Serum amyloid A stimulates vascular endothelial growth factor receptor 2 expression and angiogenesis

Serum amyloid A (SAA), a major acute-phase reactant, modulates angiogenesis in many diseases. Vascular endothelial growth factor receptor 2 (VEGFR2) is the primary angiogenic receptor for vascular endothelial growth factor (VEGF), but the possibility of an interaction between SAA and VEGFR2 has not yet been resolved. Here, we investigated if SAA stimulates the expression of VEGFR2 and promotes angiogenesis in vitro. Human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) were stimulated with recombinant SAA (rSAA), and the messenger RNA (mRNA) and protein expression of VEGFR2 was detected by Western blot analysis and quantitative real-time PCR. Formyl peptide receptor-like 1 (FPRL1) agonist (WKYMVm) and antagonist (WRW4) and inhibitors of mitogen-activated protein kinases (MAPKs) were used to investigate the mechanism of regulation of VEGFR2.We show that SAA induces VEGFR2 expression in a time- and dose-dependent manner in HUVECs. In addition, SAA promotes tube formation in HUVECs. The effect of SAA on tube formation was shown to be the result of an increase in VEGFR2 expression, which was blocked by the multi-angiokinase receptor inhibitor BIBF1120. These activities of SAA appear to be mediated by FPRL1/MAPK signaling pathways, as they were mimicked by WKYMVm and abrogated by WRW4 and inhibitors of MAPKs. These observations indicate that SAA induces VEGFR2 expression and promotes tube formation in HUVECs via the FPRL1/MAPK signaling pathway, thus providing a potential target for the control of angiogénesis (AU)

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El receptor 2 de VEGF (VEGFR2) y el receptor 1 de la PTH (PTH1R) actúan como mediadores de la respuesta antiapoptótica al estímulo mecánico en las células osteocíticas MLO-Y4 / The VEGF (VEGFR2) 2 receptor and PTH (PTH1R) 1 receptor act as mediators in the anti-apoptotic response to mechanical stimulus in MLO-Y4 osteocyte-like cell

La estimulación mecánica juega un papel fundamental en el mantenimiento de la masa ósea. Dicha estimulación previene la apoptosis de los osteocitos por un mecanismo que implica la acumulación de β-catenina y la translocación nuclear de quinasas reguladas por señales extracelulares (ERK). El factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF) y la proteína relacionada con la parathormona (PTHrP) modulan la formación ósea, aunque su interacción con los osteocitos es desconocida. En el presente estudio hemos evaluado el posible papel del receptor 2 del VEGF (VEGFR2) y del receptor tipo 1 de PTH (PTH1R) en la respuesta antiapoptótica a la estimulación mecánica en células osteocíticas MLO-Y4. Las células se sometieron a estrés mecánico por flujo laminar de fluido (10 min, 10 dinas/cm2) o choque hipotónico (240 mOsm, 1h), o estimuladas con VEGF165 o PTHrP (1-36). Además, comparamos los efectos de sobre-expresar VEGFR2 y el estímulo mecánico en estas células. La estimulación mecánica, el VEGF165 o la PTHrP (1-36), de manera similar, estimularon la viabilidad celular y la estabilización de β-catenina, relacionada con su localización en la membrana. Además, la estimulación mecánica aumentó la presencia del PTH1R en la membrana. La inhibición del VEGFR2 así como el antagonista PTHrP (7-34) disminuyeron estos efectos. Por otro lado, la sobre-expresión del VEGFR2 en las células MLO-Y4 mimetizó el efecto del estímulo mecánico sobre la β-catenina y la viabilidad celular. Estos hallazgos apoyan un papel funcional de ambos sistemas, VEGF/VEGFR2 y PTHrP/PTH1R, en la respuesta temprana a la estimulación mecánica para promover la viabilidad osteocítica (AU)

Mechanical stimulation plays a crucial role in bone mineral maintenance. This stimulation prevents osteocyte apoptosis by a mechanism that involves β-catenin accumulation and nuclear translocation of extracellular-signal-regulated kinases (ERKs). The vascular endothelial growth factor (VEGF) and parathyroid hormone-related protein (PTHrP) modulate bone formation, although their interaction with osteocytes is unknown. In this paper we have considered the possible role of VEGF (VEGFR2) 2 receptor and PTH (PTH1R) type 1 receptor in the anti-apoptotic response to mechanical stimulation of MLO-Y4 osteocyte-like cells. The cells were subjected to mechanical stress by laminar fluid flow (10 min, 10 dinas/cm2 ) or hypotonic shock (240 mOsm, 1h), or stimulated with VEGF165 or PTHrP (1-36). We also compared the effects of overexpressed VEGFR2 and mechanical stimulation of these cells. Mechanical stimulation, VEGF165 or PTHrP (1-36) stimulated cellular viability and β-catenin stabilization in a similar manner, associated with its localization in the membrane. Mechanical stimulation increased PTH1R presence in the membrane. VEGFR2 inhibition as well as the PTHrP (7-34) antagonist reduced these effects. On the other hand, VEGFR2 overexpression in MLO-Y4 cells mimicked the mechanical stimulation effect on β-catenin and cellular viability. Our findings support a functional role for both systems, VEGF/VEGFR2 and PTHrP/PTH1R, in the early response to mechanical stimulation in promoting osteocyte-like viability (AU)

Modelos animales de enfermedad pulmonar obstructiva crónica / Animal Models of Chronic Obstructive Pulmonary Disease

El desarrollo de modelos animales de una enfermedad ha sido siempre bien acogido por la comunidad científica porque permite realizar una aproximación a la investigación de determinados aspectos de la misma. Los modelos animales de la EPOC no pueden llegar a reproducir la heterogeneidad de esta enfermedad y generalmente solo llegan a representar los estadios más leves de la misma. Además, la obstrucción al flujo aéreo, variable que determina el diagnóstico en un paciente, no siempre se tiene en cuenta en los modelos. Por este motivo, los modelos se han centrado en el desarrollo de enfisema, fácilmente detectable por morfometría pulmonar, sin prestar atención a otros componentes de la enfermedad, como la lesión de las vías aéreas o las alteraciones vasculares asociadas. La exposición continua y prolongada al humo de tabaco se considera el principal factor de riesgo de esta enfermedad, lo que justifica que sea el modelo de exposición al humo de tabaco el más ampliamente utilizado. Sobre esta base de modelo podemos encontrar algunas variantes relacionadas con el tiempo de exposición, la asociación de otros inductores o inhibidores, las exacerbaciones o el uso de animales transgénicos que facilitan la identificación de las vías patogénicas. Es posible, por tanto, reproducir algunas variantes o heterogeneidades de esta enfermedad y diseñar uno u otro modelo que sea capaz de responder a una u otra pregunta de investigación, dirigida bien a una identificación patogénica y/o bien a una respuesta terapéutica

Animal models of disease have always been welcomed by the scientific community because they provide an approach to the investigation of certain aspects of the disease in question. Animal models of COPD cannot reproduce the heterogeneity of the disease and usually only manage to represent the disease in its milder stages. Moreover, airflow obstruction, the variable that determines patient diagnosis, not always taken into account in the models. For this reason, models have focused on the development of emphysema, easily detectable by lung morphometry, and have disregarded other components of the disease, such as airway injury or associated vascular changes. Continuous, long-term exposure to cigarette smoke is considered the main risk factor for this disease, justifying the fact that the cigarette smoke exposure model is the most widely used. Some variations on this basic model, related to exposure time,the association of other inducers or inhibitors, exacerbations or the use oftransgenic animals to facilitate the identification of pathogenic pathways have been developed. Some variations or heterogeneity of this disease, then, can be reproduced and models can be designed for resolving researchers’ questions on disease identification or treatment responses

Analysis of soluble angiogenic factors in Crohn’s disease: a preliminary study / Análisis de los factores angiogénicos solubles en la Enfermedad de Crohn: un estudio preliminar

Aims: Soluble angiogenic factors could be altered in patients with Crohn’s disease (CD), since inflammation and angiogenesis may play a critical pathogenic role. Methods: Serum samples were collected from 30 patients with CD (50% female; median age 44 ± 14 yrs) grouped according to their phenotypic behavior into equal subgroups: inflammatory, fibrostenotic and fistulizing; and 30 healthy controls (50% female; median age 43 ± 14 yrs). Vascular endothelial growth factor (VEGF), placental growth factor (PlGF), angiopoietins (Ang) and receptors (VEGFR1, VEGFR2 and Tie2) in sera were assayed by ELISA. Results: Serum levels of VEGF (494 ± 247 pg/ml), PlGF (36 ± 11 pg/ml), VEGFR1 (1.9 ± 0.3 ng/ml), Ang2 (6.0 ± 2.3 ng/ml) and Tie2 (36 ± 5 ng/ml) in CD patients were significantly higher than those found in healthy controls (335 ± 118 pg/ml; 23 ± 9 pg/ml; 1.0 ± 0.3 ng/ml; 3.9 ± 2.0 ng/ml; 22 ± 7 ng/ml, respectively). Conversely, CD patients showed significantly lower serum levels of Ang1 than healthy controls (46 ± 11 versus 67 ± 23 pg/ml). In the case of VEGFR2 serum levels, no differences between groups were found. Finally, patients with fibrostenotic CD were characterized by elevated VEGF and Ang2 levels, while patients with an inflammatory phenotype by elevated Tie2 and PlGF levels. Conclusions: An activated «pro-angiogenic» profile of angiogenesis soluble markers was observed in CD patients, in comparison with healthy controls. According to the phenotypic behavior, these patients showed differences in serum levels of angiogenic factors

Objetivos: Los factores angiogénicos solubles podrían estar alterados en los pacientes con enfermedad de Crohn (EC), dado que que la inflamación y la angiogénesis pueden desempeñar un papel de carácter crítico en la patogenia de esta enfermedad. Métodos: Se obtuvieron muestras de suero en 30 pacientes con EC (50% mujeres; edad media, 44 ± 14 años) agrupados subgrupos equivalentes en función de su comportamiento fenotípico: inflamatorio, fibroestenosante y fistulizante, así como en 30 controles sanos (50% mujeres; edad media, 43 ± 14 años). Mediante análisis de inmunoabsorción ligada a enzimas (Elisa, enzime-linked immunoadsorbent assay) se evaluaron en el suero el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF, vascular endothelial growth factor), el factor de crecimiento placentario (PlGF, placental growth factor), las angiopoyetinas (Ang) y los receptores VEGFR1, VEGFR2 y Tie2. Resultados: Las concentraciones séricas de VEGF (494 ± 247 pg/ml), PlGF (36 ± 11 pg/ml), VEGFR1 (1,9 ± 0,3 ng/ ml), Ang2 (6,0 ± 2,3 ng/ml) y Tie2 (36 ± 5 ng/ml) en los pacientes con EC fueron significativamente mayores que las observadas en los controles sanos (± 118 pg/ml; 23 ± 9 pg/ ml; 1,0 ± 0,3 ng/ml; 3,9 ± 2,0 ng/ml; 22 ± 7 ng/ml, respectivamente). Por el contrario, los pacientes con EC presentaron concentraciones séricas significativamente inferiores de Ang1, en comparación con los controles sanos (46 ± 11 y 67 ± 23 pg/ml, respectivamente). En el caso de las concentraciones séricas de VEGFR2, no se observaron diferencias entre los 2 grupos. Finalmente, los pacientes con EC fibroestenosante se caracterizaron por una elevación de las concentraciones de VEGF y Ang2, mientras aquellos que tenían el fenotipo inflamatorio presentaron concentraciones elevadas de Tie2 y PlGF. Conclusiones: En los pacientes con EC se detectó un perfil «proangiogénico» activado en lo relativo a los marcadores solubles de la angiogénesis, en comparación con lo observado en los controles sanos. Según el comportamiento fenotípico, estos pacientes presentaron diferencias en las concentraciones séricas de los factores angiogénicos (AU)

Progresión de la retinopatía diabética después de instaurar un tratamiento intensivo de insulina con infusión continua. A propósito de 2 casos

Se ha calculado que alrededor de 135 millones de personas padecen de diabetes mellitus y se espera que la cantidad se incremente al doble en las siguientes dos décadas. La retinopatía diabética es la causa más frecuente de ceguera en la población en edad productiva en los países desarrollados. Se requiere un adecuado control glicémico y de las alteraciones metabólicas asociadas para prevenir la aparición o enlentecer la progresión de la retinopatia. Sin embargo, se ha visto que la terapia intensiva con insulina puede provocar un empeoramiento inicial de la retinopatía cuando esta existe previamente a la intensificación del tratamiento insulínico. Se presenta dos casos de pacientes con diabetes mellitus tipo 1 con retinopaia no proliferativa que después de comenzar el tratamiento con sistemas de infusión continua de insulina y al obtenerse un adecuado control glicémico y metabólico, presentaron un empeoramiento de su retinopatía que precisó fotocoagulación. Se discuten algunas terapias alternativas previas o conjuntas al estricto control glicémico con el objetivo de prevenir un deterioro visual. Si tenemos en cuenta que la utilización de los sistemas de infusión continua de insulina son accesibles en todo el territorio nacional desde abril de 2004, estos datos habria que tenerlos en cuenta antes de aplicarlos a personas con diabetes tipo 1 que tengan retinopatía (AU)