Comparison of Transforming Growth Factor 1 (TGF-β 1) Expression in Various Lysate Platelet-Rich Fibrin (L-PRF) Concentrations on Human Dental Pulp Stem Cell Differentiation

ABSTRACT Objective: To compare Transforming growth factor-β1 (TGF-β1) expression in various L-PRF concentrations on the hDPSC differentiation process. Material and Methods: hDPSC cell cultures were subjected to serum starvation by reducing FBS levels in the hDPSC culture media. Lysate PRF was obtained from the PRF gel, which was then incubated at 4°C for 24 h. The supernatant was dried, transferred to a 2-ml Eppendorf tube, and stored at −20°C. The evaluation of TGF-β1 expression in 1%, 5%, 10%, and 25% L-PRF samples and 10% FBS (control) during the process of hDPSC differentiation was quantified using an ELISA reader on day 7. The expression of TGF-β1 was subjected to a one-way ANOVA test, followed by Bonferroni's post hoc test with significant values (p<0.05). Results: Significant differences were noted in TGF-β1 expression between 1%, 5%, 10%, and 25% L-PRF and the control group (10% FBS). The highest TGF-β1 expression occurred with 25% L-PRF (0.645 ± 0.048), followed by 10% L-PRF (0.461 ± 0.035), 10% FBS (0.374 ± 0.013), 5% L-PRF (0.275 ± 0.045), and the lowest expression was with 1% L-PRF (0.160 ± 0.045). Conclusion: The best result of TGF-B1 expression in hDPSC differentiation was in the 25% L-PRF group.

Papel da MMP-9 e do TGF-ß na expressão de componentes da Matriz Extracelular por fibroblastos gengivais de camundongos normais e diabéticos com doença periodontal in vitro / Role of MMP-9 and TGF-ß on extracellular matrix components expression by in vitro fibroblasts from normal and diabetic mice with periodontal disease

Na presença de Diabetes Mellitus, a doença periodontal (DP) pode acentuar o aparecimento de complicações e aumentar sua prevalência. O objetivo desta pesquisa foi avaliar se o Fator de Crescimento Transformador -ß do tipo 1 (TGFß1, sigla em inglês) e Metaloproteinase de matriz -9 (MMP-9, sigla em ingês) estão modulando a formação de componentes de matriz extracelular em fibroblastos gengivais (FG) de camundongos diabéticos e com DP. Os 24 animais foram separados em 4 grupos, e então foram tratados com estreptozotocina para indução de diabetes e foi realizado indução da DP através de ligadura com fio de seda. Após a eutanásia e coleta da gengiva, FG dos camundongos foram cultivados. A expressão gênica de RNAm e produção de proteína para MMP-9, TGF-ß1 e colágeno tipo 1 (Col1a1) foram avaliadas. Eles também foram tratados com inibidores de MMP-9 e TGF-ß1, e dexametasona (Dexa) por 24h. FG de animais normais e diabéticos com DP induzida tiveram expressão aumentada de MMP-9 e TGF-ß1 em 6 e 24h, diminuindo em 48h. Expressão gênica de Col1a1 foi diminuída em FG com DP em 6, 24 e 48h. Inibidor de MMP-9 (MMP-9i) bloqueou a expressão gênica de MMP-9 e de TGF-ß1 em FG normais e diabéticos em 24h. A expressão de col1a1 foi inibida pelo MMP-9i somente em FG normais, mas não em diabéticos. A expressão de receptor de TGF-ß do tipo 1 (TGF-ß R1) foi aumentada em FG normais e diabéticos, porém MMP-9i diminuiu esta expressão somente em FG diabéticos. Inibidor de TGF-ß (SB431542) e Dexa interromperam a expressão gênica de MMP-9, TGF-ß1 e col1a1 em FG normais e diabéticos com DP em 24h. TGF-ß R1 também foi inibido em FG normais e diabéticos com DP em 24h de tratamento com SB431542. Juntos, esses achados sugerem que indivíduos diabéticos têm síntese aumentada de TGF-ß e MMP-9 em FG durante a DP devido a ativação do TGF-ß R1 via ALK5 e presença de MMP-9. Por outro lado, o aumento na expressão de colágeno é devido a ativação de TGF-ß R1 em FG normais e diabéticos, e presença de MMP-9 em FG normais, somente(AU)

In presence of Diabetes Mellitus, periodontal disease (PD) can accentuate complication appearance and increase prevalence. The aim of this study was to evaluate whether Transforming Growth factor-ß 1 (TGF-ß1) and Matrix Metaloproteinase-9 (MMP-9) are modulating the extracellular matrix components in gingival fibroblasts (GF) from diabetic mice (D) with PD. 24 animals were divided in 4 groups then they were treated with streptozotocin to diabetes induction and DP was inducted through a ligature with silk thread. After euthanasia and gingiva harvest, mice GF were cultured. MMP-9, TGF- ß1, and type 1 Collagen (col1a1) mRNA expression and protein production were evaluated. They were also treated with MMP-9 and TGF-ß inhibitors, and dexamethasone (Dexa) for 24h. Normal and diabetic GF from PD-induced mice had increased MMP-9 and TGF-ß1 expression at 6 and 24 h decreasing at 48 h. Col1a1 gene expression was decreased in normal GF with PD at 6, 24 and 48 h. In diabetic GF col1a1 expression was inhibited at 6, 24 and 48 h. MMP-9 inhibitor (MMP-9i) blocked the MMP-9 expression, and TGF-ß1 gene expression in normal and diabetic GF at 24 h. The col1a1 gene expression was inhibited by MMP-9i only in normal GF but not in diabetic. TGF-ß R1 was increased in normal and diabetic GF with PD, but MMP9i decreased this expression only in diabetic GF. TGF-ß inhibitor (SB431542) and Dexa abrogated MMP-9, TGF-ß1 and col1a1 expression in normal and diabetic GF with PD at 24 h. TGF-ß R1 was also inhibited in normal and diabetic GF with PD after 24 h of treatment with SB431542. Taken together, these findings suggests that diabetic individuals has increased synthesis of TGF-ß and MMP-9 in GF during PD due to TGF-ß R1 activation via Alk5 and presence of MMP-9. On the other hand, increased in the col1a1 expression is due to TGF-ß R1 activation in normal and diabetic GF and presence of MMP-9 in normal GF(AU)

Effects of budlein A on human neutrophils and lymphocytes

ABSTRACT Sesquiterpene lactones (SLs) are the active constituents of a variety of medicinal plants used in traditional medicine for the treatment of inflammatory diseases and other ailments. Objective In this study, we evaluated whether budlein A modulates the activation of innate and adaptive immune cells such as neutrophils and lymphocytes. Material and Methods Our research group has investigated several plant species and several compounds have been isolated, identified, and their medical potential evaluated. Budlein A is a SL isolated from the species Aldama buddlejiformis and A. robusta (Asteraceae) and shows anti-inflammatory and anti-nociceptive activities. Advances in understanding how plant-derived substances modulate the activation of innate and adaptive immune cells have led to the development of new therapies for human diseases. Results Budlein A inhibited MPO activity, IL-6, CXCL8, IL-10, and IL-12 production and induces neutrophil apoptosis. In contrast, budlein A inhibited lymphocyte proliferation and IL-2, IL-10, TGF-β, and IFN-γ production, but it did not lead to cell death. Conclusions Collectively, our results indicate that budlein A shows distinct immunomodulatory effects on immune cells.

Estudo imuno-histoquímico da presença de miofibroblastos e da expressão do fator transformador de crescimento-beta1, interferon gama, mataloproteinase de matriz 13 e indutor de metaloproteinases de matriz em lesões odontogênicas epiteliais / Immunohistochemical study of the presence of myofibroblasts and the expression of transforming growth factor-beta1, interferon gamma, mataloproteinase matrix 13 and matrix metalloproteinase inducer in odontogenic epithelial lesions

Os miofibroblastos são células que apresentam um fenótipo híbrido exibindo características morfológicas de fibroblastos e de células musculares lisas, sendo a aquisição de tal fenótipo denominada diferenciação, passando então a expressar a a-SMA, a qual é importante na identificação dessas células. Estudos têm sugerido que os miofibrobíastos apresentam relação com a agressividade de diversas lesões e que o seu processo de diferenciação estaria relacionado à expressão do TGF-pl e do IFN-y atuando, respectivamente, no estímulo e na inibição dessa diferenciação. O objetivo deste trabalho foi investigar o papel dos miofibroblastos em lesões odontogênicas epiteliais, relacionando-os à agressividade das lesões e analisar por meio da imuno-histoquímica. a expressão do TGF-pl e IFN-y no processo de diferenciação, além da análise da MMP-13 que é ativada por miofibroblastos e do indutor de metaloproteinases de matriz (EMMPRIN) como precursor desta MMP. A amostra foi constituída por 20 ameloblastomas sólidos, 10 ameloblastomas unicfsticos, 20 ceratocistos odontogênicos e 20 tumores odontogênícos adenomatóides. Para a avaliação dos miofibroblastos, foram quantificadas as células imunorreativas ao anticorpo a-SMA presentes no tecido conjuntivo, próximo ao tecido epitelial. As expressões de TGF-pl, IFN-y, MMP-13 e EMMPRIN, foram avaliadas no componente epitelial e no conjuntivo, estabelecendo-se o percentual de imunorreatividade e atribuindo-se escores de 0 a 4. A análise dos miofibroblastos evidenciou maior concentração nos ameloblastomas sólidos (média de 30,55), seguido pelos ceratocistos odontogênicos (22,50), ameloblastomas unicísticos (20,80) e tumores odontogênicos adenomatóides (19,15) com valor de p= 0,001. Não foi encontrada correlação significativa entre TGF-pl e IFN-y no processo de diferenciação dos miofibroblastos, bem como na relação entre a quantidade de miofibroblastos e a expressão da MMP-13. Constatou-se, correlação estatística entre MMP-13 e TGF-pi (r= 0,087; p= 0,011) além de significante correlação entre MMP-13 e IFN-y (r=0,348; p=0,003). Entre EMMPRÍN e MMP-13 verificou-se significância (r= 0,474; p<0,001) assim como entre EMMPRIN e IFN-y (r=0,393; p=0,001). A maior quantidade de miofibroblastos evidenciada nos ameloblastomas sólidos, ceratocistos odontogênicos e ameloblastomas unicísticos sugere que estas células podem ser um dos fatores responsáveis para um comportamento biológico mais agressivo destas lesões, embora a população de miofibroblastos não tenha apresentado correlação com TGF- -pi, IFN-y ,MMP-13 e EMMPRIN. Quanto a correlação evidenciada entre MMP-13 e TGF-pl, isto pode sugerir um papel indutor do TGF-pl para a expressão da MMP-13, assim como os resultados deste estudo reforçam a relação bem estabelecida do EMMPRIN como indutor da MMP-13. Constatou-se também relação entre EMMPRIN e IFN-y assim como entre MMP-13 e IFN-y sugerindo, dessa forma, um sinergismo na ação anti-fibrótica desses marcadores.

Myofibroblasts are cells that exhibit a hybrid phenotype, sharing the morphoíogical characteristics of fibroblasts and smooth muscle cells, which is acquired during a process called differentiation. These cells then start to express a-SMA, a marker that can be used for their identification. Studies suggest that myofibroblasts are related to the aggressiveness of different tumors and that TGF-pl and IFN-y play a role in myofibroblast differentiation, stimulating or inhibiting this differentiation, respectively. The objective of this study was to investigate the role of myofibroblasts in epithelial odontogenic tumors, correlating the presence of these cells with the aggressiveness of the tumor. Immunohistochemistry was used to evaluate the expression of TGF-pl and IFN-y in myofibroblast differentiation, as well as the expression of MMP-13, which is activated by myofibroblasts, and of EMMPRIN (extracellular matrix metalloproteinase inducer) as a precursor of this MMP. The sample consisted of 20 solid ameloblastomas, 10 unicystic ameloblastomas, 20 odontogenic keratocysts, and 20 adenomatoid odontogenic tumors. For evaluation of myofibroblasts, anti-a-SMA-immunoreactive cells were quantified in connective tissue close to the epithelium. Immunoexpression of TGF-pl, IFN-y, MMP-13 and EMMPRIN was evaluaíed in the epithelial and connective tissue components, attributing scores of 0 to 4. The results showed a higher concentration of myofibroblasts in solid ameloblastomas (mean of 30.55), followed by odontogenic keratocysts (22.50), unicystic ameloblastomas (20.80), and adenomatoid odontogenic tumors (19.15) (p=0.00). No significant correlation between TGF-pl and IFN-y was observed during the process of myofibroblast differentiation. There was also no correlation between the quantity of myofibroblasts and MMP-13 expression. Significant correlations were found between MMP-13 and TGF-pi (r=0.087; p=0.01 1), between MMP-13 and ÍFN-y (r=0.348; p=0.003), as well as between EMMPRIN and MMP-13 (r=0.474; /xO.001) and between EMMPRIN and IFN-y (r=0.393; p=0.00). The higher quantity of myofibroblasts observed in solid ameloblastomas, odontogenic keratocysts and unicystic ameloblastomas suggests that these cells are one of the factors responsible for the more aggressive biological behavior of these tumors, although the myofibroblast population was not correlated with TGF-01, IFN-y, MMP-13 or EMMPRIN. The correlation between MMP-13 and TGF-pl suggests that the latter induces the expression of this metalloproteinase. The present results also support the well-established role of EMMPRIN as an inducer of MMP-13. Furthermore, the relationship between EMMPRIN and IFN-y and between MMP-13 and IFN-y suggests synergism in the antifibrotic effect of these markers.

Consideraçöes sobre oclusäo e maloclusäo na criança / Consideration about occlusion and malocclusion in children

O desenvolvimento do ser humano acontece em uma sucessäo de etapas desde a concepçäo até a idade adulta. Os padröes de crescimento e desenvolvimento säo descritos por muitos autores, os quais traçaram linhas e medidas para avaliar este crescimento. A proposta deste trabalho foi revisar o desenvolvimento da oclusäo e maloclusäo na criança. A estabilizaçäo da mordida, a seqüência de erupçäo, a relaçäo dos molares decíduos entre si, a inclinaçäo e angulaçäo dos dentes, os espaços e plano de oclusäo säo parâmetros que possibilitam avaliaçäo da oclusäo. A maloclusäo pode ser resultado de problemas hereditários e/ou ambientais. Fatores hereditários säo determinados na concepçäo e só podem ser identificados seus efeitos e näo sua causa...

Avaliaçäo da previsäo de crescimento sem tratamento de pacientes portadores de más oclusöes Classe II de Angle / Growth forecasting evaluation on Angle Class II malocclusions patients

Este estudo cefalométrico foi realizado em telerradiografias obtidas em norma lateral, com a finalidade de constatar a validade da Previsäo de Crescimento sem Tratamento, segundo Ricketts, em pacientes portadores de más oclusöes Classe II de Angle. A amostra foi composta de 20 pacientes, sendo 9 do sexo masculino e 11 do sexo feminino, com média de idade de 9 anos e 5 meses ao início controle radiográfico (T1) e de 11 anos e 3 meses no controle radiográfico final (T2). O tempo médio de controle radiográfico foi de 21,4 meses. Avaliou-se os 33 fatores da análise de Ricketts, comparando as diferenças encontradas em suas medidas entre os momentos T1 e T2 com as diferenças da previsäo de crescimento e o momento T1. A análise estatística dos resultados, indicou que os coeficientes de correlaçäo entre as medidas observadas e previstas foram elevados, sendo quase todos superiores a 0,90. As medidas trespasse horizontal, convexidade, altura da dentiçäo e posiçäo do incisivo inferior, apresentaram diferenças médias significantes ao 5 por cento. As medidas posiçäo molar e profundidade facial apresentaram diferenças médias significante ao 1 por cento