Energetic supplementation for maintenance or development of Apis mellifera L. colonies

The nutritional requirements of honeybees (Apis mellifera) for their complete development need to be supplied through food sources available in the environment, since honeybees are insects that depend directly on blossoming food sources. However, at certain times a food-supply reduction can promote nutritional stress, thus necessitating food supplementation for maintenance or production stimulus of the colonies. Thus, the determination of optimal energy supplementation can assist in the maintenance and production of colonies. Methods: Twenty Apis mellifera beehives were used (with five beehives per treatment): CTL, control (without feeding); SJ, sugarcane juice; SS, sugar syrup; and IS, inverted sucrose. We evaluated the food consumption, population development, and physiological state (expression of vitellogenin and hexamerin 70a genes) of each colony. Results: The results showed that the supplementation of colonies with sugar syrup resulted in an intermediate consumption level (894.6 ± 291 mL) and better development (384.9 ± 237.3 and 158.3 ± 171.6 cm2, sealed and open brood, respectively). Furthermore, this diet ensured that the colonies were in a good physiological state, as bees fed this diet presented the highest relative expression levels of vitellogenin and hexamerin 70a among all the diets tested. Conclusions: Therefore, sugar syrup is concluded to be the best artificial energetic food for use in the supplementation of honeybee colonies.(AU)

Energetic supplementation for maintenance or development of Apis mellifera L. colonies

Background: The nutritional requirements of honeybees (Apis mellifera) for their complete development need to be supplied through food sources available in the environment, since honeybees are insects that depend directly on blossoming food sources. However, at certain times a food-supply reduction can promote nutritional stress, thus necessitating food supplementation for maintenance or production stimulus of the colonies. Thus, the determination of optimal energy supplementation can assist in the maintenance and production of colonies. Methods: Twenty Apis mellifera beehives were used (with five beehives per treatment): CTL, control (without feeding); SJ, sugarcane juice; SS, sugar syrup; and IS, inverted sucrose. We evaluated the food consumption, population development, and physiological state (expression of vitellogenin and hexamerin 70a genes) of each colony. Results: The results showed that the supplementation of colonies with sugar syrup resulted in an intermediate consumption level (894.6 ± 291 mL) and better development (384.9 ± 237.3 and 158.3 ± 171.6 cm2, sealed and open brood, respectively). Furthermore, this diet ensured that the colonies were in a good physiological state, as bees fed this diet presented the highest relative expression levels of vitellogenin and hexamerin 70a among all the diets tested. Conclusions: Therefore, sugar syrup is concluded to be the best artificial energetic food for use in the supplementation of honeybee colonies.(AU)

Ploidy influences on metabolic substrate deposition of rainbow trout

Triploid fish are usually sterile. Thus, the energy and nutrients intended for sexual maturation may be available to enhance flesh quality and physical growth. The present study aimed to investigate differences in the metabolic substrates, lipids and proteins, between storage tissues from diploid and triploid female rainbow trout. Monthly, metabolic substrates were quantified in liver, muscle, and ovaries, which were collected during the first reproductive cycle. In general, it was possible to identify a seasonal and similar deposition of metabolites in different tissues of 2n and 3n females, mainly at early stages of gonadal maturation. However, from the stages 5-6, the ovaries showed great differences between ploidies, with higher concentration of lipids and protein in 2n females. This result reflects the incorporation of vitellogenin in oocytes, which is a process that does not occur in 3n females. It was possible to observe seasonal hepato-somatic index changes in 2n females, with higher values observed in the post-ovulatory stage, and the triploid animals showed lower values compared to 2n, with no seasonal difference. Viscero-somatic index can reflect the mobilization of substrates, with higher values found for 2n females in stage 5-6, which is the period of active mobilization of tissue substrates.(AU)

Ploidy influences on metabolic substrate deposition of rainbow trout

Triploid fish are usually sterile. Thus, the energy and nutrients intended for sexual maturation may be available to enhance flesh quality and physical growth. The present study aimed to investigate differences in the metabolic substrates, lipids and proteins, between storage tissues from diploid and triploid female rainbow trout. Monthly, metabolic substrates were quantified in liver, muscle, and ovaries, which were collected during the first reproductive cycle. In general, it was possible to identify a seasonal and similar deposition of metabolites in different tissues of 2n and 3n females, mainly at early stages of gonadal maturation. However, from the stages 5-6, the ovaries showed great differences between ploidies, with higher concentration of lipids and protein in 2n females. This result reflects the incorporation of vitellogenin in oocytes, which is a process that does not occur in 3n females. It was possible to observe seasonal hepato-somatic index changes in 2n females, with higher values observed in the post-ovulatory stage, and the triploid animals showed lower values compared to 2n, with no seasonal difference. Viscero-somatic index can reflect the mobilization of substrates, with higher values found for 2n females in stage 5-6, which is the period of active mobilization of tissue substrates.

Morfologia e expressão do gene da vitelogenina em abelhas africanizadas submetidas a dieta contendo ácido giberélico

O ácido giberélico (GA3) é um hormônio vegetal pertencente a grande família dos terpenoides. A ingestão desse composto pode limitar o desenvolvimento e reduzir a eficiência alimentar de insetos-pragas quando tratados em baixas concentrações. Nesse sentido, o objetivo deste trabalho foi investigar o efeito de diferentes níveis de inclusão do ácido giberélico na ração de abelhas Apis mellifera africanizadas sobre o consumo da dieta, mortalidade, alterações morfológicas no intestino médio e corpo gorduroso, bem como, expressão do gene vitelogenina (VG). O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente ao acaso, composto por cinco repetições por tratamento, tendo em média 150 abelhas por repetição, todas em idades definidas de 0 3 dias de vida. As gaiolas foram divididas em cinco tratamentos, sendo eles: sem adição de ácido giberélico na ração (CTRL), adição de 0,45 mg/g de GA3 na ração (DT045), adição de 0,90 mg/g de GA3 na ração (DT09), adição de 1,35 mg/g de GA3 na ração (DT135) e adição de 1,80 mg/g de GA3 na ração (DT180). As abelhas foram mantidas em estufa incubadora tipo B.O.D. (Biochemical Oxygen Demand), em temperatura de 34 ± 2°C, com umidade relativa de 60 ± 10% durante todo período experimental por sete dias. As mensurações do consumo da dieta e mortalidade foram realizadas a cada 24 horas e, a substituição da ração por uma nova ração com as mesmas características, realizadas a cada três dias. Ao término do período experimental, as abelhas foram submetidas a eutanasia por congelamento e CO2 e, posteriormente, dissecadas para remoção do intestino médio e corpo gorduroso. As abelhas submetidas aos tratamentos DT045, DT09 e DT135 apresentaram redução no consumo de ração e aumento da mortalidade, sendo estatisticamente diferentes de CTRL e DT180, enquanto que as abelhas do tratamento DT180 apresentaram consumo e mortalidade estatisticamente igual ao CTRL. As análises histológicas evidenciaram o efeito causado pelo ácido giberélico sobre o epitélio do intestino médio, bem como, trofócitos e enócitos do corpo gorduroso, sugerindo o comprometimento da absorção de nutrientes da dieta de insetos submetidos a baixas concentrações de GA3, enquanto as células pericárdicas denotaram o processo de detoxificação desencadeado pelas altas concentrações de GA3 na dieta. Houve redução nos níveis de expressão do gene VG para todos os tratamentos. Este trabalho evidenciou as formas de avaliação do efeito de agentes xenobióticos em abelhas submetidas a experimentos em laboratório, com o fornecimento de dieta contendo fonte energética e proteica para incentivar o desenvolvimento dos indivíduos, bem como, a utilização de biomarcadores para identificação de cascatas fisiológicas. Dessa forma, foi possível identificar que a inclusão de GA3 provoca alterações no consumo da dieta e aumento do percentual de mortalidade, quando utilizada as doses intermediárias desse experimento. Além disso, danos sobre as células do epitélio do intestino médio, modificações de trofócitos e enócitos do corpo gorduroso e mudanças de estágio nas células pericárdicas foram observadas nos tratamentos intermediários, denotando a capacidade de um possível processo de detoxificação do organismo quando exposto ao GA3. A expressão do gene da vitelogenina foi reduzida em todos os tratamentos, indicando que, é provável uma relação fisiológica em resposta a interações entre hormônios vegetais e hormônios de insetos.

Gibberellic acid (GA3) is a plant hormone belonging to the large terpenoid family. The ingestion of this compound is investigated about its influence on development limitation and in feed efficiency reduction, mainly on insect pests when treated at low concentrations. In this sense, the objective of this work was to investigate the effect of different inclusion levels of gibberellic acid in food of Africanized Apis mellifera bees, evaluating dietary intake, mortality, morphological changes in the midgut and fat body, as well as the level of vitellogenin (VG) gene expression. The experiment was carried out in a completely randomized design, consisting of five replicates for each treatment, with an average of 150 bees per repetition, all at defined ages of 0 3 days of life. The cages were divided into five treatments, namely: No addition of gibberellic acid in the ration (CTRL), addition of 0.45 mg/g of GA3 to the feed (DT045), addition of 0.90 mg/g (DT09), addition of 1.35 mg/g (DT135) and addition of 1.80 mg/g of GA3 to the feed (DT180). The bees were kept in a B.O.D. (Biochemical Oxygen Demand), at a temperature of 34 ± 2°C, with a relative humidity of 60 ± 10% during the entire experimental period for seven days. Measurements of dietary intake and mortality were performed every 24 hours and the replacement of the ration with a new ration with the same characteristics was performed every three days. At the end of the experimental period, the bees were euthanized by freezing and CO2 and later dissected to remove the midgut and fat body. Bees subjected to treatments D045, DT09 and DT135 showed a reduction in feed intake and increased mortality, being statistically different from CTRL and DT180, while bees in the DT180 treatment showed consumption and mortality statistically equal to CTRL treatment. Histological analyzes showed the effect caused by gibberellic acid on the midgut epithelium, as well as trophocytes and oenocytes of the fat body, suggesting the compromised absorption of nutrients in of insects subjected to low GA3 concentrations, while the pericardial cells denote the detoxification process triggered by high GA3 concentrations in the diet. There was a reduction in VG gene expression levels for all treatments. Thus, the imbalance of vitellogenin levels in hemolymph can cause hormonal disturbances that could reflect a reduction in longevity, however further investigations are needed. This work showed how to evaluate the effect of xenobiotic agents in bees submitted to laboratory experiments, with the provision of a diet containing energy and protein to encourage the development of individuals, as well as the use of biomarkers to identify physiological cascades. Thus, it was possible to identify that the GA3 inclusion causes changes in the diet consumption and an increase in the mortality percentage, when using the intermediate doses of this experiment. Furthermore, damage to midgut epithelial cells, changes in adipose cells and stage changes in pericardial cells were observed in intermediate treatments, denoting the organism's responsiveness when exposed to GA3. Vitellogenin gene expression was reduced in all treatments, denoting that there really is a hormone-physiological relationship between plant hormones and insect hormones.

Efeitos da exposição ao microplástico na estrutura gonadal e no sucesso reprodutivo de Danio rerio (Teleostei: Cypriniformes)

Os plásticos vêm se tornando uma crescente ameaça para o meio ambiente, afetando diversos organismos em quase todos os ecossistemas. Dentre os habitats mais afetados, destacam-se os ambientes aquáticos, visto que neles as condições adversas transformam grandes pedaços de plásticos em pequenas partículas, chamadas de microplásticos (MPs). Essas micropartículas entram na cadeia alimentar de diversos organismos causando inúmeras alterações fisiológicas que podem ser irreparáveis. Neste aspecto, o presente estudo teve por objetivo verificar a influência de MPs na biologia reprodutiva de Danio rerio (zebrafish) através de técnicas de histologia, imunohistoquímica e ensaio sorológico imunoenzimático de esteroides sexuais. Machos e fêmeas adultos de D. rerio foram expostos por 30 dias a duas concentrações diferentes de MPs (0,5g/L e 2,5g/L) e, posteriormente, separados para a reprodução. Todos os grupos experimentais foram capazes de reproduzir, entretanto o tempo de desenvolvimento embrionário foi retardado significativamente, embora a prole não tenha sido exposta diretamente aos MPs, resultando em alta mortalidade dos ovos nas duas concentrações testadas, além de causar malformações nos embriões que conseguiram se desenvolver. Análises histológicas demonstraram que a exposição aos MPs causou esteatoses, rompimento de hepatócitos, dilatação de sinusoides e lacerações em fígados de machos e fêmeas. Nos ovários houve hipertrofização das células foliculares, alterações estruturais nos oócitos vitelogênicos e aumento de centros melanomacrofágicos. Nos testículos, o acúmulo de gordura e vacuolizações nos compartimentos intersticial e germinativo levou a uma descaracterização do epitélio germinativo. Análises de imunohistoquímica demonstraram que a exposição aos MPs induziu a produção de vitelogenina em fígados de machos e possivelmente afetou sua produção em fêmeas com esteatose hepática, embora os níveis plasmáticos de hormônios esteroides sexuais masculinos e femininos não tenham sido alterados substancialmente, contribuindo para a fecundação dos ovos. Diante do exposto, a detecção de micropartículas nos diferentes tecidos de fêmeas e machos de zebrafish denunciam a ameaça dos MPs para a sobrevivência das espécies, especialmente dos peixes e outros animais aquáticos

The plastics are becoming a growing threat to the environment, affecting many organisms in almost all ecosystems. Among the most affected habitats, aquatic environments stand out, once that some adverse conditions transform big plastics into small particles, called microplastics (MPs). These microparticles enter the food chain of several organisms causing numerous physiological changes, and sometomes irreparable. In this respect, the present study aimed to verify the influence of MPs on the reproductive biology of Danio rerio (zebrafish) through histology, immunohistochemistry and enzyme-linked immunosorbent assay of sex steroids. Adults males and females of D. rerio were exposed for 30 days to two different concentrations of MPs (0.5g/L and 2.5g/L) and, later, separated for reproduction. All experimental groups were able to reproduce, however the embryo development time was significantly delayed, although the offspring were not directly exposed to MPs, resulting in high egg mortality at the two concentrations tested, in addition to causing malformations in embryos that managed to develop. Histological analyzes showed that exposure to MPs caused steatosis, hepatocyte disruption, sinusoid dilatation and lacerations in male and female livers. In the ovaries, there was hypertrophy of follicle cells, structural changes in the vitellogenic oocytes and an increase in melanomacrophage centers. In the testes, the fat accumulation and vacuolization in the interstitial and germinal compartments led to a mischaracterization of the germinal epithelium. Immunohistochemical analyzes demonstrated that exposure to MPs induced vitellogenin production by the male livers and possibly it affected vitellogenin production in females with hepatic steatosis, although plasma levels of male and female sex steroid hormones were not altered, contributing to the success reproductive. Given the results presented, the detection of microparticles in different tissues from zebrafish females and males reveals the threat of MPs to the survival of species, especially fish and other aquatic animals

CARACTERÍSTICAS MORFOMÉTRICAS DE ABELHAS AFRICANAS: UMA ABORDAGEM QUANTITATIVA E MOLECULAR

Nas abelhas Apis mellifera L., a performance reprodutiva das rainhas é representada por um conjunto de características com cada vez maior relevância na apicultura mundial devido ao alto valor econômico associado. Os parâmetros genéticos para as características associadas à reprodução são muito importantes pois apresentam, na abelha africanizada, interessantes correlações genéticas com algumas características morfométricas, como é o caso do peso à emergência com o peso dos ovários, o que pode permitir o ganho genético por seleção. Contudo, não existem muitos trabalhos que aliem a estimação de parâmetros genéticos com análises genômicas de forma que os aspetos fisiológicos sejam compreendidos ao nível quantitativo e molecular, simultaneamente. Nesse trabalho propõe-se fazer a estimação de parâmetros genéticos para o peso da rainha à emergência e identificação de polimorfismos no gene previamente indicado como candidato: gene da vitelogenina (Vg), para as características supramencionadas em rainhas de abelhas africanizadas. Dessa maneira, contribuir-se-á para um melhor entendimento sobre o gene e para a avaliação genética de rainhas com a compreensão dos processos fisiológicos que influenciam a sua performance reprodutiva, a fim de melhorar o desempenho da apicultura nacional e alavancar novas pesquisas sobre a biologia reprodutiva das abelhas.

In Apis mellifera L. bees, the reproductive performance of queens is characterized by a set of traits with increasing relevance in international beekeeping due to its high associated economic value. Genetic parameters for reproduction-associated traits are very important, since present, in the Africanized honeybees, interesting genetic correlations with some morphometric traits, such as emergence weight with the weight of the ovaries. However, there are not many studies that include estimation of genetic parameters with genomic approaches so that the physiological aspects are understood at the level of quantitative and molecular genetics, simultaneously. In this present study, I proposed to estimate genetic parameters for the queen's weight at emergence and also identify polymorphisms in the gene previously indicated as a candidate: vitellogenin gene (Vg), for weight at emergence. In this way, we aim to contribute to a better understanding of the gene approaching physiological processes that influence their reproductive performance, in order to improve national beekeeping and leverage and inspire new research focused to unravel the reproductive biology of bees.

Terapias hormonais aplicadas à reprodução de Astyanax altiparanae (Characiformes: Characidae) em cativeiro, fora da estação reprodutiva

O lambari-do-rabo-amarelo (Astyanax altiparanae) na natureza, reproduz durante a primavera-verão, mas as fêmeas permanecem vitelogênicas ao longo de todo ano, incluindo o período de inverno, quando a desova não ocorre. O presente estudo investigou a influência da modulação da temperatura no eixo hipotálamo-hipófise-gônadas do lambari, fora da estação reprodutiva, bem como os efeitos de diferentes terapias com análogo do hormônio liberador de gonadotrofinas (GnRHa). Foram conduzidos dois experimentos, um com múltiplas injeções de GnRHa e outro com implantes de GnRHa, em duas doses e duas temperaturas da água, sendo uma correspondente ao inverno e outra ao verão. No final do período experimental, as fêmeas das condições experimentais diferentes foram induzidas a desovar utilizando gonadotrofina coriônica humana (hCG). A análise dos dois experimentos em conjunto, demonstra que independente da forma de administração, a suplementação de fêmeas de A. altiparanae com GnRHa fora do período reprodutivo desencadeia alterações no eixo hipófise-gônadas, dependentes da temperatura de exposição, que aumenta a viabilidade na produção de larvas desta espécie. As injeções repetidas desencadearam uma resposta mais evidente na hipófise de animais em baixas temperaturas. Os dados dos índices de desempenho na reprodução induzida mostraram que a administração de GnRHa na forma de injeções também foi mais eficiente na produção de larvas, quando mantidos em temperaturas mais elevadas, enquanto o GnRHa na forma de implante resultou em maior produção estimada de larvas em temperaturas mais baixas

The lambari-do-rabo-amarelo (Astyanax altiparanae) in the wild reproduce during spring and summer, but females remain vitellogenic throughout the year, including the winter period, when spawning does not occur. The present study investigated the influence of temperature modulation on the hypothalamic-pituitary-gonad axis of the lambari in non-breeding season, as well as the effects of different therapies with gonadotropin releasing hormone analog (GnRHa). Two experiments were conducted, one with multiple injections of GnRHa and the other with GnRHa implants, in two doses and two water temperatures, one corresponding to winter and another of summer. At the end of the experimental period, females from different experimental conditions were induced to spawn using human chorionic gonadotrophin (hCG). The analysis of the two experiments shows that regardless of the administration form, the supplementation of GnRHa in A. altiparanae females, in non-breeding period, triggers alterations in the pituitary-gonadal axis, depending on the exposure temperature, increasing the viability in the production of larvae of this species. Repeated injections elicited a more evident response in the pituitary gland at low temperatures. The performance data on induced reproduction showed that the administration of GnRHa in the form of injections was more efficient in larvae production, when kept at higher temperatures, while GnRHa implants resulted in higher estimated larval production at lower temperatures.

Análise histológica de ovos de Macrobrachium rosenbergii (de Man) incubados em diferentes salinidades

A espécie de camarão de água doce de maior interesse econômico atualmente é o Macrobachium rosenbergii, um dos maiores camarões de água doce conhecido e com isso, sua produção a nível mundial é de aproximadamente 213.958 toneladas. Sua reprodução tem sido estudada com finalidades comerciais, a espécie possui características de incubar os ovos no abdômen, ficando ali aderidos até a eclosão em forma de larvas zoea. O processo de incubação dos ovos ou desenvolvimento embrionário, dura em torno de vinte dias. Neste período o embrião se desenvolve com reserva alimentar que se encontram no interior do ovo. A vitelogenina presente no ovo está entre as proteínas mais importantes na reprodução, atuando como um dos desencadeadores da cadeia de sinalizadores endócrinos regulando a biossíntese de proteínas. Para podermos inferir a absorção de vitelogenina pelo embrião, ao longo das fases embriológicas, foram utilizadas técnicas histológicas, bem como uso de ferramentas de análise de imagem e estatística. Para isso os ovos foram coletados por período de 20 dias, separados conforme seu estádio de desenvolvimento com intervalo de 5 dias, e processados com a técnica de histologia para visualizar o quanto de vitelogenina foi utilizado pelo embrião durante seu desenvolvimento com a técnica de coloração H.E. Os ovos foram incubados em tratamentos de salinidades 0, 6 e 12, com temperatura média de 28ºC. A partir da obtenção de imagens das lâminas histológicas montadas com os ovos nas diferentes fases de desenvolvimento embrionário foi possível estimar a quantidade de vitelo absorvida pelo embrião a partir da observação do espaço ocupado pelo embrião no ovo em relação ao espaço previamente ocupado pelo vitelo. As imagens obtidas foram submetidas a análise com aumento de 20 X e ao programa de imagens Image pro-plus®. De acordo com os dados obtidos após tratamento das informações no referido programa e com auxílio de outro software de estatística (Statistic®). Houve diferenciação na dinâmica de absorção, pela diferenciação das estruturas nas diferentes salinidades aplicadas. Desta forma é possível inferir que o transporte acontece no interior do ovo, possibilitando o rearranjo das biomoléculas. Ainda é possível visualizar que os tratamentos diferem entre si, quando comparados ao tamanho dos espaços formados e do deslocamento do material, sendo que para os tratamentos de salinidade intermediário (6 ) ocorreram de forma mais rápida em relação aos outros tratamentos.

The species of freshwater shrimp of major economic interest today is Macrobachium rosenbergii, one of the largest known freshwater prawns and with this, its worldwide creation is approximately 213,958 tons. Its reproduction has been studied for commercial purposes, the species has characteristics of incubating the eggs in the abdomen, remaining there adhered until the hatching in the form of zoea larvae. The process of egg incubation or embryo development lasts about twenty days. In this period the embryo develops with food reserves that are inside the egg. Vitelogenin present in the egg is among the most important proteins in reproduction, acting as one of the chain triggers of endocrine signals regulating protein biosynthesis. In order to infer the absorption of vitellogenin by the embryo, during the embryological phases, histological techniques were used, as well as the use of image and statistical analysis tools. For this, the eggs were collected for a period of 20 days, separated according to their stage of development with a 5 day interval, and processed with the histology technique to visualize how much of vitellogenine was used by the embryo during its development with the HE staining technique the eggs were incubated in 0 , 6 and 12 sal salinity treatments, with a mean temperature of 28 °C. It was possible to estimate the amount of calf absorbed by the embryo from the observation of the space occupied by the embryo in the egg in relation to the space previously occupied by the calf, from the images obtained from the histological slides assembled with the eggs in the different stages of embryonic development. The images were submitted to 20 X magnification analysis and Image pro-plus® images program. According to the data obtained after processing the information in said program and with the help of other statistical software (Statistic®). There was differentiation in the dynamics of absorption, by the differentiation of the structures in the different applied salinities. In this way it is possible to infer that the transport happens inside the egg, making possible the rearrangement of biomolecules. It is still possible to visualize that the treatments differed from each other when compared to the size of the formed spaces and the material displacement, and for the treatments of intermediate salinity (6 ) they occurred faster than the other treatments.

Arginina na dieta de reprodutores de Rhamdia quelen

Informações sobre a nutrição de reprodutores são fundamentais para que haja uma boa performance reprodutiva, e maior qualidade na produção de gametas e prole, entretanto esse tipo de estudo ainda não é realiado em grande quantidade. Com base nisso este trabalho teve como objetivo investigar o efeito da arginina na nutrição de reprodutores de Rhamdia quelen. Para isso 800 juvenis da espécie foram alimentados durante cinco meses com dietas que continham diferentes níveis de arginina (1,37; 1,67; 1,97; 2,27 e 2,57%). Após este período reprodutores de cada tratamento foram selecionados e induzidos hormonalmente (2.5 mg.kg-1 Extrato Hipofisário de Carpa para machos e 5.5 mg.kg-1 para fêmea), após 240 horas-grau foi realizada a coleta de sêmen e ovócitos. No sêmen foi avaliado: volume, pH, concentração, motilidade e velocidade espermática, normalidade, e foi aferido o diâmetro do ovócitos. As gônadas, fígado e gordura visceral de ambos os sexos foram removidas e pesadas para cálculo dos índices somáticos, e foi realizada a fertilização, incubação e após a abertura da boca as larvas foram transferidas para caixas de plástico onde foi realizada a larvicultura durante 10 dias. Foi realizada quantificação de: vitelogenina no plasma sanguíneo de fêmeas e de óxido nítrico nas gônadas de machos e fêmeas. Verificamos que a suplementação com 2,27% de arginina influenciou a produção seminal, tanto em volume quanto em concentração, ao mesmo tempo que promoveu a produção de ovócitos com maior diâmetro, que consequentemente gerou larvas mais resistentes. Além disso houve maior produção de óxido nítrico nas gônadas. Concluímos com estes resultados, apesar de iniciais, que a arginina tem um importante papel nos gametas e que mais estudos devem ser executados para uma melhor compreensão da função e ação na fisiologia reprodutiva.

Information about broodstock nutrition are essential for a good reproductive performance, and higher quality in gamete and offspring production, however this type of study is still not performed in large quantity. With the objective of assessing the effect of arginine on the reproduction of Rhamdia quelen females, 800 fish were fed for five months with diets containing 1.37, 1.67, 1.97, 2.27 and 2.57% arginine for seven months. After this period the fish of each treatment were selected and received hormonal induction (2.5 mg.kg-1 carp pituitary extract for males and 5.5 mg.kg-1 for females), after 240 termal units accumulated the semen and oocytes were collected. The semen were collected and analysed: volum, pH, concentration, velocity, motility and normality, and the diameter of oocytes. The gonad, liver, visceral fat of both sexes were collected to somatic analysis. The fertilization, incubation and after the larvae open the mouth were transfered to plastic box were the larviculture was carried for 10 days. Were analysed the production of vitellogenin in bood plasm of female and nitric oxide on gonad of males and females. We observed that the addition of 2.27% arginine influenced the seminal production, both in volum and concentration, at the same time that it promoted the oocyte production ith bigger diameter, that consequently generated more resistant larvae. The addition of 2.27% arginine to the diet of R. quelen females favored reproductive parameters, which suggests that arginine increases the nitric oxide production, and consequently raises reproductive efficiency. In addition also promoted the higher nitri oide production. We concluded that these results, although initials, that the arginine present an important role in the gametes and that more studies should be performed for a better understanding of the function and action in the reproductive physiology

DINÂMICA IMUNOHISTOQUÍMICA DA VITELOGÊNESE DURANTE O PROCESSO DE MATURAÇÃO OVARIANA NO CAMARÃO

....O camarão-sete-barbas Xiphopenaeus kroyeri está entre as espécies de crustáceos mais importantes do litoral brasileiro, com destaque social, econômico, ambiental e cultural. Além disso, destaca-se a ampla distribuição geográfica no litoral Atlântico Ocidental (Rio Grande de Sul BR até a Carolina do Norte EUA). Também evidencia-se o aumento da captura, com consequente diminuição dos estoques naturais. A falta de conhecimento sobre a biologia das espécies, principalmente aquelas visadas pelas frotas pesqueiras, diminui a eficiência de aplicações de medidas para proteção dos estoques naturais. O conhecimento sobre a dinâmica reprodutiva de uma espécie pode ser considerado importante e eficaz para controlar uma população explorada. Com relação aos crustáceos, o ciclo reprodutivo apresenta ovários em diferentes estágios de maturação e a determinação destes estágios envolve as atividades inerentes ao ovário e ao hepatopâncreas. Estes dois órgãos trabalham de forma sincronizada durante a vitelogênese. Assim, o objetivo deste estudo foi reavaliar alguns pontos referente a dinâmica celular em fêmeas de Xiphopenaeus kroyeri nos diferentes estágios de maturação ovariana. A classificação macroscópica e microscópica da maturação ovariana e o perfil celular dos túbulos hepatopancreáticos foram estudados através de análises histológicas e histoquímicas; a localização da síntese de vitelogenina no ovário e hepatopâncreas foi estudada através da imuno-histoquímica; e os índices gonadossomático (IGS) e hepatossomático (IHS) foram comparados. Deste modo, o ovário de X. kroyeri apresenta seis estágios de maturação: imaturo, pré-maturo, maturação inicial, maturação avançada, maduro e desovado. As células germinativas apresentam seis fases de desenvolvimento: oogônia tipo I, oogônia tipo II, oócitos pré-vitelogênicos, oócitos em vitelogênese inicial, oócitos em vitelogênese avançada e oócitos maduros. O túbulo hepatopancreático está revestido por um epitélio pseudoestratificado formado por cinco tipos celulares, sendo eles, célula E (embrionária), célula F (fibrilar), célula R (reabsortiva), célula B (vesicular) e célula M (basal). Estes tipos celulares variam a quantidade e a plasticidade de acordo com o estágio de maturação ovariano. Sobre a dinâmica da vitelogênese durante o ciclo reprodutivo detecta-se vitelogenina no ovário e no hepatopâncreas. Além disso, em indivíduos adultos ocorre uma relação inversa entre os índices gonadossomático e hepatossomático nos estágios pré-maturo para maturação inicial, devido ao envolvimento funcional entre ovário e hepatopâncreas durante o início do ciclo de maturação ovariana. O IHS não apresenta diferença significativa entre os estágios de maturação ovariana. Dessa forma, o presente estudo apresenta contribuições importantes a cerca do ciclo reprodutivo do camarão X. kroyeri.

The shrimp Xiphopenaeus kroyeri is among the most important shellfish species off the Brazilian coast, with several highlights such as social, economic, environmental and cultural. In addition, we highlight the wide geographic distribution in the western Atlantic coast (Rio Grande do Sul - BR to North Carolina - USA) and also the increase in artisanal fisheries with consequent reduction of the natural stocks. The lack of knowledge about the biology of the species, especially those targeted by fishing fleets, decreases the efficiency of strategies for protection of natural stocks. Knowledge about reproductive dynamics of a species is considered important and effective to control an exploited population. Regarding the crustaceans, the reproductive cycle is composed of ovaries at different stages of maturation, and the determination of these stages involves activities related to the ovary and hepatopancreas. These two organs work synchronously during vitellogenesis. The objectives of this study were to reevaluate some points in females in different stages of ovarian maturation. Macroscopic and microscopic classification of ovarian maturation and the cellular profile of hepatopancreatic tubules were studied by histological and histochemical analyzes; the location of vitellogenin synthesis in ovary and hepatopancreas was studied by immunohistochemistry and the gonadosomatic (GSI) and hepatosomatic (IHS) indices were compared. Thus, X. kroyeri ovary features six maturity stages: immature, pre-mature, early maturation, advanced maturation, mature and spawned. The germ cells exhibit six phases of development: oogonia type I, oogonia type II, pre-vitellogenic oocytes, oocytes in early vitellogenesis, oocytes in advanced vitellogenesis and mature oocyte. The hepatopancreatic tubule is lined by a pseudostratified epithelium with five cell types, cell E (undifferentiated) cells F (fibrillar), cell R (resorptive), B cell (vesicular) and cell M (basal). These cell types vary the amount and plasticity according to each ovarian maturation stage. On the dynamics of vitellogenesis during the reproductive cycle we highlight the presence of vitellogenin in ovaries and hepatopancreas. Moreover, there is an inverse relationship between gonadosomatic and hepatosomatic indices at the beginning of gonadal maturation due to the functional engagement between ovary and hepatopancreas. Finally, this study has important contributions about the reproductive cycle of shrimp X. kroyeri.

Protein content and electrophoretic profile of fat body and ovary extracts from workers of Melipona quadrifasciata anthidioides (Hymenoptera, Meliponini)

Workers of Melipona quadrifasciata anthidioides (Lepeletier, 1836) develop their ovaries and lay eggs, therefore the production of vitellogenin is expected. In electrophoretic profiles only fat body extracts from nurse workers and ovary extracts from newly-emerged workers show protein with molecular mass similar to vitellogenin. However, an increase in the protein content was detected in forager fat body. This increase was attributed to storage of vitellogenin or other proteins in the previous phase and not discharged into the hemolymph or to an effect of the increased titre of juvenile hormone in this phase of worker life over the fat body functioning.

Protein content and electrophoretic profile of fat body and ovary extracts from workers of Melipona quadrifasciata anthidioides (Hymenoptera, Meliponini)

Workers of Melipona quadrifasciata anthidioides (Lepeletier, 1836) develop their ovaries and lay eggs, therefore the production of vitellogenin is expected. In electrophoretic profiles only fat body extracts from nurse workers and ovary extracts from newly-emerged workers show protein with molecular mass similar to vitellogenin. However, an increase in the protein content was detected in forager fat body. This increase was attributed to storage of vitellogenin or other proteins in the previous phase and not discharged into the hemolymph or to an effect of the increased titre of juvenile hormone in this phase of worker life over the fat body functioning.

Protein content and electrophoretic profile of fat body and ovary extracts from workers of Melipona quadrifasciata anthidioides (Hymenoptera, Meliponini)

Workers of Melipona quadrifasciata anthidioides (Lepeletier, 1836) develop their ovaries and lay eggs, therefore the production of vitellogenin is expected. In electrophoretic profiles only fat body extracts from nurse workers and ovary extracts from newly-emerged workers show protein with molecular mass similar to vitellogenin. However, an increase in the protein content was detected in forager fat body. This increase was attributed to storage of vitellogenin or other proteins in the previous phase and not discharged into the hemolymph or to an effect of the increased titre of juvenile hormone in this phase of worker life over the fat body functioning.