Suppressive effect of tamarixetin, isolated from Inula japonica, on degranulation and eicosanoid production in bone marrow-derived mast cells

Background: The aim of this study was to evaluate the inhibitory effect of tamarixetin on the production of inflammatory mediators in IgE/antigen-induced mouse bone marrow-derived mast cells (BMMCs). Materials and methods: The effects of tamarixetin on mast cell activation were investigated with regard to degranulation, eicosanoid generation, Ca2+ influx, and immunoblotting of various signaling molecules. Results: Tamarixetin effectively decreased degranulation and the eicosanoid generation such as leukotriene C4 and prostaglandin D2 in BMMCs. To elucidate the mechanism involved, we investigated the effect of tamarixetin on the phosphorylation of signal molecules. Tamarixetin inhibited the phosphorylation of Akt and its downstream signal molecules including IKK and nuclear factor κB. In addition, tamarixetin downregulated the phosphorylation of cytosolic phospholipase A2 (cPLA2) and p38 mitogen-activated protein kinase. Conclusions: Taken together, this study suggests that tamarixetin inhibits degranulation and eicosanoid generation through the PLCγ1 as well as Akt pathways in BMMCs, which would be potential for the prevention of allergic inflammatory diseases (AU)

Mucosal expression of defensin-5, soluble phospholipase A2 and lysozyme in the intestine in a rat model of acute liver failure and its relationship to intestinal bacterial translocation / Expresión de defensina-5, fosfolipasa A2 soluble y lisozima en la mucosa intestinal en un modelo de rata con insuficiencia hepática aguda y su relación con la traslocación bacteriana intestinal

INTRODUCTION: To study the expression of defensin-5 (RD-5), soluble phospholipase A2 (sPLA2) and lysozyme in the intestine in a rat model of acute liver failure and its relationship with intestinal bacterial translocation (BT). PATIENTS AND METHODS: Sprague-Dawley (SD) rats were divided into two groups. The experimental group was divided into five subgroups according to the lapsing time after the model was established, which were designated accordingly as 8 h, 16 h, 24 h, 48 h, and 72 h groups. Acute liver failure (ALF) model was induced by intraperitoneal injection of 10% d-galactosamine. The homogenates of mesenteric lymph nodes (MLNs), liver and spleen from each group were cultured in agar to determine the bacterial outgrowth. The mRNA expression of RD-5, sPLA2, lysozyme and the protein expression of sPLA2, lysozyme were determined. RESULTS: No bacteria grew in the organ cultures from the control group while experimental groups had positive cultures. Expression of the RD-5 and sPLA2 mRNA in the experimental groups gradually increased at early time points and peaked 16 h after induction of ALF, then progressively decreased. The mRNA expression of lysozyme in the experimental group peaked at 8 h after ALF induction, then progressively decreased. Similar results were obtained with Western blot and immunohistochemical staining. DISCUSSION: The immune barrier function of the ileal mucosa in the rat model of acute liver failure was compromised as demonstrated by the decreased expression of RD-5, sPLA2 and lysozyme in Paneth cells along with increased intestinal bacterial translocation

INTRODUCCIÓN: Estudiar la expresión de defensina-5 (RD-5), fosfolipasa A2 soluble (sPLA2) y lisozima en el intestino de un modelo de rata con insuficiencia hepática aguda y su relación con la traslocación bacteriana (TB) intestinal. PACIENTES Y MÉTODOS: Se dividieron ratas Sprague-Dawley® (SD) en 2 grupos. El grupo experimental se dividió en 5 subgrupos según el tiempo transcurrido desde que se estableció el modelo, y se designaron en consecuencia como grupos de 8, 16, 24, 48 y 72 h. El modelo de insuficiencia hepática aguda (IHA) se indujo mediante inyección intraperitoneal de D-galactosamina al 10%. Se cultivaron homogeneizados de ganglios linfáticos mesentéricos (GLM), hígado y bazo de cada grupo en agar para determinar la proliferación bacteriana. Se determinaron la expresión de ARNm de RD-5, sPLA2 y lisozima, y la expresión de proteínas de sPLA2 y lisozima. RESULTADOS: En los cultivos de órganos del grupo de control no creció ninguna bacteria, mientras que los grupos experimentales presentaron cultivos positivos. La expresión del ARNm de RD-5 y sPLA2 en los grupos experimentales aumentó gradualmente en los primeros momentos y alcanzó el máximo 16 h después de la inducción de la IHA, para después disminuir de forma progresiva. La expresión de lisozima en el grupo experimental alcanzó el valor máximo 8 h después de la inducción de la IHA y después disminuyó progresivamente. Se obtuvieron resultados similares con la inmunoelectrotransferencia y la tinción inmunohistoquímica. DISCUSIÓN: La función de barrera inmunológica de la mucosa ileal en el modelo de rata de insuficiencia hepática aguda se vio afectada, como lo demuestra la disminución de la expresión de RD-5, sPLA2 y lisozima en las células de Paneth junto con el aumento de la translocación bacteriana intestinal

Arachidonic acid mobilization by stimuli of the innate immune response

Las células del sistema inmune innato pueden reconocer patógenosmediante una serie de receptores extracelulares e intracelulares, tales comolos receptores para Fc, receptores de manosa y receptores tipo Toll. El reconocimiento de estos patógenos conduce a la síntesis de mediadores lipídicos de la inflamación conocidos bajo el nombre colectivo de eicosanoides.Los eicosanoides derivan del ácido araquidónico (AA), un ácido graso ω-6poliinsaturado que los mamíferos pueden incorporar directamente a través la dieta o sintetizar a partir de ácido linoleico. El AA no se halla nuncaen forma libre, sino esterificando la posición sn-2 de los glicerofosfolípidosde membrana. Por ello, antes de que se produzca la síntesis de eicosanoides, el AA tiene que ser liberado de los fosfolípidos. Las enzimas involucradas en tal liberación son las fosfolipasas A2 (PLA2). Aunque las rutas deseñalización que median la producción de eicosanoides por células involucradas en inmunidad innata no están bien caracterizadas, se ha demostrado de modo concluyente que la fosfolipasa A2 citosólica de grupo IVA(cPLA2α) es una enzima fundamental en este proceso y que, dependiendodel tipo celular y de las condiciones de estimulación, existen mecanismosreguladores de cross-talk entre la cPLA2α y otras enzimas con actividadPLA2 presentes en las células (AU)

Cells of the innate immune system can recognize pathogens via anumber of extracellular and intracellular receptors, such as Fc, mannoseor Toll-like receptors. Recognition of these pathogens leads to the synthesisof inflammatory lipid mediators, the eicosanoids. The eicosanoids derivefrom arachidonic acid (AA), an ω-6 polyunsaturated fatty acid that mammalscan incorporate directly through dietary sources or synthesize from linoleicacid. In cells, AA seldom occurs in free fatty acid form, and is almostalways found esterified at the sn-2 position of glycerophospholipids. Thus,it has to be removed from there before any eicosanoid synthesis can occur.The enzymes involved in such a removal are the phospholipase A2s (PLA2s).The signaling pathways that mediate the production of eicosanoids bycells involved in innate immunity are not completely understood, but itis now clear that the calcium-dependent cytosolic group IVA PLA2 (cPLA2α)is a critical enzyme in this process, and that, depending on cell type andstimulation conditions, regulatory cross-talk mechanisms exist betweencPLA2α and other PLA2 enzymes present in the cells (AU)