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1.
Rev. osteoporos. metab. miner. (Internet) ; 10(4): 131-138, nov.-dic. 2018. graf, ilus
Artigo em Espanhol | IBECS | ID: ibc-178639

RESUMO

Objetivos: Analizar en células tumorales de próstata los efectos causados por el secretoma de células óseas sobre la proliferación y sobre vías de señalización intracelular relacionadas con la progresión del cáncer de próstata. Materiales y métodos: Se caracterizaron los efectos de factores secretados presentes en medios condicionados de pre-osteoblastos MC3T3-E1 y osteocitos MLO-Y4 sobre la proliferación de células de adenocarcinoma de próstata metastásicas PC-3 mediante tinción por azul de tripano. Se observó por técnicas de fluorescencia en células vivas los efectos de los medios condicionados por células MC3T3-E1 y MLO-Y4 en moléculas de señalización intracelular implicadas en la progresión tumoral de células de adenocarcinoma de próstata PC-3. Se estudió la acumulación de calcio intracelular utilizando el indicador de calcio fluorescente Fluo-4AM y la generación de AMP cíclico, y la activación de la quinasa ERK 1/2 por Transferencia de Energía de Resonancia Fluorescente (FRET) usando los biosensores EPAC y ERK-NES, respectivamente. Resultados: La estimulación de células PC-3 con medios condicionados de pre-osteoblastos MC3T3-E1 y osteocitos MLO-Y4 indujo aumento en la proliferación de las células de adenocarcinoma PC-3. Los medios condicionados por células óseas causaron también aumento transitorio en la acumulación de calcio intracelular y de la generación de AMP cíclico e incrementaron la activación de la quinasa ERK 1/2. Conclusiones: Las células óseas secretan factores activadores de la proliferación y de vías de señalización que favorecen la progresión tumoral de células de cáncer de próstata, sugiriendo que la comunicación cruzada entre estos tipos celulares puede favorecer el desarrollo de nichos metástasicos de cáncer de próstata en el hueso


Objectives: To analyze in prostate tumor cells the effects caused by the secretome of bone cells on pro- liferation and on intracellular signaling pathways related to the progression of prostate cancer. Materials and methods: The effects of secreted factors present in conditioned media of pre-osteoblasts MC3T3-E1 and osteocytes MLO-Y4 on the proliferation of metastatic prostate adenocarcinoma cells PC-3 were characterized using trypan blue staining. The effects of media conditioned by MC3T3-E1 and MLO- Y4 cells on intracellular signaling molecules involved in the tumor progression of prostate adenocarcinoma cells PC-3 were observed by fluorescence techniques in living cells. The accumulation of intracellular calcium was studied using the fluorescent calcium indicator Fluo-4AM and the generation of cyclic AMP, and ERK 1/2 activation by Fluorescent Resonance Energy Transfer (FRET) using the EPAC and ERKNES biosensors, respectively. Results: The stimulation of PC-3 cells with conditioned media of pre-osteoblasts MC3T3-E1 and osteocytes MLO-Y4 induced an increase in PC-3 adenocarcinoma cell proliferation. Media conditioned by bone cells also caused a transient increase in intracellular calcium accumulation and generation of cyclic AMP and increased ERK 1/2 activation. Conclusions: Bone cells secrete proliferation-activating factors and signaling pathways that favor the tumor progression of prostate cancer cells, suggesting that cross-communication between these cell types may favor the development of metastatic niches of prostate cancer in the bone


Assuntos
Humanos , Masculino , Cálcio/metabolismo , Espaço Intracelular/metabolismo , MAP Quinases Reguladas por Sinal Extracelular/fisiologia , Neoplasias da Próstata/metabolismo , Fluorescência , Células Tumorais Cultivadas
2.
Nutr. hosp ; 31(3): 1134-1141, mar. 2015. tab
Artigo em Inglês | IBECS | ID: ibc-134408

RESUMO

Background/Aims: To measure skeletal muscle lipid infiltration, its association with insulin resistance (IR) lean mass and function, in Chilean men differing in age and body composition. Our hypothesis was that muscle lipid accumulation would be higher among older and heavier individuals and this would deteriorate insulin sensitivity (IS) and decrease muscle mass and function, both features of the ageing process. Methods: Healthy men (38 < 55 and 18 > 65 years), underwent anthropometric measurements, body composition assessment through radiologic densitometry, Nuclear Magnetic Resonance spectroscopy at the tibialis anterioris muscle to measure intra (IMCL) and extramyocellular lipids (EMCL), quadriceps and handgrip strength, 12 minute walking distance and serum biochemistry (haemoglobin, lipoproteins, creatinine, ultrasensitive C Reactive Protein, fasting and post glucose insulin and glucose concentrations, to assess IS). Physical activity was estimated by actigraphy. Results: 23 men were eutrophic, 26 were overweight and 7 were obese and mostly sedentary, independent of age. Both IMCL and EMCL were higher in overweight/ obese men. Abdominal fat was negatively associated with IS and positively correlated with muscle lipid accretion (both IMCL and EMCL), but not with age. As expected, older individuals had lower muscle mass and strength, but not more adipose tissue nor intramyocellular lipids, yet were more glucose intolerant. Conclusions: central obesity was associated with IMCL and EMCL infiltration and IR. This type of lipid accretion was not related with ageing nor age-related sarcopenia. Older individuals were more glucose intolerant, which was explained by a decrease of insulin secretion more than adiposity-related IR (AU)


Introducción/Objetivos: medir la infiltración grasa en el músculo esquelético, su asociación con resistencia a la insulina (RI) y con masa y función muscular, en hombres chilenos de diferente edad y composición corporal. Nuestra hipótesis era que habría mas acumulación de grasa en el tejido muscular entre las personas de mayor edad y peso, lo cual deterioraría la sensibilidad a la insulina (SI) y afectaría negativamente la masa y la función muscular, ambas características del proceso de envejecimiento. Métodos: se estudiaron hombres sanos (38 < 55 anos y 18 > 65 anos), que fueron sometidos a mediciones antropométricas, evaluación de la composición corporal mediante densitometría radiológica (DEXA), espectroscopia de resonancia nuclear magnética en el músculo tibial anterior para medir lípidos intra (LIM) y extramiocelulares (LEM), fuerza de mano y cuadriceps, test de 12 minutos y bioquímica sérica (glicemia, hemoglobina, lipoproteínas, creatinina y proteína C reactiva ultrasensible en ayunas, ademas de glucosa e insulina post carga de glucosa para evaluar SI). La actividad física se estimo mediante actigrafía. Resultados: 23 hombres eran eutróficos, 26 tenían sobrepeso y 7 eran obesos, todos eran sedentarios según el registro actigráfico, independiente de la edad. Tanto LIM como LEM resultaron mas altos entre los hombres con sobrepeso / obesidad. La grasa abdominal se asocio negativamente con la SI y se correlaciono positivamente con la acumulación de grasa en el músculo (tanto LIM como LEM), pero no con la edad. Como era de esperar, las personas mayores tenían menor masa magra y fuerza, pero no mas tejido adiposo ni lípidos intramiocelulares, aunque eran mas intolerantes a la glucosa. Conclusiones: La obesidad central se asocio con infiltración de grasa intramuscular y con RI. Esta distribución adiposa no se relaciono con edad ni con sarcopenia asociada al envejecimiento. Las personas mayores resultaron mas intolerantes a la glucosa, explicable por una disminución de la secreción de insulina mas que por RI relacionada con mayor adiposidad (AU)


Assuntos
Humanos , Obesidade Abdominal/fisiopatologia , Gordura Abdominal/fisiopatologia , Síndrome Metabólica/fisiopatologia , Resistência à Insulina , Fatores Etários , Fatores de Risco , Espaço Intracelular , Lipídeos/análise , Índice de Massa Corporal , Músculos Abdominais/fisiopatologia , Envelhecimento
3.
An. R. Acad. Farm ; 81(2): 164-178, 2015. tab, graf, ilus
Artigo em Inglês | IBECS | ID: ibc-143994

RESUMO

Lichens, symbiotic organisms with special features, are able to synthesize exclusive secondary metabolites that are attracting increasing interest in their pharmacological activities. Present study aimed to perform an initial screening of the antioxidant capacities of 29 lichens from Parmeliaceae family, and the cytoprotective potential of the most promising species in a model of central nervous system-like cells. Also, another goal was to determine the main chemical constituents of the promising lichens. After molecular identification of all lichen specimens by PCR techniques regarding the molecular marker ITS rDNA, antioxidant activity was measured in terms of free radical scavenging properties through ORAC assay. Methanol extracts of the three species with highest ORAC values (Cetrelia braunsiana (Cb), Parmotrema saccatilobum (Ps) and Usnea ghattensis (Ug)) were analyzed for phytochemical characterization through TLC and HPLC methods. We identified alectoronic acid as major metabolite in Cb, protocetraric acid in Ps and usnic, stictic and constictic acids in Ug. Concerning cytoprotective properties, their extracts were tested on human neuroblastoma cell line SH-SY5Y. Protection against H2O2- induced oxidative stress in such neuron- like model was assessed by cell viability assays, thus determining their optimal concentrations. Then, their effect on oxidative stress markers, such as intracellular ROS formation, glutathione levels and caspase-3 activity, were evaluated. In general, lichens extracts were able to reverse the oxidative damage caused by H2O2, and promoted neurons survival. Results obtained in this study imply that these lichen species might be used as promising sources for natural compounds with potential neuroprotective activity, suggesting future research avenues


Los líquenes son organismos simbióticos de especiales características capaces de sintetizar metabolitos secundarios únicos, con un creciente interés por sus propiedades farmacológicas. El presente estudio persiguió realizar un cribado de la actividad antioxidante de 29 especies liquénicas de la familia Parmeliaceae, y el potencial citoprotector de los más interesantes en un modelo neuronal. Otro objetivo consistió en derminar los principales constituyentes de dichas especies. Tras la identificación molecular de todos los especímenes por técnicas de PCR, la actividad antioxidante se evaluó por la capacidad captadora de radicales libres en el ensayo ORAC. Se analizaron por TLC y HPLC los extractos metanólicos de las tres especies con mayor valor ORAC (Cetrelia braunsiana (Cb), Parmotrema saccatilobum (Ps) and Usnea ghattensis (Ug)) y se identificaron como principales metabolitos el ácido alectorónico en Cb, el ácido protocetrárico en Ps y los ácidos úsnico, estíctico y constíctico en Ug. Estos tres extractos se probaron en células de neuroblastoma humano (línea celular SH- SY5Y). Se testó la citoprotección contra el estrés oxidativo inducido por H2O2 mediante ensayos de viabilidad celular, estableciendo las concentraciones óptimas. Posteriormente, se valoraron sus efectos en marcadores de estrés oxidativo, como la formación intracelular de especies reactivas de oxígeno, los niveles de glutatión y la actividad de la enzima caspasa-3. En general, los extractos liquénicos revirtieron el daño oxidativo causado por H2O2, promoviendo la supervivencia neuronal. Los resultados obtenidos de este estudio apuntan que las especies estudiadas pueden ser prometedoras fuentes de productos naturales con potencial actividad neuroprotecora, sugiriendo futuras líneas de investigación


Assuntos
Técnicas In Vitro/classificação , Técnicas In Vitro/métodos , Técnicas In Vitro/tendências , Antioxidantes/administração & dosagem , Antioxidantes/farmacologia , Antioxidantes/uso terapêutico , Espaço Intracelular , Técnicas In Vitro/instrumentação , Antioxidantes/fisiologia , Metanol/farmacologia
4.
Reumatol. clín. (Barc.) ; 10(1): 43-47, ene.-feb. 2014.
Artigo em Espanhol | IBECS | ID: ibc-120444

RESUMO

El calcio (Ca2+) es un catión con capacidad multifuncional como segundo mensajero en diferentes grupos celulares del sistema inmunitario que incluyen los linfocitos T y B, los macrófagos, los mastocitos, entre otras. Los recientes descubrimientos en relación con la entrada de Ca2+ dependiente de depósito (SOCE por su sigla en inglés, store operated calcium entry) han abierto nuevos caminos en la investigación de cómo este catión dirige el destino celular, en especial en los linfocitos T y B. La SOCE actúa a través de canales CRAC (del inglés Ca2+ release-activated Ca2+ channels) y su mecanismo de activación depende de la interacción de dos moléculas reguladoras: un sensor del Ca2+ del retículo endoplásmico o molécula de interacción estromal (STIM-1, del inglés stromal interaction molecule) y una subunidad poro del canal CRAC (Orai1). Esta revisión se centra principalmente en las funciones del Ca2+ en los linfocitos B y T, así como las alteraciones de estas vías implicadas en el desarrollo de enfermedades autoinmunes (AU)


Calcium (Ca2+) is an important cation able to function as a second messenger in different cells of the immune system, particularly in B and T lymphocytes, macrophages and mastocytes, among others. Recent discoveries related to the entry of Ca2+ through the store-operated calcium entry (SOCE) has opened a new investigation area about the cell destiny regulated by Ca2+ especially in B and T lymphocytes. SOCE acts through calcium-release-activated calcium (CRAC) channels. The function of CRAC depends of two recently discovered regulators: the Ca2+ sensor in the endoplasmic reticulum or stromal interaction molecule (STIM-1) and one subunit of CRAC channels called Orai1. This review focuses on the role of Ca2+ signals in B and T lymphocytes functions, the signalling pathways leading to Ca2+ influx, and the relationship between Ca2+ signals and autoimmune diseases (AU)


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Autoimunidade , Autoimunidade/imunologia , Autoimunidade/fisiologia , Células Estromais/patologia , Cálcio , Cálcio/isolamento & purificação , Sinalização do Cálcio/imunologia , Sinalização do Cálcio/fisiologia , Doenças Autoimunes/epidemiologia , Doenças Autoimunes/prevenção & controle , Espaço Intracelular/fisiologia , Espaço Intracelular
5.
Rev. esp. cardiol. Supl. (Ed. impresa) ; 11(supl.D): 13d-17d, 2011. ilus
Artigo em Espanhol | IBECS | ID: ibc-166482

RESUMO

En los últimos años se han descubierto nuevos aspectos fisiológicos del sistema renina-angiotensina que podrían producir cambios en las estrategias terapéuticas seguidas hasta ahora para conseguir su inhibición. Especialmente, el descubrimiento de la existencia de un sistema renina-angiotensina intracelular funcional ha permitido comprender muchos aspectos de la fisiopatología del remodelado cardiaco y puede ayudar a explicar la eficacia sólo parcial de los inhibidores de la enzima de conversión de la angiotensina y de los bloqueadores del receptor de angiotensina, así como la superioridad de los inhibidores directos de la renina, en determinadas condiciones patológicas asociadas con la enfermedad cardiovascular (AU)


In recent years, new aspects of the physiology of the renin-angiotensin system (RAS) have been discovered that could bring about changes in the therapeutic strategies used at present to inhibit the RAS. In particular, discovery of the existence of a functioning intracellular renin-angiotensin system has led to increased understanding of many aspects of the physiopathology of cardiac remodeling, and could help explain the limited efficacy of angiotensin-converting enzyme inhibitors and angiotensin-receptor blockers, as well as the superiority of direct renin inhibitors, under certain pathological conditions associated with cardiovascular disease (AU)


Assuntos
Humanos , Sistema Renina-Angiotensina , /farmacocinética , Espaço Intracelular , Miócitos Cardíacos , Doenças Cardiovasculares/prevenção & controle
6.
Enferm. infecc. microbiol. clín. (Ed. impr.) ; 28(9): 612-614, nov. 2010. ilus, graf
Artigo em Inglês | IBECS | ID: ibc-95313

RESUMO

Se ha evaluado la penetración intracelular y la actividad de UB-8902 en leucocitos polimorfomucleares humanos. La concentración intracelular de UB-8902 fue más de 6 veces superior a la concentración extracelular. La penetración intracelular fue un proceso rápido, reversible, saturable y no se afectó por el pH del medio. UB-8902 se mostró activo intracelularmente frente a cepas de Staphylococcus aureus que presentaban mutaciones en los genes gyrA y/o grlA, asociadas a resistencia a fluorquinolonas (AU)


The intracellular penetration and activity of UB-8902 in human polymorphonuclear leukocytes was evaluated. Intracellular UB-8902 concentrations were 6-fold higher than extracellular levels. Uptake was rapid, reversible, saturable, and affected by external pH. UB-8902 showed intracellular activity against Staphylococcus aureus strains presenting mutations associated with fluoroquinolone resistance in the gyrA and/or grlA genes (AU)


Assuntos
Humanos , Espaço Intracelular/microbiologia , Staphylococcus aureus , Fluoroquinolonas/farmacocinética , Farmacorresistência Bacteriana/imunologia , Testes de Sensibilidade Microbiana
7.
Int. microbiol ; 7(3): 181-191, sept. 2004. ilus, tab
Artigo em Inglês | IBECS | ID: ibc-98761

RESUMO

Intracellular bacterial pathogens have evolved as a group of microorganisms endowed with weapons to hijack many biological processes of eukaryotic cells. This review discusses how these pathogens perturb diverse host cell functions, such as cytoskeleton dynamics and organelle vesicular trafficking. Alteration of the cytoskeleton is discussed in the context of the bacterial entry process (invasion), which occurs either by activation of membrane-located host receptors («zipper» mechanism) or by injection of bacterial proteins into the host cell cytosol («trigger» mechanism). In addition, the two major types of intracellular lifestyles, cytosolic versus intravacuolar (phagosomal), which are the consequence of alterations in the phagosome-lysosome maturation route, are compared. Specific examples illustrating known mechanisms of mimicry or hijacking of the host target are provided. Finally, recent advances in phagosome proteomics and genome expression in intracellular bacteria are described. These new technologies are yielding valuable clues as to how these specialized bacterial pathogens manipulate the mammalian host cell (AU)


Los patógenos bacterianos intracelulares han evolucionado como un grupo de microorganismos altamente especializados en el secuestro de funciones propias de células eucariotas. Esta revisión discute cómo esos patógenos alteran diversas funciones de la célula hospedadora, tales como la dinámica del citoesqueleto y el tráfico vesicular entre orgánulos. Se describe la alteración del citoesqueleto durante el proceso de entrada (invasión) de la bacteria. Este proceso puede desencadenarse bien por la activación de receptores de la membrana de la célula hospedadora (mecanismo de tipo «cremallera») o por la inyección de proteínas bacterianas en el citosol de la célula hospedaora (mecanismo de tipo «activador»). Se comparan también los dos tipos principales de vida intracelular de estos patógenos: en el citosol o en el interior de vacuolas (vida fagosómica). Ambos son consecuencia de cambios de la ruta clásica de fusión fagosoma-lisosoma. Se aportan algunos ejemplos representativos en los que se conoce el mecanismo de mimetismo o de secuestro de funciones eucarióticas. Por último, se mencionan los avances más recientes en la proteómica del fagosoma y en la expresión de genomas en bacterias intracelulares. Estos nuevos enfoques aportan información valiosa sobre cómo estas bacterias patógenas especializadas manipulan la célula huésped de mamífero (AU)


Assuntos
Humanos , Células Eucarióticas/fisiologia , Espaço Intracelular/microbiologia , Infecções/fisiopatologia , Organelas/fisiologia , Citoesqueleto/microbiologia , Vacúolos/fisiologia
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