Assessment of zinc solubilization potential of zinc-resistant Pseudomonas oleovorans strain ZSB13 isolated from contaminated soil

Abstract Zinc is an essential micronutrient that is required for optimum plant growth. It is present in soil in insoluble forms. Bacterial solubilization of soil unavailable form of Zn into available form, is an emerging approach to alleviate the Zn deficiency for plants and human beings. Zinc solubilizing bacteria (ZSB) could be a substitute for chemical Zn fertilizer. The present study aimed to isolate and characterize bacterial species from the contaminated soil and evaluate their Zn solubilizing potential. Zn resistant bacteria were isolated and evaluated for their MIC against Zn. Among the 13 isolated bacterial strains ZSB13 showed maximum MIC value upto 30mM/L. The bacterial strain with the highest resistance against Zn was selected for further analysis. Molecular characterization of ZSB13 was performed by 16S rRNA gene amplification which confirmed it as Pseudomonas oleovorans. Zn solubilization was determined through plate assay and broth medium. Four insoluble salts (zinc oxide (ZnO), zinc carbonate (ZnCO3), zinc sulphite (ZnS) and zinc phosphate (Zn3(PO4)2) were used for solubilization assay. Our results shows 11 mm clear halo zone on agar plates amended with ZnO. Likewise, ZSB13 showed significant release of Zn in broth amended with ZnCO3 (17 and 16.8 ppm) and ZnO (18.2 ppm). Furthermore, Zn resistance genes czcD was also enriched in ZSB13. In our study, bacterial strain comprising Zn solubilization potential has been isolated that could be further used for the growth enhancement of crops.

Resumo O zinco é um micronutriente essencial necessário para o crescimento ideal das plantas. Ele está presente no solo em formas insolúveis. A solubilização bacteriana da forma indisponível de Zn no solo para a forma disponível é uma abordagem emergente para aliviar a deficiência de Zn em plantas e seres humanos. Bactérias solubilizadoras de zinco (ZSB) podem ser um substituto para fertilizantes químicos de Zn. O presente estudo teve como objetivo isolar e caracterizar espécies bacterianas de solo contaminado e avaliar seu potencial de solubilização de Zn. Bactérias resistentes ao Zn foram isoladas e avaliadas quanto ao seu MIC contra o Zn. Entre as 13 cepas bacterianas isoladas, ZSB13 apresentou valor máximo de MIC de até 30 mM/L. A cepa bacteriana com maior resistência ao Zn foi selecionada para análise posterior. A caracterização molecular de ZSB13 foi realizada por amplificação do gene 16S rRNA que o confirmou como Pseudomonas oleovorans. A solubilização do Zn foi determinada através de ensaio em placa e meio caldo. Quatro sais insolúveis (óxido de zinco (ZnO), carbonato de zinco (ZnCO3), sulfito de zinco (ZnS) e fosfato de zinco (Zn3 (PO4) 2) foram usados para o ensaio de solubilização. Nossos resultados mostram uma zona de halo clara de 11 mm em placas de ágar corrigidas com ZnO. Da mesma forma, ZSB13 mostrou liberação significativa de Zn em caldo alterado com ZnCO3 (17 e 16,8 ppm) e ZnO (18,2 ppm). Além disso, os genes de resistência ao Zn czcD também foram enriquecidos em ZSB13. Em nosso estudo, a cepa bacteriana compreendendo potencial de solubilização de Zn foi isolada e poderia ser usada posteriormente para o aumento do crescimento de safras.

Assessment of zinc solubilization potential of zinc-resistant Pseudomonas oleovorans strain ZSB13 isolated from contaminated soil / Avaliação do potencial de solubilização do zinco da cepa ZSB13 de Pseudomonas oleovorans resistente ao zinco isolada de solo contaminado

Zinc is an essential micronutrient that is required for optimum plant growth. It is present in soil in insoluble forms. Bacterial solubilization of soil unavailable form of Zn into available form, is an emerging approach to alleviate the Zn deficiency for plants and human beings. Zinc solubilizing bacteria (ZSB) could be a substitute for chemical Zn fertilizer. The present study aimed to isolate and characterize bacterial species from the contaminated soil and evaluate their Zn solubilizing potential. Zn resistant bacteria were isolated and evaluated for their MIC against Zn. Among the 13 isolated bacterial strains ZSB13 showed maximum MIC value upto 30mM/L. The bacterial strain with the highest resistance against Zn was selected for further analysis. Molecular characterization of ZSB13 was performed by 16S rRNA gene amplification which confirmed it as Pseudomonas oleovorans. Zn solubilization was determined through plate assay and broth medium. Four insoluble salts (zinc oxide (ZnO), zinc carbonate (ZnCO3), zinc sulphite (ZnS) and zinc phosphate (Zn3(PO4)2) were used for solubilization assay. Our results shows 11 mm clear halo zone on agar plates amended with ZnO. Likewise, ZSB13 showed significant release of Zn in broth amended with ZnCO3 (17 and 16.8 ppm) and ZnO (18.2 ppm). Furthermore, Zn resistance genes czcD was also enriched in ZSB13. In our study, bacterial strain comprising Zn solubilization potential has been isolated that could be further used for the growth enhancement of crops.

O zinco é um micronutriente essencial necessário para o crescimento ideal das plantas. Ele está presente no solo em formas insolúveis. A solubilização bacteriana da forma indisponível de Zn no solo para a forma disponível é uma abordagem emergente para aliviar a deficiência de Zn em plantas e seres humanos. Bactérias solubilizadoras de zinco (ZSB) podem ser um substituto para fertilizantes químicos de Zn. O presente estudo teve como objetivo isolar e caracterizar espécies bacterianas de solo contaminado e avaliar seu potencial de solubilização de Zn. Bactérias resistentes ao Zn foram isoladas e avaliadas quanto ao seu MIC contra o Zn. Entre as 13 cepas bacterianas isoladas, ZSB13 apresentou valor máximo de MIC de até 30 mM/L. A cepa bacteriana com maior resistência ao Zn foi selecionada para análise posterior. A caracterização molecular de ZSB13 foi realizada por amplificação do gene 16S rRNA que o confirmou como Pseudomonas oleovorans. A solubilização do Zn foi determinada através de ensaio em placa e meio caldo. Quatro sais insolúveis (óxido de zinco (ZnO), carbonato de zinco (ZnCO3), sulfito de zinco (ZnS) e fosfato de zinco (Zn3 (PO4) 2) foram usados para o ensaio de solubilização. Nossos resultados mostram uma zona de halo clara de 11 mm em placas de ágar corrigidas com ZnO. Da mesma forma, ZSB13 mostrou liberação significativa de Zn em caldo alterado com ZnCO3 (17 e 16,8 ppm) e ZnO (18,2 ppm). Além disso, os genes de resistência ao Zn czcD também foram enriquecidos em ZSB13. Em nosso estudo, a cepa bacteriana compreendendo potencial de solubilização de Zn foi isolada e poderia ser usada posteriormente para o aumento do crescimento de safras.

Assessment of zinc solubilization potential of zinc-resistant Pseudomonas oleovorans strain ZSB13 isolated from contaminated soil / Avaliação do potencial de solubilização do zinco da cepa ZSB13 de Pseudomonas oleovorans resistente ao zinco isolada de solo contaminado

Abstract Zinc is an essential micronutrient that is required for optimum plant growth. It is present in soil in insoluble forms. Bacterial solubilization of soil unavailable form of Zn into available form, is an emerging approach to alleviate the Zn deficiency for plants and human beings. Zinc solubilizing bacteria (ZSB) could be a substitute for chemical Zn fertilizer. The present study aimed to isolate and characterize bacterial species from the contaminated soil and evaluate their Zn solubilizing potential. Zn resistant bacteria were isolated and evaluated for their MIC against Zn. Among the 13 isolated bacterial strains ZSB13 showed maximum MIC value upto 30mM/L. The bacterial strain with the highest resistance against Zn was selected for further analysis. Molecular characterization of ZSB13 was performed by 16S rRNA gene amplification which confirmed it as Pseudomonas oleovorans. Zn solubilization was determined through plate assay and broth medium. Four insoluble salts (zinc oxide (ZnO), zinc carbonate (ZnCO3), zinc sulphite (ZnS) and zinc phosphate (Zn3(PO4)2) were used for solubilization assay. Our results shows 11 mm clear halo zone on agar plates amended with ZnO. Likewise, ZSB13 showed significant release of Zn in broth amended with ZnCO3 (17 and 16.8 ppm) and ZnO (18.2 ppm). Furthermore, Zn resistance genes czcD was also enriched in ZSB13. In our study, bacterial strain comprising Zn solubilization potential has been isolated that could be further used for the growth enhancement of crops.

Resumo O zinco é um micronutriente essencial necessário para o crescimento ideal das plantas. Ele está presente no solo em formas insolúveis. A solubilização bacteriana da forma indisponível de Zn no solo para a forma disponível é uma abordagem emergente para aliviar a deficiência de Zn em plantas e seres humanos. Bactérias solubilizadoras de zinco (ZSB) podem ser um substituto para fertilizantes químicos de Zn. O presente estudo teve como objetivo isolar e caracterizar espécies bacterianas de solo contaminado e avaliar seu potencial de solubilização de Zn. Bactérias resistentes ao Zn foram isoladas e avaliadas quanto ao seu MIC contra o Zn. Entre as 13 cepas bacterianas isoladas, ZSB13 apresentou valor máximo de MIC de até 30 mM/L. A cepa bacteriana com maior resistência ao Zn foi selecionada para análise posterior. A caracterização molecular de ZSB13 foi realizada por amplificação do gene 16S rRNA que o confirmou como Pseudomonas oleovorans. A solubilização do Zn foi determinada através de ensaio em placa e meio caldo. Quatro sais insolúveis (óxido de zinco (ZnO), carbonato de zinco (ZnCO3), sulfito de zinco (ZnS) e fosfato de zinco (Zn3 (PO4) 2) foram usados ​​para o ensaio de solubilização. Nossos resultados mostram uma zona de halo clara de 11 mm em placas de ágar corrigidas com ZnO. Da mesma forma, ZSB13 mostrou liberação significativa de Zn em caldo alterado com ZnCO3 (17 e 16,8 ppm) e ZnO (18,2 ppm). Além disso, os genes de resistência ao Zn czcD também foram enriquecidos em ZSB13. Em nosso estudo, a cepa bacteriana compreendendo potencial de solubilização de Zn foi isolada e poderia ser usada posteriormente para o aumento do crescimento de safras.

Assessment of zinc solubilization potential of zinc-resistant Pseudomonas oleovorans strain ZSB13 isolated from contaminated soil / Avaliação do potencial de solubilização do zinco da cepa ZSB13 de Pseudomonas oleovorans resistente ao zinco isolada de solo contaminado

Zinc is an essential micronutrient that is required for optimum plant growth. It is present in soil in insoluble forms. Bacterial solubilization of soil unavailable form of Zn into available form, is an emerging approach to alleviate the Zn deficiency for plants and human beings. Zinc solubilizing bacteria (ZSB) could be a substitute for chemical Zn fertilizer. The present study aimed to isolate and characterize bacterial species from the contaminated soil and evaluate their Zn solubilizing potential. Zn resistant bacteria were isolated and evaluated for their MIC against Zn. Among the 13 isolated bacterial strains ZSB13 showed maximum MIC value upto 30mM/L. The bacterial strain with the highest resistance against Zn was selected for further analysis. Molecular characterization of ZSB13 was performed by 16S rRNA gene amplification which confirmed it as Pseudomonas oleovorans. Zn solubilization was determined through plate assay and broth medium. Four insoluble salts (zinc oxide (ZnO), zinc carbonate (ZnCO3), zinc sulphite (ZnS) and zinc phosphate (Zn3(PO4)2) were used for solubilization assay. Our results shows 11 mm clear halo zone on agar plates amended with ZnO. Likewise, ZSB13 showed significant release of Zn in broth amended with ZnCO3 (17 and 16.8 ppm) and ZnO (18.2 ppm). Furthermore, Zn resistance genes czcD was also enriched in ZSB13. In our study, bacterial strain comprising Zn solubilization potential has been isolated that could be further used for the growth enhancement of crops.(AU)

O zinco é um micronutriente essencial necessário para o crescimento ideal das plantas. Ele está presente no solo em formas insolúveis. A solubilização bacteriana da forma indisponível de Zn no solo para a forma disponível é uma abordagem emergente para aliviar a deficiência de Zn em plantas e seres humanos. Bactérias solubilizadoras de zinco (ZSB) podem ser um substituto para fertilizantes químicos de Zn. O presente estudo teve como objetivo isolar e caracterizar espécies bacterianas de solo contaminado e avaliar seu potencial de solubilização de Zn. Bactérias resistentes ao Zn foram isoladas e avaliadas quanto ao seu MIC contra o Zn. Entre as 13 cepas bacterianas isoladas, ZSB13 apresentou valor máximo de MIC de até 30 mM/L. A cepa bacteriana com maior resistência ao Zn foi selecionada para análise posterior. A caracterização molecular de ZSB13 foi realizada por amplificação do gene 16S rRNA que o confirmou como Pseudomonas oleovorans. A solubilização do Zn foi determinada através de ensaio em placa e meio caldo. Quatro sais insolúveis (óxido de zinco (ZnO), carbonato de zinco (ZnCO3), sulfito de zinco (ZnS) e fosfato de zinco (Zn3 (PO4) 2) foram usados para o ensaio de solubilização. Nossos resultados mostram uma zona de halo clara de 11 mm em placas de ágar corrigidas com ZnO. Da mesma forma, ZSB13 mostrou liberação significativa de Zn em caldo alterado com ZnCO3 (17 e 16,8 ppm) e ZnO (18,2 ppm). Além disso, os genes de resistência ao Zn czcD também foram enriquecidos em ZSB13. Em nosso estudo, a cepa bacteriana compreendendo potencial de solubilização de Zn foi isolada e poderia ser usada posteriormente para o aumento do crescimento de safras.(AU)

Enterococcus Spp. Survival Through the Use of Standard Protocol for Clostridium Sp. Isolation

The genera Clostridium and Enterococcus are very different from each other, both morphologically and physiologically. Due to the high resistance by the sporulation capacity of Clostridium species, the thermal shock is a characteristic tool used for the isolation and identification of these microorganisms, this way, it would eliminate any other bacteria that did not present spores. The objective of this work is to show that Enterococcus sp. resist the temperature treatment and grow in culture media used for the isolation of Clostridium sp. For this, the present study initially attempted to identify reducing sulfite clostridia in poultry products, through the use of specific culture media and heat shock treatment. However, the PCR did not detect the presence of Clostridium sp. Then, sequencing of the 16S rDNA region was performed, which showed that the reducing sulfite colonies that were being isolated were, actually, Enterococcus spp. With this, some tests were carried out using different temperature and time combinations in the thermal shock, as well as the use of five different selective and differential culture media, in an attempt to eliminate any contaminants, but all without success, because these bacteria resisted to all modification. Therefore, the standard protocol for the isolation of bacteria of the genus Clostridium does not eliminate Enterococcus, which can lead to failures in the quantification and qualification of sulfite reducing microorganisms, a fact that can significantly affect food safety and animal health.(AU)

Enterococcus Spp. Survival Through the Use of Standard Protocol for Clostridium Sp. Isolation

The genera Clostridium and Enterococcus are very different from each other, both morphologically and physiologically. Due to the high resistance by the sporulation capacity of Clostridium species, the thermal shock is a characteristic tool used for the isolation and identification of these microorganisms, this way, it would eliminate any other bacteria that did not present spores. The objective of this work is to show that Enterococcus sp. resist the temperature treatment and grow in culture media used for the isolation of Clostridium sp. For this, the present study initially attempted to identify reducing sulfite clostridia in poultry products, through the use of specific culture media and heat shock treatment. However, the PCR did not detect the presence of Clostridium sp. Then, sequencing of the 16S rDNA region was performed, which showed that the reducing sulfite colonies that were being isolated were, actually, Enterococcus spp. With this, some tests were carried out using different temperature and time combinations in the thermal shock, as well as the use of five different selective and differential culture media, in an attempt to eliminate any contaminants, but all without success, because these bacteria resisted to all modification. Therefore, the standard protocol for the isolation of bacteria of the genus Clostridium does not eliminate Enterococcus, which can lead to failures in the quantification and qualification of sulfite reducing microorganisms, a fact that can significantly affect food safety and animal health.

Avaliação da qualidade microbiológica em atuns enlatados comercializados no Rio de Janeiro / Assessment of microbiological quality in canned tuna marketed in Rio de Janeiro

Objetivou-se avaliar a qualidade microbiológica de atuns enlatados comercializados no Rio de Janeiro, armazenados em refrigeração. A s análises bacteriológicas realizadas foram: Contagem de Bactérias Heterotróficas Aeróbias Mesófilas, Termófilas, Psicrófilas, Pesquisa de Bacillus spp., Contagem de bactérias esporuladas, Contagem de bactérias produtoras de histamina e anaeróbias sulfito redutoras a 46°C em três diferentes apresentações. Observou-se na contagem de mesófilas valores inferiores a 103 UFC/g e ausência de bactérias sulfito redutoras a 46°C. A s outras análises revelaram expressivo crescimento bacteriano, inclusive produtoras de histamina. Conclui-se que a qualidade microbiológica dos produtos analisados não foi satisfatória, podendo ocorrer alterações indesejáveis e comprometimento da segurança alimentar.(AU)

Avaliação da qualidade microbiológica em atuns enlatados comercializados no Rio de Janeiro / Assessment of microbiological quality in canned tuna marketed in Rio de Janeiro

Objetivou-se avaliar a qualidade microbiológica de atuns enlatados comercializados no Rio de Janeiro, armazenados em refrigeração. A s análises bacteriológicas realizadas foram: Contagem de Bactérias Heterotróficas Aeróbias Mesófilas, Termófilas, Psicrófilas, Pesquisa de Bacillus spp., Contagem de bactérias esporuladas, Contagem de bactérias produtoras de histamina e anaeróbias sulfito redutoras a 46°C em três diferentes apresentações. Observou-se na contagem de mesófilas valores inferiores a 103 UFC/g e ausência de bactérias sulfito redutoras a 46°C. A s outras análises revelaram expressivo crescimento bacteriano, inclusive produtoras de histamina. Conclui-se que a qualidade microbiológica dos produtos analisados não foi satisfatória, podendo ocorrer alterações indesejáveis e comprometimento da segurança alimentar.

Qualidade microbiológica das refeições transportadas oferecidas aos profissionais da saúde durante uma campanha de imunização em Goiânia / Microbiological quality of transposed meals offered to health professionals during the immunization campaign in Goiânia

O trabalho teve como objetivo avaliar a qualidade microbiológica das refeições transportadas oferecidas aos profissionais da saúde, durante a campanha de imunização em Goiânia, GO. Para tal, foram analisadas as condições e materiais das embalagens, temperatura de recepção das refeições, condições de transporte, análises microbiológicas (Coliformes Termotolerantes, Clostridium sulfito redutos, Staphylococcus coagulase positiva e Bacillus cereus) das refeições e sua classificação sanitária. As refeições constituíam-se de almoço, sendo analisadas 27 amostras. Todas as refeições encontravam-se impróprias para consumo por causa da elevada contaminação por Coliformes Termotolerantes e temperatura inferior a 60°C. As unidades devem ter maior comprometimento com a qualidade sanitária das refeições para mitigar as possiblidades de adoecimento.(AU)

Qualidade microbiológica das refeições transportadas oferecidas aos profissionais da saúde durante uma campanha de imunização em Goiânia / Microbiological quality of transposed meals offered to health professionals during the immunization campaign in Goiânia

O trabalho teve como objetivo avaliar a qualidade microbiológica das refeições transportadas oferecidas aos profissionais da saúde, durante a campanha de imunização em Goiânia, GO. Para tal, foram analisadas as condições e materiais das embalagens, temperatura de recepção das refeições, condições de transporte, análises microbiológicas (Coliformes Termotolerantes, Clostridium sulfito redutos, Staphylococcus coagulase positiva e Bacillus cereus) das refeições e sua classificação sanitária. As refeições constituíam-se de almoço, sendo analisadas 27 amostras. Todas as refeições encontravam-se impróprias para consumo por causa da elevada contaminação por Coliformes Termotolerantes e temperatura inferior a 60°C. As unidades devem ter maior comprometimento com a qualidade sanitária das refeições para mitigar as possiblidades de adoecimento.

Microbiological and physical-chemical characteristics of honeys from the bee Melipona fasciculata produced in two regions of Brazil / Características microbiológicas e físico-químicas de méis de abelha Melipona fasciculata produzidos em duas regiões do Brasil

The honey from Tiúba bees (Melipona fasciculata) is commercially important in the Brazilian state of Maranhão. However, the absence of any specific legislation for this kind of honey is an obstacle to its increased production and commercialization. Determining the microbiological and physical-chemical characteristics of different Tiúba honey can inform the elaboration of specific legislation. Thus, honey samples from two Water Catchment Areas in Maranhão (Munim and Pericumã, sample size 20 for each) were collected and submitted for microbiological analysis (total coliforms, thermotolerant coliforms, molds and yeasts, Clostridium sulfite reducers and Salmonella sp.) and physical-chemical analysis (moisture content, reducing and non-reducing sugars, insoluble and soluble solids, ash content, acidity and pH). Most of honeys sampled were suitable for human consumption, except for one sample from Pericumã. Honeys from the two water catchment areas presented differences in some physicochemical characteristics, which can be attributed to the botanic, soil and climatic diversity of the two areas. Still, these Tiúba honey samples did not fall within the Brazilian legislation for Apis mellifera honey for some of the physical-chemical characteristics, and so is not properly regulated, thus reinforcing the need for specific legislation for this type of honey.

O mel de Tiúba (Melipona fasciculata) tem importância comercial na região do estado do Maranhão, no entanto a ausência de uma legislação específica para este mel entrava a ampliação de sua produção e comercialização. Dessa forma, faz-se necessário determinar as características microbiológicas e físico-químicas de méis de Tiúba, com o objetivo de fornecer subsídios para a elaboração de uma legislação específica. Assim, amostras de méis provenientes de duas bacias hidrográficas do Maranhão (Munim n = 20, e Pericumã n = 20) foram coletadas e submetidas às análises microbiológicas (coliformes totais, coliformes termotolerantes, bolores e leveduras, Clostridium sulfito redutores e Salmonella sp.) e físico-químicas (umidade, açúcares redutores e não redutores, sólidos insolúveis e solúveis, cinzas, acidez e pH). A maioria dos méis apresentou-se adequado microbiologicamente ao consumo humano, exceto uma amostra de mel proveniente de Pericumã. Os méis provenientes das duas bacias hidrográficas apresentaram diferenças em algumas características físico-químicas, o que pode ser atribuído à diversidade botânica, edáfica (solo) e climática das duas bacias. Ainda, os méis de Tiúba não se adequaram à legislação brasileira de Apis mellifera para algumas características físico-químicas, o que não permite sua regulamentação e, assim, reforça a necessidade de legislação específica para este tipo de mel.

Microbiological and physical-chemical characteristics of honeys from the bee Melipona fasciculata produced in two regions of Brazil / Características microbiológicas e físico-químicas de méis de abelha Melipona fasciculata produzidos em duas regiões do Brasil

The honey from Tiúba bees (Melipona fasciculata) is commercially important in the Brazilian state of Maranhão. However, the absence of any specific legislation for this kind of honey is an obstacle to its increased production and commercialization. Determining the microbiological and physical-chemical characteristics of different Tiúba honey can inform the elaboration of specific legislation. Thus, honey samples from two Water Catchment Areas in Maranhão (Munim and Pericumã, sample size 20 for each) were collected and submitted for microbiological analysis (total coliforms, thermotolerant coliforms, molds and yeasts, Clostridium sulfite reducers and Salmonella sp.) and physical-chemical analysis (moisture content, reducing and non-reducing sugars, insoluble and soluble solids, ash content, acidity and pH). Most of honeys sampled were suitable for human consumption, except for one sample from Pericumã. Honeys from the two water catchment areas presented differences in some physicochemical characteristics, which can be attributed to the botanic, soil and climatic diversity of the two areas. Still, these Tiúba honey samples did not fall within the Brazilian legislation for Apis mellifera honey for some of the physical-chemical characteristics, and so is not properly regulated, thus reinforcing the need for specific legislation for this type of honey.(AU)

O mel de Tiúba (Melipona fasciculata) tem importância comercial na região do estado do Maranhão, no entanto a ausência de uma legislação específica para este mel entrava a ampliação de sua produção e comercialização. Dessa forma, faz-se necessário determinar as características microbiológicas e físico-químicas de méis de Tiúba, com o objetivo de fornecer subsídios para a elaboração de uma legislação específica. Assim, amostras de méis provenientes de duas bacias hidrográficas do Maranhão (Munim n = 20, e Pericumã n = 20) foram coletadas e submetidas às análises microbiológicas (coliformes totais, coliformes termotolerantes, bolores e leveduras, Clostridium sulfito redutores e Salmonella sp.) e físico-químicas (umidade, açúcares redutores e não redutores, sólidos insolúveis e solúveis, cinzas, acidez e pH). A maioria dos méis apresentou-se adequado microbiologicamente ao consumo humano, exceto uma amostra de mel proveniente de Pericumã. Os méis provenientes das duas bacias hidrográficas apresentaram diferenças em algumas características físico-químicas, o que pode ser atribuído à diversidade botânica, edáfica (solo) e climática das duas bacias. Ainda, os méis de Tiúba não se adequaram à legislação brasileira de Apis mellifera para algumas características físico-químicas, o que não permite sua regulamentação e, assim, reforça a necessidade de legislação específica para este tipo de mel.(AU)

Sulfites in beer: reviewing regulation, analysis and role

Beer is an extremely complex mixture of more than 3,000 different compounds in an aqueous environment. Thus, it is perhaps not surprising that the maintenance of beer quality throughout its lifetime has been a considerable challenge for brewers. Whilst it is inevitable that chemical changes will occur in beer with the passage of time, it is the formation of flavor-active components which is of immediate concern to an overview of beer shelf life stability. Sulfur dioxide has long been recognized by brewers as the most important factor in delaying flavor staling, and prolonging the shelf life of beer. However, nowadays, sulfur dioxide and sulfites are considered allergens and concerns about the safety of their use as food additives have been on the increase. The present review is structured into three main parts. Firstly, the chemical properties of sulfur dioxide are presented, along with the toxic effects and maximum legal levels permitted according to U.S. and EU legislation. As the accurate determination of the free, bound and total sulfur dioxide in beer is essential to ensuring regulatory compliance, several methods have been developed for analyzing sulfur dioxide in beer. Thus, secondly, various types of methods are reported and compared with the officially recommended ones. Finally, the crucial role of sulfite in the control of flavor instability of beer is discussed in light of the current data. Two courses of action have been proposed, which are elucidated in detail relating firstly to the fact that sulfite inhibits beer oxidation during storage by acting as an antioxidant and, secondly, sulfite reacts with the carbonyl staling compounds in beer, and thereby masks stale flavors.

Sulfites in beer: reviewing regulation, analysis and role

Beer is an extremely complex mixture of more than 3,000 different compounds in an aqueous environment. Thus, it is perhaps not surprising that the maintenance of beer quality throughout its lifetime has been a considerable challenge for brewers. Whilst it is inevitable that chemical changes will occur in beer with the passage of time, it is the formation of flavor-active components which is of immediate concern to an overview of beer shelf life stability. Sulfur dioxide has long been recognized by brewers as the most important factor in delaying flavor staling, and prolonging the shelf life of beer. However, nowadays, sulfur dioxide and sulfites are considered allergens and concerns about the safety of their use as food additives have been on the increase. The present review is structured into three main parts. Firstly, the chemical properties of sulfur dioxide are presented, along with the toxic effects and maximum legal levels permitted according to U.S. and EU legislation. As the accurate determination of the free, bound and total sulfur dioxide in beer is essential to ensuring regulatory compliance, several methods have been developed for analyzing sulfur dioxide in beer. Thus, secondly, various types of methods are reported and compared with the officially recommended ones. Finally, the crucial role of sulfite in the control of flavor instability of beer is discussed in light of the current data. Two courses of action have been proposed, which are elucidated in detail relating firstly to the fact that sulfite inhibits beer oxidation during storage by acting as an antioxidant and, secondly, sulfite reacts with the carbonyl staling compounds in beer, and thereby masks stale flavors.(AU)

Partial substitution of sodium chloride in Toscana sausages and the effect on product characteristics / Substituição parcial de cloreto de sódio em linguiça Toscana e os efeitos nas características do produto

High sodium intake has been linked with problems of hypertension and in Brazil, it still has above that recommended by the World Health Organization. Meat products contribute 2030% of sodium intake in the diet, indicating the necessity of reducing the amount of sodium added. The aim of this study was to reduce the sodium content in Toscana sausages by partial replacement of sodium chloride with PuraQ Arome NA4 substitute, and to evaluate the effect on physico-chemical and microbiological parameters and sensory acceptability. Three formulations one control (T1), and one with 20% (T2) and another with 30% (T3) sodium reduction compared with the control were produced. For comparative purposes, the physico-chemical, microbiological and sensory parameters were determined. In the proposed formulations with 20% and 30% reduction, the sodium contents were 857.3 mg 100 g-1 (T2) and 790.3 mg 100 g-1 (T3), compared with 926.7 mg 100 g-1 in T1. The produced samples were in accordance with the physico-chemical (moisture, lipid, protein and calcium) and microbiological (Salmonella, coagulase-positive Staphylococcus, and sulphite-reducing Clostridium and Coliforms at 45C) parameters stipulated by Brazilian law. The analysis of lightness and hue indicated that the sample T3 had a more intense red colour, while T1 had a less intense red colour. In the shear force evaluation, no difference...(AU)

O consumo elevado de sódio tem sido relacionado com problemas de hipertensão arterial e, no Brasil, ainda tem-se um consumo acima do recomendado pela Organização Mundial da Saúde. Os produtos cárneos têm contribuído com 20 a 30% do sódio ingerido na dieta, indicando a necessidade de redução no sódio adicionado. O objetivo do presente estudo foi reduzir o teor de sódio em linguiça Toscana por meio da substituição parcial do cloreto de sódio (NaCl) pelo substituto PuraQ Arome NA4 e avaliar o efeito deste aditivo na aceitação sensorial da linguiça Toscana. Foram elaboradas três formulações, uma controle (T1), uma com 20% (T2) e outra com 30% (T3) de redução de sódio, em comparação à primeira (T1). Para efeitos comparativos, os parâmetros físico-químicos, microbiológicos e sensoriais foram determinados. Nas formulações com proposta de 20% e 30% de redução, o teor de sódio foi 857,3 mg 100 g-1 (T2) e 790,3 mg 100 g-1 (T3), comparados com 926,7 mg 100 g-1 em T1. As formulações elaboradas atenderam os critérios físico-químicos (umidade, lipídio, proteína e cálcio) e microbiológicos (Salmonella, Staphylococcus coagulase positiva, Clostridium sulfito redutor e Coliformes a 45 ºC) estipulados na legislação brasileira. A análise dos parâmetros luminosidade e tonalidade cromática indicaram que a amostra T3 foi a de cor vermelha mais intensa, enquanto T1 a de cor vermelha menos intensa...(AU)

Tambaqui (Colossoma macropomum) sous vide: characterization and quality parameters / Sous vide de tambaqui (Colossoma macropomum): caracterização e parâmetros de qualidade

The objective of this study was to evaluate the microbiological, physical and physico-chemical quality parameters of sous vide preparation of pen-reared tambaqui (Colossoma macropomum). To prepare the tambaqui sous vide, 200 g of fillet, 50 g of basil sauce (1:4 fish fillet:sauce ratio) and 10 mL of 5% sodium lactate were used. The product was then vacuum-packaged, pasteurized at 65 ºC for 12.5 min and refrigerated. The presence of Salmonella spp., sulfite-reducing Clostridium and Listeria monocytogenes was not detected in the samples analyzed. The coliform count at 45 ºC and coagulase-positive staphylococci were below the limit (10³) permitted by the law in vigor. Water retention capacity and chloride content analyses revealed that the tambaqui fillet differed significantly (P<0.05) from the sous vide because of the addition of basil sauce. The total volatile basic nitrogen (TVB-N) and thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) content of the fillet and sous vide were below the limits established by the law, indicating good quality. The lightness (L*) and yellow color (b*) of the fillet and the sous vide did not differ significantly (P>0.05), but the red color (a*) decreased in the sous vide, which is related to the addition of basil sauce. The chroma (C*) and hue angle (ho) differed significantly (P<0.05), and the fillet samples were lighter in color, whereas the sous vide was characterized by yellow color. The n-6/n-3 ratios found for the fillet and the sous vide are within the recommended values, which is important for human metabolism. The fillet and sous vide also had high calcium, zinc, magnesium and potassium concentrations. It is concluded that tambaqui sous vide is a good source of nutrients, rich in fatty acids and minerals essential for human health.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar os parâmetros de qualidade microbiológica, física e físico-química de sous vide de tambaqui (Colossoma macropomun) cultivado. Para a elaboração do sous vide foram utilizados 200 g de filé de tambaqui, 50 g de molho a base de manjericão (1:4 de filé de peixe: molho) e 10 mL de lactato de sódio a 5%, em seguida foram embalados à vácuo, pasteurizados a 65ºC durante 12,5 min e mantidos sob refrigeração. Nas amostras analisadas não foi detectada a presença de Salmonella spp, Clostridium sulfito redutores e Listeria monocytogenes. A contagem de coliformes a 45ºC e estafilococus coagulase positiva foram inferiores ao limite (10³) permitido na legislação vigente. As análises de capacidade de retenção de água e teor de cloretos, do filé de tambaqui apresentaram diferença significativa (P<0,05) quando comparados ao sous vide devido a adição do molho de manjericão. As análises de bases voláteis totais (N-BVT) e teor de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) no filé e no sous vide encontravam-se abaixo dos limites estabelecidos pela legislação indicando sua boa qualidade. A luminosidade (L*) e a cor amarela (b*) não mostraram diferença significativa (P>0,05) ao comparar o filé com o sous vide, porém o a* (cor vermelha) diminuiu o que está relacionado com a adição do molho do molho de manjericão. O croma (C*) e ângulo de tonalidade (hº) diferiram significativamente (P<0,05), foi constatado que as amostras de filé apresentaram uma cor mais clara e o sous vide foi identificado com a cor amarela. As razões n-6/n-3 encontradas no filé e no sous vide estão dentro do valor recomendado sendo importante para o metabolismo humano. Apresentaram também altas concentrações de cálcio, zinco, magnésio e potássio. Conclui-se, que o sous vide de tambaqui é boa fonte de nutrientes, rico de ácidos graxos e minerais essenciais para a saúde humana.(AU)

Partial substitution of sodium chloride in Toscana sausages and the effect on product characteristics / Substituição parcial de cloreto de sódio em linguiça Toscana e os efeitos nas características do produto

High sodium intake has been linked with problems of hypertension and in Brazil, it still has above that recommended by the World Health Organization. Meat products contribute 2030% of sodium intake in the diet, indicating the necessity of reducing the amount of sodium added. The aim of this study was to reduce the sodium content in Toscana sausages by partial replacement of sodium chloride with PuraQ Arome NA4 substitute, and to evaluate the effect on physico-chemical and microbiological parameters and sensory acceptability. Three formulations one control (T1), and one with 20% (T2) and another with 30% (T3) sodium reduction compared with the control were produced. For comparative purposes, the physico-chemical, microbiological and sensory parameters were determined. In the proposed formulations with 20% and 30% reduction, the sodium contents were 857.3 mg 100 g-1 (T2) and 790.3 mg 100 g-1 (T3), compared with 926.7 mg 100 g-1 in T1. The produced samples were in accordance with the physico-chemical (moisture, lipid, protein and calcium) and microbiological (Salmonella, coagulase-positive Staphylococcus, and sulphite-reducing Clostridium and Coliforms at 45C) parameters stipulated by Brazilian law. The analysis of lightness and hue indicated that the sample T3 had a more intense red colour, while T1 had a less intense red colour. In the shear force evaluation, no difference...

O consumo elevado de sódio tem sido relacionado com problemas de hipertensão arterial e, no Brasil, ainda tem-se um consumo acima do recomendado pela Organização Mundial da Saúde. Os produtos cárneos têm contribuído com 20 a 30% do sódio ingerido na dieta, indicando a necessidade de redução no sódio adicionado. O objetivo do presente estudo foi reduzir o teor de sódio em linguiça Toscana por meio da substituição parcial do cloreto de sódio (NaCl) pelo substituto PuraQ Arome NA4 e avaliar o efeito deste aditivo na aceitação sensorial da linguiça Toscana. Foram elaboradas três formulações, uma controle (T1), uma com 20% (T2) e outra com 30% (T3) de redução de sódio, em comparação à primeira (T1). Para efeitos comparativos, os parâmetros físico-químicos, microbiológicos e sensoriais foram determinados. Nas formulações com proposta de 20% e 30% de redução, o teor de sódio foi 857,3 mg 100 g-1 (T2) e 790,3 mg 100 g-1 (T3), comparados com 926,7 mg 100 g-1 em T1. As formulações elaboradas atenderam os critérios físico-químicos (umidade, lipídio, proteína e cálcio) e microbiológicos (Salmonella, Staphylococcus coagulase positiva, Clostridium sulfito redutor e Coliformes a 45 ºC) estipulados na legislação brasileira. A análise dos parâmetros luminosidade e tonalidade cromática indicaram que a amostra T3 foi a de cor vermelha mais intensa, enquanto T1 a de cor vermelha menos intensa...

Desenvolvimento, Padronização e Comparação de Técnicas Diagnósticas para Avaliação da Transferência de Imunidade Passiva em Bezerros

O monitoramento da Transferência de Imunidade Passiva (TIP) deve ser realizado nas fazendas porque os bezerros nascem hipogamaglobulinêmicos e são dependentes da ingestão do colostro para adquirir imunoglobulinas (Ig) maternas. A Falha na Transferência da Imunidade Passiva (FTIP) está relacionada ao maior risco de morbidade, mortalidade e menores taxas de crescimento dos bezerros, além de outros prejuízos. Existem diversas técnicas disponíveis para avaliar a TIP e, nesse sentido, o objetivo do presente estudo foi (1) apresentar uma revisão de literatura sobre estas técnicas; (2) padronizar a técnica considerada padrão-ouro (teste de referência), a Imunodifusão Radial (IDR), a fim de utilizá-la na comparação de técnicas de avaliação da TIP (inclusive a técnica desenvolvida); (3) determinar os pontos de corte para avaliação TIP em bezerros em condições de clima tropical de criação com as técnicas de: refratometria óptica de proteína, refratometria digital de proteína e BRIX, análise bioquímica da proteína total e frações em analisador bioquímico automático, além da técnica desenvolvida da turvação do sulfito de sódio e (4) desenvolver um teste rápido baseado na modificação da técnica já descrita de turvação do sulfito de sódio, que permita determinar, de forma dicotômica, se o bezerro adquiriu ou não a imunidade passiva e compará-lo à outras técnicas para avaliação da TIP. Para a realização do presente trabalho avaliou-se 418 amostras de bezerros de 24 a 48 horas de idade realizando-se as técnicas de IDR descritas anteriormente, além do teste de 17 concentrações de soluções de sulfito de sódio. Todas as análises foram realizadas em triplicata. Analisou-se os resultados de mortalidade e número de tratamentos dos bezerros a fim de determinar os pontos de corte para as técnicas avaliadas em condições de criação de bezerros em clima tropical. A técnica de Imunodifusão Radial padronizada in house estimou a concentração de imunoglobulinas, mas não foi eficiente na determinação da concentração da imunoglobulina G de amostras de soro de bezerros para a avaliação da Transferência da Imunidade Passiva. A dosagem de Globulinas foi mais representativa da TIP, devendo ser utilizada como técnica padrão-ouro. Em condições tropicais de criação de bezerros, os pontos de corte para Boa e Excelente TIP foram, respectivamente, 7,0 g/dL e 9,0 g/dL para Proteína Total, 4,8 g/dL e 7,4 g/dL para Globulinas e 2,0 g/dL e 3,5 g/dL para IgG. Os refratômetros superestimaram as concentrações de Proteína Total, necessitando aumento no seu ponto de corte ou um fator de correção para seu uso. Determinou-se que a concentração de 13% de sulfito de sódio deve ser utilizada no teste rápido para avaliação da TIP, uma vez que ela é que mais se aproxima dos pontos de corte para Boa TIP em condições tropicais de criação de bezerros.

Monitoring Transfer of Passive Immunity (TPI) should be performed on farms because calves are born hypogammaglobulinemic and are dependent on colostrum ingestion to acquire maternal immunoglobulins (Ig). Failure of Transfer of Passive Immunity (FTPI) is related to increased risk of morbidity, mortality, lower calf growth rates, and other impairments. There are several techniques available to evaluate TPI and, in this sense, the objective of the present study was (1) to present a literature review on these techniques; (2) standardize the technique considered the gold standard (reference test), Radial Immunodiffusion (RID), in order to use it in the comparison of TPI evaluation techniques; (3) determine the cutoff points for evaluation of TPI in calves under tropical rearing conditions for total protein on optical refractometry, total protein and Brix on digital refractometry, biochemical analysis for total protein and fractions in automated biochemical analyzer, and the developed technique of sodium sulfite turbidity test using the standardized RID technique and (4) to develop a rapid test based on the modification of the previously described technique of sodium sulfite turbidity test, which allows a dichotomous determination of whether the calf has acquired passive immunity and compare it to other techniques for assessing TPI. For this study, 418 samples of 24 to 48 hour-old calves were evaluated using standardized RID technique, total protein on optical refractometry, total protein and Brix on digital refractometry, biochemical analysis of total protein and fractions on automatic biochemical analyzer for all samples. In addition, to testing 17 concentrations of sodium sulfite solutions. All analyzes were performed in triplicate. Calf mortality and number of treatments were analyzed to determine the cutoff points for the techniques evaluated under calf rearing conditions in tropical climate. The in-house standardized RID technique estimated immunoglobulin concentration, but was not efficient in determining the immunoglobulin G concentration of calf serum samples for the evaluation of TPI. The dosage of globulins was more representative of TPI and should be used as the gold standard technique. Under tropical calf rearing conditions, the cutoff points for Good and Excellent TPI were, respectively, 7.0 g/dL and 9.0 g/dL for Total Protein, 4.8 g/dL and 7.4 g/dL for Globulins and 2.0 g/dL and 3.5 g/dL for IgG. Refractometers overestimated total protein concentrations, requiring an increase in their cutoff or a correction factor for their use. It has been determined that the 13% 10 sodium sulfite concentration should be used in the rapid test for TPI assessment, as it is closest to the cutoff points for Good TPI under tropical calf rearing conditions

Microbiological quality of sandwiches of food establishments with delivery service / Qualidade microbiológica de sanduíches de estabelecimentos com serviço tipo delivery

Snacks are highly consumed products due to the low price, easy and fast preparation and convenience. However, the inadequate handling and preparation of these foods increase the risk for microbiological contamination. This study aimed at examining the microbiological quality of hamburgers by performing the counts of mesophilic aerobic bacteria, total coliforms, Escherichia coli, Salmonella sp., Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, sulfite reducer Clostridium, and molds and yeasts. Eighteen samples were collected from six lunchrooms in the city of Ouro Preto - MG. Among the analyzed samples, 56 % were classified as unsatisfactory for mesophilic aerobic counts, 67 % for total coliforms counts, 6 % for E. coli, and 61 % for molds and yeasts. Salmonella sp. was not detected in any of the analyzed samples, and the CFU/g of B. cereus, S. aureus and sulfite reducer Clostridium were under the detection limit. Despite the absence or low prevalence of the above mentioned pathogens, the high counts of mesophilic aerobic bacteria, yeasts and molds, and total coliforms indicate the need for implementing the good manufacturing practices in the evaluated establishments, and an agenda by the government to increase the supervision from the sanitary surveillance center of the municipality(AU)

Lanches prontos são produtos altamente consumidos em função do baixo preço, rapidez e comodidade. Contudo, as condições inadequadas de preparo e manipulação destes alimentos aumentam os riscos de contaminações microbiológicas. Objetivou-se examinar a qualidade microbiológica de sanduíches tipo hambúrguer quanto às contagens de bactérias aeróbias mesófilas, coliformes totais, Escherichia coli, Salmonella sp., Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Clostridium sulfito redutor, e bolores e leveduras. Foram avaliados 18 sanduíches de seis estabelecimentos localizados no município de Ouro Preto MG. Das amostras analisadas, 56 % estavam em desacordo com os padrões estabelecidos para as contagens de aeróbios mesófilos, 67 % para coliformes totais, 6 % para E. coli, e 61 % apresentaram contagens elevadas de bolores e leveduras. Não foi detectada a presença de Salmonella sp.; e as contagens dos B. cereus, Staphylococcus aureus e Clostridium sulfito redutor foram abaixo do limite de detecção. Apesar da ausência ou baixa prevalência dos patógenos acima citados, as contagens elevadas de mesófilos aeróbios, bolores e leveduras, assim como de coliformes totais sugerem que há necessidade de efetuar a implantação das boas práticas de produção nos estabelecimentos avaliados, além de maior fiscalização por parte da vigilância sanitária do município(AU)

Occurrence of antibiotic-resistant Escherichia coli and Staphylococcus aureus and of Entamoeba coli and Ascaris lumbricoides parasites in the school snacks / Ocorrência de Escherichia coli e Staphylococcus aureus resistentes a antimicrobianos e parasitos Entamoeba coli e Ascaris lumbricoides em merendas escolares

Several outbreaks of food-borne diseases have been reported in schools, and these have been responsible for causing death of millions children per year worldwide. The objective of this study was to evaluate the rate of microbiological and parasitological contamination of school meals. This study evaluated 102 samples of different types of food by analyzing total coliforms, thermotolerant, Escherichia coli, Salmonella spp., coagulase-positive Staphylococcus aureus, Bacillus cereus and sulfite-reducing clostridia. Total coliforms counts were > 1,100 MPN, and of 3 a 240 MPN for thermotolerant. E. coli was isolated from four samples, and S. aureus was detected in two samples in a rate higher than the permitted one. By means of antimicrobial susceptibility testing, E. coli and S. aureus strains showed to be resistant to ampicillin and penicillin, respectively. In the parasitological analysis in raw foods, the following parasites were investigated: Entamoeba coli, Entamoeba hystolitica, Giardia duodenalis and Ascaris lumbricoides. Entamoeba coli and Ascaris lumbricoides were found in salad. The school meals offer risks to the children health; therefore, it has to improve the conditions of their preparation and to implement the Good Practices in the educational institutions.(AU)

Vários surtos de doenças de origem alimentar têm sido relatados nas escolas, e que chegam a matar milhões de crianças a cada ano em todo o mundo. O objetivo deste estudo foi de avaliar o nível de contaminação microbiológica e parasitológica de refeições escolares. Foram avaliadas 102 amostras de diferentes tipos de alimentos, em que foram analisados: coliformes totais, termotolerantes, Escherichia coli, Salmonella spp., Staphylococcus coagulase positiva (CP), Bacillus cereus e clostrídios sulfito redutores. Foram encontradas contagens > 1.100 NMP de coliformes totais e 3 a 240 NMP de termotolerantes. Quatro amostras apresentaram E. coli e Staphylococcus (CP) foi isolado em duas em nível acima do permitido. No teste de sensibilidade a antimicrobianos, as cepas de E. coli e de Staphylococcus (CP) detectadas neste estudo demonstraram resistência, respectivamente, a ampicilina e penicilina. Na análise parasitológica dos alimentos crus foram pesquisados: Entamoeba coli, Entamoeba histolytica, Giardia duodenalis e Ascaris lumbricoides. Entamoeba coli e Ascaris lumbricoides foram detectados na salada. A merenda escolar oferece riscos à saúde das crianças, o que indica a necessidade de melhoria nas condições de seu preparo e de implantação das Boas Práticas nas instituições de ensino.(AU)