RESUMO
Abstract This study aimed to identify members of the Sarcocystidae family in naturally infected wild birds at a rescue center in the state of Minas Gerais, southeastern Brazil. The heart and brain of 44 wild birds were evaluated by bioassay in mice to detect T. gondii, and extracted DNA was used for nested PCR of the 18S ribosomal DNA gene to detect members of the Sarcocystidae family. The positive samples were sequenced, assembled, edited and compared with sequences deposited in GenBank. Toxoplasma gondii was isolated from six (13.6%) out of 44 birds. Toxoplasma gondii DNA was identified in 10/44 (22.7%) of the birds. The amplified sequences exhibited 100% similarity with the DNA of the ME49 strain of T. gondii. Sarcocystis DNA (99% similarity) was identified in 5/44 (11.4%) of the birds. T. gondii and Sarcocystis spp. are common in wild birds in Minas Gerais, Brazil.
Resumo O objetivo deste estudo foi identificar membros da família Sarcocystidae em aves silvestres de vida livre naturalmente infectadas e resgatadas no estado de Minas Gerais, Brasil. Coração e cérebro de 44 aves silvestres foram avaliados por bioensaio em camundongos para detecção de T. gondii e extração de DNA para Nested-PCR do gene 18S do DNA ribossomal de membros da família Sarcocystidae. As amostras positivas foram sequenciadas, analisadas, editadas e comparadas com sequências depositadas no GenBank. Toxoplasma gondii foi isolado de seis (13,6%) das 44 aves. DNA de T. gondii foi identificado em 10/44 (22,7%) das 44 aves. As sequências amplificadas exibiram 100% de similaridade com o DNA da cepa ME49 de T. gondii. DNA de Sarcocystis (99% de similaridade) foi identificado em 5/44 (11,4%) das 44 aves. T. gondii e Sarcocystis spp. são encontrados, comumente, em aves silvestres no estado de Minas Gerais, Brasil.
Assuntos
Animais , Coelhos , Doenças das Aves/parasitologia , Doenças das Aves/epidemiologia , Coccidiose/epidemiologia , Sarcocystidae/genética , Toxoplasma/genética , Bioensaio , Aves , Brasil , RNA Ribossômico 18S/genética , Toxoplasmose Animal/epidemiologia , Reação em Cadeia da Polimerase , DNA de Protozoário , Sarcocystis/genéticaRESUMO
Abstract The little owl Athene noctua (Scopoli, 1769) is a small raptor that is widely distributed from northern to southern Portugal and several other countries in Europe, Asia and North Africa, and which has been introduced into New Zealand. In the current study, 18 fecal samples were collected from little owls kept at the Lisbon Center for Wild Animal Recovery, which is located in Monsanto Forest Park, Lisbon, Portugal. Twelve (67%) of them were found to be passing an undescribed species of Avispora in their feces. The oocysts of Avispora mochogalegoi n. sp. were ellipsoidal with a bilayered wall and measured 38.9 × 32.9 µm, with a shape index of 1.18. No micropyle, oocyst residuum or polar granule was present. The sporocysts were subspherical, measuring 21.1 × 20.1 µm. Stieda, sub-Stieda and para-Stieda bodies were absent. The sporocyst residuum was composed of a compact subspherical mass of granules. This is the fourth species of Avispora reported in Strigiformes.
Resumo O mocho-galego Athene noctua (Scopoli, 1769) é uma pequena ave de rapina amplamente distribuída de norte a sul de Portugal, em vários países da Europa, Ásia e norte da África, e foi introduzida na Nova Zelândia. No presente trabalho, 18 amostras de fezes foram coletadas de mochos-galegos mantidos no Centro de Recuperação de Animais Silvestres de Lisboa, localizado no Parque Florestal de Monsanto, Lisboa, Portugal. Doze (67%) deles eliminaram uma espécie não descrita de Avispora em suas fezes. Os oocistos de Avispora mochogalegoi n. sp. foram elipsóides, com parede de dupla camada, medindo 38,9 × 32,9 µm, e índice morfométrico de 1,18. A micrópila, resíduo do oocisto e grânulo polar foram ausentes. Os esporocistos foram subesféricos, medindo 21,1 × 20,1 µm. Corpos de Stieda, substieda e parastieda foram ausentes. O resíduo do esporocisto foi composto de uma massa subesférica compacta de grânulos. Esta é a quarta espécie Avispora relatada em Strigiformes.
Assuntos
Animais , Doenças das Aves/parasitologia , Coccidiose/veterinária , Estrigiformes , Sarcocystidae/classificação , Portugal , Fezes/parasitologiaRESUMO
Resumen Introducción: La infección por Cystoisospora belli es una de las causas más frecuentes de diarrea acuosa en pacientes con infección por VIH y ocasiona altas tasas de morbilidad y mortalidad. Métodos: Se realizó un estudio retrospectivo en pacientes infectados con VIH y diarrea por C. belli. Características clínicas y de laboratorio fueron recolectadas mediante el análisis de historias clínicas. Resultados: Se identificaron siete casos. Cuatro presentaron diarrea recurrente a pesar de recibir profilaxis secundaria con cotrimoxazol y tratamiento específico, dos de los cuales tuvieron buena respuesta viral e inmunológica al tratamiento anti-retroviral de gran actividad (TARGA) al momento del diagnóstico y tratamiento antiparasitario. Mientras que, los tres restantes no recibían profilaxis, tampoco TARGA (dos de ellos), pero respondieron bien al tratamiento. Conclusiones: C. belli es causa importante de diarrea en pacientes VIH con TARGA y profilaxis, pudiendo tener distinta evolución clínica. Sugerimos que la infección persistente puede ser debido al fallo farmacológico por causas intrínsecas o extrínsecas al parásito, o a defectos en la restauración del sistema inmune intestinal, o ambos.
Introduction: Cystoisospora belli infection is one of the most important causes of watery diarrhea in patients with HIV and causes high rates of morbidity and mortality. Methods: A retrospective study was conducted in patients with HIV and diarrhea by C. belli. Clinical and laboratory characteristics were collected by analyzing clinical records. Results: Four had recurrent diarrhea despite receiving secondary prophylaxis with cotrimoxazole and specific treatment, two of which had a good viral and immunological response to highly active antiretroviral therapy (HAART) at the time of diagnosis and antiparasitic treatment. While the remaining three did not receive prophylaxis, neither did HAART (two of them), but they responded well to treatment. Conclusions: C. belli is an important cause of diarrhea in HIV patients on HAART and prophylaxis, being able to have different clinical evolution. We suggest that persistent infection may be due to drug failure by intrinsic or extrinsic to the parasite causes, or to defects in restoration of the intestinal immune system, or both.
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Adulto Jovem , Coccidiose/microbiologia , Infecções Oportunistas Relacionadas com a AIDS/microbiologia , Sarcocystidae/microbiologia , Diarreia/microbiologia , Peru , Infecções por HIV/tratamento farmacológico , Combinação Trimetoprima e Sulfametoxazol/uso terapêutico , Estudos Retrospectivos , Infecções Oportunistas Relacionadas com a AIDS/complicações , Terapia Antirretroviral de Alta Atividade , Diarreia/etiologiaRESUMO
Abstract Phylogenies within Toxoplasmatinae have been widely investigated with different molecular markers. Here, we studied molecular phylogenies of the Toxoplasmatinae subfamily based on apicoplast and mitochondrial genes. Partial sequences of apicoplast genes coding for caseinolytic protease (clpC) and beta subunit of RNA polymerase (rpoB), and mitochondrial gene coding for cytochrome B (cytB) were analyzed. Laboratory-adapted strains of the closely related parasites Sarcocystis falcatula and Sarcocystis neurona were investigated, along with Neospora caninum, Neospora hughesi, Toxoplasma gondii (strains RH, CTG and PTG), Besnoitia akodoni, Hammondia hammondiand two genetically divergent lineages of Hammondia heydorni. The molecular analysis based on organellar genes did not clearly differentiate between N. caninum and N. hughesi, but the two lineages of H. heydorni were confirmed. Slight differences between the strains of S. falcatula and S. neurona were encountered in all markers. In conclusion, congruent phylogenies were inferred from the three different genes and they might be used for screening undescribed sarcocystid parasites in order to ascertain their phylogenetic relationships with organisms of the family Sarcocystidae. The evolutionary studies based on organelar genes confirm that the genusHammondia is paraphyletic. The primers used for amplification of clpC and rpoB were able to amplify genetic sequences of organisms of the genus Sarcocystisand organisms of the subfamily Toxoplasmatinae as well.
Resumo A filogenia da subfamília Toxoplasmatinae tem sido amplamente investigada com diversos marcadores moleculares. Neste estudo, a filogenia molecular da subfamília Toxoplasmatinae foi analisada através de genes de apicoplasto e mitocondriais. Foram analisadas sequências parciais de genes de apicoplasto codificadores da protease caseinolítica (clpC), e da subunidade beta da RNA polimerase (rpoB) e de gene mitocondrial codificador de citocromo B (cytB). Foram investigadas cepas adaptadas em laboratório de Sarcocystis neurona eSarcocystis falcatula, parasitos estreitamente relacionados, além de Neospora caninum, Neospora hughesi, Toxoplasma gondii (cepas RH, CTG e PTG),Besnoitia akodoni, Hammondia hammondi e duas linhagens geneticamente divergentes de Hammondia heydorni. A análise molecular, baseada em genes de organelas, não diferenciou claramenteN. caninum de N. hughesi, porém foi possível confirmar as duas linhagens de H. heydorni. Foram encontradas pequenas diferenças entre as cepas adaptadas em laboratório deS. falcatula e S. neurona em todos os marcadores moleculares avaliados. Concluindo, filogenias congruentes foram reconstruídas com os três diferentes genes que podem ser úteis em triagem de parasitos sarcocistídeos não identificados, para identificar sua relação com organismos da família Sarcocystidae. Os estudos evolutivos com genes organelares confirmam que o gênero Hammondia é parafilético. Osprimers utilizados para amplificação declpC e rpoB foram capazes de amplificar sequências genéticas de organismos do gênero Sarcocystis e da subfamília Toxoplasmatinae.
Assuntos
Animais , Filogenia , Sarcocystidae/genética , Apicoplastos/genética , Toxoplasma/genética , Análise de Sequência de DNA/métodos , Neospora/genéticaRESUMO
La Cystoisospora belli, antes denominada Isospora belli, es el agente etiológico de la cystoisosporiasis, una infección oportunista que afecta a pacientes inmunodeprimidos, caracterizada por diarrea crónica y pérdida ponderal. La incidencia de diarrea crónica por este agente, en pacientes infectados por el VIH, ha disminuido considerablemente. Ello gracias al advenimiento de la terapia antirretroviral de gran actividad (TARGA), con la que se ha logrado mejorar la respuesta inmunológica del paciente y disminuir su carga viral. Se presentan seis casos de cystoisosporiasis recurrente y refractaria en pacientes con infección por VIH, en quienes se diagnosticó cystoisosporiasis pese a que previamente se encontraban recibiendo profilaxis con trimetropin/sulfametoxazol (TMP/SMX). Cinco de ellos evolucionaron de manera tórpida y fallecieron, a pesar de una buena respuesta al TARGA (adecuado incremento de CD4 y disminución de la carga viral hasta rangos indetectables), y de tratamiento con TMP/SMX por vía oral y otros medicamentos de segunda línea.
The Cystoisospora belli, before denominated as Isospora belli, is the etiologic agent of cystoisosoporiasis, an opportunistic infection affecting immunocompromised patients, characterized by chronic diarrhea and weight loss. The incidence of chronic diarrhea for this agent, in HIV patients, has decreased considerably. This thanks to the advent of highly active antiretroviral therapy (HAART), which has improved the patient’s immune response and decrease viral load. We present six cases of cystoisosoporiasis recurrent and refractory to treatment in HIV patients, who was being treated with with trimethoprim / sulfamethoxazole (TMP / SMX) orally as a prophylaxis. Five of these patients passed away due to the infection, despite of the fact that they had a good response to HAART (adequate increase in CD4 and viral load undetectable) and they had been treated with second line drugs.
