Probiotics study with Streptococcus salivarius and its ability to produce bacteriocins and adherence to KB cells / Estudo de probióticos Streptococcus salivarius e sua habilidade de produzir bacteriocinas e aderência à células KB

Abstract Introduction Streptococcus salivarius is a dominant oral species and the best suitable candidate for probiotic of the oral cavity. Since Streptococcus salivarius is able to produce bacteriocins against Streptococcus pyogenes interest has been focused on the use of it as a probiotic to avoid sore throats by Streptococcus pyogenes. Objective This study is for selecting Streptococcus salivarius strains for potential use as probiotics for the oral mucosa, that is, production of bacteriocin against Streptococcus pyogenes and the ability to bind to KB cells. Material and method Tongue material from 45 students was collected and seeded on Mitis Salivarius Agar plaques. The strains were tested by the production of bacteriocin-like substances (BLIS) against S. pyogenes, biochemically and PCR for identification of S. salivarius. The best strains were tested for adherence to KB cells. Briefly, S. salivarius strains were cultured in broth, washed and suspended at 108cells/ml. KB cells were inoculated into plaques, washed and incubated with the bacteria, for adhesion. These were washed for lysis of the KB cells and release bacteria for determination of CFU. Result The bacteriocin test showed that 133 strains presented inhibition of S. pyogenes. The samples tested for adhesion to KB cells, presented different profiles and only three strains presenting high adhesion capacity. Conclusion The selection of strains of Streptococcus salivarius with high inhibitory activity against Streptococcus pyogenes, as well as adherence to KB cells leads us to the next future step, that is, to use the best strains for in vivo colonization tests

Resumo Introdução Streptococcus salivarius é uma espécie dominante na cavidade bucal e tem sido indicada como um ótimo candidato para uso como probiótico. Visto que a espécie Streptococcus salivarius é capaz de produzir bacteriocinas contra Streptococcus pyogenes, desenvolveu-se interesse no uso desse microrganismo como probiótico, para evitar amigdalites causadas por Streptococcus pyogenes. Objetivo A pesquisa em questão tem o objetivo de selecionar cepas de Streptococcus salivarius para seu uso potencial como probióticos na cavidade bucal, ou seja, produção de bacteriocinas contra Streptococcus pyogenes e habilidade de aderência à células KB. Material e método Coletou-se material de língua de 45 estudantes e semeou-se em placas de ágar Mitis Salivarius. As amostras foram testadas para verificar a produção de substâncias semelhantes à bacteriocina (BLIS) contra S. pyogenes, bioquimicamente e através de PCR para identificação de S. salivarius. As melhores cepas foram testadas quanto aderência à células KB. Resumidamente, as cepas de S. salivarius foram cultivadas em caldo, lavadas e suspensas à correspondência de 108 cels/ml. As células KB foram inoculadas em placas, lavadas e incubadas com as bactérias, para adesão. Estas foram lavadas para lise das células KB e liberação das bactérias para determinação de UFC. Resultado O teste de bacteriocina, mostrou que 133 cepas apresentaram atividade inibitória contra Streptococcus pyogenes. As cepas testadas para aderência à células KB, apresentaram diferentes perfis e somente três com alta capacidade de adesão. Conclusão: A seleção de cepas de Streptococcus salivarius com alta atividade inibitória contra Streptococcus pyogenes, bem como aderência a células KB, pode nos levar ao próximo passo, ou seja, o uso das melhores cepas para o estudo de colonização in vivo.

Cytotoxic and apoptotic potential of Myristica fragrans Houtt. (mace) extract on human oral epidermal carcinoma KB cell lines

Several studies have revealed that certain naturally occurring medicinal plants inhibit the growth of various cancers. The present study was conducted to evaluate cytotoxicity and apoptotic induction potential of Myristica fragrans Houtt mace extract. The cytotoxic activity of the Myristica fragrans Houtt mace acetone extract was assayed by MTT assay on human oral epidermal carcinoma KB cell lines. KB cells were incubated with different concentration of mace extract ranging from 25 to 125 µg/mL for 24hrs. The apoptotic induction potential was also studied by the analysis of Bcl-2 protein and gene expression in mace extract incubated KB cell lines using western blotting technique and real-time polymerase chain reaction. The mace extract exhibited cytotoxicity and anticancer effect against KB cell lines and it also suppressed the growth of cancer cells, therefore growth inhibitory effect was noted in extract treated cell lines. The apoptotic potential of mace extract was accompanied by reduced gene expression of Bcl-2 compared to the untreated KB cells. The mace extract shows the cytotoxic activity and induced the apoptosis through the modulation of its target genes Bcl-2 in the KB cell lines, suggesting the potential of mace as a candidate for oral cancer chemoprevention. This can be further investigated in vivo for its anticancer potential.

Cytotoxicity and genotoxicity of endodontic irrigants on human cells / Citotoxicidade e genotoxicidade de irrigantes endodônticos em células humanas

OBJECTIVE: Endodontic irrigants solutions with antibacterial activity have been used in treatment of teeth with infected root canals; however, these solutions can irritate periapical tissues. The aim of this study was to evaluate the cytotoxity and genotoxicity of different endodontic irrigants solutions – sodium hypochlorite (1% and 2%), calcium hydroxide (0.2%), and HCT20 in human KB cells. MATERIAL AND METHOD: Cells were incubated with solutions for 2 and 24 hours. The cell viability was assessed after the trypan blue exclusion and the frequency of cell death mechanism (apoptotic or necrotic) was determined by acridine orange/ethidium bromide fluorescent dyeing test. The genotoxicity effects were assessed by the micronucleus assays. RESULTS AND DISCUSSION: The results showed that Ca(OH)2 alone or in combination with tergentol (HCT20), and NaOCl induced cytotoxicity in KB causing death cells by apoptosis. The micronuclei test showed that KB treated with NaOCl (1%) present an increase in the frequency of micronucleus compared to the control group.

OBJETIVO: Soluções irrigadoras com atividade antibacteriana têm sido usadas no tratamento de dentes com canais radiculares infectados; entretanto, essas soluções podem irritar os tecidos periapicais. O objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade e genotoxicidade de diferentes soluções irrigadoras – hipoclorito de sódio (1% e 2%), hidróxidode cálcio (0,2 %) e HCT em células humanas KB. MATERIAL E MÉTODO: As células foram incubadas em soluções por 2 e 24 horas. A viabilidade celular foi determinada após exclusão do tripan blue e a frequência de mecanismo de morte celular (apoptótica ou necrótica) foi determinada pelo teste acridine Orange/ethidium bromide fluorescen dyeing. Os efeitos de genotoxicidade foram determinados pelo ensaio de micronúcleos. RESULTADOS E DISCUSSÃO: Os resultados demonstraram que o Ca(OH2), isoladamente ou em combinação com Tergentol™ (HCT20) e NaOCl, induziram citotoxicidade em KB, causando morte celular por apoptose. O teste de micronúcleos demonstrou que KB tratado codm NaOCl (1%) apresentou aumento na frequência de microdnúcleos quando comparadocom o grupo controle.

Estudo histoquímico comparativo da matriz extracelular de tumores primários e metastáticos em ratos nude xenotransplantados com células KB / Histochemical comparative study of primary and metastatic tumors in nude rates xenotransplanted with KB cells

Estudou-se comparativamente, através de métodos histoquímicos, a expressäo dos componentes da matriz extracelular de tumores primitivos e metastáticos em ratos nude, xenotransplantados com células KB. Em ambas as neoplasias observou-se uma variabilidade tanto qualitativa como quantitativa dos componentes matriciais, coexistência de diferentes tipos de fibras, pouca representatividade de fibras elásticas de glicosaminoglicanas ácidas e sulfatadas e de polissacarídeos neutros, além da ausência de membrana basal

Caquexia cancerosa em modelo experimental rato nude atímico/tumor humano KB / Cancerous cachexia in athymic nude rat experimental model/human tumor KB

1. Newborn anthymic nude rats, innoculated with KB human tumor, normally develop a great level of tumoral taken. With the augmentation in volume of the tumoral mass, animals may enter in a cachetic state that leads them to death. 2. However, proportionally to the total of days of observation, the number of rats that enter in cachexia was significantly greater than in the group that did not develop growth of tumoral mass post-innoculum. 3. This fact may suggest that any factor produced by the organism, in an excessive amount, with the aim to hinder the development of the tumoral mass, ha d a parallel effect strondgly cachetizing. 4. Relevant is the fact that the production of this substance may be thymus-independent, since these animals are congenitally athymic

Evaluation of the purified fraction of Wilbrandia (c. f. ) verticillata for antitumour activity

Cucurbatacins are known to produce cytotoxic and anticancer activities. Two novel norcucurbitacin glucosides (Wvl and Wv2) have recently been isolated from a purified fraction obtained from the rhizome of Wilbrandia verticillata. The present study evaluates the cytotoxic and anti-tumour activities of the norcucurbitacins. We have found a regular cytotoxicity in KB cells (Cy50 = 12µg/ml) as well as a significant inhibition in the Walker 256 carcinosarcoma growth (approximately 75%).

Seleçäo por meio de células KB de substâncias e extratos potencialmente ativos em quimioterapia do câncer / Selection by means of KB cells of substances and extracts potentially active in cancer chemotherapy

Several synthetic, semi-synthetic and natural compounds as well extracts were screened for their growht inhibition activity on KB cells. The most active ones were naphthoquinones and derivatives of pyrido [4,3-b] carbazole alkaloids, with inhibition dose (ID50) < 4microng/ml. Of the crude extracts of several plants screened, Vellozia caput-ardeae showed to be the most active

Preparación y toxicidad in vitro de un conjugado entre el factor de crecimiento epidérmico y la adriamicina / Preparation and in vitro toxicity between a conjugate of Epidermal Growth Factor and adriamycine

La principal dificultad de la terapia del cáncer en la actualidad es la utilización de agentes tóxicos cuya actividad antitumoral no es específica. Por tal razón se ha pensado en la unión de agentes tóxicos como toxinas o drogas a factores de crecimiento, hormonas y anticuerpos monoclonales para lograr toxicidad específica sobre las células cancerosas. En este trabajo se presenta la construcción de un conjugado mediante una unión covalente entre el factor de crecimiento epidérmico (EGF) y la adriamicina (ADM). El conjugado retiene la habilidad del EGF de reconocer sus receptores en células de carcinoma mamario, sin perder afinidad y la ADM retiene su toxicidad. La toxicidad del conjugado fue revertida por adición de un exceso de EGF libre y fue dependiente de la cantidad de receptores de EGF presentes en la superficie celular

Sobre los compuestos de coordinación como agentes antitumorales: III: efectos electrónico-estructurales / On coordination compounds as antitumorigenic agents: III: electronic and structural effects

Se reportan los valores de toxicidad in vitro, en la linea celular Kb, de 28 tiosemicarbazonas y sus correspondientes compuestos de coordinación con cobalto, níquel, cobre y cinc. A partir de estos valores se hacen consideraciones sobre qué influencia pueden tener sobre esta propiedad los efectos electrónicos y estructurales, y se concluye que los primeros resultan ser los determinantes

Estudio farmacológico preclínico de un carbamato con interés oncológico / Preclinical pharmacologic trial of a carbamate of oncologoc interest

El 43GV040 es un producto sintético análogo al dietildetiocarbamato de sodio con perspectiva de uso en la clínica oncológica. Es por ello que se estudiaron sus efectos sobre la línea celular KB así como en algunos modelos in vivo e in vitro en 2 especies de animales (ratas y curiel), sobre el aparato cardiovascular, respiratorio y tracto gastrointestinal. No se observaron efectos directos en ileon y tráquea. A altas concentraciones se encontró un ligero aumento del inotropismo. En el animal intacto, la dosis mayor ensayada produce una ligera disminución de la frecuencia cardíaca y la presión arterial que se recupera. Estos estudios nos señalan la posibilidad de su introducción en el arsenal terapéutico

Heterotransplante de células KB em ratos nude atímicos: II. Estudos morfológicos / Heterotransplant of KB cells in athymic nude rats: II. Morphological studies

Estudos morfológicos de microscopia óptica e eletrônica foram realizados em tumores crescidos em ratos nude atímicos, pós-transplantes de linhagem celular tumoral humana de carcinoma epidermóide de boca (KB), desde a 1ª inoculaçäo realizada, até a 8ª passagem seriada do tumor nesses animais. Os autores descrevem o aumento do volume celular e nuclear, bem como a elevaçäo do número de mitoses e uma maior velocidade de crescimento da massa tumoral, à medida que as passagens seriadas do tumor se sucedem. Também foi observado que, com o progredir dessas passagens, a reaçäo inflamatória por parte do hospedeiro aumenta

estudio de la citotoxicidad en células KB de algunas familias de plantas: estudio citotóxico en plantas / Study of cytotoxicity in KB cells of some families of plants: cytotoxicstudy in plants

En el presente trabajo se hace un estudio de la citotoxicidad, en cultivo de células KB, presentada por 60 muestras de extractos pertenecientes a plantas de 6 familias evaluadas en erl año 1983 en el laboratorio de bioensayo del Instituto de Oncología y Radiobiología, como fase inicial del tamizaje de búsqueda de nuevos compuestos con actividad antitumoral. Las familias estudiadas son: Boraginaceae, Clusiaceae, Euphorbiaceae, Rutaceae, Solanaceae. Encontramos que el 21,7 de los extractos probados presentan una amplia citotoxicidad, pues tienen una DE50 menor de 20 mcg/ml. El 10 se considera como moderadamente citotóxicos. Los resultados indican que el mayor número de productos citotóxicos pertenecen a la familias Boraginaceae, Rutaceae y Solanaceae, por lo que pueden considerarse como más perspectivas

Agentes citotóxicos: experimentos com células KB / Citotoxic agents: experiments with KB cells

Apresentam-se os primeiros resultados com o uso de células KB no Instituto de Antibióticos como um importante passo para o estudo de substâncias antimurais no Brasil. A atividade da substância é avaliada mediante a dose-resposta da toxicidade segundo o Protocolo 1600 do "National Cancer Institute-USA" para o uso de células KB, células cultivadas de um carcinoma epidermóide humano. O material com DE**50 <= 30 microng/ml é reavaliado e aquele com DE**50 <= 4 microng/ml é submetido aos testes com tumores in vivo