Aplicação da ozonioterapia no processo de reparação tecidual de queimaduras cutâneas: avaliação histométrica / Application of ozone therapy in the tissue repair orocess of skin burns: histometric evaluation

O ozônio é considerado um agente oxidante muito potente, e quando aplicado nos tecidos reage imediatamente com várias moléculas presentes nos fluidos biológicos promovendo a formação de espécies reativas de oxigênio que envolvem várias reações bioquímicas, e que na associação ao óleo formam-se uma série de subprodutos, dentre eles, peróxidos com propriedades germicidas (BOCCI, 2006). Dentre as propriedades biológicas do ozônio, também são descritas sua ação antimicrobiana, anti-inflamatória e analgésica incluindo a neutralização de mediadores da dor. E seu efeito terapêutico na redução do estresse oxidativo (Menendes et al., 2002; Ferreira e cols., 2013). Ainda, em aplicações clínicas na odontologia, o ozônio foi descrito como biocida oxidativo, atuando em fungos, colônias bacterianas, vermes e vírus (Oliveira e Mendes, 2009). Este trabalho avaliou a ação do ozônio associado ao óleo de girassol no tratamento de feridas cutâneas ocasionadas por queimaduras induzidas por laser CO2 em ratos machos da linhagem Winstar. Os resultados mostraram uma diminuição significativa do número de células mononucleares e de vasos sanguíneos no 7º dia, período inicial do tratamento e uma proliferação exacerbada de fibroblastos em todos os períodos estudados. Desta maneira pode-se concluir que a ozonioterapia administrada com óleo de girassol ozonizado não favoreceu eficientemente a reparação tecidual de feridas cutâneas por queimaduras. Assim, Novas pesquisas se tornam importantes para estabelecer novos critérios para o uso do ozônio como terapia adjuvante, embora algumas propriedades biológicas sejam descritas.(AU)

Ozone is considered a very powerful oxidizing agent, and when applied to tissues it reacts immediately with several molecules present in biological fluids, promoting the formation of reactive oxygen species that involve several biochemical reactions, and when associated with oil, a series of byproducts, including peroxides with germicidal properties (BOCCI, 2006). Among the biological properties of ozone, its antimicrobial, anti-inflammatory and analgesic action is also described, including the neutralization of pain mediators and its therapeutic effect in reducing oxidative stress (Menendes et al., 2002; Ferreira et al., 2013). Furthermore, in clinical applications in dentistry, ozonehas been described as an oxidative biocide, acting on fungi, bacterial colonies, worms and viruses (Oliveira and Mendes, 2009). This work evaluated the action of ozone associated with sunflower oil in the treatment of wounds cutaneous injuries caused by CO2 laser-induced burns in male Winstar rats. The results showed a significant decrease in the number of mononuclear cells and blood vessels on the 7th day, the initial period of treatment, and an exacerbated proliferation of fibroblasts in all periods studied. Therefore, it can be concluded that ozone therapy administered with ozonized sunflower oil did not efficiently promote tissue repair of cutaneous burn wounds. Thus, new research becomes important to establish new criteria for the use of ozone as an adjuvant therapy, although some biological properties are described.

Estrogen deficiency influences SEC23A gene expression in the odontogenic region of incisors ­ a murine model study / A deficiência de estrógeno influencia a expressão gênica de SEC23A na região odontogênica de incisivos ­ um estudo em modelo murino

Recent scientific evidence suggests a close relationship between estrogen deficiency and vitamin D- related genes. Estrogen and vitamin D were involved with alterations in odontogenesis and tooth eruption process. Objective: The aim of the present study was to evaluate the influence of estrogen deficiency on the expression of genes related to the activation and degradation of vitamin D in the odontogenic region of incisors in a murine model. Material and Methods: This is an experimental clinical study that used female Wistar Hannover rats. The animals were randomly divided into two groups according to the intervention received: Hypoestrogenism Group ­ animals submitted to estrogen deficiency by ovariectomy surgery and Control Group ­ animals submitted to sham surgery. Surgical intervention was performed in the prepubertal period; the animals were followed throughout the pubertal period. After euthanasia, the hemimandibles were removed to evaluate the mRNA expression of the vitamin D-related genes AMDHD1, CYP24A1, NADSYN1 and SEC23A in the odontogenic region of incisors through real time PCR. Student's t test was used to compare means. Kruskal-Wallis test and Dunn's posttest were also used. The level of significance was 5%. Results: SEC23A was overexpressed in the estrogen deficiency condition in the odontogenic region (p=0.021). Conclusion: Estrogen deficiency may influence the expression of the SEC23A gene involved in the activation and degradation of vitamin D in the odontogenic region of incisors in a murine model(AU)

Evidências científicas recentes sugerem uma estreita relação entre a deficiência de estrógeno e os genes relacionados à vitamina D. O estrógeno e a vitamina D estão envolvidos com alterações na odontogênese e no processo de erupção dentária. Objetivo: O objetivo do presente estudo foi avaliar a influência da deficiência de estrógeno na expressão de genes relacionados à ativação e degradação da vitamina D na região odontogênica de incisivos em modelo murino. Material e Métodos: Trata-se de um estudo clínico experimental que utilizou ratas Wistar Hannover fêmeas. Os animais foram divididos aleatoriamente em dois grupos de acordo com a intervenção recebida: Grupo Hipoestrogenismo ­ animais submetidos à deficiência de estrógeno pela cirurgia de ovariectomia e Grupo Controle ­ animais submetidos à cirurgia simulada. A intervenção cirúrgica foi realizada no período pré-púbere; os animais foram acompanhados durante todo o período puberal. Após a eutanásia, as hemimandíbulas foram removidas para avaliar a expressão de mRNA dos genes AMDHD1, CYP24A1, NADSYN1 e SEC23A, relacionados à vitamina D, na região odontogênica de incisivos por meio de PCR em tempo real. O teste t de Student foi utilizado para comparar as médias. Também foram utilizados o teste de Kruskal-Wallis e o pós-teste de Dunn. O nível de significância foi de 5%. Resultados: SEC23A foi superexpresso na condição de deficiência de estrógeno na região odontogênica (p=0,021). Conclusão: A deficiência de estrógeno pode influenciar a expressão do gene SEC23A envolvido na ativação e degradação da vitamina D na região odontogênica de incisivos em modelo murino (AU)

Effect of ovarian dysfunction induced ovariectomy and Porphyromonas gingivalis induction to risk of metabolic syndrome: in vivo study / Efeito da disfunção ovariana por meio de ovariectomia e indução de Porphyromonas gingivalis no risco de desenvolvimento de síndrome metabólica: estudo in vivo

Doenças periodontais e síndrome metabólica estão relacionadas a condições multifatoriais complicadas. No entanto, a relação ainda não é evidente. A insuficiência de estrogênio pode estar correlacionada a essa condição, possivelmente causada pela remoção dos ovários e infecção por Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis). Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito da disfunção ovariana causada pela ovariectomia e infecção por P. gingivalis no desenvolvimento da síndrome metabólica. Este foi um estudo experimental de laboratório utilizando ratos fêmeas da linhagem Sprague Dawley. Os modelos animais foram divididos em quatro grupos: controle, ovariectomia (OVX), ovariectomia-periodontite (OPG) e periodontite (PG). O objetivo de cada tratamento em cada grupo foi obter disfunção ovariana. O grupo OVX foi submetido à cirurgia de remoção dos ovários; no grupo PG foi realizada a indução de P. gingivalis; e no grupo OPG foi feita uma combinação de ovariectomia e indução de P. gingivalis. O sangue foi coletado e observado nos dias 0, 3, 7, 14, 21 e 28. A amostra de sangue foi examinada para ácido úrico, colesterol, glicose e estrogênio. Os dados coletados foram todos examinados estatisticamente. Todos os grupos de tratamento apresentaram peso corporal e observações bioquímicas sanguíneas significativamente maiores do que o grupo controle, exceto o colesterol total (p<0,05). Além disso, a maioria das variáveis apresentou uma correlação entre os grupos com o peso corporal e indicadores bioquímicos sanguíneos, exceto o nível de ácido úrico no sangue (R>0,5). A síndrome metabólica foi desencadeada pela disfunção ovariana causada pela infecção por P. gingivalis após a ovariectomia. Ambos apresentaram o mesmo risco. Mesmo a indução por P. gingivalis piorou a síndrome metabólica no grupo de modelos animais que foram submetidos à ovariectomia.(AU)

Periodontal diseases and metabolic syndrome are related to complicated multifactorial conditions. However, the relationship is not yet evident. Estrogen insufficiency might correlate to this condition, possibly caused by ovarian removal and Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis) infection. This study aimed to evaluate the effect of ovarian dysfunction caused by ovariectomy and P. gingivalis infection to metabolic syndrome development. This study was an experimental laboratory study using female rats Sprague Dawley Strain. Animal models were divided into four groups: control, ovariectomy (OVX), ovariectomy-periodontitis (OPG), and periodontitis (PG). The purpose of every treatment in each group was to induce ovarian dysfunction. The OVX group was undertaken ovaries removal surgery. PG was performed P. gingivalis induction. Therefore OPG was a combination of ovariectomy and P. gingivalis induction. Blood was drawn and observed on days 0, 3, 7, 14, 21, and 28. The blood sample was examined for uric acid, cholesterol, glucose and estrogen. The collected data were all statistically examined. All treatment groups presented body weight and blood biochemical observation significantly higher than the control group, except total cholesterol (p<0.05). Moreover, most variables presented a correlation between groups to body weight and biochemical blood indicators, except blood uric acid level (R>0.5). The metabolic syndrome was triggered by ovarian dysfunction brought on by P. gingivalis infection after ovariectomy. They both took the same risk. Even P. gingivalis induction made metabolic syndrome in the group of animal models which underwent ovariectomy worse (AU)

Histomorphometric comparison of two different preclinical models to evaluate the bone repair in grafted areas

Aim: This study was performed to compare two different rat defect models (critical calvaria defects versus guided bone regeneration in the mandibular ramus) used to evaluate bone repair in grafted areas. Methods: A total of 12 rats were allocated in two groups according the experimental model used to evaluate the bone repair in grafted areas: a critical sized-calvaria defect of 5 mm filled with bone graft (n=6) and a mandibular ramus filled with the bone graft associated with a Teflon dome-shaped membrane (n=6). Both groups were grafted with deproteinized bovine bone graft. After 60 days, the animals were euthanized and the samples obtained were submitted to histomorphometry analysis to evaluate the relative amount of bone, remaining bone substitute, and soft tissue within the grafted areas. Results: No differences were observed between the preclinical models evaluated in relation to the amount of bone tissue formation (19.93 ± 4.55% in calvaria vs. 21.00 ± 8.20% in mandible). However, there was a smaller amount of soft tissue (43.20 ± 10.97% vs. 57.79 ± 7.61 %; p<0.01) and a greater amount of bone substitute remaining (35.80 ± 5.52% vs. 22.28 ± 4.36 %; p<0.05) in the grafted areas in the mandible compared to calvaria defect. Conclusion: Preclinical models for the analysis of bone repair in grafted areas in the mandible and critical sized-calvaria defects showed different responses in relation to the amount of soft tissue and bone substitute remnants

Avaliação do efeito anti-inflamatório do extrato de Spondias Mombin L. Em um modelo experimental de periodontite / Evaluation of the anti-inflammatory effect of Spondias Mombin L. extract in an experimental model of periodontitis

A doença periodontal (DP) é uma doença crônica de caráter inflamatório multifatorial, que acomete somente os tecidos de proteção (gengivite) ou os tecidos de proteção e sustentação dentárias (periodontite). O extrato hidroetanólico de Spondias mombin L. (EHSM) vem se destacando em função de sua eficácia antimicrobiana frente a patógenos bucais e de suas atividades anti-inflamatória e antioxidante. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito antiinflamatório do EHSM em um modelo experimental de periodontite. Foi realizado um ensaio pré-clínico, controlado e in vivo, utilizando-se 61 ratos wistar machos, distribuídos aleatoriamente nos seguintes grupos: salina (n=7); DP (n=14); DP + SM 50mg/ml (n=12); DP + SM 100mg/kg (n=13) e DP + SM 200mg/kg (n=15). Foi realizada a gavagem diariamente desde o dia da indução da periodontite até o 11º dia experimental (eutanásia). Amostras sanguíneas, gengivais e maxilares foram obtidas e destinadas para as análises bioquímica, quantitativa de citocinas (IL-1ß e IL-6), histológica e microtomográfica computadorizada. Para análise estatística foram utilizados o teste paramétrico ANOVA, seguido pelo teste T de student e o teste não paramétrico de Kruskall-Wallis. A administração do EHSM não causou alterações sistêmicas nos animais, mostrando-se capaz de reduzir a concentração de IL-6, na dose de 50mg/kg (p<0,05), e de IL-1ß, na dose de 100mg/kg (p<0,01), assim como reduziu a reabsorção óssea e aumentou a integridade óssea em animais que receberam o EHSM nas concentrações de 100mg/kg (p<0,05) e 200mg/kg (p<0,001). Ademais, os animais submetidos à gavagem oral com o extrato na concentração de 200mg/kg (p<0,01) apresentou os melhores resultados histológicos, com infiltrado inflamatório escasso, restrito à gengiva marginal, e preservação do ligamento periodontal e do osso alveolar. Como conclusão, os achados deste estudo indicam que o EHSM, nas diferentes concentrações testadas, apresenta efeito anti-inflamatório local em um modelo experimental in vivo de periodontite, sem causar toxicidade sistêmica, apontando assim para o potencial uso do referido extrato no tratamento dessa doença (AU).

Periodontal disease (PD) is a chronic disease with a multifactorial inflammatory nature, which exclusively affects the protective tissues (gingivitis) or the tissues that protect and support the teeth (periodontitis). The hydroethanolic extract of Spondias mombin L. (HESM) has been highlighted due to its antimicrobial action against oral pathogens and its anti-inflammatory and antioxidant activities. The aim of this work was to evaluate the anti-inflammatory effect of HESM in an experimental model of periodontitis. A pre-clinical, controlled and in vivo test was carried out, using 61 male Wistar rats, randomly distributed in the following groups: saline (n=7); PD (n=14); PD + MS 50mg/ml (n=12); PD + MS 100mg/kg (n=13) and PD + MS 200mg/kg (n=15). Gavage was performed daily from the day of periodontitis induction to the 11th experimental day (euthanasia). Blood, gingival and jaw samples were transferred and sent for biochemical, quantitative cytokine (IL-1ß and IL-6), histological and computerized microtomographic analyses. For statistical analysis, the parametric ANOVA test was used, followed by Student's t test and the non-parametric Kruskall-Wallis test. The administration of HESM did not cause systemic diseases in the animals, being able to reduce the concentration of IL-6, at a dose of 50mg/kg (p<0.05), and of IL-1ß, at a dose of 100mg/kg (p<0.01), as well as bone resorption and increased bone integrity in animals that received HESM at concentrations of 100mg/kg (p<0.05) and 200mg/kg (p<0.001). In addition, the animals confirmed by oral gavage with the extract at a concentration of 200mg/kg (p<0.01) showed the best histological results, with limited infiltration, restricted to the marginal gingiva, and preservation of the periodontal ligament and alveolar bone. In conclusion, the findings of this study indicate that HESM, at different concentrations, presents local antiinflammatory activity in an experimental in vivo model of periodontitis, without causing systemic toxicity, thus pointing to the potential use of the aforementioned extract in the treatment of this disease (AU).

Influência da via hippo no reparo da mucosite oral quimicamente induzida em modelo murino submetida a tratamento com laser, geleia real ou própolis / Influence of the hippo pathway on the repair of chemically induced oral mucositis in a murine model subjected to treatment with laser, royal jelly or propolis

A via hippo é uma via de transdução de sinal altamente conservada que está implicada no desenvolvimento, homeostase e regeneração celular/tecidual. A YAP tem papel fundamental na via hippo uma vez que junto com a TAZ ativam fatores de transcrição que levam ao crescimento, diferenciação e migração celular. O mecanismo de fosforilação da YAP/TAZ pela LATS1/LATS2 cria um sítio de ligação para manter a YAP no citoplasma (fosforilada) impedindo suas funções a nível nuclear. Diante das importantes funções desta via no reparo e crescimento tecidual, esta pesquisa avaliou se a via hippo exerceu influência na resposta ao tratamento da MO através da expressão das proteínas YAP e LATS2 em mucosite oral (MO) quimicamente induzida pelo 5- fluoracil (5-FU), em modelo murino, tratada com própolis (P), geleia real (GR) ou laser (L) comparadas ao grupo controle (C), sem tratamento. Foram utilizadas amostras de ratos machos wistar divididos nos seguintes grupos: C, P, GR e L (intraoral 6 J/cm2 ) separados em três tempos experimentais: dias 08, 10 e 14. O perfil de imunomarcação foi feito por escores padronizados entre 0 a 3 levando em consideração a marcação nuclear e/ou citoplasmática. Na análise de imunomarcação da YAP, no dia 08, o grupo controle obteve os escore 0 e 1 na maioria das amostras, já nos dias 10 e 14 a maior parte das amostras obteve os escore 2 e 3. Nos grupos experimentais (L, GR e P), o escore 2 prevaleceu em todos os tempos experimentais. Para LATS2 houve prevalência do escore 2 tanto no grupo controle quanto nos grupos teste em todos os tempos experimentais. Em relação a análise estatística da imunoexpressão da proteína YAP, verificou-se diferença estatítica significativa (p= 0,020), apenas no dia 08 entre o grupo controle comparado aos grupos experimentais (L, GR e P). Já para LATS2 nenhuma diferença estatística foi encontrada. Na avaliação estatística dos diferentes tempos experimentais dentro um mesmo grupo, só foi encontrada diferença estatística significativa no grupo laser e apenas para LATS2 (p=0,025). Adicionalmente foi realizada a correlação de spearman, entre YAP e LATS2 para todos os grupos, porém não houve associação estatística significativa. A maior imunoexpressão de YAP e LATS2 (escores 2 e 3) observada nos grupos experimentais, indica que a via hippo é ativada e parece influenciar o processo de reparo nas mucosites orais quimioinduzidas e tratadas pelos diferentes métodos (AU).

The hippo pathway is a highly conserved signal transduction pathway that is implicated in cell/tissue development, homeostasis and regeneration. YAP plays a key role in the hippo pathway since, together with TAZ, they activate transcription factors that lead to cell growth, differentiation and migration. The YAP/TAZ phosphorylation mechanism by LATS1/LATS2 creates a binding site to keep YAP in the cytoplasm (phosphorylated) preventing its functions at the nuclear level. Given the important functions of this pathway in tissue repair and growth, this research evaluated whether the hippo pathway exerted influence on the response to OM treatment through the expression of YAP and LATS2 proteins in oral mucositis (OM) chemically induced by 5-fluororacil (5- FU), in a murine model, treated with propolis (P), royal jelly (GR) or laser (L) compared to the control group (C), without treatment. Samples of male Wistar rats divided into the following groups were used: C, P, GR and L (intraoral 6 J/cm2) separated into three experimental times: days 08, 10 and 14. The immunostaining profile was performed by standardized scores between 0 to 3 taking into account nuclear and/or cytoplasmic labeling. In the YAP immunostaining analysis, on day 08, the control group obtained scores 0 and 1 in most samples, while on days 10 and 14 most samples obtained scores 2 and 3. In the experimental groups (L, GR and P), score 2 prevailed at all experimental times. For LATS2 there was a prevalence of score 2 both in the control group and in the test groups at all experimental times, showing a very heterogeneous expression. Regarding the statistical analysis of YAP protein immunoexpression, there was a statistically significant difference (p= 0.020), only on day 08 between the control group compared to the experimental groups (L, GR and P). As for LATS2, no statistical difference was found. In the statistical evaluation of the different experimental times within the same group, a statistically significant difference was only found in the laser group and only for LATS2 (p=0.025). Additionally, the Spearman correlation was performed between YAP and LATS2 for all groups, but there was no statistically significant association. The greater immunoexpression of YAP and LATS2 (scores 2 and 3) observed in the experimental groups indicates that the hippo pathway is activated and seems to influence the repair process in chemoinduced oral mucositis treated by different methods (AU).

Avaliação do comportamento das fibras colágenas periodontais durante a progressão da periodontite experimental em ratos / Evaluation of the behaviour of periodontal collagen fibers during the progression of experimental periodontitis in rats

Introdução: A periodontite é uma doença infecto-inflamatória, resultante da disbiose microbiana e da resposta do hospedeiro, que leva à destruição dos tecidos de suporte dentário, inclusive das fibras colágenas periodontais, podendo culminar na perda do elemento dental. Objetivo: Avaliar o comportamento das fibras colágenas periodontais durante a progressão da periodontite experimental induzida em ratos. Material e método: Doze ratos Wistar foram distribuídos nos grupos: Controle (C), Periodontite Experimental 14-dias (PE-14d), Periodontite Experimental 21-dias (PE-21d) e Periodontite Experimental 42-dias (PE-42d). No dia 0, os animais do grupo C foram eutanasiados. Neste mesmo dia, os animais remanescentes foram submetidos à instalação de uma ligadura de algodão ao redor do primeiro molar inferior esquerdo para indução da periodontite experimental. Tais animais foram eutanasiados aos 14 (PE-14d), 21 (PE-21d) e 42 (PE-42d) dias após a instalação da ligadura. Executou-se o processamento histológico das hemimandíbulas e as secções foram submetidas à reação histoquímica pelo vermelho picro-sirius. A análise qualitativa descritiva foi realizada sob microscopia de luz polarizada, na região de furca dental, evidenciando as fibras do ligamento periodontal. Resultado: O grupo C exibiu feixes espessos e orientados de fibras colágenas maduras, condizentes com aspecto de normalidade. Os grupos com periodontite experimental exibiram desestruturação tecidual severa, com fibras colágenas imaturas e de menor espessura, sendo tais condições mais exacerbadas nos grupos PE-14d e PE-21d. Conclusão: As fases iniciais da periodontite apresentam caráter agudo e, portanto, resultam na rápida destruição dos tecidos periodontais de suporte, prejudicando potencialmente a fibrilogênese e a reestruturação do colágeno no ligamento periodontal.

Introduction: Periodontitis is an infectious-inflammatory disease resulting from microbial dysbiosis and host response that leads to the destruction of tooth support tissues, including periodontal collagen fibers, which may culminate in tooth loss. Objective: To evaluate the behavior of periodontal collagen fibers during the progression of induced experimental periodontitis in rats. Material and method: Twelve Wistar rats were distributed into groups: Control (C), 14-days Experimental Periodontitis (PE-14d), 21-days Experimental Periodontitis (PE-21d) and 42-days Experimental Periodontitis (PE-42d). At day 0, the animals of group C were euthanized. At the same day, the remaining animals were submitted to the installation of a cotton ligature around the lower left first molar for the induction of experimental periodontitis. The animals were euthanized at 14 (PE-14d), 21 (PE-21d) and 42 (PE-42d) days after the installation of ligature. Histological processing of the hemi-mandibles was performed and the sections underwent histochemical reaction using picro-sirius red. The descriptive qualitative analysis was performed under polarized light microscopy, in the dental furcation region, evidencing the fibers of the periodontal ligament. Result: Group C exhibited thick and oriented bundles of mature collagen fibers, consistent with a normal appearance. The groups with experimental periodontitis exhibited severe tissue disruption, with immature and thinner collagen fibers, with such conditions being more exacerbated in the PE-14d and PE-21d groups. Conclusion: The early stages of periodontitis present acute response, and therefore result in rapid destruction of periodontal support tissues and potentially impair fibrillogenesis and collagen restructuring in the periodontal ligament.

Argon plasma application on the surface of titanium implants: osseointegration study / Aplicação de plasma de argônio na superfície de implantes de titânio: estudo de osseointegração

Introduction: The development of new biomaterials with improved properties is a trend in regenerative medicine. The successful healing of implants is related to their osseointegration and the topographic geometry of their surface. Treatment with argon plasma acts on the surface of the implants, bringing several benefits to their osseointegration in the body. Material and Methods: Previously the in vivo study, the topography implants were observed by scanning electron microscopy (SEM). Following the implants were inserted in 14 male rats, and one perforation was made in the right and left tibias for implant placement without the surface treatment (control group), and with the argon plasma surface treatment (experimental group), respectively. The rats were euthanized at 4 weeks, a time in which tibia fragments were submitted for histological and histomorphometric examination, and torque removal test for comparison and analysis of osseointegration. Results: The SEM images showed the argon plasma surface treatment altered the topography. At the end of the study, both greater bone formation and better osseointegration were verified in the experimental group, and a statistically significant difference between the groups was observed. Conclusion: It was concluded that implants with this surface treatment can bring more practicality in the rehabilitation treatment, and more comfort in the patients' postoperative time (AU)

Introdução: O desenvolvimento de novos biomateriais com propriedades aprimoradas é uma tendência na medicina regenerativa. A cicatrização bem-sucedida dos implantes está relacionada à sua osseointegração e à geometria topográfica de sua superfície. O tratamento com plasma de argônio atua na superfície dos implantes, trazendo diversos benefícios para sua osseointegração no corpo. Materiais e Métodos: Antes do estudo in vivo, a topografia dos implantes foi observada por microscopia eletrônica de varredura (MEV). Em seguida, os implantes foram inseridos em 14 ratos machos, e uma perfuração foi feita nas tíbias direita e esquerda para a colocação do implante sem o tratamento de superfície (grupo controle) e com o tratamento de superfície de plasma de argônio (grupo experimental), respectivamente. Os ratos foram sacrificados após 4 semanas, momento em que fragmentos das tíbias foram submetidos a exame histológico e histomorfométrico, além do teste de remoção de torque para comparação e análise da osseointegração. Resultados: As imagens de MEV mostraram que o tratamento de superfície com plasma de argônio alterou a topografia. Ao final do estudo, foi verificada maior formação óssea e melhor osseointegração no grupo experimental, e foi observada diferença estatisticamente significativa entre os grupos. Conclusão: Concluiu-se que os implantes com esse tratamento de superfície podem trazer mais praticidade no tratamento de reabilitação e maior conforto no pós-operatório dos pacientes (AU)

Efeitos de Bifidobacterium animalis subsp. Lactis HN019 vivo e inativado na periodontite experimental em ratos / Effects of Bifidobacterium animalis subsp. Lactis HN019 live and inactivated in experimental periodontitis in rats

A periodontite é uma doença crônica e complexa, abrangendo mais de uma forma de tratamento combinados. Os probióticos têm ganhado espaço em casos de terapias adjuvantes e mostrado resultados promissores quando utilizados em casos de periodontite. O objetivo do estudo foi avaliar a ação do probiótico Bifidobacterium lactis vivo e inativado na periodontite induzida por ligadura em ratos. Foram utilizados 32 ratos machos, nos seguintes grupos: GC/controle animais sem periodontite que receberam apenas caldo Man Rogosa-Sharpe (MRS); GP/periodontite experimental e caldo MRS; GP/PROB periodontite experimental + probiótico vivo e o grupo GP/POSB periodontite experimental + posbiótico. Após 45 dias, os animais foram eutanasiados. As hemimandíbulas foram analisadas por microtomografia computadorizada e histomorfometria de perda óssea alveolar. O intestino delgado foi analisado por histomorfometria de altura de vilos e profundidade de criptas intestinais. Os dados foram submetidos à análise estatística apropriada, ao nível de 5%. Os parâmetros de volume ósseo (BV/TV), número de trabéculas (Tb.N), separação das trabéculas (Tb.Sp) e porosidade total (PO total) foram diferentes entre o GC e os demais grupos, GP, GP/POSB e GP/PROB. O GC apresentou maiores valores para BV/TV. Para PO total e Tb.Sp o GC apresentou menores valores. No parâmetro de Tb.n o GP.PROB apresentou maiores valores. Para espessura trabecular (Tb.Th) houve diferença estatística entre o GC e GP e entre GC e GP/PROB, sendo que GC apresentou valores maiores em ambos os casos. Para a perda óssea da furca houve diferença estatística entre o GC e os demais grupos, sendo que GC apresentou menores valores de perda óssea. Em relação ao intestino delgado, não houve diferença estatística entre os grupos. Concluímos que tanto o probiótico vivo como o inativado não foram capazes de atuar na inibição da perda óssea na área de furca bem como não foram capazes de agir como modulador da resposta inflamatória no intestino (AU)

Periodontitis is a chronic and complex disease, encompassing more than one form of combined treatment. Probiotics have gained space in cases of adjuvant therapies and have shown promising results when used in cases of periodontitis. The aim of the study was to evaluate the action of the live and inactivated probiotic Bifidobacterium lactis on ligature-induced periodontitis in rats. 32 male rats were used in the following groups: CG/control animals without periodontitis that received only Man Rogosa-Sharpe broth (MRS); GP/experimental periodontitis and MRS broth; GP/PROB experimental periodontitis + live probiotic and GP/POSB experimental periodontitis + postbiotic group. After 45 days, the animals were euthanized. The hemimandibles were analyzed by computed microtomography and histomorphometry of alveolar bone loss. The small intestine was analyzed by histomorphometry of villus height and intestinal crypt depth. Data were subjected to appropriate statistical analysis at the 5% level. The parameters of bone volume (BV/TV), number of trabeculae (Tb.N), trabeculae separation (Tb.Sp) and total porosity (total PO) were different between the CG and the other groups, GP, GP/POSB and GP/PROB. The CG showed higher values for BV/TV. For total PO and Tb.Sp, the CG showed lower values. In the Tb.n parameter, GP.PROB presented higher values. For trabecular thickness (Tb.Th) there was a statistical difference between GC and GP and between GC and GP/PROB, with GC showing higher values in both cases. For bone loss in the furcation, there was a statistical difference between the CG and the other groups, with the CG having lower values of bone loss. Regarding the small intestine, there was no statistical difference between the groups. We conclude that both the live and inactivated probiotics were not able to inhibit bone loss in the furcation area, nor were they able to act as a modulator of the inflammatory response in the intestine (AU).

Perfil microbiano intracanal e processo inflamatório periapical de ratos submetidos à radioterapia de cabeça e pescoço / Intracanal microbial profile and periapical inflammatory process in rats manifested by head and neck radiotherapy

Pacientes que passam pela radioterapia (RT) no tratamento de tumores malignos de cabeça e pescoço podem ter efeitos adversos na cavidade bucal, especialmente nos dentes levando à instalação de cárie que pode atingir a cavidade pulpar evoluindo para necrose e desenvolvimentoda periodontite apical (PA). Até o presente momento não se conhece a evolução da PA, bem como a microbiota endodôntica intracanal após procedimentos de RT. Assim, este estudo propôs avaliar a PA induzida em ratos submetidos à RT analisando o volume e área da PA e o processo inflamatório periapical (parte1) e monitorando o perfil microbiano intracanal (parte 2). Parte 1: foram utilizados 40 ratos machos Wistar distribuídos em 4 grupos (n=10): PA: com indução da PA; RTPA: aplicação da RT e indução da PA; RT: aplicação da RT; Controle: sem qualquer intervenção. Parte 2: foram utilizados 20 ratos machos Wistar distribuídos em 2 grupos(n=10): PA-TE: indução da PA e tratamento endodôntico (TE); RT-PA-TE: aplicação da RT, indução da PA e TE. Nos grupos RT, os animais foram submetidos a RT no dia 1 do experimento, com a dosagem de 15 Gy localizada no lado direito da face. A PA foi induzida no dia 7 através da exposição das cavidades pulpares dos primeiros molares ao meio oral por um período de 21 dias. Após 21 dias da indução da PA nos grupos de TE os canais foram preparados até a lima K# 30 associada à solução de hipoclorito de sódio 1%. Foram feitas coletas do canal radicular após abertura coronária (S1) e após preparo dos canais (S2), para avaliar o perfil microbiano intracanal. Os animais foram eutanasiados no dia 28 do experimento. Nos animais da Parte 1: foram realizadas análises comportamentais no início do experimento e no dia da eutanásia. Amostras foram submetidas às análises: radiográfica, microtomográfica e histológica e da expresão gência de mediadores ósseos RANKL, OPG, TRAP. Parte 2: o conteúdo coletado dos canais foi avaliado por cultura (UFC/mL) utilizando meios seletivos para microorganismos anaeróbios facultativos e/ou aeróbios; anaeróbios; leveduras; espécies de enterococos; streptococos; Enterobactérias e estafilococos. Os resultados mostraram que o ganho de peso foi significante menor nos animais submetidos a RT sendo o grupo PA-RT com menor ganho de peso. Verificou-se diminuição na movimentação média dos animais nos grupos com RT. No grupo RTPA: A área e o volume da lesão periapical foi significantemente maior nas análises microtomográficas e radiográficas; Houve maior intensidade de extensão e intensidadedo infiltrado inflamatório. A expressão gênica de de OPG e TRAP foi alterada, influenciando no desenvolvimento da PA. A carga bacteriana foi principalmente composta por microrganismos anaeróbios facultativos, aeróbios, estreptococos e anaeróbios. O preparo biomecânico foi eficienciente na redução do número de espécies bacterianas (AU).

Patients who undergo radiotherapy (RT) in the treatment of malignant head and neck tumors may have adverse effects on the oral cavity, especially on the teeth, leading to the installation of caries that can reach the pulp cavity, progressing to necrosis and development of apical periodontitis (AP). Until the present moment, the evolution of AP is not known, as well as the intracanal endodontic microbiota after RT procedures. Thus, this study proposed to evaluate the BP induced in rats submittedto RT by analyzing the volume and area of the PA and the periapical inflammatory process (part 1) and monitoring the intracanal microbial profile (part 2). Part 1: 40 male Wistar rats were used, divided into 4 groups (n=10): PA: with PA induction; RT- PA: RT application and BP induction; RT: RT application; Control: without any intervention. Part 2: 20 male Wistar rats distributed in 2 groups (n=10) were used: PA-TE: PA induction and endodontic treatment (ET); RT-PA-TE: application of RT, induction of PA and TE. In the RT groups, the animals were submitted to RT on day1 of the experiment, with the 15 Gy dose located on the right side of the face. PA wasinduced on day 7 by exposingthe pulp cavities of the first molars to the oral medium for a period of 21 days. After 21days of BP induction in the TE groups, the canals were prepared with a K# 30 file associated with a 1% sodium hypochlorite solution. Root canal samples were taken after coronal opening (S1) and after root canal preparation (S2), to evaluate the intracanal microbial profile. The animals were euthanized on day 28 of the experiment.In animals from Part 1: behavioral analyzes were performed at the beginning of the experiment and on the day of euthanasia. Samples were submitted to radiographic, microtomographic and histological analyses, and the expression of bone mediators RANKL, OPG, TRAP. Part 2: the content collected from the canals was evaluated by culture (CFU/mL) using selective media for facultative anaerobic and/or aerobic microorganisms; anaerobes; yeasts; species of enterococci; streptococci; Enterobacteriaceae and staphylococci. The results showed that the weight gain was significantly lower in the animals submittedto RT, with the PA-RT group having the lowest weight gain. There was a decrease in the average movement of the animals in the groups with RT. In the RT-PA group:The area and volume of the periapical lesion was significantly greater in the microtomographic and radiographic analyses; There was a greater intensity of extension and intensity of the inflammatory infiltrate. The geneexpression of OPG and TRAP was altered, influencing the development of AP. The bacterial load was mainly composed of facultative anaerobic, aerobic, streptococcal and anaerobic microorganisms. The biomechanical preparation was efficient in reducing the numberof bacterial species (AU)

Avaliação do potencial de regeneração óssea guiada e biocompatibilidade de membrana polimétrica nano estruturada à base de quitosana / Evaluation of guided bone regeneration potential and biocompatibility of nano-structured polymeric membrane based on chitosan

A regeneração óssea guiada (ROG) é uma técnica muito utilizada na odontologia para reconstrução de defeitos alveolares para posterior instalação de implantes dentários. Para que a técnica seja efetiva, uma membrana que permita o isolamento de diferentes tipos teciduais é necessária. A quitosana nanoestruturada modificada por hidróxidos duplos lamelares (HDL) é um biopolímero sintético que busca unir as características promissoras da quitosana como material bioadesivo e com propriedades antimicrobianas com a hidrocalcita buscando aprimorar suas características estruturais. O objetivo deste estudo in vivo foi avaliar a biocompatibilidade e o potencial de regeneração óssea guiada de uma nova membrana produzida à base de quitosana nanoestrutada modificada por HDL. Ratos Wistar machos adultos (n=64) foram divididos randomicamente em 2 grupos de acordo com o tratamento: Colágeno (COL) e Quitosana (QTS). Os animais foram submetidos à cirurgia para instalação de uma membrana no subcutâneo da região dorsal e à realização de 2 defeitos críticos na calota craniana, respeitando cada lado do animal. O defeito do lado direito foi coberto por uma das membranas testadas (COL ou QTS) enquanto o outro permanecia descoberto (Controle). Oito animais de cada grupo foram sacrificados em 4 tempos de acompanhamento: 3, 7, 14 e 30 dias. Amostras de calota e subcutâneo foram coletadas e preservadas em paraformaldeído 4%. As amostras de calota foram escaneadas em viii microtomógrafico para análise da quantidade de osso neoformado. Em seguida, os espécimes de calota e subcutâneo foram processados laboratorialmente para exames histológicos em parafina: para avaliação histomorfológica das características do processo cicatricial e de degradação das membranas e histomorfométrica para quantificação do processo inflamatório e do nível de reação tecidual por meio do escore global de reação tecidual (EGRT). Análises descritivas e inferenciais foram realizadas para comparação entre os grupos com nível de significância de 5%. Os resultados não demonstraram diferenças entre os grupos COL e QTS quanto à intensidade do processo inflamatório e EGRT. Já em relação aos defeitos na calota, o grupo QTS apresentou maior neoformação óssea em relação ao grupo controle aos 30 dias (p=0,04). Com base nos resultados conclui-se que as membranas de quitosana nano particuladas modificadas por HDL apresentaram biocompatibilidade compatível com a membrana de colágeno e efetividade para uso como barreira em ROG. (AU)

Guided bone regeneration (GBR) is a technique widely used in dentistry to reconstruct alveolar defects for subsequent installation of dental implants. For the technique to be effective, a membrane that allows the isolation of different tissue types is necessary. Nanostructured chitosan modified by lamellar double hydroxides (HDL) is a synthetic biopolymer that seeks to combine the promising characteristics of chitosan as a bioadhesive material with antimicrobial properties with hydrocalcite seeking to improve its structural characteristics. The objective of this in vivo study was to evaluate the biocompatibility and guided bone regeneration potential of a new membrane produced based on nanostructured chitosan modified by HDL. Adult male Wistar rats (n=64) were randomly divided into 2 groups according to treatment: Collagen (COL) and Chitosan (QTS). The animals underwent surgery to install a membrane in the subcutaneous tissue of the dorsal region and to perform 2 critical defects in the cranial vault, respecting each side of the animal. The defect on the right side was covered by one of the tested membranes (COL or QTS) while the other remained uncovered (Control). Eight animals from each group were sacrificed at 4 follow-up times: 3, 7, 14 and 30 days. Calvary and subcutaneous samples were collected and preserved in 4% paraformaldehyde. The cap samples were scanned in a microtomograph to analyze the amount of newly formed bone. Then, the cap and subcutaneous specimens were processed in the laboratory for histological examinations in paraffin: for histomorphological evaluation of the characteristics of the scarring process and membrane degradation and histomorphometric for quantification of the inflammatory process and the level of tissue reaction through the global score of tissue reaction (EGRT). Descriptive and inferential analyzes were performed for comparison between groups with a significance level of 5%. The results showed no differences between the COL and QTS groups regarding the intensity of the inflammatory process and EGRT. In relation to the defects in the calvaria, x the QTS group presented greater new bone formation in relation to the control group at 30 days (p=0.04). Based on the results, it is concluded that the nanoparticulate chitosan membranes modified by HDL showed biocompatibility compatible with the collagen membrane and effectiveness for use as a barrier in GBR. (AU)

Suckermouth catfish bone extract as bone graft raw material for bone-healing promotes bone growth in bone loss / Extrato de osso de bagre como material de reparo promove o crescimento ósseo em perda óssea

Objective: This study aimed to evaluate the properties of suckermouth catfish bone extract, which allows it to be adopted as a raw material for bone graft following its graft in an artificial defect of a rat model. Material and Methods: Hydroxyapatite (HA) from suckermouth catfish bone extract was characterized using Fourier-transform infrared spectroscopy (FTIR), and its toxicity was evaluated by Brine Shrimp Lethality Test (BSLT). This material was grafted on artificial defects in rats' femoral bones, which were observed immunologically by Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) after one week and four weeks, and radiographically in the second week, and histologically in the second and fourth weeks. Results: FTIR shows that this material consists of phosphate, hydroxyl, and carbonate groups, while the BSLT results show that this material is not toxic. Observations by ELISA showed an increase in the expression of Tumor necrosis factor alpha (TNF-α) in defects with HA in the fourth week. Radiographically the defect did not show closure in the second week. In contrast, histological analysis showed a better bone healing process in the defect, which was applied with the HA of the suckermouth catfish bone. Conclusion: The HA extracted from the suckermouth catfish bone has beneficial properties as an alternative to bone graft raw material and, more investigated needed to support this biomaterial to be used in the treatment of bone loss (AU)

Objetivo: Avaliar as propriedades do extrato de osso de bagre, que permitem sua adoção como material bruto para enxerto ósseo, em um defeito ósseo artificial em ratos. Material e Métodos: A hidroxiapatita (HA) do extrato de osso de bagre foi caracterizada usando espectroscopia infravermelha por transformada de Fourier (FTIR), e sua toxicidade foi avaliada pelo Teste de Letalidade do Camarão de Sal (BSLT). Esse material foi enxertado em defeitos artificiais nos ossos femorais de ratos. Análise imunológica por meio do ensaio imunoenzimático (ELISA) foi realizada uma e quatro semanas após a colocação dos enxertos. Análises radiográficas foram feitas na segunda semana e histológica na segunda e quarta semanas. Resultados: A FTIR mostrou que esse material é composto por grupos de fosfato, hidroxila e carbonato, enquanto os resultados do BSLT mostraram que esse material não é tóxico. As observações pelo ELISA mostraram um aumento na expressão do fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) nos defeitos com HA na quarta semana. Radiograficamente, o defeito não apresentou fechamento na segunda semana. Em contraste, a análise histológica mostrou um melhor processo de cicatrização óssea no defeito que foi aplicado com a HA do osso de bagre. Conclusão: A HA extraída do osso de bagre possui propriedades benéficas como alternativa ao material bruto para enxerto ósseo, sendo necessárias mais investigações para apoiar esse biomaterial a ser usado no tratamento da perda óssea.(AU)

Accelerating Wound Healing of Traumatic Ulcer with Topical Application of Dental Pulp Mesenchymal Stem Cell Secretome and Robusta Green Coffee Bean Extract Combination in vivo

ABSTRACT Objective: To investigate the ability of a combination dental pulp mesenchymal stem cell secretome (DPMSCS), robusta green coffee bean extract (RGCBE), and Carboxymethylcellulose-Natrium (CMC-Na) in a Wistar rats model of traumatic ulcers. Material and Methods: Twenty-eight young, male, healthy Wistar rats (Rattus norvegicus) were divided into seven groups randomly: Group K0, group K1-3 (traumatic ulcer rats that received CMC-Na gel for three days), group K1-7 (traumatic ulcer rats that received CMC-Na gel for seven days), group K2-3 (traumatic ulcer rats that received RGCBE for three days), group K2-7 (traumatic ulcer rats that received RGCBE for seven days), group K3-3 (traumatic ulcer rats that received DPMSCS for three days), and group K3-7 (traumatic ulcer rats that received DPMSCS for seven days). An ulcer was made with an amalgam stopper on the right buccal mucosa of the rats. DPMSCS 50% gel was applied to the ulcer on the left buccal mucosa. The ulcer diameter was measured on day 3 and day 7. Results: There was a significant difference in the diameter of the ulcer, the number of neutrophils, and fibroblasts in the treatment group compared to the control group on day 7. Conclusion: A combination of DPMSCS and RGCBE 50% accelerates traumatic ulcer wound healing by lowering ulcer diameter, decreasing neutrophil counts, and increasing fibroblast proliferation in vivo.

Avaliação da influência do tabagismo no desenvolvimento da periodontite apical em ratos wistar / Evaluation of smoking influence on the development of apical periodontitis in wistar rats

A infecção endodôntica ocorre a após contaminação do tecido pulpar levando à uma colonização bacteriana dos canais radiculares resultando em uma resposta inflamatória dos tecidos periapicais e formação de uma lesão periapical, a periodontite apical (PA). O tabagismo, por sua vez, tem impactos prejudiciais à saúde oral e sistêmica sendo considerado um importante fator de risco para as doenças periodontais. Este trabalho tem por finalidade investigar a influência do tabagismo no desenvolvimento da periodontite apical em ratos. Trinta e dois ratos machos Wistar foram divididos em 4 grupos experimentais (n=8): Controle (sem periodontite apical induzida e sem inalação da fumaça do cigarro); FU (com inalação a fumaça do cigarro); PA (com periodontite apical induzida); FU+PA (com inalação a fumaça do cigarro e periodontite apical induzida). Para a inalar a fumaça do cigarro, grupo de cinco animais permaneceram em uma câmara de tabagismo inalando a fumaça de 10 cigarros por 8 minutos, três vezes ao dia, durante 50 dias. Decorridos 20 dias de inalação de fumaça do cigarro, foi realizada a cirurgia para indução da periodontite apical nos animais do grupo PA e FU+PA, no primeiro molar inferior direto, o qual permaneceu aberto na cavidade bucal por 30 dias. Nesses 30 dias subsequentes da indução da PA, os animais do grupo FU+PA e FU continuaram com a inalação a fumaça do cigarro. No 50º dia, os animais foram eutanasiados e coletados amostras de tecido hematológico para avalição dos níveis séricos de nicotina, cotinina, fosfatase alcalina, cálcio, fósforo, série vermelha e série branca. As hemimandibula removidas foram escaneadas em microtomógrafo para avaliar o volume da destruição óssea e processadas histologicamente para avaliação do perfil inflamatório e expressão das citocinas IL-6, IL-1ß, TNF-α e dos marcadores do metabolismo ósseo RANKL e OPG. Os dados foram tabulados e aplicados os testes estatísticos de Mann-Whitney para os dados não paramétricos e teste t para os dados paramétricos, a um nível de significância de P< 0.05. Com relação a análise histológica o grupo FU+PA apresentou infiltrado inflamatório mais intenso em relação aos demais grupos (P< 0,05). As citocinas pró-inflamatórias IL-6, IL-1ß, TNF-α apresentaram alto padrão de imunomarcação para o grupo FU+PA (P< 0,05). A análise histométrica mostrou maior área de reabsorção óssea no grupo FU+PA, assim como na análise microtomográfica (P< 0,05). As citocinas RANKL esteve mais expressa no grupo FU+PA (P< 0,05) e OPG teve maior expressão no grupo PA (P< 0,05). Na análise hematológica houve um aumento na concentração de hemácias, hemoglobina e leucócitos para o FU+PA (P< 0,05). Os níveis séricos de cálcio foram menores no FU+PA (P> 0,05), a fosfatase alcalina e o cálcio se manteve constante em todos os grupos experimentais (P> 0,05). A concentração sérica de nicotina e cotinina no grupo FU e FU+PA foram compatíveis com fumante humano(AU)

Endodontic infection occurs mainly after pulp tissue contamination by a carious process, leading to bacterial colonization of root canal system and inflammatory response of periapical tissues, followed by formation of apical periodontitis (AP). It is widely known that smoking has harmful impacts on oral and systemic health and is considered a risk factor for periodontal diseases. The objective of this research was to investigate the influence of smoking on the development of AP in rats. Thirty-two male Wistar rats were divided into 4 experimental groups (n = 8): C - Control (no induced AP and no cigarette smoke inhalation); CSI (cigarette smoke inhalation); AP (induced apical periodontitis); CSI + AP (cigarette smoke inhalation and induced apical periodontitis). To inhale cigarette smoke, group with five animals remained in a smoking chamber inhaling smoke from 10 cigarettes for 8 minutes, three times daily, for 50 days. After 20 days of cigarette smoke inhalation, pulp chamber access was performed to induce apical periodontitis in the first mandibular right molar, which remained with pulp chamber exposed to oral cavity for 30 days in animals in the AP and CSI + AP group. During these 30 days after the AP induction, animals in the CSI + AP and CSI group continued to inhale cigarette smoke. On the 50th day, animals were euthanized and blood sample collected to assess serum levels of nicotine, cotinine, alkaline phosphatase, calcium, phosphorus, red series and white series. The hemimandibles were removed and scanned in microtomograph to assess bone volume and histologically processed to assess inflammatory profile and expression of cytokines IL-6, IL-1ß, TNF-α and bone metabolism markers RANKL and OPG. Data were tabulated and statistically analyzed using Mann-Whitney tests for nonparametric data and analysis of variation test for parametric data, with a significance level of P< 0.05. Regarding histological analysis, CSI+AP group showed more intense inflammatory infiltrate compared to other groups (P < 0.05). Histometric analysis showed a larger area of bone resorption in the CSI + AP group, also observed in the microtomographic analysis (P< 0.05). Group CSI+AP had elevated pro-inflammatory cytokines IL-6, IL-1ß, TNF-α expression (P< 0.05). The RANKL cytokines were also more expressed in the CSI+AP group (P< 0.05), while OPG was more expressed in the AP group (P< 0.05). The hematological analysis revealed an increase in the concentration of red blood cells, hemoglobin, and leukocytes for CSI+AP (P< 0.05). Serum calcium levels were lower in CSI+AP (P> 0.05), and alkaline phosphatase and calcium remained constant in all experimental groups (P> 0.05). The serum concentrations of nicotine and cotinine in the CSI and CSI+AP group were compatible with human smokers(AU)

Avaliação da resposta óssea de uma superfície de implante revestida com odanacatib em ratas ovariectomizadas: estudo experimental in vivo / Evaluation of the bone response of an odanacatib coated implant surface in ovariectomized rats: in vivo experimental study

Atualmente novos princípios ativos de função reabsortiva têm ganhado campo de estudo para avaliar seus mecanismos e comportamento biológico. Com isso, um novo antirreabsortivo, inibidor da catepsina K tem apresentado efeito positivo na osseointegração. Este estudo tem como objetivo avaliar a resposta óssea da superfície de implantes revestida por duplo ataque ácido e Odanacatib (MK-0822) em ratas ovariectomizadas. Neste estudo foram utilizadas ratas (Albinus, Wistar) ovariectomizadas ou sham (placebo). Cinquenta e dois (52) tiveram as superfícies revestidas por duplo ataque ácido e MK-0822 a 0,06 mg/ml através do método biomimético, e 48 implantes foram instalados em tíbias de ratas ovariectomizadas ou sham. Microscopia eletrônica de varredura (MEV) e energia dispersiva de raios-x (EDS) foram realizadas em 4 implantes após tratamento de superfície, para análise da topografia e composição química, além da realização da análise do ângulo de contato em 16 discos de titânio comercialmente puro tratados com as mesmas superfícies. Aos 15 e 40 dias após instalação de implantes (n=6), foi realizada microtomografia computadorizada. Dados quantitativos foram avaliados adotando-se o nível de significância p< 0,05. Além dos resultados topográficos favoráveis para os grupos tratados com MK-0822, os resultados microtomográficos apresentaram diferença estatisticamente significante entre os grupos SHAM e OVX na maioria dos parâmetros (p< 0,05). Ainda assim, os grupos tratados com MK-0822 apresentaram resultado semelhante ou maior, porém sem diferença estatística, em relação ao grupo controle em todos os parâmetros (TV, BV, BV ̸TV, Tb.Sp e Tb.N)(AU)

Currently new active principles of resorptive function have gained field of study to evaluate their mechanisms and biological behavior. Thereby a new anti-absorbent, cathepsin K inhibitor has had a positive effect on osseointegration. This study aims to evaluate the bone response of the surface of implants coated by double acid-etched and Odanacatib (MK-0822) in ovariectomized rats. In this study, either ovariectomized rats (Albinus, Wistar) or sham (placebo) have been used. Fifty-two (52) implants had the surfaces coated with double acid-etched and MK-0822 at 0,06 mg/ml by the biomimetic method and 48 implants were installed on sham or ovariectomized rat tibias. Scanning electron microscopy (SEM) and X-ray dispersive energy (EDS) were performed in 4 implants after surface treatment for analysis of topography and chemical composition, in addition to performing contact angle analysis on 16 commercially pure titanium discs treated with the same surfaces. At 15 and 40 days after implant installation, microcomputer tomography was performed. Quantitative data was evaluated by adopting the significance level of p< 0.05. Besides the favorable topographic results to MK-0822 coated implants group, the microtomographic results presents statistically significant differences between the SHAM and OVX groups at most of the parameters (p< 0,05). Nevertheless, the MK-0822 coated group presents similar or higher values, although without statistic differences related to the control group in all parameters (TV, BV, BV ̸TV, Tb.Sp and Tb.N)(AU)

Efeito da sinvastatina e do propranolol no desenvolvimento da lesão periapical de ratos submetidos ao estresse / Effect of Simvastatin and Propranolol on the development of periapical lesions in rats subjected to stress

Uma vez que o estresse crônico pode estimular o sistema nervoso simpático, diminuindo a resposta imune, favorecendo a perda óssea frente a um processo inflamatório, os objetivos deste estudo foram: 1) Avaliar os efeitos de modelos de indução de estresse no desenvolvimento da periodontite apical (P.a) e avaliar o nível de estresse gerado pelos mesmos; 2) A partir do melhor protocolo de estresse obtido foi avaliado o perfil inflamatório da PA induzida em animais sob condições de estresse, utilizando sistemicamente a Sinvastatina, Propranolol e a Sinvastatina associada ao propranolol. Na primeira parte foram utilizados 32 ratos Wistar (N=8) divididos aleatoriamente em: SE: sem estresse, sem periodontite apical (P.a); SE+P.a: sem estresse, com P.A; EP+P.a: Estresse previsível + P.a; EI+P.a: estresse imprevisível + P.a. Os animais foram submetidos ao estresse crônico por 42 dias sendo que no dia 21 foi induzida a P.a. Para comprovação do estresse foram utilizadas análises de peso e comportamentais de campo aberto (CA) e labirinto em y (Y). Foram realizadas análises micro tomográfica e histológica para avaliar o efeito de ambas as metodologias sobre a progressão da P.a. Os dados foram avaliados estatisticamente. Observou-se que não houve diferença no ganho de peso entre os animais SE e SE+P.a. Em relação aos grupos estressados o grupo estresse imprevisível apresentou menor ganho de peso quando comparado ao grupo sem estresse. Nos testes comportamentais, Y e CA observou-se um mesmo padrão de comportamento nos animais do grupo SE e SE+P.a (p>0.05). Verificou-se diferenças entre os grupos SE+P.a e EI +P.a no volume da lesão periapical, mas não houve diferença entre os protocolos de estresse. A Análise histológica mostrou maior área de P.a nos animais do grupo EI+P.a o que também foi observado pela análise microtomográfica. Na segunda etapa foram utilizados 48 animais divididos em 5 grupos (N=8): SE+P.a: sem estresse e com P.a; E+SS: Estresse + Periodontite Apical + soro; E+SN: Estresse + Periodontite Apical + Sinvastatina; E+P: Estresse + Periodontite Apical + Propranolol e S+SN+P: Estresse + Periodontite Apical + Sinvastatina + Propranolol. O protocolo de estresse utilizado foi o estresse crônico imprevisível por 42 dias. Realizou-se análises de peso e comportamentais de labirinto em y e campo aberto. Após a eutanásia foram realizadas as análises microtomográfica e a análise histológica e histomorfométrica. Os valores obtidos foram analisados estatisticamente.Observouse que todos os grupos medicados apresentaram ganho de peso maior do que o grupo solução salina. No grupo Sinvastatina e no grupo Propranolol, os animais apresentaram maior atividade locomotora do que no grupo Solução salina. O volume da P.a foi significativamente menor nos grupos Sinvastatina e Propranolol quando comparado ao grupo solução salina. Na análise histológica observou-se que a área da lesão foi significativamente menor nos animais do grupo Sinvastatina quando comparado ao da solução salina, bem como menor intensidade e extensão do infiltrado inflamatório. Concluindo-se que o estresse crônico imprevisível aumenta a perda óssea periapical em animais com PA induzida. Além disso, concluiu-se que tanto a Sinvastatina quanto o Propranolol reduze o estresse crônico, reduzindo a perda óssea nestes animias (AU)

Since chronic stress can stimulate the sympathetic nervous system, decreasing the immune response, favoring bone loss in the face of an inflammatory process, the objectives of this study were: 1) To evaluate the effects of stress induction models on the development of apical periodontitis (P.a) and assess the level of stress generated by them; 2) Based on the best stress protocol obtained, the inflammatory profile of BP induced in animals under stress conditions was evaluated, systemically using Simvastatin, Propranolol and Simvastatin associated with propranolol. In the first part, 32 Wistar rats (N=8) were randomly divided into: SE: without stress, without apical periodontitis (P.a); SE+P.a: without stress, with P.A; EP+P.a: Predictable stress + P.a; EI+P.a: unpredictable stress + P.a. The animals were subjected to chronic stress for 42 days, and on the 21st, P.a. To prove the stress, weight and behavioral analyzes of open field (CA) and maze in y (Y) were used. Micro tomographic and histological analyzes were performed to evaluate the effect of both methodologies on the progression of P.a. Data were statistically evaluated. It was observed that there was no difference in weight gain between SE and SE+P.a animals. In relation to the stressed groups, the unpredictable stress group showed less weight gain when compared to the non-stress group. In the behavioral tests, Y and CA, the same pattern of behavior was observed in animals from the SE and SE+P.a groups (p>0.05). There were differences between groups SE+P.a and EI +P.a in the volume of the periapical lesion, but there was no difference between the stress protocols. The histological analysis showed a greater area of P.a in the animals from the EI+P.a group, which was also observed by the microtomographic analysis. In the second stage, 48 animals were divided into 5 groups (N=8): SE+P.a: without stress and with P.a; E+SS: Stress + Apical Periodontitis + serum; E+SN: Stress + Apical Periodontitis + Simvastatin; E+P: Stress + Apical Periodontitis + Propranolol and S+SN+P: Stress + Apical Periodontitis + Simvastatin + Propranolol. The stress protocol used was unpredictable chronic stress for 42 days. Weight and behavioral analyzes of y-maze and open field were performed. After euthanasia, microtomographic analysis and histological and histomorphometric analysis were performed. The values obtained were statistically analyzed. It was observed that all medicated groups had greater weight gain than the saline group. In the Simvastatin group and in the Propranolol group, the animals showed greater locomotor activity than in the Saline group. The BP volume was significantly lower in the Simvastatin and Propranolol groups when compared to the saline group. In the histological analysis, it was observed that the area of the lesion was significantly smaller in the animals of the Simvastatin group when compared to the saline solution, as well as lower intensity and extension of the inflammatory infiltrate. Concluding that unpredictable chronic stress increases periapical bone loss in animals with induced AP. In addition, it was concluded that both Simvastatin and Propranolol reduce chronic stress, reducing bone loss in these animals. (AU)

Estrogen deficiency influences TNF-α and IL-1ß gene expression in the odontogenic region of dental hypofunctional condition / A deficiência de estrógeno influencia a expressão gênica de TNF-α e IL-1ß na região odontogênica de dentes em hipofunção

Objetivo: Evidências científicas sugerem que a deficiência de estrógeno e fatores genéticos influenciam o desenvolvimento do sistema estomatognático. Este estudo teve como objetivo avaliar a influência da deficiência de estrógeno na expressão gênica de TNF-α, IL-1ß, IL-6 e IL-10 durante o desenvolvimento dentário em modelo murino. Material e Métodos: Ratas Wistar Hannover foram divididas em dois grupos de acordo com a intervenção recebida: Grupo Hipoestrogenismo - cirurgia de ovariectomia e Grupo Controle - cirurgia fictícia. Para avaliar o desenvolvimento dentário, o incisivo inferior foi escolhido. O modelo de hipofunção dos incisivos inferiores foi realizado por ajuste incisal. O incisivo homólogo exercia hiperfunção dentária. Os animais foram avaliados durante todo o período puberal. Após a eutanásia, as hemimandíbulas foram removidas para avaliar a expressão gênica do TNF-α, IL-1ß, IL-6 e IL-10 na região odontogênica dos incisivos por meio de PCR em tempo real. Foi realizado o teste de Kruskal-Wallis e o pós-teste de Dunn. O nível de significância foi de 5%. Resultados: Houve diferenças estatisticamente significativas na expressão gênica de TNF-α e IL-1ß entre os grupos hipoestrogenismo e controle sob condição de hipofunção dentária (p=0,0084, p=0,0072, respectivamente). Conclusão: A deficiência de estrógeno influencia a expressão gênica de TNF-α e IL-1ß na região odontogênica de dentes hipofuncionais (AU)

Objective: Scientific evidence suggests that estrogen deficiency and genetic factors have an influence on the development of the stomatognathic system. This study aimed to evaluate the influence of estrogen deficiency on the gene expression of TNF-α, IL-1ß, IL-6 and IL-10 during dental development in a murine model. Material and Methods: Wistar Hannover rats were divided into two groups according to the intervention received: Hypoestrogenism Group - ovariectomy surgery and Control Group - fictitious surgery. To evaluate the dental development, the lower incisor was chosen. The mandibular incisor hypofunction model was performed by incisal adjustment. The homologous incisor exerted a hyperfunction. The animals were evaluated throughout the pubertal period. After euthanasia, the hemimandibles were removed to evaluate the gene expression of the TNF-α, IL-1ß, IL-6 and IL-10 in the odontogenic region of the incisors through real time PCR. Kruskal-Wallis test and Dunn's posttest were performed. The level of significance was 5%. Results: There were statistically significant differences of TNF-α and IL-1ß gene expression between the hypoestrogenism and control groups under hypofunction condition (p=0.0084, p=0.0072, respectively). Conclusion: Estrogen deficiency influences TNF-α and IL-1ß gene expression in the odontogenic region of the hypofunctional teeth. (AU)

Effect of radiotherapy on the differentiation and osteogenic activity of mesenchymal stem cells on dental implants / Efeito da radioterapia na diferenciação e atividade osteogênica de células-tronco mesenquimais em implantes dentários

Objective: to evaluate the differentiation and gene expression of transcripts related to osteogenesis in a primary culture of Mesenchymal Stem Cells (MSCs) derived from rat femurs submitted to radiotherapy and the installation of pure titanium implants. Material and Methods: fifty-four rats received titanium implants in both femurs and were divided into three groups: Control: implant surgery (C); Implant + immediate irradiation (IrI), and Implant + late irradiation (IrL). Euthanasia occurred 3, 14, and 49 days after surgery. The bone marrow MSCs from the femurs were isolated and cultivated. The cell viability, total protein content, alkaline phosphatase (ALP) activity, and the formation of mineralization nodules and cellular genotoxicity were analyzed. The gene expression of Alkaline Phosphatase (phoA), Collagen 1 (COL1), Runt-related transcription factor 2 (RUNX2), Osterix (OSX), Osteopontin (OPN), Integrin ß1(ITGB1), Bone Sialoprotein (BSP), Osteonectin (SPARC), Osteocalcin (Bglap), Transforming Growth Factor ß-type (TGF-ß), Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor (GM-CSF), Interleukin-6 (IL-6), Apolipoprotein E (APOE) and Prostaglandin E2 synthase (PGE2) were evaluated by qRT- PCR. Results: ionizing radiation suppresses the gene expression of essential transcripts for bone regeneration, as well as cellular viability, as observed in the IrI and IrL groups. Conclusion: although this can lead to the loss of osseointegration and failure of the implant, the MSCs showed more activity at 49 days than at 3 and 14 days. (AU)

Objetivo: avaliar a diferenciação e expressão gênica de transcritos relacionados à osteogênese em cultura primária de MSCs derivadas de fêmures de ratos submetidos à radioterapia e instalação de implantes de titânio puro. Material e Métodos: cinquenta e quatro ratos receberam implantes de titânio em ambos os fêmures e foram divididos em três grupos: Controle: cirurgia de implante (C); Implante + irradiação imediata (IrI) e Implante + irradiação tardia (IrL). A eutanásia ocorreu 3, 14 e 49 dias após a cirurgia. As MSCs de medula óssea dos fêmures foram isoladas e cultivadas. Foram analisadas a viabilidade celular, teor de proteína total, atividade da fosfatase alcalina (ALP), formação de nódulos de mineralização e genotoxicidade celular. A expressão gênica de Fosfatase Alcalina (phoA), Colágeno 1 (COL1), fator de transcrição relacionado a Runt 2 (RUNX2), Osterix (OSX), Osteopontina (OPN), Integrina ß1 (ITGB1), Sialoproteína Óssea (BSP), Osteonectina (SPARC), Osteocalcina (Bglap), Fator de Crescimento Transformador tipo ß (TGF-ß), Fator Estimulante de Colônia de Granulócitos-Macrófagos (GM-CSF), Interleucina-6 (IL-6), Apolipoproteína E (APOE) e Prostaglandina E2 sintase (PGE2) foram avaliados por qRT-PCR. Resultados: a radiação ionizante suprime a expressão gênica de transcritos essenciais para a regeneração óssea, bem como a viabilidade celular, como observado nos grupos IrI e IrL. Conclusão:embora isso possa levar à perda da osseointegração e falha do implante, as MSCs apresentaram maior atividade aos 49 dias do que aos 3 e 14 dias (AU)

Fibra de carbono ativada: avaliação das interações biológicas in vitro / Activated carbon fiber: evaluation of biological interactions in vitro

Devido a constante necessidade de desenvolver materiais biocompatíveis com propriedades osteocondutores e osteoindutoras, a presente tese conta com o desenvolvimento de dois estudos in vitro com fibra de carbono obtida a partir de fibra PAN têxtil, incorporada com diferentes íons de metais, na osteogênese com vistas à compreensão das necessidades da engenharia tecidual no desenvolvimento desse biomaterial com adequadas propriedades biológicas. As células foram obtidas dos fêmures de 09 ratos machos adultos (Wistar) pesando 300g, com 90 dias.Estudo 1: A partir da preparação da fibras foram obtidos corpos de prova de 4 mm de diâmetro e 2 mm de altura, dos seguintes grupos: fibra de carbono não ativada (FCNA), fibra carbono ativada (FCA) e fibra carbono ativada com prata (FCAAg). Após plaqueamento (n=5) em meio suplementado (MTS) e meio suplementado osteogênico (MTSO) foram analisados: viabilidade celular, conteúdo de proteína total (PT), atividade de fosfatase alcalina (ALP), interaçãocelular e formação de nódulos de mineralização. Foi avaliada a formação de biofilme nos corpos de prova, utilizando cepas de S. aureus, P. aeruginosa e E. coli. Na viabilidade celular, houve diferença estatística entre grupo controle celular (C) e FCA-MTS, FCAAg-MTS e FCAAg-MTSO. Em PT, não houvediferença, na ALP houve diferença entre C-MTS e as fibras, C-MTSO se mostrou semelhante. Em nódulos, houve diferença entre C-MTS e C-MTSO e as fibras do MTSO. Houve redução de formação de biofilme do S. aureus na FCAAg.Estudo 2: Foram obtidos corpos de prova da mesma dimensão do estudo 1 (n=5) dos seguintes grupos: fibra carbono ativada com prata (FCAAg), fibra carbono ativada com ouro (FCAAu), fibra carbono ativada com cobre (FCACu), fibra carbono ativada com paládio (FCAPd) e fibra carbono ativada com platina (FCAPt). Foram quantificadas a proliferação celular, viabilidade celular, formação de nódulos de mineralização, conteúdo de PT e ALP. Todas as amostras mostraram-se semelhantes quanto a proliferação celular, com exceção do grupo FCAAg comparado ao grupo controle (C). Sobre viabilidade celular, C obteve maior viabilidade que os outros grupos, e FCA obteve maior taxa que os grupos FCAAg, FCACu, FCAPt, sendo semelhante aos grupos FCAAu e FCAPd. Já os grupos FCAAu e FCAPd apresentaram diferença aos grupos FCAAg e FCACu. Na análise de expressão de PT apenas houve diferença entre FCA e FCAAu, sendo FCAAu com menor expressão de produção de PT. Na avaliação da ALP os grupos FCAAg e FACu mostraram diferença estatística e inferior com os grupos C, FCAAu, FCAPd e FCAPt, além disso, o grupo FCA mostrou menor taxa que C.Conclusões: As fibras utilizadas de base para a incorporação dos íons demonstraram grande potencial para uso como scaffold para reparação óssea, isso porque em ambos os estudos, na forma ativada e não ativada, as fibras apresentaram viabilidade celular e quantificação de cálcio satisfatórias. Sendo a versão não ativada mais econômica no que diz respeito ao tempo e custo de preparação. Mais estudos devem ser empregados a fim de assegurar sua segurança clínica em relação à citotoxicidade da incorporação de íons de ouro e paládio.(AU)

Due to the constant need to develop biocompatible materials with osteoconductive and osteoinductive properties, this thesis involves the development of two in vitro studies with carbon fiber obtained from textile PAN fiber, incorporated with different metal ions, in osteogenesis with a view to understanding the needs of tissue engineering in the development of this biomaterial with adequate biological properties. The cells were obtained from the femurs of 9 adult male rats (Wistar) weighing 300g, aged 90 days. Study 1: From the fiber preparation, specimens measuring 4 mm in diameter and 2 mm in height were obtained from the following groups: non-activated carbon fiber (FCNA), activated carbon fiber (FCA) and silver-activated carbon fiber (FCAAg). After plating (n=5) in supplemented medium (MTS) and supplemented osteogenic medium (MTSO), cell viability, total protein content (PT), alkaline phosphatase (ALP) activity, cell interaction and formation of mineralization nodules were analyzed. . Biofilm formation was evaluated in the specimens, using strains of S. aureus, P. aeruginosa and E. coli. In cell viability, there was a statistical difference between the cell control group (C) and FCAMTS, FCAAg-MTS and FCAAg-MTSO. In PT, there was no difference, in ALP there was a difference between C-MTS and fibers, C-MTSO was similar. In nodules, there was a difference between C-MTS and C-MTSO and MTSO fibers. There was a reduction in S. aureus biofilm formation on FCAAg. Study 2: Specimens of the same size as in study 1 (n=5) were obtained from the following groups: carbon fiber activated with silver (FCAAg), carbon fiber activated with gold (FCAAu), carbon fiber activated with copper (FCACu), palladium-activated carbon fiber (FCAPd) and platinum-activated carbon fiber (FCAPt). Cell proliferation, cell viability, formation of mineralization nodules, PT and ALP content were quantified. All samples were similar in terms of cell proliferation, with the exception of the FCAAg group compared to the control group (C). Regarding cell viability, C obtained higher viability than the other groups, and FCA obtained a higher rate than the FCAAg, FCACu, FCAPt groups, being similar to the FCAAu and FCAPd groups. The FCAAu and FCAPd groups showed differences to the FCAAg and FCACu groups. In the analysis of PT expression, there was only a difference between FCA and FCAAu, with FCAAu having lower expression of PT production. In the ALP assessment, the FCAAg and FACu groups showed a lower statistical difference compared to the C, FCAAu, FCAPd and FCAPt groups, in addition, the FCA group showed a lower rate than C. Conclusions: The fibers used as the basis for the incorporation of ions demonstrated great potential for use as a scaffold for bone repair, because in both studies, in activated and non-activated form, the fibers showed satisfactory cell viability and calcium quantification. The non-activated version is moreeconomical in terms of preparation time and cost. More studies must be carried out to ensure its clinical safety in relation to the cytotoxicity of the incorporation of gold and palladium ions. (AU)

Avaliação da etapa final do sinal insulínico, via inflamatória, estresse oxidativo, mecanismo epigenético por metilação do DNA e expressão de GLUT4 no músculo gastrocnêmio de ratos adultos, proles de ratas com periodontite apical / Assessment of insulin signaling and inflammatory pathways in skeletal muscle and adipose tissues of adult rats, offspring of the rats with periapical lesion

A programação fetal sugere que estímulos adversos quando aplicados durante o início do desenvolvimento fetal podem alterar o metabolismo da prole, aumentando o risco de doenças na sua vida adulta. A metilação do DNA é um dos mecanismos epigenéticos envolvida nesta programação e regula a expressão gênica. Estudos anteriores verificaram que a periodontite apical (AP) materna em ratas promove em sua prole adulta: resistência insulínica (RI), alteração na etapa inicial do sinal insulínico (SI) no músculo gastrocnêmio (MG) e aumento na concentração plasmática de fator de necrose tumoral-α (TNF-α). O TNF-α pode ativar o fator de transcrição nuclear kappa B (NF-kB) que diminui a expressão gênica do transportador de glicose GLUT4. Nesse contexto, mais estudos são necessários para investigar se as alterações no SI observadas em ratos adultos, proles de ratas com AP também estão presentes na continuidade da cascata insulínica. Ademais, sabendo-se que o estresse oxidativo tem sido implicado como fator contribuinte tanto para o início quanto para a progressão do diabetes, torna-se fundamental verificar o grau de estresse oxidativo tecidual nesta prole adulta. Em vista disso, os objetivos deste estudo foram avaliar a RI, estresse oxidativo, etapa final do SI e via inflamatória no MG de ratos adultos, proles de ratas com AP. Para tanto, as 21 ratas Wistar (2 meses de idade) foram distribuídas em 3 grupos: 1) ratas controle; 2) ratas com 1 AP induzida em 1º molar superior direito; 3) ratas com 4 APs induzidas em 1os e 2os molares superiores e inferiores do lado direito. A AP foi induzida empregandose broca em aço carbono dotada de esfera de 0,1 mm na extremidade. Após 30 dias da exposição pulpar, as ratas de todos os grupos foram colocadas para acasalamento. Quando os filhotes machos de todas as ratas completaram 75 dias de idade, foram realizadas as seguintes análises plasmáticas: 1) glicemia; 2) insulinemia; 3) RI. Ademais, foram realizados os seguintes experimentos no MG: 1) grau de fosforilação em serina/treonina da Akt, após o estímulo insulínico; 2) conteúdo proteico de GLUT4; 3) grau de metilação do DNA na região promotora do gene do GLUT4; 4) expressão gênica do GLUT4 e TNF-α; 5) conteúdo proteico de TNF-α e PGC-1α; 6) grau de fosforilação de NF-kB p50 e NF-kB p65; 7) estresse oxidativo (superóxido dismutase ­ SOD e espécies reativas ao tiobarbitúrico ­ TBARS). A análise estatística foi realizada pela análise de variância, seguida do teste de Tukey. O nível de significância adotado foi de 5%. Os resultados mostraram que AP materna (tanto 1 foco de infecção como 4 focos de infecções) promoveu hiperinsulinemia, RI e diminuição na atividade antioxidante da SOD e na concentração de TBARS no MG de sua prole adulta. Entretanto, somente a AP materna em quatro dentes promoveu aumento na massa corpórea, na ingestão alimentar e no grau de fosforilação das subunidades p50 e p65 do NF-kB no MG de proles adultas. Ademais, houve diminuição no grau de fosforilação em serina e treonina da Akt (após estímulo insulínico) e na expressão gênica e conteúdo proteico de GLUT4 no MG em proles adultas de ratas com 4APs. A AP materna não promoveu alteração na glicemia de jejum, conteúdo de PGC-1α, grau de metilação do DNA na região promotora do gene do GLUT4 e expressão gênica e conteúdo proteico de TNF-α no MG de proles adultas. Esses resultados revelam o impacto que a AP materna tem em longo prazo na predisposição às alterações metabólicas na fase adulta da prole. Isso reforça a importância que a manutenção da saúde bucal materna tem sobre a saúde geral da prole(AU)

Fetal programming suggests that adverse stimuli when applied during early fetal development may alter metabolism of offspring, increasing the risk of disease in adulthood. DNA methylation is one of the epigenetic mechanisms involved in this programming and regulates gene expression. Previous studies have shown that maternal apical periodontitis (AP) in rats promotes in their adult offspring: insulin resistance (IR), alteration in the initial steps of the insulin signaling (IS) in the gastrocnemius muscle (GM) and increase in plasma concentration of tumor necrosis factor-α (TNF-α). TNF-α can activate nuclear transcription factor kappa B (NF-kB) thus decreasing gene expression of the GLUT4 glucose transporter. In this context, more studies are needed to investigate whether changes in IS observed in adult rats, offspring of rats with AP are also present in the continuity of the insulin cascade. In addition, since oxidative stress has been implicated as a contributing factor for both the onset and progression of diabetes, it is essential to verify the degree of tissue oxidative stress in this adult offspring. Therefore, the aims of this study were to evaluate IR, oxidative stress, final steps of IS and inflammatory pathway in the GM of adult rats, offspring of rats with AP. For this purpose, 21 female Wistar rats (2 months of age) were distributed into three groups: 1) control rats (CN); 2) group with one AP induced in the upper right first molar (1AP); 3) group with four APs induced in the first and second upper and lower right molars (4AP). AP was induced using a surgical round bur measuring 0.1 mm in diameter. After 30 days of pulp exposure, female rats of all groups were placed for mating. Pregnant rats were separated into individual cages. When the male offspring of all rats reached 75 days of age, the following plasma analyzes were performed: 1) glycemia; 2) insulinemia; 3) IR. Furthermore, the following analyzes were performed in the GM: 1) Akt serine/threonine phosphorylation status, after insulin stimulation; 2) GLUT4 content; 3) degree of DNA methylation in the proximal promoter region of the GLUT4 gene; 4) GLUT4 and TNF- α gene expression; 5) TNF-α and PGC-1α content; 6) p50 and p65 subunits of NF-kB phosphorylation status; 7) oxidative stress (superoxide dismutase ­ SOD and thiobarbiturate reactive species ­ TBARS). Statistical analyzes were performed by analysis of variance, followed by the Tukey test. The level of significance adopted was 5%. Results showed that maternal AP (both 1 infection focus and 4 infection focus) promoted hyperinsulinemia, IR and decrease in SOD antioxidant activity and TBARS concentration in the GM of their adult offspring. However, only maternal AP in four teeth promoted an increase in body weight, food intake and p50 and p65 subunits of NF-kB phosphorylation status in the GM of adult offspring. Furthermore, there was a decrease in Akt serine and threonine phosphorylation status (after insulin stimulation) and in gene expression and protein content of GLUT4 in the GM in adult offspring of rats with 4APs. Maternal AP did not change fasting glycemia, PGC-1α content, degree of DNA methylation in the proximal promoter region of GLUT4, gene expression and protein content of TNF-α in the GM of adult offspring. These results demonstrate that maternal AP is associated with IR and promotes important alterations in IS and inflammation pathways in adult offspring. This reinforces the importance of maternal oral health on the overall health of offspring(AU)