Nanopartículas de prata em bases de próteses de PMMA para controle de atividade microbiana / Silver nanoparticles in PMMA prosthesis bases to control microbial activity

Objetivo:Avaliar in vitro a atividade de Staphylococcus aureus e Candida albicans em bases de próteses convencionais à base de polimetilmetacrilato de metila com nanopartículas de prata incorporadas a sua composição. Métodos: Foi realizado um estudo experimental laboratorial com resinas acrílicas autopolimerizáveis comercialmente disponíveis, Vipi Flash/VIPI e JET/Clássico. Foram confeccionados 80 corpos de prova, divididos em 16 grupos (n = 5), referentes ao tipo de resina, tratamento (incorporação e imersão na solução de nanopartículas de prata) e microrganismo inoculado. As nanopartículas foram sintetizadas com ácido polimetacrílico, nitrato de prata e irradiadas com luz ultravioleta de baixa potência (~8W) por 6 horas, e as suas concentrações idealizadas pelo método de microdiluição em placas para determinação da concentração mínima inibitória frente aos microrganismos selecionados. Verificou-se ação bactericida e fungicida com concentração inicial de 25% e após fator de diluição 12,5%. Resultados: Houve dificuldade de incorporação das nanopartículas na resina acrílica, que pode decorrer da alteração da proporção 3:1 recomendada pelo fabricante ou pela redução ou inativação da ação da nanopartícula de prata pela interação com o polimetilmetacrilato. VIPI com inclusão de nanopartícula obteve menor aderência de biofilme de Candida albicans. Conclusão:A nanopartícula de prata mostrou-se eficaz na sua ação de controle de Candida albicans e Staphylococcus aureus no método de imersão, entretanto, a sua ação antimicrobiana foi comprometida após inclusão nas resinas acrílicas.

Aim:To perform an in vitro evaluation of the activity of Staphylococcus aureus and Candida albicansin conventional prosthesis bases, based on methyl polymethylmethacrylate with silver nanoparticles incorporated into the composition. Methods: An experimental laboratory study was carried out using commercially available self-curing acrylic resins, Vipi Flash/VIPI and JET/Clássico. Eighty specimens were manufactured and divided into 16 groups (n = 5), referent to the resin brand, treatment (incorporation and immersion in the silver nanoparticle solution), and inoculated microorganism. The nanoparticles were synthesized with polymethacrylic acid and silver nitrate, and were irradiated with a low power (~ 8W) ultraviolet light for 6 hours. Their concentrations were idealized by the method of microplate dilution to determine the minimum inhibitory concentration when compared to the selected microorganisms. Bactericidal and fungicidal activities were identified with an initial concentration of 25% and a subsequent dilution factor of 12.5%. Results:It was difficult to incorporate the AgNPs into the acrylic resin, which may well have resulted from the change from the 3:1 proportion recommended by the manufacturer or by reducing or inactivating the action of the silver nanoparticle by interaction with polymethylmethacrylate. VIPI with the inclusion of nanoparticles obtained a lesser Candida albicans biofilm adherence. Conclusion: Silver nanoparticles were effective in controlling Candida albicans and Staphylococcus aureus in the immersion method; however, the antimicrobial activity was compromised after inclusion in acrylic resins.

Influência do fator mecânico na formação de lesões cervicais não cariosas / Influence of the mechanical factor on the formation of non-carious cervical lesions

Lesões cervicais não cariosas têm etiologia multifatorial, com ênfase na ação de ácidos, abrasivos e cargas mecânicas aplicadas à distância do local da lesão, mas que concentram tensão na região cervical, que é o local da lesão. O mecanismo de ação das cargas aplicadas à distância não foi ainda elucidado. Pensou-se que seria mediado por micro fraturas que fariam se desprender fragmentos de tecido (abfração); mas isto não explicaria a formação de lesões produzidas na presença de compressão, mesmo concentrada, nem a interação sinérgica na presença de ácidos. Além disso, as fraturas nunca foram localizadas no tecido. Uma outra hipótese considera os tecidos dentários como esponjas rígidas, deformáveis, capazes de expelir a sua própria água quando comprimidos ou absorver fluidos circundantes quando tracionados. Quando a carga fosse removida e o tecido recuperasse sua forma original, o fluido faria o caminho inverso. Assim, a ciclagem mecânica forçaria a circulação de fluidos circundantes no tecido e, se fossem ácidos, facilitaria a dissolução do tecido, tanto sob tração quanto sob compressão. A proposta do estudo foi avaliar a penetração de fluido traçador (nitrato de prata a 10 %) no esmalte de espécimes submetidos ou não a cargas cíclicas excêntricas que provocam compressão ou tração. Os espécimes foram construídos a partir de incisivos bovinos, cortados em paralelepípedos de 3x3x8,2 mm, com entalhe na dentina para formar um pescoço de 2x2 mm de seção transversal. Os espécimes, exceto uma faixa central do esmalte vestibular de 1,5x5 mm foram protegidos da penetração do traçador com verniz. Foram aplicados 1.200 ciclos mecânicos de carga excêntrica para produzir tensões de tração ou compressão no esmalte, com 5 s de carga de 40 N e 25 s sem carga. Um grupo controle não recebeu nem carga nem exposição ao traçador; outro controle recebeu apenas exposição ao traçador, sem carga; outros dois grupos controles receberam carga (de tração ou compressão) enquanto imersos em água e, imediatamente depois, foram expostos ao traçador durante 600 min. Os dois grupos teste foram expostos simultaneamente aos ciclos de carga (de tração ou de compressão) e ao traçador. A prata do traçador foi precipitada por exposição a fixador radiográfico e, posteriormente, à luz de fotopolimerizador (5 min). Para localizar o traçador os espécimes foram micro tomografados, radiografados e, posteriormente, foram cortados longitudinalmente para obter uma fatia central de 1 mm de espessura para avaliação em lupa, com luz refletida ou transmitida. A micro tomografia foi ineficaz devido aos artefatos formados. As radiografias marcaram apenas as regiões de maior concentração do traçador. A avaliação dos cortes em lupa binocular permitiu concluir que existem variações de padrão de coloração natural do esmalte de incisivos bovinos, que todos os espécimes expostos ao traçador, independentemente do grupo experimental, apresentaram alguma infiltração, pelo menos numa camada fina e uniforme da superfície exposta. Além da fina camada marcada, existe variação de padrões de penetração do traçador, mesmo entre os que receberam um mesmo tratamento experimental, o que pode ser devido a variações inevitáveis no histórico de cada dente. Isto, apesar de se tornar um inconveniente para identificar um possível efeito de bombeamento, poderia ser identificado também como um indicador de que podem existir diferenças na velocidade e profundidade de penetração no esmalte de outras moléculas como, por exemplo, as dos ácidos. Em resumo, o corante traçador penetrou no esmalte dos espécimes de incisivos bovinos sem diferenças claras de padrão de penetração entre os diferentes grupos e pode ser um método eficaz para comprovar a hipótese de circulação forçada, mas exigirá novos estudos.

Effect of thermocycling to adhesive interface of enamel analyzed by polarized light microscopy / Análise do efeito da termociclagem na interface adesivo do esmalte analisada por microscopia de luz polarizada

Objetivo: A desmineralização menos agressiva do esmalte por sistemas adesivos autocondicionantes resulta em maior descoloração, infiltração marginal e falhas em suas restaurações. Deste modo, este estudo teve como objetivo avaliar a microinfiltração por meio da técnica da infiltração de nitrato de prata e formação de tags na interface esmalte/adesivo. Material e Método: Duzentos fragmentos de esmalte foram divididos aleatoriamente em 10 grupos (n = 10) de acordo com o sistema adesivo (Single Bond Adper Plus- (SB), Clearfil Tri-S Bond- (CF), ou Scotchbond Universal- (SBU)) e a superfície do esmalte (lixada (GE), não lixada- (UE), condicionada com ácido fosfórico 37%- (PHA), ou sem condicionamento): (SB-UE), (SB-GE), (CF-UE), (CFGE), (CF-ue/pha), (CF-ge/pha), (SBU-ue), (SBU-ge), (SBU-ue/pha) e (SBU-ge/pha). Metade das amostras restauradas foram submetidas a 20.000 ciclos térmicos. Quatro fatias de 1,0 mm/amostra foram obtidas para avaliar a formação de tags e infiltração de nitrato de prata. Todas as amostras foram examinadas com microscopia de luz polarizada e a percentagem de infiltração foi quantificada. Resultados: Não foram observadas interações entre os três fatores. O sistema adesivo e envelhecimento exibiram uma interação. Foram encontradas diferenças significativas somente após termociclagem: os grupos SB e SBU condicionados apresentaram menor porcentagem de infiltração comparados aos outros grupos, independente do tipo de esmalte. Quanto à analise qualitativa, o comprimento dos tags após condicionamento ácido foi maior para o GE comparado ao UE, independente do sistema adesivo. Conclusão: A aplicação dos sistemas adesivos na técnica autocondicionante mostrou uma formação de tags significativamente menor comparada à técnica convencional. O condicionamento ácido do esmalte previamente aos sistemas adesivos multi-mode é fundamental para reduzir o grau de infiltração na interface adesiva após envelhecimento.

Objective: The less aggressive demineralization of enamel by self-etching systems results in greater staining, marginal leakage, and failure in their restorations, so this study aimed to assess the silver nitrate infiltration and tag formation of the enamel/adhesive interface. Material and Methods: Two hundred enamel fragments were randomly assigned into 10 groups according to the adhesive system (Single Bond Adper Plus- (SB), Clearfil Tri-S Bond-(CF), or Scotchbond Universal-(SBU)) and enamel surface (ground- (ge), unground-(ue), phosphoric acid etching- (pha), or none) (n=10): (SB-ue), (SB-ge), (CF-ue), (CF-ge), (CF-ue/pha), (CF-ge/pha), (SBU-ue), (SBU-ge), (SBU-ue/pha), and (SBUge/pha). Half of the restored samples were submitted to thermocycling. Four slices of 1.0mm/ sample were obtained to evaluate tag formation and silver nitrate infiltration. All of the specimens were examined with Polarized Light Microscopy, and the percentage of infiltration was quantified. Results: No interactions were found among the three factors. The adhesive and aging exhibited an interaction. Significant differences were found only after thermocycling: the SB and SBU-etched groups had decreased infiltration compared with the other groups. The tag length after etching was higher for ge compared with ue, regardless of the adhesive system. Conclusion: The selfetching techniques resulted in significantly less tag formation compared with the conventional technique. The acid pre-etching of enamel with the multi-mode adhesive was fundamental for reducing the degree of infiltration of the adhesive interface after aging

Análise da ação de nanopartículas de prata sobre o biofilme de espécies de Candida / Analysis of the antifungal activity of silver nanoparticles on biofilms of Candida species

O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antifúngica de nanopartículas de prata (NP) contra os biofilmes de Candida albicans e Candida glabrata. NP foram sintetizadas por meio da redução do nitrato de prata com citrato de sódio e estabilizadas com amônia ou polivinilpirrolidona. Os testes de concentração inibitória mínima (CIM) das NP contra células de Candida foram baseados no método da microdiluição. NP foram aplicadas sobre os biofilmes de Candida (48 horas) e após 24 horas de contato sua atividade antifúngica foi determinada por meio da quantificação da biomassa total (coloração com violeta cristal (VC)) e por meio da enumeração das unidades formadoras de colônias (UFCs). Após o tratamento com NP, as matrizes dos biofilmes foram extraídas e analisadas em termos de proteínas, carboidratos e DNA, e a estrutura dos biofilmes foi analisada por meio da microscopia eletrônica de varredura e de epifluorescência. A atividade antibiofilme da combinação de NP com nistatina e clorexidina foi avaliada por meio dos ensaios de VC e UFCs. Leveduras viáveis foram recuperadas a partir dos biofilmes previamente tratados com NP e adicionadas às células epiteliais HeLa e aos poços de placas de poliestireno e, após 2 horas de contato, a adesão foi determinada usando VC. A eficácia de NP submetidas às variações de temperatura (50, 70 e 100ºC) e pH (5 e 9) também foi avaliada, assim como a susceptibilidade às NP dos biofilmes de Candida em diferentes fases de crescimento. Os resultados de CIM mostraram que NP foram fungicidas contra os isolados testados em concentrações baixas (0,4-3,3 μg/mL). NP foram mais efetivas na redução da biomassa para os biofilmes de C. glabrata (reduções de 90% na concentração de 108 μg/mL) do que para C. albicans, e promoveram reduções significativas no log10 do número de UFCs em concentrações iguais ou superiores a 108 µg/mL. Os resultados demonstraram que o tipo de agente estabilizante e o tamanho das partículas não influenciaram na...

The aim of this study was to evaluate the antifungal activity of silver nanoparticles (SN) against Candida albicans and Candida glabrata biofilms. Colloidal suspensions of SN were synthesized by reducing silver nitrate with sodium citrate and stabilized with ammonia or polyvinylpyrrolidone. Minimal inhibitory concentrations (MIC) were performed for Candida cells grown in suspension following the microbroth dilution method. Candida biofilms (48 h) were treated with SN for 24 h and then the total biomass quantification (by crystal violet (CV) staining) and the colony forming units (CFUs) were determined. Also, after treating with SN, extracellular matrices were extracted from Candida biofilms and analyzed chemically in terms of proteins, carbohydrates and DNA. To investigate the biofilm structure, scanning electron microscopy and epifluorescence microscopy were carried out. The antibiofilm activity of SN in combination with nystatin and chlorhexidine was also assessed by CV and CFU. Moreover, viable yeasts were recovered from the biofilms pretreated with SN and added to HeLa epithelial cells or to empty wells of polystyrene plates and, after 2 h of contact, the adhesion capacity of the yeasts was determined by using CV staining. The antibiofilm efficacy of SN subjected to variations of temperature (50, 70 and 100ºC) and pH (5 and 9) was also evaluated. Finally, the susceptibility to SN of biofilms in different stages of growth was analyzed. MIC results showed that SN were fungicidal against the tested strains at very low concentrations (0.4- 3.3 μg/mL). SN were more effective in reducing the total biomass of C. glabrata (reductions around 90% at 108 μg/mL SN) than C. albicans biofilms, and provided significant log10 reduction of the number of CFUs after having being exposured to SN concentrations at or higher than 108 µg/mL. The results either demonstrated the particle size and the type of stabilizing agent used for producing SN did not interfere in their…

Análise da ação de nanopartículas de prata sobre o biofilme de espécies de Candida / Analysis of the antifungal activity of silver nanoparticles on biofilms of Candida species

O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antifúngica de nanopartículas de prata (NP) contra os biofilmes de Candida albicans e Candida glabrata. NP foram sintetizadas por meio da redução do nitrato de prata com citrato de sódio e estabilizadas com amônia ou polivinilpirrolidona. Os testes de concentração inibitória mínima (CIM) das NP contra células de Candida foram baseados no método da microdiluição. NP foram aplicadas sobre os biofilmes de Candida (48 horas) e após 24 horas de contato sua atividade antifúngica foi determinada por meio da quantificação da biomassa total (coloração com violeta cristal (VC)) e por meio da enumeração das unidades formadoras de colônias (UFCs). Após o tratamento com NP, as matrizes dos biofilmes foram extraídas e analisadas em termos de proteínas, carboidratos e DNA, e a estrutura dos biofilmes foi analisada por meio da microscopia eletrônica de varredura e de epifluorescência. A atividade antibiofilme da combinação de NP com nistatina e clorexidina foi avaliada por meio dos ensaios de VC e UFCs. Leveduras viáveis foram recuperadas a partir dos biofilmes previamente tratados com NP e adicionadas às células epiteliais HeLa e aos poços de placas de poliestireno e, após 2 horas de contato, a adesão foi determinada usando VC. A eficácia de NP submetidas às variações de temperatura (50, 70 e 100ºC) e pH (5 e 9) também foi avaliada, assim como a susceptibilidade às NP dos biofilmes de Candida em diferentes fases de crescimento. Os resultados de CIM mostraram que NP foram fungicidas contra os isolados testados em concentrações baixas (0,4-3,3 μg/mL). NP foram mais efetivas na redução da biomassa para os biofilmes de C. glabrata (reduções de 90% na concentração de 108 μg/mL) do que para C. albicans, e promoveram reduções significativas no log10 do número de UFCs em concentrações iguais ou superiores a 108 µg/mL. Os resultados demonstraram que o tipo de agente estabilizante e o tamanho das partículas não influenciaram na...

The aim of this study was to evaluate the antifungal activity of silver nanoparticles (SN) against Candida albicans and Candida glabrata biofilms. Colloidal suspensions of SN were synthesized by reducing silver nitrate with sodium citrate and stabilized with ammonia or polyvinylpyrrolidone. Minimal inhibitory concentrations (MIC) were performed for Candida cells grown in suspension following the microbroth dilution method. Candida biofilms (48 h) were treated with SN for 24 h and then the total biomass quantification (by crystal violet (CV) staining) and the colony forming units (CFUs) were determined. Also, after treating with SN, extracellular matrices were extracted from Candida biofilms and analyzed chemically in terms of proteins, carbohydrates and DNA. To investigate the biofilm structure, scanning electron microscopy and epifluorescence microscopy were carried out. The antibiofilm activity of SN in combination with nystatin and chlorhexidine was also assessed by CV and CFU. Moreover, viable yeasts were recovered from the biofilms pretreated with SN and added to HeLa epithelial cells or to empty wells of polystyrene plates and, after 2 h of contact, the adhesion capacity of the yeasts was determined by using CV staining. The antibiofilm efficacy of SN subjected to variations of temperature (50, 70 and 100ºC) and pH (5 and 9) was also evaluated. Finally, the susceptibility to SN of biofilms in different stages of growth was analyzed. MIC results showed that SN were fungicidal against the tested strains at very low concentrations (0.4- 3.3 μg/mL). SN were more effective in reducing the total biomass of C. glabrata (reductions around 90% at 108 μg/mL SN) than C. albicans biofilms, and provided significant log10 reduction of the number of CFUs after having being exposured to SN concentrations at or higher than 108 µg/mL. The results either demonstrated the particle size and the type of stabilizing agent used for producing SN did not interfere in their...

Permeability, roughness and topography of enamel after bleaching: tracking channels of penetration with silver nitrate

Aim: This study evaluated the surface roughness, topography and permeability of bovine enamel by profilometry and scanning electron microscopy (SEM) with and without silver nitrate solution, after exposure to different bleaching agents. Methods: Fifty-two enamel samples were randomly divided into four groups (n=13): CP16% –16% carbamide peroxide - Whiteness Perfect; HP6% - 6% hydrogen peroxide - White Class; HP35% - 35% hydrogen peroxide Whiteness HP Maxx; and Control - not bleached and kept in artificial saliva. For roughness analysis, average surface roughness (Ra) and flatness coefficient (Rku) parameters were used. The topography and permeability were examined by SEM. For permeability evaluation, the samples were immersed in a 50% silver nitrate solution and analyzed using a backscattered electron and secondary electron mode. Results: For the roughness (Ra) evaluation, Kruskal-Wallis and Wilcoxon Signed Ranks Test were used, showing an increase on the surface roughness in all bleached groups. The Rku parameter suggested changes on enamel integrity. The SEM micrographs indicated changes on enamel topography and different levels of silver nitrate penetration in the samples of the bleached groups. In the overall analysis, the bleaching agents promoted surface changes and higher silver nitrate penetration when compared to the control group. Conclusions: It may be concluded that different bleaching agents might alter the topography and roughness of enamel surface. Moreover, the higher infiltration of silver nitrate suggests an easier penetration path for the oxygen molecules into the dentin substrate.

Microscopia ótica aplicada no estudo morfometria da prata de filmes radiográficos / Optical microscopy applied on silver morphometric study from radiographic films

Introdução - O presente estudo aplica a microscopia ótica para analisar os cristais de prata nos filmes radiográficos em Odontologia. Métodos - Filme oclusal foi exposto ao feixe de raios X, produzindo ionização na metade da radiografia, usando-se 67kVp e 8mAs. O filme foi processado utilizando-se a processadora automática Periomat. A avaliação microscópica dos cristais halogenados de prata foi obtida através de microscopia ótica com 100x, 200x e 400x de ampliação. Resultados - Observou-se diferenças entre áreas radiolúcidas e radiopacas na concentração, dispersão e número de cristais no campo de visão. Conclusões - A forma dos cristais permanece fusiforme em ambas as áreas, apesar das diferenças na sua distribuição no filme

Permeabilidade marginal de restauraçöes de Classe V com Scotchbond Multi-Purpose/Z-100, em funçäo do momento do acabamento / The marginal microleakage of restaurations Class V, with adhesive Scotchbond Multi-Purpose/Z 100, in function of the finish and polish

Este trabalho foi realizado com a finalidade de avaliar a permeabilidade marginal de restauraçöes de Classe V, tendo como materiais restauradores o adesivo Scotchbond Multi-Purpose e o compósito Z-100, através do uso de nitrato de prata. O estudo (in vitro) permitiu observar que as restauraçöes que receberam o acabamento e polimento, depois de armazenadas em água a 36ñ 1ºC por semana, tiveram um desempenho superior às outras que receberam tratamentos imediatamente após sua restauraçäo

Comparative SEM and TEM observations of nanoleakage within the hybrid layer / Observações comparativas SEM e TEM da infiltração dentro da camada híbrida

Must adhesive interface studies have involved SEM demonstration of the penetration of adhesive resins into desmineralized dentin surfaces with subsequent creation of hybrid layers. Nanoleakage is a term that describes the diffusion of small ions or molecules within the hybrid layer in the absence of gap formation. The present microscopic study examined the nanoleakage of the hybrid layer using a silver nitrate staining technique. Adhesive dentin sandwiches, which were immersed in a silver nitrate solution, were prepared for both SEM and TEM examination using both the Clearfil Liner Bond and All-Bond 2 adhesive systems. Both systems demonstrated silver accumulation within the hybrid layers. Clearfil Liner Bond System showed scattered silver particles at the bottom two-thirds of the hybrid layer by both SEM and TEM observation, whereas All-Bond 2 revealed stained fiber-like structures within the full thickness of the hybrid layer. To evaluate the quality of the hybrid layer, the utilization of tracer molecules such as silver nitrate that are detectable by both SEM and TEM is proposed. It is important to determine the location and morphology of these nanometer-sized porosities that may permit the hydrolysis of collagen fibers and degradation of adhesive monomers