Antibacterial Activity of a New Ready-To-Use Calcium Silicate-Based Sealer

Abstract The aim of this study was to evaluate the antibacterial potential of a calcium silicate-based sealer (Bio-C Sealer, Angelus) against common bacteria in primary and secondary endodontic infections. Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus and Streptococcus mutans were exposed to fresh Bio-C Sealer for 24 h by the agar diffusion method (n=5). Additionally, the antibacterial activity was investigated against E. faecalis and S. mutans biofilms (48 h old) grown in discs with 4 mm in diameter and 2 mm in height. (n=3) of set discs of Bio-C Sealer (Angelus), EndoFill (Dentsply-Mallefer), Sealer 26 (Dentsply), AH Plus (Dentsply), Sealapex (Sybron-Endo) and EndoSequence BC Sealer (Brasseler). The antibacterial activity was evaluated by colony forming unity (CFU) counting using ImageJ software. Data were compared by one-way ANOVA followed by Holm-Sidak test (a=5%). Fresh Bio-C Sealer exhibited antimicrobial activity against all bacteria evaluated by agar diffusion method, except for S. mutans. Set discs of all endodontic sealers tested showed similar CFU values for E. faecalis (p>0.05). S. mutans in biofilms showed higher susceptibility to EndoFill compared with the other sealers (p<0.05). In conclusion, the results indicate that fresh Bio-C Sealer does not inhibit S. mutans growth, but exhibits antibacterial activity against E. faecalis, S. aureus, P. aeruginosa and E. coli. After setting, the Bio-C Sealer exhibits an antimicrobial potential comparable to that of the other sealers evaluated in E. faecalis biofilm, but lower than that of EndoFill for S. mutans biofilm.

Resumo O objetivo deste estudo foi avaliar o potencial antibacteriano do novo cimento biocerâmico (Bio-C Sealer, Angelus) contra bactérias comuns em infecções endodônticas primárias e secundárias. Culturas de Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus e Streptococcus mutans foram expostos a amostras frescas do Bio-C sealer durante 24 h pelo método de difusão em agar (n=5). A atividade antibacteriana de amostras dos cimentos Bio-C Sealer (Angelus), EndoFill (Dentsply-Mallefer), Sealer 26 (Dentsply), AH Plus (Dentsply), Sealapex (Sybron-Endo) e EndoSequence BC Sealer (Brasseler) após a presa também foi investigada em biofilmes de 48 h das bactérias E. faecalis e S. mutans, crescidos em discos com 4 mm de diâmetro e 2 mm de altura. A atividade antibacteriana foi avaliada por contagem das unidades formadoras de colônias (UFC) utilizando o software ImageJ. Os dados foram comparados por ANOVA a um critério seguido pelo pós-teste Holm-Sidak (a=5%). Amostras frescas do Bio-C Sealer exibiram atividade antimicrobiana contra todas as bactérias avaliadas pelo método de difusão em ágar, exceto para S. mutans. A análise da formação de biofilme mostrou que todos os cimentos endodônticos testados apresentaram valores similares de UFC para E. faecalis (p> 0,05), enquanto biofilmes de S. mutans foram mais suscetíveis ao EndoFill em comparação com os demais cimentos (p<0,05). Conclui-se que o cimento Bio-C Sealer fresco exibe atividade antibacteriana para E. faecalis, S. aureus, P. aeruginosa e E. coli, mas não inibe o crescimento de S. mutans. Após a presa, o cimento Bio-C Sealer exibe potencial antimicrobiano similar ao dos demais cimentos avaliados em biofilme de E. faecalis, mas inferior ao do EndoFill para S. mutans.

Evaluation of zinc-oxide nanocoating on the characteristics and antibacterial behavior of nickel-titanium alloy

ABSTRACT Objective: To investigate the effect of ZnO nanocoating on mechanical properties of NiTi orthodontic wires and antibacterial activity. Methods: 0.016 x 0.022-in NiTi orthodontic wires were coated with ZnO nanoparticles using an electrochemical deposition method with three electrodes system in 0.1M Zn(NO3)2. Mechanical properties and frictional resistance of the coated wires were investigated using an universal testing machine. Antibacterial effect of ZnO coating was also investigated. Results: A stable adhered ZnO nanocoating on NiTi wires was obtained. The coated wires have a significant antibacterial activity against S. aureus, S. pyogens and E. coli, and a reduction of frictional forces by 34%. Conclusion: ZnO nanocoating may improve the antibacterial effects of NiTi wires and reduce the frictional resistance. Coating may be implanted in orthodontic practice for faster and safer treatment.

RESUMO Objetivos: Avaliar o efeito do nanorrevestimento de óxido de zinco (ZnO) sobre as propriedades mecânicas e propriedades antibacterianas de fios ortodônticos de NiTi. Métodos: Fios 0,016" x 0,022" de NiTi foram revestidos com nanopartículas de ZnO por meio de um método de deposição eletroquímica com um sistema de três eletrodos a 0,1M Zn(NO3)2. Uma máquina universal de testes foi utilizada para avaliar as propriedades mecânicas e a resistência friccional dos fios revestidos. Além disso, também foram analisadas as propriedades antibacterianas do revestimento de ZnO. Resultados: Obteve-se uma aderência estável das nanopartículas de ZnO sobre os fios NiTi. Os fios revestidos apresentaram atividade antibacteriana significativa contra S. aureus, S. pyogens e E. coli, e apresentaram uma redução de 34% na força de atrito. Conclusão: O revestimento com nanopartículas de óxido de zinco pode melhorar as propriedades antibacterianas e reduzir a resistência friccional dos fios de NiTi. Assim, o revestimento dos fios pode ser utilizado na Ortodontia visando tratamentos mais rápidos e seguros.

Análise físico-química da superfície de titânio após tratamento químico de descontaminação com clorexidina: estudo in vitro / Physical and chemical analysis of the titanium surface after chemical treatment of decontamination with chlorexidine: in vitro study

Introdução: Tratamentos têm sido propostos para a peri-implantite com o objetivo de descontaminar a superfície dos implantes, removendo microrganismos que podem estar associados à doença. Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar a ação in vitro de diferentes métodos de aplicação de digluconato de clorexidina (CLX) na descontaminação de discos de titânio (Ti) com microtopografia e seu efeito físico-químico sobre a superfície. Material e método: Vinte discos de Ti foram expostos a inóculo de Escherichia coli por 24 horas. Foram distribuídos em quatro grupos de descontaminação (n=5): 1 - um minuto de exposição à solução de CLX 0,12%; 2 - dois minutos de exposição à solução de CLX 0,12%; 3 - esfregaço durante um minuto com gel de CLX 1%; 4 - esfregaço durante um minuto com gel de CLX 2%. O produto de cada disco foi diluído e plaqueado individualmente. Após 24 horas, realizou-se contagem das unidades de colônias formadas (UFC). Resultado: O grupo com o menor número de crescimento de UFC foi o grupo 4 (0,20±0,37), com apenas UFC em uma das amostras. Seguido do grupo 2 (0,40±0,73), grupo 1 (18,60±33,96). O grupo 3 apresentou as maiores quantidades de UFC (36,07±41,39). Em todas as amostras, foi possível observar uma diminuição estatisticamente significante da concentração superficial de Ti, assim como um aumento de oxigênio. Conclusão: Pode-se concluir que o uso de CLX gel a 2% em superfícies de Ti com microtopografia contaminadas com E. coli propicia a eliminação das UFC e que sua aplicação resulta em diminuição do percentual de Ti e aumento do teor de O.

Introduction: Treatments have been proposed for peri-implantitis aiming to decontaminate the implants` surface removing microorganisms associated with the disease. Objective: The objective of this study was to evaluate the in vitro action of application of chlorhexidine digluconate (CLX) in the decontamination of titanium (Ti) discs with microtopography and its chemical-physical effect on the surface. Material and method: Twenty Ti discs were exposed to the Escherichia coli inoculum for 24 hours. Distributed equally in 4 decontamination groups (n = 5): 1- one minute of exposure to the 0.12% CLX solution; 2- two minutes of exposure to the 0.12% CLX solution; 3- smear for 1 minute with 1% CLX gel; and 4- smearing for 1 minute with 2% CLX gel. The product was diluted and plated individually. After 24 hours, colony units formed (CFU) were counted. Result: The group with the lowest number of CFU growth was group 4 (0.20 ± 0.37) with only one CFU in one of the samples. Followed by group 2 (0.40 ± 0.73), group 1 (18.60 ± 33.96), and group 3, which presented the highest amounts of CFU (36.07 ± 41.39). In all samples it was possible to observe a statistically significant decrease in the surface concentration of Ti, as well as an increase in oxygen. Conclusion: It can be concluded that the use of 2% CLX gel on Ti surfaces with microtopography contaminated with E.coli allows the elimination of CFU, and that its application results in a decrease in the percentage of Ti and an increase in the content of O.

Periapical bone response to bacterial lipopolysaccharide is shifted upon cyclooxygenase blockage

Abstract Objectives: Infection, inflammation and bone resorption are closely related events in apical periodontitis development. Therefore, we sought to investigate the role of cyclooxygenase (COX) in osteoclastogenesis and bone metabolism signaling in periapical bone tissue after bacterial lipopolysaccharide (LPS) inoculation into root canals. Methodology: Seventy two C57BL/6 mice had the root canals of the first molars inoculated with a solution containing LPS from E. coli (1.0 mg/mL) and received selective (celecoxib) or non-selective (indomethacin) COX-2 inhibitor. After 7, 14, 21 and 28 days the animals were euthanized and the tissues removed for total RNA extraction. Evaluation of gene expression was performed by qRT-PCR. Statistical analysis was performed using analysis of variance (ANOVA) followed by post-tests (α=0.05). Results: LPS induced expression of mRNA for COX-2 (Ptgs2) and PGE2 receptors (Ptger1, Ptger3 and Ptger4), indicating that cyclooxygenase is involved in periapical response to LPS. A signaling that favours bone resorption was observed because Tnfsf11 (RANKL), Vegfa, Ctsk, Mmp9, Cd36, Icam, Vcam1, Nfkb1 and Sox9 were upregulated in response to LPS. Indomethacin and celecoxib differentially modulated expression of osteoclastogenic and other bone metabolism genes: celecoxib downregulated Igf1r, Ctsk, Mmp9, Cd36, Icam1, Nfkb1, Smad3, Sox9, Csf3, Vcam1 and Itga3 whereas indomethacin inhibited Tgfbr1, Igf1r, Ctsk, Mmp9, Sox9, Cd36 and Icam1. Conclusions: We demonstrated that gene expression for COX-2 and PGE2 receptors was upregulated after LPS inoculation into the root canals. Additionally, early administration of indomethacin and celecoxib (NSAIDs) inhibited osteoclastogenic signaling. The relevance of the cyclooxygenase pathway in apical periodontitis was shown by a wide modulation in the expression of genes involved in both bone catabolism and anabolism.

Análise in vitro da desinfecção de escovas dentais por substâncias com potencial antimicrobiano / In vitro analysis of toothbrushes' disinfection by antimicrobial activity substances / Análisis in vitro de la desinfección de cepillos dentales por sustancias con potencial antimicrobiano

Introdução: a correta utilização de técnicas e materiais de higiene são alguns dos fatores que influenciam positivamente a saúde bucal. O mal acondicionamento e higienização das escovas dentais podem contribuir para a reincidência de infecções bucofaríngeas. Objetivo: avaliar, in vitro, o potencial de descontaminação de duas diluições de hipoclorito de sódio em escovas dentais. Materiais e Métodos: as escovas foram inoculadas com Escherichia coli, Candida albicans, Streptococcus mutans e Pseudomonas aeruginosa, durante 30 segundos. Posteriormente foram tratadas por 10 minutos com: solução bucal Colgate Periogard® com álcool e 0,12% de gluconato de clorexidina, Água Sanitária Brilux® com 2,5% de cloro ativo diluída em água destilada até a concentração de 1% e Água Sanitária Brilux® com 2,5% de cloro ativo diluída em água destilada de acordo com a indicação do fabricante para desinfecção de frutas e vegetais (0,005%). Alíquotas das soluções foram semeadas em BHI ágar e incubadas a 37ºC, por 48 horas. Foi feita a contagem das Unidades Formadoras de Colônia UFC/mL. Resultados: para as soluções Colgate Periogard® e Água Sanitária Brilux® (1%) não foi observado crescimento de microrganismos, já a solução Sanitária Brilux® (0,005%) apresentou um discreto crescimento para Streptococcus mutans (10200 UFC/ml) e Candida albicans(1200 UFC/ml). Conclusão: o Colgate Periogard® e a Água Sanitária Brilux® (1%) foram semelhantemente eficazes na desinfecção das escovas. O hipoclorito é uma substância de baixo custo, de fácil acesso e um bom candidato a ser adotado para a indicação de armazenamento e limpeza das escovas(AU)

Introduction: The correct use of techniques and hygiene materials are some of the factors that positively influence oral health. Poorly conditioned and hygienised toothbrushes may contribute to the recurrence of oropharyngeal infections. Objective: to evaluate, in vitro, the decontamination potential of two dilutions of sodium hypochlorite in dental brushes. Materials and Methods: The brushes were inoculated with Escherichia coli, Candida albicans, Streptococcus mutans and Pseudomonas aeruginosa for 30 seconds. They were then treated for 10 minutes with: Colgate Periogard® alcohol solution and 0.12% chlorhexidine gluconate, Brilux® Sanitary Water with 2.5% active chlorine diluted in distilled water to a concentration of 1% and Sanitary Water Brilux® with 2.5% active chlorine diluted in distilled water according to the manufacturer's indication for disinfection of fruits and vegetables (0.005%). Aliquots of the solutions were seeded in BHI agar and incubated at 37 ° C for 48 hours. The UFC / mL colony forming units were counted. Results: Brilux® solution (0,005%) showed a slight growth for Streptococcus mutans (10200 CFU / ml) and Candida albicans (1200 CFU / ml). Conclusion: Colgate Periogard® and Brilux® Sanitary Water (1%) were similarly effective in disinfecting the brushes. Hypochlorite is a low cost, easily accessible substance and a good candidate to be adopted for the storage and cleaning indication of brushes(AU)

Introducción: la correcta utilización de técnicas y materiales de higiene son algunos de los factores que influencian positivamente la salud bucal. El mal acondicionamiento e higienización de los cepillos dentales pueden contribuir a la reincidencia de infecciones bucofaríngeas. Objetivo: evaluar, in vitro, el potencial de descontaminación de dos diluciones de hipoclorito de sodio en cepillos dentales. Materiales y Métodos: los cepillos fueron inoculados con Escherichia coli, Candida albicans, Streptococcus mutans y Pseudomonas aeruginosa, durante 30 segundos. En la mayoría de los casos, se observó un aumento en la concentración de agua potable en el agua potable, con una concentración de 1% y agua sanitaria, Brilux® con 2,5% de cloro activo diluida en agua destilada de acuerdo con la indicación del fabricante para desinfección de frutas y vegetales (0,005%). Las alícuotas de las soluciones fueron sembradas en BHI ágar e incubadas a 37ºC, por 48 horas. Se realizó el conteo de las Unidades Formadoras de Colonia UFC / mL. Resultados: para las soluciones Colgate Periogard® y Agua Sanitaria Brilux® (1%) no se observó crecimiento de microorganismos, ya la solución Sanitaria Brilux® (0,005%) presentó un discreto crecimiento para Streptococcus mutans (10200 UFC / ml) y Candida albicans (1200 UFC / ml). Conclusión: el Colgate Periogard® y el Agua Sanitaria Brilux® (1%) fueron similares en la desinfección de las escobillas. El hipoclorito es una sustancia de bajo costo, de fácil acceso y un buen candidato a ser adoptado para la indicación de almacenamiento y limpieza de los cepillos(AU)

Análise microbiológica in vitro do selamento bacteriano de implante osseointegrável e pilar protético intermediário / In vitro microbiological analysis of the bacterial sealing between dental implant and a prosthetic abutment

Objetivo: avaliar pela análise microbiológica in vitro a capacidade de selamento bacteriano de dois modelos de implante conexão cone-morse e hexágono externo. Material e métodos: foram utilizados 28 implantes osseointegráveis (Colosso Emfils ­ Itu/SP, Brasil) divididos em dois grupos (14 implantes cada), nos quais os componentes protéticos foram parafusados com um torque de 20 Ncm, em um ambiente controlado e após contaminação propositada da parte interna dos implantes por Escherichia coli. As colônias bacterianas foram transportadas por meio de hastes confeccionadas por fios ortodônticos, previamente esterilizadas, e então fixados seus respectivos pilares protéticos. Em seguida, um microbrush umedecido em solução salina a 0,9% estéril foi levemente friccionado na interface da superfície externa implante/conector protético. Cada conjunto implante/componente protético foi imerso em um tubo de ensaio contendo 5 ml de caldo BHI, permanecendo imerso no meio de cultura. As amostras foram monitoradas em relação ao crescimento bacteriano. Resultados: após 14 dias, verificou-se que não houve contaminação em nenhum dos tipos de conexões. Conclusão: a utilização desses implantes já evitaria a contaminação bacteriana nos primeiros dias após a carga imediata, determinando assim o aumento do índice de sucesso desse procedimento.

Objective: to evaluate by in vitro microbiological analysis the bacterial sealing ability of two implant models (Morse cone and external hexagon connections). Material and methods: Twentyeight dental implants (Colosso Emfi ls ­ Itu/SP, Brazil) were divided into two groups (14 implants each) and the prosthetic components screwed with a 20 Ncm torque in a controlled environment and after deliberate contamination of the internal part of the implants by Escherichia coli. The bacterium strain was transported by orthodontic wire loops previously sterilized and then the prosthetic abutments were fastened. After, a microbrush moistened with a 0.9% saline sterile solution was lightly rubbed into the external implant/ prosthetic abutment surface. Each implant/prosthetic assembly was immersed in a test tube containing 5 ml of BHI broth remaining immersed in the culture medium. Samples were monitored for bacterial growth. Results: after 14 days, no contamination was observed in any of the implant connections. Conclusion: the use of these implants would already prevent bacterial contamination in the first days after immediate loading, thus increasing the success rate of this procedure.

Bacterial endotoxin adhesion to different types of orthodontic adhesives

Abstract Bacterial endotoxin (LPS) adhesion to orthodontic brackets is a known contributing factor to inflammation of the adjacent gingival tissues. Objective The aim of this study was to assess whether LPS adheres to orthodontic adhesive systems, comparing two commercial brands. Material and Methods Forty specimens were fabricated from Transbond XT and Light Bond composite and bonding agent components (n=10/component), then contaminated by immersion in a bacterial endotoxin solution. Contaminated and non-contaminated acrylic resin samples were used as positive and negative control groups, respectively. LPS quantification was performed by the Limulus Amebocyte Lysate QCL-1000™ test. Data obtained were scored and subjected to the Chi-square test using a significance level of 5%. Results There was endotoxin adhesion to all materials (p<0.05). No statistically significant difference was found between composites/bonding agents and acrylic resin (p>0.05). There was no significant difference (p>0.05) among commercial brands. Affinity of endotoxin was significantly greater for the bonding agents (p=0.0025). Conclusions LPS adhered to both orthodontic adhesive systems. Regardless of the brand, the endotoxin had higher affinity for the bonding agents than for the composites. There is no previous study assessing the affinity of LPS for orthodontic adhesive systems. This study revealed that LPS adheres to orthodontic adhesive systems. Therefore, additional care is recommended to orthodontic applications of these materials.

Análise da contaminação microbiológica de diferentes dentifrícios / Microbiological contamination evaluation of different dentrifices

Introdução: A avaliação microbiológica em produtos de higiene pessoal constitui uma etapa importante no que se refere à segurança do usuário e à qualidade do produto, visto que a carga microbiana elevada pode acarretar problemas de saúde, especialmente em pessoas imunocomprometidas. Objetivo: Verificar o cumprimento das exigências acerca da qualidade microbiológica de cremes e géis dentais adquiridos comercialmente. Material e método: Realizou-se a contagem de bactérias e fungos viáveis totais e pesquisa dos patógenos E. coli, Salmonella sp., S. aureus e P. aeruginosa em 21 amostras. Resultado: Das amostras analisadas, 52,0% apresentaram crescimento microbiano e 28,6% e 0,21% apresentaram contaminação fúngica e bacteriana, respectivamente, acima dos limites descritos na Farmacopeia Brasileira para preparações de uso tópico (máximo permitido 2 × 102 UFC/g de bactérias e 2 × 101 UFC/g de fungos). Nenhuma amostra apresentou os patógenos pesquisados E. coli, Salmonella sp., S. aureus e P. aeruginosa. Conclusão: Estes resultados indicam que muitos produtos disponíveis no mercado apresentam qualidade inadequada, demonstrando falhas no controle de qualidade. Para prevenir esta situação, faz-se necessária fiscalização rigorosa e adoção de medidas regulamentadoras e educacionais aliadas ao seguimento das Boas Práticas de Fabricação pelas indústrias fabricantes.

Introduction: Microbiological evaluation in personal care products is important to guarantee user safety and product quality since microbial contamination elicits health problems especially in immunocompromised patients. Objective: To verify the compliance with the requirements regarding the microbiological quality of creams and dental gels acquired commercially. Material and method: Microbiological contamination was performed through total bacterial and fungal viable count and research of E. coli, Salmonella sp., S. aureus and P. aeruginosa in twenty-one samples. Result: 52.0% of sample presented microbial growth, and 28.6% and 0.21% presented fungal and bacterial contamination, respectively, exceeding the limits described in Brazilian Pharmacopoeia for topical preparations (maximum allowable 2 × 102 CFU / g of bacteria and 2 × 101 CFU / g yeast). None of the researched pathogens E. coli, Salmonella sp., S. aureus and P. aeruginosa were found. Conclusion: These results indicate that many products available in the market present inadequate quality, demonstrating quality control failures. Rigorous inspection and adoption of regulatory and educational measures aligned with the compliance of Good Manufacturing Practices by manufactures are needed to prevent this situation.

Influência da galectina-3 na resposta de neutrófilos a patógenos periodontais / Influence of galectin-3 on neutrophil response to periodontal pathogens

Galectina-3, uma proteína que se liga a -galactosídeos, é expressa por neutrófilos e inúmeras evidências indicam que esta molécula atua como uma possível reguladora da resposta imune. Sabe-se que galectina-3 ao ligar com LPS pode levar a formação de oligômeros, que podem alterar o limiar de ativação de células da resposta imune inata. Apesar de existirem diversos estudos que mostram a influência de galectina-3 na resposta de neutrófilos frente a componentes bacterianos, os resultados são em sua maioria contraditórios e inconclusivos. Para elucidar a influência da galectina-3 na reposta imune inata a patógenos periodontais, o presente trabalho avaliou a atividade antimicrobiana in vitro de neutrófilos, isolados de camundongos selvagens (WT) ou geneticamente deficientes de galectina-3 (Gal-3KO), previamente estimulados com LPS de Aa e Pg. Os resultados não evidenciaram diferenças significativas no número de unidades formadoras de colônia (UFC) recuperadas das culturas de neutrófilos provenientes de animais deficientes de galectina-3 e do grupo controle (WT). Contudo, a estimulação de neutrófilos com LPS por 18 horas levou a redução no número de UFC recuperadas das culturas, quando comparado com as culturas estimuladas com LPS por apenas 3 horas.

Galectin-3, a protein that binds -galactosides, is expressed by neutrophils and numerous evidences indicate that this molecule acts as a possible regulator of the immune response. It is known that galectin-3 binding to LPS can lead to the formation of oligomers and thus changing the activation threshold of cells of the innate immune response. Although there are several studies that show the influence of galectin-3 in neutrophil response against bacterial components, the results are conflicting and inconclusive in their majority. To elucidate the influence of galectin-3 in the innate immune response to periodontal pathogens, the present study evaluated the in vitro antimicrobial activity of neutrophils, isolated from wild-type or galectin-3 deficient mice, previously stimulated with LPS of Aa and Pg. The results showed no significant differences in the number of colony forming units (CFU) recovered from cultured galectin-3 deficient neutrophils or control group. However, in a 18 hours time course of LPS stimulation, we observed reduction in the number of CFU, when compared to 3 hours of LPS stimulation.

Utilização do hipoclorito de sódio na descontaminação de escovas dentais: estudo in vitro / The use of sodium hypochlorite for toothbrushes decontamination: in vitro study

Introdução: A escovação dentária é um método utilizado para controle do biofilme dental; entretanto, as escovas dentais tornam-se um meio de contaminação de microrganismos após seu uso, com lacunas importantes em relação a estes métodos de desinfecção, principalmente no uso coletivo. Objetivo: O objetivo desta pesquisa foi avaliar a descontaminação de escovas dentais contaminadas in vitro, utilizando-se hipoclorito de sódio 0,08% em diferentes períodos de tempo (5, 10 e 15 minutos). Material e método: Foram utilizadas, nesta pesquisa, 72 escovas dentais distribuídas em seis grupos, levando-se em conta o microrganismo utilizado para contaminação, sendo: grupo 1, contaminadas com Escherichia coli; grupo 2, com Stafilococcus aureus; grupo 3, com Streptococcus pyogenes; grupo 4, com Enterococus faecalis; grupo 5, com suspensões de todas as bactérias, e grupo 6, o grupo-controle. Após a contaminação, os grupos foram imersos na solução de hipoclorito de sódio a 0,08% por períodos de 5, 10 e 15 minutos, sendo considerado positivo para desinfecção a não turvação do meio de imersão. Resultado: No tempo de imersão de 5 minutos, ocorreu a desinfecção dos grupos 2 e 3; em 10 minutos, houve desinfecção dos grupos 1,2 e 3; após 15 minutos de imersão, ocorreu a desinfecção de todos os cinco grupos. Conclusão: O uso de hipoclorito de sódio 0,08% foi efetivo na descontaminação de escovas dentais contaminadas com bactérias Escherichia coli, Stafilococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Enterococcus faecalis, num tempo de imersão de 15 minutos.

Aim: Tooth brushing is a method used to control the dental biofilm; however, toothbrush can be a contamination medium by microorganisms after its utilization, with significant weaknesses in relation to those disinfection methods, mainly on collective use. Objective: This study had as objective to evaluate the decontamination of toothbrushes contaminated in vitro using 0,08% sodium hypochlorite during different periods (5, 10 and 15 minutes). Material and method: It was studied 72 toothbrushes distributed in 6 groups according to the microorganism used for contamination, as follow: group 1 for Escherichia coli; group 2 for Stafilococcus aureus; group 3 for Streptococcus pyogenes; group 4 for Enterococus faecalis; group 5 for a mix of all bacteria; and group 6 for control group. After contamination, all groups were immersed into 0,08% sodium hypochlorite solution during 5, 10 and 15 minutes, and it was considered as positive for disinfection no turbidity of the immersion medium. Result: During the period of 5 minutes in immersion, it occurred the disinfection of the groups 2 and 3; during 10 minutes period, there was the disinfection of the groups 1, 2 and 3; after 15 minutes in immersion, all the 5 groups were disinfected. Conclusion: The use of 0,08% sodium hypochlorite was effective in the decontamination of the toothbrushes contaminated by Escherichia coli, Stafilococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Enterococcus faecalis, during an immersion period of 15 minutes.

QMix® irrigant reduces lipopolysacharide (LPS) levels in an in vitro model

AbstractThe presence of endotoxin inside the root canal has been associated with periapical inflammation, bone resorption and symptomatic conditions.Objectives To determine, in vitro, the effect of QMix® and other three root canal irrigants in reducing the endotoxin content in root canals.Material and Methods Root canals of single-rooted teeth were prepared. Samples were detoxified with Co-60 irradiation and inoculated with E. coli LPS (24 h, at 37°C). After that period, samples were divided into 4 groups, according to the irrigation solution tested: QMix®, 17% EDTA, 2% chlorhexidine solution (CHX), and 3% sodium hypochlorite (NaOCl). LPS quantification was determined by Limulus Amebocyte Lysate (LAL) assay. The initial counting of endotoxins for all samples, and the determination of LPS levels in non-contaminated teeth and in contaminated teeth exposed only to non-pyrogenic water, were used as controls.Results QMix® reduced LPS levels, with a median value of 1.11 endotoxins units (EU)/mL (p<0.001). NaOCl (25.50 EU/mL), chlorhexidine (44.10 EU/mL) and positive control group (26.80 EU/mL) samples had similar results. Higher levels were found with EDTA (176.00 EU/mL) when compared to positive control (p<0.001). There was no significant difference among EDTA, NaOCl and CHX groups. Negative control group (0.005 EU/mL) had statistically significant lower levels of endotoxins when compared to all test groups (p<0.001).Conclusion QMix® decreased LPS levels when compared to the other groups (p<0.001). 3% NaOCl, 2% CHX and 17% EDTA were not able to significantly reduce the root canal endotoxins load.

Efeito do exercício físico na capacidade fagocítica dos macrófagos: comparação entre ratos jovens e idosos / Physical exercise effect in the phagocytic capacity of the macrophages: comparison between young and old mice

Em animais, os protocolos de Treinamento Físico Crônico (TF) aeróbio de nível moderado têm sido relacionados com a melhora da capacidade do sistema imunológico, como por exemplo o aumento dos leucócitos e a maior produção de citocinas e de oxido nítrico. Durante o envelhecimento, ocorre uma desregulação do sistema imunológico, conhecido como Imunossenescência, a qual contribui para o aumento da suscetibilidade a infecções, câncer e autoimunidade, e redução da resposta vacinal. Assim, o presente estudo verificou os resultados do TF sobre o sistema imunológico, avaliando a capacidade fagocítica dos macrófagos peritoneais oriundos de animais jovens e idosos. MATERIAL E MÉTODOS: Foram utilizados ratos da linhagem Wistar com 60 dias (Jovens) e com 14 meses de idade (Idosos), divididos em quatro grupos: Jovens Sedentários (JS) e Treinados (JT), e Idosos Sedentários (IS) e Treinados (IT). O protocolo de TF foi realizado através do exercício de nível por meio de natação por 45 minutos, três vezes na semana, por oito semanas consecutivas. Após, os macrófagos peritoneais foram desafiados em vitro, durante 30 e 120 minutos, com Escherichia Coli (E. coli) ou Candida albicans (C. albicans), previamente corados com FITC. Células com microrganismos internalizados foram quantificadas por meio de microscopia de fluorescência. RESULTADOS: Após o protocolo de EF, o percentual de macrófagos peritoneais com microrganismos internalizados, obtidos a partir dos ratos jovens ou idosos, foi maior (p < 0,05) em relação aos sedentários. Estes achados foram verificados tanto após desafio com bactérias E. coli quanto com fungos C. albicans, e independente do período de desafio. Os valores obtidos em 120 minutos foram superiores que aqueles correspondentes aos 30 minutos de desafio. Após o EF, os valores percentuais de macrófagos com microrganismos internalizados foram maiores entre os idosos que aqueles observados entre os jovens, independente do período de desafio...

In animals, the aerobic physical training (PT) of moderate level have been related with the improvement of the immunologic system capacity, like the increase of leukocytes and a higher production of cytokines and nitric oxide. While ageing, there is a deregulation of the immunologic system, known as Immunosenescence, which contributes to the increasing of the susceptibility to infections, cancer and autoimmunity, and the vaccine response. Thus, the present study examined the results of PF on the immune system, evaluating the phagocytic capacity of peritoneal macrophages derived from young and old animals. Material and Methods: Young (60-day old) and old (14-month old) Wistar mice were divided in four different groups: Sedentary Youngsters (SY) and Trained Youngsters (TY), Sedentary Elderly (SE) and Trained Elderly (TE). The physical training was based in an moderate aerobic PE protocol through swimming sessions of 45 minutes each, three times a week, for eight consecutive weeks. After that, the peritoneal macrophages were challenged in vitro, during 30 to 120 minutes, with Escherichia Coli (E.coli) or Candida albicans (C.albicans), previously dyed with FITC. Internalized microorganism cells were quantified through fluorescence microscopy. Results:After the PE protocol, the percentage of peritoneal macrophage with internalized microorganisms, from young and old mice, was higher (p<0,05) related to the sedentary. These findings were verified either after the challenge with E. coli bacteria or with C. albicans fungi, independently of the challenge time. The values obtained in 120 minutes were higher than those obtained in the 30 minutes of challenge. After the PE, the percentage values of macrophage with internalized microorganisms were higher among the elderly than those observed among the youngsters, independently of the challenge time (p < 0,05). These age differences also occurred among the sedentary animals...

Carbono tipo diamante em componentes de implantes dentários: avaliação das propriedades antimicrobianas e de adesão de Escherichia coli / Diamond-like carbon on dental implants components: evaluation of antimicrobial and adhesion properties of Escherichia coli

O estudo de filmes de Carbono tipo Diamante é objeto de pesquisas devido às suas diferentes propriedades incluindo propriedades antibacterianas. No tratamento reabilitador com implantes, podem ocorrer complicações, proporcionando a infiltração de microrganismos orais para a interface Implante-Componente protético. O objetivo deste estudo foi avaliar propriedades de molhabilidade e energia livre de superfície a partir dos valores do ângulo de contato; propriedades antimicrobiana, de bioadesão e citotoxicidade de discos de titânio recobertos com DLC. Escherichia coli foi mantida em meio BHI a 37ºC por 3 h e 24 h para teste antimicrobiano. Para adesão, os discos foram mantidos em cultura de E. coli por 90 minutos a 37ºC e 20 minutos em ultrassom. A capacidade de prevenção na migração de bactérias para o interior da interface Implante-Componente protético foi realizado em implantes Hexágono Externo, conectados com torque de 32N e deixados em contato com E. coli por 24h, e Reação em Cadeia da Polimerase semi-quantitativo foi realizado para confirmação da esterilidade da técnica. Foram quantificados em UFC/mL em BHI Ágar para o teste antimicrobiano, adesão e infiltração bacteriana. Para citotoxicidade foi utilizado queratinócitos humanos (HaCat) cultivados em meio DMEM mantidos em atmosfera com 5% de CO2 a 37°C e avaliados pelo teste colorimétrico MTT. Os resultados de molhabilidade, teste antimicrobiano, teste de adesão e Infiltração bacteriana não apresentaram diferença estatisticamente significante entre os grupos. As superfícies de titânio e recobertas com DLC apresentaram uma leve diminuição na viabilidade celular com diferença estatisticamente significante ao grupo controle. O DLC apresenta-se como material biocompatível com leve grau de citotoxicidade que não modifica as propriedades de superfície, não apresenta propriedades antimicrobianas, não interfere na adesão bacteriana de E. coli e não inibem a infiltração bacteriana na interface implante-componente protético

The study of DLC films is the subject of research due to their different properties including antibacterial properties. Rehabilitator in implant treatment, complications may occur, providing the infiltration of oral microorganisms for implant- abutmente interface. The aim of this study was to evaluate properties and wetting surface free energy from the values of the contact angle; antimicrobial properties bioadhesion and cytotoxicity of titanium discs coated with DLC. Escherichia coli was maintained on BHI at 37 ° C for 3 h and 24 h for antimicrobial test. For adhesion test, the discs were maintained in culture of E. coli for 90 minutes at 37 ° C and 20 minutes inside ultrasound. The ability to prevent the migration of bacteria into the implant - abutment interface was performed in dental implants External Hexagon connected with a torque of 32N and left in contact with E. coli for 24 h , and Polymerase Chain Reaction semi -quantitative was performed to confirm the sterility of the technique. Were quantified in CFU / ml in BHI agar for antimicrobial test, bacterial adhesion and infiltration. Cytotoxicity was performed using human keratinocytes ( HaCaT ) cultured in DMEM maintained in an atmosphere of 5% CO2 at 37 ° C and evaluated by the MTT colorimetric assay. The results of wettability, antimicrobial test, adhesion test and bacterial infiltration showed no statistically significant difference between the test groups. The surfaces of titanium and coated with DLC showed a slight decrease in cell viability with a statistically significant difference to the control group. The DLC is presented as biocompatible material with mild cytotoxicity without changing the surface properties, has no antimicrobial properties, does not interfere with bacterial adherence for E. coli and do not inhibit bacterial infiltration into the implant-abutment interface

Efeito de um curcumin modificado quimicamente sobre a reabsorção óssea inflamatória e apoptose: estudos in vivo e in vitro / Effect of a novel chemically modified curcumin in inflammatory bone resorption and apoptosis: in vivo and in vitro study

Curcumin (diferuloylmethane) é um composto polifenólico com efeito antiinflamatório e capacidade de prevenir a atividade osteolítica verificados em modelos in vitro e in vivo. No entanto, uma importante limitação no uso do curcumin são suas pobres propriedades farmacológicas, incluindo absorção e biodisponibilidade. Assim, é de grande interesse a síntese de análogos do curcumin com características bioquímicas que favoreçam suas propriedades farmacológicas, mantendo as características de segurança e efetividade. O objetivo foi avaliar o efeito de composto sintético análogo ao curcumin (CMC 2.24) sobre o processo inflamatório e osteoclastogênese em modelo de doença periodontal in vivo. A doença periodontal foi induzida em ratos por meio de injeção de 30 ug de LPS de Escherichia coli, realizadas 3x/semana durante 2 semanas. Os controles, contralaterais, receberam injeções do mesmo volume do veículo de diluição do LPS (PBS). A administração de CMC (30mg/kg) e curcumin (100mg/kg) foram feitas via intragástrica (gavagem oral) diariamente, durante 15 dias. A expressão de fosfatase ácida tartarato resistente (TRAP), indicativa de diferenciação osteoclástica, foi avaliada por meio de imunohistoquímica, a proporção de células inflamatórias e conteúdo de colágeno, em cortes corados com H/E, por estereometria, a fragmentação do DNA celular indicativa de apoptose foi avaliada por método TUNEL e a reabsorção óssea por análise de microtomografia computadorizada. Nos experimentos in vitro, células derivadas da medula óssea de camundongos C57BL/6, foram estimuladas com RANKL e tratadas com curcumin e CMC em concentração de 10µM, em diferentes períodos. O número de osteoclastos foi avaliado pela visualização do anel de actina, e a expressão gênica de MMP-9, indicativa de atividade osteoclástica, foi avaliada por RT-qPCR. De acordo com os resultados, tanto CMC quanto curcumin reduziram significativamente o infiltrado inflamatório (p<0.05) e aumentaram a proporção de fibras colágenas nos tecidos gengivais (p<0.05), em comparação ao controle-veículo. CMC, mas não curcumin, diminuiu significativamente (p<0.05) a quantidade de células TRAP positivas e a perda óssea alveolar; porém apenas curcumin reduziu significativamente (p<0.05) o número de células apoptóticas (TUNELpositivas). In vitro, tanto CMC quanto curcumin inibiram a diferenciação osteoclástica induzida por RANKL (p<0.05), independentemente do momento em que CMC e/ou curcumin foram adicionados às culturas. No entanto, apenas CMC reduziu significativamente (p<0.05) a expressão de MMP-9 nestas culturas induzidas por RANKL. Estes resultados sugerem que curcumin e CMC apresentam diferenças em seus efeitos biológicos relacionados à reabsorção óssea inflamatória neste modelo experimental de doença periodontal. Concluímos que CMC, mas não curcumin, inibe significativamente a reabsorção óssea inflamatória por um mecanismo que pode envolver a modulação da atividade de osteoclastos

Curcumin (diferuloylmethane) is a polyphenolic compound with anti-inflammatory properties and the ability to prevent the osteolytic activity both in vitro and in vivo models. The clinical use of curcumin is limited by its poor pharmacological properties, including absorption and bioavailability. This justifies the interest on the synthesis of curcumin analogues with improved pharmacological properties that retain both safety and biological properties of the natural compound. The aim was to evaluate the effect of a curcumin synthetic analogue (CMC 2.24) on RANKL-induced osteoclastogenesis in vitro and on inflammatory-driven bone resorption in a periodontal disease model in vivo. Periodontal disease was induced in rats by injections of LPS from Escherichia coli (30 ug/injection) directly on the gingival tissues, performed 3x/week during 2 weeks. The opposite site (controls) received injections of the same volume of vehicle (PBS). CMC (30 mg/kg) and curcumin (100 mg/kg) were administered by oral gavage daily, during this 2 week experimental period. Tartrate resistant acid phosphatase (TRAP) expression, which is indicative of osteoclast differentiation was assessed by immunohistochemistry, bone resorption was measured by microCT and the proportion of inflammatory cells and collagen was assessed by stereometry on H/E-stained section. Apoptosis was assessed in the gingival tissues and alveolar bone by TUNEL staining. Bone marrow stromal cells from C56Bl/7 mice were stimulated with RANKL in the presence of M-CSF and treated with 10 µM of curcumin or CMC 2.24 at different time points over a 6-day period. The number of the osteoclasts identified by actin-ring formation was counted and gene expression of MMP-9, indicative of osteoclast activity, was assessed by RT-qPCR. Both curcumin and CMC significantly reduced the inflammatory infiltrate (p<0.05 vs vehicle control); however only CMC significantly increased the proportion of collagen fibers in gingival tissues (p<0.05 vs vehicle control). CMC, but not curcumin, decreased the number of TRAP positive cells (p<0.05) and the alveolar bone loss (p<0.05); however only curcumin reduced the number of TUNEL positive cells (p<0.05). In vitro, both CMC and curcumin decreased the number of osteoclasts (p<0.05); but only CMC reduced MMP-9 gene expression (p <0.05). The data suggests that although curcumin and CMC have different biological mechanisms of action, both presented promising therapeutic properties in the treatment of inflammatory diseases, due to inhibition of inflammatory responses and improved healing process. However, only CMC was effective in reducing inflammatorydriven bone resorption in this experimental model

Avaliação da eficácia de substâncias naturais antimicrobianas e seu efeito em determinadas propriedades do gesso tipo IV / Evaluation of the efficacy of natural antimicrobial substances and their effect on certain properties of type IV gypsum

O objetivo foi avaliar o efeito de desinfecção, de soluções incorporadas em gesso odontológico, contra um grupo de microrganismos, e verificar as alterações morfológicas e propiedades físicas e mecânicas do gesso. O digluconato de clorexidina (2%), óleo de melaleuca (20%); própolis em solução hidroalcoólica (14%); extrato de própolis seco (4,4% da massa de gesso) foram incorporados no gesso tipo IV. As propiedades antimicrobianas foram avaliadas por teste de difusão em ágar em 1 hora, 24 horas, e 7 dias após a confecção do modelo em gesso (n=8), para os microrganismos comuns da cavidade oral: Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis e Candida Albicans. As propriedades físicas e mecânicas do gesso modificado (n=10) foram avaliadas por: resistência à compressão, reprodução de detalhes, alteração dimensional, e tempo de presa, já as alterações morfológicas foram analisadas por meio de microscopia eletrônica de varredura. Foi observado que o digluconato de clorexidina á 2% foi eficaz contra todos os microrganismos, exceto Candida Albicans. O extrato hidroalcoólico de própolis foi eficaz para S.Aureus, porém com efeito antimicrobiano menor que o digluconato de clorexidina 2%. O extrato de própolis hidroalcoólico demonstrou efeito antimicrobiano somente para os microrganismos Candida Albicans, e S. Aureus. As alterações mecânicas e físicas encontradas com a incorporação de antimicrobianos ao gesso estão dentro das especificações da ADA, ISO e Anusavice & Phillips, citadas na literatura odontológica. Como conclusão a clorexidina á 2% tem ótimas propriedades antimicrobianas para ser incorporado ao gesso odontologico, e não apresentaram alterações mecânicas, físicas e morfológicas significativas.

This study evaluated the antimicrobial activity of disinfectant agents incorporated into type IV dental stone at the time of mixing against some microorganisms typically of oral cavity. 2% chlorhexidine digluconate solution (CHX), 20% tea tree oil (TTO),14% alcohol própolis extract, powder of própolis extract in 4.4% proportion of the dental stone mass and mixed with sterile distilled water was incorporate in dental stone type IV. The antimicrobial properties has evaluated for Agar diffusion test in 1 hour, 24 hours and 7 days, used for the following microorganisms: Escherichia coli, Staphylococcus Aureus, Bacillus subtilis and Candida albicans. The properties of modified gypsum (n = 10) were measured: compressive strength, detail reproduction, dimensional alterations, and setting time, since the morphological alterations were analyzed by scanning electron microscopy. CHX 2% incorporate in dental stone demonstrated antimicrobial activity against all microorganisms, with the exception of C. albicans. 14% alcohol própolis extract was effective for S.Aureus, therefore with lower effect when incorporated at dental stone. It showed statistical difference between disinfectant agents incorporated in dental stone group and control substance with paper for all groups with chlorhexidine digluconate 2%, except S.Aureus. 14% alcohol própolis extract in paper group was demonstrated antimicrobial activity against S.Aureus and C. albicans. The mechanical and physical changes found with the incorporation of antimicrobial agents to gypsum are within normal limits according to ADA specification, ISO, and Anusavice. It was demonstrated that 2% chlorhexidine digluconate has great antimicrobial propriedades to be incorporated into the gypsum dental, and did not present significant physical and mechanical changes. The study of other substances may have antimicrobial activity with higher concentrations, but more studies are needed

Caracterização da ação modulatória de citocinas inflamatórias pelo óleo de Melaleuca alternifolia e seus componentes (terpinen-4ol e alfa-terpineol) em macrófagos humanos ativados por lipopolissacarídeos de Porphyromonas gingivalis e Escherichia coli / Characterization of modulatory action of inflammatory cytokines by Melaleuca alternifolia oil and its components (terpinnen-4ol and alpha-terpineol) in human macrophages activated lipopolysaccharide of Porphyromonas gingivalis and Escherichia coli

O óleo de Melaleuca alternifolia (TTO) tem propriedades antimicrobianas e somado a isso, sugere-se que apresente características anti-inflamatórias. Este estudo investigou o potencial do TTO e seus componentes (terpinen-4-ol e alfa-terpineol) em modular citocinas e os mecanismos intracelulares participantes desta ação. Células monocíticas (U937) foram diferenciados em macrófagos com 40ng/mL de 12-miristato 13-acetato de forbol. A citotoxicidade dos óleos foi determinada com o ensaio de redução de Metil-tetrazolium (MTT). A habilidade em modular a produção das citocinas após o estímulo com LPS de Porphyromonas gingivalis (agonista de TLR2) e Escherichia coli (agonista de TLR4), foi estabelecida por meio de ensaios ELISA. Os efeitos dos compostos testados, na ativação de vias de sinalização intracelular, foram avaliados por western blot. As concentrações selecionadas pelo MTT foram: 0,015% e 0,004% para o TTO, 0,059% e 0,0073% para o terpinen-4-ol e 0,0064% e 0,0007% para alfa-terpineol. A influência do TTO na produção de citocinas foi mais marcante após estímulo de TLR4, com diminuição de IL-1ß, IL-6 e IL-10. O terpinen-4-ol reduziu a produção de INF-γ, IL-1ß, IL-6, IL-4, IL-10 e IL-17 após ativação tanto TLR4 quanto TLR2. O alfa-terpienol atua após ativação de TLR2 e 4 inibindo a produção de IL-1ß, IL-6 e IL-10. Nenhuma das vias analisadas (NF-kB, ERK, p38 MAP-Kinase) sofreram interferência dos óleos. O TTO tem ação modulatória inibindo produção de citocinas inflamatórias e o terpinen-4-ol é o seu maior componente ativo, entretanto este mecanismo não ocorre via inibição de NF-kB, ERK e p38 MAP-Kinase

The oil of Melaleuca alternifolia (TTO) has antimicrobial properties, coupled with this, it is suggested that it also has antiinflammatory characteristics. This study investigated the potential of TTO and its components (terpinen-4-ol and alphaterpineol) and cytokines in modulating the intracellular mechanisms that participate in this action. Monocytic cells (U937) were differentiated into macrophages with 40ng/mL 12-myristate 13-acetate phorbol. The olil cytotoxicity was determined with the reduction assay Methyl-tetrazolium (MTT). The ability to modulate cytokine production after stimulation with LPS of porphyromonasgingivalis (TLR2 agonist) and Escherichia coli (TLR4 agonist), was established by ELISA assays. The effects of the tested compounds, the activation of intracellular signaling pathways were evaluated by western blot. The concentrations selected by the MTT were 0.015% and 0.004% for the TTO, 0.059% and 0.0073% to terpinen-4-ol and 0.0064% and 0.0007% for alpha-terpineol. The influence of TTO in cytokine production was more marked after TLR4 stimulation, with decreased IL-1ß, IL-6 and IL-10. The terpinen-4-ol reduced the production of INF-γ, IL-1ß, IL-6, IL-4, IL-10 and IL-17 activation after both TLR4 as TLR2. The alpha-terpienol acts upon activation of TLR2 and four inhibiting the production of IL-1ß, IL-6 and IL-10. None of the analyzed pathways (NF-kB, ERK, p38 MAP-Kinase) suffered interference oils. The TTO has modulatory action by inhibiting the production of inflammatory cytokines and terpinen-4-ol is your greatest asset component however, this mechanism does not occur via inhibition of NF-kB, ERK and p38 MAP-kinase

Effect of Zingiber officinale and propolis on microorganisms and endotoxins in root canals

The purpose of this study was to evaluate the effectiveness of glycolic propolis (PRO) and ginger (GIN) extracts, calcium hydroxide (CH), chlorhexidine (CLX) gel and their combinations as ICMs (ICMs) against Candida albicans,Enterococcus faecalis, Escherichia coli and endotoxins in root canals. Material and Methods: After 28 days of contamination with microorganisms, the canals were instrumented and then divided according to the ICM: CH+saline; CLX, CH+CLX, PRO, PRO+CH; GIN; GIN+CH; saline. The antimicrobial activity and quantification of endotoxins by the chromogenic test of Limulus amebocyte lysate were evaluated after contamination and instrumentation at 14 days of ICM application and 7 days after ICM removal. Results and Conclusion: After analysis of results and application of the Kruskal-Wallis and Dunn statistical tests at 5% significance level, it was concluded that all ICMs were able to eliminate the microorganisms in the root canals and reduce their amount of endotoxins; however, CH was more effective in neutralizing endotoxins and less effective against C. albicans and E. faecalis, requiring the use of medication combinations to obtain higher success.

Interação entre Escherichia coli e Candida albicans em biofilmes formados in vitro: análise da viabilidade celular por método colorimétrico / Interaction between Escherichia coli and Candida albicans in biofilms formed in vitro: analysis of cell viability by the colorimetric assay

As interações entre fungos e bactérias estão presentes na natureza e têm grande relevância médica e ambiental. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos de Escherichia coli sobre os biofilmes de Candida albicans formados in vitro. Foram desenvolvidos biofilmes heterotípicos com a associação de C. albicans e E. coli e biofilmes monotípicos deC. albicans (grupo controle). Foi utilizada uma suspensão padronizada de C. albicans contendo 107 células.mL?1 para formação dos biofilmes. Para analisar os efeitos de E. coli no biofilme de C. albicans, foram testadas diferentes densidades celulares da suspensão de E. coli (107, 106 e 105 células.mL?1). Após 90 minutos e 24 horas da formação do biofilme, a viabilidade celular de C. albicans foi quantificada utilizando-se o ensaio colorimétrico XTT (2 metoxi 4 nitro 5 sulfofenil 5 fenilalanina carbonil 2H tetrazolium hidróxido). Os dados foram submetidos à Análise deVariância ANOVA e ao teste de Tukey, com significância de 5% (p < 0,05). Após 90 minutos da formação do biofilme, observou-se que a viabilidade celular de C. albicans dos biofilmes heterotípicos foi semelhante ao monotípico. A análise de 24 horas demonstrou que a viabilidade celular de C. albicans foi maior no biofilme monotípico emrelação aos biofilmes heterotípicos; entretanto, essa diferença não foi estatisticamente significante. Além disso, não foram observadas diferenças estatísticas entre as densidades celulares de E. coli testadas nos biofilmes heterotípicos. Conclui-se que, dentro dos parâmetros utilizados, E. coli não inibiu a formação de biofilme por C. albicans.

The interactions between fungi and bacteria are present in nature and has medical and environmental importance. The aim of this study was to evaluate the effects of interaction between ATCC strains Candida albicans and Escherichia coli through the study of biofilms in vitro. For this study were developed biofilms formed by the association between C.albicans and E.coli and monotypic biofilms of C. albicans (control group). To evaluate the effects of E. coli in biofilms of C. albicans, we tested different cell densities of E.coli suspension (107, 106 and 105 cells.mL?1). After 90 minutes and 24 hours of biofilm formation, cell viability of C. albicans was quantified using the XTT (2 methoxy 4 nitro 5 sulfophenyl 5 phenylamino carbonyl 2H tetrazolium hydroxide) colorimetric assay. Data were submitted to ANOVA and Tukey?s test, with 5% of significance. After 90 minutes of Candidal biofilm formation, we observedthat cell viability of C. albicans heterotypic biofilms was similar to monotypic biofilm (control group). For the analysis of 24 hours, it was found that cell viability of C. albicans was higher in the monotypic biofilm if compared to heterotypic biofilm, however this difference was not statistically significant. In addition, there were no statisticaldifferences between E. coli different cell densities tested in heterotypic biofilms. According to the methods used, we can conclude that E. coli did not inhibit the biofilm formation by C. albicans.

Efeito da terapia fotodinâmica mediada pelo azul de metileno sobre bactérias cariogênicas / Effect of photodynamic therapy mediated by methylene blue in cariogenic bacteria

Objetivos: O objetivo do presente estudo foi avaliar a infl uência das alterações na concentração defotossensibilizador e fl uência de energia de irradiação de laser vermelho (660 nm) na viabilidade de culturasbacterianas derivadas de dentina cariada humana após a aplicação da terapia fotodinâmica (TFD)mediada pelo azul de metileno (AM). Material e método: Utilizaram-se culturas bacterianas derivadasde amostras de dentina cariada de pacientes e uma linhagem de Escherichia coli. Utilizaram-se formulaçõesde azul de metileno nas concentrações de 25 e 50 μg/mL para a aplicação da TFD. Foi utilizada fonte delaser vermelho (660 nm) na potência de 40 mW com três fl uências diferentes (6,8; 20,55 e 61,65 J/cm²).Resultados: O tratamento com AM nas duas concentrações testadas (25 e 50 μg/mL) não apresentouatividade antimicrobiana em todas as culturas bacterianas testadas. Para as culturas bacterianas derivadasde dentina cariada, a fl uência de energia de 6,8 J/cm² não promoveu efeito fotodinâmico quando combinadacom AM; as energias de 20,55 e 61,65 J/cm² foram efetivas na redução da carga microbiana, sendoa fl uência de 61,65 J/cm² a mais indicada para a aplicação da TFD antimicrobiana. As culturas de E. coliforam suscetíveis à atividade antibacteriana da TFD nas três fl uências de energia testadas. Conclusão:Os resultados demonstram que a TFD mediada pelo AM nas duas concentrações testadas (25 e 50 μg/mL)e combinada com a irradiação de laser nas fl uências de 20,55 e 61,65 J/cm², promoveu uma diminuiçãosignifi cativa da carga bacteriana das culturas derivadas de amostras de dentina cariada testadas.

Objectives: The aim of this study was to evaluate the effi cacy of antimicrobial photodynamic therapy (PDT)mediated by methylene blue (MB) in two concentrations (25 e 50 μg/mL) and different red laser (660 nm) energyirradiation on bacterial suspensions derived from infected carious dentine samples. Material and method:Bacterial suspensions derived from infected dentine samples and Escherichia coli cell suspensions were used inthis study. MB in two concentrations (25 e 50 μg/mL) alone or in combination with red laser (660 nm) irradiationin different energies (6,8; 20,55 e 61,65 J/cm²) were used to apply PDT in the bacterial suspensions. Results:MB alone had no signifi cant antibacterial effect against the tested bacterial suspensions. In bacterial suspensionsderived from infected carious dentine, MB combined with 6,8 J/cm² laser irradiation did not show the antibacterialeffect of PDT. Laser irradiation with 20,55 e 61,65 J/cm² combined with MB treatment, produced a signifi cantantibacterial effect, but 61,65 J/cm² was the most effective tested laser energy. Bacterial suspensions of E. coli weredecreased their bacterial load in all tested laser energies. Conclusion: The results presented in this study suggestthat PDT mediated by MB in both tested concentrations (25 e 50 μg/mL) could be used in effectively antibacterialclinical protocols in dentistry.

Antimicrobial action of root canal filling pastes used in deciduous teeth / Ação antimicrobiana de pastas obturadoras usadas em dentes decíduos

Purpose: This study assessed the antimicrobial effectiveness of an iodoform-based paste (Guedes-Pinto Paste, GPP) and a paste modified by the addition of a 2% chlorhexidine gluconate gel (CHX) to replace the camphorated parachlorophenol component of the original GPP. Methods: The antimicrobial action was tested against the following microorganisms: Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus oralis, Enterococcus faecalis, Escherichia coli and Bacillus subtilis. In the agar diffusion test, 18 Petri plates with 20 mL of BHIA were inoculated with 0.1 mL of the microbial suspensions. Paper disks were immersed in the experimental solutions for 1 min and were then placed over the BHIA surface in each agar plate. The plates were maintained for 1 h at room temperature and then incubated at 37ºC for 48 h. The diameters of the microbial inhibition halos were measured around the paper disks containing the substances. Data were analyzed using the Mann-Whitney U-test (alpha=0.05). Results: Antimicrobial action was observed for the GPP and CHX pastes, which presented absence of turbidity for almost all microorganisms. No statistically significant difference in the antimicrobial action was found between GPP and CHX. Conclusion: Both pastes present similar antimicrobial effectiveness against several microorganisms commonly found in endodontic infections in deciduous teeth.

Objetivo: Este estudo avaliou a ação antimicrobiana de pastas, uma à base de iodofórmio conhecida por Pasta Guedes-Pinto (PGP) e outra modificada pela adição de digluconato de clorexidina (CHX) a 2% em substituição ao paramonoclorofenol canforado da formulação original da PGP. Metodologia: A ação antimicrobiana das duas pastas foi testada contra Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus oralis, Enterococcus faecalis, Escherichia coli e Bacillus subtilis. O método empregado foi o de Diluição em Meio Sólido, Difusão em Ágar. Dezoito placas de Petri com 20 mL de BHIA foram inoculados com 0,1 mL das suspensões microbianas. Discos de papel foram imersos nas soluções experimentais por 1 min e colocados sobre a superfície de BHIA em cada placa. As placas foram mantidas em temperatura ambiente por 1 h e então incubadas a 37ºC por 48 h. O diâmetro da inibição microbiana foi medida ao redor dos discos de papel. Os dados foram pelo teste U de Mann-Whitney (alfa=0,05). Resultados: A PGP teve ação bacteriostática contra todos os microrganismos e também bactericida exceto para Enterococcus faecalis e Bacillus subtilis. A CHX apresentou ação bacteriostática e bactericida contra todos os microrganismos. Não houve diferença estatística significante quanto à efetividade antimicrobiana entre as pastas avaliadas. Conclusão: Ambas as pastas apresentaram ação antimicrobiana contra quase todos os microrganismos encontrados em infecções endodônticas de dentes decíduos.