Potencial terapêutico da tintura de Bauhinia Forficata Link frente à cárie dentária / Therapeutic potential of Bauhinia Forficata Link tincture against dental carie

Avaliou-se o potencial terapêutico frente à cárie dentária da tintura hidroalcoólica (20%) de Bauhinia forficata Link (TBF). O estudo foi dividido em três artigos. O primeiro avaliou a constituição química mineral, pH, sólidos solúveis totais (°Brix) da TBF, suas concentrações mínimas inibitória (CMI) e microbicida (CMM) frente aos Streptococcus mutans (SM), o perfil de crescimento/morte (48h) desse microrganismo na presença da TBF, a citotoxicidade da tintura frente a fibroblastos orais (L929) na concentração máxima de 2,33mg/mL, e a ação antibacteriana da TBF, comparada aos controles (clorexidina 0,12% - CHX, dentre eles), sobre um biofilme de SM formado (48h) em blocos de esmalte bovino (n=48), após 3 dias de tratamento diário (1 min). No segundo artigo, investigou-se a CMI e CMM frente ao SM e Streptococcus sanguinis, Candida albicans, Fusubacterium nucleatum, Lactobacillus casei, Prevotella nigrescens, Bifidobacterium dentium; e a ação antimicrobiana da TBF sobre um biofilme de pool salivar de adultos (1mL, n=3, foram misturados e 20µL semeados para formação do biofilme) em membranas de celulose (n=4, 48h) tratadas em um único momento (membranas submersas por 1 min). A ação antimicrobiana foi quantificada pela contagem de Streptococcus spp. (S) e microrganismos totais (MT). No terceiro artigo, observou-se os conteúdos fenólicos da TBF, perfil de crescimento/morte dos microrganismos testados na presença da tintura, a citotoxicidade da TBF (23,21 e 200 mg/mL) até 5 min de contato com fibroblastos orais e seus efeitos: antimicrobiano frente um biofilme formado de pool salivar de crianças (contagem de S e MT e avaliação da altura do biofilme por microscopia confocal) e sobre a perda mineral do esmalte dentário (n=60; % de perda de microdureza-%PMD) após tratamentos diários (TBF e controles) por 7 dias (50µL/1min). Os dados foram analisados descritivamente e inferencialmente (p<0,05). No primeiro artigo, detectou-se cálcio, fósforo e magnésio na composição da tintura, pH=5,8 e ºBrix=17. A TBF apresentou CIM e CBM de 1.11mg/mL e promoveu redução óptica (0,32 nm) do SM após 48h (p<0,05). A tintura obteve baixos valores de morte celular (fibroblastos orais) (p<0,05) e em 2.32 mg/mL reduziu os níveis de SM do biofilme similar à CHX (p>0,05), sendo efetiva em sua redução (p<0,05). No segundo artigo, as CMI e CMM variaram de 1,31-23,2mg/mL e a TBF reduziu S e MT comparada ao não tratamento do biofilme (p<0.05), porém com ação inferior à CHX (p<0,05). No artigo três, a TBF apresentou grande quantidade de compostos fenólicos e ácidos clorogênicos. Na CMM de cada microrganismo gerou uma redução óptica após 48h; promoveu, na maior CMM (23,21mg/mL) baixa citotoxicidade (3.20% de células mortas em 5 min) e reduziu S e MT comparada ao controle de crescimento (CC; p<0,05), mas com ação inferior à CHX (p<0,05). Além disso, não alterou a altura da biomassa formada sobre os blocos (p>0,05) e permitiu menor %PMD comparada ao CC (p<0,05). Portanto, conclui-se que a TBF é uma substância com potencial terapêutico frente à cárie dentária, por apresentar ação antimicrobiana frente a diferentes biofilmes dentários com uso tópico oral seguro. (AU)

It was evaluated the therapeutic potential against dental caries of a hydroalcoholic tincture (20%) of Bauhinia forficata Link (TBF). The study was divided into three articles. The first one evaluated the mineral chemical composition, pH, total soluble solids (°Brix) of TBF. The TBF minimum inhibitory (MIC) and microbicide (MMC) concentrations against Streptococcus mutans (SM); the growth / death profile of SM (48h) with TBF; and the cytotoxicity of the tincture in oral fibroblasts (L929) at a maximum concentration of 2.33 mg/mL were also evaluated. The antibacterial action of TBF, compared to controls (chlorhexidine 0.12% - CHX, among them), on a SM biofilm formed (48h) on bovine enamel blocks (n=48) after 3 days of daily treatment (1 min) was observed. In the second article, MIC and MMC against SM and Streptococcus sanguinis, Candida albicans, Fusubacterium nucleatum, Lactobacillus casei, Prevotella nigrescens, Bifidobacterium dentium were investigated. The antimicrobial action of TBF was also tested against a salivary pool biofilm of adults (1mL, n=3, were mixed and 20µL seeded for biofilm formation) on cellulose membranes (n=4, 48h) treated in a single moment (membranes submerged during 1 min). The antimicrobial action was quantified by counting Streptococcus spp. (S) and total microorganisms (TM). In the third article, the phenolic contents of the TBF; growth/death profile of the tested microorganisms in the presence of the tincture; and the cytotoxicity (23.21 and 200 mg/mL) of TBF up to 5 min of contact with oral fibroblasts were evaluated. The antimicrobial effect of TBF against a biofilm formed from a salivary pool of children (counting S and TM and evaluation of biofilm height by confocal microscopy) on enamel bovine blocks of teeth and the tincture effect against the dental enamel mineral loss (n=60; % microhardness loss- %MHL) after daily treatments (TBF and controls) of the biofilm until 7 days (50µL/1 min) were observed. Data were analyzed descriptively and inferentially (p<0.05). In the first article, calcium, phosphorus and magnesium were detected. The, pH was 5.8 and ºBrix=17. TBF showed MIC and MMC of 1.11mg/mL and was able to decrease the optics density (0.32 nm) of SM after 48 hours (p<0.05). Low values of cell (oral fibroblasts) death (p<0.05) was obtained in the presence of TBF and it (2.32 mg/mL) reduced SM levels of the biofilm similarly to CHX (p>0.05), being effective in SM reducing (p<0.05). In the second article, the MIC and MMC ranged from 1.31-23.2mg/mL and TBF reduced S and MT compared to non-biofilm treatment (p<0.05), but with an antimicrobial action lower than CHX (p <0.05). In the third article, the TBF presented large amount of phenolic compounds and chlorogenic acids. The TBF at the MMC of each microorganism reached an microbial optical reduction after 48h. Even with the highest TBF MMC (23. 21mg/mL), a low cytotoxicity (3.20% of dead cells at 5 min) was observed. And the tincture (23. 21mg/mL) reduced S and TM compared to growth control (CC, p<0.05), but lower than CHX (p<0.05). In addition, TBF did not change the height of the biomass formed on the blocks (p>0.05) and allowed lower %MHL compared to CC (p<0.05). Therefore, it is concluded that TBF is a substance with therapeutic potential against dental caries, since it presents antimicrobial action against different dental biofilms with safe oral topical use. (AU)

Concentração inibitória mínima e concentração bactericida mínima de extratos hidroalcoólicos das folhas de Myracrodruon urundeuva All. e Qualea grandiflora Mart. sobre Streptococcus mutans e Lactobacillus casei / Minimum inhibitory concentration and minimum bactericidal concentration of hydroalcoholic extracts of Myracrodruon urundeuva All. and Qualea grandiflora Mart. leaves on Streptococcus mutans and Lactobacillus casei

A cárie dentária é uma doença bucal de alta prevalência e impactante em países em desenvolvimento. É causada pela presença de biofilme dentário rico em bactérias acidogênicas e acidúricas, como Streptococcus mutans e Lactobacillus casei. Neste sentido, a fitoterapia tem sido aplicada na odontologia devido ao seu conhecido efeito antimicrobiano, tendo potencial para prevenir doenças como a cárie dentária. Portanto, o presente estudo tem como objetivo testar o potencial antimicrobiano de extratos bruto e etanólico das folhas de Myracrodruon urundeuva (M. urundeuva.) e Qualea grandiflora (Q. grandiflora) sobre S.mutans e L. casei. Para tal, determinaram-se a Concentração Inibitória Mínima (CIM) e a Concentração Bactericida Mínima (CBM). A CIM foi definida como a menor concentração do agente antimicrobiano capaz de inibir 100% o crescimento microbiano (absorbância) em relação aos controles negativos. Para a CBM, alíquotas foram removidas dos poços que não apresentaram nenhuma absorbância (viabilidade, concentrações CIM) e semeadas em placas de ágar BHI, incubadas por 24 h a 37°C em estufa de CO2 5%. A CBM foi determinada considerando a menor concentração dos extratos capaz de impedir o crescimento bacteriano visível. Cepas de S. mutans (ATCC 21175) e L. casei (ATTC 334) foram ativadas em BHI e caldo Rogosa, respectivamente. A CIM foi determinada pela técnica de diluição em microplacas de 96 poços (100 l de extrato + 80 l BHI/Rogosa + 20 l da bactéria diluída em BHI/Rogosa equivalente a 5x105 UFC/mL), as quais foram incubadas por 24 h (S. mutans) e 48 h (L. casei) a 37°C em estufa de CO2 5%. Os extratos de M. urundeuva e Q. grandiflora inicialmente foram diluídos em BHI/Rogosa variando as concentrações entre 2 mg/ml a 0,00012207 mg/ml e os mesmos extratos diluídos em álcool foram avaliados nas concentrações entre 20 mg/ml a 0,00244 mg/ml para S. mutans e L. casei. Não foi possível determinar a CIM e a CBM para os extratos diluídos no BHI/Rogosa. Foram utilizados como controle positivo a clorexidina e como controles negativos BHI/Rogosa com e sem álcool a 5%. As CIMs (CBMs) da M. urundeuva e Q. grandiflora, diluídas em álcool, e clorexidina contra S. mutans foram 2,5 mg/ml (2,5 mg/ml), 5,0 mg/ml (--) e 0,00468 mg/ml (0,00937 mg/ml), respectivamente. Em relação ao L. casei, as CIMs (CBMs) da M. urundeuva e Q. grandiflora, diluídas em álcool, e da clorexidina foram 0,156 mg/ml (0,312 mg/ml), 0,156 0,625 mg/ml (0,312 0,625mg/ml) e 0,00468 mg/ml (0,3 mg/ml), respectivamente. Como conclusão, nosso estudo mostrou que L. casei (ATTC 334) é mais susceptível aos extratos que S. mutans (ATCC 21175) e o extrato M. urundeuva apresenta melhor efeito antimicrobiano que a Q. grandiflora em S. mutans (ATCC 21175), porém os dois extratos apresentam efeito similar sobre L. casei (ATTC 334) e ambos foram inferiores à CHX.(AU)

Dental caries is an oral disease of high prevalence and impact in developing countries. It is caused by the presence of a dental biofilm rich in acidogenic and aciduric bacteria, such as Streptococcus mutans and Lactobacillus casei. Accordingly, phytotherapy has been applied in dentistry due to its known antimicrobial effect, having potential to prevent diseases such as dental caries. Therefore, the present study aims to test the antimicrobial potential of crude and ethanolic extracts of Myracrodruon urundeuva (M. urundeuva) and Qualea grandiflora (Q. grandiflora) leaves on S. mutans and L. casei. For this, the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bactericidal Concentration (MBC) were determined. MIC was defined as the lowest concentration of the antimicrobial agent capable of inhibiting 100% the microbial growth in comparison to the negative controls. For MBC, aliquots were removed from the wells that did not show any absorbance (viability, concentrations than MIC) and seeded on BHI agar plates, incubated for 24 h at 37°C and 5% CO2. The MBC was determined considering the lowest concentration of extracts capable of preventing visible bacterial growth. Strains of S. mutans (ATCC 21175) and L. casei (ATTC 334) were activated in BHI and Rogosa broth. MIC was determined by the dilution technique in 96-wells microplates (100 l of extract + 80 l BHI/ Rogosa + 20 l of bacterium diluted in BHI/Rogosa equivalent to 5x105 CFU/ml), which were incubated for 24 h (S. mutans) and 48 h (L. casei) at 37°C and 5% CO2. The extracts were firstly diluted in BHI/Rogosa varying the concentrations between 2 mg/mL and 0.00012207 mg/ml; the same extracts were also diluted in alcohol at concentrations ranging from 20 mg/ml to 0.00244 mg/ml and both tested against S. mutans and L. casei. It was not possible to determine the MIC and MBC for the extracts diluted in BHI/Rogosa. Chlorhexidine was used as positive control, while BHI/Rogosa with or without 5% alcohol were used as negative controls. The MICs (MBCs) of M. urundeuva and Q. grandiflora diluted in alcohol, and clorexidine against S. mutans were 2.5 mg/ml (2.5 mg/ml), 5.0 mg/ml (--) and 0.00468 mg/ml (0.00937 mg/ml), respectively. In respect to L. casei, the MICs (MBCs) of M. urundeuva and Q. grandiflora, diluted in alcohol, and chlorhexidine were 0.156 mg/ml (0.312 mg/ml), 0.156 0.625 mg/ml (0.312 0.625 mg/ml) and 0.00468 mg/ml (0.3 mg/ml), respectively. In conclusion, our study showed that L. casei (ATTC 334) is more susceptible than S. mutans (ATCC 21175) to the extracts and the extract of M. urundeuva has a better antimicrobial effect than Q. grandiflora against S. mutans (ATCC 21175), but both extracts have similar effect on L. casei (ATTC 334) and they were inferior to CHX.(AU)

Utilização da Punica granatum linn. no controle da placa bacteriana supra gengival: revisão da literatura / Use Punica granatum linn. on the control of the supragengival dental plque: literature review

O presente trabalho tem por finalidade apresentar através da revisão da literatura, as características e propriedades farmacológicas da Punica granatum Linn. No controle da placa bacteriana. Após esse estudo pode-se inferir que, o extrato hidroalcoólico da Punica granatum Linn. (romã) apresenta atividade antimicrobiana in vitro sobre os streptococcus mitis, Streptococcus mutans e Streptococcus sanguis presentes na placa bacteriana supragengival