Bactéria cromogênica associada a manchas negras / Black-spotted chromogenic bactéria

Objetivos: Este trabalho tem como objetivo avaliar a associação das bactérias Prevotella Melaninogênica e Actinomyces ao biofilme escuro em dentes permanentes. Relato de Caso: Um paciente apresentou manchas enegrecidas ao longo do contorno cervical dos dentes foi convidado a participar do presente estudo. Foi coletado com o auxílio de uma cureta estéril, uma parte deste biofilme que transferido para um eppendorff contendo soro fisiológico. O material coletado foi agitado em um Vórtex por 15 segundos e em seguida, inoculadas em 100 microlitros (µl) da solução em um meio de ágar sangue suplementado com Canamicina 5%, seguido de cultivo por 72 horas. A partir do crescimento bacteriano, as mesmas foram isoladas em ágar macconkey, chocolate e sangue em anaerobiose. Em seguida foram realizados testes de bioquimismo, utilizando-se os meios MIO (motilidade, indol e ornitina), citrato, TSI (triplo açúcar com ferro) e LIA (ágar lisina com ferro). Conclusão: Através das características clínicas associadas ao bioquimismo empregado nos testes, podemos concluir que a bactéria que está associada as manchas negras presentes no paciente é do gênero prevotella spp(AU)

Objectives: This study aims to evaluate the association of Prevotella Melaninogenic and Actinomyces bacteria with dark biofilm in permanent teeth. Case Report: A patient with black spots along the cervical contour of the teeth was invited to participate in the present study. After its clarification and acceptance, completing the IC, was collected with the aid of a sterile curette, a part of this biofilm that was inserted into an eppendorff containing saline. The collected material was vortexed for 15 seconds and then inoculated into 100 microliters (µl) of the solution in a 5% kanamycin supplemented blood agar medium, followed by cultivation for 72 hours. From bacterial growth, they were isolated on macconkey agar, chocolate and anaerobic blood. Biochemical tests were then performed using MIO (motility, indole and ornithine), citrate, TSI (triple sugar with iron) and LIA (iron lysine agar) media. Conclusion: Through the clinical characteristics associated with the biochemism employed in the tests, we can conclude that the bacteria that is associated with black spots present in the patient is of the genus prevotella spp(AU)

Efeito de análogos de curcumina, irradiados ou não por LED, como agentes antimicrobianos e indutores de proliferação e migração celular / Effect of curcumin analogues, irradiated or not by LED, as antimicrobial agents and inducers of cell proliferation and migration

O tratamento endodôntico de dentes permanentes jovens com infecções pulpares/periapicais antes de completar a rizogênese ainda é um desafio para a Endodontia e a Odontopediatria. Relatos científicos têm mostrado que a curcumina (CUR), um fitoquímico polifenólico, apresenta diversas propriedades terapêuticas, entre as quais, amplo espectro de ação antimicrobiana e a capacidade de induzir a proliferação e migração celular. Além disso, devido à sua capacidade excitatória na presença de luz, a CUR também tem sido utilizada como fotossensibilizante em terapia fotodinâmica associada ao LED (light emitting diode), promovendo aumento dos seus efeitos biológicos. Uma forma de aumentar seu potencial terapêutico e reduzir algumas limitações do uso da CUR é a síntese de análogos a partir de pequenas modificações químicas na estrutura original, entretanto, mantendo sua capacidade fotossensibilizante. O objetivo desse estudo foi avaliar a ação antimicrobiana e antibiofilme de análogos de curcumina sob a influência ou não do LED sobre microrganismos de interesse endodôntico e sua influência sobre a viabilidade, proliferação e migração de fibroblastos da linhagem L-929. Uma série de compostos análogos de CUR (PCR-4 H, PCR-3 OH, PCR-4 OH, PCR-3 OCH3, PCR-4 OCH3, PCR-3 acetil, PCR-4 acetil) foram sintetizados pela metodologia de Pabon. A atividade antimicrobiana da CUR e seus análogos foi determinada pelo ensaio de Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM) sobre Streptococcus mutans, Lactobacillus casei, Actinomyces israelii, Enterococcus faecalis e Fusobacterium nucleatum, sob a ação ou não do LED InGaN (nitreto de gálio e índio, com potência de saída de 100 mW/cm², ponta do LED com área de 0,78 cm², 60 s). A curcumina e seu análogo com melhor efeito antimicrobiano (PCR-3 OH) foi avaliado sobre o biofilme inicial (72h) e maduro (1 semana) dessas espécies em microplacas e sobre biofilmes multiespécies formados em túbulos dentinários por contagem das UFC/mL e por microscopia confocal, respectivamente, sob ação ou não do LED. Também foram avaliados quanto à citotoxicidade e a capacidade de induzir proliferação e migração em fibroblastos, por meio de ensaios de metiltetrazólio, azul de tripan e azul de Coomassie, respectivamente. Os dados foram avaliados estatisticamente (p<0,05). Dos 7 análogos de curcumina sintetizados, PCR-3 OH foi o único composto que apresentou atividade bactericida quando testado sobre as bactérias de interesse endodôntico selecionadas. Seu efeito foi potencializado na presença do LED, variando entre as espécies bacterianas. A curcumina teve efeito bactericida para as espécies S. mutans, A. israelii, L. casei e F. nucleatum, e em algumas delas, foi independente do LED. Ambos os compostos reduziram o crescimento dos biofilmes iniciais ou maduros, independente do LED. Entretanto, quando irradiados, o efeito dos compostos variou de acordo com a espécie bacteriana, sendo que A. israelii e S. mutans foram os mais afetados. Ambos os compostos reduziram significativamente os biofilmes multiespécies quando comparados ao controle sem tratamento, sendo que melhor efeito foi observado para PCR-3 OH. A curcumina foi considerada citocompatível a partir de 0,039µg/mL e PCR-3 OH a partir de 0,019 µg/mL. Houve redução significativa na viabilidade celular quando os compostos foram irradiados com LED nas concentrações 0,039 e 0,019 µg/mL. O LED, dentro dos parâmetros testados, reduziu significativamente a viabilidade, a proliferação e a migração celular, independente do composto ou tempo de exposição. Conclui-se que PCR-3 OH apresentou atividade bactericida e sobre biofilmes simples e multiespécies de bactérias de interesse endodôntico superior à CUR, principalmente sob ação do LED. Entretanto, sua citocompatiblidade foi inferior à da CUR. A presença do LED afetou a viabilidade, proliferação e migração dos fibroblastos, mostrando que os parâmetros utilizados para fins antimicrobianos não foram adequados para aplicação em células eucarióticas(AU)

Endodontic treatment of young permanent teeth with pulp / periapical infections before completing rhizogenesis is still a challenge for Endodontics and Pediatric Dentistry. Scientific reports have shown that curcumin (CUR), a polyphenolic phytochemical, has several therapeutic properties, including a broad spectrum of antimicrobial action and the ability to induce cell proliferation and migration. In addition, due to its excitatory capacity in the presence of light, CUR has also been used as a photosensitizer in photodynamic therapy associated with LED (light emitting diode), promoting an increase in its biological effects. One way to increase its therapeutic potential and reduce some limitations of the use of CUR is the synthesis of analogues from small chemical modifications in the original structure, however, maintaining its photosensitizing capacity. The aim of this study was to evaluate the antimicrobial and antibiofilm action of curcumin analogues under the influence or not of LED on microorganisms of endodontic interest and their influence on the viability, proliferation and migration of L-929 fibroblasts. A series of CUR analog compounds (PCR-4 H, PCR-3 OH, PCR-4 OH, PCR-3 OCH3, PCR-4 OCH3, PCR-3 acetyl, PCR-4 acetyl) were synthesized by Pabon's methodology. The antimicrobial activity of CUR and its analogs was determined by the Minimum Concentration Inhibitory (CIM) and Minimum Bactericidal Concentration (CBM) assay on Streptococcus mutans, Lactobacillus casei, Actinomyces israelii, Enterococcus faecalis and Fusobacterium nucleatum, with or without the InGaN LED (gallium and indium nitride, with output power of 100 mW / cm², LED tip with an area of 0.78 cm², 60 sec). Curcumin and its analog with the best antimicrobial effect (PCR-3 OH) were evaluated on the initial (72h) and mature (1 week) biofilm of these species in microplates and on multispecies biofilms formed in dentinal tubules by counting CFU / mL and by confocal microscopy, respectively, under the action or not of the LED. They were also evaluated for cytotoxicity and the ability to induce proliferation and migration in fibroblasts, using methyltetrazolium, trypan blue and Coomassie blue assays, respectively. The data were evaluated statistically (p <0.05). Of the 7 curcumin analogues synthesized, PCR-3 OH was the only compound that showed bactericidal activity when tested on selected bacteria of endodontic interest. Its effect was enhanced in the presence of LED, varying between bacterial species. Curcumin had a bactericidal effect for the species S. mutans, A. israelii, L. casei and F. nucleatum, and in some of them, it was independent of the LED. Both compounds reduced the growth of the initial or mature biofilms, regardless of the LED. However, when irradiated, the effect of the compounds varied according to the bacterial species, with A. israelii and S. mutans being the most affected. Both compounds significantly reduced multispecies biofilms when compared to the untreated control, with the best effect being observed for PCR-3 OH. Curcumin was considered cytocompatible from 0.039 µg / mL and PCR-3 OH from 0.019 µg / mL. There was a significant reduction in cell viability when the compounds were irradiated with LED at concentrations of 0.039 and 0.019 µg / mL. The LED, within the parameters tested, significantly reduced cell viability, proliferation and migration, regardless of the compound or time of exposure. It is concluded that PCR-3 OH showed bactericidal activity and on simple and multispecies biofilms of bacteria of endodontic interest superior to CUR, mainly under the action of LED. However, its cytocompatibility was lower than that of the CUR. The presence of the LED affected the viability, proliferation and migration of fibroblasts, showing that the parameters used for antimicrobial purposes were not suitable for application in eukariotic cells(AU)

Efeito citotóxico e ação antimicrobiana/antibiofilme de híbridos de curcumina e cinamaldeído sobre microrganismos de interesse endodôntico / Cytotoxic effect and antimicrobial action / antibiofilm of hybrids of curcumin and cinnamaldehyde on microorganisms of endodontic interest

Embora o tratamento endodôntico convencional reduza significativamente a microbiota presente no interior dos canais radiculares, a permanência de microrganismos devido à complexidade anatômica do sistema de canais radiculares e a resistência destes ao tratamento químico-mecânico pode ocasionar infecções persistentes ou secundárias. Muitos estudos têm explorado o uso de fitoquímicos, buscando obter novos compostos que apresentem propriedades farmacológicas. A curcumina, pigmento amarelo isolado dos rizomas da Curcuma longa (Zingiberaceae), e o cinamaldeido, substância volátil responsável pelo odor e sabor das cascas dos caules de plantas do gênero Cinnamomum (Lauraceae) são possíveis substâncias promissoras. O objetivo do estudo foi avaliar o efeito citotóxico e ação antimicrobiana/antibiofilme de compostos híbridos de curcumina e cinamaldeído sobre microrganismos de interesse endodôntico. Foram realizados ensaios para determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM) do cinamaldeído, da curcumina e dos 23 híbridos sobre Enterococcus faecalis, Streptococcus mutans, Lactobacillus casei, Actinomyces israelii e Fusobacterium nucleatum. Os melhores compostos foram avaliados em ensaios de biofilme simples (cada cepa bacteriana isoladamente) e dualespécies (E. faecalis + L. casei, E. faecalis + S. mutans, E. faecalis + A. israelii, E. faecalis + F. nucleatum) em placas de poliestireno objetivando-se determinar o efeito sobre o metabolismo bacteriano utilizando o ensaio de XTT e sua viabilidade através da contagem das Unidades Formadoras de Colônias (UFCs), após 24 ou 48 horas de exposição ao composto. A toxicidade também foi avaliada sobre fibroblastos (linhagem L-929) utilizando o ensaio de methyltetrazolium (MTT). Além disso, biofilmes mistos com as mesmas espécies bacterianas selecionadas e multiespécies com amostras de biofilme humano foram formados em dentina radicular de dentes bovinos e após tratamento de 48 horas com o composto/controle, foram avaliados por microscopia confocal. Os dados apresentaram distribuição normal e as diferenças entre grupos (antimicrobianos e tempos de crescimento ­ 1 ou 2 semanas) foi analisada por ANOVA (One-way ou Two-way) seguido pelo teste de Tukey. Dos 25 compostos testados, 9 deles apresentaram efeito inibitório para, no mínimo, uma das espécies bacterianas testadas com valores de MIC/MBC variando entre 0,009 a 0,625 mg/mL. O composto LA11 e o controle clorexidina (CHX) apresentaram o melhor efeito inibitório para todas as espécies bacterianas testadas e, por este motivo, foram selecionados para os ensaios subsequentes. LA11 apresentou compatibilidade em fibroblastos em concentração superior à da Clorexidina (CHX) e teve efeito superior ou semelhante à CHX, reduzindo estatisticamente o metabolismo e viabilidade bacteriana nos biofilmes simples e dual-espécies, sendo que biofilmes de S. mutans foram os mais afetados. Para os biofilmes formados em dentina radicular, LA11 teve efeito significante sobre os biofilmes mistos com redução de 85,93%, enquanto que nos biofilmes multiespécies, a redução microbiana foi de 33,76%. Conclui-se que o composto híbrido LA11 apresentou citocompatibilidade e efeito antimicrobiano e contra biofilme de espécies bacterianas relacionadas às infecções radiculares e poderia ser uma opção de agente antimicrobiano para aplicação no tratamento endodôntico(AU)

Although conventional endodontic treatment significantly reduces the microbiota present inside the root canals, the permanence of microorganisms due to the anatomical complexity of the root canal system and their resistance to chemical-mechanical treatment can lead to persistent or secondary infections. Many studies have explored the use of phytochemicals, seeking to obtain new compounds that present pharmacological properties. Curcumin, a yellow pigment isolated from Curcuma longa rhizomes (Zingiberaceae), and cinnamaldehyde, the volatile substance responsible for the odor and taste of plant stems of the genus Cinnamomum (Lauraceae) are possible promising substances. The objective of the study was to evaluate the cytotoxic effect and antimicrobial action / antibiofilm of hybrid compounds of curcumin and cinnamaldehyde on microorganisms of endodontic interest. The minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bacterial concentration (MBM) of cinnamaldehyde, curcumin and 23 hybrids on Enterococcus faecalis, Streptococcus mutans, Lactobacillus casei, Actinomyces israelii and Fusobacterium nucleatum were determined. The best compounds were evaluated on single biofilms (single bacterial strain) and dual-species biofilms (E. faecalis + L. casei, E. faecalis + S. mutans, E. faecalis + A. israelii, E. faecalis + F. nucleatum) in polystyrene plates to determine the effect on bacterial metabolism using the XTT assay and its viability by counting Colony Forming Units (CFUs) after 24 or 48 hours of exposure to the compound. Toxicity was also evaluated on fibroblasts (L929 cell line) using the methyltetrazolium (MTT) assay. In addition, mixed biofilms with the same bacterial species selected and multispecies with human biofilm samples were formed in the dentinal root of bovine teeth and after 48 hours treatment with the compound / control, they were evaluated by confocal microscopy. The data presented normal distribution and the differences between groups (antimicrobials and growth times - 1 or 2 weeks) were analyzed by ANOVA (One-way or Two-way) followed by the Tukey test. Of the 25 compounds tested, 9 of them had inhibitory effect for at least one of the bacterial species tested with MIC / MBC values ranging from 0.009 to 0.625 mg / mL. The LA11 compound and the chlorhexidine control (CHX) had the best inhibitory effect for all bacterial species tested and were therefore selected for subsequent assays. LA11 showed a higher concentration of chlorhexidine (CHX) in the fibroblasts and had a CHX-like or higher effect, reducing bacterial metabolism and viability in single and dualspecies biofilms, with S. mutans biofilms being the most affected. For biofilms formed in root dentin, LA11 had a significant effect on mixed biofilms with a reduction of 85.93%, whereas in the multispecies biofilms, the microbial reduction was 33.76%. It is concluded that the hybrid compound LA11 presented cytocompatibility and antimicrobial effect and against biofilm of bacterial species related to root infections and could be an option of antimicrobial agent for application in endodontic treatment(AU)

Antibacterial Activity of Homeopathic Medications Lycopodium clavatum and Arsenicum album Against Periodontal Bacteria / Evaluación antibacteriana de los medicamentos homeopáticos sobre bacterias periodontales

Abstract There are several controversies regarding the efficacy of homeopathic substances; however, these remedies are used in many countries for the treatment of various pathological conditions. The purpose of this study was to evaluate the in vitro antibacterial activity of two homeopathic tinctures Arsenicum album (mineral extract) and Lycopodium clavatum (plant extract) on the periodontal bacteria Actinomyces israelii, Streptococcus sanguinis, Prevotella intermedia, Aggregatibacter actinomycetemcomitans and Phorphyromonas gingivalis (P. gingivalis). Materials and methods: Equal numbers of bacteria were seeded on agar plates containing enriched media with the homeopathic solutions at 1dH and 1cH dilutions. After 7 days of incubation under anaerobic conditions, colony forming units (CFUs) were counted. The antibacterial effect was calculated based on the total number of CFUs observed on non-tincture containing agar, and on the tincture containing plates. Results: No visible growth of any of the strains was observed on the plates containing Arsenicum album at any of the dilutions tested. In contrast, when Lycopodium clavatum at 1cH dilution was tested, only P. gingivalis was susceptible to this compound. Conclusions: The results suggest that the mineral extract tincture had a greater antibacterial activity than the plant extract tincture, also Lycopodium clavatum preparation could be an effective inhibitor of periodontal pathogens bacteria such as P. gingivalis.

Resumen Se necesita un mayor número de estudios in vitro e in vivo para validar estos resultados.

Papel de cepas de Streptococcus mutans e Bifidobacterium spp. na etiologia ou proteção contra doenças bucais / The role of Streptococcus mutans strains and Bifidobacterium spp. in the etiology or protection against oral diseases

A boca é um ecossistema complexo composto por centenas de espécies microbianas que apresentam características genotípicas e fenotípicas distintas que permitem sua adaptação e sobrevivência às adversidades desse ambiente. Streptococcus mutans é a espécie bacteriana mais relacionada à etiologia da cárie dentária, devido principalmente ao seu potencial acidogênico, acidúrico e na aderência e formação de biofilme dental. Outras espécies bacterianas, como as bifidobactérias, foram detectadas em diversos sítios bucais incluindo lesões cariosas iniciais ou cavitadas e estão sendo relacionadas à etiologia da cárie precoce da infância (CPI). Contrariamente, efeito benéfico na prevenção da doença periodontal tem sido observado para as bifidobactérias pelo fato dessas espécies competirem e interferirem na aderência e formação do biofilme de patógenos periodontais. Assim, ambiguidade em relação ao papel das bifidobactérias na etiologia ou prevenção de doenças bucais está sendo observada na literatura. Este trabalho foi dividido em três capítulos. Os objetivos foram: 1) avaliar a diversidade genotípica e as características fenotípicas de cepas de S. mutans, isoladas do biofilme dental de crianças CPI e CPI-severa (CPI-S) em comparação com crianças livres de cárie (LC); 2) avaliar a capacidade de produzir e tolerar ácidos, de formar biofilme e de induzir lesões iniciais de cárie in vitro por espécies de bifidobactérias comparadas à de espécies bacterianas já reconhecidas no contexto da cárie dentária e 3) investigar o efeito antagonista in vitro de algumas espécies de bifidobactérias sobre biofilmes de Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis e Streptococcus oralis. No capítulo 1, cepas de S. mutans de amostras de biofilme de crianças com CPI, CPI-S e LC foram isoladas em meio Agar Mitis Salivarius com bacitracina e avaliadas geneticamente pelo método de AP-PCR (Reação em Cadeia da Polimerase usando Iniciadores Arbitrários) e fenotipicamente pelos métodos de...

The mouth is a complex ecosystem composed of hundreds of microbial species with different genotypic and phenotypic characteristics that allow their adaptation and survival in the adversity of that environment. Streptococcus mutans is the bacterial species more closely related to the etiology of dental caries, mainly due to its acidogenic and aciduric potential and adherence and formation of dental biofilm. Other bacterial species, such as bifidobacteria, have been detected in oral sites including initial and cavitated carious lesions and have been related to the etiology of early childhood caries (ECC). In contrast, beneficial effect of bifidobacteria in the prevention of periodontal disease has been observed because they compete and interfere with the adherence and biofilm formation by periodontal pathogens. Thus, ambiguity regarding the role of bifidobacteria in the etiology or prevention of oral diseases has been observed in the literature. This work was divided into three chapters. The objectives were: 1) to evaluate the genotypic diversity and phenotypic characteristics of S. mutans strains isolated from dental biofilm of ECC and severe-ECC (S-ECC) children compared to caries-free children (CF); 2) to evaluate the ability to produce and tolerate acids, to form biofilm and inducing in vitro initial carious lesions by species of bifidobacteria compared to the bacterial species already recognized in the context of dental caries and 3) to investigate the in vitro antagonistic effect of some bifidobacteria species on biofilms of Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis and Streptococcus oralis. In Chapter 1, S. mutans strains from biofilm samples of children with ECC, S-ECC and CF were isolated in Agar Mitis Salivarius with bacitracin and genetically evaluated by AP-PCR method (Arbitrary Primers - Polymerase Chain Reaction) and phenotypically by acidogenicity methods, verifying the final pH of the cultures after exposure to high glucose concentration...

Papel de cepas de Streptococcus mutans e Bifidobacterium spp. na etiologia ou proteção contra doenças bucais / The role of Streptococcus mutans strains and Bifidobacterium spp. in the etiology or protection against oral diseases

A boca é um ecossistema complexo composto por centenas de espécies microbianas que apresentam características genotípicas e fenotípicas distintas que permitem sua adaptação e sobrevivência às adversidades desse ambiente. Streptococcus mutans é a espécie bacteriana mais relacionada à etiologia da cárie dentária, devido principalmente ao seu potencial acidogênico, acidúrico e na aderência e formação de biofilme dental. Outras espécies bacterianas, como as bifidobactérias, foram detectadas em diversos sítios bucais incluindo lesões cariosas iniciais ou cavitadas e estão sendo relacionadas à etiologia da cárie precoce da infância (CPI). Contrariamente, efeito benéfico na prevenção da doença periodontal tem sido observado para as bifidobactérias pelo fato dessas espécies competirem e interferirem na aderência e formação do biofilme de patógenos periodontais. Assim, ambiguidade em relação ao papel das bifidobactérias na etiologia ou prevenção de doenças bucais está sendo observada na literatura. Este trabalho foi dividido em três capítulos. Os objetivos foram: 1) avaliar a diversidade genotípica e as características fenotípicas de cepas de S. mutans, isoladas do biofilme dental de crianças CPI e CPI-severa (CPI-S) em comparação com crianças livres de cárie (LC); 2) avaliar a capacidade de produzir e tolerar ácidos, de formar biofilme e de induzir lesões iniciais de cárie in vitro por espécies de bifidobactérias comparadas à de espécies bacterianas já reconhecidas no contexto da cárie dentária e 3) investigar o efeito antagonista in vitro de algumas espécies de bifidobactérias sobre biofilmes de Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis e Streptococcus oralis. No capítulo 1, cepas de S. mutans de amostras de biofilme de crianças com CPI, CPI-S e LC foram isoladas em meio Agar Mitis Salivarius com bacitracina e avaliadas geneticamente pelo método de AP-PCR (Reação em Cadeia da Polimerase usando Iniciadores Arbitrários) e fenotipicamente pelos métodos de...

The mouth is a complex ecosystem composed of hundreds of microbial species with different genotypic and phenotypic characteristics that allow their adaptation and survival in the adversity of that environment. Streptococcus mutans is the bacterial species more closely related to the etiology of dental caries, mainly due to its acidogenic and aciduric potential and adherence and formation of dental biofilm. Other bacterial species, such as bifidobacteria, have been detected in oral sites including initial and cavitated carious lesions and have been related to the etiology of early childhood caries (ECC). In contrast, beneficial effect of bifidobacteria in the prevention of periodontal disease has been observed because they compete and interfere with the adherence and biofilm formation by periodontal pathogens. Thus, ambiguity regarding the role of bifidobacteria in the etiology or prevention of oral diseases has been observed in the literature. This work was divided into three chapters. The objectives were: 1) to evaluate the genotypic diversity and phenotypic characteristics of S. mutans strains isolated from dental biofilm of ECC and severe-ECC (S-ECC) children compared to caries-free children (CF); 2) to evaluate the ability to produce and tolerate acids, to form biofilm and inducing in vitro initial carious lesions by species of bifidobacteria compared to the bacterial species already recognized in the context of dental caries and 3) to investigate the in vitro antagonistic effect of some bifidobacteria species on biofilms of Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis and Streptococcus oralis. In Chapter 1, S. mutans strains from biofilm samples of children with ECC, S-ECC and CF were isolated in Agar Mitis Salivarius with bacitracin and genetically evaluated by AP-PCR method (Arbitrary Primers - Polymerase Chain Reaction) and phenotypically by acidogenicity methods, verifying the final pH of the cultures after exposure to high glucose concentration...

Influence of different fermentable carbohydrates on dual species biofilms of S. mutans and A. naeslundii: a pilot study / Influência de diferentes carboidratos fermentáveis em biofilmes de duas espécies com S. mutans e A. naeslundii - um estudo piloto

Objetivo: O propósito deste estudo foi analisar o efeito da presença de diferentes carboidratos fermentáveis na biomassa e acidogenicidade do biofilme formado por Streptococcus mutans ATCC 25175 em associação com Actinomyces naeslundii ATCC 19039. Material e Métodos: Biofilmes com uma ou duas espécies cresceram em poços de placas de microtitulação em igual concentração, por 24 h a 37 ºC. Carboidratos foram adicionados em concentração de 2%: maltose, sacarose, glicose e lactose, além disso, como controle negativo, caldo BHI (0.2% de sacarose) foi usado. O pH foi medido individualmente para avaliar a acidogenicidade após 24 h, imediatamente após troca do meio de cultura e 30 min, 1 h e 2 h depois. Cristal violeta foi usado como indicador do total de biomassa formada após 24 h de incubação e a absorbância foi medida a 590 nm. Teste de Tukey foi utilizado para todas as análises estatísticas. Resultados: Em geral, maior quantidade de biomassa foi formada por biofilmes dupla-espécie que única-espécie na presença de todos os carboidratos, exceto glicose. Biofilmes formados por S. mutans mostraram significativamente maior acidogenicidade que o grupo controle apenas após 24 h. Em biofilmes dupla-espécie, maior acidogenicidade foi encontrada após 24 h na presença de sacarose, lactose, maltose e no grupo controle. Conclusão: Esses achados indicam que o tipo de biofilme e o carboidrato usado podem influenciar ambas: formação de biomassa e taxa de queda do pH.

Objective: The aim of this study was to elucidate the effect of presence of different fermentable carbohydrates in the biomass and acidogenicity of biofilm formed by Streptococcus mutans ATCC 25175 in association with Actinomyces naeslundii ATCC 19039. Material and Methods: Single and dualspecies biofilms were grown on wells of microtiter plates at equal concentration for 24 h at 37 ºC. Carbohydrates were added at 2%: maltose, sucrose, glucose and lactose and as negative control, BHI Broth (0.2% glucose) was used. The pH of each culture was measured to assess acidogenicity after 24 h, immediately after changing the culture medium and 30 min, 1 h and 2 h after. Crystal violet was used asindicator of the total attached biofilm biomass after 24 h incubation and the absorbance was measured at 590 nm. Tukey Multiple Comparison Test was performed for all the statistical analysis. Results: Higher amount of biomass was formed by dualspecies than single-species biofilm in the presence of all carbohydrates, except to glucose. S. mutans biofilms showed statistically significant higher acidogenicity than control group only after 24 h. In dual-species biofilms the highest acidogenicity were found after 24 h for sucrose, lactose, maltose and the control group. Conclusion: The findings indicate that the type of biofilm (single or dual-species) and the carbohydrate used may influence amount of biomass formed and rate of the pH reduction.

Infecção oral crônica experimental induzida por actinomyces israelii e propionibacterium acnes / Experimental oral chronic infection induced by actinomyces israelii and propionibacterium acnes

The purpose of this study was to evaluate an experimental animal model of oral chronic infection induced by Actinomyces israelii and propionibacterium acnes in mice. Swiss/NIH mice (n=100), 21 days of age, male and female were divided into two groups of 45 animals. A. israelii (n=45)and P. acnes (n=45) were inoculated in the anterior mandibular paraperiosteal periodontal tissue associated with sodium alginate gel particles. The animals were evaluated clinically and microscopically at 1,3,7,15,21,30 and 45 days after inoculation. Actinomycotic and propioni lesions were induced in all animals. In control mice (n=10), no lesions were noted; however, differences in the clinical and histopathological evoluations of actinomycosis and propioni lesions were observed and are discussed in this study. Microorganisms entrapped in alginate gel provided a prolonged bacterial irritation, and chronic histopathologic features similar to those seen in human actinomycosis could be detected.

Experimental oral chronic infection induced by actinomyces israelii and propionibacterium acnes

The purpose of this study was to evaluate an experimental animal model of oral chronic infection induced by Actinomyces israelii and propionibacterium acnes in mice. Swiss/NIH mice (n=100), 21 days of age, male and female were divided into two groups of 45 animals. A. israelii (n=45) and P. acnes (n=45) were inoculated in the anterior mandibular paraperiosteal periodontal tissue associated with sodium alginate gel particles. The animals were evaluated clinically and microscopically at 1,3,7,15,21,30 and 45 days after inoculation. Actinomycotic and propioni lesions were induced in all animals. In control mice (n=10), no lesions were noted; however, differences in the clinical and histopathological evoluations of actinomycosis and propioni lesions were observed and are discussed in this study. Microorganisms entrapped in alginate gel provided a prolonged bacterial irritation, and chronic histopathologic features similar to those seen in human actinomycosis could be detected.

Eficácia antimicrobiana de diferentes medicamentos intracanais sobre Enterococcus faecalis, Candida albicans e Actinomyces radicidentis / Antimicrobial efficacy of different intracanal medicaments on Enterococcus faecalis, Candida albicans e Actinomyces radicidentis

O objetivo deste estudo in vitro foi investigar a eficácia de diferentes medicamentos intracanais contra Enterococcus faecalis, Candida albicans e Actinomyces radicidentis, três espécies microbianas detectadas em casos de fracasso da terapia endodôntica e com reconhecidos níveis de resistência ao hidróxido de cálcio. Os seguintes medicamentos foram testados: pasta de solução aquosa de clorexidina a 0,2% óxido de zinco e pastas de hidróxido de cálcio em glicerina, clorexidina a 0,2%, panamonoclorofenol, canforado/glicerina, iodeto de potássio iodetado ou iodo povidine. Os resultados demonstraram que a clorexidina associada ao óxido de zinco ou ao hidróxido de cálcio apresentou maior atividade antimicrobiana quando comparada aos outros medicamentos. Isso sugere que pastas contendo clorexidina podem ser consideradas para uso como medicamentação intracanal.

Mecanismos biológicos e influência de fatores ambientais na fluorose dentária e a participaçäo do flúor na prevençäo da cárie: revisäo de literatura / Biological mechanisms and influence of environmental factors in the dental fluorosis. The role of fluoride in the caries prevention: a literature review

O flúor tem uma importante participaçäo na prevençäo da cárie dentária, estando disponível principalmente na água de abastecimento. Este íon tem sido associado com a inibiçäo da desmineralizaçäo e a aceleraçäo da remineralizaçäo durante o processo carioso. A presença constante do flúor nos fluídos bucais constitui o principal fator na prevençäo da cárie. Além disso, tem-se demonstrado que o flúor na placa bacteriana pode inibir a produçäo de ácidos pelas bactérias cariogênicas. Entretanto, fluorose dentária pode ocorrer se as concentraçöes de flúor forem excessivas no interior ou nas proximidades do esmalte em formaçäo, durante sua fase de desenvolvimento pré-eruptiva. A fluorose caracteriza-se pelo aumento da porosidade na superfície e subsuperfície do esmalte, resultando em esmalte com aparência opaca. Os efeitos tóxicos do flúor sobre o esmalte em desenvolvimento estäo associados com sua influência tanto sobre os ameloblastos, como sobre o estágio de maturaçäo da formaçäo do esmalte. No momento da prescriçäo de terapia com flúor, os profissionais devem ter conhecimento da exposiçäo total do paciente ao flúor, bem como dos fatores ambientais que podem influenciar a sua absorçäo e aumentar a incidência e gravidade da fluorose dentária. O objetivo desta revisäo é discutir os mecanismos biológicos e a influência dos fatores ambientais na fluorose dentária. A participaçäo do flúor na prevençäo da cárie também será discutida, abordando a desmineralizaçäo e remineralizaçäo dentária e seu efeito inibitório sobre a placa bacteriana

Manchas dentárias extrínsecas pretas: revisäo de literatura / Extrinsic dental black stain

O objetivo deste trabalho foi discutir, através de uma revisäo da literatura, as manchas dentárias extrínsecas pretas, elucidando o que säo e por quê removê-las. Sugestöes quanto à natureza química dos pigmentos pretos foram feitas e mostraram que este é um sal férrico, produzido pela bactéria. Prevotella melaninogênica

Aspectos microbiológicos da flora bacteriana em torno de implantes osseointegrados / The microbiological aspects of microflora in endosseous implantation

O presente estudo é uma revisão da literatura sobre a microflora observada em torno de implantes osseointegrados. Existe uma relação muito próxima entre a microflora peri-implantar e a periodontal. Sítios peri-implantes doentes exibem uma microflora sub-gengival composta, principalmente, por Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedius, Capnocytophaga e Fusobacterium nucleatum. Os sítios peri-implantares saudáveis apresentam, principalmente, Streptococcus mitis, Streptococcus salivares, Actinomyces naeslundi e Actinomyces odontolyticus. A composição da microflora subgengival peri-implantar e periodontal podem ser consideradas similares, tanto a relacionada com saúde quanto a relacionada com doença. A doença peri-implantar pode ser considerada como uma infecção causada por patógenos comuns a doença periodontal.

Fatores enzimáticos de agressão produzidos por bactérias aeróbicas da cavidade bucal / Production of histolytic enzymes by aerobic oral bacteria

Verificou-se a produção de hialuronidase, condroitin sulfatase, lecitinase e gelatinase em diferentes amostras bacterianas, isoladas da cavidade bucal. Hialuronidase foi produzida por 20 das 30 amostras de S. aureus, 18 das 21 amostras de S. pyogenes e todas as 4 amostras de A. viscosus. Nenhuma amostra produziu condrotin sulfatase e gelatinase; todas as 30 amostras de S. aureus e todas as amostras de A. viscosus produziram lecitinase

Host modulation of adherence of oral bacteria: the effect of human neutrophil myeloperoxidase on the attachment of Actinomyces viscosus and Actinomyces naeslundii to saliva-coated hydroxyapatite / Modulação da aderência da bactéria oral do hospedeiro: o efeito da mieloperoxidase neutrofilica de humanos sôbre a aderência do actinomices viscosus e actionomices naeslundi à hidroxiapatita embebida em saliva

Host neutrophils, by virtue of their ability to secrete lysosomal enzymes and reduced oxygen metabolites, may play a fundamental role in altering the composition and pathogenic potential of dental plaque by modulating bacterial adherence. The adherence of Actinomyces viscosus and Actinomyces naeslundii to saliva-coated surfaces in known to be saturable and mediated by proteinaceous fimbriae. In this study, we examined the adhesive effects of the human neutrophil enzyme, myeloperoxidase(MPO), on the adherence of A. viscosus T14V and A. naeslundii ATCC 12104 to saliva-coated hydroxyapatite (SHA) beads. Microorganisms were treated with MPO in the presence of hydrogen peroxide (H2O2) and physiologic concentrations of chloride (forming the MPO-H2O2-C1- system) and incubated with SHA beads, Treatment of cells with the isolated MPO-H2O2-C1-system reduced the percentage of cells that bound. This abhesive effect was inhibited by sodium azide, exogenous catalase, taurine, and potassium thiocyanate. The three major chromatographic forms of MPO (I,II, and III) were effective in blocking adherence of A. viscosus. We conclude thet the MPO-H2O2-C1- system can interfere with the adherence of A. viscosus and A naeslundii, and therefore may be important in modulating the microbial colonization of oral surfaces

Actinomyces: meio de cultura para seu isolamento / Actinomyces: culture media for isolation

Foi comparado o rendimento de dois meios de cultura propostos para o isolamento de Actinomyces viscosus e Actinomyces naeslundii. O meio de cultura com os inibidores propostos por KORNMAN & LOESCHE (12) apresentou melhores resultados do que os inibidores propostos por ZYLBER & JORDAN (17)

Actinomyces viscosus como fornecedores da placa "in vitro" / Actinomyces viscosus how furnisher of plate \"in vitro\"

Cem amostras puras, identificadas como actinomyces viscosus isoladas de placa dental humana, foram testadas em meio cariogênico, em condições de aerobiose e anaerobiose, como formadores de placa "in vitro". Obteve-se 80 amostras como positivas de placa "in vitro" e cujas placas, foram melhormente evidenciadas em condições de anaerobiose