An in vitro model mimicking the complement system to favor directed phagocytosis of unwanted cells

BACKGROUND: Opsonization, is the molecular mechanism by which target molecules promote interactions with phagocyte cell surface receptors to remove unwanted cells by induced phagocytosis. We designed an in vitro system to demonstrate that this procedure could be driven to eliminate adipocytes, using peptides mimicking regions of the complement protein C3b to promote opsonization and enhance phagocytosis. Two cell lines were used: (1) THP-1 monocytes differentiated to macrophages, expressing the C3b opsonin receptor CR1 in charge of the removal of unwanted coated complexes; (2) 3T3-L1 fibroblasts differentiated to adipocytes, expressing AQP7, to evaluate the potential of peptides to stimulate opsonization. (3) A co-culture of the two cell lines to demonstrate that phagocytosis could be driven to cell withdrawal with high efficiency and specificity. RESULTS: An array of peptides were designed and chemically synthesized p3691 and p3931 joined bound to the CR1 receptor activating phagocytosis (p < 0.033) while p3727 joined the AQP7 protein (p < 0.001) suggesting that opsonization of adipocytes could occur. In the co-culture system p3980 and p3981 increased lipid uptake to 91.2% and 89.0%, respectively, as an indicator of potential adipocyte phagocytosis. CONCLUSIONS: This in vitro model could help understand the receptor­ligand interaction in the withdrawal of unwanted macromolecules in vivo. The adipocyte-phagocytosis discussed may help to control obesity, since peptides of C3b stimulated the CR1 receptor, promoting opsonisation and phagocytosis of lipidcontaining structures, and recognition of AQP7 in the differentiated adipocytes, favored the phagocytic activity of macrophages, robustly supported by the co-culture strategy.

Células gigantes en lepra lepromatosa: dermatitis difusa con células gigantes exuberantes de tipo cuerpo extraño en lepra lepromatosa tratada / Giant cells lepromatous leprosy: Diffuse dermatitis with exuberant foreign body giant cells in treated lepromatous leprosy

Resumen Los pacientes con lepra lepromatosa que han recibido tratamiento durante años, usualmente requieren seguimiento con biopsias de piel para detectar lesiones persistentes o si la baciloscopia es positiva, incluso si los valores son menores que los iniciales. Se presenta el caso de una mujer de 48 años de edad con lepra lepromatosa de 15 años de evolución, índice bacilar de 4 en el extendido directo y en la biopsia, que recibió tratamiento con múltiples medicamentos durante 32 meses, aunque lo recomendado por la Organización Mundial de la Salud (OMS) es una duración de 12 meses. Se tomó una biopsia de piel para determinar si la enfermedad estaba activa. Se observó inflamación dérmica difusa con numerosas células gigantes de tipo cuerpo extraño y macrófagos vacuolados (células de Virchow). Estas células, CD68 positivas, contenían material granular ácido-alcohol resistente positivo con inmunohistoquímica para BCG. Se encontraron bacilos fragmentados y el índice bacilar fue de 2. Se interpretó como una forma residual de lepra lepromatosa y se concluyó que la paciente no requería prolongar el tratamiento con múltiples medicamentos. Este perfil histológico se ha observado en casos similares, pero sin datos clínicos estas biopsias representan un reto diagnóstico. La acumulación de lípidos en estas células gigantes se debe a la destrucción bacilar y a la fusión de macrófagos vacuolados. Se revisó el papel de los lípidos del bacilo y del huésped en la patogenia de la lepra lepromatosa. En estos casos, no es necesario extender los 12 meses de tratamiento con múltiples medicamentos recomendados por la OMS. En el seguimiento de los pacientes, se recomienda contar con los hallazgos clínicos, la baciloscopia, la biopsia anual de piel y los títulos IgM antiglucolípido fenólico.

Abstract Patients with lepromatous leprosy that have received treatment for many years usually get follow up biopsies for persistent skin lesions or positive bacilloscopy even if the values are lower than in the initial bacilloscopy. We report the case of a 48-year old woman with long-standing lepromatous leprosy of 15 years of evolution, with a bacterial index of 4 in the direct smear and the initial skin biopsy. The patient was treated with multidrug therapy for 32 months although the treatment recommended by the World Health Organization (WHO) is only for 12 months. A skin biopsy was taken to determine if there was an active disease. We observed a diffuse dermal inflammation with numerous foreign body giant cells and vacuolated macrophages (Virchow´s cells). These cells contained granular acid-fast material that was also positive with immunohistochemistry for BCG. There were fragmented bacilli and the BI was 2. These cells were also strongly positive for CD68. The biopsy was interpreted as a residual form of lepromatous leprosy that did not require further multidrug therapy. We have observed similar histological profiles in several cases. The lack of clinical data makes it a histological challenge. The accumulation of lipids in these giant cells is due to bacillary destruction and fusion of vacuolated macrophages. We discuss here the role of bacillary and host lipids in the pathogenesis of lepromatous leprosy. We concluded that there was no need to extend the 12-month multidrug therapy recommended by WHO. Clinical findings, bacilloscopy, annual skin biopsy, and anti-phenolic glycolipid-I IgM titers are recommended procedures for the follow-up of these patients.

Economic evaluation in the context of rare diseases: is it possible? / Evaluación económica en el contexto de enfermedades raras: ¿es posible? / Avaliação econômica no âmbito das doenças raras: isto é possível?

This study analyzes the available evidence on the adequacy of economic evaluation for decision-making on the incorporation or exclusion of technologies for rare diseases. The authors conducted a structured literature review in MEDLINE via PubMed, CRD, LILACS, SciELO, and Google Scholar (gray literature). Economic evaluation studies had their origins in Welfare Economics, in which individuals maximize their utilities based on allocative efficiency. There is no widely accepted criterion in the literature to weigh the expected utilities, in the sense of assigning more weight to individuals with greater health needs. Thus, economic evaluation studies do not usually weigh utilities asymmetrically (that is, everyone is treated equally, which in Brazil is also a Constitutional principle). Healthcare systems have ratified the use of economic evaluation as the main tool to assist decision-making. However, this approach does not rule out the use of other methodologies to complement cost-effectiveness studies, such as Person Trade-Off and Rule of Rescue.

El objetivo fue sistematizar las evidencias disponibles sobre la pertinencia de utilizar la evaluación económica para la incorporación/exclusión de tecnología en enfermedades raras. Se realizó una revisión sistemática de la literatura en MEDLINE vía PubMed, CRD, LILACS, SciELO y Google Académico (literatura gris). Los estudios de evaluación económica se originan de la Economía del Bienestar, en la que los individuos maximizan sus utilidades, basándose en la eficiencia de asignación. No existe un criterio ampliamente aceptado para examinar las utilidades, a fin de dar más peso a los individuos con mayores necesidades. Generalmente, los estudios no equilibran asimétricamente las utilidades, todas son consideradas iguales, lo que en Brasil es también un principio constitucional. Los sistemas de salud han ratificado el uso de la evaluación económica como la principal herramienta para ayudar en la toma de decisiones. Sin embargo, este abordaje no excluye el uso de otras metodologías complementarias a los estudios de coste-efectividad, como la técnica de compensación personal o la regla del rescate.

O objetivo deste estudo foi analisar as evidências disponíveis sobre a adequação do uso de avaliação econômica sobre incorporação/exclusão de tecnologias para doenças raras. Foi realizada uma revisão estruturada da literatura, nas bases MEDLINE, via PubMed, CRD, LILACS, SciELO e Google Acadêmico (literatura cinzenta). Os estudos de avaliação econômica têm origem na Economia do Bem-Estar, na qual os indivíduos maximizam suas utilidades, fundamentando-se na eficiência alocativa. Não há um critério amplamente aceito para ponderar as utilidades esperadas, no sentido de dar mais peso aos indivíduos com maiores necessidades em saúde. Geralmente não se ponderam assimetricamente as utilidades; todas são tratadas de forma igualitária, que, no caso brasileiro, também é um princípio constitucional. Os sistemas de saúde têm ratificado o uso de avaliação econômica como principal instrumento para auxiliar na tomada de decisão. No entanto, essa postura não exclui o uso de outras metodologias complementares aos estudos de custo-efetividade, como Person Trade-Off e regra de resgate.

Xantoma intraóseo pelviano: reporte de un caso y revisión de la literatura / Pelvic intraosseous xanthoma: a case report and literature review

El xantoma intraóseo (XIO) es un tumor óseo benigno extremadamente raro. En la histología se caracteriza por presentar macrófagos mononucleares, abundantes células espumosas y células gigantes multinucleadas. Puede aparecer asociado a otras enfermedades (XIO secundario), principalmente a desórdenes lipídicos, o en forma aislada (XIO primario). Los XIO son lesiones líticas expansivas que a menudo se encuentran en pacientes con condiciones hiperlipidémicas. En la mayoría de los casos la evaluación inicial se realiza con radiografía, aunque otros procedimientos pueden ser necesarios para confirmar el diagnóstico. Se presenta el caso de un hombre de 48 años que consultó por lumbalgia con irradiación al miembro inferior derecho e impotencia funcional de 3 meses de evolución. Tenía hallazgos imagenológicos de XIO en el hueso ilíaco derecho, sin hiperlipidemia o lesiones preexistentes. Se llevó a cabo la extirpación total del tumor y el posterior estudio histopatológico de la pieza operatoria confirmó el diagnóstico. El tratamiento resultó exitoso. El objetivo de este artículo es describir los hallazgos clínicos e imagenológicos (radiografía, resonancia magnética, tomografía computada y medicina nuclear) de un XIO primario y su tratamiento. Además, realizamos una breve revisión de la literatura.

Abstract Intraosseous xanthoma is an extremely rare benign bone tumor. Histology shows mononuclear macrophages, abundant foam cells and multinucleated giant cells. The intraosseous xanthoma may appear associated with other diseases (secondary intraosseous xanthoma), mainly lipid disorders or without an underlying lipid disorder (primary intraosseous xanthoma). The intraosseous xanthoma is a lytic, expansive tumor, often seen in patients with hyperlipidemic conditions. In most cases, the initial evaluation is performed with X-ray, although other procedures may be necessary to confirm the diagnosis. We report the case of a man aged 48, who consulted for back pain radiating to the right leg and functional disability 3 months duration, with imaging findings in the right iliac XIO in the absence of pre-existing injuries or hyperlipidemic conditions, so surgery for total removal of the tumor was performed with histological examination of the surgical specimen, confirming the preoperative diagnosis of XIO. Such treatment resulted curative. The aim of this article is to describe the clinical, imaging findings (RX, MRI, CT, nuclear medicine) and the course of treatment of a committing the iliac primary intraosseous xanthoma a and a normolipidemic patient brief review of the literature.

Intoxicação espontânea e experimental por Pterodon emarginatus (Fabaceae Faboideae) em bovinos e experimental em ovinos / Spontaneous and experimental poisoning by Pterodon emarginatus (Fabaceae Faboideae) in cattle and experimental poisoning in sheep

Relatam-se mortalidades de bovinos nos Estados de Mato Grosso e Mato Grosso do Sul relacionadas ao consumo de folhas de Pterodon emarginatus. Três surtos ocorreram no período de seca na região Centro-Oeste, após a queda de árvores devido a ventos fortes ou após serem derrubadas para aproveitamento da madeira. Morreram 40 bovinos em três diferentes surtos. A intoxicação foi reproduzida com administração de folhas de P. emarginatus; a dose tóxica mínima foi 20g/kg para ovinos e 6g/kg para bovinos. Os sinais clínicos iniciaram-se entre 24 e 72 horas após o consumo da planta. A evolução clínica da doença letal foi de 12 a 36 horas. Os sinais clínicos se caracterizaram por apatia, depressão, andar a esmo, pressão da cabeça contra objetos. Em dois dos surtos, os bovinos que sobreviveram a fase aguda da doença, desenvolveram fotossensibilização. Os principais achados macroscópicos nos casos espontâneos e experimentais foram no fígado; estes se caracterizaram por hepatomegalia e evidenciação do padrão lobular na superfície capsular e de corte. Notaram-se também hemorragias nas serosas abdominais e torácicas. Microscopicamente observou-se necrose coagulativa hepatocelular, que variou de centrolobular a massiva, por vezes associada à congestão e hemorragia; ocorreu também marcada tumefação e vacuolização de hepatócitos na região periacinar. O diagnóstico foi baseado nos dados epidemiológicos, clínicos, patológicos e na reprodução experimental da intoxicação em bovinos e ovinos. Estes achados caracterizam P. emarginatus como planta hepatotóxica de interesse pecuário na região Centro-Oeste do Brasil.

This paper reports cattle mortalities in the states of Mato Grosso and Mato Grosso do Sul, Brazil, caused by the consumption of the leaves of Pterodon emarginatus. The outbreaks occurred during the dry season after P. emarginatus trees had fallen to the ground due to high winds or after having been cut for wood, and cattle had access to the branches. Forty cattle died during three different outbreaks. First clinical signs were seen after 24-72 hours of the consumption of the leaves by the cattle. The course of the letal disease was from 12 to 36 hours. Clinical signs were characterized by apathy, depression, walking aimlessly, pressing the head against objects, and occasionally photosensitization in cases of poisoning with a longer clinical course. The disease was reproduced by administration of P. emarginatus leaves at a minimum toxic dose of 20g/kg for sheep and 6g/kg for cattle. The main macroscopic findings in spontaneous and experimental cases were in the liver, characterized by hepatomegaly and diffuse accentuation of the lobular pattern on the capsular and cut surfaces. Additionally, there were petechiae, ecchymoses and suffusions within the thoracic and abdominal serosa surfaces. In two outbreaks, fotossensibilization was reported in cattle that survived the acute phase. The main histopathological findings were marked centrilobular or massive coagulative hepatocellular necrosis associated with congestion and hemorrhages, surrounded or not by markedly swollen and vesicular hepatocytes in the periacinar area. The diagnosis was based on epidemiological data, clinical signs, necropsy findings, histological lesions and experimental reproduction of the poisoning in cattle and sheep. These findings showed P. emarginatus to be a hepatotoxic plant of interest in the Midwest region of Brazil.

La lepra y el testículo / Leprosy and the testis

Introducción. La afección testicular es frecuente en la lepra lepromatosa, daño que se incrementa cuando cursa con eritema nudoso leproso. Objetivo. Presentar un paciente con lepra lepromatosa y eritema nudoso leproso con grave compromiso testicular. Materiales y métodos. Se estudió un hombre de 28 años con lepra lepromatosa desde los 22, que durante la poliquimioterapia para la lepra presentó eritema nudoso leproso crónico que afectó ambos testículos y no respondió al manejo convencional. El dolor persistente obligó a practicar orquidectomía izquierda. Resultados. Este testículo presentaba atrofia tubular y fibrosis notorias, conglomerados de macrófagos espumosos, sin bacilos, hiperplasia focal de células de Leydig, endarteritis y arteritis linfocitaria y granulomatosa de vasos pequeños y medianos; estos cambios también estaban presentes en el epidídimo. Un estudio llevado a cabo dos años después de terminar su tratamiento y de la orquidectomía izquierda, demostró azoospermia, testosterona total normal, testosterona libre discretamente disminuida y hormonas lutropina (luteinizante) y folitropina (estimulante del folículo) elevadas. No había disminución de la libido ni de su actividad sexual. Se revisaron los conceptos generales sobre el eritema nudoso leproso y las alteraciones que la lepra produce en el testículo. Conclusión. La lepra lepromatosa puede conducir a hipogonadismo. Los programas de lepra deben contemplar esta complicación para corregir y evitar sus secuelas.

Introduction. Damage of testicles is frequent in lepromatous leprosy and worsened by the presence of erythema nodosum leprosum. Objective. A patient is presented who developed lepromatous leprosy and erythema nodosum leprosum with major testicular compromise. Material and methods. The 28-year-old male patient had lepromatous leprosy since age 22. During a polychemotherapy treatment for the lepromatous leprosy, he presented chronic erythema nodosum leprosum that affected both testicles; he did not respond to the conventional treatment. A left orchidectomy was performed to treat the persistent pain. Results. The extracted testis evidenced the following: tubular atrophy, extensive fibrosis, cumulus of foamy macrophages without rods, focal Leydig cell hyperplasia, linfocitary and granulomatous arteritis and endarteritis of small and medium size vessels. These changes were also observed in the epididymis. Two years after the polychemoterapy and the orchidectomy, the patient exhibited azoospermy, normal total testosterone, slightly diminished free testosterone and elevated levels of luteinizing hormone and follicle-stimulating hormone. No loss of libido or sexual activity was reported. General concepts of erythema nodosum leprosum were reviewed, as well as the pathologic changes produced by leprosy in the testis. Conclusion. Lepromatous leprosy may lead to hypogonadism. This condition is recommended for inclusion in leprosy diagnostic programs in order to detect and treat the consequences of the possible hypogonadism.

Aumento dos níveis de LDLox induzem maior formação de células espumosas in vitro / Increased levels of oxLDL induce higher foam cells formation in vitro

Inúmeras evidências sustentam a hipótese de que a modificação oxidativa da LDL contribui para o desenvolvimento e progressão da aterosclerose em uma variedade de modelos animais e que as células espumosas constituem um evento crucial no desenvolvimento da lesão aterosclerótica. A LDL oxidada tem uma ação quimioatraente sobre os monócitos, induzindo a transformaçãode macrófagos em células espumosas. Neste trabalho, foi desenvolvido um protocolo simples e reproduzível de cultura de células mononucleares humanas, o qual foi utilizado para avaliação da capacidade aterogênica da LDL oxidada comparada à LDL nativa naformação de células espumosas com ativação espontânea dos macrófagos. A partir do sangue de 10 indivíduos normolipidêmicos, obteve-se a LDL por processo de ultracentrifugação sendo a mesma oxidada in vitro na presença de íons cobre. Monócitos diferenciaram-se em macrófagos e foram incubados com LDL nativa e oxidada em diferentes concentrações. Houve formação decélulas espumosas apenas em macrófagos estimulados com LDL oxidada, variando quantitativamente de acordo com a sua concentração.Concluiu-se que este protocolo de estudo, além de possibilitar a utilização de macrófagos humanos, permitiu a redução do tempo de incubação da cultura. Paralelamente, demonstrou-se que a formação de células espumosas é dependente da extensão do grau deoxidação da LDL

Much evidence sustains the hypothesis that oxidative modification of low-density lipoprotein (LDL) contributes to the development and progression of atherosclerosis and that foam cells constitute a crucial event in the development of the atheroscleroticlesion. Oxidized LDL (oxLDL) presents a chemotatic action on monocytes, inducing the transformation of macrophages into foam cells. In this work, a simple reproducible protocol for culturing human mononuclear cells was developed to evaluate the atherogeniccapacity of oxLDL compared to native LDL in the formation of foam cells. Monocytes differentiate into macrophages when stimulatedwith native and oxidized LDL at different concentrations. Foam cell formation only occurred in macrophages stimulated by oxLDL, which varied quantitatively according to its concentration. This study protocol, besides making the use of human macrophages possible, permitted a reduction in culture incubation time. Moreover, the study demonstrated that foam cell formation is dependent on the degree of LDL oxidation

Histopathological study of radicular cysts diagnosed in a Brazilian population

The aim of this study was to investigate the histopathological features of radicular cysts (RCs) diagnosed in a Brazilian population. Seventy-three cases of RCs, from a total of 1480 biopsies diagnosed between 2001 and 2008 at the Laboratory of Oral Surgical Pathology of the Dental School of the Federal University of Bahia were investigated regarding their histopathological features. Morphological results showed that exocytosis (n=50), spongiosis (n=40), acanthosis (n=28), atrophic epithelium (n=27) and apoptotic bodies (n=21) were the most common findings. Other morphological findings included: foamy macrophages (n=10), Russell’s bodies (n=7), cholesterol crystals (n=7) and glandular-like odontogenic epithelial rests (n=1). Evidence of exogenous material was seen in 16 samples. It was concluded that the clinical and histopathological findings observed in Brazilian patients were comparable with those described for other populations.

O propósito desse estudo foi investigar os aspectos histopatológicos de cistos radiculares diagnosticados em uma população brasileira. Setenta e três casos de cistos radiculares entre 1480 biópsias diagnosticadas na Faculdade de Odontologia da Universidade Federal da Bahia, entre 2001 e 2008, foram investigados, considerando os seus aspectos histopatológicos. Os resultados morfológicos mostraram que os achados mais comuns foram a exocitose (n=50), espongiose (n=40), acantose (n=28), epitélio atrófico (n=27) e células apoptóticas (n=21). Outros achados encontrados incluíram macrófagos espumosos (n=10), corpúsculos de Russell (n=7), imagens negativas de colesterol (n=7) e restos epiteliais odontogênicos semelhantes à tecido glandular (n=1). Material exógeno foi observado em 16 casos. Concluiu-se que os aspectos histopatológicos e clínicos observados foram comparáveis a outros descritos em outras populações.

Xantoma verruciforme: características histopatológicas y patogénesis, análisis de casos de vulva y región perianal / Verruciform xanthoma: histopathologic findings and pathogenesis: analysis of vulvar and perianal cases

El xantoma verruciforme es una lesión inflamatoria, reactiva, no tumoral, que afecta principalmente la mucosa oral, las semimucosas y la piel de las extremidades. Clínicamente se presenta como lesión única, elevada, de superficie irregular o verrucosa. La histopatología se caracteriza por hiperplasia epidérmica, paraqueratosis extensa con exocitosis de neutrófilos y acúmulos de histiocitos xantomatosos en la dermis papilar. Las hipótesis propuestas para explicar la patogénesis de la enfermedad incluyen origen metabólico, infeccioso, irritantes locales, inflamación crónica y trauma. Las diferentes teorías indican que el evento inicial es el daño de los queratocitos con liberación de productos que inducen respuesta inflamatoria, proliferación celular y liberación de lípidos, que originarían los macrófagos espumosos. El diagnóstico diferencial debe hacerse con condiloma acuminado, carcinoma escamocelular y con el tumor de células granulares. Revisamos la patogénesis del xantoma verruciforme y presentamos dos casos de lesiones en el área perineal, que ilustran sus características histopatológicas.

Papel de CD100 na patogênese da aterosclerose / Role of CD100 in the pathogenesis of atherosclerosis

A aterosclerose é uma doença degenerativa crônica dos vasos, com conseqüências clínicas agudas que incluem o infarto do miocárdio e o acidente vascular cerebral, resultantes geralmente da ruptura da placa e trombose. É atualmente reconhecida como de característica inflamatória, iniciada e propagada no contexto da hipercolesterolemia. Um trabalho de nosso grupo utilizou técnicas de phage display para comparar placas ateroscleróticas e carótidas normais objetivando a busca de proteínas alteradas potencialmente envolvidas na patogênese da doença. Diversas semaforinas e plexinas (receptores de semaforinas) foram identificadas dentre elas a plexina B1, que possui alta afinidade por CD100, sugerindo assim uma concentração aumentada de CD100 na placa aterosclerótica. CD100 foi a primeira semaforina descrita no sistema imune e a única até hoje descrita como possuidora de duas formas de funcionalidades distintas, sendo uma de membrana (mCD100) e outra solúvel (sCD100). Neste trabalho demonstramos a expressão da semaforina CD100 em macrófagos e células espumosas em placas ateroscleróticas humanas, assim como seu padrão de expressão ao longo da diferenciação monócito-macrófago-célula espumosa, e sob estímulos distintos. Além disso, identificamos pela primeira vez o receptor que medeia suas atividades nessas células, a plexina B2. Adicionalmente, detectamos também pela primeira vez detectamos a expressão de CD100 em células endoteliais teciduais e cultivadas in vitro, o que sugere um papel significativo da semaforina em fenômenos vasculares. Com base nessas observações e nos resultados de experimentos de bloqueio de adesão constatamos que CD100 pode atuar na fase mais precoce da aterosclerose, como uma molécula de adesão envolvida na ligação entre monócitos e células endoteliais. Verificamos ainda que CD100 diminui a captação de LDLox em macrófagos e células espumosas. Poucos estudos relatam a presença ou possível atividade biológica de CD100 tanto na aterosclerose...

Atherosclerosis is a chronic degenerative disease affecting vessels, with acute clinical consequences that include myocardium infarction or stroke, generally resulting from plaque rupture and thrombosis. It is now recognized as an inflammatory disease, initiated and developed in a hipercholesterolemic context. A work in our lab has used phage display techniques to compare atherosclerotic plaques and normal carotids, searching for altered proteins potentially involved in the pathogenesis of the disease. Many semaphorins and plexins (semaphorin receptors) have been identified, among which plexin B1, a high affinity receptor for CD100, suggesting an augmented level of CD100 in the atherosclerotic plaques. CD100 is the first semaphorin described in the immune system, and the only to possess two forms with distinct functionalities, being one associated to the membrane, mCD100, and another soluble form, sCD100. In the present work we have demonstrated CD100 expression in macrophages and foam cells of human atherosclerotic plaques, as well as its pattern of expression along monocyte-macrophage-foam cell differentiation and under distinct stimuli. Furthermore, we have identified for the first time the receptor involved in CD100 activities in these cells, namely plexin B2. Aditionally, we have detected CD100 expression in tissue as well as in in vitro cultured endothelial cells, also for the first time. According to these informations and adhesion blockage experiments we have shown that CD100 may act in the earliest phase of the establishment of atherosclerosis, as an adhesion molecule involved in monocyte-endothelial cell association. We have also verified that CD100 diminishes the intake of oxLDL in macrophages and foam cells. Only a few studies describe the presence or possible biological activity of CD100 in atherosclerosis or macrophages. Since the molecule has been shown to participate in the immune system, we believe that the differential expression of...

A role for archaeal organisms in development of atherosclerotic vulnerable plaques and myxoid matrices

PURPOSE: Vulnerable plaques are characterized by a myxoid matrix, necrotic lipidic core, reactive oxygen species, and high levels of microorganisms. Aerobic microbes such as Chlamydophila pneumoniae and Mycoplasma pneumoniae usually do not survive in oxidative stress media. Archaea are anaerobic microbes with powerful anti-oxidative enzymes that allow detoxification of free radicals whose presence might favor the survival of aerobic microorganisms. We searched for archaeal organisms in vulnerable plaques, and possible associations with myxoid matrix, chlamydia, and mycoplasma bodies. METHODS: Twenty-nine tissue samples from 13 coronary artherectomies from large excentric ostial or bifurcational lesions were studied using optical and electron microscopy. Infectious agents compatible with archaea, chlamydia, and mycoplasma were semiquantified using electron micrographs and correlated with the amounts of fibromuscular tissue, myxoid matrix, and foam cells, as determined from semi-thin sections. Six of the cases were also submitted to polymerase chain reaction with archaeal primers. RESULTS: All 13 specimens showed archaeal-compatible structures and chlamydial and mycoplasmal bodies in at least 1 sample. There was a positive correlation between extent of the of myxoid matrix and archaeal bodies (r = 0.44, P = 0.02); between archaeal and mycoplasmal bodies (r = 0.41, P = 0.03), and between chlamydial bodies and foam cells (r = 0.42; P = 0.03). The PCR test was positive for archaeal DNA in 4 of the 6 fragments. DISCUSSION: DNA and forms suggestive of archaea are present in vulnerable plaques and may have a fundamental role in the proliferation of mycoplasma and chlamydia. This seems to be the first description of apparently pathogenic archaea in human internal organ lesions.

PROPOSTA: Placas vulneráveis são caracterizadas por matriz mixomatosa, centro lipídico necrótico, espécies reativas de oxigênio e alto níveis de microorganismos. Micróbios aeróbicos como Chlamydophila pneumoniae e Mycoplasma pneumoniae usualmente não sobrevivem em meio de estresse oxidativo. Arquéias são microorganismos anaeróbicos com poderosas enzimas anti-oxidantes que permitem detoxificação de radicais livres e a presença delas poderia favorecer a sobrevivência de micróbios aeróbicos. Pesquisamos por elementos de arquéia em placas vulneráveis e sua possível associação com degeneração mixomatosa da matriz e aumento do número de clamídias e micoplasmas. MÉTODOS: Vinte e nove amostras de 13 produtos de aterotomia de lesões grandes e excêntricas de óstio ou bifurcação de coronárias foram estudadas pela microscopia óptica e eletrônica. Agentes compatíveis com arquéia, clamídia e micoplasma foram semiquantificados pela microscopia eletrônica e correlacionados com quantidade de tecido fibromuscular, matriz mixomatosa e células xantomatosas. Seis casos foram também submetidos à reação em cadeia da polimerase com oligonucleotídeos de arquéia. RESULTADOS: Os 13 casos foram positivos para estruturas sugestivas de arquéia, micoplasma ou clamídia, em pelo menos uma amostra. Houve correlação positiva entre intensidade de matriz mixomatosa versus arquéia (r=0.44, p=0.02); arquéia versus micoplasma (r=0.41, p=0.03) e clamídia versus células xantomatosas r=0,42; 0.03). PCR foi positiva para DNA de arqueia em 4 dos 6 fragmentos. DISCUSSÃO: DNA e formas compatíveis com arquéia estão presentes em placas vulneráveis e podem ter papel fundamental na proliferação de micoplasma e clamídia. Este parece ser o primeiro relato de arquéia aparentemente patogênica em lesões de órgãos internos humanos.

Aislamiento y caracterización de macrófagos- células espusas a partir de aorta de un modelo de ateroesclerosis en conejo hipercolesterolémico / Isolation and characterization of macrophages-foam cells from aorta of hypercholesterolemic rabbit

Actualmente existe suficiente evidencia que sustenta que la ateroesclerosis es una patología en la cual están involucrados no sólo procesos de desequilibrio y aumento de lípidos, sino también procesos inflamatorios mediados por macrófagos-células espumosas. Estos hallazgos han sido encontrados en estudios llevados a cabo con animales de experimentación. Con el propósito de racionalizar la utilización de animales y de proponer un modelo biológico alterno en el que se puedan estudiar los mecanismos de patogenicidad que involucren tipos celulares relacionados con la ateroesclerosis, en el presente trabajo se estandarizó una técnica de aislamiento y cultivo de macrófagos-células espumosas, así como, los procedimientos para caracterizar los cultivos establecidos mediante la detección de esterasas no específicas. Para el análisis de la expresión de estas enzimas, se utilizó una técnica histoquímica y electroforesis en gel de poliacrilamida en condiciones no denaturantes. En la literatura revisada, este último método no ha sido empleado para evidenciar expresión de esterasas no específicas en leucocitos. El modelo biológico aportado por este trabajo puede ser usado para estudiar respuestas de los macrófagos activados y células espumosas relacionadas con la ateroesclerosis.

Relaçäo entre macrófagos espumosos ("foam cells") no fígado de bovinos e ingestäo de Brachiaria spp no Brasil / Relationship between foamy macrophages in the liver of cattle and ingestion of Brachiaria spp

Com o objetivo de estabelecer uma relaçäo etiológica e caracterizar, cronologicamente, o aparecimento de macrófagos espumosos (foam cells), comuns em fígados de bovinos oriundos das regiões de clima tropical do Brasil, foram reexaminados cortes histológicos de fígado de bovinos dos arquivos do Setor de Anatomia Patológica da Embrapa-Projeto Sanidade Animal, RJ. O material utilizado provinha de investigações sobre causas de mortandades em bovinos nas regiões Norte, Centro-Oeste e Sudeste do Brasil, realizadas de 1970 a 1991. Foram estudados 55 fígados de bovinos afetados por enfermidades variadas. Somente foram usados casos em que o tipo de pastagem era conhecido. Essa alteraçäo näo foi encontrada de 1970 até o final de 1975, embora 40 amostras (72,7) tenham sido coletadas nesse período. A presença de macrófagos espumosos, observada a partir de 1976, coincidiu com a introduçäo da gramínea Brachiaria decumbens var. australiana no Brasil. Algumas amostras eram provenientes de bovinos que apresentaram histórico de fotossensibilizaçäo, na época atribuída ao fungo Pithomyces chartarum. Os achados indicam que essas alterações hepáticas säo relacionadas com a ingestäo de Brachiaria spp.

Estudos histológico, histoquímico e ultra-estrutural de fígados e linfonodos de bovinos com presença de macrófagos espumosos ("foam cells") / Histologic, histochemical and ultrastructural study of livers and lymph nodes with foamy macrophages (foam cells)

Foram examinadas amostras de fígado, rins, baço e linfonodos hepáticos, mesentéricos, retro-mandibulares, pré-escapulares e mediastínicos de 12 lotes em um total de 120 animais, envolvendo diferentes faixas etárias, todos oriundos do Estado de Mato Grosso. Os animais haviam sido mantidos em pastos onde Brachiaria decumbens e Brachiaria brizantha eram as forrageiras predominantes. Macroscopicamente o fígado desses animais mostrava coloração amarelada, mais evidente após 24 horas de fixação em formol a 10%. Nos linfonodos hepáticos e mesentéricos foram evidenciadas, na superfície de corte, estriações esbranquiçadas de forma radiada na cortical e medular com pequenas áreas brancas nodulares multifocais principalmente na medular. Em muitos casos, associado com essas áreas foram vistos focos de aspecto hemorrágico. Microscopicamente foram encontradas, no fígado, linfonodos hepáticos e mesentéricos, células com citoplasma espumoso, muitas das quais multinucleadas. Nos linfonodos hepáticos e mesentéricos estes infiltrados estavam associados a áreas de necrose e hemorragia. No fígado, as células de citoplasma espumoso estavam presentes em todo parênquima, de forma irregular, geralmente formando nódulos ao redor da veia centrolobular. Estas células não se coravam pelo ácido periódico de Schiff (PAS) e apenas fracamente na coloração de gordura pelo Oil Red O. Na ultra-estrutura as células de citoplasma espumoso apresentavam fendas, parcial ou totalmente delimitadas por membrana, que representam a imagem negativa de cristais, presentes também no citoplasma dos hepatócitos

Respuesta inflamatoria en granulomas apicales de pacientes VIH positivos (CDC II) y sanos (I) / Inflammatory response in apical granulomas fron HIV-positive patients (CDC II) and healthy subjects (I)

Entre las infecciones bacterianas bucales asociadas al SIDA, se describe la exacerbación de periodontitis apicales, siendo la naturaleza de las alteraciones celulares ocurridas en el ápice de dichas piezas dentarias desconocida, por lo que buscamos identificar y cuantificar células inflamatorias presentes en granulomas apicales de pacientes sanos y portadores del VIH (CDC II). Seleccionamos seis pacientes (5 hombres y 1 mujer) CDC II que tuvieran piezas dentarias con indicación de extracción y que, ya sea a la radiografía o al momento de hacer la extracción, se observara lesión apical. Estas las comparamos con 10 casos diagnosticados como granulomas apicales en el Instituto de Referencia de Patología Oral de la Facultad de Odontología de la Universidad de Chile y utilizando técnicas histológicas convencionales, evaluamos la presencia de PMNN, linfocitos, plasmocitos, macrófagos, fibroblastos, células en espuma, células no determinadas, áreas con y sin infiltrado inflamatorio y áreas con islotes epiteliales. Encontramos que los linfocitos fueron la población celular más numerosa en ambos grupos de pacientes, VIH+ (CDC II) y sanos, así como una mayor dificultad en la identificación celular en el grupo VIH+. El análisis estadístico de los recuentos celulares de los granulomas apicales en ambos tipos de pacientes no reveló diferencias estadísticamente significativas en las poblaciones celulares y áreas observadas. En el granuloma apical estarían participando reacciones de hipersensibilidad retardada, las que podrían estar alteradas en presencia de la infección por VIH, virus que podría ocasionar o condicionar alguna alteración morfológica en el infiltrado inflamatorio de las lesiones apicales