DDAB cationic lipid-mPEG, PCL copolymer hybrid nano-carrier synthesis and application for delivery of siRNA targeting IGF-1R into breast cancer cells

Background and objective To use siRNA molecule as a therapeutic agent in gene silencing, an efficient delivery system is necessary. Stability and clearance by reticuloendothelial of siRNA still remains the major challenges for clinical application. Herein, we could develop new lipid-polymer hybrid nanoparticles (LPHNP) as a siRNA carrier to silence insulin-like growth factor type I (IGF-1R) gene overexpression in MCF-7 human breast cancer cell line. Methods Dimethyldioctadecylammonium bromide-methoxy poly(ethylene glycol)-poly (ε-caprolactone) (DDAB-mPEG-PCL) LPHNPs were synthesized using a single step nanoprecipitation method and characterized by dynamic light scattering (DLS) and atomic force microscopy (AFM) microscope. Cytotoxicity of the nanoparticles was assessed in the MCF7 cell line using 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. Desired LPHNP-siRNA complex was determined using different Nitrogen:Phosphate ratio (N/P) ratios and gel retardation. To determine the encapsulation efficiency of siRNA (%) in LPHNP, its absorbance was measured. The effect of the siRNA-LPHNP complex on IGF-1R silencing was assessed by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) Results LPHNP was synthesized using a single-step sonication method with a size below 100 nM. The viability of cells treated with hybrid nanoparticles was significantly greater than the corresponding cationic lipid (P < 0.01). As demonstrated by gel retardation assay, efficient siRNA binding to LPHNP occurred at N/P equal to 40 and siRNA encapsulation efficiency was found to be 95% ± 4 at this ratio. LPHNP-IGF-1R siRNA complex could be able to down-regulate the target more efficiently when it compared with the corresponded controls (P < 0.001). Conclusion In conclusion, our results suggest that DDAB cationic lipid and mPEG-PCL copolymer hybrid nanoparticle may be a good candidate for efficient siRNA delivery (AU)

Exposición a contaminantes ambientales y patología respiratoria / Exposure to environmental contaminants & respiratory pathology

Objetivo: Tras la aparición de 5 casos con sintomatología respiratoria en una empresa aeronáutica y su exposición a diferentes sustancias químicas, nos propusimos investigar su posible relación con el medio laboral. Material y métodos: Se realizaron mediciones ambientales de polvo de aluminio, tricloroetileno y glicol, estudio alergológico con dichas sustancias además de neumoalergenos y tests epicutáneos con batería estándar europea, análisis de sangre, radiografías de tórax, mediciones de flujo pico y pruebas funcionales respiratorias, test de metacolina y electrocardiograma. Resultados: La medición del flujo pico y el test de hiperreactividad bronquial directo con metacolina fueron negativos. El estudio alergológico de las sustancias expuestas fue negativo detectándose en 3 casos resultados positivos a neumoalergenos. Conclusiones: La negatividad en las mediciones del flujo pico y el test de metacolina estando el trabajador en activo, prácticamente descartarían un cuadro de asma laboral, en la actualidad. No podemos descartar la posibilidad concomitante de un Síndrome de disfunción reactiva de la vía aérea en un momento previo al estudio. En tal caso, la existencia de una hiperreactividad bronquial inicial podría haber cedido sin llegar a objetivarse en la actualidad con metacolina. La creación de equipos multidisciplinarios es fundamental para la detección de enfermedades respiratorias de posible origen laboral

Target: After the appearance of 5 cases with respiratory symptoms in an aeronautical company and their exposal to different chemical substances, we proposed to investigate their possible link with the working environment. Material and methods: Aluminium environmental dust measurements, trichloroethylene and glycol, alergic study with these substances as well as with aero alergens and epicutaneos tests with a european standard accumulator were made, blood analysis, thorax x-rays, peak-flow measurements and functional respiratory tests, Methacholine test and electrocardiogram. Results: The peak-flow measurement and the direct bronchial hyperactivity test using metacholine were negative. The alergic tests performed were generally negative with the exception of 3 positive results concerning aero alergens test. Conclusions: The negative results of the peak-flow measurements and the metacholine test of an active worker, would practically disguard a cadre of work related asthma, at the present time. We cannot discard the concomitant possibility of a reactive disfunction syndrome via the aerial route in a precise moment of time previous to the study. In such case, the existence of an initial bronchial hyperreactivity could have yielded finally not being detectable with metacholine. The creation of multidisciplinary equipment is fundamental for the detection of respiratory diseases of possible work origin

Tratamiento de las intoxicaciones graves por alcoholes / No disponible

No disponible

Eficacia de la hemodiálisis precoz con membranas de alto flujo en el tratamiento de las intoxicaciones graves por alcoholes / No disponible

La intoxicación por alcoholes (metanol, etanol y etilenglicol)origina acidosis metabólica severa con hiato aniónico y osmolal elevados, alteraciones neurológicas que van desde la obnubilación al coma profundo, amaurosis y muerte. A pesar de la terapia intensiva la morbilidad y la mortalidad siguen siendo muy elevadas. En la intoxicación por etilenglicol, además, puede ocurrir la precipitación masiva de oxalato en los tejidos, sobre todo en el riñón, produciendo un fracaso renal agudo. El tratamiento establecido, en las intoxicaciones por metanol y etilenglicol, es la administración de etanol y la hemodiálisis (HD) precoz. La HD convencional puede reducir rápidamente los niveles de metanol, etanol y etilenglicol, así como los de sus metabolitos tóxicos, corrigiendo también los trastornos electrolíticos y ácido-base. Las membranas de alto flujo son capaces de eliminar más cantidad de tóxico por hora de HD pudiendo ser más eficaces en el tratamiento. En este estudio se presentan 14 casos de intoxicación por alcoholes (11metanol, 1 etanol y 2 etilenglicol) tratados precozmente con bicarbonato, infusión de etanol (para metanol y etilenglicol)y HD con membranas de alto flujo. Al ingreso el pH medio fue 7,04 ± 0,06 (rango 6,60-7,33), el bicarbonato medio de 9,9 ± 1,9 mmol/l (rango 1,4-25) y el déficit de bases medio de 18,4 ± 2,6 mmol/l (rango 2-33). El hiato aniónico inicial fue de 29,1 ± 2,3 mmol/l (rango 16-45) y el hiato osmolal de 119 ± 47 mOsm/l (rango 16-402). Existió una excelente correlación lineal entre los niveles séricos iniciales del alcohol tóxico y el hiato osmolal (R2 = 0,98, p = 0,0006). En todos los casos, el tratamiento precoz con HD corrigió la acidosis metabólica y el hiato osmolal. De los 14 casos, 11 sobrevivieron sin secuelas, 2 quedaron con amaurosis y 1 falleció (mortalidad 7 %). Se concluye que en las intoxicaciones severas por alcoholes la HD debe instaurarse precozmente. La infusión de etanol, al frenar el metabolismo del metanol y del etilenglicol, permite la eliminación rápida por HD de los alcoholes y sus metabolitos tóxicos. La prescripción de HD debe incluir un dializador de alto flujo y gran superficie, un flujo sanguíneo elevado, un baño de bicarbonato con concentraciones normales de potasio y fósforo, y debe prolongarse el tiempo necesario. La modificación del baño de HD evita la hipofosfatemia y la hipopotasemia. La HD según fue implementada en estos casos es una forma segura y efectiva de tratamiento de la intoxicación grave por alcoholes (AU)

Alcohol intoxication (methanol, ethanol and ethylene glycol)may result in metabolic acidosis with increased anion gap, increased serum osmolal gap, and neurologic abnormalities ranging from drunkenness to coma, and death. The mortality and morbidity rates remain very high despite intensive care therapy. The toxicity of methanol and ethylene glycol is clearly correlated tothe degree of metabolic acidosis. The established treatment of severe methanol and ethylene glycol intoxication is ethanol administration and hemodialysis (HD). By inhibiting the main metabolic pathway of methanol and ethylene glycol (alcohol dehydrogenase), ethanol prevents the formation of major toxic metabolites (formic acid, glycolic acid and oxalic acid). Conventional HD can reduce serum methanol, ethanol and ethylene glycol and its metabolites rapidly, but high-flux membranes should be capable of removing more toxic per hour of HD. In this report, we describe 14 cases of life-threatening alcohol intoxication(11 methanol, 1 ethanol, and 2 ethylene glycol) who were treated successfully with supportive care, ethanol infusion (methanol and ethylene glycol), and early HD with a high-flux dialyser. The median pH was 7.04 ± 0.06 (range 6.60-7.33), median bicarbonate 9.9 ± 1.9 mmol/l (range 1.4-25), and median base deficit 18.4 ± 2.6 mmol/l (range 2-33). The median anion gap was 29.1 ± 2.3 mmol/l (range 16-45) and the median osmolal gap was 119 ± 47 mOsm/l (range 16-402). On admission there was an excellent linear correlation between the serum toxic alcohol concentrations and the osmolal gaps (R2 = 0.98, p = 0.0006). In all cases early HD corrected metabolic acidosis and osmolal abnormalities. The mortality was 7% (1 from 14). We conclude that pre-emptive HD should be performed in severe intoxications to remove both the parent compound and its metabolites. The HD prescription should include a large surface area dialyser with high-flux membrane, a blood flow rate in excess of 250 ml/min, a modified bicarbonate bath enriched with phosphorus and potassium, and a long time session. The phosphorus and potassium- enriched bicarbonate-based dialysis solution used in patients with normal phosphorus and potassium serum levels avoided HD-induced hypophosphatemia and hypopotassemia. HD as implemented in these cases is a safe and very effective approach to the management of alcohol poisonin (AU)