculo Semitendinosus somente foram identificadas duas bandas da cadeia pesada de miosina, a MyHC do tipo I e a MyHC do tipo II sem diferenciação da isoforma do tipo II e no músculo Longissimus dorsi foram identificadas as isoformas dos tipos I, II a e II x. Quanto a caracterização dos tipos de fibras no músculo Semitendinosus as mesmas estavam distribuídas em mosaico com predomínio de fibras glicolíticas FOG e FG e houve um aumento significativo (P<0,05) da área dos três tipos de fibras da biopsia para o abate. No músculo Longissimus dorsi constatou-se predominância de fibras do tipo FG em relação as fibras do tipo FOG e SO (P<0,05). Também em relação ao diâmetro das mesmas, as fibras SO apresentaram menor diâmetro (P<0,05) em relação aos demais tipos. Comparando-se os dois músculos no abate, observa-se que o músculo Longissimus dorsi apresenta maior área (P<0,05) tanto em relação as fibras SO como quanto as fibras FG. Com relação ao diâmetro observa-se maiores valores (P<0,05) também para as fibras do músculo Longissimus dorsi, principalmente em relação as fibras FG

The objective of this study was identify the myosin heavy chain isoforms in Semitendinosus (biopsy and slaughter) and Longissimus dorsi (slaughter) by electrophoresis (SDS PAGE) and the muscles fiber types (SO, FOG and FG) in Brazilian yearly cattle system - Superprecoce. Were used twenty young bulls Bos indicus (Nellore) in completely randomized design. In relation of Semitendinosus muscle were identified only two MyHC isoforms (type I and II) without any diferentiation of type II, and in the Longissimus dorsi muscle were identified the MyHC isoforms I, II a and II x. About the characterization of fiber types, in the Semitendinosus, the same were distributed in Mosaic with predominance of the FG and FOG fibers and siginificant increase (P<0,05) of the fibers of biopsy to slaughter. In Longissimus dorsi muscle were observed predominance of FG fibers in relation to FOG and SO fibers (P<0,05) and in relation to diameter, the SO fibers showed smallest values. Comparing the two muscles, the Longissimus dorsi, showed high area in relation the SO and FG fibers and high diameter especially in the FG fibers