Avaliação dos efeitos modulatórios da hematopoese no envelhecimento: Papel das células tronco mesenquimais medulares / Evaluation of the modulatory effects of hematopoiesis during aging: Role of bone marrow mesenchymal stem cells

O envelhecimento é um processo fisiológico que traz consigo uma série de alterações no organismo que se estendem até o nível molecular. Diante disto, este é um processo complexo que afeta diversos tecidos, sendo um deles o hematopoético, local onde, através de interações da Célula Tronco Hematopoética (CTH) com o ambiente ao seu redor, incluindo a Célula Tronco Mesenquimal (CTM), ocorre a hematopoese. Embora já sejam descritas na literatura algumas alterações na medula óssea consequentes do envelhecimento, os mecanismos por trás de tais mudanças permanecem elusivas, principalmente no âmbito das interações celulares ocorrentes na medula óssea. Portanto, este trabalho buscou investigar como o envelhecimento afeta a regulação hematopoética no contexto de sua relação com as CTM medulares. Para esta pesquisa, foram utilizados camundongos machos isogênicos da linhagem C57BL/6, dividindoos em grupos conforme sua idade: jovens (3 ­ 5 meses) e idosos (18 ­ 19 meses). Foi realizada a caracterização do modelo através de aspectos físicos como consumo proteico, variação de peso, entre outros, seguido de avaliação bioquímica e hematológica. Adicionalmente, foram coletadas células medulares e, posteriormente, realizado o isolamento das CTMs. Para estudar a relação destas células com a hematopoese, foram realizados ensaios in vitro utilizando a linhagem celular leucêmica C1498 (TIB-49™, ATCC®) mantidas em contato com o sobrenadante das CTMs isoladas. Quanto aos parâmetros bioquímicos, os animais idosos apresentaram menores níveis de albumina, aspartato alanina transferase (ALT) e de triglicerídeos quando comparados aos animais jovens. Contrariamente, os animais idosos apresentaram um maior nível de colesterol. Na avaliação hematológica, foi constatado pelo hemograma que os animais idosos apresentaram valores comparáveis aos animais jovens, todavia, o mielograma mostrou menor celularidade geral, seguido de menor número de células da linhagem eritroide e maior número de precursores granulocíticos. Através da imunofenotipagem, foi revelado um maior número de CTHs e de precursores grânulosmonocíticos na medula de animais idosos quando comparado aos jovens, e uma menor frequência de progenitores linfoides. Na imunofenotipagem de sangue periférico de animais idosos houve uma redução no número de linfócitos B e de eritrócitos, e aumento na população de células natural killers. Na imunofenotipagem de CTMs, o marcador CD73 apresentou menor expressão nos animais idosos. Avaliando o secretoma destas células estromais, foram encontrados no sobrenadante de CTMs de animais idosos aumentos significativos nas concentrações de CXCL12 e SCF e redução de IL-11. No âmbito molecular, as CTMs de animais idosos apresentaram aumento na expressão de Akt1, Nos e Ppar-γ, e redução na expressão de Csf3 e Cdh2. Adicionalmente, quando comparado a ação das CTMs de animais idosos em relação as CTMs de animais jovens, observou-se que CTMs de animais idosos foram capazes de aumentar a expressão de Sox2, Pou5f1 e Nanog e diminuir a expressão de Cdkn1a de células da linhagem C1498. O sobrenadante de CTMs de animais idosos também resultou na maior proliferação e migração de células da linhagem C1498. Portanto, levando em consideração a importância das CTMs sobre a regulação do sistema hematopoético, pode-se concluir que, no envelhecimento, as CTMs criam um ambiente propício para a proliferação celular no qual a manutenção da pluripotência é estimulada, o que pode acarretar em uma desregulação do sítio hematopoético quando habitado por células malignas

Aging is a physiological process in which occurs a series of alterations in an organism that extend to a molecular level. It is a complex process that affects various tissues, one of them being the bone marrow, wherethrough the interactions of the hematopoietic stem cell (CTH) with its surrounding environment, including with the mesenchymal stem cell (CTM), hematopoiesis takes place. Although some aging-associated alterations in the bone marrow can be found described in the literature, the mechanisms behind said changes remain elusive, especially when regarding the cellular interactions present inside the bone marrow. Therefore, this research aimed to investigate how aging affects the regulation of hematopoiesis in the context of its interactions with bone marrow-derived CTMs. For this investigation, male isogenic C57BL/6 mice were used as animal models. These were separated in two groups according to their age: young (3 ­ 5 months) and aged (18 ­ 19 months). The animal models were characterized by their physical properties such as protein intake and weight variation, followed by biochemical and hematological evaluation. Bone marrow cells were obtained and identified through immunophenotyping, thus isolating different cell populations, including the CTMs. To study the relationship between these cells and hematopoiesis, in vitro assays were conducted utilizing the leukemic cell lineage C1498 (TIB-49™, ATCC®) maintained in contact with the supernatant of isolated CTMs. By their biochemical profile, aged mice showed lower levels of albumin, alanine-aspartate transferase (ALT) and triglycerides compared to the young group. In contrast, aged mice had a higher cholesterol level. Hematological evaluation by total blood count showed similar results between the two groups, however, the myelogram revealed that the aged animals had lower cellularity, with less frequent cells from the erythroid lineage, with an increase in granulocytic precursors. Through immunophenotyping, it was also revealed that aged mice have higher numbers of hematopoietic stem cells, while also being noted a reduced population of lymphoid progenitors. An increase in the granulomonocytic progenitors was also found. Immunophenotyping peripheral blood cells of aged mice revealed reduced numbers of B lymphocytes and erythrocytes, and an increased natural killer cell population. Additionally, the cell surface marker CD73 was found to be less expressed in aged mice CTMs. The secretome of these stromal cells obtained from aged mice showed higher levels of CXCL12 and SCF, and lower levels of IL-11when compared to the young counterparts. At a molecular level, CTMs obtained from aged mice expressed more Akt1, Nos and Ppar-γ, while the expression of Csf3 and Cdh2 was reduced. Additionally, when comparing the effects of aged mice CTMs with young mice CTMs, it was observed that the first expressed were capable of increasing the expression of Sox2, Pou5f1 and Nanog, while decreasing Cdkn1a expression in the C1498 cell lineage. The supernatant obtained from aged mice also favored the proliferation and cell migration of the C1498 cell line. Thus, considering the importance that CTMs have over the hematopoietic system, we can conclude that, in aging, CTMs create a special environment which favors cell proliferation and maintenance of pluripotency, which can result in a dysregulation of the hematopoietic tissue when malignant cells are present

Laserterapia transcutânea para efeitos adversos hematopoiéticos de quimioterápicos antineoplásicos: Ensaio clínico randomizado / Terapia con láser transcutáneo para los efectos adversos hematopoyéticos de la quimioterapia antineoplásica: Ensayo clínico aleatorizado / Transcutaneous laser therapy for hematopoietic adverse effects of antineoplastic chemotherapeutics: Randomized clinical trial

Objetivo. Avaliar a eficácia dos protocolos de aplicação transcutânea do Intravenous Laser Irradiation of Blood 30' e 60', sobre os efeitos adversos no tecido hematopoiético por agentes quimioterápicos antineoplásicos endovenosos em adultos. Método. Ensaio clínico, randomizado e unicego, realizado em serviço ambulatorial de quimioterapia de hospital público do estado de São Paulo realizado de abril de 2018 a março de 2019. A amostra constituiu de 55 pacientes com tumores sólidos, a partir do segundo ciclo de tratamento com fármacos endovenosos citotóxicos para o tecido hematopoiético. O comprimento de onda utilizado foi de 660 nm, por via transcutânea, sob artéria radial. Resultado. Comparado ao tipo de hemocomponente, obtivemos, respectivamente aos protocolos do Intravenous Laser Irradiation of Blood 30' e 60': hemoglobina (85%; 86%), plaquetas (100%; 100%) e neutrófilos (95%; 92%). Conclusão. Considerou-se ambos os protocolos eficazes e, portanto, sugere-se implantá-los em unidades de quimioterapia(AU)

Objective: To evaluate the effectiveness of the protocols for transcutaneous application of the Intravenous Laser Irradiation of Blood 30' and 60', on the adverse effects on hematopoietic tissue by intravenous antineoplastic chemotherapeutic agents in adults. Method. Clinical, randomized and single-blind trial, carried out in an outpatient chemotherapy service of a public hospital in the state of São Paulo, carried out from April 2018 to March 2019. The sample consisted of 55 patients with solid tumors, from the second cycle of treatment with cytotoxic intravenous drugs for hematopoietic tissue. The wavelength used was 660 nm, transcutaneously, under the radial artery. Result. Compared to the type of blood component, we obtained, respectively from the Intravenous Laser Irradiation of Blood 30' and 60' protocols: hemoglobin (85%; 86%), platelets (100%; 100%) and neutrophils (95%; 92%). Conclusion. Both protocols were considered effective and, therefore, it is suggested to implant them in chemotherapy units.(AU)

Objetivo. Evaluar la efectividad de los protocolos de aplicación transcutánea de Irradiación Láser Intravenosa de Sangre 30' y 60', sobre los efectos adversos sobre el tejido hematopoyético por agentes quimioterápicos antineoplásicos intravenosos en adultos. Método. Ensayo clínico, aleatorizado y simple ciego, realizado en un servicio de quimioterapia ambulatoria de un hospital público del estado de São Paulo, realizado de abril de 2018 a marzo de 2019. La muestra estuvo compuesta por 55 pacientes con tumores sólidos, del segundo ciclo. del tratamiento con fármacos intravenosos citotóxicos para el tejido hematopoyético. La longitud de onda utilizada fue de 660 nm, por vía transcutánea, bajo la arteria radial. Resultado. En comparación con el tipo de componente sanguíneo, obtuvimos, respectivamente, de los protocolos de Irradiación Intravenosa con Láser de Sangre 30' y 60': hemoglobina (85%; 86%), plaquetas (100%; 100%) y neutrófilos (95%; 92%). %). Conclusión. Ambos os protocolos se consideraron efectivos, por lo que se sugiere implantarlos en las unidades de quimioterapia(AU)

Caracterización epidemiológica de las neoplasias del tejido hematopoyético y linfoide atendidos en el Instituto Oncológico Nacional-SOLCA Guayaquil / Epidemiological characterization of Hematopoietic and Lymphoid Neoplasms treated at the National Oncological Institute-SOLCA Guayaquil

Introducción: Dentro de las cinco primeras neoplasias en el mundo están las Leucemias, la misma que ha venido incrementándose en las últimas décadas. El objetivo del presente estudio fue determi-nar las características epidemiológicas de las Neoplasias del tejido Hematopoyético y linfoide en pacientes atendidos en el Instituto Oncológico Nacional-SOLCA Guayaquil durante los años 2015 al 2019. Metodología: Se efectuó un estudio de diseño observacional, descriptivo poblacional; donde el universo y la muestra fueron 891 casos nuevos de neoplasias del Tejido Hematopoyético y Linfoide, recolectándose los datos en una matriz, que fueron tomados del programa informático del registro de tumores. Resultados: se diagnosticaron Leucemias Linfoideas (69.58%) y Leucemias Mieloides (30.30%); más en hombres (53.33%) que mujeres (44.67%); siendo los casos en menores de 19 años en Gua-yaquil del 57.33% y en Otras ciudades con el 64.36%; en Guayaquil el grupo de edad de 5 ­ 9 años fue más frecuente con 20.57% seguido de los menores de 5 años con 19.02%; mientras que en Otras ciudades fueran los menores de 5 años con 20.72% seguido del grupo etario de 5 ­ 9 años con 18.33%; entre otros grupos. Su mayor frecuencia en Guayaquil fueron en parroquias Tarqui, Ximena y en Otras ciudades en Región Costa (81.47%). Conclusión: Dentro de las neoplasias del Tejido Hematopoyético y Linfoide la más común fue las Leucemias Linfoideas en la población menor de 19 años con énfasis en los niños menores de 5 años mostrando una presencia importante en los años de estudio en Guayaquil y en la región Costa del Ecuador.

Introduction: Leukemias are among the first five neoplasms in the world, the same one that has been increasing in recent decades. The aim of this study was to determine the epidemiological char-acteristics of Hematopoietic and Lymphoid Neoplasms in patients treated at the National Oncological Institute-SOLCA Guayaquil during the years 2015 to 2019. Methodology: An observational, descriptive population study was carried out; Where the universe and the sample were 891 new cases of Hematopoietic and Lymphoid neoplasms, the data was col-lected in a matrix, taken from the tumor registry computer program. Results: Lymphoid Leukemias were diagnosed in 69.58% and Myeloid Leukemias with 30.30%; more in men (53.33%) than women (44.67%); being the cases in minors of 19 years in Guayaquil 57.33% and in Other cities it had 64.36%; in Guayaquil the age group of 5 - 9 years was more frequent with 20.57% followed by those under 5 years with 19.02%; while in Other cities under 5 years old with 20.72% followed by the age group of 5 - 9 years old with 18.33%; among other groups. Its highest frequency in Guayaquil was in Tarqui and Ximena parishes and in other cities it was in the Coastal Region with 81.47%. Conclusion: Among the Hematopoietic and Lymphoid neoplasms the most common was Lym-phoid Leukemias in the population under 19 years of age, with emphasis on children under 5 years of age, showing an important presence in the years of study in Guayaquil and in the Ecuadorian Coastal region.

Síndrome de Hiper IgD: espectros clínicos, achados genéticos e condutas terapêuticas / Hyper-IgD syndrome: clinical spectrum, genetic findings, and therapeutic approaches

A deficiência de mevalonato quinase (MVK; MIM #142680; ORPHA #343) é uma doença genética, espectral, rara, associadas a mutações ao longo do gene MVK causando distúrbios na síntese do colesterol, que culminam em: inflamação sistêmica com febre, adenopatia, sintomas abdominais e outros achados clínicos. Enquanto no polo leve da doença os achados mais comuns são febres recorrentes com linfadenopatia, no polo mais grave adiciona-se o acometimento do sistema nervoso central (meningites assépticas, vasculites e atraso do desenvolvimento neuropsicomotor) e do sistema hematopoiético (síndrome de ativação macrofágica). Apesar de inúmeras terapêuticas, os bloqueadores da interleucina-1 ainda são os únicos medicamentos capazes de controlar a doença e de impedir a evolução para amiloidose. Os estudos atuais visam tentar novos tratamentos, como o transplante de células-tronco hematopoiéticas, ou mesmo a terapia gênica.

Mevalonate kinase deficiency (MVK; MIM #142680; ORPHA #343) is a rare spectral genetic disorder linked to mutations along the MVK gene leading to impaired cholesterol synthesis, clinically observed as systemic inflammation with fever, adenopathy, abdominal manifestations, and other clinical findings. While on mild forms recurrent fever with lymphadenopathy is commonly observed, severe forms add to that neurological (aseptic meningitis, vasculitis, and neuropsychomotor developmental delay) and hematopoietic involvement (macrophage activation syndrome). Despite of several therapeutic approaches, blocking interleukin-1 is the only effective method to control the disease and prevent the development of systemic amyloidosis. Ongoing studies aim to test new treatments, such as hematopoietic stem cell transplantation and gene therapy.

Material didáctico para la enseñanza aprendizaje del sistema hemolinfopoyético en la carrera Bioanálisis Clínico / Teaching aid for the teaching-learning of the hemolinfopoietic system in the Clinical Bioanalysis degree

RESUMEN Fundamento: la educación superior efectúa transformaciones profundas que se convierten en un factor clave para la puesta en marcha de procesos necesarios en el enfrentamiento a los desafíos del mundo existente. Objetivo: elaborar un material didáctico para la enseñanza aprendizaje del sistema hemolinfopoyético, con énfasis en el extendido de sangre periférica en la carrera de Bioanálisis Clínico. Métodos: se realizó un estudio descriptivo transversal en el período septiembre 2017-febrero 2018, en la Facultad Tecnológica "Octavio de la Concepción y de la Pedraja" de la Universidad de Ciencias Médicas "Carlos J. Finlay", de Camagüey. Se emplearon métodos teóricos: analítico-sintético e inductivo-deductivo; empíricos: observación a clases, la encuesta en forma de entrevista a docentes y la prueba exploratoria a estudiantes; y matemático-estadísticos para el cálculo de las frecuencias absolutas y el porcentaje. El producto fue valorado por criterios de especialistas. Resultados: se evidenciaron insuficiencias en el proceso enseñanza aprendizaje por los profesores para trabajar de manera integrada los procesos cognitivos sobre extendidos de sangre periférica como una vía para analizar las células hematopoyéticas; entre los estudiantes primaron el uso incorrecto de técnicas y procederes en los análisis y en la elaboración de los informes a partir de la observación e interpretación de extendidos de sangre periférica como componente esencial de la Hematología. Conclusiones: se elaboró un material didáctico que fue valorado por criterios de especialistas en las categorías de muy adecuado y adecuado en todos los indicadores propuestos, por lo que se consideró factible de ser aplicado.

ABSTRACT Background: Higher education carries out profound transformations that become a key factor for the implementation of necessary processes in the face of world challenges. Objective: to develop a teaching aid for the teaching - learning of the hemolinfopoietic system, with emphasis on the spread of peripheral blood in the Clinical Bioanalysis degree. Methods: a descriptive cross-sectional study was carried out from September 2017-to February 2018, at the "Octavio de la Concepción y de la Pedraja" Technological Faculty of the "Carlos J. Finlay" Camagüey University of Medical Sciences. Theoretical methods were used: analytical-synthetic and inductive-deductive; Empirical ones: observation to classes, the survey in the form of teacher interviews and the exploratory test to students; and mathematical-statistics for the calculation of the absolute frequencies and the percentage. The product was valued by criteria of specialists. Results: inadequacies in the teaching-learning process were evidenced by teachers to work in a comprehensive way on the cognitive processes on peripheral blood as a way to analyze hematopoietic cells; Among the students, the incorrect use of techniques and procedures prevailed in the analysis and in the preparation of the reports based on the observation and interpretation of peripheral blood spreads as an essential component of Hematology. Conclusions: a teaching aid was developed that was assessed by criteria of specialists in the categories of very adequate and adequate in all the proposed indicators, so it was considered feasible to be applied.

Nuevas estrategias en trasplante de precursores hematopoyético / New strategies in hematopoietic precursor transplantation

El trasplante hematopoyético es una estrategia terapéutica que permite posibilidad de curación en diversas enfermedades benignas y malignas. El autotrasplante tiene demostrada utilidad en mieloma y linfomas permitiendo recuperar la hematopoyesis luego de quimioterapias de alta intensidad. El alotrasplante permite reemplazar hematopoyesis defectuosa y/o introducir un potente efecto inmunológico llamado "efecto de injerto contra tumor". En los últimos años, se han desarrollado nuevos fármacos que permiten optimizar la recolección de progenitores autólogos y se han modificado los esquemas de trasplante, permitiendo un uso más amplio. El haplo trasplante alogénico ha favorecido que los enfermos tengan mejores posibilidades de encontrar donantes. En esta revisión, se analizan brevemente estas nuevas modalidades adoptadas en nuestro programa de trasplante hematopoyético.(AU)

Hematopoietic transplantation offers cure or control in several benign or malignant diseases. Autologous transplantation has proven to be useful in myeloma and lymphoma patients allowing hematopoiesis recovery after high-intensity chemotherapies. Allogeneic transplantation can replace defective hematopoiesis and / or introduce graft-versus-tumor effect. In recent years, new strategies have been developed to optimize autologous progenitor's collection and haploidentical modalities have allowed a wider use of allotransplants. In this brief review these new modalities adopted in our program are analyzed.(AU)

Importancia del estudio de la médula ósea en el Hospital Carlos Andrade Marín en el año 2013 / Importance of the bone marrow study of the year 2013 in Carlos Andrade Marin Hospital

Objetivo: el estudio de la biopsia de la médula ósea tiene como objetivo el diagnosticar los problemas que existen con los diversos tipos de células sanguíneas, con el fin de realizar un tratamiento y obtener un pronóstico adecuados; en el tiempo este exámen ha ido ampliándose y junto con el aspirado ayudan a la evaluación de patologías como anemia, trombocitopenia, linfomas, leucemias, tumores metastáticos, síndromes mieloproliferativos entre otros. Materiales y métodos: estudio retrospectivo, descriptivo y con diseño transversal. Se analizaron 450 muestras obtenidas desde enero a diciembre del 2013 para evaluar las distintas patologías que se presentan frecuentemente en nuestro hospital, de acuerdo a edad y sexo. Resultados: de los 450 casos receptados, analizados y reportados en el 2013; 236 muestras fueron negativas; 27 fueron muestras insuficientes e inadecuadas y 187 fueron positivas para lesiones benignas, borderline y malignas. La mayor parte de lesiones fueron más en hombres y en edades comprendidas entre 40 y 69 años. Las lesiones benignas más frecuentes fue la Hipoplasia y dentro de las lesiones malignas la infiltración linfocitica de inmunofenotipo B, la misma que se corroboró con estudio de Inmunohistoquimica. Conclusión: se determina que de los estudios realizados, la patología que con mayor frecuencia afecta a los pacientes del Hospital Carlos Andrade Marín, sometidos a biopsia de médula ósea en el año 2013 es la Infiltración de estirpe linfoide con biopsy has become important for the treatment and prognosis of diseases. Inmunofenotipo B. De ahí que el estudio de biopsia de médula ósea se ha tornado importante para el tratamiento y pronóstico de las diferentes patologías hematológicas y metastásicas.

Objective: the study of bone marrow biopsy aims to diagnose the problems that exist with the different types of blood cells, with the aim of treatment and obtain an acertive prognosis, with time this test has become popular and together with the aspirate helps with the evaluation of diseases such as anemia, trombocitopenia, leucemias, lymphomas among others, myeloproliferative syndromes, and metastatic tumors. Materials and methods: a retrospective descriptive study with cross-sectional design was used to analyze 450 samples obtained from january to december of 2013 in order to evaluate the different pathologies that arise frequently in our hospital, profiled by age and sex. Results: of the 450 analyzed cases and reported in the 2013; 236 samples were negative; 27 were insufficient and inadequate samples, 187 were positive for benign lesions, borderline or malignant. Most of the lesions were in men aged between 40 and 69 years; Hypoplasia was amongst the most benign lesions and among the malignant lesions was the Immune B Lymphocytic Infiltration, which was corroborated with inmunohistochemical staining. Conclusion: this study determines that the disease which most often affects patients of the Hospital Carlos Andrade Marín undergoing bone marrow biopsy in the year 2013 was lineage with Immune B lymphoid infiltration. Hence the study of bone marrow biopsy has become important for the treatment and prognosis of diseases.

Obesity and inflammation and the effect on the hematopoietic system

Bone marrow is organized in specialized microenvironments known as 'marrow niches'. These are important for the maintenance of stem cells and their hematopoietic progenitors whose homeostasis also depends on other cell types present in the tissue. Extrinsic factors, such as infection and inflammatory states, may affect this system by causing cytokine dysregulation (imbalance in cytokine production) and changes in cell proliferation and self-renewal rates, and may also induce changes in the metabolism and cell cycle. Known to relate to chronic inflammation, obesity is responsible for systemic changes that are best studied in the cardiovascular system. Little is known regarding the changes in the hematopoietic system induced by the inflammatory state carried by obesity or the cell and molecular mechanisms involved. The understanding of the biological behavior of hematopoietic stem cells under obesity-induced chronic inflammation could help elucidate the pathophysiological mechanisms involved in other inflammatory processes, such as neoplastic diseases and bone marrow failure syndromes.

Recuento absoluto de linfocitos como factor predictivo en el trasplante hematopoyético / Absolute lymphocyte count as a predictor in hematopoietic transplantation

La recuperación temprana de linfocitos es un factor pronóstico que está relacionado con una mayor supervivencia libre de eventos y supervivencia global en pacientes trasplantados. Se realizó una revisión bibliográfica con el objetivo de determinar el valor pronóstico del recuento absoluto de linfocitos en pacientes con hemopatías malignas, tratados con trasplante. Los pacientes con trasplantes autólogos alcanzan un recuento absoluto de linfocitos el día + 15 (RAL15) e 500 x mm³, más temprano que los alogénicos. El RAL15 cuando se utiliza sangre periférica es mayor que cuando se emplea la médula ósea. Los factores pronósticos asociados a una peor supervivencia global fueron la sepsis, el RAL15 < 500x mm³ y la recaída. Varios estudios muestran una mejor supervivencia global y supervivencia libre de eventos a los cinco años, en los pacientes con RAL15 e 500 x mm³. El RAL15 e 500 x mm³ es una herramienta simple y útil para predecir un mejor resultado en pacientes sometidos a trasplante hematopoyético

Early recovery of lymphocytes is a prognostic factor that is related to a higher event-free survival and overall survival after haematopoietic stem cell transplantation. A literature review was conducted in order to determine the prognostic value of absolute lymphocyte count in patients with hematological malignancies after transplantation. Autologous transplant patients reach an absolute lymphocyte count on day + 15 (RAL15) e 500 x mm³, earlier than allogeneic. The RAL15 when peripheral blood is used is greater than when using the bone marrow. Prognostic factors associated with worse overall survival were sepsis, RAL 15 <500x mm³ and relapse. Several studies show a better overall survival and event-free survival at five years in patients with e 500 x RAL15 mm³. The RAL15 e 500 x mm³ is a simple and useful tool to predict a better outcome in patients undergoing hematopoietic transplantation

Anemias sideroblásticas y puenteado basófilo: Indicador biológico por exposición ocupacional al plomo y sus derivados / Sideroblastic anemia and basophilic bridged: Biological indicator of occupational exposure to lead and its derivatives

En el presente estudio se evaluaron 34 individuos de ambos géneros (n = 15 mujeres y n = 19 hombres) con edades promedios de 37,35 ± 10,37. De los cuales 09 trabajadores de talleres mecánicos y 25 de imprentas gráficas con exposición laboral entre 8 a 10 horas/día. Bajo su consentimiento se les tomo muestra de sangre del antebrazo derecho para evaluar hematológica y morfológicamente glóbulos rojos (punteado basófilo), glóbulos blancos (segmentados neutrofilos), plaquetas y determinar por espectroscopia de absorción atómica con atomización elec trotérmica niveles séricos de plomo. Los resultados analíticos obtenidos para niveles de plomo globales expresados en μgL-1 de 36,03 ± 23,02 evidenciaron correlación directa y positiva con los parámetros bioquímicos evaluados. Ma yo res concentraciones de plomo en sangre coincidieron con pun teados basófilos toscos y alteraciones cualitativas morfológicas tales como hipocromía moderada en glóbulos rojos, granulaciones tóxicas e hipersegmentación en segmentados neutrofilos. No se observaron diferencias estadísticamente significativas con un p = 0,002 entre los grupos expuestos y tiempo de exposición por jornada laboral, más si entre los géneros con un p = 0,087, siendo más evidente el impacto de la exposición ocupacional en hombres, asumiendo mayor masa corporal y por ende mayor densidad ósea por donde este metal tóxico tiene un 95% de afinidad, además de contar el género masculino con mayor producción hematopoyética (La cantidad considerada normal fluctúa entre 4.500.000 (en la mujer) y 5.000.000 (en el hombre) por milímetro cúbico (o microlitro) de sangre). Los resultados obtenidos constituyen una herramienta útil para un pre-diagnóstico a exposición o intoxicación por plomo cuando por infraestructura no se cuente en laboratorios bioanalíticos con un equipo de espectroscopia de ab sorción atómica con atomización electrotérmica.

This study assessed 34 individuals of both genre (n = 15 women and n = 19 men) aged averages of 37.35 ± 10.37. Of whom 09 workers of garages and 25 printing graphs with occupational exposure between 8 to 10 hours per day. Under their consent took them right forearm blood sample to evaluate haematological and morphologically (stippling Basophilic) red blood cells, white blood cells (segmented neutrophils), pla te lets and by Atomic Spectrometry atomization absorption spectroscopy to determine serum levels of lead. The analytical re sults for overall lead levels ex pressed in μgL-1 36.03 ± 23.02 demonstrate positive and direct correlation with the biochemical parameters evaluated. High concentrations of lead in blood coincided with various crude basophiles and qualitative morphological alterations such as hypochromia moderate red globules, toxic granulation’s and hypersegmentation in segmented neutrophils. There were no statistically significant differences with p = 0.002 among exposed groups and exposure time by working day, more if genre with a p = 0.087, being most evi dent impact of occupational exposure in men, assuming greater mass body and therefore greater bone density where this toxic metal has a 95% of affinity’s well as the masculine gender with greater production hematopoietic (considered normal amount fluctuates between 4.500.000 (in women) and 5.000.000 (in humans) per cubic millimeter (microliter) of blood). The results constitute a useful tool for an prediag nostic to exposure or poisoning by lead when infrastructure don’t count in laboratories bioanalytic’s with a team of atomic absorption spectroscopy with spectrometry atomization.

Metilfenidato e agentes hematopoiéticos são úteis na fadiga relacionada ao câncer / Methylphenidate and haematopoietic agents are useful in cancer-related fatigue

Em pacientes que sentem fadiga relacionada ao câncer, o metilfenidato pode ser muito útil. A eritropoetina é efetiva na melhora da fadiga associada à anemia induzida pela quimio¬terapia. A paroxetina e os esteroides progestacionais não são melhores do que o placebo.

Morfo-fisiologia dos tecidos hematopoiéticos em Lithobates catesbeianus (Anura, Anphibia) / Morpho-physiology of hematopoietic tissue in Lithobates catesbeianus (Anura, Anphibia)

O estudo de diferentes modelos e microambientes hematopoiéticos permite compreender melhor o processo de manutenção do fenótipo tronco. Os lissanfíbios representam um modelo atraente, por representarem o primeiro animal a ocupar o ambiente terrestre, e provavelmente os primeiros a possuir medula óssea. Considerando que o conhecimento sobre os sítios de hematopoiese em lissanfíbios adultos ainda não está bem estabelecido, este estudo teve como objetivo verificar os principais sítios de hematopoiese no anuro Lithobates catesbeianus adulto. Para tal, foram utilizadas colorações especiais e convencionais em microscopia de campo claro. Anticorpos contra G-CSFR, Epo-R, c-kit, CD34, antígeno de célula-tronco, macrófagos, fator de Von Willebrand e laminina foram também utilizados em microscopia confocal a laser. A atividade hematopoiética foi detectada na medula óssea do fêmur, das vértebras e das falanges dos dedos das patas e no rim. Nenhuma atividade hematopoiética foi identificada no baço nem no fígado. Células imaturas e em mitose foram observadas na circulação sanguínea, indicando a diferenciação de algumas linhagens também ocorre neste compartimento. Células CD34 positivas foram visualizadas na medula óssea e no rim. Osteoblastos e outras células da medula óssea mostraram positividade para c-kit. Células-tronco na medula óssea foram identificadas pelo antígeno de células-tronco (Fall-3). Células G-CSF positivas ocorriam em grupos na medula óssea, no parênquima renal e na circulação sangüínea. Células positivas ao receptor de eritropoetina foram identificadas em associação com os sinusóides e com o endósteo na medula óssea, assim como próximas aos túbulos renais. Este trabalho demonstrou que o principal sítio de hematopoiese é a medula óssea, sendo também o rim um local importante de produção de células sangüíneas, apresentando também a seqüência de diferenciação de algumas linhagens hematopoiéticas, e células imaturas.

Polimorfismo do gene tp53 no códon 72 em pacientes com suspeita de LMC / Codon 72 polymorphism of the TP53 gene in patients suspected to have CML

A leucemia mielóide crônica (LMC) é uma doença proliferativa do sistema hematopoiético, caracterizada pela expansão clonal de uma célula-tronco primitiva e pluripotente denominada stem cell. Este tipo de leucemia está associado, em 90 por cento dos casos, à translocação t(9;22)(q34;q11). Essa alteração cromossômica estrutural codifica para uma proteína quimérica BCR-ABL, que confere às células leucêmicas uma alta resistência à morte, independente do agente indutor desse processo. A proteína p53 é uma reguladora transcricional induzida por danos no DNA, fato que resulta na parada do ciclo celular com conseqüente ativação de mecanismos de reparo ou mesmo na indução à apoptose. As mutações no gene TP53 são as alterações genéticas mais comuns em tumores malignos humanos. O presente estudo teve como objetivo genotipar e determinar a freqüência alélica do polimorfismo do TP53 no códon 72 (arginina - Arg e prolina - Pro), em pacientes com suspeita de LMC, pela Reação em Cadeia da Polimerase. Desta forma, os resultados indicaram que 73,4 por cento (23/30) dos pacientes apresentaram homozigose para arginina (Arg/Arg) e 26,6 por cento (7/30) heterozigose (Arg/Pro). Não foi encontrado nenhum paciente homozigoto para prolina (Pro/Pro). Os resultados obtidos sugerem que o polimorfismo do gene TP53 no códon 72 não é um fator de risco importante para a iniciação, promoção e progressão da LMC.

Chronic myeloid leukemia (CML) is a proliferative disorder of the hematopoietic system characterized by clonal expansion of a primitive and pluripotent stem cell. In this type of leukemia, up to 90 percent of all cases is associated to a specific chromosomal translocation, t(9;22)(q34;q11). The genomic alteration results in a chimeric protein, BCR-ABL, that confers a high resistance leukemia cells to death, independent of the induction mechanism of this process. Protein p53 is a transcriptional factor expressed after DNA damage which ceases cell cycle progression and consequently activates repair mechanisms or even induces apoptosis. Mutations of TP53 are the most common genetic alterations in malignant tumors in humans. The main objective of the current study was to genotype and determine the allelic frequency of the TP53 polymorphism at codon 72 in patients suspected of having CML using a PCR-based assay. The frequencies of the genotypes among the cases were: 73.4 percent (23/30) and 26 percent (7/30) for homozygous arginine (Arg-72) and heterozygous proline/arginine (Pro/Arg-72), respectively. Homozygous proline (Pro-72) was not observed in the current study. The results obtained suggest that the TP53 polymorphism at codon 72 is not an important risk factor for the initiation, promotion, nor progression of CML.

Células madre hematopoyéticas, generalidades y vías implicadas en sus mecanismos de auto-renovación / Hematopoietic stem cells, overview and pathways implied on their self-renewal mechanisms

El tejido sanguíneo está compuesto en un 45% aproximadamente por células y derivados de éstas, con una vida media que oscila entre 120 días para los eritrocitos y alrededor de 3 años para ciertos tipos de linfocitos. Esta pérdida es compensada gracias a la actividad del sistema hematopoyético y a la presencia de una población de células primitivas inmaduras conocidas como Células Madre Hematopoyéticas (CMHs) encargadas del proceso de hematopoyesis, activo desde el inicio de la vida fetal y que genera cerca de 2 x 1011 eritrocitos y 1010 células blancas por día (1). Las CMHs poseen la capacidad de auto-renovarse y diferenciarse a múltiples linajes, se ubican en un nicho particular y tienen marcadores de superficie que las identifican, como por ejemplo el antígeno CD34. Recientemente se ha podido avanzar en el entendimiento de la biología básica de los procesos celulares que rigen los mecanismos de auto-renovación, diferenciación y proliferación de las CMHs, y de la participación de diferentes vías de señalización (Hedgehog, Notch y Wnt) en estos procesos, los cuales controlan el comportamiento in vivo e in vitro de las CMHs. Todo esto es de vital importancia para la implementación y generación de alternativas terapéuticas con CMHs, para diversas enfermedades entre ellas las hematológicas, como por ejemplo las leucemias.

Blood tissue is composed approximately in 45% by cells and its derivatives, with a life span of around 120 days for erythrocytes and 3 years for certain type of lymphocytes. This lost is compensated with the hematopoietic system activity and the presence of an immature primitive cell population known as Hematopoietic Stem Cells (HSCs) which perform the hematopoiesis, a process that is active from the beginning of the fetal life and produces near to 2 x 1011 eritrocytes and 1010 white blood cells per day (1). Hematopoietic Stem Cells are capable of both self-renewal and differentiation into multiple lineages, are located in a particular niche and are identified by their own cell surface markers, as the CD34 antigen. Recently it has been possible to advance in the understanding of self-renewal, differentiation and proliferation processes and in the involvement of the signaling pathways Hedgehog, Notch and Wnt. Studying the influence of these mechanisms on in vivo and in vitro behavior and the basic biology of HSCs, has given valuable tools for the generation of alternative therapies for hematologic disorders as leukemias.

Dor óssea e sua relação na apresentação inicial da leucemia linfóide aguda / Bone pain and its relation to the initial presentation of acute lymphoblastic leukemia

A leucemia linfóide aguda é uma neoplasia maligna do sistema hematopoiético caracterizada pela alteração do crescimento e da proliferação das células linfóides na medula óssea, com conseqüente acúmulo de células jovens indiferenciadas, denominadas blastos. É a neoplasia maligna mais freqüente (70 por cento) entre as crianças menores de 15 anos de idade. As manifestações clínicas mais comuns incluem febre, equimose e palidez, porém a dor óssea pode ser encontrada como sintoma inicial em 25 por cento dos casos. Assim, com o objetivo de determinar a freqüência da dor óssea e sua relação com dados clínico-laboratoriais em crianças portadoras de leucemia linfóide aguda atendidas na unidade de Oncologia Pediátrica do Hospital de Base de São José do Rio Preto-SP, foram avaliadas cinqüenta crianças portadoras de leucemia linfóide aguda com idade até 15 anos, no período de dezembro de 1991 a dezembro de 2001. Entre as crianças estudadas, 18 apresentaram dor óssea como queixa principal e, destas, 14 apresentaram tempo de evolução (período entre primeiro sintoma e o diagnóstico) superior a 15 dias (p=0.018). Além disso, 13 crianças com dor óssea e tempo de evolução superior a 15 dias apresentaram níveis de hemoglobina inferiores a 8g/dl (p=0,008).

Acute lymphoblastic leukemia is a hematopoietic malignancy characterized by alterations in the growth and proliferation of lymphoblastic cells in bone marrow, with consequent accumulation of immature white blood cells called blasts. It is the most common malignant neoplasm seen in under fifteen-year-olds. Acute lymphoblastic leukemia frequently presents with fever, ecchymosis and paleness, however bone pain is the initial symptom found in 25 percent of the cases. The objective of this work is to determine the frequency of bone pain and its relation with clinical and laboratory data in children with acute lymphoblastic leukemia admitted in the Pediatric Oncology Unit of Hospital de Base de São José do Rio Preto, São Paulo, Brazil. Fifty children with acute lympho­blastic leukemia, aged under fifteen years old, in the period from December 1991 to December 2001 were assessed. Among the children studied, 18 presented bone pain as the main complain and of these, 14 presented a time of evolution (period between first symptom and diagnosis) of over 15 days (p=0.01). Moreover, 13 children with bone pain and time of evolution greater than 15 days had hemoglobinometry below 8 g/dL (p=0.008).

Dipeptidyl peptidase IV (CD26) activity in the hematopoietic system: differences between the membrane-anchored and the released enzyme activity

Dipeptidyl peptidase IV (DPP-IV; CD26) (EC 3.4.14.5) is a membrane-anchored ectoenzyme with N-terminal exopeptidase activity that preferentially cleaves X-Pro-dipeptides. It can also be spontaneously released to act in the extracellular environment or associated with the extracellular matrix. Many hematopoietic cytokines and chemokines contain DPP-IV-susceptible N-terminal sequences. We monitored DPP-IV expression and activity in murine bone marrow and liver stroma cells which sustain hematopoiesis, myeloid precursors, skin fibroblasts, and myoblasts. RT-PCR analysis showed that all these cells produced mRNA for DPP-IV. Partially purified protein reacted with a commercial antibody to CD26. The K M values for Gly-Pro-p-nitroanilide ranged from 0.43 to 0.98 mM for the membrane-associated enzyme of connective tissue stromas, and from 6.76 to 8.86 mM for the enzyme released from the membrane, corresponding to a ten-fold difference, but only a two-fold difference in K M was found in myoblasts. K M of the released soluble enzyme decreased in the presence of glycosaminoglycans, nonsulfated polysaccharide polymers (0.8-10 æg/ml) or simple sugars (320-350 æg/ml). Purified membrane lipid rafts contained nearly 3/4 of the total cell enzyme activity, whose K M was three-fold decreased as compared to the total cell membrane pool, indicating that, in the hematopoietic environment, DPP-IV activity is essentially located in the lipid rafts. This is compatible with membrane-associated events and direct cell-cell interactions, whilst the long-range activity depending upon soluble enzyme is less probable in view of the low affinity of this form

Aspectos morfológicos, citoquímicos ultra-estruturais e citoquímicos ultra-estruturais de células do sistema hematopoético de Caiman crocodilus yacare(Daudin, 1802) (Reptilia, Crocodilia) / Morphological, cytochemical, ultrastructural and cytochemical-ultrastructural aspects of cells of hematopoetic system in Caiman crocodilus yacare (Daudin, 1802)(Reptilia, Crocodilia

Com o objetivo de estudar o sistema hematopoético do réptil da espécie Caiman crocodilus yacare, foram utilizados cinco exemplares hígidos e jovens (aproximadamente um ano de idade), provenientes de São Paulo e de Mato Grosso do Sul. Amostras de sangue periférico foram colhidas em EDTA, através da punção do seio venoso cervical, e da medula óssea pela punção aspirativa do osso femural. Estudo histológico da medula óssea femural foi realizado em um animal, através da coloração em HE, Giemsa e pela técnica de Gomori para fibras reticulínicas. Os esfregaços de sangue e de medula foram processados para coloração panótica (Leishman ou Rosenfeld) e reações citoquímicas para fosfatase alcalina, peroxidase e azul de toluidina. O material de medula óssea foi também processado para estudo ultra-estrutural em Microscopia Eletrônica de Transmissão, pelo método clássico e com o emprego de reações citoquímicas (fosfatase alcalina e peroxidase). A presença de sítios hematopoéticos ativos foi demonstrada histologicamente nos cortes transversais do fêmur, principalmente no seu terço distal. As células leucocitárias imaturas foram localizadas no espaço extravascular da região subendosteal, enquanto as da linhagem eritrocítica foram encontradas dentro dos vasos capilares sinusóides medulares, na região central do osso. As células precursoras desta linhagem estavam aderidas à parede do vaso, e suas sucessoras distribuídas em direção ao centro do sinusóide à medida que amadureciam. Nos esfregaços de medula, as células imaturas da linhagem eritrocítica mostraram-se arredondadas e com núcleo predominantemente frouxo, em contraposição às células maduras, de núcleo condensado e forma em geral elíptica. Foram vistos pró-eritroblastos, eritroblastos basofilicos, policromáticos e ortocromáticos, e finalmente eritrócitos. As células precursoras da linhagem granulocítica foram grandes e diminuíam progressivamente com a diferenciação. Os grânulos específicos surgiram a partir da fase de mielócito inicial, aumentando com a maturação celular. O núcleo foi excêntrico e de cromatina frouxa nas fases mais imaturas, tomando-se esférico com o avançar da diferenciação no caso do eosimófilo e do heterófilo, porém ocupando posição central no basófllo. Os heterófilos, contendo grânulos de coloração em geral salmão, foram positivos para a fosfatase alcalina e para a mieloperoxidase a partir da...(au)

The hematopoietic stroma

All blood cells are derived from a small common pool of totipotent cells, called hematopoietic stem cells. The process is strictly regulated by the hematopoietic microenvironment, which includes stromal cells, extracellular matrix molecules and soluble regulatory factors. Several experimental in vitro assays have been developed for the study of hematopoietic differentiation, and have provided valuable information on the stroma, which includes, among other cell types, macrophages, fibroblasts, adipocytes, and endothelial cells. The composition, ontogeny, and function in physiological as well as pathological conditions of stroma are discussed

Relación dosis efecto subcrítico del plomo en el sístema hematopoyético

Objetivo: describir la dosis-efecto subcrítico del plomo en el sístema hematopoyético, relacionando las concentraciones de cinc protoporfirina eritrocitaria /CPP-E) y plomo sanguíneo (plomo.sp), mediante la descripción de un modelo matemático teórico-empirico.Diseñó: censo de la poblción de trabajadores expuestos a plomo en razón de su actividad laboral. Marco de referencia: nueve empresas fabricantes de baterías de Santafé de Bogotá. Participantes: un total de 236 hombres mayores de 17 años de edad, con un tiempo mínimo de exposición laboral a plomo de cuatro meses. Mediciones principales. Cuantificación simultánea de plomo y CPP-E en sangre venosa total. Formulación del modelo matemático: se utilizó la estrategia regular para definir un modelo conceptual teórico-empiríco, seguida la formulación de la ecuación para describir el modelo y por último su representación matemática. Para describir la relación dosis efecto subcrítico, se empleó la función exponencial dada por la ecuación Y= ß1 (ß2x), donde x<1. Resultados: la estimación de la curva de crecimiento exponencial para la realción dosis-efecto subclínico del plomo sobre el sistema hematopoyetico fue dada por la ecuación CPP-E=78.6 (1.01 plomo.sp). El modelo matemático ajustó los datos obtenidos con un coeficiente de determinación de 0.66. El incremento progresivo exponencial en la concentración de CPP-E se observó a niveles de plomo sanguineo de 3.9 a 172 ug/dL. Conclusiones: las mediciones de los niveles de plomo.sp y de CPP-E detectan diferentes aspectos de la excesiva exposición a plomo. los niveles de plomo sanguineo reflejan la absorción de plomo a partir del ambiente, mientras los niveles de CPP-E indican efectos tóxicos subcríticos del plomo sobre el sistema hematopoyetico. el incremento de la CPP-E indican efectos tóxicos subcríticos del plomo sobre el sistema último paso en la síntesis del hem en los normoblastos de la médula ósea con acumulación exponencial del sustrato