Escleroterapia no tratamento de lesões vasculares orais / Escleroterapia en el tratamiento de las lesiones vasculares orales / Sclerotherapy in the treatment of oral vascular injuries

Objetivo: apresentar um caso de lesão vascular em paciente idoso tratado pela técnica da escleroterapia. Relato do caso: paciente masculino, 67 anos, vítima de acidente vascular cerebral, buscou atendimento odontológico por apresentar raízes residuais. Durante o exame físico foi identificada lesão exofítica, de coloração violácea, base séssil, com aproximadamente dois centímetros, localizada em comissura labial esquerda. Para confirmar a origem da alteração foi realizada manobra semiotécnica (diascopia) que revelou tratar-se de lesão vascular. Por ser o paciente idoso, hipertenso, com histórico de acidente vascular cerebral, foi feita a opção por tratamento conservador, sendo realizada a escleroterapia com oleato de monoetanolamina 5%, numa única sessão. No retorno de sete dias, foi observada regressão parcial da lesão e com 30 dias a região se mostrou completamente cicatrizada, sem vestígios da alteração. O oleato de monoetanolamina provoca uma reação inflamatória estéril, aguda, dose-dependente, no endotélio vascular e nos tecidos extravasculares que resulta em fibrose e obliteração dos vasos sanguíneos, induzindo a regressão das lesões. Conclusão: Com base no caso apresentado e nos registros da literatura é possível afirmar que a escleroterapia é uma alternativa terapêutica minimamente invasiva, eficaz, de baixo custo e com resultado estético favorável no tratamento de lesões vasculares orais... (AU)

Objective: to present a case of vascular injury in an elderly patient treated by the sclerotherapy technique. Case report: male patient, 67 years old, victim of a stroke, sought dental care due to residual dental roots. During the physical examination, an exophytic lesion, violet in color, sessile base, approximately two centimeters, located in the left labial commissure, was identified. Diascopy was performed to confirm the origin of the alteration, which revealed that it was a vascular le sion. As the patient was elderly, hypertensive, with a history of stroke, conservative treatment was chosen, with sclerotherapy with 5% mon oethanolamine oleate in a single session. On return after seven days, partial regression of the lesion was observed and, after 30 days, the region was completely healed, with no traces of the alteration. Mon oethanolamine oleate causes a sterile, acute, dose-dependent inflam matory reaction in the vascular endothelium and extravascular tissues that results in fibrosis and obliteration of blood vessels, inducing re gression of the lesions. Conclusion: Based on the case presented and on the literature records, it is possible to affirm that sclerotherapy is a minimally invasive, effective, low-cost therapeutic alternative with a favorable aesthetic result in the treatment of oral vascular lesions... (AU)

Objetivo: presentar un caso de lesión vascular en un paciente de edad avanzada, tratado mediante la técnica de escleroterapia. Reporte de caso: paciente masculino, 67 años, víctima de un derrame cerebral, buscó atención odontológica por raíces dentarias residuales. Durante el examen físico se identificó una lesión exofítica, de color violeta, de base sésil, de aproximadamente dos centímetros, ubicada en la comisura labial izquierda. Se realizó diascopia para confirmar el origen de la alteración, que reveló que se trataba de una lesión vascular. Como el paciente era anciano, hipertenso, con antecedentes de ictus, se optó por tratamiento conservador, con escleroterapia con oleato de monoetanolamina al 5% en una sola sesión. Al regreso a los siete días se observó una regresión parcial de la lesión y, a los 30 días, la región estaba completamente curada, sin rastros de la alteración. El oleato de monoetanolamina provoca una reacción inflamatoria estéril, aguda y dependiente de la dosis en el endotelio vascular y los tejidos extravasculares que produce fibrosis y obliteración de los vasos sanguíneos, lo que induce la regresión de las lesiones. Conclusión: Con base en el caso presentado y en los registros de la literatura, es posible afirmar que la escleroterapia es una alternativa terapéutica mínimamente invasiva, efectiva, de bajo costo y con resultado estético favorable en el tratamiento de las lesiones vasculares orales... (AU)

Granulomatose de Wegener: reabilitação oral com prótese bucomaxilofacial / Wegener's granulomatosis: oral rehabilitation with maxillofacial prosthesis / Granulomatosis de Wegener: rehabilitación oral con prótesis bucomaxilofacial

Introdução: A granulomatose de Wegener é uma doença autoimune rara que ocorre através de mediadores imunológicos. Sua etiologia permanece desconhecida. No entanto, sabe-se que é caracterizada principalmente pela inflamação dos vasos sanguíneos que acometem preferencialmente as vias aéreas superiores, inferiores e os rins. A doença apresenta altas taxas de morbidade e mortalidade quando não tratada, seu principal tratamento é através do uso de corticoides e imunossupressores. Objetivo: realizar um relato de caso de Granulomatose de Wegener tratando a comunicação orosinusal através de prótese bucomaxilofacial e uma discussão baseada na literatura recente. Relato de caso: paciente do gênero masculino, 40 anos de idade, leucoderma, encaminhado ao serviço de Bucomaxilofacial do Hospital Universitário da Universidade Federal de Santa Catarina (HU-UFSC) queixando-se de comunicação oronasal em região de palato. Foi tratado com prótese BMF obturadora, o que devolveu ao paciente a capacidade de fonação, deglutição e convívio social. Conclusão: o tratamento com a prótese BMF reestabelece o velamento velofaríngeo, corrige hipernasalidade, melhora a deglutição e dá conforto psicológico ao paciente com estabilidade protética funcional... (AU)

Introduction: Wegeners' Granulomatulosis is a rare autoimmune disease that acts through immunologic mediators. It's etymology remains unknown. However, it is known that it's mainly characterized by the inflammation of blood vessels that affect, by preference, upper and lower airways, as well as kidneys. The disease presents high rates of morbidity and mortality when not treated, and it's main treatments are corticoids and immunosuppressants. Objective: Perform a Wegener's Granulomatulosis case report treating orosinusal communication through the use of a bucomaxilofacial prosthesis and a discussion based on current literature. Case report: Male patient, 40 years of age, leucoderma, brought to the Bucomaxilofacial department of Federal University of Santa Catarina (HU UFSC) with complaints regarding oronasal communication in the palate region. The patient was treated with a BMF prosthetics, which has allowed the patient to resume normal social activities, as well as returning phonation and deglutition. Conclusion: Treatment with a BMF prosthetics reestablishes velopharyngeal veiling, assists in the correction of nasal voice, improves deglutition and offers the patient psychological comfort with functional prosthetic stability... (AU)

Introducción: la granulomatosis de Wegener es una enfermedad autoinmune rara que se presenta a través de mediadores inmunológicos. Su etiologia permanece desconocida. Sin embargo, se sabe que se caracteriza principalmente por la inflamación de los vasos sanguíneos que afectan preferentemente las vías respiratorias superiores e inferiores y los riñones. La enfermedad tiene altas tasas de morbilidad y mortalidad cuando no se trata, su principal tratamiento es mediante el uso de corticosteroides e inmunosupresores. Objetivo: realizar un reporte de caso de Granulomatosis de Wegener en el tratamiento de la comunicación orosinusal mediante prótesis maxilofacial y una discusión basada en la literatura reciente. Caso clínico: paciente de sexo masculino, 40 años, leucoderma, remitido al Servicio Maxilofacial del Hospital Universitario de la Universidad Federal de Santa Catarina (HU-UFSC) por comunicación oronasal en región paladar. Fue tratado con una prótesis obturatriz de BMF, que le devolvió al paciente la capacidad de hablar, tragar y socializar. Conclusión: el tratamiento con la prótesis BMF restablece el velo velofaríngeo, corrige la hipernasalidad, mejora la deglución y proporciona confort psicológico al paciente con estabilidad protésica funcional... (AU)

Comparison of two soft tissue substitutes for the treatment of gingival recession defects: an animal histological study

Abstract Objectives: This study aimed to compare two different soft tissue replacement grafts in their ability to treat gingival recession defects and successfully integrate with the surrounding tissues. Methodology: Nine beagle dogs were included and followed up to 10 weeks. Sites for intervention were allocated to one of the grafting materials investigated. Treatment consisted of coronally advanced flap combined with one of the two soft tissue substitutes on a previous surgically created defect. Materials employed were porcine-derived acellular dermal matrix (ADM) [Novomatrix™ (Test)] and collagen-based matrix (CBM) [Mucograft® (Control)]. Animals were sacrificed at 2, 6, and 10 weeks postoperatively and compared using descriptive histology and histomorphometric outcomes. Results: Macroscopic findings were similar between test and control groups at all intervals. After 10 weeks, both groups demonstrated successful incorporation of the grafting materials without signs of rejection and with comparable tissue integration. The histomorphometric data were similar between groups at 2 weeks; however, the test group provided greater root coverage and increase in tissue thickness than the control at 6- and 10-weeks post surgically. Conclusions: Both porcine-derived ADM and CBM revealed similar histological outcomes with successful integration and absence of adverse events. Test group provided superior outcomes regarding root coverage and increase in tissue thickness.

Procedimentos de regeneração pulpar: avaliação longitudinal imune / Procedimentos de regeneração pulpar: avaliação imune / Pulpar regeneration procedures: Longitudinal imune assessment

O tratamento endodôntico em dentes com desenvolvimento radicular incompleto está relacionado a algumas dificuldades e limitações. Entretanto, apesar das dificuldades técnicas, a alta susceptibilidade à fratura de dentes com rizogênese incompleta representa o fator chave para a busca de novas modalidades terapêuticas. Adicionalmente, as deficiências estéticas e funcionais apresentadas pelas terapias reabilitadoras após a perda de um elemento dentário permanente em um paciente jovem, também são fatores importantes e estimuladores. Assim, fica evidente a necessidade de pesquisas que disponibilizem novas opções terapêuticas conservadoras, com resultados previsíveis. O estudo objetivou investigar a resposta imunoinflamatória de dentes submetidos a diferentes protocolos descritos na literatura para se executar a terapia endodôntica regeneradora. Para isso, a expressão de moléculas inflamatórias e fatores de crescimento/diferenciação celular expressos nos tecidos pulpares foram analisados em diferentes intervalos de tempo, utilizando-se um modelo murino desenvolvido para a presente pesquisa. 54 Camundongos Balb/C tiveram as câmaras pulpares de seus molares superiores abertas e, subsequentemente submetidas à pulpectomia. Os animais foram então divididos em 3 grupos: grupo Sangramento (Blood) ­ preenchimento do espaço pulpar com coágulo sanguíneo; grupo EDTA + Sangramento (EDTA + Blood) ­ irrigação dos canais com solução de EDTA a 17% por 1 min, seguido do preenchimento do espaço pulpar com coágulo sanguíneo; grupo Vazio (Empty) ­ espaço pulpar deixado vazio. Cada grupo foi composto por 18 animais. De cada grupo, 6 animais foram sacrificados nos intervalos de 7, 14 e 21 dias após os experimentos. Utilizando-se a análise da reação em cadeia da polimerase em tempo real (Real Time PCR) avaliou-se a expressão gênica das citocinas IL-1, TNF-ß, IL-10 e dos fatores de crescimento/diferenciação NGF, IGF e VEGF, comparando-se tais achados inter e extra-grupos, nos diferentes períodos de avaliação. Os resultados demonstraram as maiores expressões dos mediadores pró-inflamatórios no grupo Empty, assim como uma maior expressão de mediadores anti-inflamatórios no grupo experimental preenchido com o coágulo sanguíneo. O grupo EDTA + Blood evidenciou a maior expressão gênica de fatores de crescimento/diferenciação, em todos os períodos analisados, quando comparado aos demais grupos. Pode-se concluir que a irrigação com solução de EDTA a 17%, previamente ao preenchimento dos sistemas de canais radiculares (SCR) com o scaffold (coágulo sanguíneo), estimulou a expressão aumentada de mediadores relacionados ao sucesso da terapia endodôntica regenerativa. Adicionalmente, o modelo animal desenvolvido para a pesquisa mostrou-se eficaz para se analisar longitudinalmente a modulação imune que se processa nos tecidos pulpoperirradiculares após a instituição da terapia.(AU)

Endodontic treatment in teeth with incomplete root development is related to some difficulties and limitations. However, despite the technical difficulties, the high susceptibility to fracture of teeth with incomplete rhizogenesis represents the key factor for the search for new therapeutic modalities. Additionally, the aesthetic and functional deficits presented by rehabilitation therapies after the loss of a permanent dental element in a young patient are also important and stimulating factors. Thus, it is evident the need for research that offers new conservative therapeutic options, with predictable results. Aimed to investigate the immunoinflammatory response of teeth submitted to different protocols described in the literature to perform the regenerative endodontic therapy. For this, the expression of inflammatory molecules and cell growth/differentiation factors expressed in pulpal tissues were analyzed at different time intervals using a murine model developed for the present study. 54 Balb/C mice had the pulp chambers of their upper molars opened and subsequently submitted to pulpectomy (one tooth per animal). The animals were then divided into 3 groups: Bleeding group - filling of the pulp space with blood clot; EDTA + Bleeding group (EDTA + Blood) - irrigation of the channels with 17% EDTA solution for 1 min, followed by filling of the pulp space with blood clot; Empty - pulp space left empty (negative control). Each group consisted of 18 animals. From each group, 6 animals were sacrificed at 7, 14 and 21 day intervals after the experiments. Using real-time polymerase chain reaction (RT-PCR), the cytokines IL-1, TNF-ß, IL-10 and the growth/differentiation factors NGF, IGF and VEGF, comparing such inter and extra group findings in the different evaluation periods. The results showed the highest expressions of the pro-inflammatory mediators in the Empty group, as well as a greater expression of anti-inflammatory mediators in the Experimental group filled with the blood clot. The EDTA + Blood group evidenced the greater gene expression of growth / differentiation factors, in all periods analyzed, when compared to the other groups. It can be concluded that irrigation with 17% EDTA solution, prior to filling the root canals system with the scaffold (blood clot), stimulated the increased expression of detrimental mediators for the success of regenerative endodontic therapy. Additionally, the animal model developed for the research proved to be effective in longitudinally analyzing the immune modulation that occurs in octopus-periradicular tissues after the institution of therapy.(AU)

The effect of hippophae rhamnoides extract on oral mucositis induced in rats with methotrexate

ABSTRACT Objective: To investigate the effect of HRE (Hippophae rhamnoides extract) on oral mucositis induced in rats with MTX. Material and Methods: Experimental animals were divided into groups as healthy (HG), HRE+MTX (HMTX), and control group, which received MTX (MTXC). HMTX group received 50 mg/kg HRE while MTXC and HG groups received equivolume distilled water with gavage once a day. After one hour of HRE and distilled water administration, HMTX and MTXC groups received a single dose of oral MTX 5 mg/ kg. This procedure was repeated for one month. Results: The levels of MDA, IL-1β, and TNF-α were found to be significantly higher in the cheek, lower lip, and tongue tissue of the animals receiving MTX, compared with HG and HMTX groups; however, these parameters were lower in the cheek and low lip tissue, and a milder damage ocurred in these tissues, compared with the tongue tissue in MTXC group. No histopathologic damage was observed in the cheek, lower lip, and tongue tissues of the rats treated with HRE. Conclusion: This findings indicate that HRE as a natural product is an important advantage compared with synthetic drugs for prophylaxis of oral mucositis developed due to MTX.

Inflammatory response of human dental pulp to at-home and in-office tooth bleaching

ABSTRACT Tooth bleaching is a technique of choice to obtain a harmonious smile, but bleaching agents may damage the dental pulp. Objective: This study evaluated the inflammatory responses of human dental pulp after the use of two bleaching techniques. Material and Methods: Pulp samples were collected from human third molars extracted for orthodontic reasons and divided into three groups: control - no tooth bleaching (CG) (n=7); at-home bleaching with 15% carbamide peroxide (AH) (n = 10), and in-office bleaching with 38% hydrogen peroxide (IO) (n=12). Pulps were removed and stained with hematoxylin-eosin for microscopic analysis of inflammation intensity, collagen degradation, and pulp tissue organization. Immunohistochemistry was used to detect mast cells (tryptase+), blood vessels (CD31+), and macrophages (CD68+). Chi-square, Kruskal-Wallis, and Mann Whitney tests were used for statistical analysis. The level of significance was set at p<.05. Results: The inflammation intensity and the number of macrophages were significantly greater in IO than in AH and CG (p<0.05). The results of CD31+ (blood vessels per mm2) were similar in CG (61.39±20.03), AH (52.29±27.62), and IO (57.43±8.69) groups (p>0.05). No mast cells were found in the pulp samples analyzed. Conclusion: In-office bleaching with 38% hydrogen peroxide resulted in more intense inflammation, higher macrophages migration, and greater pulp damage then at-home bleaching with 15% carbamide peroxide, however, these bleaching techniques did not induce migration of mast cells and increased the number of blood vessels.

Rat subcutaneous tissue response to calcium silicate containing different arsenic concentrations

Objective: To evaluate the response of rat subcutaneous tissue in implanted polyethylene tubes that were filled with GMTA Angelus and Portland cements containing different arsenic concentrations. Material and Methods: Atomic absorption spectrophotometry was utilized to obtain the values of the arsenic concentration in the materials. Thirty-six rats were divided into 3 groups of 12 animals for each experimental period. Each animal received two implants of polyethylene tubes filled with different test cements and the lateral of the tubes was used as a control group. After 15, 30 and 60 days of implantation, the animals were killed and the specimens were prepared for descriptive and morphometric analysis considering: inflammatory cells, collagen fibers, fibroblasts, blood vessels and other components. The results were analyzed utilizing the Kuskal-Wallis test and the Dunn's Multiple test for comparison (p<0.05). Results: The materials showed, according to atomic absorption spectrophotometry, the following doses of arsenic: GMTA Angelus: 5.01 mg/kg, WPC Irajazinho: 0.69 mg/kg, GPC Minetti: 18.46 mg/kg and GPC Votoran: 10.76 mg/kg. In a 60-day periods, all specimens displayed a neoformation of connective tissue with a structure of fibrocellular aspect (capsule). Control groups and MTA Angelus produced the lower amount of inflammatory reaction and GPC Minetti, the highest reaction. Conclusions: There was no direct relationship between the concentration of arsenic present in the composition of the materials and the intensity of the inflammatory reactions. Higher values, as 18.46 mg/kg of arsenic in the cement, produce characteristics of severe inflammation reaction at the 60-day period. The best results were found in MTA angelus. .

Efeitos do LRP6 e Frizzled6 na diferenciação endotelial de DPSC / LRP6 and Frizzled6 effects in the endothelial differentiation of DPSC

O objetivo deste estudo foi avaliar a função da via de sinalização Wnt/β-catenina através dos receptores LRP6 e Frizzled6 na diferenciação de células-tronco de polpa dental de dentes permanentes (DPSC) em células endoteliais. DPSC foram transduzidas com marcadores eGFP e vetores lentivirais shRNA (LRP6, Frizzled6 ou vetor vazio - controle) para os experimentos. Os testes in vitro avaliaram a expressão de GSK3-β e β-catenina por western blot na presença de rhWnt1 e rhVEGF165 e de VEGFe CXCL-8 (IL-8) por ELISA. A expressão de marcadores endoteliais (western blot e PCR) e formação de túbulos capilares foram analisados após a diferenciação endotelial das DPSCs. In vivo, fatias dentárias/matrizes condutivas semeadas com DPSCs-shRNA foram implantadas em subcutâneo de dorso de camundongos imunodeprimidos por 28 dias e o número de vasos sanguíneos foi determinado por imunohistoquímica para eGFP e coloração por HE. β-catenina ativa foimais expressa em shRNA-LRP6 e shRNA-Frizzled6 que nas células controle, e sua expressão aumentou com a suplementação com rhVEGF165 e rhWnt1. A expressão de GSK3-β fosforilado foi menor, porém também aumenta ou permanece estável com rhVEGF165 ou rhWnt1. Quanto à expressão de VEGF, em shRNA-Frizzled6 foi maior que nas células controle e em shRNA-LRP6 (p<0,05), enquanto que a expressão de IL8 foi menor em shRNA-LRP6, diferindo estatisticamente das outras células. A expressão dos marcadores endoteliais CD31 eVEGFR2 diminuiu nas células shRNA-LRP6, enquanto que em shRNA Frizzled6a expressão de VEGFR2 foi aumentada. A formação de túbulos capilares de shRNA-Frizzled6 e shRNA-LRP6 foi menor quando comparado ao controle, porém shRNA-Frizzled6 obteve uma tendência de aumento na proliferação de capilares em 144h. In vivo, DPSC-shRNALRP6 apresentou menor número de capilares formados quando comparados com as outras duas células (p<0,05). Coletivamente, os resultados deste estudo sugerem que a via de sinalização Wnt/β-catenina regula a diferenciação ...

The aim of this study was to evaluate the function of Wnt/β-cateninsignaling through LRP-6 and Frizzled-6 receptors in the differentiation ofdental pulp stem cells from permanent teeth (DPSC) into endothelial cells.DPSC were transduced with EGFP-tagged lentiviral shRNA vectors(LRP6, Frizzled6 or empty vector - control) for experiments. In vitro assayevaluated GSK3-β and β-catenin expression by western blot in rhWnt1and rhVEGF165 presence, and VEGF and CXCL-8 (IL-8) expression byELISA. Endothelial markers expression (western blot and PCR) and tubeformation were analyzed after endothelial differentiation of DPSCs. In vivo,tooth slices/scaffolds seeded with transduced DPSCs were implantedsubcutaneously in back of immunodefficient mice and blood vessels werecounted per immunohistochemistry for eGFP and HE staining. Active β-catenin was more expressed in shRNA-LRP6 and shRNA-Frizzled6 thanin control cells, and increased with rhVEGF165 and rhWnt1supplementation. Phosphorylated GSK3-β expression was lower, howeveralso increased or maintained with rhVEGF165 or rhWnt1. VEGF expressionwas higher in shRNA-Frizzled6 than in control and shRNA-LRP6 (p<0,05),IL8 expression was lower in shRNA-LRP6, with statistically difference ofthe others cells. Endothelial markers CD31 and VEGFR2 expressiondecreased in shRNA-LRP6, but VEGFR2 expression increased in shRNAFrizzled6.shRNA-Frizzled6 and shRNA-LRP6 tube formation was lowerwhen compared to control, however shRNA-Frizzled6 had tendency toincrease proliferation in 144h. In vivo, shRNA-LRP6 showed fewer bloodvessels formed than other cells (p<0,05). Collectively, the results of thisstudy suggest that Wnt/β-catenin signaling regulates endothelialdifferentiation of DPSC through LRP6

Efeitos do LRP6 e Frizzled6 na diferenciação endotelial de DPSC / LRP6 and Frizzled6 effects in the endothelial differentiation of DPSC

O objetivo deste estudo foi avaliar a função da via de sinalização Wnt/β-catenina através dos receptores LRP6 e Frizzled6 na diferenciação de células-tronco de polpa dental de dentes permanentes (DPSC) em células endoteliais. DPSC foram transduzidas com marcadores eGFP e vetores lentivirais shRNA (LRP6, Frizzled6 ou vetor vazio - controle) para os experimentos. Os testes in vitro avaliaram a expressão de GSK3-β e β-catenina por western blot na presença de rhWnt1 e rhVEGF165 e de VEGFe CXCL-8 (IL-8) por ELISA. A expressão de marcadores endoteliais (western blot e PCR) e formação de túbulos capilares foram analisados após a diferenciação endotelial das DPSCs. In vivo, fatias dentárias/matrizes condutivas semeadas com DPSCs-shRNA foram implantadas em subcutâneo de dorso de camundongos imunodeprimidos por 28 dias e o número de vasos sanguíneos foi determinado por imunohistoquímica para eGFP e coloração por HE. β-catenina ativa foimais expressa em shRNA-LRP6 e shRNA-Frizzled6 que nas células controle, e sua expressão aumentou com a suplementação com rhVEGF165 e rhWnt1. A expressão de GSK3-β fosforilado foi menor, porém também aumenta ou permanece estável com rhVEGF165 ou rhWnt1. Quanto à expressão de VEGF, em shRNA-Frizzled6 foi maior que nas células controle e em shRNA-LRP6 (p<0,05), enquanto que a expressão de IL8 foi menor em shRNA-LRP6, diferindo estatisticamente das outras células. A expressão dos marcadores endoteliais CD31 eVEGFR2 diminuiu nas células shRNA-LRP6, enquanto que em shRNA Frizzled6a expressão de VEGFR2 foi aumentada. A formação de túbulos capilares de shRNA-Frizzled6 e shRNA-LRP6 foi menor quando comparado ao controle, porém shRNA-Frizzled6 obteve uma tendência de aumento na proliferação de capilares em 144h. In vivo, DPSC-shRNALRP6 apresentou menor número de capilares formados quando comparados com as outras duas células (p<0,05). Coletivamente, os resultados deste estudo sugerem que a via de sinalização Wnt/β-catenina regula a diferenciação...

The aim of this study was to evaluate the function of Wnt/β-cateninsignaling through LRP-6 and Frizzled-6 receptors in the differentiation ofdental pulp stem cells from permanent teeth (DPSC) into endothelial cells.DPSC were transduced with EGFP-tagged lentiviral shRNA vectors(LRP6, Frizzled6 or empty vector - control) for experiments. In vitro assayevaluated GSK3-β and β-catenin expression by western blot in rhWnt1and rhVEGF165 presence, and VEGF and CXCL-8 (IL-8) expression byELISA. Endothelial markers expression (western blot and PCR) and tubeformation were analyzed after endothelial differentiation of DPSCs. In vivo,tooth slices/scaffolds seeded with transduced DPSCs were implantedsubcutaneously in back of immunodefficient mice and blood vessels werecounted per immunohistochemistry for eGFP and HE staining. Active β-catenin was more expressed in shRNA-LRP6 and shRNA-Frizzled6 thanin control cells, and increased with rhVEGF165 and rhWnt1supplementation. Phosphorylated GSK3-β expression was lower, howeveralso increased or maintained with rhVEGF165 or rhWnt1. VEGF expressionwas higher in shRNA-Frizzled6 than in control and shRNA-LRP6 (p<0,05),IL8 expression was lower in shRNA-LRP6, with statistically difference ofthe others cells. Endothelial markers CD31 and VEGFR2 expressiondecreased in shRNA-LRP6, but VEGFR2 expression increased in shRNAFrizzled6.shRNA-Frizzled6 and shRNA-LRP6 tube formation was lowerwhen compared to control, however shRNA-Frizzled6 had tendency toincrease proliferation in 144h. In vivo, shRNA-LRP6 showed fewer bloodvessels formed than other cells (p<0,05). Collectively, the results of thisstudy suggest that Wnt/β-catenin signaling regulates endothelialdifferentiation of DPSC through LRP6.

Proposta de mapeamento da vascularização normal da face por meio da ultrassonografia modo B e Doppler / Mapping proposition of the normal vasculature of the face though ultrasound B-mode and Doppler

O estudo do aporte sanguíneo da face é importante em função da cirurgia como para as cirurgias que fazem uso de retalhos. O bom restabelecimento da área depende da perfusão obtida. Os métodos de aquisição de imagem que investigam a vascularização da face muitas vezes são caros e acrescentam risco à condição do paciente. A ultrassonografia é um método de imagem que não oferece risco ao paciente, sendo acessível e realizado em tempo real. A intensidade do fluxo sanguíneo de uma determinada estrutura pode ser medida pelo modo Doppler e alterações do padrão de normalidade indicam uma possível deficiência na nutrição dos tecidos compreendidos, podendo mesmo levar o clínico a prever futuras afecções. O objetivo neste estudo foi captar a vascularização normal da face, por meio da ultrassonografia modo B e Doppler de modo a se propor um mapeamento dos principais vasos arteriais. Foi possível, utilizando-se transdutores linear e endocavitário proceder-se ao estudo da vascularização da face. Foram obtidos dados referentes à vascularização da face que permitissem a análise da hemodinâmica dos tecidos. Foram estudados três vasos de diâmetro reduzido (0,60mm a. angular; 0,55mm a. palatina maior; 0,45mm a. infraorbital), sendo que nestes foi possível adquirir gráficos de onda de velocidade de fluxo e, consequentemente, obter-se a velocidade de pico sistólico (VPS) e o índice de resistividade (IR).

The study of the blood supply of the facial tissues is important due to oral and maxillofacial surgery as for operations that make use of flaps. The proper restoration of the perfusion is essential to the success of these procedures. The image methods that investigate the vasculature of the face are often costly and add risk to the patients condition. Ultrasound is an imaging method that offers no risk, is affordable and is performed in real time. The intensity of blood flow of a given structure can be measured by Doppler mode and changes in the normal range can indicate a deficiency in the nutrition of tissues end even influence the clinician to predict future conditions. The aim of this study was to access the normal vasculature of the face through ultrasound B-mode and Doppler in order to propose a mapping of the arterial vessels. It was possible, using the linear and endocavitary probes to study the vascularity of the face. Data was obtained allowing the analysis of the tissue hemodynamics. It was possible to access three arteries of small diameter (0,60mm angular artery; 0,55mm greater palatine artery; 0,45mm infraorbital artery) and in all cases graphics of wave flow velocity. Therefore, the resistivity index (RI) and systolic peak velocity (SPV) could also be computed.

Mecanismos envolvidos na diferenciação de células-tronco de dentes decíduos exfoliados humanos (SHED) em odontoblastos e células endoteliais / Mechanisms underlying the differentiation of stem cells from human exfoliated deciduous teeth (SHED) into odontoblasts and endothelial cells

A engenharia de tecido pulpar tem como objetivo substituir a polpa dentária inflamada ou necrosada por um tecido saudável e funcional, capaz de formar nova dentina para reparar a estrutura dentária perdida. Assim, os objetivos deste trabalho foram: avaliar a habilidade de diferenciação de células tronco de dentes decíduos exfoliados humanos (SHED) em odontoblastos funcionais, demonstrando a formação de tecido mineralizado in vivo; e estudar o efeito de VEGF em SHED com relação à estimulação de vias de sinalização celular (STAT3, AKT e ERK), proliferação, migração, formação de estruturas tubulares e diferenciação em células endoteliais. O início do processo de mineralização de SHED tratadas com dexametasona, ácido ascórbico 'beta' - glicerofosfato pôde ser detectado por meio da produção da enzima fosfatase alcalina a partir da segunda semana de cultura, mas a expressão de RNAm para DSPP só foi observada após 28 dias de indução. Utilizando-se o modelo de fatias de dentes e matrizes condutivas implantadas no dorso de camundongos imunodeprimidos, demonstrou-se a diferenciação de SHED em células semelhantes a odontoblastos, as quais tiveram imunomarcação positiva com o anticorpo DMP-1. A deposição de dentina, seguindo um ritmo centrípeto de crescimento, numa taxa de 14,1 µm por dia também foi demonstrada por meio da marcação com tetraciclina. O tratamento das SHED com VEGF estimulou a fosforilação de ERK e AKT e a diminuiu a fosforilação de STAT3 em um período de uma hora, provavelmente por meio de sua ligação com os receptores VEGFR-1 e NP-1 presentes nestas células. Além disso, VEGF intensificou a organização das SHED em estruturas tubulares, havendo diferença estatisticamente significativa entre os grupos tratado e não tratado a partir do 5o dia de tratamento. Entretanto, VEGF não estimulou a proliferação nem a migração destas células. Os resultados de RT-PCR mostraram que SHED cultivadas em fatias de dentes e ...

Dental pulp tissue engineering aims to replace the inflamed or necrotic pulp by a healthy and functionally competent tissue able to form new dentin in order to repair lost structure. The purposes of this work were: to evaluate the differentiation ability of stem cells from human exfoliated deciduous teeth (SHED) into functional odontoblasts, showing the formation of mineralized tissue in vivo; and to study the effect of VEGF on SHED with regards to the stimulation of cell signaling pathways (STAT3, AKT and ERK), the proliferation, migration, capillary sprouting, and the differentiation into endothelial cells. The beginning of the mineralization process of SHED treated with dexamethasone, ascorbic acid and beta-glycerophosphate could be detected through the production of alkaline phosphatase after the second week of culture, but the expression of DSPP mRNA was only observed after 28 days of induction. Using the tooth slice and scaffold model implanted in the dorsum of immunocompromised mice, the differentiation of SHED into odontoblast-like cells, which were immunostained with DMP-1 antibody, was demonstrated. Dentin deposition following a centripetal rhythm, in a rate of 14.1 µm per day, was also shown through the tetracycline labeling. VEGF treatment of SHED stimulated the ERK and AKT phosphorilation, and decreased the phosphorilation of STAT3 over 1 hour period, presumably due to its binding to VEGFR-1 and NP-1 receptors in these cells. In addition, VEGF enhanced SHED organization into tubular structures, with statistically significant difference between the treated group and the non-treated one after the 5th day of treatment. However, VEGF did not stimulate proliferation and migration of these cells. RT-PCR results demonstrated that SHED seeded in the tooth slices and scaffolds expressed VEGFR-2 after the first day of VEGF stimulation...

Frequência das aspirações positivas no bloqueio mandibular / Frequency of Positive Aspirations in Mandibular Block

Objetivo: o estudo avaliou a freqüência de aspirações positivas durante anestesia dos nervos alveolar inferior,lingual e bucal, utilizando a técnica anestésica de Smith (1918). Metodologia: sessenta pacientes saudáveis, com faixa etária entre 15 e 30 anos, foram submetidos à intervenção cirúrgica buco-dental sob anestesia local por bloqueio dos nervos alveolar inferior, lingual e bucal. Utilizou-se, para a realização da anestesia, seringa do tipo carpule com refluxo em forma de arpão. Após arealização da punção, injetou-se um pouco de anestésico e puxou-se gentilmente a seringa durante três segundos. Este procedimento foi realizado no trajeto e no ponto de infiltração durante a anestesia, sendo observado se havia a presença de sangue aspirado no interior do tubete de anestésico. Conclusão: a quantidade de eventos positivos foi significativamente alta, sendo que o bloqueio do nervo alveolar inferior apresentou um maior índice de aspiração positiva, e os testes realizados no ponto de infiltração do anestésico tiveram maior número de aspiração sangüínea positiva do que no trajeto da agulha

Objective: The study evaluated the frequency of positive aspirations during anesthesia of the inferior alveolar nerve, lingual nerve and buccal using Smith's anesthetic technique (1918). Methodology: Sixty healthy patients, with age between 15 and 30 years, they were submitted to the dental surgical intervention under local anesthesia for block of the inferior alveolar nerve, lingual nerve and buccal. It was used for the accomplishment of the anesthesia syringe of the type carpule with reflux in harpoon form. After the accomplishment of the puncture, some anesthetic was injected, and it was pulled the syringe kindly for three seconds. This procedure was accomplished in the itinerary and in the infiltration point during the anesthesia, being observed if there was the presence of blood aspirated inside anesthetic's cartridge. Conclusion: The amount of positive events was significantly high, and the block of the inferior alveolar nerve presented a larger index of positive aspiration and the tests accomplished in the point of the anesthetic's infiltration had larger number of positive sanguine aspiration than in the itinerary of the needle