Efectos del bosentán sobre la función vascular e inflamación de pacientes diabéticos con enfermedad vascular periférica / Bosentan effects on vascular function and inflammation in diabetic patients with peripheral vascular disease

INTRODUCCIÓN: La endotelina-1 (ET-1) interviene en la regulación del tono vasomotor y remodelado vascular y en la disfunción endotelial. El bloqueante de ET-1, bosentán, podría tener un efecto beneficioso en la enfermedad arterial. OBJETIVO: Analizar la expresión de ET-1, óxido nítrico (NO) e interleucinas 6 y 10 (IL-6, IL-10), en diabéticos con arteriopatía periférica y en controles no diabéticos. Analizar el efecto de bosentán en la expresión de mediadores inflamatorios y en la liberación de NO. PACIENTES: Un total de 3 grupos de sujetos; G1: controles no diabéticos (n = 15), G2: diabéticos con claudicación (n = 15), G3: diabéticos con lesiones tróficas (n = 15). MATERIAL Y MÉTODOS: Análisis de expresión plasmática de ET-1 mediante dot-blot, de concentraciones plasmáticas de IL-6 e IL-10 (kits de ELISA). Capacidad de liberar NO mediante kit de nitratos+nitritos. RESULTADOS: Se observa un aumento de los niveles de ET-1 (G1: 172,9; G2: 277,1; G3: 367,3; p < 0,05, unidades arbitrarias) y un descenso de IL-6 en las formas más avanzadas de la enfermedad (G1: 45,8; G2: 16,4; G3: 9,8; p < 0,05 pg/ml). Bosentán elevó los niveles de IL-6 en el grupo de lesiones tróficas hasta igualarla con el grupo control. Se observó una reducción significativa de la capacidad de liberar NO por los leucocitos en G3 (G1: 16,7; G3: 12; p < 0,05 μmol/L). Este efecto se revirtió significativamente en presencia de bosentán. CONCLUSIONES: Los niveles elevados de ET-1 podrían influir en la progresión de la EAP. En la arteriopatía avanzada parece existir un descenso de la actividad inflamatoria (disminución de IL-6), lo que podría disminuir la vasodilatación (reducción de NO). Bosentán tiene un efecto antagonista sobre estos efectos, fundamentalmente en los estadios más avanzados de la enfermedad

INTRODUCTION: Endothelin-1 (ET-1) is involved in the regulation of vasomotor tone, vascular remodeling, and endothelial dysfunction. The ET-1 blocker, osentan, could have a beneficial effect on vascular disease. OBJECTIVE: To analyze the expression of ET-1, nitric oxide (NO), and interleukins 6 and 10 (IL-6, IL-10), in diabetics with peripheral arterial disease (PAD) and non-diabetic controls. To analyze the effects of bosentan on the expression of inflammatory mediators and the release of NO. PATIENTS: G1: non-diabetic controls (n = 15), G2: diabetic patients with claudication (n = 15), G3: diabetics patients with trophic lesions (n = 15). MATERIAL AND METHODS: Analysis of plasma ET-1 expression by dot-blot, plasma concentrations of IL-6 and IL-10 (ELISA kits). Ability to release NO by nitrate + nitrite kit. RESULTS: Increased levels of ET-1 (G1: 172.9; G2: 277.1; G3: 367.3, P<.05, arbitrary units) and a decrease in IL-6 (G1: 45.8; G2: 16.4; G3: 9.8; P<.05 pg/ml) are observed in the most advanced forms of disease. Bosentan increased levels of IL-6 in the group of trophic lesions when compared with the control group. A significant reduction in the ability of NO release by leukocytes in G3 (G1: 16.7; G3: 12; P<.05 μmol/L) was observed. This effect was significantly reversed in the presence of bosentan. CONCLUSIONS: Elevated levels of ET-1 may influence the progression of PAD. In advanced artery disease, there appears to be a reduction in inflammatory activity (decrease IL-6), which could reduce the vasodilation (NO reduction). Bosentan has an antagonistic effect on these effects, mainly in the more advanced stages of the disease

Estudio de expresión de marcadores de células madre neurales en neuroblastoma y correlación con factores pronóstico / Study of the expression of neural Stem Cell markers in neuroblastoma tumor samples and correlation with prognostic factors

INTRODUCCIÓN: En el neuroblastoma (NB), la existencia de células madre cancerosas (CMC) se ha relacionado con la presencia de metástasis, resistencia al tratamiento quimioterápico y recidiva. Nuestro objetivo es analizar la expresión de marcadores relacionados con proliferación y diferenciación de células progenitoras neurales en muestras de NB, y correlacionarlo con parámetros clínicos, histología, genética y respuesta al tratamiento. MATERIAL Y MÉTODOS: Realizamos un estudio experimental retrospectivo con muestras de neuroblastoma obtenidas mediante biopsia o exéresis tumoral entre 2010 y 2012 en nuestro hospital. Mediante inmunohistoquímica de fluorescencia analizamos la expresión de los marcadores: CD44, CD74, CD133, tirosina hidroxilasa, receptor de endotelina A (REA) y endotelina B (REB), p75, nestina y Phox2b, todos relacionados con la biología de células madre neurales. Posteriormente, relacionamos los niveles de expresión con variables clínicas. RESULTADOS: La expresión de nestina fue positiva en el 72,2% de las muestras y el REA en el 66,7%. Phox2b y CD74 fueron de menor expresión, siendo positiva en menos del 30%. Los marcadores CD44, REB y Phox2b se expresaban en tumores más agresivos. La expresión de REA se correlacionó de forma significativa con tumores de histología desfavorable (p= 0,01), amplificación del N-myc (p= 0,05) y recidiva/ progresión (p= 0,05). [Conclusión] La expresión de CD44, REB y REA se asoció con tumores más agresivos y factores de mal pronóstico. Estos marcadores están presentes en la membrana de células madre neurales, pudiendo ser útiles para identificar y aislar por citometría de flujo las CMCs del NB y para el estudio de nuevas dianas terapéuticas

INTRODUCTION: The existence of cancer stem cells (CSC) in neuroblastoma (NB) has been associated with the development of metastasis, resistance to chemotherapy and recurrence. Our objective is to analyze the expression of proliferation and differentiation markers of neural progenitor cells in NB samples, and to correlate this expression with clinical variables such as histology, genetics and response to conventional therapy. MATERIAL AND METHODS: We performed a retrospective-experimental study with neuroblastoma samples obtained from biopsies or tumor resections between 2010-2012 in our Hospital. Fluorescence immunohistochemistry was used to analyze the expression of the different markers: CD44, CD74, CD133, tyrosine hydroxylase, endothelin receptors type A (ETA) and B (ETB), p75, nestina y and Phox2b, all of them related to neural stem cell biology. The level of expression of the markers was then correlated with clinical variables. [Results] Nestin expression was positive in 72.2% of samples and ETA in 66.7%. PHOX2B and CD74 expression were lower, being positive in less than 30%. The markers CD44, ETB and PHOX2B were expressed in more aggressive tumors. ETA expression correlated significantly with unfavorable histology tumors (p= 0.01), N-myc amplification (p= 0.05) and recurrence/progression (p= 0.05). [Conclusion] The expression of CD44, ETB and ETA was associated with more aggressive tumors and poor prognostic factors. These markers are in the membrane of neural stem cells and may be useful to identify and isolate by flow cytometry CSCs of NB for the study of new therapeutic targets