RESUMO
Se desarrolló una técnica de PCR para detectar virus maedi-visna (VMV) libre e integrado en células, seestudio su concordancia con una PCR-LTR y un ELISA de anticuerpos de probada eficacia en muestras decalostro de ovejas infectadas y se emplearon los tres ensayos para investigar la infección calostral por VMV encorderos. Los cebadores se diseñaron en una región conservada en las seis secuencias de VMV disponibles enGenBank y amplifican un producto de 744 pares de bases (pb). Se realizaron 856 ensayos incluidos 283 con lagag, e independientemente de la PCR empleada se observó una buena correlación entre la presencia de viruslibre e integrado y esto es novedoso y plantea la importancia relativa de ambas formas víricas en la infección porVMV. En cambio, la concordancia entre las PCRs y el ELISA fue solo moderada y se corroboró que a menudono se detecta VMV en animales seropositivos. Las PCRs detectaron VMV en la mayoría de calostros ingeridospor corderos que posteriormente a los 10 meses de edad fueron seropositivos y además la gag y en menormedida la LTR, también en algunos calostros de corderos que fueron seronegativos, probablemente porquetomaron menos cantidad de calostro que los seropositivos. Además de aportar mas evidencia de la asociaciónpositiva entre la infección por VMV y el volumen de calostro con VMV ingerido, este resultado sugiere que lagag es más sensible que la LTR en esta matriz
A PCR test was developed to detect cell-free and cell-integrated maedi-visna virus (MVV), its degree ofagreement with an LTR-PCR and an antibody ELISA of proven efficacy was analysed in colostrum samplesand all three tests were employed to investigate colostral MVV infection in lambs. Primers were designed fromgag gene sequences homologous in the six MVV sequences presently in GenBank, and amplify a 744bp fragment.856 assays were carried out including 283 with the new gag-PCR and a good correlation was observedbetween the presence of cell-free and -integrated MVV. This is novel and questions the relative role of the twoviral forms in MVV infection. Instead, the correlation between PCR and ELISA results was only moderateand provided further evidence that MVV detection may fail in infected animals. The PCRs detected MVV incolostrum ingested by most lambs that later tested seropositive at 10 months-old and additionally, the gag-PCRand to a lesser extent the LTR-PCR, detected MVV in colostrum taken by lambs seronegative at 10 months-oldmost likely because they ingested less colostrum. As well as providing further evidence of the positive associationbetween MVV infection and volume of MVV-containing colostrum ingested, this result suggest that thegag-PCR developed is more sensitive than the LTR-PCR used in this study
