Sepsis due to Yersinia enterocolitica in an aborted equine fetus: case report / Sepse por Yersinia enterocolitica em um feto equino abortado: relato de caso

Yersinia enterocolitica is a bacterium with zoonotic potential and there are no previous records of this bacteria being isolated from aborted foals. This report aims to describe a case of sepsis due to Y. enterocolitica in a seven month old aborted equine. The fequinoetus was submitted to necropsy and samples of all the organs were collected for the histological exam. Samples of liver, lung, placenta, and stomach contents were collected for bacterial culture. Macroscopically, the liver was enlarged with yellowish heterogeneous color, heart with pale myocardial areas; lungs not collapsed, heavy and shiny, thickened umbilical cord covered with fibrin and pus. Histopathologically, there was moderate multifocal necrosuppurative myocarditis and thrombosis, moderate diffuse suppurative bronchopneumonia, mild multifocal fibrinonecrotic hepatitis, and moderate diffuse necrosuppurative omphalitis with intralesional bacterial myriads and thrombosis. Mild multifocal suppurative placentitis, nephritis, myositis, cystitis, and dermatitis were also observed, in addition to mild diffuse lymphoid rarefaction. The microbiological evaluation identified Y. enterocolitica in the liver, lung, and stomach fluid. This is the first report of sepsis due to Y. enterocolitica causing an abortion in a horse. This bacterium has zoonotic importance; therefore, it should be investigated in abortion in this species, serving as a differential diagnosis in reproductive disorders.(AU)

Yersinia enterocolitica é uma bactéria com potencial zoonótico, e não há informações desse agente como causa de abortamento em equinos. O objetivo deste relato é descrever um caso de sepse por Y. enterocolitica em um feto equino abortado aos sete meses. O feto foi submetido à necropsia, e amostras de todos os órgãos foram processadas para histopatologia. Para microbiologia, foram coletadas amostras de fígado, pulmão, placenta e conteúdo estomacal. Macroscopicamente, observou-se fígado aumentado com coloração amarelada heterogênea; coração com áreas pálidas no miocárdio; pulmões não colabados, pesados e brilhantes; e cordão umbilical espessado e recoberto por fibrina e pus. Na análise histopatológica, havia miocardite necrossupurativa multifocal moderada e trombose, broncopneumonia supurativa difusa moderada, hepatite fibrinonecrótica multifocal discreta e onfalite necrossupurativa difusa moderada com miríades bacterianas intralesionais e trombose. Observou-se também placentite, nefrite, miosite, cistite e dermatite supurativa multifocal discreta, além de rarefação linfoide difusa discreta. A avaliação microbiológica identificou Y. enterocolitica no fígado, no pulmão e no líquido estomacal. Este é o primeiro relato de sepse por Y. enterocolitica causando abortamento na espécie equina. Essa bactéria tem importância zoonótica, portanto deve ser investigada em casos de abortamento nessa espécie, servindo como diagnóstico diferencial em tal distúrbio reprodutivo.(AU)

Onfalite associada a pneumonia embólica em neonatos caninos / Omphalitis associated with embolic pneumonia in canine neonates

não hemorrágica, mucosa oral cianótica e dispneia intensa 48 horas após o nascimento. Apesar dos cuidados de suporte, os filhotes morreram e foram submetidos à necropsia. Na avaliação anatomopatológica, foi diagnosticada onfalite bacteriana supurativa em todos os animais, caracterizada macroscopicamente por aumento de volume em região umbilical, e, microscopicamente, por infiltrado inflamatório neutrofílico e necrose, associado a numerosas colônias bacterianas intralesionais. Pneumonia intersticial multifocal a coalescente com necrose alveolar e grande quantidade de colônias bacterianas intralesionais foi diagnosticada em todos os filhotes, morfologia típica de pneumonia embólica. Escherichia coli, Staphylococcus spp., Klebsiella pneumoniae e Klebsiella ozaenae e Bacillus cereus foram isolados dos fragmentos pulmonares. Este caso demonstra a associação entre onfalite e pneumonia. Falhas nos cuidados neonatais podem ocasionar infecção bacteriana generalizada e elevada mortalidade. A antissepssia do umbigo deve ser realizada logo após o nascimento a fim de reduzir os casos de onfalite e consequentemente a mortalidade neonatal.(AU)

Four canine neonates, that were born in poor hygiene condition, presented prostration, nonhemorrhagic diarrhea, cyanotic oral mucous membranes, and intense dyspnea 48 hours after the birth. Despite supportive care, the animals died and were necropsied. Anatomopathological examination revealed suppurative bacterial omphalitis in all animals, macroscopically characterized by umbilicus enlargement and, microscopically, by neutrophilic inflammatory infiltrate and necrosis, associated with intralesional bacterial colonies. Multifocal to coalescent interstitial pneumonia with alveolar necrosis and numerous intralesional bacterial colonies was diagnosed in all neonates, morphologically suggestive of embolic pneumonia. Escherichia coli, Staphylococcus spp., Klebsiella pneumoniae, Klebsiella ozaenae and Bacillus cereus, were isolated from lung tissue samples. This case demonstrates the association between omphalitis and pneumonia. Inappropriate neonatal care can predispose neonates to generalized bacterial infection and death. Therefore, umbilical cord treatment should be performed immediately after birth to reduce neonatal mortality.(AU)

Onfalite associada a pneumonia embólica em neonatos caninos / Omphalitis associated with embolic pneumonia in canine neonates

não hemorrágica, mucosa oral cianótica e dispneia intensa 48 horas após o nascimento. Apesar dos cuidados de suporte, os filhotes morreram e foram submetidos à necropsia. Na avaliação anatomopatológica, foi diagnosticada onfalite bacteriana supurativa em todos os animais, caracterizada macroscopicamente por aumento de volume em região umbilical, e, microscopicamente, por infiltrado inflamatório neutrofílico e necrose, associado a numerosas colônias bacterianas intralesionais. Pneumonia intersticial multifocal a coalescente com necrose alveolar e grande quantidade de colônias bacterianas intralesionais foi diagnosticada em todos os filhotes, morfologia típica de pneumonia embólica. Escherichia coli, Staphylococcus spp., Klebsiella pneumoniae e Klebsiella ozaenae e Bacillus cereus foram isolados dos fragmentos pulmonares. Este caso demonstra a associação entre onfalite e pneumonia. Falhas nos cuidados neonatais podem ocasionar infecção bacteriana generalizada e elevada mortalidade. A antissepssia do umbigo deve ser realizada logo após o nascimento a fim de reduzir os casos de onfalite e consequentemente a mortalidade neonatal.

Four canine neonates, that were born in poor hygiene condition, presented prostration, nonhemorrhagic diarrhea, cyanotic oral mucous membranes, and intense dyspnea 48 hours after the birth. Despite supportive care, the animals died and were necropsied. Anatomopathological examination revealed suppurative bacterial omphalitis in all animals, macroscopically characterized by umbilicus enlargement and, microscopically, by neutrophilic inflammatory infiltrate and necrosis, associated with intralesional bacterial colonies. Multifocal to coalescent interstitial pneumonia with alveolar necrosis and numerous intralesional bacterial colonies was diagnosed in all neonates, morphologically suggestive of embolic pneumonia. Escherichia coli, Staphylococcus spp., Klebsiella pneumoniae, Klebsiella ozaenae and Bacillus cereus, were isolated from lung tissue samples. This case demonstrates the association between omphalitis and pneumonia. Inappropriate neonatal care can predispose neonates to generalized bacterial infection and death. Therefore, umbilical cord treatment should be performed immediately after birth to reduce neonatal mortality.

Salmonella Typhimurium - associated meningoencephalomyelitis in a foal / Meningoencefalomielite por Salmonella Typhimurium em potro

A 10-day old foal presented with a history of acute recumbency and generalized weakness, that progressed to seizure episodes and death. Post mortem examination revealed necrotizing and purulent omphalophlebitis and fibrinopurulent meningoencephalomyelitis. Salmonella Typhimurium was isolated from the central nervous system and determined to be the cause of the meningoencephalomyelitis. Due to the lack of evidence of gastrointestinal disease, the umbilical cord was considered the most likely portal of entry of the bacteria. The isolated S. Typhimurium was resistant to ampicillin and cephalotin, and partially resistant to enrofloxacin. These drugs are commonly used in the treatment of salmonellosis. This is the first report of S. Typhimurium affecting the brain and spinal cord of a foal. Salmonellosis should be considered a differential diagnosis in foals with neurologic signs, even in the absence of enterocolitis.(AU)

Um potro de 10 dias de idade foi admitido com histórico de decúbito e fraqueza generalizada aguda, com progressão para episódios de convulsão e morte. A avaliação post mortem demonstrou onfalite necropurulenta e meningoencefalomielite fibrinopurulenta. Salmonella Typhimurium foi isolada do material purulento coletado do sistema nervoso central. A ausência de diarreia e lesões entéricas associadas à presença de onfalite sugerem que o umbigo foi possivelmente a porta de entrada do agente. O isolado de S. Typhimurium apresentou resistência a cefalotina e ampicilina e resistência intermediária a enrofloxacina, drogas utilizadas para o tratamento de salmonelose. Este é o primeiro relato de S. Typhimurium levando a alterações encefálicas e medulares em potro. A salmonelose deve ser considerada, portanto, como diagnóstico diferencial em potros neonatos com alterações neurológicas, mesmo na ausência de enterocolite.(AU)

Goat umbilical cord cells are permissive to small ruminant lentivirus infection in vitro

Small ruminant lentiviruses isolated from peripheral blood leukocytes and target organs can be propagated in vitro in fibroblasts derived from goat synovial membrane cells. These cells are obtained from tissues collected from embryos or fetuses and are necessary for the establishment of the fibroblast primary culture. A new alternative type of host cells, derived from goat umbilical cord, was isolated and characterized phenotypically with its main purpose being to obtain cell monolayers that could be used for the diagnosis and isolation of small ruminant lentiviruses in cell culture. To accomplish this goal, cells were isolated from umbilical cords; characterized phenotypically by flow cytometry analysis; differentiate into osteogenic, chondrogenic and adipogenic lineage; and submitted to viral challenge. The proliferation of goat umbilical cord cells was fast and cell monolayers formed after 15 days. These cells exhibited morphology, immunophenotype, growth characteristics, and lineage differentiation potential similar to mesenchymal stem cells of other origins. The goat umbilical cord derived cells stained positive for vimentin and CD90, but negative for cytokeratin, CD34 and CD105 markers. Syncytia and cell lysis were observed in cell monolayers infected by CAEV-Cork and MVV-K1514, showing that the cells are permissive to small ruminant lentivirus infection in vitro. These data demonstrate the proliferative competence of cells derived from goat umbilical cords and provide a sound basis for future research to standardize this cell lineage.(AU)

Identificação de Neospora caninum por PCR em cordão umbilical de bezerros recém nascido no Brasil / PCR-based identification of Neospora caninum in the umbilical cord of a newborn calf in Brazil

This study was conducted at a beef cattle breeding farm in the far southern region of Brazil. The birth of a calf with unilateral corneal opacity was immediately reported to the Laboratory of Parasitology, in the Universidade Federal de Pelotas, Rio Grande do Sul, Brazil; blood was collected from the cow and calf before colostrum intake. The umbilical cords from this calf and from six other healthy animals were collected. Serological examination, utilizing an indirect fluorescent antibody test, was done using a cut-off point of 1:100. Polymerase chain reaction (PCR) was also performed using the umbilical cord samples. Serological tests showed that the calf was positive for Neospora caninum at birth, with a titer of 1:1600; a titer of 1:3200 was reported in the dam. PCR, using umbilical cord tissue from the affected animal, was positive for the presence of this parasite, and the molecular identity of the amplified product was confirmed by sequencing. Therefore, the detection of N. caninum DNA in the umbilical cord represents a novel alternative test for the diagnosis of this parasitic infection in newborn calves that are clinically suspected to have neosporosis.

O estudo foi realizado em uma fazenda de criação de gado de corte na região do extremo sul do Brasil. O nascimento de um bezerro com opacidade unilateral da córnea foi imediatamente relatado ao Laboratório de Parasitologia da Universidade Federal de Pelotas (RS) e coletou-se sangue da vaca e do bezerro antes da ingestão do colostro. Foram coletados sangue e cordão umbilical do bezerro com opacidade na córnea bem como de outros seis bezerros aparentemente saudáveis antes da ingestão de colostro. Foram realizados exames sorológicos utilizando o teste indireto de anticorpos fluorescentes (IFAT) com ponto de corte de 1: 100 e reação em cadeia da polimerase (PCR). O resultado dos exames sorológicos mostraram que o bezerro foi positivo para N. caninum ao nascer com titulação de 1:1600 e o de sua mãe foi de 1:3200 na IFAT. A PCR do cordão umbilical foi positiva para o agente no animal com opacidade córnea unilateral e a identidade molecular do produto amplificado foi confirmada por sequenciamento. A detecção de DNA de N. caninum no cordão umbilical é uma nova alternativa para o diagnóstico deste agente em bezerros recém-nascidos com suspeita clínica de neosporose.

Identificação de Neospora caninum por PCR em cordão umbilical de bezerros recém nascido no Brasil / PCR-based identification of Neospora caninum in the umbilical cord of a newborn calf in Brazil

This study was conducted at a beef cattle breeding farm in the far southern region of Brazil. The birth of a calf with unilateral corneal opacity was immediately reported to the Laboratory of Parasitology, in the Universidade Federal de Pelotas, Rio Grande do Sul, Brazil; blood was collected from the cow and calf before colostrum intake. The umbilical cords from this calf and from six other healthy animals were collected. Serological examination, utilizing an indirect fluorescent antibody test, was done using a cut-off point of 1:100. Polymerase chain reaction (PCR) was also performed using the umbilical cord samples. Serological tests showed that the calf was positive for Neospora caninum at birth, with a titer of 1:1600; a titer of 1:3200 was reported in the dam. PCR, using umbilical cord tissue from the affected animal, was positive for the presence of this parasite, and the molecular identity of the amplified product was confirmed by sequencing. Therefore, the detection of N. caninum DNA in the umbilical cord represents a novel alternative test for the diagnosis of this parasitic infection in newborn calves that are clinically suspected to have neosporosis.(AU)

O estudo foi realizado em uma fazenda de criação de gado de corte na região do extremo sul do Brasil. O nascimento de um bezerro com opacidade unilateral da córnea foi imediatamente relatado ao Laboratório de Parasitologia da Universidade Federal de Pelotas (RS) e coletou-se sangue da vaca e do bezerro antes da ingestão do colostro. Foram coletados sangue e cordão umbilical do bezerro com opacidade na córnea bem como de outros seis bezerros aparentemente saudáveis antes da ingestão de colostro. Foram realizados exames sorológicos utilizando o teste indireto de anticorpos fluorescentes (IFAT) com ponto de corte de 1: 100 e reação em cadeia da polimerase (PCR). O resultado dos exames sorológicos mostraram que o bezerro foi positivo para N. caninum ao nascer com titulação de 1:1600 e o de sua mãe foi de 1:3200 na IFAT. A PCR do cordão umbilical foi positiva para o agente no animal com opacidade córnea unilateral e a identidade molecular do produto amplificado foi confirmada por sequenciamento. A detecção de DNA de N. caninum no cordão umbilical é uma nova alternativa para o diagnóstico deste agente em bezerros recém-nascidos com suspeita clínica de neosporose.(AU)

Avaliação ultrassonográfica de componentes umbilicais inflamados em bezerros da raça Holandesa com até 30 dias de vida / Ultrassonographic avaliation of the inflamed umbilical structures in Holstein calves during their first 30 days of life

As afecções umbilicais merecem destaque entre as enfermidades que acometem bezerros no primeiro mês de vida, pela alta incidência durante essa fase da vida dos neonatos e pelas relevantes perdas econômicas, decorrentes da mortalidade, custos de tratamento e atendimento veterinário, além de sequelas que poderão determinar menores ganho de peso e produção leiteira. O diagnóstico dessas enfermidades muitas vezes é prejudicado pela dificuldade em se detectar os acometimentos das estruturas intra-abdominais do umbigo, o que afetará negativamente a escolha do tratamento mais adequado e o estabelecimento do real prognóstico para cada animal. No presente estudo, realizou-se a análise ultrassonográfica dos animais com inflamação/infecção dos componentes umbilicais sendo possível observar algumas características em relação a mensurações e ecogenicidade, presentes nos componentes umbilicais acometidos. A partir dessas avaliações concluiu-se que a medida mais adequada para identificar animais com possíveis processos inflamatórios nos componentes umbilicais é a espessura da parede dos vasos umbilicais quando comparada ao diâmetro dos mesmos. Ainda, o estudo possibilitou verificar algumas particularidades do comportamento dos componentes do cordão umbilical em bezerros sadios da raça Holandesa, bem como determinar que os vasos umbilicais intra-abdominais iniciam uma involução em porção mais interna e progridem para as extremidades próximas ao anel umbilical com o evoluir da idade. Destaca-se que o confronto desses resultados com aqueles poucos descritos na literatura disponível mostrou-se com notáveis diferenças.(AU)

Umbilical disorders deserve mention among the illnesses affecting calves in the first month of life. The high incidence during this phase of life of newborns and relevant economic losses arising from mortality, cost of treatment and veterinary care, beyond sequelae may determine lower weight gain and milk production. The diagnosis of these diseases is often hampered by the difficulty to detect the involvement of intra-abdominal umbilical structures, which negatively affect the choice of the most appropriate treatment and the actual outcome for each calf. In the present study, we performed ultrasound examinations of calves with inflammation/infection in the umbilical components and observed some characteristics related with measurements and echogenicity present in umbilical affected components. From these evaluation it was concluded that the wall thickness of the umbilical vessels is the more reliable standard to determine changes in these components, as compared with that of the diameter of the umbilical vessels. Furthermore, from this study we observed some peculiarities of involution of the intra-abdominal umbilical cord components in healthy Holstein calves used for the control group to characterize the behavior of the umbilical structures during the progress of the age in the newborns. It is noteworthy that the comparison of these results with those found in the rare literature available showed notable differences.(AU)

Avaliação ultrassonográfica de componentes umbilicais inflamados em bezerros da raça Holandesa com até 30 dias de vida / Ultrassonographic avaliation of the inflamed umbilical structures in Holstein calves during their first 30 days of life

As afecções umbilicais merecem destaque entre as enfermidades que acometem bezerros no primeiro mês de vida, pela alta incidência durante essa fase da vida dos neonatos e pelas relevantes perdas econômicas, decorrentes da mortalidade, custos de tratamento e atendimento veterinário, além de sequelas que poderão determinar menores ganho de peso e produção leiteira. O diagnóstico dessas enfermidades muitas vezes é prejudicado pela dificuldade em se detectar os acometimentos das estruturas intra-abdominais do umbigo, o que afetará negativamente a escolha do tratamento mais adequado e o estabelecimento do real prognóstico para cada animal. No presente estudo, realizou-se a análise ultrassonográfica dos animais com inflamação/infecção dos componentes umbilicais sendo possível observar algumas características em relação a mensurações e ecogenicidade, presentes nos componentes umbilicais acometidos. A partir dessas avaliações concluiu-se que a medida mais adequada para identificar animais com possíveis processos inflamatórios nos componentes umbilicais é a espessura da parede dos vasos umbilicais quando comparada ao diâmetro dos mesmos. Ainda, o estudo possibilitou verificar algumas particularidades do comportamento dos componentes do cordão umbilical em bezerros sadios da raça Holandesa, bem como determinar que os vasos umbilicais intra-abdominais iniciam uma involução em porção mais interna e progridem para as extremidades próximas ao anel umbilical com o evoluir da idade. Destaca-se que o confronto desses resultados com aqueles poucos descritos na literatura disponível mostrou-se com notáveis diferenças.(AU)

Umbilical disorders deserve mention among the illnesses affecting calves in the first month of life. The high incidence during this phase of life of newborns and relevant economic losses arising from mortality, cost of treatment and veterinary care, beyond sequelae may determine lower weight gain and milk production. The diagnosis of these diseases is often hampered by the difficulty to detect the involvement of intra-abdominal umbilical structures, which negatively affect the choice of the most appropriate treatment and the actual outcome for each calf. In the present study, we performed ultrasound examinations of calves with inflammation/infection in the umbilical components and observed some characteristics related with measurements and echogenicity present in umbilical affected components. From these evaluation it was concluded that the wall thickness of the umbilical vessels is the more reliable standard to determine changes in these components, as compared with that of the diameter of the umbilical vessels. Furthermore, from this study we observed some peculiarities of involution of the intra-abdominal umbilical cord components in healthy Holstein calves used for the control group to characterize the behavior of the umbilical structures during the progress of the age in the newborns. It is noteworthy that the comparison of these results with those found in the rare literature available showed notable differences.(AU)

Wharton's jelly cells from sheep umbilical cord maintained with different culture media are permissive to in vitro infection by Small Ruminant Lentiviruses / Células da geleia de Wharton do cordão umbilical ovino mantidas em diferentes meios de cultivo são permissivas à infecção in vitro por lentivírus de pequenos ruminantes

This study aimed to isolate cells from the Wharton's jelly of umbilical cord (WJUC) of sheep collected during natural parturition using different culture media, in addition to reporting for the first time the permissiveness of these cells to in vitro infection by small ruminant lentiviruses. Ten umbilical cords were collected from healthy sheep. Each cord explants were grown in different media consisting of MEM, low glucose DMEM, M199, and RPMI-1640. The permissiveness of infection of sheep cells from WJUC was tested with CAEV-Cork and MVV-K1514 strains, inoculating 0.1 MOI of each viral strain. Four supernatants from each strain were obtained from WJUC sheep cell cultures infected in different media. The results demonstrated the presence of cytopathic effect after the in vitro infection by CAEV-Cork and MVV-K1514 with all of the tested culture media. Nested-PCR detected proviral DNA in all supernatants. Supernatants containing CAEV-Cork viruses had TCID 50/ml titres of 10 5.5 in MEM, 10 4.0 in low glucose DMEM, 105.0 in M199, and 10 5.7 in RPMI-1640. Supernatants containing the MVV-K1514 virus had TCID 50/ml titres of 10 4.3 in MEM, 10 3.5 in low-glucose DMEM, 10 4.7 in M199, and 10 3.5 in RPMI-1640. Sheep cells from WJUC are permissive to in vitro infection by small ruminant lentivirus.(AU)

O objetivo deste estudo foi isolar células da geleia de Wharton do cordão umbilical (GWCU) ovino coletado por ocasião do parto natural, utilizando-se diferentes meios de cultivo, além de relatar, pela primeira vez, sua permissividade à infecção in vitro por lentivírus de pequenos ruminantes (LVPRs). Dez cordões umbilicais foram coletados de ovelhas hígidas e soronegativas para LVPRs pelo teste de imunodifusão em gel de agarose (IDGA). De cada cordão, explantes foram cultivados em quatro meios distintos que consistiram em MEM, DMEM baixa glicose, meio 199 e RPMI-1640, todos acrescidos de 10% de soro fetal bovino em estufa com atmosfera úmida e 5% de CO2 a 37ºC. A permissividade de infecção das células GWCU ovino foi testada frente às cepas CAEV-Cork e MVV-K1514, inoculando-se 0,1 MOI de cada cepa viral e corando as monocamadas com May Grunwald Giemsa para visualização do efeito citopático. Foram obtidos quatro sobrenadantes CAEV-Cork e quatro MVV-K1514, provenientes do cultivo de células GWCU ovino infectadas por 21 dias em meios distintos, dos quais foram realizadas titulação em membrana sinovial caprina e extração do DNA pró-viral para realização de nested-PCR e eletroforese em gel de agarose a 2%. Os resultados demonstraram a presença de efeito citopático na infecção in vitro tanto por CAEV-Cork como por MVV-K1514 em todos os meios de cultivo, sendo visualizados sincícios e lise celular em microscópio invertido. A nested-PCR detectou o DNA pró-viral tanto do CAEV-Cork como do MVV-K1514 em todos os sobrenadantes. Os sobrenadantes contendo o vírus CAEV-Cork apresentaram títulos em TCID50/mL de 10 5,5 em MEM, 10 4,0 em DMEM baixa glicose, 10 5,0 em meio 199 e 10 5,7 em RPMI-1640. Os sobrenadantes contendo o vírus MVV-K1514 apresentaram título em TCID 50/mL de 10 4,3 em MEM, 10 3,5 em DMEM baixa glicose, 10 4,7 em meio 199 e 10 3,5 em RPMI-1640. Células GWCU ovino são permissivas à infecção in vitro pelos lentivírus de pequenos ruminantes CAEV-Cork e MVV-K1514.(AU)

Wharton's jelly cells from sheep umbilical cord maintained with different culture media are permissive to in vitro infection by Small Ruminant Lentiviruses / Células da geleia de Wharton do cordão umbilical ovino mantidas em diferentes meios de cultivo são permissivas à infecção in vitro por lentivírus de pequenos ruminantes

This study aimed to isolate cells from the Wharton's jelly of umbilical cord (WJUC) of sheep collected during natural parturition using different culture media, in addition to reporting for the first time the permissiveness of these cells to in vitro infection by small ruminant lentiviruses. Ten umbilical cords were collected from healthy sheep. Each cord explants were grown in different media consisting of MEM, low glucose DMEM, M199, and RPMI-1640. The permissiveness of infection of sheep cells from WJUC was tested with CAEV-Cork and MVV-K1514 strains, inoculating 0.1 MOI of each viral strain. Four supernatants from each strain were obtained from WJUC sheep cell cultures infected in different media. The results demonstrated the presence of cytopathic effect after the in vitro infection by CAEV-Cork and MVV-K1514 with all of the tested culture media. Nested-PCR detected proviral DNA in all supernatants. Supernatants containing CAEV-Cork viruses had TCID 50/ml titres of 10 5.5 in MEM, 10 4.0 in low glucose DMEM, 105.0 in M199, and 10 5.7 in RPMI-1640. Supernatants containing the MVV-K1514 virus had TCID 50/ml titres of 10 4.3 in MEM, 10 3.5 in low-glucose DMEM, 10 4.7 in M199, and 10 3.5 in RPMI-1640. Sheep cells from WJUC are permissive to in vitro infection by small ruminant lentivirus.(AU)

O objetivo deste estudo foi isolar células da geleia de Wharton do cordão umbilical (GWCU) ovino coletado por ocasião do parto natural, utilizando-se diferentes meios de cultivo, além de relatar, pela primeira vez, sua permissividade à infecção in vitro por lentivírus de pequenos ruminantes (LVPRs). Dez cordões umbilicais foram coletados de ovelhas hígidas e soronegativas para LVPRs pelo teste de imunodifusão em gel de agarose (IDGA). De cada cordão, explantes foram cultivados em quatro meios distintos que consistiram em MEM, DMEM baixa glicose, meio 199 e RPMI-1640, todos acrescidos de 10% de soro fetal bovino em estufa com atmosfera úmida e 5% de CO2 a 37ºC. A permissividade de infecção das células GWCU ovino foi testada frente às cepas CAEV-Cork e MVV-K1514, inoculando-se 0,1 MOI de cada cepa viral e corando as monocamadas com May Grunwald Giemsa para visualização do efeito citopático. Foram obtidos quatro sobrenadantes CAEV-Cork e quatro MVV-K1514, provenientes do cultivo de células GWCU ovino infectadas por 21 dias em meios distintos, dos quais foram realizadas titulação em membrana sinovial caprina e extração do DNA pró-viral para realização de nested-PCR e eletroforese em gel de agarose a 2%. Os resultados demonstraram a presença de efeito citopático na infecção in vitro tanto por CAEV-Cork como por MVV-K1514 em todos os meios de cultivo, sendo visualizados sincícios e lise celular em microscópio invertido. A nested-PCR detectou o DNA pró-viral tanto do CAEV-Cork como do MVV-K1514 em todos os sobrenadantes. Os sobrenadantes contendo o vírus CAEV-Cork apresentaram títulos em TCID50/mL de 10 5,5 em MEM, 10 4,0 em DMEM baixa glicose, 10 5,0 em meio 199 e 10 5,7 em RPMI-1640. Os sobrenadantes contendo o vírus MVV-K1514 apresentaram título em TCID 50/mL de 10 4,3 em MEM, 10 3,5 em DMEM baixa glicose, 10 4,7 em meio 199 e 10 3,5 em RPMI-1640. Células GWCU ovino são permissivas à infecção in vitro pelos lentivírus de pequenos ruminantes CAEV-Cork e MVV-K1514.(AU)

Tratamento com imunoglobulina anti-toxina tetânica homóloga por via intratecal em tétano neonatal equino - relato de caso / Treatment with intrathecal administration of anti-tetanus toxoid immunoglobulin in neonatal foal tetanus - case report

Tetanus is a severe and highly fatal infectious disease caused by the toxin of Clostridium tetani, an anaerobic spore-forming Grampositive bacterium. The disease is characterized by muscle rigidity (tetany) and can lead to death by respiratory failure or seizures. The present study reports a case of tetanus in a 6-day-old Quarter Horse foal. The animal showed apathy, lateral recumbency, umbilical thickening, protrusion of the third eyelid, seizures and hyperesthesia. Was treated with 50,000 IU/kg of potassium penicillin; with anti-tetanus toxoid immunoglobulin in a dose of 25,000 IU, 20,000 IU and 20,000 IU intravenously, intramuscular and intrathecal, respectively; with acepromazine hydrochloride (0.05 mg / kg); fluid therapy of Ringer"s lactate solution and dressing for umbilical cord. After 48 hours of treatment, the animal demonstrated hyperacute symptoms and died, showing unsuccessful in treating. Possibly the infection has been caused by inadequate umbilical cord cleansing.

O tétano é uma doença infecciosa grave e altamente fatal, causada pela toxina Clostridium tetani, uma bactéria Gram-positiva formadora de esporos anaeróbicos. A doença é caracterizada por rigidez muscular (tetania) e pode levar à morte por parada respiratória ou convulsões. O presente trabalho relata um caso de tétano em um potro Quarto de Milha de 6 dias de idade. O animal apresentava apatia, decúbito lateral, espessamento umbilical, protrusão da terceira pálpebra e convulsões em resposta a estímulos externos, como som, luz e toque. Foi tratado com 110.000 IU / kg de penicilina potássica; com imunoglobulina anti-toxina tetânica homóloga, numa dose de 25000 UI, 20.000 UI e 20000 UI por via intravenosa, intramuscular e intratecal, respectivamente; com cloridrato de acepromazina (0,05 mg / kg); fluidoterapia à base de Ringer com lactato e curativo no cordão umbilical. Decorridas 48 horas de tratamento, o animal demonstrou sintomas hiperagudos e veio à óbito, mostrando insucesso no tratamento. Possivelmente, a infecção foi causada pela limpeza inadequada do cordão umbilical.

Tratamento com imunoglobulina anti-toxina tetânica homóloga por via intratecal em tétano neonatal equino - relato de caso / Treatment with intrathecal administration of anti-tetanus toxoid immunoglobulin in neonatal foal tetanus - case report

Tetanus is a severe and highly fatal infectious disease caused by the toxin of Clostridium tetani, an anaerobic spore-forming Grampositive bacterium. The disease is characterized by muscle rigidity (tetany) and can lead to death by respiratory failure or seizures. The present study reports a case of tetanus in a 6-day-old Quarter Horse foal. The animal showed apathy, lateral recumbency, umbilical thickening, protrusion of the third eyelid, seizures and hyperesthesia. Was treated with 50,000 IU/kg of potassium penicillin; with anti-tetanus toxoid immunoglobulin in a dose of 25,000 IU, 20,000 IU and 20,000 IU intravenously, intramuscular and intrathecal, respectively; with acepromazine hydrochloride (0.05 mg / kg); fluid therapy of Ringer"s lactate solution and dressing for umbilical cord. After 48 hours of treatment, the animal demonstrated hyperacute symptoms and died, showing unsuccessful in treating. Possibly the infection has been caused by inadequate umbilical cord cleansing.(AU)

O tétano é uma doença infecciosa grave e altamente fatal, causada pela toxina Clostridium tetani, uma bactéria Gram-positiva formadora de esporos anaeróbicos. A doença é caracterizada por rigidez muscular (tetania) e pode levar à morte por parada respiratória ou convulsões. O presente trabalho relata um caso de tétano em um potro Quarto de Milha de 6 dias de idade. O animal apresentava apatia, decúbito lateral, espessamento umbilical, protrusão da terceira pálpebra e convulsões em resposta a estímulos externos, como som, luz e toque. Foi tratado com 110.000 IU / kg de penicilina potássica; com imunoglobulina anti-toxina tetânica homóloga, numa dose de 25000 UI, 20.000 UI e 20000 UI por via intravenosa, intramuscular e intratecal, respectivamente; com cloridrato de acepromazina (0,05 mg / kg); fluidoterapia à base de Ringer com lactato e curativo no cordão umbilical. Decorridas 48 horas de tratamento, o animal demonstrou sintomas hiperagudos e veio à óbito, mostrando insucesso no tratamento. Possivelmente, a infecção foi causada pela limpeza inadequada do cordão umbilical.(AU)

Caracterização genética e biológica de isolados de Toxoplasma gondii (Nicolle e Manceaux, 1909) de animais e humano na região Nordeste do Brasil

Toxoplasma gondii é um coccídio intracelular obrigatório, formador de cistos teciduais, causador da toxoplasmose, doença zoonótica de grande impacto à Saúde Pública. Foram realizados três estudos, divididos em capítulos que abordam a infecção por T. gondii em humano, animais de produção e silvestre. O primeiro estudo teve como objetivo isolar e caracterizar cepas de T. gondii obtidas de tecidos de animais de produção abatidos para consumo humano no Arquipélago de Fernando de Noronha, Pernambuco. Foram obtidos dois isolados de T. gondii, sendo um de ovino e um de suíno e ambos foram caracterizados como genótipo ToxoDB #146, descrevendo-se o primeiro relato deste genótipo nestas espécies no mundo. Os isolados apresentaram perfil diferente para virulência fenotípica e molecular. O segundo estudo teve como objteivo relatar um caso de toxoplasmose congênita severa envolvendo o genótipo atípico ToxoDB #162, isolado a partir de sangue do cordão umbilical de recém-nascido em Alagoas. O resultado da genotipagem dos genes ROP5 e ROP18 foi compatível com o perfil de elevada virulência do isolado em camundongo. O terceiro estudo teve como objetivo identificar protozoários do subfilo Apicomplexa em tecido cardíaco de 39 saguis (Callithrix jacchus) de Pernambuco por meio do sequenciamento de fragmento do gene 18S rDNA onde foi detectado o DNA de T. gondii em sete animais (7/39 - 17,9%). Os resultados obtidos neste estudo contribuem com importantes informações biológicas e genéticas sobre T. gondii em animais e humano nos estados de Alagoas e Pernambuco.

Toxoplasma gondii is an obligate intracellular coccidian, tissue cyst forming, which causes toxoplasmosis, zoonotic disease of great impact in public health. Three studies were conducted and divided into chapters, which address T. gondii infection in human, farm and wild animals. The first study aimed to isolate and characterize T. gondii strains from tissues of farm animals slaughtered for human consumption on Fernando de Noronha Archipelago, Pernambuco. Two T. gondii isolates were obtained, onde from sheep and one from pig, both isolates were characterized as genotype ToxoDB #146. This is the first report of this genotype in pig and sheep worldwide. The isolates showed different phenotypic and molecular profiles. The second study reported a case of severe congenital toxoplasmosis in newborn baby from Alagoas, that involved the atypical genotype ToxoDB #162, isolated from umbilical cord blood. Genotype result of ROP5 and ROP18 genes could predict the high virulence of the isolate in mice. The third study investigated the presence of apicomplexan protozoans in heart tissue from 39 common marmoset (Callithrix jacchus) from Pernambuco by sequencing a fragment of 18S rDNA gene, by which T. gondii DNA was detected in seven animals (7/39 - 17,9%). Results obtained in the present study contribute to biological and genetic information of T. gondii in animals and human from Alagoas and Pernambuco state.

Lentivírus em caprinos leiteiros do semiárido paraibano: prevalência de anticorpos, fatores de risco e detecção molecular / Lentivirus in dairy goats from the semiarid region of Paraiba state: seroprevalence, risk factors and molecular detection

Os objetivos do presente trabalho foram determinar a prevalência de caprinos leiteiros soropositivos para a infecção por Lentivirus de pequenos ruminantes no semiárido do Estado da Paraíba, Nordeste do Brasil, identificar fatores de risco associados à prevalência de rebanhos positivos, e realizar a detecção molecular do agente. Foram utilizadas 1047 cabras leiteiras de 110 propriedades selecionadas aleatoriamente no Município de Monteiro, Estado da Paraíba, no período de março de 2009 a dezembro de 2011. Para o diagnóstico da infecção por Lentivirus, foi utilizado o teste de imunodifusão em gel de ágar (AGID). Um ano após foi realizada nova sorologia, e PCR em tempo real foi aplicada em amostras de sangue e leite de 48 cabras procedentes de quatro propriedades com animais soropositivos. As prevalências de propriedades positivas e de animais soropositivos na AGID foram 44,6% (IC 95% = 35,1% - 54,3%) e 8,1% (IC 95% = 5,6% - 16,8%), respectivamente. Realizar corte e desinfecção de umbigo (odds ratio = 2,44; p = 0,048) e condições de aglomeração de animais (odds ratio = 3,45; p = 0,048) foram associadas com a prevalência de propriedades positivas. Um ano após a realização do inquérito sorológico, foi verificada a permanência de animais infectados, detectados por PCR em tempo real a partir de amostras de sangue e leite. A PCR em tempo real das amostras de leucócitos circulantes apresentou boa performance, com sensibilidade de 100%, especificidade de 92,86%, concordância de 93,75% e indicador Kappa de 0,765. Sugere-se que seja realizado um trabalho de educação sanitária junto aos produtores sobre medidas de prevenção com o objetivo de reduzir a disseminação da infecção nos rebanhos.(AU)

The aims of this study were to determine the seroprevalence of infection by ruminants Lentivirus in dairy goats in the semiarid of the Paraiba State, Northeastern Brazil, to identify risk factors associated with the herd-level prevalence and to perform molecular detection of the agent. A total of 1,047 dairy goats from 110 herds were randomly selected from the county of Monteiro, Paraiba State, and serum samples were collected from March 2009 to December 2011. For the diagnosis of Lentivirus infection, the agar gel immunodiffusion test (AGID) was used. One year after that a new serology was performed and the real-time PCR assay was applied in blood and milk samples from 48 goats from four herds with seropositive animals. Prevalence of positive herds and seropositive animals at AGID were 44.6% (95% CI=35.1-54.3%) and 8.1% (95% CI =5.6-16.8%), respectively. Umbilical cord cutting and disinfection (odds ratio = 2.44; p = 0.048) and conditions of animal agglomeration (odds ratio=3.45; p=0.048) were associated with herd-level prevalence. One year after the serological profile, the permanence of infected animals detected by real-time PCR in blood and milk samples was verified. Real-time PCR using white blood cells had a good performance, with sensitivity of 100%, specificity of 92.86%, concordance of 93.75% and Kappa index of 0.765. It was suggested to teach sanitary measures to the herd owners in order to encourage them to adopt prevention measures aiming to reduce the spread of the infection in the herds.(AU)

Abortos em equinos na região sul do Rio Grande do Sul: estudo de 72 casos / Equine abortion in southern Brazil: study of 72 cases

Foi realizado um estudo retrospectivo das causas de aborto ocorridas em equinos na área de influência do Laboratório Regional de Diagnóstico (LRD), da Faculdade de Veterinária da Universidade Federal de Pelotas (UFPel), no período entre janeiro de 2000 e junho de 2011. Foram revisados os protocolos de necropsia e de 1.154 equinos ou materiais de equinos recebidos 72 (6,2 por cento) eram casos de abortos. A infecção bacteriana foi a principal causa de aborto neste estudo com 36,1 por cento dos casos. As causas não infecciosas corresponderam a 8,3 por cento dos casos, os abortos virais a 4,2 por cento, os parasitários a 1,4 por cento e os inflamatórios a 2,8 por cento. Em 47,2 por cento dos casos não foi possível determinar a causa/etiologia do aborto. Lesões macroscópicas e histológicas características foram observadas em casos de aborto por Leptospira sp. e por herpesvirus equino-1 sendo que nos demais casos as lesões foram inespecíficas. Ficou demonstrado que o envio do feto inteiro junto com a placenta, sob refrigeração, aumenta consideravelmente a eficiência do diagnóstico e o elevado número de abortos de causa não determinada foi atribuído em parte ao envio de material não adequado.(AU)

A retrospective study of the causes of equine abortion occurred in southern Rio Grande do Sul, Brazil, diagnosed from January 2000 to June 2011 by the Regional Diagnostic Laboratory (LRD) of the Veterinary School, Federal University of Pelotas (UFPel), is reported. Necropsy protocols were reviewed, and from 1.154 horses or equine materials received 72 (6.2 percent) were abortions. The main cause of abortion in this study was bacterial infection on 36.1 percent of the cases. Non-infectious causes accounted for 8.3 percent of the cases, viral abortions for 4.2 percent, parasitic for 1.4 percent and inflammatory for 2.8 percent. In 47.2 percent, it was not possible to determine the cause/etiology of abortions. Characteristic macroscopic and histological lesions were observed in abortion by Leptospira sp. and equine herpesvirus-1. No lesions were observed in the other cases. It was demonstrated that the analyses of whole fetus with the placenta under refrigeration increases the efficiency of diagnosis. The high number of abortions of undetermined cause was attributed in part to inadequate delivery of fetus material for diagnoses.(AU)

Aspectos celulares da interação de células endoteliais da veia do cordão umbilical humano e Toxoplasma gondii

O Toxoplasma gondii, um protozoário intracelular obrigatório, com distribuição cosmopolita é de grande relevância médica e veterinária. Toxoplasmose congênita representa uma das mais sérias consequências da infecção aguda da gestante podendo acarretar: transmissão vertical (19%); aborto (9%) ou má formação do feto (30%). Durante a transmissão congênita, as células endoteliais da veia do cordão umbilical (HUVEC) estão inseridas na principal rota de transmissão da infecção vertical. No entanto, esse modelo celular tem sido pouco explorado no contexto da toxoplasmose experimental. O principal objetivo dessa dissertação foi analisar aspectos celulares da interação de T. gondii e HUVEC in vitro. Assim, as culturas foram caracterizadas morfologicamente por microscopia óptica e eletrônica de transmissão e quanto a interação parasito-célula os seguintes parâmetros avaliados: cinética da susceptibilidade de HUVEC frente à infecção; comparação da capacidade infectiva de taquizoítos obtidos de diferentes fontes e de duas cepas polares (ME-49 WT e GFP e RH) e ainda, o destino intracelular do parasito. Culturas de HUVEC mantiveram as características morfológicas e funcionais preservadas como no sistema in vivo. As análises quantitativas mostraram que T. gondii é capaz de invadir e se multiplicar ativamente nessas células; taquizoítos da cepa RH são mais infectivos do que taquizoítos da cepa ME-49 WT e, que o método de obtenção dos parasitos pode influenciar na capacidade infectiva de taquizoítos provenientes do cultivo celular. As análises qualitativas realizadas por microscopia eletrônica de transmissão e citoquímica indicaram que a infecção de HUVEC gera ativação celular e altera a dinâmica de suas organelas em resposta à infecção, dentre elas, os corpúsculos de Weibel-Palade. Pela primeira vez, a conversão taquizoítos- bradizoítos e o estabelecimento da cistogênese em HUVEC foram demonstradas. O encistamento, nesta importante rota de infecção para o feto, pode atuar como repositório de parasitos ao longo da gestação, potencializando, por meio do rompimento dos cistos, re-infecções. Esse trabalho abre novas perspectivas para o estudo da interação de T. gondii e HUVEC in vitro e com isso potencialmente elucidar os mecanismos moleculares envolvidos na transmissão congênita

gondii, an obligate intracellular protozoan with cosmopolitan distribution is of great medical and veterinary relevance. Congenital toxoplasmosis represents one of the most serious consequences of the acute infection of the pregnant woman, which can lead to: vertical transmission (19%); abortion (9%) or malformation of the fetus (30%). During congenital transmission, the endothelial cells of the umbilical vein (HUVEC) are inserted in the main route of vertical transmission infection. However, this cellular model has been little explored in the context of experimental toxoplasmosis. The main objective of this dissertation was to analyze cellular aspects of the interaction of T. gondii and HUVEC in vitro. Thus, cultures were characterized morphologically by optical and transmission electron microscopy and as for the parasite-cell interaction the following parameters evaluated: kinetics of HUVEC susceptibility to infection; comparation of the infective capacity of tachyzoites obtained from different sources and from two polar strains (ME-49 WT and GFP and RH) and the intracellular fate of the parasite. Cultures of HUVEC maintained the morphological and functional characteristics preserved as in vivo. Quantitative analyzes showed that T. gondii is able to invade and multiply actively in these cells; tachyzoites of the RH strain are more infective than tachyzoites of the ME-49 WT strain and that the method of obtaining the parasites may influence the infective capacity of tachyzoites from the cell culture. Qualitative analyzes performed by transmission electron microscopy and cytochemistry indicated that HUVEC infection generates cellular activation and changes the dynamics of its organelles in response to infection, among them Weibel-Palade corpuscles. For the first time, tachyzoites-bradyzoites conversion and establishment of cystogenesis in HUVEC was demonstrated. Cysts formation, in this important route of infection to the fetus, can act as a repository of parasites throughout gestation, potentializing, through the rupture of the cysts, re-infections. This work opens new perspectives for the study of the interaction of T. gondii and HUVEC in vitro and thus can elucidate the molecular mechanisms involved in congenital transmission.

CÉLULAS-TRONCO MESENQUIMAIS DE CORDÃO UMBILICAL CAPRINO COMO FERRAMENTA PARA O ISOLAMENTO DE LENTIVÍRUS EM CULTIVO CELULAR

Células-tronco são células não diferenciadas de embriões, fetos ou tecidos adultos, com potencial para gerar diversos tipos celulares sob o estímulo bioquímico, hormonal e mecânico adequado. Dentre elas figuram as células-tronco mesenquimais (CTM), tipo celular que tem particular importância na pesquisa científica, utilizadas principalmente em terapias celulares. No entanto, o seu potencial é bem mais amplo, podendo ser utilizadas como insumo para o isolamento viral em cultivo celular. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi isolar e caracterizar células-tronco mesenquimais provenientes do cordão umbilical caprino, investigar o seu potencial de diferenciação, e produzir monocamada celular para o isolamento de lentivírus em cultivo celular. Para tanto, foram coletadas amostras de tecido e sangue do cordão umbilical caprino, submetidas a protocolos de transporte, separação, isolamento e cultivo das CTM, para a obtenção da monocamada celular. Essas células foram caracterizadas através da imunofenotipagem por citometria de fluxo e submetidas à diferenciação em linhagens mesodermais. As monocamadas obtidas foram utilizadas para isolamento dos lentivírus de pequenos ruminantes, através da infecção experimental com os vírus da artrite encefalite caprina (CAEV-Cork) e Maedi Visna (MVV K1514), visando testar sua permissibilidade aos efeitos citopáticos causados por esses vírus, e seu potencial para o uso no diagnóstico de lentiviroses em cultivo celular. A padronização do isolamento e cultivo dessas células, tanto de amostras de tecido como sangue do cordão umbilical, permitiu o isolamento das células-tronco mesenquimais, bem como obtenção de monocamada celular com potencial de diferenciação nas linhagens mesodermais de condrócitos, adipócitos e osteoblastos. Essas monocamadas se mostraram permissíveis à infecção pelos lentivírus de pequenos ruminantes, apresentando efeito citopático de lise e sincício celular. Esses resultados contribuem para evolução do diagnóstico das lentiviroses em cultivo celular, apresentando nova alternativa de obtenção de células, e dão base para maiores estudos com células-tronco mesenquimais caprinas.

Stem cells are undifferentiated cells of embryos, fetuses or adult tissues, with the potential of generate cells of several tissues in the biochemical, hormonal and mechanical stimulation suitable. Among them, the mesenchymal stem cells (MSC), a cell type that has particular importance in scientific research, used mainly in cellular therapies. However, its potential is much broader, and can be used as element material for virus isolation in cell culture. Thus, the objectives of this work were to isolate and characterize mesenchymal stem cells from the goat umbilical cord, to investigate its differentiation potential, and to produce cell monolayer for the isolation of lentivirus in cell culture. For this purpose, tissue and blood samples from the goat umbilical cord were collected, submitted to protocols for transport, separation, isolation and culture of the MSC, to obtain the cellular monolayer. These cells were characterized by immunophenotyping by flow cytometry and submitted to differentiation in mesodermal lines. The obtained monolayers were used to isolate lentiviruses from small ruminants through experimental infection with Caprine Arthritis Encephalitis virus (CAEV-Cork) and Maedi Visna virus (MVV K1514), in order to test their permissibility to the cytopathic effects caused by these viruses and their potential for use in the diagnosis of lentiviruses in cell culture. The standardization of the isolation and culture of these cells, both tissue samples and umbilical cord blood, allowed the isolation of mesenchymal stem cells, as well as obtaining a cell monolayer with differentiation potential in the mesodermal lines of chondrocytes, adipocytes and osteoblasts. These monolayers were shown to be permissible for infection by lentiviruses of small ruminants, presenting cytopathic effect of lysis and cellular syncytium. These results contribute to the evolution of the diagnosis of lentiviruses in cell culture, presenting a new alternative to obtain cells, and provide a basis for further studies with mesenchymal stem cells.

OCORRÊNCIA DE Toxoplasma gondii EM CAPRINOS E AVALIAÇÃO DA TRANSMISSÃO TRANSPLACENTÁRIA

Toxoplasma gondii, um protozoário coccídeo formador de cistos teciduais, é considerado uma causa importante de aborto em caprinos, podendo gerar perdas econômicas significantes no rebanho. Além disso, constitui um problema de saúde pública, uma vez que a carne e leite contaminados pode ser fonte de infecção para o ser humano. Normalmente, pequenos ruminantes se infectam ao ingerirem oocistos de T. gondii no ambiente, mas estudos têm mostrado que a transmissão vertical de geração para geração pode ser muito mais significante do que anteriormente reportado. Este trabalho teve como objetivo verificar a frequência de anticorpos IgG anti-T. gondii em caprinos do semiárido baiano e avaliar em um grupo de fêmeas caprinas a ocorrência de transmissão transplacentária. Soros de 375 animais - provenientes das cidades baianas de Casa Nova, Curaçá, Jaguarari, Juazeiro, Sento Sé e Uauá - foram analisados através de ELISA, com 25,1% positivos para IgG anti-T. gondii. As fêmeas possuíram um risco 1,236 vezes maior de serem soropositivas em relação aos machos. Posteriormente, foram selecionadas 26 fêmeas caprinas em Jaguarari-BA, para avaliação dos níveis de anticorpos específicos para T. gondii por ELISA antes do cruzamento, durante a gestação e após o parto. No momento do parto, foram coletados fragmentos do cordão umbilical e da placenta para detecção do DNA do parasito através da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Antes da ingestão do colostro, o sangue dos filhotes também foi coletado para avaliação de anticorpos específicos. Dentre as 26 cabras, oito (30,8%) foram consideradas cronicamente infectadas, das quais duas transmitiram verticalmente o T. gondii para suas crias. Outras onze fêmeas (42,3%) soroconverteram durante a gestação, e entre estas, quatro geraram filhotes congenitamente infectados. Considerando somente as fêmeas soropositivas, a transmissão congênita ocorreu em 31,6% (6/19) animais. O DNA de T. gondii não foi amplificado nas amostras de tecido analisadas. Os cabritos congenitamente infectados por T. gondii nasceram clinicamente normais, apresentando sorologia positiva antes da ingestão de colostro, o que evidencia a infecção vertical. Neste estudo, foi observada a ocorrência de transmissão transplacentária do T. gondii em cabras prenhes tanto com toxoplasmose aguda quanto crônica, contribuindo para a manutenção do parasito no rebanho.

Toxoplasma gondii, a tissue cyst-forming coccidia, is considered an important cause of abortion in goats, leading to significant economic losses in the herd. Moreover, it constitutes a public health problem, since the contaminated meat and milk can be a source of infection for humans. Usually, small ruminants become infected by ingesting T. gondii oocysts in the environment, but studies have shown that the vertical transmission from generation to generation may be much more significant than previously reported. The aim of this study was to assess the frequency of anti-T. gondii IgG antibodies in goats from the semi-arid region of Bahia state and to evaluate the transplacental transmission in a group of female goats. Sera of 375 animals - from the Bahia cities Casa Nova, Curaçá, Jaguarari, Juazeiro, Sento Sé e Uauá - were analyzed by ELISA, with 25.1% positive for IgG anti-T. gondii. Females had a 1.236 times higher risk of being seropositive compared to males. Thereafter, we selected 26 female goats, in Jaguarari-BA, to evaluate the levels of T. gondii specific antibodies by ELISA before crossing, during pregnancy and after delivery. At delivery time, there were collected umbilical cord and placenta fragments for parasite DNA detection by Polymerase Chain Reaction (PCR). Before the ingestion of colostrum, the blood of goat kids was also collected for evaluation of specific antibodies. Among the 26 goats, eight (30.8%) were considered chronically infected, from which two vertically transmitted T. gondii to their offsprings. Other eleven goats (42.3%) seroconverted during pregnancy, and among them, four generated congenital infected goat kids. Considering only the seropositive females, the congenital transmission occurred in 31.6% (6/19) animals. T. gondii DNA was not amplified in the tissue samples analyzed. The kids goats congenitally infected with T. gondii were born clinically normal, with positive serology before colostrum ingestion, which indicate the vertical infection. In this study, it was we observed the occurrence of transplacental transmission of T. gondii in pregnant goats with both acute and chronic toxoplasmosis, which contributes to the maintenance of the parasite in the herd.

Estudos de parâmetros clínicos e patológicos em ovelhas infectadas por Trypanosoma vivax no início e final da gestação / Study of clinical and pathological parameters in ewes infected with Trypanosoma vivax in the beginning and end of pregnancy

O presente estudo teve como objetivo investigar o efeito da infecção experimental por Trypanosoma vivax em ovelhas em diferentes fases da gestação, determinar a patogênese das falhas reprodutivas, e confirmar a transmissão transplacentária por PCR. Foram utilizadas 12 doze ovelhas prenhas, adultas em três grupos experimentais G1, formado por três ovelhas infectadas no terço inicial da gestação; G2, composto por três ovelhas infectadas no terço final da gestação; e G3, constituído por seis ovinos não infectados (grupo controle). Cada ovelha do G1 e G2 foi inoculada com 1,25x105 tripomastigotas. Exames clínicos, avaliação do hematócrito, bioquímica sérica, determinação da concentração plasmática de progesterona e parasitemia foram determinados diariamente. Foram realizados exames anatomopatológicos dos fetos, placenta, cordão umbilical e pesquisa de DNA do parasita na placenta, liquido amniótico, sangue e tecidos dos fetos. A parasitemia foi alta, alcançando picos de 2,7x106, sendo persistente durante todo o período experimental. A infecção foi caracterizada por mortalidade das ovelhas e mortalidade perinatal no terço inicial; aborto e mortalidade perinatal no terço final da gestação. Os fatores possivelmente relacionados com as falhas reprodutivas maternas foram baixos escore corporal, hematócrito, níveis séricos de glicose, proteína total, colesterol e progesterona. A presença do DNA do T. vivax no sangue e tecidos de fetos, placenta e liquido amniótico, confirma a transmissão transplacentária do parasita. A presença de lesões histológicas nos órgãos fetais e placenta sugerem a participação do parasita no mecanismo etiopatogênico de danos reprodutivos.

This study aimed to investigate the effect of experimental infection with Trypanosoma vivax in ewes at different stages of pregnancy, to determine the pathogenesis of reproductive failure, and confirm transplacental transmission by PCR. A total of 12 pregnant ewes twelve, adults into three groups G1, consisting of three ewes infected in the first third of pregnancy, G2, consisting of three infected ewes in the final third of gestation, and G3, consisting of six non-infected sheep (control group .) Each ewes G1 and G2 were inoculated with trypomastigotes 1.25 x105. Clinical examination, assessment of hematocrit, serum chemistry, determination of plasma progesterone and parasitemia were determined daily. Pathological examinations were conducted of the fetus, placenta, umbilical cord blood and DNA detection of the parasite in the placenta, amniotic fluid, blood and tissues of fetuses. The parasitaemia was high, reaching peaks of 2.7 x106, being persistent throughout the experimental period. The infection was characterized by the ewes mortality and perinatal mortality in the first third; abortion and perinatal mortality in the final third of gestation. The factors possibly related maternal reproductive failures were low body score, hematocrit, serum glucose, total protein, cholesterol and progesterone. The presence of DNA of T. vivax in the blood and tissues of fetuses, placenta and amniotic fluid, confirming transplacental transmission of the parasite. The presence of histological lesions in the fetal organs and placenta suggest the involvement of the parasite in the pathophysiological mechanism of reproductive damage.