Era-like GTP protein gene expression in rice / Expressão do gene da proteína GTP semelhante à era no arroz

The mutations are genetic changes in the genome sequences and have a significant role in biotechnology, genetics, and molecular biology even to find out the genome sequences of a cell DNA along with the viral RNA sequencing. The mutations are the alterations in DNA that may be natural or spontaneous and induced due to biochemical reactions or radiations which damage cell DNA. There is another cause of mutations which is known as transposons or jumping genes which can change their position in the genome during meiosis or DNA replication. The transposable elements can induce by self in the genome due to cellular and molecular mechanisms including hypermutation which caused the localization of transposable elements to move within the genome. The use of induced mutations for studying the mutagenesis in crop plants is very common as well as a promising method for screening crop plants with new and enhanced traits for the improvement of yield and production. The utilization of insertional mutations through transposons or jumping genes usually generates stable mutant alleles which are mostly tagged for the presence or absence of jumping genes or transposable elements. The transposable elements may be used for the identification of mutated genes in crop plants and even for the stable insertion of transposable elements in mutated crop plants. The guanine nucleotide-binding (GTP) proteins have an important role in inducing tolerance in rice plants to combat abiotic stress conditions.

Mutações são alterações genéticas nas sequências do genoma e têm papel significativo na biotecnologia, genética e biologia molecular, até mesmo para descobrir as sequências do genoma de um DNA celular junto com o sequenciamento do RNA viral. As mutações são alterações no DNA que podem ser naturais ou espontâneas e induzidas devido a reações bioquímicas ou radiações que danificam o DNA celular. Há outra causa de mutações, conhecida como transposons ou genes saltadores, que podem mudar sua posição no genoma durante a meiose ou a replicação do DNA. Os elementos transponíveis podem induzir por si próprios no genoma devido a mecanismos celulares e moleculares, incluindo hipermutação que causou a localização dos elementos transponíveis para se moverem dentro do genoma. O uso de mutações induzidas para estudar a mutagênese em plantas cultivadas é muito comum, bem como um método promissor para a triagem de plantas cultivadas com características novas e aprimoradas para a melhoria da produtividade e da produção. A utilização de mutações de inserção por meio de transposons ou genes saltadores geralmente gera alelos mutantes estáveis que são marcados quanto à presença ou ausência de genes saltadores ou elementos transponíveis. Os elementos transponíveis podem ser usados para a identificação de genes mutados em plantas de cultivo e até mesmo para a inserção estável de elementos transponíveis em plantas de cultivo mutadas. As proteínas de ligação ao nucleotídeo guanina (GTP) têm papel importante na indução de tolerância em plantas de arroz para combater as condições de estresse abiótico.

Era-like GTP protein gene expression in rice / Expressão do gene da proteína GTP semelhante à era no arroz

The mutations are genetic changes in the genome sequences and have a significant role in biotechnology, genetics, and molecular biology even to find out the genome sequences of a cell DNA along with the viral RNA sequencing. The mutations are the alterations in DNA that may be natural or spontaneous and induced due to biochemical reactions or radiations which damage cell DNA. There is another cause of mutations which is known as transposons or jumping genes which can change their position in the genome during meiosis or DNA replication. The transposable elements can induce by self in the genome due to cellular and molecular mechanisms including hypermutation which caused the localization of transposable elements to move within the genome. The use of induced mutations for studying the mutagenesis in crop plants is very common as well as a promising method for screening crop plants with new and enhanced traits for the improvement of yield and production. The utilization of insertional mutations through transposons or jumping genes usually generates stable mutant alleles which are mostly tagged for the presence or absence of jumping genes or transposable elements. The transposable elements may be used for the identification of mutated genes in crop plants and even for the stable insertion of transposable elements in mutated crop plants. The guanine nucleotide-binding (GTP) proteins have an important role in inducing tolerance in rice plants to combat abiotic stress conditions.(AU)

Mutações são alterações genéticas nas sequências do genoma e têm papel significativo na biotecnologia, genética e biologia molecular, até mesmo para descobrir as sequências do genoma de um DNA celular junto com o sequenciamento do RNA viral. As mutações são alterações no DNA que podem ser naturais ou espontâneas e induzidas devido a reações bioquímicas ou radiações que danificam o DNA celular. Há outra causa de mutações, conhecida como transposons ou genes saltadores, que podem mudar sua posição no genoma durante a meiose ou a replicação do DNA. Os elementos transponíveis podem induzir por si próprios no genoma devido a mecanismos celulares e moleculares, incluindo hipermutação que causou a localização dos elementos transponíveis para se moverem dentro do genoma. O uso de mutações induzidas para estudar a mutagênese em plantas cultivadas é muito comum, bem como um método promissor para a triagem de plantas cultivadas com características novas e aprimoradas para a melhoria da produtividade e da produção. A utilização de mutações de inserção por meio de transposons ou genes saltadores geralmente gera alelos mutantes estáveis que são marcados quanto à presença ou ausência de genes saltadores ou elementos transponíveis. Os elementos transponíveis podem ser usados para a identificação de genes mutados em plantas de cultivo e até mesmo para a inserção estável de elementos transponíveis em plantas de cultivo mutadas. As proteínas de ligação ao nucleotídeo guanina (GTP) têm papel importante na indução de tolerância em plantas de arroz para combater as condições de estresse abiótico.(AU)

Expressão da proteína p53 no carcinoma de células escamosas corneal em cães / p53 protein expression in corneal squamous cell carcinomas of dogs

As neoplasias oculares representam uma crescente preocupação na oftalmologia veterinária. O carcinoma de células escamosas corneal é raro em cães e, por isso, pouco estudado. Pesquisas investigando os mecanismos da carcinogênese que contribuem para o desenvolvimento do carcinoma de células escamosas (CCE) ocular em cães são infrequentes. No presente trabalho teve-se por objetivo identificar, por imunoistoquímica, a expressão da proteína p53 no carcinoma de células escamosas corneal espontâneo de cães. Foram utilizados cinco casos de CCE corneal e um caso de ceratite actínica. Os cortes foram obtidos a partir dos blocos de parafina e submetidos à análise anatomopatológica e imunoistoquímica. Do total de seis amostras, todas apresentaram imunomarcação para citoqueratina e para a proteína p53. Conclui-se que a imunorreatividade da proteína p53 pela imunoistoquímica foi presente nos CCE corneal de cães contribuindo para sua carcinogênese, mas não fornece indicadores de prognóstico em casos de CCE córnea em cão; e pode existir forte relação da exposição à radiação solar com a possível mutação do gene TP53.(AU)

Ocular tumors play an increasing concern in veterinary ophthalmology. Corneal squamous cell carcinoma is unfrequent in dogs, and by this way it has little studies. Studies that investigated the carcinogenesis mechanisms wich could help to the development of ocular squamous cell carcinoma (SCC) in dog are rare. The aim of this work was to identify by immunohistochemical techniques, the p53 protein expression in the spontaneous dog corneal SCC. For this work, were used five cases of corneal SCC and one case of actinic keratitis. The sections were obtained from paraffin-wax blocks and submitted to histopathological and immunohistochemical analysis. All the six samples showed immunolabeling to cytokeratin and p53 protein. These results support the conclusions that the immunoreactivity of p53 protein by immunohistochemistry is present in canine corneal SCC suppporting its role in carcinogenesis of this tumor, but not provides prognostic indicators in cases of SCC corneal in dog; and can be a association of exposure to solar radiation with the possible mutation of the TP53 gene.(AU)

Aspectos comportamentais, neuroquímicos e imunológicos em camundongos com mutação espontânea tipo tremor

O tremor é uma desordem de movimento frequentemente encontrado na prática clínica e associado a inúmeras disfunções motoras. Objetivo: avaliar o fenótipo da disfunção motora, assim como os aspectos morfológicos, neuroquímicos e imunológicos em camundongos Swiss com mutação espontânea, caracterizada por tremores contínuos, ataxia e convulsões tônicas audiogênicas. Métodos: avaliação do comportamento e da disfunção motora dos camundongos TR em diferentes idades, por meio da caixa de observação e em plataforma inclinada, a composição de mielina em diferentes áreas do cérebro, a atividade de astrócitos, pela expressão da proteína ácida fibrilar glial (GFAP), os níveis de citocinas periféricas e avaliação dos níveis de dopamina estriatal (DA) e de seus metabólitos. Resultados: o camundongo TR apresentou tremores contínuos, menor tempo de locomoção e da frequência do levantar. Além disso, apresentou um maior tempo de imobilidade, de latência para atingir o topo da rampa, maior tempo com a cauda elevada acima da linha do dorso e para realizar movimento de geotaxia negativa. Estas disfunções motoras progrediram com a idade. Não foram observadas diferenças na morfologia da mielina, bem como na expressão de GFAP e nos níveis de citocinas periféricas. Foram detectados níveis aumentados de DA e de seus metabólitos no estriado bem como no turnover de DOPAC/DA. Conclusões: o mutante TR apresentou bradicinesia associada à instabilidade postural, menor alcance de movimento e dificuldade para iniciar movimentos voluntários que progrediram com a idade. Este fenótipo foi atribuído a uma maior atividade dopaminérgica.

Introduction: Tremor is a disorder of movement often found in clinical practice and associated with several motor dysfunctions. Objective: We evaluated the motor dysfunction phenotype, as well as morphological, neurochemical and immunological aspects in Swiss mice that presented spontaneous mutation, characterized by continuous tremors, ataxia and audiogenic tonic seizures. Methods: the behavior phenotype and motor dysfunction of the tr mice at different ages, by evaluation in observation box and inclined ramp, the myelin status in several brain areas, the activity of astrocytes, by the expression of glial fibrillary acidic protein (GFAP), the peripheral cytokines levels and the striatal dopamine (DA) and its metabolite levels were studied. Results: tr mutant presented continuous tremors, reduced time in movements, in rearing behavior. Besides, an increased immobility and tail elevation, latency to ramp up and to perform negative geotaxis. These motor dysfunctions increased with age. No differences in morphology of myelin as well as in the expression GFAP and in the peripheral cytokines levels were observed. An increased striatal DA and metabolites levels and in the DOPAC/DA turnover were detected. Conclusions: tr mutant showed bradikinesia associated to postural instability, reduced range of motion and difficulty to initiate voluntary movements that increased with age. This phenotype was attributed to an increased striatal DAergic activity

Caracterização fenotípica do camundongo mutante espontâneo tremor utilizando uma bateria de testes comportamentais

A mutação espontânea tremor (tr), autossômica recessiva, foi identificada na colônia de camundongos Swiss no Biotério do Departamento de Patologia da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo. Os mutantes apresentaram como principais características fenotípicas tremores, ataxia e convulsões tônicas audiogênicas. Por meio de dez retrocruzamentos essa mutação foi transferida para a linhagem congênica C57BL/6 (N10). O mapeamento genético com marcadores microssatélites distribuídos pelo genoma do camundongo indicou que a mutação tr encontra-se no cromossomo 14, na região entre 33,21 e 38,21 cM, tendo como possível candidato o gene Egr3 (Early Growth Response 3). O presente estudo teve como objetivo caracterizar o fenótipo comportamental do camundongo mutante tremor. A caracterização do fenótipo dos camundongos mutantes Swiss foi realizada a partir do nascimento até a idade adulta. Os parâmetros do desenvolvimento físico analisados foram: desdobramento das orelhas, erupção dos dentes incisivos, abertura dos olhos, surgimento da pelagem completa, ganho de peso e comprimento dos filhotes e desenvolvimento sexual. No desenvolvimento reflexológico foram analisados: preensão palmar, geotaxia negativa, endireitamento de postura e sobressalto. No 21º dia de vida foi realizado o teste de campo aberto para analisar a atividade geral dos animais, e no 60º dia esse teste foi repetido, juntamente com testes para analisar parâmetros comportamentais. Os testes realizados em campo aberto foram ordenados por parâmetro avaliado; 1) atividade geral dos animais e sistema sensorial: frêmito vocal, irritabilidade, reflexo auricular, aperto de cauda, reflexo corneal e resposta ao toque; 2) testes psicomotores: trem posterior, reflexo de endireitamento, tônus corporal e força de agarrar; 3) avaliação do sistema nervoso central: tremores, cauda em pé, micção e defecação. Demais testes realizados analisaram: comportamento em labirinto em cruz elevada, coordenação motora em trave elevada, memória espacial no labirinto em T, e respostas comportamentais nos testes de natação forçada e de suspensão pela cauda. Exceto pelo menor peso no desmame, os parâmetros de desenvolvimento analisados não apresentaram diferenças significativas entre os mutantes e controles, o que confirmou a hipótese de que as alterações fenotípicas somente são perceptíveis a partir de 3 semanas de vida. A caracterização comportamental do fenótipo também foi realizada nos mutantes em fundo genético C57BL/6, de ambos os sexos, com 8 semanas de idade. Em relação aos camundongos controle, nos mutantes houve aumento da presença de cauda em pé, da ataxia e do tremor; menor frequência de levantar e de limpeza do corpo (grooming); redução da coordenação motora, indicando evidente prejuízo motor. Também foram observadas respostas negativas à ansiedade e hiperatividade, mas não houve alteração na memória espacial dos mutantes. Os resultados indicaram que o mutante tremor apresentou prejuízos de origem no sistema nervoso central; demostraram também que o fenótipo observado coincide com as alterações descritas na literatura, sugerindo o gene Egr3 como possível candidato para a mutação. A caracterização fenotípica desse animal é importante no entendimento das alterações causadas pela mutação e se essa apresenta potencial como modelo para doenças neurológicas.

The autosomal recessive spontaneous mutation tremor (tr) was identified in the Swiss mice colony of the laboratory animal facility of the Department of Pathology, from Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia - Universidade de São Paulo. The mutants presented tremors, ataxia and audiogenic tonic convulsions as the main expressive characteristics. This mutation was moved from Swiss onto C57BL/6 by ten backcrosses (N10). Genetic mapping with microsatellite markers distributed through the mouse genome showed that the mutation is on 14 chromosome, between 33.21 and 38.21 cM, making Egr3 (Early Growth Response 3) a candidate gene. This study aimed to characterize the behavior phenotype of the tremor mice. Phenotypic characterization of the Swiss mutant mice was performed from birth to adulthood. The physical development points analyzed were: unfolding of the ears, eruption of the incisor teeth, opening the eyes, complete fur, weight gain and length, and sexual development. The reflexology development ones were: palmar grip, negative geotaxia, posture straightening and reaction to sound. On the 21day-old the open field test was performed to analyze the activity of the animals, and on the 60-day-old this task was repeated along with tests to analyze behavioral parameters. The tests performed in the open field were evaluated by parameters; 1) general activity and sensory system: vocalization, irritability, auricular reflex, tail flick, corneal reflex and response to touch; 2) psychomotor tests: hindquarter fall, surface-righting reflex, body tone and grasping strength; 3) evaluation of the central nervous system: tremors, straub tail, micturition and defecation. Other tests analyzed: behavior in elevated plus maze, motor coordination in balance beam test, spatial memory in T maze alternation test, and behavioral responses in forced swing and tail suspension tests. Except for the lower weight at weaning, the development parameters analyzed did not show significant differences between the mutants and controls, which confirmed the hypothesis that phenotypic changes are only perceptible after 3weeksold. The behavioral characterization of the phenotype was also performed on 8- week-old C57BL/6 mutants of both sexes. In comparison to the control mice, in the mutants there were an increase in the presence of straub tail, ataxia and tremor; less frequent rearing and grooming; less motor coordination, indicating evident motor impairment. Negative responses to anxiety and hyperactivity were also observed, but there was no change in the spatial memory of the mutants. The results indicated that the tremor mutant presented damages in the central nervous system; also showed that the phenotype coincides with the changes described in the literature, suggesting the Egr3 gene as a possible candidate for the mutation. The phenotypic characterization of this animal is important to clarify impairments caused by the genetic mutation, and also identify if this potential model could be useful to study neurological diseases.

Fungicide resistance and genetic variability in plant pathogenic strains of Guignardia citricarpa

Citrus black spot (CBS) is a plant disease of worldwide occurrence, affecting crops in Africa, Oceania, and South America. In Brazil, climate provides favorable conditions and CBS has spread to the Southeast and South regions. CBS is caused by the fungus Guignardia citricarpa (anamorph: Phyllosticta citricarpa) and its control is based on the use of fungicides, such as benzimidazoles. In South Africa, the disease was kept under control for 10 years with benomyl, until cases of resistance to high concentrations of this fungicide were reported from all citrus-producing areas. Azoxystrobin (a strobilurin) has been found effective in controlling phytopathogens, including CBS, in a wide range of economically important crops. The present study investigated in vitro the effects of the fungicides benomyl and azoxystrobin on 10 strains of G. citricarpa isolated from lesions in citrus plants from Brazil and South Africa. Benomyl at 0.5 µg/mL inhibited mycelial growth in all strains except PC3C, of African origin, which exhibited resistance to concentrations of up to 100.0 µg/mL. The spontaneous mutation frequency for resistance to benomyl was 1.25 ´ 10-7. Azoxystrobin, even at high concentrations, did not inhibit mycelial growth in any of the strains, but significantly reduced sporulation rates, by as much as 100%, at a concentration of 5.0 µg/mL. Variations in sensitivity across strains, particularly to the strobilurin azoxystrobin, are possibly related to genetic variability in G. citricarpa isolates.

A Mancha Preta dos Citros (MPC) tem ocorrência mundial afetando a produção de citros na África, Oceania e América do Sul. No Brasil, onde o clima é favorável ao seu desenvolvimento, a doença está espalhada nas regiões Sul e Sudeste. O controle da MPC, causada pelo fungo Guignardia citricarpa (anamorfo: Phyllosticta citricarpa) é baseado na aplicação de fungicidas, como os benzimidazóis. Na África do Sul, após 10 anos de controle da doença com o fungicida benomil, os casos de resistência a altas concentrações deste fungicida atingiram todas as áreas produtoras. O fungicida estrolilurina chamado azoxistrobina tem se mostrado eficiente no controle dos fitopatógenos de uma grande variedade de culturas economicamente importantes, incluindo a MPC. Neste trabalho foram investigados os efeitos in vitro dos fungicidas benomil e azoxistrobina em 10 linhagens de G. citricarpa isoladas de lesões em plantas cítricas no Brasil e na África do Sul. Houve inibição do crescimento micelial a 0,5 µg/mL do fungicida benomil entre as linhagens testadas, com exceção de PC3C de origem sul-africana, que apresentou resistência até a concentração de 100,0 µg/mL de benomil. A freqüência de mutação espontânea para resistência ao benomil foi de 1,25 FONT FACE=Symbol>´ /font> 10-7. A estrobilurina azoxistrobina, mesmo em altas concentrações, não inibiu o crescimento micelial dos isolados, entretanto reduziu significativamente a produção de esporos, chegando a 100% de inibição em concentrações de 5,0 µg/mL de azoxistrobina. A variação na sensibilidade das linhagens, principalmente com a estrobilurina azoxistrobina, possivelmente está relacionada com a variabilidade genética dos isolados de G. citricarpa.

Caracterização fenotípica do camundongo BALB/c mutante anêmico / Phenotype characterization of anemic mutant BALB/c mouse

Várias linhagens de camundongos resultam de mutações genéticas pontuais espontâneas ou induzidas e estas alterações podem apresentar fenótipos relevantes semelhantes a doenças hereditárias humanas. Massironi et al. (2006) desenvolveram vários camundongos BALB/c mutantes com o agente mutagênico etil-nitroso-uréia (ENU) no Biotério de Experimentação do Departamento de Imunologia do Instituto de Ciências Biomédicas (ICB) da Universidade de São Paulo. Destes, o mutante chamado anêmico foi objeto de estudo desta pesquisa, que tem como objetivo a sua fenotipagem. [...] Este camundongo BALB/c mutante anêmico apresenta fenótipo e genótipo muito similares ao quadro de hemoglobina instável de Santa Ana e, considerando-se a importância dos modelos animais para o avanço dos estudos de doenças humanas, este modelo seria o primeiro camundongo mutante descrito para o estudo desta doença

Many strains of mice result from spontaneous or induced punctual genetic mutations and these changes may present relevant and similar phenotypes to inherited human diseases. Massironi et al. (2006) developed some BALB/c mice mutants with the mutagen ethyl-nitroso-urea (ENU) in the Biotério de Experimentação, Departamento de Imunologia, Instituto de Ciências Biomédicas (ICB) of Universidade de São Paulo. From these, the mutant called anemic is the object of this research, which aims to characterize its phenotype. [...] This BALB/c mutant mouse presents similar genotype and phenotype to the human Santa Ana unstable hemoglobin. Considering the importance of animal models for human diseases studies advance, this model would be the first mutant mouse described for study of Hb Santa Ana

Caracterização fenotípica do camundongo BALB/c mutante anêmico / Phenotype characterization of anemic mutant BALB/c mouse

Várias linhagens de camundongos resultam de mutações genéticas pontuais espontâneas ou induzidas e estas alterações podem apresentar fenótipos relevantes semelhantes a doenças hereditárias humanas. Massironi et al. (2006) desenvolveram vários camundongos BALB/c mutantes com o agente mutagênico etil-nitroso-uréia (ENU) no Biotério de Experimentação do Departamento de Imunologia do Instituto de Ciências Biomédicas (ICB) da Universidade de São Paulo. Destes, o mutante chamado anêmico foi objeto de estudo desta pesquisa, que tem como objetivo a sua fenotipagem. [...] Este camundongo BALB/c mutante anêmico apresenta fenótipo e genótipo muito similares ao quadro de hemoglobina instável de Santa Ana e, considerando-se a importância dos modelos animais para o avanço dos estudos de doenças humanas, este modelo seria o primeiro camundongo mutante descrito para o estudo desta doença (AU)

Many strains of mice result from spontaneous or induced punctual genetic mutations and these changes may present relevant and similar phenotypes to inherited human diseases. Massironi et al. (2006) developed some BALB/c mice mutants with the mutagen ethyl-nitroso-urea (ENU) in the Biotério de Experimentação, Departamento de Imunologia, Instituto de Ciências Biomédicas (ICB) of Universidade de São Paulo. From these, the mutant called anemic is the object of this research, which aims to characterize its phenotype. [...] This BALB/c mutant mouse presents similar genotype and phenotype to the human Santa Ana unstable hemoglobin. Considering the importance of animal models for human diseases studies advance, this model would be the first mutant mouse described for study of Hb Santa Ana (AU)

Study on the susceptibility of Enterococcus faecalis from infectious processes to ciprofloxacin and vancomycin

Enterococcus faecalis is considered a pathogen responsible for hospital infections and, due to its frequent multi-resistant profile, has caused preoccupations among many medical authorities. The objective of this study was to determine the antimicrobial susceptibility of 74 strains isolated from blood cultures and purulent secretions to vancomycin and ciprofloxacin through the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bactericidal Concentration (MBC) by using the Microdilution test. The results showed a greater efficacy of vancomycin compared to ciprofloxacin (98.6% of the strains were inhibited by vancomycin at lower concentrations: 0.06 - 1 µg/ml). However, in the MBC analysis 73% of the strains showed a MBC of vancomycin only at high concentrations (equal to or higher than 64 µg/ml). For ciprofloxacin, the strains showed a broad sensitivity with MICs and MBCs distributed along all the MIC classes. Results also revealed a probability that some strains are tolerant to vancomycin, which indicates the need of other tests to confirm this characteristic.

uvsH//uvsH diploid strain favors an efficient method to evaluate the recombinagenic effect of chemical and physical agents in Aspergillus nidulans (Ascomycetes) / Utilização de linhagens diplóides uvsH//uvsH de Aspergillus nidulans (Ascomycetes) para a avaliação do potencial recombinagênico de agentes químicos e físicos

Ascomycete Aspergillus nidulans is an excellent system for mitotic crossing-over studies. This is due to the fact that much of its cell cycle is passed in G2 and presents uvs mutations that increase frequencies of normal mitotic recombinations (uvsF and uvsH). The aim of this research was to obtain a new diploid strain of A. nidulans with proper characteristics for recombinagenesis investigations, or rather, heterozygous for nutritional markers and conidia coloration and homozygous for uvsH mutation. Higher sensitivity of diploid uvsH//uvsH in the monitoring of mitotic recombination events was shown by higher indexes of the diploids spontaneous mitotic recombination when compared with diploid uvsH+//uvsH +. New strain is a versatile tool that may be used in different studies on mitotic recombination in A. nidulans

O ascomiceto Aspergillus nidulans apresenta-se como um excelente sistema para o estudo da recombinação somática, por passar grande parte de seu ciclo celular em G2 e por apresentar mutações uvs que promovem aumento das freqüências normais de recombinação mitótica (uvsF e uvsH). O presente trabalho teve como objetivo obter uma nova linhagem diplóide de A. nidulans, com características apropriadas para estudos da recombinagênese, tais como: hetererozigose para marcadores nutricionais e de coloração de conidios e homozigose para a mutação uvsH. A maior sensibilidade do diplóide uvsH//uvsH no monitoramento de eventos de recombinação mitótica foi demonstrada através dos mais altos índices de recombinação mitótica espontânea por ele apresentados, em comparação com o diplóide uvsH+//uvsH +. A nova linhagem apresenta-se como uma ferramenta versátil, podendo ser utilizada em diferentes estudos relacionados à recombinação mitótica em A. nidulans

uvsH//uvsH diploid strain favors an efficient method to evaluate the recombinagenic effect of chemical and physical agents in Aspergillus nidulans (Ascomycetes) / Utilização de linhagens diplóides uvsH//uvsH de Aspergillus nidulans (Ascomycetes) para a avaliação do potencial recombinagênico de agentes químicos e físicos

Ascomycete Aspergillus nidulans is an excellent system for mitotic crossing-over studies. This is due to the fact that much of its cell cycle is passed in G2 and presents uvs mutations that increase frequencies of normal mitotic recombinations (uvsF and uvsH). The aim of this research was to obtain a new diploid strain of A. nidulans with proper characteristics for recombinagenesis investigations, or rather, heterozygous for nutritional markers and conidia coloration and homozygous for uvsH mutation. Higher sensitivity of diploid uvsH//uvsH in the monitoring of mitotic recombination events was shown by higher indexes of the diploids spontaneous mitotic recombination when compared with diploid uvsH+//uvsH +. New strain is a versatile tool that may be used in different studies on mitotic recombination in A. nidulans

O ascomiceto Aspergillus nidulans apresenta-se como um excelente sistema para o estudo da recombinação somática, por passar grande parte de seu ciclo celular em G2 e por apresentar mutações uvs que promovem aumento das freqüências normais de recombinação mitótica (uvsF e uvsH). O presente trabalho teve como objetivo obter uma nova linhagem diplóide de A. nidulans, com características apropriadas para estudos da recombinagênese, tais como: hetererozigose para marcadores nutricionais e de coloração de conidios e homozigose para a mutação uvsH. A maior sensibilidade do diplóide uvsH//uvsH no monitoramento de eventos de recombinação mitótica foi demonstrada através dos mais altos índices de recombinação mitótica espontânea por ele apresentados, em comparação com o diplóide uvsH+//uvsH +. A nova linhagem apresenta-se como uma ferramenta versátil, podendo ser utilizada em diferentes estudos relacionados à recombinação mitótica em A. nidulans

Expressão de c-MYC, NKX3.1 e E-Caderina por Imuno-Histoquímica em Microarranjo de Tecido (TMA) de Lesões Pré- Neoplásicas e Neoplásicas na Próstata De Cães

A próstata canina pode utilizada como modelo para estudo comparativo de afecções desta glândula no homem, constituindo as únicas espécies em que o carcinoma de próstata (CaP) se desenvolve espontaneamente. A próstata canina é sede de diversos processos patológicos que comumente acometem cães adultos e idosos. O papel do oncogene c-MYC e supressores tumorais NKX3.1 e E-caderina são bem estabelecidos no processo de carcinogênese da próstata humana, no entanto, não há pesquisas que relatem a expressão proteica dessas proteínas na progressão do CaP canino. Neste contexto, este estudo teve por objetivo avaliar a expressão proteica de c-MYC, NKX3.1 e Ecaderina na próstata normal, com Hiperplasia Prostática Benigna (HPB), Atrofia Inflamatória Proliferativa (PIA) e CaP e avaliar o papel dessas proteínas no processo de gênese tumoral. O presente estudo foi realizado em uma plataforma de Microarranjo de Tecido (TMA) contendo diferentes lesões prostáticas. Foi realizada Imuno-histoquímica com os anticorpos c-MYC, NKX3.1 e E-caderina pelo método da peroxidase e DAB. A análise estatística foi realizada pelo teste de Qui-quadrado ou teste de Fischer para determinar associação entre as variáveis. A proteína c-MYC apresentou maior expressão no CaP e na PIA quando comparada com a próstata normal e com HPB (p= 0,0068). Observou-se maior número de amostras com ausência da expressão do NKX3.1 no CaP (94.75% ) e PIA (100%) quando comparando com a próstata normal e HPB (p=0,0022). Em relação a E-caderina houve maior número de amostras positivas na HPB e próstata normal quando comparado CaP e a PIA, no entanto sem diferença estatística. O processo de gênese tumoral na próstata canina esta associado com o aumento de expressão proteica do c-MYC e a perda da expressão proteica do NKX3.1

The dog is the only species besides humans that develop spontaneous and naturally prostatic carcinoma (PCa) with high frequency. The canine model is primarily used for studies of molecular mechanisms of PCa and provides a natural animal model for studies of potential therapies. PCa in men presents CMYC oncogene mutation and reduced E-cadherin and NKX3.1 protein expression. In this context our objective was to evaluate NKX3.1, C-MYC and E-cadherin expression in benign prostatic hyperplasia (BPH), prostatic inflammatory atrophy (PIA) and PCa in dogs and verify the role of these proteins in the progression to prostate cancer. A tissue microarray (TMA) slide was constructed and immunohistochemistry with antibodies C-MYC, NKX3.1 and E-cadherin was performed with peroxidase method and DAB. Chi-square or Fisher exact test was used to determine the association between the categorical variables. The evaluation of the C-MYC oncogene protein showed higher cytoplasmic positivity in canine PCa and PIA compared to BPH (p= 0.0068). We observed a decrease of NKX3.1 expression in 94.75% of PCa, 100% of PIA in comparison to BPH (p=0.0022). E-cadherin expression was higher in BPH and PIA in comparison to PCa, with no statistical difference. The carcinogenesis process of canine prostatic lesion may be related to gain of CMYC and loss of NKX3.1

Expressão da proteína p53 no carcinoma de células escamosas corneal em cães / p53 protein expression in corneal squamous cell carcinomas of dogs

As neoplasias oculares representam uma crescente preocupação na oftalmologia veterinária. O carcinoma de células escamosas corneal é raro em cães e, por isso, pouco estudado. Pesquisas investigando os mecanismos da carcinogênese que contribuem para o desenvolvimento do carcinoma de células escamosas (CCE) ocular em cães são infrequentes. No presente trabalho teve-se por objetivo identificar, por imunoistoquímica, a expressão da proteína p53 no carcinoma de células escamosas corneal espontâneo de cães. Foram utilizados cinco casos de CCE corneal e um caso de ceratite actínica. Os cortes foram obtidos a partir dos blocos de parafina e submetidos à análise anatomopatológica e imunoistoquímica. Do total de seis amostras, todas apresentaram imunomarcação para citoqueratina e para a proteína p53. Conclui-se que a imunorreatividade da proteína p53 pela imunoistoquímica foi presente nos CCE corneal de cães contribuindo para sua carcinogênese, mas não fornece indicadores de prognóstico em casos de CCE córnea em cão; e pode existir forte relação da exposição à radiação solar com a possível mutação do gene TP53.

Ocular tumors play an increasing concern in veterinary ophthalmology. Corneal squamous cell carcinoma is unfrequent in dogs, and by this way it has little studies. Studies that investigated the carcinogenesis mechanisms wich could help to the development of ocular squamous cell carcinoma (SCC) in dog are rare. The aim of this work was to identify by immunohistochemical techniques, the p53 protein expression in the spontaneous dog corneal SCC. For this work, were used five cases of corneal SCC and one case of actinic keratitis. The sections were obtained from paraffin-wax blocks and submitted to histopathological and immunohistochemical analysis. All the six samples showed immunolabeling to cytokeratin and p53 protein. These results support the conclusions that the immunoreactivity of p53 protein by immunohistochemistry is present in canine corneal SCC suppporting its role in carcinogenesis of this tumor, but not provides prognostic indicators in cases of SCC corneal in dog; and can be a association of exposure to solar radiation with the possible mutation of the TP53 gene.