Antibacterial Effect of Hypochlorous Acid on Bacteria Associated with the Formation of Periodontal Biofilms: An in vitro Pilot Study

ABSTRACT Objective: To evaluate the antibacterial effect of electrolytically generated hypochlorous acid on Streptococcus gordonii, Fusobacterium nucleatum, and Porphyromonas gingivalis. Material and Methods: In this in vitro experiment, the effect of hypochlorous acid (HOCl) on the strains S. gordonii, F. nucleatum, and P. gingivalis was evaluated using 4% sodium hypochlorite, 0.12% chlorhexidine, and distilled water as controls. The four groups were placed on each plate, and each group was replicated five times. The agar diffusion method by zones measurement was used. The data were processed with SPSS using the Kruskal-Wallis test and multiple comparison tests. Results: Hypochlorous acid showed an average inhibition halo of 9.28 mm on S. gordonii. As expected with distilled water, no zone of inhibition was noted for any of the bacteria, nor were zones of inhibition observed with HOCl for F. nucleatum and P. gingivalis. Conclusion: Hypochlorous acid showed antimicrobial properties against only S. gordonii and was less effective than 4% sodium hypochlorite and 0.12% chlorhexidine, although no significant differences were found between the latter.

Chronic inflammatory periapical diseases: a Brazilian multicenter study of 10, 381 cases and literature review

Abstract The aim of this study was to investigate the epidemiological and clinical characteristics of chronic inflammatory periapical diseases in different regions of Brazil and to compare with data from the literature. A multicenter study was carried out in four Brazilian referral centers in oral diagnosis. Histopathological records were reviewed, and all cases diagnosed microscopically as periapical granuloma, radicular cyst, and periapical abscess were included. Demographic and clinical data were collected. Descriptive statistics and Pearson's chi-square test were performed. A total of 10,381 cases of chronic inflammatory periapical diseases were found (13.8% of 74,931 archived specimens) over a period of 65 years. Radicular cysts were the most common lesion (59.9%). Women (56.1%) with a mean age of 37.01 years old (range 13 to 100 ± 14.42) and people of white skin color (59.2%) were the most affected individuals by chronic inflammatory periapical diseases. The lesions were generally asymptomatic (28.1%), located in the maxilla (60.1%), and posterior region (49.8%). The radicular cysts were larger when compared to periapical granulomas (p < 0.001). The disagreement between the clinical and histopathological diagnoses was higher when the final diagnosis was a periapical granuloma (p < 0.001). Chronic inflammatory periapical diseases continue to be common lesions affecting mainly adults. This should be a consequence of the burden of untreated caries in permanent teeth. Women are more affected and radicular cyst was the most common lesion.

Endo-perio lesions prevalence in non-molar and molar teeth: a pilot study / Prevalência de lesões endo-perio em dentes não-molares e molares: um estudo piloto

Introduction Pulp and periodontal tissues may communicate and, in pathological situations, combined endodontic-periodontal lesions may be established. Objective The aim of this study was to evaluate the prevalence of endo-perio lesions in non-molar and molar teeth referred for endodontic treatment. Material and method The sample consisted of 104 teeth evaluated in 79 consecutive patients in a cross-sectional design. Visible plaque, probing depth, and bleeding on probing were evaluated. Endodontic evaluation included the presence or absence of caries, fistulas, pain, and pulp sensitivity. The presence/absence of periapical lesion, bone loss in the furcation region, and proximal area were evaluated. Result The results showed that pain was the main reason for seeking dental care in 63.3% of patients. The molar teeth demonstrated higher presence of probing depth (PD) ≥ 7 mm (38.3%) and higher PD mean (6.17 mm) than non-molar teeth (P<0.05). It was verified that 65.4% of the teeth were diagnosed with a primary endodontic lesion and that the periodontal component was present in 34.6% of the teeth, either in a primary (10.6%), secondary (11.5%), or combined form (12.5%). True combined endodontic-periodontal lesion occurred significantly in molar teeth compared to non-molar teeth (p<0.05). Conclusion The primary endodontic lesion was found in a greater proportion in teeth referred for endodontic treatment; however, approximately 1/3 of the sample had periodontal involvement, which demonstrates the importance of the periodontal examination together with the general clinical examination.

Introdução Os tecidos pulpar e periodontal podem se comunicar e, em situações patológicas, podem-se estabelecer lesões endodônticas-periodontais combinadas. Objetivo O objetivo deste estudo foi avaliar a prevalência de lesões endo-perio em dentes não molares e molares encaminhados para tratamento endodôntico. Material e método A amostra consistiu de 104 dentes avaliados em 79 pacientes consecutivos em um desenho transversal. Placa visível, profundidade de sondagem e sangramento à sondagem foram avaliados. A avaliação endodôntica incluiu a presença ou ausência de cáries, fístulas, dor e sensibilidade pulpar. Foram avaliados a presença / ausência de lesão periapical, perda óssea em região de furca e área proximal. Resultado Os resultados mostraram que a dor foi o principal motivo de procura de atendimento odontológico em 63,3% dos pacientes. Os dentes molares demonstraram maior presença de profundidade de sondagem (PS) ≥ 7 mm (38,3%) e maior média de PS (6,17 mm) do que os dentes não molares (P <0,05). Verificou-se que 65,4% dos dentes tinham diagnóstico de lesão endodôntica primária e que o componente periodontal estava presente em 34,6% dos dentes, seja na forma primária (10,6%), secundária (11,5%) ou combinada (12,5%). Lesão endodôntica-periodontal combinada verdadeira ocorreu significativamente em dentes molares em comparação com os dentes não molares (p <0,05). Conclusão A lesão endodôntica primária foi encontrada em maior proporção nos dentes encaminhados para tratamento endodôntico; entretanto, aproximadamente 1/3 da amostra apresentava acometimento periodontal, o que demonstra a importância do exame periodontal em conjunto com o exame clínico geral.

Efeito de análogos de curcumina, irradiados ou não por LED, como agentes antimicrobianos e indutores de proliferação e migração celular / Effect of curcumin analogues, irradiated or not by LED, as antimicrobial agents and inducers of cell proliferation and migration

O tratamento endodôntico de dentes permanentes jovens com infecções pulpares/periapicais antes de completar a rizogênese ainda é um desafio para a Endodontia e a Odontopediatria. Relatos científicos têm mostrado que a curcumina (CUR), um fitoquímico polifenólico, apresenta diversas propriedades terapêuticas, entre as quais, amplo espectro de ação antimicrobiana e a capacidade de induzir a proliferação e migração celular. Além disso, devido à sua capacidade excitatória na presença de luz, a CUR também tem sido utilizada como fotossensibilizante em terapia fotodinâmica associada ao LED (light emitting diode), promovendo aumento dos seus efeitos biológicos. Uma forma de aumentar seu potencial terapêutico e reduzir algumas limitações do uso da CUR é a síntese de análogos a partir de pequenas modificações químicas na estrutura original, entretanto, mantendo sua capacidade fotossensibilizante. O objetivo desse estudo foi avaliar a ação antimicrobiana e antibiofilme de análogos de curcumina sob a influência ou não do LED sobre microrganismos de interesse endodôntico e sua influência sobre a viabilidade, proliferação e migração de fibroblastos da linhagem L-929. Uma série de compostos análogos de CUR (PCR-4 H, PCR-3 OH, PCR-4 OH, PCR-3 OCH3, PCR-4 OCH3, PCR-3 acetil, PCR-4 acetil) foram sintetizados pela metodologia de Pabon. A atividade antimicrobiana da CUR e seus análogos foi determinada pelo ensaio de Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM) sobre Streptococcus mutans, Lactobacillus casei, Actinomyces israelii, Enterococcus faecalis e Fusobacterium nucleatum, sob a ação ou não do LED InGaN (nitreto de gálio e índio, com potência de saída de 100 mW/cm², ponta do LED com área de 0,78 cm², 60 s). A curcumina e seu análogo com melhor efeito antimicrobiano (PCR-3 OH) foi avaliado sobre o biofilme inicial (72h) e maduro (1 semana) dessas espécies em microplacas e sobre biofilmes multiespécies formados em túbulos dentinários por contagem das UFC/mL e por microscopia confocal, respectivamente, sob ação ou não do LED. Também foram avaliados quanto à citotoxicidade e a capacidade de induzir proliferação e migração em fibroblastos, por meio de ensaios de metiltetrazólio, azul de tripan e azul de Coomassie, respectivamente. Os dados foram avaliados estatisticamente (p<0,05). Dos 7 análogos de curcumina sintetizados, PCR-3 OH foi o único composto que apresentou atividade bactericida quando testado sobre as bactérias de interesse endodôntico selecionadas. Seu efeito foi potencializado na presença do LED, variando entre as espécies bacterianas. A curcumina teve efeito bactericida para as espécies S. mutans, A. israelii, L. casei e F. nucleatum, e em algumas delas, foi independente do LED. Ambos os compostos reduziram o crescimento dos biofilmes iniciais ou maduros, independente do LED. Entretanto, quando irradiados, o efeito dos compostos variou de acordo com a espécie bacteriana, sendo que A. israelii e S. mutans foram os mais afetados. Ambos os compostos reduziram significativamente os biofilmes multiespécies quando comparados ao controle sem tratamento, sendo que melhor efeito foi observado para PCR-3 OH. A curcumina foi considerada citocompatível a partir de 0,039µg/mL e PCR-3 OH a partir de 0,019 µg/mL. Houve redução significativa na viabilidade celular quando os compostos foram irradiados com LED nas concentrações 0,039 e 0,019 µg/mL. O LED, dentro dos parâmetros testados, reduziu significativamente a viabilidade, a proliferação e a migração celular, independente do composto ou tempo de exposição. Conclui-se que PCR-3 OH apresentou atividade bactericida e sobre biofilmes simples e multiespécies de bactérias de interesse endodôntico superior à CUR, principalmente sob ação do LED. Entretanto, sua citocompatiblidade foi inferior à da CUR. A presença do LED afetou a viabilidade, proliferação e migração dos fibroblastos, mostrando que os parâmetros utilizados para fins antimicrobianos não foram adequados para aplicação em células eucarióticas(AU)

Endodontic treatment of young permanent teeth with pulp / periapical infections before completing rhizogenesis is still a challenge for Endodontics and Pediatric Dentistry. Scientific reports have shown that curcumin (CUR), a polyphenolic phytochemical, has several therapeutic properties, including a broad spectrum of antimicrobial action and the ability to induce cell proliferation and migration. In addition, due to its excitatory capacity in the presence of light, CUR has also been used as a photosensitizer in photodynamic therapy associated with LED (light emitting diode), promoting an increase in its biological effects. One way to increase its therapeutic potential and reduce some limitations of the use of CUR is the synthesis of analogues from small chemical modifications in the original structure, however, maintaining its photosensitizing capacity. The aim of this study was to evaluate the antimicrobial and antibiofilm action of curcumin analogues under the influence or not of LED on microorganisms of endodontic interest and their influence on the viability, proliferation and migration of L-929 fibroblasts. A series of CUR analog compounds (PCR-4 H, PCR-3 OH, PCR-4 OH, PCR-3 OCH3, PCR-4 OCH3, PCR-3 acetyl, PCR-4 acetyl) were synthesized by Pabon's methodology. The antimicrobial activity of CUR and its analogs was determined by the Minimum Concentration Inhibitory (CIM) and Minimum Bactericidal Concentration (CBM) assay on Streptococcus mutans, Lactobacillus casei, Actinomyces israelii, Enterococcus faecalis and Fusobacterium nucleatum, with or without the InGaN LED (gallium and indium nitride, with output power of 100 mW / cm², LED tip with an area of 0.78 cm², 60 sec). Curcumin and its analog with the best antimicrobial effect (PCR-3 OH) were evaluated on the initial (72h) and mature (1 week) biofilm of these species in microplates and on multispecies biofilms formed in dentinal tubules by counting CFU / mL and by confocal microscopy, respectively, under the action or not of the LED. They were also evaluated for cytotoxicity and the ability to induce proliferation and migration in fibroblasts, using methyltetrazolium, trypan blue and Coomassie blue assays, respectively. The data were evaluated statistically (p <0.05). Of the 7 curcumin analogues synthesized, PCR-3 OH was the only compound that showed bactericidal activity when tested on selected bacteria of endodontic interest. Its effect was enhanced in the presence of LED, varying between bacterial species. Curcumin had a bactericidal effect for the species S. mutans, A. israelii, L. casei and F. nucleatum, and in some of them, it was independent of the LED. Both compounds reduced the growth of the initial or mature biofilms, regardless of the LED. However, when irradiated, the effect of the compounds varied according to the bacterial species, with A. israelii and S. mutans being the most affected. Both compounds significantly reduced multispecies biofilms when compared to the untreated control, with the best effect being observed for PCR-3 OH. Curcumin was considered cytocompatible from 0.039 µg / mL and PCR-3 OH from 0.019 µg / mL. There was a significant reduction in cell viability when the compounds were irradiated with LED at concentrations of 0.039 and 0.019 µg / mL. The LED, within the parameters tested, significantly reduced cell viability, proliferation and migration, regardless of the compound or time of exposure. It is concluded that PCR-3 OH showed bactericidal activity and on simple and multispecies biofilms of bacteria of endodontic interest superior to CUR, mainly under the action of LED. However, its cytocompatibility was lower than that of the CUR. The presence of the LED affected the viability, proliferation and migration of fibroblasts, showing that the parameters used for antimicrobial purposes were not suitable for application in eukariotic cells(AU)

Influência da técnica de preparo apical na desinfecção e modelagem dos canais radiculares: revisão de literatura / Influence of apical preparation technique on root canal disinfection and shaping: literature review

Introdução: um dos objetivos da terapia endodôntica é a redução dos fatores microbianos no interior dos canais radiculares, o que pode ser conseguido por meio do preparo químico-mecânico (PQM). O PQM tem como finalidade criar um ambiente propício à condição de reparo, por meio da limpeza e modelagem do sistema de canais radiculares (SCR), que associa a ação mecânica dos instrumentos ao uso de substâncias químicas auxiliares. Em relação ao limite apical desse preparo e ao diâmetro apical final da instrumentação, podemos observar que não há consenso entre os profissionais. Introdução: o objetivo do presente estudo foi avaliar, por meio de uma revisão de literatura, a eficiência de duas técnicas no preparo e desinfecção do terço apical do SCR: a técnica de ampliação foraminal e a técnica de batente apical com manutenção da patência foraminal. Métodos: foi realizada uma busca nas bases de dados PubMed, Medline, BBO, Lilacs e SciELO, usando os seguintes termos: canal radicular, forame apical, endodontia, lima de patência, tamanho apical, lima apical final, preparo biomecânico, ampliação foraminal, comprimento de trabalho, anatomia dental, tratamento endodôntico, patência foraminal, preparo do canal radicular e batente apical. Cada um desses termos foi combinado utilizando os operadores booleanos E/OU. Após leitura dos resumos, 65 artigos foram selecionados e incluídos nessa revisão. Resultados: os resultados demonstraram que o alargamento do terço apical, seja com ou sem ampliação foraminal, parece favorecer o prognóstico do tratamento endodôntico, devido à redução do conteúdo infeccioso em toda a extensão do SCR. A manutenção da patência foraminal é um fator essencial para um PQM adequado quando a técnica de batente apical é realizada. Conclusão: conclui-se que preparos apicais mais amplos promovem resultados mais previsíveis, e que a ampliação foraminal possibilita o melhor debridamento e desinfeção do SCR (AU).

Introduction: Endodontic therapy should reduce the microbial load within the root canals, which can be achieved during chemomechanical preparation (CMP). The purpose of CMP of the root canal system (RCS) is to create a favorable environment for healing. CMP associates the mechanical action of instruments with the use of auxiliary chemical substances. There is no consensus among professionals about what should be the diameter of the apical foramen after CMP. This literature review evaluated the efficiency of two apical preparation techniques: foraminal enlargement and apical stop with maintenance of foraminal patency. Material and methods: A literature search was conducted in PubMed, Medline, BBO, Lilacs and Scielo using the following terms: root canal, apical foramen, endodontics, patency file, apical size, master apical file, biomechanical preparation, foraminal enlargement, working length, dental anatomy, endodontic treatment, foraminal patency, root canal preparation, and apical stop. All terms were combined using the Boolean operators AND/OR. After the abstracts were analyzed, 65 full texts were selected and included in this review. Results: The enlargement of the apical third, with or without foraminal enlargement, seems to improve endodontic treatment prognosis due to the reduction of infectious contents throughout the RCS. Foraminal patency is essential for adequateCMP when the apical stop technique is performed. Conclusion: Apical preparations with a greater diameter have more predictable results, and foraminal enlargement ensures better debridement and disinfection of the RCS (AU).

Conhecimento de cirurgiões-dentistas de Atenção Primária à Saúde acerca de urgências endodônticas / Knowledge of Primary Health Care dentists about endodontic urgencies

Objetivo: avaliar o conhecimento de um grupo de cirurgiões-dentistas que trabalham em Atenção Primária à Saúde acerca de diagnósticos e condutas a serem tomadas diante de urgências em endodontia. Métodos: 24 cirurgiões-dentistas responderam um questionário estruturado, adaptado para o estudo. O instrumento abordava características socioeconômicas e o conhecimento dos cirurgiões-dentistas sobre diagnósticos e condutas perante patologias pulpares e periapicais. Os dados foram submetidos a análises estatísticas descritivas (medidas de variabilidade e de tendência central) e de associação entre os desfechos e as variáveis independentes, pelo Teste t Student e pelo teste de correlação Pearson, todos com α ≤ 0,05. Resultados: a quantidade de acertos dos participantes foi baixa nas perguntas selecionadas, as quais eram vinculadas aos conhecimentos de urgência em endodontia (27,3% ­ 68,2%). Essa baixa quantidade de acertos foi relacionada às variáveis sexo, idade e tempo de formado. Conclusão: o cirurgião-dentista deve estar preparado para lidar com urgências endodônticas desde a formação acadêmica. Considerando a baixa quantidade de acertos nas questões acerca de urgências endodônticas, atualizações constantes sobre o tema são necessárias, a fim de aprimorar o conhecimento dos profissionais e ampliar a resolutividade dos serviços. (AU)

Objective: To assess the knowledge of a group of dentists working in Primary Health Care about the diagnostics and behaviors to be adopted to treat endodontic emergencies. Methods: 24 dentists answered a structured questionnaire adapted to the study. The instrument addressed socioeconomic characteristics and the knowledge of dentists about diagnostics and behaviors concerning pulpal and periapical pathologies. The data were subjected to analyses of descriptive statistics (measures of variability and central tendency) and of association between the outcomes and the independent variables using Student's t-test and Pearson correlation test. Significance was set at α ≤ 0.05. Results: The number of correct answers was low in the questions selected, which were linked to the knowledge of endodontic emergencies (27.3 - 68.2%). The low number of correct answers was related to the variables of sex, age, and time of academic training. Conclusion: Dentists should be prepared to deal with endodontic emergencies since their academic training. The low number of correct answers for questions about endodontic emergencies shows the need for constant updates on the subject, in order to improve the knowledge of the professionals and expand the resoluteness of services. (AU)

Efeito de probióticos no desenvolvimento de lesão periapical induzida em ratos / Effect of probiotics on the development of induced periapical lesion in rats

Objetivo: O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da administração sistêmica de probióticos nos parâmetros hematológicos, microbiológicos do canal radicular e da saliva e no desenvolvimento da periodontite apical (PA) induzida em ratos. Material e Métodos: Foram utilizados 24 ratos Wistar machos. PA foi induzida nos primeiros molares inferiores e superiores (lado esquerdo e direito). Os animais foram divididos em 3 grupos: controle, Lactobacillus rhamnosus e Lactobacillus acidophilus. Os probióticos foram administrados por gavagem (109 unidades formadoras de colônias (CFU)) diluídas em 5 mL de água durante o período de desenvolvimento da PA (30 dias). No trigésimo dia, foi realizada punção cardíaca para análise de hemograma, cálcio, fósforo e concentração de fosfatase alcalina no sangue. Além disso, foi realizada análise microbiológica do conteúdo do canal radicular e da saliva. Em seguida, os animais foram eutanasiados e a mandíbula e maxila foram removidas para análise da PA através da microtomografia computadorizada; análises histopatológicas (hematoxilina - H&E) e de imunomarcação para interleucina 10 (IL-10), interleucina 1 beta (IL-1ß), interleucina 6 (IL-6), ligante do recetor ativador do fator nuclear kappa B (RANKL), osteoprotegerina (OPG) e fosfase ácida resistente ao tataráto (TRAP). Os dados foram estatisticamente analisados com nível de significância de 5%. Resultados: A fosfatase alcalina foi maior nos grupos que consumiram probióticos (p>0.05). A contagem total de microrganismos no canal radicular/saliva, o infiltrado inflamatório e a imunomarcação para IL-1ß e IL-6 no PA foram menores nos grupos probióticos quando comparados ao controle (p<0.05). Observou-se que a IL-10 foi mais imunomarcada nos grupos probióticos do que no grupo controle (p<0.05). Menor volume de reabsorção óssea foi observada nos grupos que consumiram probióticos (p<0.05). A imunomarcação para RANKL e TRAP foram menores nos grupos probióticos quando comparados ao controle (p<0.05). Observou-se que a OPG foi mais imunomarcada no grupo Lactobacillus acidophilus do que no grupo Lactobacillus rhamnosus e controle (p<0.05). Não houve diferença estatística na contagem de lactobacilos no canal radicular/saliva bem com no perfil hematológico, cálcio e fósforo entre os grupos (p>0.05)(AU)

Aim: The objective of the present study was to evaluate the effect of systemic administration of probiotics on haematological, microbiological parameters of the root canal and saliva and on the development of apical periodontitis (AP) induced in rats Materials and Methods: Twenty-four male Wistar rats were used. PA was induced in the lower and upper first molars (left and right side). The animals were divided into three groups: control, Lactobacillus rhamnosus and Lactobacillus acidophilus. Probiotics were administered by gavage (109 colony forming units (CFU)) diluted in 5 mL of water during the developmental period of PA (30 days). On the thirtieth day, cardiac puncture was performed for hemogram, calcium, phosphorus and alkaline phosphatase concentration in the blood. In addition, a microbiological analysis of the root canal and saliva contents was performed. Afterwards, the animals were euthanized and the mandible and maxilla were removed for analysis of PA by computerized microtomography; interleukin 10 (IL-10), interleukin 1 beta (IL-1ß), interleukin 6 (IL-6), receptor activator of NF-κB ligand (RANKL), osteoprotegerin (OPG) and tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP). The data were statistically analyzed with significance level of 5%. Results: Alkaline phosphatase was higher in the groups that consumed probiotics (p>0.05). The total count of microorganisms in the root canal/saliva, inflammatory infiltrate and immunolabeling for IL-1ß and IL-6 in BP were lower in the probiotic groups when compared to the control group (p<0.05). It was observed that IL-10 was more immunolabelled in the probiotic groups than in the control group (p<0.05). Lower volume of bone resorption was observed in the groups that consumed probiotics (p<0.05). Immunoblotting for RANKL and TRAP were lower in probiotic groups when compared to control (p<0.05). It was observed that OPG was more immunolabelled in the Lactobacillus acidophilus group than in the Lactobacillus rhamnosus group and control (p<0.05). There was no statistically significant difference in the lactobacillus count in the root canal / saliva as well as in the hematological profile, calcium and phosphorus between the groups (p>0.05). Conclusion: Supplementation with probiotics (Lactobacillus rhamnosus and Lactobacillus acidophilus) had a significant effect on the reduction of PA severity in rats, as well as the reduction of total root canal/saliva microorganisms concomitantly with increased alkaline phosphatase blood, demonstrating the capacity of probiotics in modulating the development of PA(AU)

A periodontite apical como fator de risco às manifestações sistêmicas: uma perspectiva histórica atualizada / Apical periodontitisas a risk factor to systemic manifestations: a updated historical perspective

Objetivo: O objetivo deste trabalho foi revisar a literatura científica pertinente, dando enfoque ao tratamento endodôntico e dentes portadores de necrose pulpar associados à periodontite apical como fator de risco às manifestações sistêmicas, desde a teoria da infecção focal até os dias atuais. Metodologia: Empregou-se fontes de catalogação bibliográfica identificadas eletronicamente pelo MEDLINE, até setembro de 2018. Os artigos relacionados pela busca eletrônica foram selecionados, por três revisores independentes, avaliando os critérios de inclusão e exclusão. Resultados: A busca apresentou 107 artigos, sendo que destes, 17 estudos satisfizeram os critérios de inclusão, o que possibilitou a análise dos dados. Conclusão: Muitos dos preceitos da teoria da infecção focal estão sendo reerguidos por pesquisas que mostram cada vez mais a existência de associações entre patologias endodônticas e sistêmicas.

Objective: The aim of this work was to review the pertinent scientific literature, focusing on endodontic treatment and teeth with pulp necrosis associated with apical periodontitis as a risk factor for systemic manifestations, from the focal infection theory to the present day. Methodology: The sources of bibliographic cataloging electronically identified by MEDLINE were used until September 2018. Articles related to the electronic search were selected by three independent reviewers, evaluating the inclusion and exclusion criteria. Results: The search presented 107 articles, of which, 17 studies met the inclusion criteria, which made it possible to analyze the data. Conclusion: Many of the precepts of the focal infection theory are being reinstated by research that increasingly shows the existence of associations between endodontic and systemic pathologies.

O dente tem vitalidade pulpar e tem lesão periapical: critérios para o diagnóstico e condutas / The tooth has pulp vitality and has a periapical lesion: Criteria for diagnosis and treatment

Muitos profissionais ficam confusos quando um dente tem lesão periapical e mantém a vitalidade pulpar. Muitas lesões imitam imagiologicamente as lesões periapicais crônicas inflamatórias e os dentes permanecem com vitalidade pulpar. Sempre devemos lembrar que: 1) dentes com vitalidade pulpar não devem ser abertos sem um diagnóstico prévio das lesões que são portadores; tratamento endodôntico não deve ser aplicado como meio de diagnóstico ou teste terapêutico de lesões periapicais em dentes com vitalidade pulpar. 2) Realizar tratamentos endodônticos em dentes com vitalidade pulpar e com lesões que imitam periapicopatias pode prolongar o tempo de uma abordagem adequada e piorar em muito o prognóstico da lesão. 3) Em dentes com vitalidade pulpar e lesões periapicais de origem a determinar, é muito importante a inter-relação clínica, imagiológica e microscópica para a troca de experiências e conhecimento, visando um diagnóstico seguro e terapêutica eficaz. 4) As lesões relacionadas devem ser mentalizadas ou anotadas para que se aplique sempre frente a dentes com lesões periapicais e com vitalidade pulpar!

Análise epidemiológica e imunológica em indígenas das etnias Sateré Mawé e Tikuna portadores de infecções endodônticas / Epidemiological and immunological analysis in indigenous people of the Sateré Mawé and Tikuna ethnic groups with endodontic infections

Os povos indígenas compõem 305 etnias, distribuídas por todas as unidades federativas do Brasil. Esta diversidade cultural consiste em uma das maiores riquezas do país, mas, ao mesmo tempo, é também um grande desafio para a elaboração e implementação de políticas públicas específicas e diferenciadas. O objetivo deste estudo foi analisar o perfil epidemiológico de saúde bucal e a necessidade de tratamento endodôntico de indígenas das etnias SATERÉ MAWÉ, que vivem em Barreirinha-AM, e TIKUNA, residentes na zona urbana de MANAUS-AM. Após determinar a necessidade de tratamento endodôntico, este estudo comparou as respostas perirradiculares de infecções endodônticas entre membros de uma civilização ocidental, residentes em Belo Horizonte MG, e indígenas não miscigenados da etnia TIKUNA. Para a análise epidemiológica participaram do estudo 138 indivíduos, sendo 98 pertencentes à etnia TIKUNA e 40 SATERÉ-MAWE; distribuídos nos grupos etários de 7 a 50 anos ou mais. Para a analise imunológica das alterações perirradiculares das populações selecionas, coletaram-se as amostras clínicas em dentes portadores de necrose pulpar. Os indígenas da etnia Tikuna foram atendidos na Clínica de Endodontia da UNIP (Universidade Paulista), campus Manaus. Os membros da população ocidental foram atendidos nas clínicas da Faculdade de Odontologia da UFMG. As amostras foram coletadas imediatamente após a instrumentação do SCR, introduzindo-se cones absorventes nos SCR, 1 mm além do ápice radicular. Subsequentemente, as amostras foram transferidas para um tubo estéril, e mantidas na temperatura de - 70 º C até a sua análise. Utilizando-se o PCR em tempo real, avaliou-se a expressão das citocinas e quimiocinas TNF-, IL-1-, IL-9, INF-, IL-17, IL-10, CXCR-4, CCL-2/MCP-1 e CCR-6. Os resultados demonstram que, em relação à etnia SATERÉ-MAWÉ, na faixa etária de 7 a 12 anos, o CPO-d apresentou valor médio de 3.17. Comparando-se o índice CPO-d e a necessidade de tratamento endodôntico em cada uma das etnias, verificou-se que estas variáveis estão correlacionadas, uma vez que, à medida que o CPO-d aumentou, verificou-se um aumento na necessidade de tratamento endodôntico. Os molares prevaleceram dentre os os dentes mais acometidos por cárie e com necessidade de tratamento endodôntico. Quanto à análise imunológica, observou-se um aumento significativo na expressão gênica de TNF, CCL-2/MCP-1, CXCR4, e CCR6, após os procedimentos de limpeza e formatação dos SCR apenas na população ocidental. Os níveis de INF- aumentaram na 2a coleta na população indigena, enquanto, em ambas as populações, houve um aumento significativo na expressão de IL-10 e IL-17 após os procedimentos de limpeza e formataçao. Não observaram-se diferenças significativas entre as expressões de IL-1 , IL-9, e CCL4, entre a 1ª e 2ª coleta, em ambas as populações. Conclui-se que as populações indígenas encontram-se desasistidas, visto que o CPO-d de ambas as etnias se encontram acima dos padrões recomendados pela OMS, principalmente na faixa etária de 07 a 12anos. Ademais, o nível de escolaridade ainda é muito baixo nas populações indígenas analisadas, mesmo na comunidade Tikuna, situada na zona urbana de Manaus/AM. Finalmente, observaram-se padrões imunes distintos quando se comparou as respostas das comunidades ocidentais e Tikuna, sugerindo que os determinantes genéticos e ambientais devem ser mais bem avaliados no futuro.

The indigenous peoples comprise 305 ethnic groups, distributed by all the federative units of Brazil. This cultural diversity is one of the most significant assets of the country, but at the same time, it is also a great challenge for the elaboration and implementation of specific and differentiated public policies. The objective of this study was to analyse the epidemiological profile of oral health and the need for endodontic treatment of SATERÉ MAWÉ indigenous people living in Barreirinha-AM, and TIKUNA, living in the urban area of MANAUS-AM. After determining the need for endodontic treatment, this study compared the perirradicular responses of endodontic infections among members of western civilisation, living in Belo Horizonte - MG, and no - mixed indigenous TIKUNA. For the epidemiological analysis, the study consisted of 138 individuals, of whom 98 were TIKUNA ethnicity, and 40 were SATERÉ-MAWE ethnics; aged between 7 and 50 years or more. For the immunological analysis of the perirradicular alterations of the selected populations, the clinical samples were collected in teeth with pulp necrosis. The Tikuna Indians were treated at the Endodontics Clinic of UNIP (Universidade Paulista), Manaus campus. The members of the western population were attended in the clinics of the Faculty of Dentistry of UFMG. Samples were collected immediately after SCR instrumentation, introducing absorbent cones in the SCR, 1 mm beyond the root apex. Subsequently, the samples were transferred to a sterile tube and maintained at -70 ° C until analysed. Using the real-time PCR, the expression of cytokines and chemokines TNF-, IL-1-, IL-9, INF-, IL-17, IL-10, CXCR- 2 / MCP-1 and CCR-6. The results show that, concerning the ethnicity SATERÉ-MAWÉ, in the age group of 7 to 12 years, the CPO-d presented a mean value of 3.17. Comparing the CPO-d index and the need for endodontic treatment in each of the ethnicities, these variables were correlated, since, as CPO-d increased, there was an increase in the demand for endodontic treatment. The molars prevailed among the teeth most affected by caries and in need of endodontic treatment. As for the immunological analysis, a significant increase in the gene expression of TNF, CCL-2 / MCP-1, CXCR4, and CCR6 was observed after the SCR cleaning and formatting procedures only in the western population. INF- levels increased in the second collection in the Indian community, while in both people, there was a significant increase in the expression of IL-10 and IL-17 after the cleaning and shaping procedures. There were no significant differences between IL-1, IL-9, and CCL4, between the 1st and 2nd collection, in both populations. It is concluded that the indigenous people are disassociated, since the CPO-d of both ethnic groups is above the standards recommended by the WHO, especially in the age group from 07 to 12 years. Besides, the educational level is still shallow in the indigenous populations analysed, even in the Tikuna community, located in the urban area of Manaus / AM. Finally, distinct immune patterns were observed when comparing Western societies and Tikuna responses, suggesting that genetic and environmental determinants should be better evaluated in the future. Keywords: endodontic treatment, epidemiology, indigenous, cytokines, chemokines, periapical lesion.

Avaliação da expressão apical de fatores pró-angiogênicos e citocinas em reposta à infecção endodôntica / Evaluation of apical expression of pro-angiogenic factors and cytokines in response to endodontic infection

A progressão e desenvolvimento de patologias pulpares e periapicais estão intimamente relacionados à presença de microrganismos e seus subprodutos nos sistema de canais radiculares (SCR), que induzem uma resposta de defesa adjacente ao ápice radicular. A angiogênese é apontada como fator essencial na patogênese das alterações periapicais crônicas, estando relacionada ao seu estabelecimento e manutenção, por ser fonte constante de citocinas, quimiocinas e proteases. A angiogênse também está relacionada ao reparo tecidual que segue à resolução das alterações perirradiculares após a realização da terapia endodôntica. Neste estudo, avaliou-se a expressão de fatores pró-angiogêncios e citocinas relacionadas, em amostras coletadas de pacientes (n=20) com dentes portadores de Periodontite Apical Crônica imediatamente após a instrumentação dos SCR e 7 dias após os procedimentos de desinfecção. As amostras foram analisadas por meio de reação em cadeia da polimerase em tempo real (PCR-RT). Verificou-se a expressão gênica de fatores pró-angiogênicos e citocinas Angiopoetina-1 (AGT1), Fator de crescimento endotelial vascular-A (VEGF-A), Fator de crescimento fibroblástico básico (FGF-ß), Proteína quimiotática de monócitos (CCL2/MCP-1), Proteína inflamatória de macrófagos-1ß (CCL4), C-X-C Receptor de quimiocina tipo 4 (CXCR4), C-C Receptor de quimiocina tipo 6 (CCR6), TNF-α, IFN-γ, IL-17, IL-10, IL6, RANK-L e MMP-9. A expressão do mRNA dos mediadores avaliados revelou aumento significativo nos níveis de AGT1, CCL2/MCP-1, CCL4, CCR6, TNF-α, IFN- γ, IL-10, RANK-L e MMP-9 no dia 7 quando comparado com o dia 0 (P <0,05). Para VEGF-A, FGF-ß, CXCR4, IL-17 e IL-6 as expressões de mRNA foram semelhantes em ambos tempos mensurados (P> 0,05). Pode-se concluir que, após desinfecção do SCR, houve aumento nos níveis de expressão de mRNA de importantes mediadores envolvidos nos fenômenos angioproliferativos e osteogênicos.(AU)

The progression and development of pulpal and periapical pathologies are closely related to the presence of microorganisms and their by-products in the infected root canal system (RCS), which induces a defense response adjacent to the root apex. Angiogenesis has been identified as an essential factor in the pathogenesis of chronic periapical alterations, being related to its establishment and maintenance, being a constant source of cytokines, chemokines and proteases. Angiogenesis is also related to the tissue repair that follows the resolution of the periradicular alterations after the implementation of endodontic therapy. In this study, was evaluated the expression of pro-angiogenic factors and correlated cytokines in samples collected from patients (n = 20) on teeth with Chronic Apical Periodontitis immediately after RCS instrumentation and 7 days after disinfection procedures. Samples were analyzed by real-time polymerase chain reaction (RT-PCR). The gene expression of pro-angiogenic factors and cytokines Angiopoetin-1 (AGT1), Vascular endothelial growth factor-A (VEGF-A), Basic fibroblast growth factor (FGF-ß), Monocyte Chemoattractant Protein-1 (CCL2/MCP-1), Macrophage inflammatory protein-1ß (CCL4), C-X-C chemokine receptor motif 4 (CXCR4), C-C chemokine receptor motif 6 (CCR6), TNF-α, IFN-γ, IL-17, IL-10, IL-6, RANK-L and MMP-9. The mRNA expression of the mediators evaluated revealed a significant increase in levels of AGT1, CCL2/MCP-1, CCL4, CCR6, TNF-α, IFN-γ, IL-10, RANK-L and MMP-9 on day 7 when compared to day 0 (P <0.05). As for VEGF-A, FGF-ß, CXCR4, IL-17 and IL-6 their mRNA expressions was similar at both observed times (P> 0.05). In conclusion, after cleaning and shaping procedures of the RCS, there was an increase in mRNA expression levels of important mediators involved in angioproliferative and osteogenic phenomenon.(AU)

Comparação in vivo de HyFlex CM e ProTaper Next na remoção de bactérias e endotoxinas de infecções endodônticas / In Vivo Comparison of HyFlex CM and ProTaper Next in Bacteria and Endotoxin Removal from Endodontic Infections

O objetivo deste estudo clínico foi avaliar a eficácia de dois sistemas rotatórios: HyFlex CM e ProTaper Next na remoção de bactérias cultiváveis e endotoxinas de canais radiculares infectados. Vinte e quatro canais radiculares de molares e pré-molares com necrose pulpar e lesão periapical foram selecionados e divididos aleatoriamente em 2 grupos: HyFlex CM (n = 12); e ProTaper Next (n = 12). As amostras foram coletadas antes e após o preparo biomecânico e inoculadas em frascos específicos. A irrigação foi realizada com hipoclorito de sódio a 2,5%. Um teste turbidimétrico LAL (Pyrogent 5000 ­ Lonza, Walkersville, MD, EUA) foi utilizado para quantificar endotoxinas. Cultura microbiológica foi utilizada para determinar a contagem de unidades formadoras de colônias bacterianas (UFC/mL). Os dados coletados foram analisados estatisticamente usando SigmaPlot 12.0 para Windows (Systat Software Inc., San Jose, CA). Foi realizado o teste estatístico de Two-Way ANOVA e o nível de significância foi de 5%. Nas coletas antes do preparo biomecânico, bactérias cultiváveis e endotoxinas foram evidenciadas em 100% das amostras. A análise de cultura revelou que não houve uma diferença estatisticamente significativa na redução bacteriana entre os dois sistemas de instrumentação. As endotoxinas estavam presentes em 100% dos canais após a instrumentação e não houve diferença estatística entre os dois sistemas na redução de endotoxinas. Assim, concluímos que ambos os sistemas de instrumentação foram eficazes na redução de bactérias e endotoxinas de canais radiculares com infecção endodôntica primária e que não houve diferença estatística entre eles. Contudo, nenhum sistema foi capaz de eliminar 100% das bactérias e seus subprodutos(AU)

The aim of this clinical study was to compare the effectiveness of two rotary systems: HyFlex CM and ProTaper Next on the removal of cultivable bacteria and endotoxins from primarily infected root canals. Twenty-four root canals of molars and premolars with pulp necrosis were selected and randomly divided into 2 groups: HyFlex CM (n = 12); and ProTaper Next (n = 12). Samples were collected before and after the biomechanical preparation and inoculated in specific flasks. Irrigation was performed using 2.5% sodium hypochlorite. A kinetic turbidimetric lysate assay of limulus amoebocytes was used to quantify endotoxins. Microbiological culture was used to determine the count of bacterial colony forming units (CFU/mL). Data collected were statistically analyzed using SigmaPlot 12.0 for Windows (Systat Software Inc, San Jose, CA). The TwoWay ANOVA statistical test was performed and the level of significance was 5%. In the samples before the biomechanical preparation, cultivable bacteria and endotoxins were evidenced in 100% of the cases. The culture analysis revealed that there was no statistically significant difference in the bacterial reduction between the two instrumentation systems. Endotoxins were present in 100% of the canals after instrumentation, and there was no statistical difference between the two systems in endotoxin reduction. Thus, it was concluded that both instrumentation systems were effective in reducing root canal bacteria and endotoxins with primary endodontic infection and that there was no statistical difference between them. However, no system was able to eliminate 100% of the bacteria and their by-products(AU)

Diagnóstico diferencial entre periodontite apical e cisto do ducto nasopalatino: relato de caso / Differential diagnosis of apical periodontitis and nasopalatine duct cyst: case report

A presença de uma alteração óssea periapical na região anterior da maxila, mais precisamente entre os incisivos superiores, pode ser erroneamente confundida com uma periodontite apical (AP) ou um cisto do ducto nasopalatino (CDNP). O diagnóstico diferencial é de suma importância para definir o tratamento adequado. O exame clínico, mais especificamente o teste de sensibilidade pulpar, é de suma importância, pois dentes portadores de periodontite apical não respondem ao teste, diferentemente dos casos de cisto do ducto nasopalatino. Uma paciente com 48 anos de idade, sexo feminino, compareceu à clínica de Endodontia com inchaço na região de palato e fundo de sulco anterior, relatando dor aguda ao redor dos incisivos centrais, sendo submetida a exames clínicos e radiográficos. Os exames clínicos mostraram ausência de vitalidade pulpar e as radiografias evidenciaram uma área radiolúcida simétrica na região de linha média, que poderia ser uma lesão endodôntica ou um CDNP. Durante o tratamento endodôntico, foi observada comunicação entre o canal radicular e a lesão periapical, sugerindo uma lesão de origem endodôntica. O tratamento endodôntico foi realizado e, após oito meses de acompanhamento, foi possível observar regressão da lesão. Este caso evidencia a importância de um diagnóstico diferencial preciso entre PA e CDNP, para planejar o tratamento adequado e favorecer o reparo dos tecidos periodontais.

Terapia de manutenção periodontal: perfil microbiológico e efeito do tabagismo na perda dental / Periodontal maintenance therapy: microbial profile and effects of smoking on tooth loss

Esta Tese reporta dois estudos distintos relacionados à terapia de manutenção periodontal (TMP): achados microbiológicos longitudinais de 6 anos relacionados à cooperação dos indivíduos e efeito do tabagismo na perda dental. A justificativa para estes estudos é baseada em dois aspectos pontuais: (1) Embora a associação do tabagismo como fator de risco para a periodontite e pior resposta à TMP tenha sido demonstrada em muitos estudos, o efeito isolado deste sobre a perda dental em indivíduos submetidos a TMP ainda não foi reportado em revisões sistemáticas; (2) Poucos estudos têm sido conduzidos avaliando mudanças longitudinais na microbiota subgengival de indivíduos em TMP e, até o momento, nenhum estudo relacionou níveis de bactérias associadas à periodontite com o grau de cooperação dos indivíduos em TMP. Neste sentido, os objetivos deste estudo são apresentados em dois artigos científicos: (1) realizar uma revisão sistemática e meta-análise do efeito do tabagismo na perda dental em indivíduos em TMP, com a seguinte questão focal: ¿Qual é o efeito do tabagismo na perda dental em indivíduos em terapia de manutenção periodontal?¿; (2) avaliar longitudinalmente, durante 6 anos, o efeito da cooperação em TMP na frequência das bactérias Actinomyces naeslundii, Porphyromonas gingivalis, Tanerella forsythia e Treponema dentícola. Na revisão sistemática as bases de dados MEDLINE, WEB OF SCIENCE, COCHRANE LIBRARY e SCOPUS foram pesquisadas, incluindo artigos até fevereiro de 2017. A estratégia de busca identificou 728 referências. Após a remoção das duplicatas, restaram 591 para a seleção baseada nos títulos e resumos, e desses, foram selecionados 36 para leitura completa do texto. Após a leitura, foram incluídos 10 artigos para revisão sistemática e 3 artigos para meta-análise. A qualidade da evidência científica foi moderada para indivíduos tabagistas em TMP apresentarem maior chance de perda dental que indivíduos não tabagistas. A metodologia do estudo microbiológico englobou um total de 56 indivíduos, todos recrutados de um coorte prospectivo com 212 participantes de um programa de TMP. Estes indivíduos foram acompanhados durante 6 anos, em 5 tempos de avaliações: T1 (anterior à terapia periodontal ativa), T2 (após a terapia periodontal ativa), T3 (última visita à TMP em 2 anos), T4 (última visita à TMP em 4 anos) e T5 (última visita à TMP em 6 anos). Assim, 28 indivíduos cooperadores regulares (CR) foram randomizados e pareados, pelo gênero e idade, a 28 indivíduos cooperadores irregulares (CI). Durante a TMP, os exames periodontais avaliaram os parâmetros clínicos: índice de placa (IP), profundidade de sondagem (PS), nível clínico de inserção (NCI) e sangramento à sondagem (SS). A quantificação de bactérias em carga total e dos níveis de A. naeslundii, P. gingivalis, T. forsythia e T. dentícola foi executada pela reação em cadeia da polimerase quantitativa (qPCR). Este estudo concluiu que CI apresentaram piores parâmetros clínicos periodontais e maiores níveis de carga bacteriana total que CR, refletindo o papel benéfico da cooperação na TMP em manter a estabilidade da condição periodontal

This Thesis report two distinct issues related to periodontal maintenance therapy (PMT): microbiological findings of 6 years related to compliance of individuas and effect of smoking on tooth loss. The rattionale for these studies is based on two specific aspects: (1) Although the association of smoking as a risk factor for periodontitis and worse response to PMT has been demonstrated in many studies, the isolated effect of smoking on tooth loss in patients undergiong PMT has not been reported in systematic reviews; (2) Few studies have been conducted on longitudinal changes in the subgingival microbiota of individuals in PMT and to date, no study related levels of bacteria to the degree of cooperation of individuls in PMT...

Participação de citocinas relacionadas às respostas Th17/Treg na inflamação periapical inflamatória crônica / Role of cytokines related to responses Th17 / Treg in chronic inflammatory periapical disease

A doença periapical inflamatória é uma sequela da infecção e necrose pulpar. Ela representa a resposta de defesa do hospedeiro à agressão proveniente do canal radicular. Assim, lesões periapicais crônicas se desenvolvem como resposta à manutenção da inflamação e à reabsorção óssea. As células T reguladoras (Treg) e células T helper (Th) 17 (Th17) têm papel fundamental na regulação da resposta imunológica. Forkhead box P3 (FoxP3) é o fator de transcrição para as células Treg, mas a diferenciação e maturação das células T naive em Treg ou Th17 depende também de citocinas específicas como o fator transformador de crescimento ß (TGF-ß), interleucina 10 (IL-10), interleucina 17 (IL-17), interleucina 6 (IL-6) e interleucina 21 (IL-21). Outras citocinas participam na modulação da atividade de Treg e Th17 como as quimiocinas CCL4 e CCL20 com função de recrutamento destas células para atuação no processo inflamatório. O papel de Treg e Th17 tem sido muito estudado em doenças autoimunes, mas ainda pouco avaliado na patogenia das lesões inflamatórias periapicais crônicas. Para este estudo foram utilizadas oitenta e sete amostras de tecido periapical humano para realização de análises morfológicas e dosagem de citocinas por meio de ensaio imunoenzimático (ELISA) (TGF-ß, IL10, IL-17, CCL4, CCL20). As amostras de tecido periapical foram coletadas de três grupos: grupo controle (dentes hígidos), grupo de dentes com necrose pulpar e lesão periapical e grupo de dentes com necrose pulpar sem lesão periapical. Observamos alta expressão de CCL4 e TGF-ß no grupo com lesão periapical quando comparado com os grupos sem lesão e uma correlação positiva entre CCL20 e IL-17, além de um aumento na expressão de CCL20 no grupo com lesão periapical quando comparado ao controle. Nossas observações implicam que essas duas características, tanto pró-inflamatórias quanto imunossupressoras, estão presentes na lesão periapical crônica, ocorrendo de maneira simultânea e com características de co-estimulação, como resultado do intenso trabalho da resposta imunológica do hospedeiro contra o processo inflamatório proveniente das bactérias intracanais e seus subprodutos.(AU)

Inflammatory periapical disease is a sequel of the infection and pulp necrosis. It represents the host defense response to aggression from the root canal. Chronic periapical lesions are developed in response to the maintenance of inflammation and bone resorption. Regulatory T cells (Tregs) and Th17 cells play a key role in regulating the immune response with opposite functions. Forkhead box P3 (FoxP3) is the master transcription factor for Treg cells, but differentiation and maturation of naive T cells in Treg or Th17 also depend on specific cytokines such as transforming growth factor ß (TGFß), interleukin 10 (IL -10), interleukin17 (IL-17), interleukin-6 (IL-6) and interleukin-21 (IL-21). Other cytokines participate in the modulation of the Treg and Th17 activity, as the chemokines CCL4 and CCL20 with function of recruitment of these cells to act in the inflammatory process. The role of Treg and Th17 has been better studied in autoimmune diseases, but sparsely evaluated in the pathogenesis of chronic periapical inflammatory lesions. Eighty-six human samples were used to perform histologic analysis and the cytokine dosage by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) (TGF-ß, IL-10, IL-17, CCL4, CCL20) in the periapical tissue of three groups: control group, group of teeth with pulp necrosis and periapical lesion and group of teeth with necrosis without periapical lesion. We observed high expression of CCL4 and TGF-ß in the group with periapical lesion in comparison with the groups without lesion and demonstrated increased expression of CCL20 in the group with periapical lesion when compared to control. Our findings imply that these two characteristics, pro-inflammatory and immunosuppressive, are present in the chronic periapical lesion, occurring simultaneously and with co-stimulation characteristics, as a result of the intense actionof the host's immune response against the inflammatory process coming from intracanal bacteria and their by-products.(AU)

MMP1-1607 polymorphism increases the risk for periapical lesion development through the upregulation MMP-1 expression in association with pro-inflammatory milieu elements

ABSTRACT Increased matrix metalloproteinases (MMPs) activity is a hallmark of periapical granulomas. However, the factors underlying the MMPs expression modulation in healthy and diseased periapical tissues remains to be determined. Objective In this study, we evaluated the association between the MMP1-1607 polymorphism (rs1799750) and pro-inflammatory milieu elements with MMP-1 mRNA levels in vivo. Material and Methods MMP1-1607 SNP and the mRNA levels of MMP-1, TNF-a, IFN-g, IL-17A, IL-21, IL-10, IL-4, IL-9, and FOXp3 were determined via RealTimePCR in DNA/RNA samples from patients presenting periapical granulomas (N=111, for both genotyping and expression analysis) and control subjects (N=214 for genotyping and N=26 for expression analysis). The Shapiro-Wilk, Fisher, Pearson, Chi-square ordinal least squares regression tests were used for data analysis (p<0.05 was considered statistically significant). Results The MMP1-1607 1G/2G and 1G/2G+2G/2G genotypes were significantly more prevalent in the patients than in controls, comprising a risk factor for periapical lesions development. MMP-1 mRNA levels were higher in periapical lesions than in healthy periodontal ligament samples, as well as higher in active than in inactive lesions. The polymorphic allele 2G carriers presented a significantly higher MMP-1 mRNA expression when compared with the 1G/1G genotype group. The ordered logistic regression demonstrated a significant correlation between the genetic polymorphism and the expression levels of MMP-1. Additionally, the pro- and anti-inflammatory cytokines IL-17A, IFN-g, TNF-a, IL-21, IL-10, IL-9, and IL-4 were significant as complementary explanatory variables of MMP-1 expression. Conclusion The MMP1-1607 SNP was identified as a risk factor for periapical lesions development, possibly due to its association with increased MMP-1 mRNA levels in periapical lesions. The MMP-1 expression is also under the control of the inflammatory milieu elements, being the cytokines TNF-a, IL-21, IL-17A, and IFN-g associated with increased MMP-1 levels in periapical lesions, while IL-10, IL-9, or IL-4 presented an inverse association.

Prevalence of endodontic diseases: an epidemiological evaluation in a Brazilian subpopulation

Aim: To determine the prevalence of pulp and periradicular diseases in a Brazilian subpopulation, correlating the prevalence with sex, age and most affected teeth. Methods: Data collected from medical records of patients treated at the Clinic of Specialization in Endodontics of the Federal University of Pernambuco between 2003 and 2010. The following variables were recorded for each patient: sex, age, affected teeth and diagnosed endodontic disease. Using Pearson's chi-square and Fisher's exact tests, the collected data analysis was set at a 5% significance level. Results: From all the treated teeth, 57% were diagnosed with pulp diseases, with the symptomatic irreversible pulpitis being the most prevalent (46.3%), while among the diagnosed periradicular diseases (43%), chronic apical periodontitis was the most prevalent (81%). Pulp diseases were detected in men and women in an unequal mode (p=0.008). Subjects under 40 years old had higher prevalence of pulp disease (p=0.286), and patients over 50 years were most affected by periradicular diseases (p=0.439). Maxillary incisors and mandibular first molars were the most affected teeth by endodontic diseases. Conclusions: In the evaluated subpopulation, the endodontic diseases were more prevalente in the maxillary incisive, affected indiscriminately individuals of different age groups and chronic apical periodontitis was the most prevalent diagnosed disease (Au)

Dentes com vitalidade pulpar e lesão periapical: displasia cemento-óssea periapical / Teeth with pulp vitality and apical periodontitis: periapical cemento-osseous dysplasia

Apesar da afirmação dogmática de que "se o dente tem lesão periapical, não existe mais vitalidade pulpar", isso não corresponde à realidade, pois existem periapicopatias em que os dentes portadores permanecem com vitalidade pulpar. Para fundamentar esse raciocínio, será discutido no presente artigo: 1) O conceito de periapicopatia verdadeira, 2) As diferenças entre ápice e periápice, 3) A distinção entre pericemento apical e periodonto apical, e 4) Considerações sobre a classificação das periapicopatias verdadeiras. Entre as quatro situações clínicas em que o dente com lesão periapical mantém a vitalidade pulpar, escolheu-se, para este primeiro trabalho de uma série, a Displasia Cemento-Óssea Periapical, que não requer qualquer tratamento, apenas controle ao longo do tempo.

Influência da hipertensão arterial no padrão fenotípico da lesão periapical, na diferenciação dos osteoclastos, na resposta tecidual e na capacidade de mineralização do cimento reparador MTA / Influence of hypertension in periapical lesion phenotype pattern, in osteoclastic differentiation, in tissue response and mineralization capacity of MTA repairing cement

Entre as consequências da forma de ação do MTA e seus produtos encontra-se a participação na indução da mineralização nos tecidos onde é aplicado e a redução da inflamação ali presente. Sendo a hipertensão arterial uma desordem crônica de cunho inflamatório que parece agir negativamente na mobilização do cálcio e nas estruturas ósseas do organismo, pode-se inferir que o desenvolvimento da lesão periapical e o seu tratamento por meio do uso do MTA podem ser alterados pela presença do estado hipertensivo. Dessa forma, o objetivo do presente trabalho foi de estudar a influência da hipertensão arterial no padrão fenotípico da lesão periapical, na diferenciação dos osteoclastos, na resposta inflamatória tecidual e na capacidade de mineralização dos cimentos reparadores à base de MTA. Para isso o trabalho foi dividido em três artigos. O artigo 1 comparou aspectos potenciais da formação da lesão periapical nas condições de hipertensão e normotensão, tendo como hipóteses nulas que a hipertensão não altera a quantidade de osteoclastos diferenciados, o tamanho da lesão periapical e a expressão das citocinas inflamatórias IL1α, IL1β e TNFα da lesão periapical. Esse artigo teve como resposta que, apesar de não haver diferenças estatisticamente significantes entre o tamanho da lesão periapical e a expressão de citocinas inflamatórias, ratos hipertensos apresentaram um elevado número de osteoclastos diferenciados. Já o artigo 2 investigou se a hipertensão afeta a resposta tecidual do MTA branco e cinza implantados subcutaneamente em ratos, bem como a capacidade dessas substâncias para induzir a mineralização, sendo a hipótese nula testada que a hipertensão não altera a resposta tecidual e capacidade de mineralização do MTA. Por meio dos resultados para as análises histológicas com as colorações Hematoxilina e Eosina e Von Kossa e sob luz polarizada, observou-se que a hipertensão exacerba a resposta inflamatória e diminui a capacidade de mineralização, prejudicando, dessa...

Among MTA and its products consequences, it is found the participation in mineralization induction in tissue where it is applied and reduction of inflammation maybe present. High blood pressure is a chronic inflammatory disorder that seems acting negatively on calcium mobilization and bone structures of the body. So it can be inferred that periapical lesion development and its treatment using MTA can be altered by the presence of a hypertensive state. Thus, the objective of this research was to study the influence of hypertension in periapical lesion phenotypic, in osteoclast differentiation, in tissue inflammatory response and mineralization ability of MTA repair cements. For this, work was divided into three articles. Article 1 compared potentials aspects of periapical lesion formation in hypertensive and normotensive conditions. Null hypothesis was high blood pressure does not change the number of differentiated osteoclasts, periapical lesion size and expression of IL1α, IL1β and TNFα inflammatory cytokines in apical periodontitis. Among results, although there was no statistically significant difference between periapical lesion size and inflammatory cytokines expression, hypertensive mice showed a large number of differentiated osteoclasts. Article 2 investigated whether hypertension affect tissue response and mineralization ability of white and grey MTA implanted subcutaneously in rats. Null hypotheses were that high blood pressure did not alter tissue response and mineralization capacity against MTA. Through histological analyzes with Hematoxylin and Eosin and Von Kossa stains and under Polarized Light was observed hypertension exacerbates inflammatory response and decrease mineralization capacity, damaging both tissue repair and mineralization. In turn, article 3 investigated whether hypertension affects white and gray MTA mineralization response when they were implanted subcutaneously in rats through osteoblast biomarkers RUNX-2, OPN and OCN. Null...

The role of Th17 and regulatory T cells (TREGs) in immunomodulation of experimental periapical lesions / Papel das células Th17 e T reguladoras (TREGs) na imunomodulação de lesões periapicais experimentais

A patogênese das lesões periapicais é determinada pelo equilíbrio entre a resposta imune pró-inflamatória do hospedeiro e a resposta anti-inflamatória/reparo. Diferentes subtipos de linfócitos e seus produtos têm sido implicados na patogênese dessas lesões, tais como as células T reguladoras (Tregs) e Th17. Enquanto as Tregs parecem ser potenciais agentes imuno-reguladores, Th17 parece estar associada à maior severidade da doença. Neste estudo, foram investigados o envolvimento de Tregs e Th17, além do impacto de diferentes terapias na progressão de lesões periapicais experimentais. Para isso, lesões periapicais foram induzidas (exposição pulpar e inoculação bacteriana) em camundongos C57BL/6, IL- 17KO e CCR4KO tratados com anticorpos anti-GITR (inibe a função de Treg) ou com CCL22p, partículas de ácido poliláctico-glicólico (induz a migração de Tregs). Além disso, os camundongos WT foram tratados com anti-RANKL utilizando protocolos contínuos ou intermitentes, ou com anti-TNF como controle. Posteriormente, analisou-se o fluxo e fenótipo de Tregs e Th17, perda óssea periapical e expressão de citocinas inflamatórias/imunológicas e marcadores de reparo (RealTimePCRarray, ELISA). A inibição de Tregs (depleção de CCR4 ou terapia anti-GITR), aumentou significantemente a severidade da lesão, associada com o aumento da expressão de citocinas pró-inflamatórias, Th1, Th17 e mediadores de destruição tecidual em paralelo com a diminuição dos marcadores de Treg e de reparo. A liberação local de CCL22 no canal radicular resultou na migração de Treg, dependente de CCR4, levando à modulação da lesão periapical, associada com a diminuição da expressão de marcadores pró-inflamatórios e de destruição tecidual em paralelo com o aumento dos marcadores de Tregs e de reparo. O tratamento anti-RANKL impediu o desenvolvimento da lesão, mas provocou uma resposta inflamatória contínua caracterizada pela elevada expressão de citocinas pró-inflamatórias e mediadores de destruição tecidual e diminuição da expressão dos marcadores de Tregs e de reparo. Este tratamento levou à recidiva da lesão e foi associado com o aumento da razão células TCD4 efetoras/supressoras e com o perfil de expressão gênica de lesões ativas. O tratamento anti-TNF limitou a progressão das lesões e não promoveu sua recidiva após o término da terapia, estando associado à resposta do hospedeiro atenuada. Por fim, a ausência de IL-17 resultou em lesões menos severas, associadas com o aumento da expressão de marcadores de reparo e citocinas anti-inflamatórias, em paralelo com a menor expressão de marcadores de destruição tecidual e citocinas pró-inflamatórias. De fato, observou-se menor concentração de osteoclastos, neutrófilos e células inflamatórias, na ausência de IL-17. Conclui-se, portanto, que as células T reguladoras são essenciais no controle da lesão periapical, enquanto as células Th17 acentuam a severidade dessas lesões. Comparando com outras estratégias clínicas, tais como a terapia anti-RANKL que perpetua a resposta inflamatória do hospedeiro levando a recidiva da lesão, a quimioatração de Treg bem como a inibição de Th17 podem ser estratégias promissoras para o manejo clínico das lesões periapicais.(AU)

The pathogenesis of periapical lesions is determined by the balance between host proinflammatory immune response and counteracting anti-inflammatory and reparative responses. In this context, different subtypes of lymphocytes and their products have been implicated in periapical lesion pathogenesis, such as regulatory T cells (Tregs) and Th17. While Tregs has been demonstrated as potential immunoregulatory agents, Th17 has been correlated with greater severity of disease. In this study, we investigated (in a cause-and-effect manner) the involvement of Tregs and Th17, besides the impact of different therapies in the progression of experimental periapical lesions. With this aim, periapical lesions were induced (pulp exposure and bacterial inoculation) in C57Bl/6 (wild-type), IL-17KO and CCR4KO mice and treated with anti­glucocorticoid-induced TNF receptor family regulated gene (anti-GITR) to inhibit Treg function or alternatively with CCL22-releasing, poly lactic-glycolic acid particles to induce site-specific migration of Tregs. Furthermore, WT mice were treated with anti-RANKL using continuous or intermittent protocols, and with anti-TNF therapy as a control. After treatment, lesions were analyzed for Treg or Th17 influx and phenotype, overall periapical bone loss, and inflammatory/immunologic and wound healing marker expression (RealTimePCRarray, ELISA). Treg inhibition by anti-GITR or CCR4 depletion results in a significant increase in periapical lesion severity, associated with upregulation of proinflammatory, Th1, Th17, and tissue destruction markers in parallel with decreased Treg and healing marker expression. The local release of CCL22 in the root canal system resulted in the promotion of Treg migration in a CCR4-dependent manner, leading to the arrest of periapical lesion progression, associated with down regulation of proinflammatory and tissue destruction markers in parallel with increased Treg and healing marker expression. Anti-RANKL treatment arrested lesion development, but prompted a continuous inflammatory response characterized by unremitting elevated expression of proinflammatory cytokines and tissue destructive mediators, and decreased expression of Tregs and wound healing markers levels. This treatment triggered lesion development relapse and was associated with high TCD4 effector/suppressor cells ratio and active lesions gene expression signature. Anti-TNF treatment limits lesions progression and does not drives lesions relapse upon cessation, being associated with attenuated host response. Finally, the absence of IL-17 results in a significant decrease in periapical lesions severity, associated with upregulation of healing markers and antiinflammatory cytokines, in parallel with decreased expression of tissue destruction markers and proinflammatory cytokines. Indeed, histomorphometric analysis showed lower concentration of osteoclasts, neutrophils and mononuclear cells in periapical lesions without IL-17. Therefore, we concluded that regulatory T cells are essential in the control of apical periodontitis, while Th17 cells accentuate the lesions severity. Compared with other clinical strategies, such as anti-RANKL therapy, which perpetuates the host inflammatory response prompting lesion relapse, chemoattraction of Treg as well as inhibition of Th17 may be promising strategies for the clinical management of periapical lesions.(AU)