Review on trypanosomiasis and their prevalence in some country on the Red Sea / Avaliação da tripanossomíase e sua prevalência em alguns países do mar Vermelho

Trypanosomiasis is a protozoan infection affecting both human and animals in almost all parts of the world. It can affect a very large range of domestic and wild hosts including camelids, equines, cattle, buffaloes, sheep, goats, pigs, dogs and other carnivores, deer, gazelles and elephants. This review paper was designed to address the effect of this economically important disease in countries on the Red Sea, especially in Egypt, Sudan, Somalia, and Saudi Arabia during the period 2010 to 2020. The prevalence of trypanosomiasis is different between these countries due to different types of diagnostic methods (Giemsa-stained blood smears, Hematocrit centrifugation, Serological test, and molecular analysis PCR) used and differential distribution of vector (Tse tse) flies. In current review, retrospective studies of published literature on distribution and prevalence of Trypanosoma evansi infection in the Red Sea Countries was conducted [Google Scholar and PubMed were used to retrieve the published literature from 2000-2020. A total of 77 published articles met the eligibility criteria and were reviewed. A total of 16 reports have been reported on the prevalence and distribution of Trypnosoma evansi infection in the Red Sea Countries have been from 2010-2020]. According to the published literature, we can say that trypanosomiasis in camels are more prevalent in Sudan than in other countries, followed by 17% and 51.78% in both clinical and non-clinical cases. Hence, the reliable diagnostic tests should be used for rapid treatment or control of the disease as if not treated appropriately in early-stage, can lead to death of the camels.

A tripanossomíase é uma infecção por protozoário que afeta humanos e animais em quase todas as partes do mundo. Pode afetar grande variedade de hospedeiros domésticos e selvagens, incluindo camelídeos, equinos, gado, búfalos, ovelhas, cabras, porcos, cães e outros carnívoros, veados, gazelas e elefantes. Este artigo de revisão foi elaborado para abordar o efeito dessa doença economicamente importante em países do mar Vermelho, especialmente Egito, Sudão, Somália e Arábia Saudita, durante o período de 2010 a 2020. A prevalência de tripanossomíase é diferente entre esses países devido a tipos distintos de métodos diagnósticos (esfregaços de sangue corados com Giemsa, centrifugação de hematócrito, teste sorológico e PCR de análise molecular) usados e distribuição diferencial de moscas vetoras (tsé-tsé). Na revisão atual, foram realizados estudos retrospectivos da literatura publicada sobre distribuição e prevalência da infecção por Trypanosoma evansi nos países do mar Vermelho [Google Scholar e PubMed foram usados para recuperar a literatura publicada de 2000 a 2020. Um total de 77 artigos publicados preencheu os critérios de elegibilidade e foi revisado. E há também 16 relatos sobre a prevalência e distribuição da infecção por Trypnosoma evansi nos países do mar Vermelho, de 2010 a 2020]. De acordo com a literatura publicada, podemos afirmar que a tripanossomíase em camelos é mais prevalente no Sudão do que em outros países, seguida por 17% e 51,78% em casos clínicos e não clínicos. Assim, os testes diagnósticos confiáveis devem ser utilizados para o tratamento rápido ou controle da doença, pois, se eles não forem tratados de forma adequada na fase inicial, isso pode levar à morte dos camelos.

New detection of the occurrence of trypanosomiasis in a bovine herd in a rural property in the state of Bahia/BA ­ case report / Nova detecção da ocorrência de tripanossomíase em rebanho bovino em propriedade rural no estado da Bahia/BA ­ relato de caso

This report aims to discuss the occurrence of protozoan infestation in a Girolanda cattle herd in the state of Bahia / BA. Bovine trypanosomiasis is a severe disease that is harmful to cattle, inducing large productive and economic losses. The animals are affected by protozoa of the genus Trypanosoma spp., giving rise to infestations in the vast majority of them in a silent and lasting way. In the Bahian rural property described, 10% of adult cows died and the rest of the animals showed clinical signs of anemia, drop in milk production, low body score, apathy, among others. Among the information obtained through the farm manager, who helped in the diagnosis and in ordering tests for the respective disease were: purchase of cattle from the region of the state of Minas Gerais and dubious management of oxytocin for improvements in milk production (suspected shared needles). Faced with the suspicion and in conjunction with the information obtained, laboratory tests and molecular tests were carried out to confirm the suspicion. After the examinations, it was found that the animals were affected by protozoa of the genus Trypanossoma vivax. The animals were treated with volume replenishers and drugs such as isometamidium chloride in a single dose calculated according to the body weight.

O presente relato tem por objetivo discorrer sobre a ocorrência da infestação protozoária em um rebanho bovino da raça Girolanda no estado da Bahia/BA. A tripanossomíase bovina é uma doença severa e prejudicial aos bovinos, induzindo-os a grandes perdas produtivas e econômicas. Os animais são afetados por protozoários do gênero Trypanosoma spp., dandoorigem a infestações em sua grande maioria de forma silenciosa e duradoura. Na propriedade rural baiana descrita, 10% das vacas adultas morreram e o restante dos animais apresentava sinais clínicos de anemia, queda da produção leiteira, baixo escore corpóreo, apatia, prostração, entre outros. Dentre as informações obtidas através do gerente da fazenda, que auxiliaram no diagnóstico e na requisição de exames para a respectiva doença estavam: compra de bovinos da região do estado de Minas Gerais e manejo duvidoso de ocitocina para melhorias na produção leiteira (suspeita de agulhas compartilhadas). Diante da suspeita e em conjunto com informações obtidas, foram realizados exames laboratoriais e testes moleculares para confirmar a suspeita. Após a realização dos exames, constatou-se que os animais estavam acometidos por protozoários do gênero Trypanossoma vivax. Os animais foram tratados com repositores de volume e fármacos como o cloreto de isometamidium em uma única dose calculada de acordo com o peso corpóreo.

TRYPANOSOMA spp. in captive primates in a brazilian zoo

Captive animals, despite the constant care provided, are susceptible to infections from different sources. We herein report the natural trypanosome infection of 11 (28.2% positive) out of 39 non-human primates from 13 different species, in a Brazilian zoological park. Immunofluorescent antibody test (IFAT) and conventional polymerase chain reaction (cPCR) ruled out Trypanosoma cruzi, the etiological agent of Chagas disease. However, sequencing performed with positive samples employing hsp70 primers revealed similarities from 86% to 88% to diverse trypanosomes, including T. cruzi, Trypanosoma grayi, Trypanosoma lewisi, Trypanosoma rangeli and Trypanosoma vivax. We believe that the low similarity values obtained by sequencing reflect the difficulties in the molecular identification of trypanosomes, which share a large portion of their genetic material; this similarity may also preclude the diagnosis of co-infection by more than one trypanosome species. Thus, our study demonstrates the presence of diverse trypanosomes in primates, which are susceptible to infection by these parasites. Mechanical devices such as windows and bed nets, etc., are required to avoid vector insects in these environments, in addition to preventive quarantining of animals recently introduced into zoos. Therefore, investigation of the parasites in both the animals already residing in the zoo and those being introduced is of paramount importance, although no easy task.

Molecular detection of trypanosomatids in neotropical primates in the state of Mato Grosso, Midwest, Brazil / Detecção molecular de tripanossomatídeos em primatas neotropicais no estado de Mato Grosso, Centro-Oeste, Brasil

Abstract Trypanosomatids are uniflagellate protozoa belonging to the Trypanosomatidae family. The genera Trypanosoma and Leishmania are of paramount importance as they contain species that cause serious diseases, such as Chagas disease and Leishmaniasis, respectively. The objective of the present study was to identify trypanosomatids present in the whole blood of free-living and captive neotropical primates in Mato Grosso State, Midwest Brazil. Between 2017 and 2019, 38 blood samples were collected from seven different neotropical primate species in seven cities in the state. Through molecular techniques, including polymerase chain reaction (PCR) to amplify a fragment of the kinetoplast DNA (kDNA) and 18S ribosomal RNA (18S rRNA) gene, sequencing, and phylogenetic analysis, nine Leishmania spp. [seven L. infantum and two L. (Leishmania) amazonensis] and two Trypanosoma spp. (T. minasense and T. rangeli) were identified. This study contributes to understanding the occurrence and epidemiology of trypanosomatids in Mato Grosso State and the importance of neotropical primates as trypanosome hosts and possible infection sources for other animals and humans. Future identification of other blood pathogens in neotropical primates will assist in disease control and prevention strategies.

Resumo Tripanossomatídeos são protozoários uniflagelados pertencentes à família Trypanosomatidae. Os gêneros Trypanosoma e Leishmania são de suma importância por conterem espécies causadoras de doenças graves, como doença de Chagas e Leishmaniose, respectivamente. O objetivo do presente estudo foi identificar tripanossomatídeos presentes no sangue total de primatas neotropicais de vida livre e cativos no Estado de Mato Grosso, Centro-Oeste do Brasil. Entre 2017 e 2019, foram coletadas 38 amostras de sangue de sete diferentes espécies de primatas neotropicais em sete cidades do Estado. Foram identificados por meio de técnicas moleculares, incluindo reação em cadeia da polimerase (PCR), para amplificar um fragmento do DNA do cinetoplasto (kDNA) e do gene do RNA ribossômico 18S (rRNA 18S), sequenciamento e análise filogenética, nove Leishmania spp. [sete L. infantum e dois L. (Leishmania) amazonensis] e dois Trypanosoma spp. (T. minasense e T. rangeli). Este estudo contribui para o entendimento da ocorrência e epidemiologia dos tripanossomatídeos no Estado de Mato Grosso e a importância dos primatas neotropicais como hospedeiros tripanossômicos e possíveis fontes de infecção para outros animais e humanos. A identificação futura de outros patógenos do sangue em primatas neotropicais ajudará no controle de doenças e em estratégias de prevenção.

Synthetic ligustrazine based cyclohexanone and oxime analogs as Anti-Trypanosoma and Anti-Leishmanial agentes

In the present study a series of 34 synthetic ligustrazine-containing α, ß-Unsaturated carbonyl-based compounds and oximes, recognized as anticancer compounds were assessed against protozoa of the Trypanosoma and Leishmania species. Ligustrazine, chemically known as tetramethylpyrazine (TMP), was selected as the core moiety for the synthesis of α, ß-Unsaturated carbonyl-based compounds and these compounds were selected as precursors for the synthesis of new oximes. Some derivates, including 5f and 6i, showed multiple activities against all tested strains. In particular compounds 5f and 8o are the most potent and they are, therefore, potential candidates for trypanosomiasis and leishmaniasis

Clinical-dermatological, histological abnormalities and prevalence of Trypanosoma caninum and Leishmania infantum in dogs from Midwest region of Brazil / Anormalidades clínico-dermatológicas, histológicas e prevalência de Trypanosoma caninum e Leishmania infantum em cães da região Centro-Oeste do Brasil

Abstract Leishmania infantum is a trypanosomatid that causes parasitic dermatopathy in dogs. Trypanosoma caninum is another trypanosomatid, which infects the skin of dogs, although cutaneous abnormalities are absent. This study aimed to investigate the occurrence of T. caninum infection and its associated cutaneous and histological changes and compare it with the occurrence of L. infantum infection in dogs. The study included 150 dogs, of which T. caninum infection was identified in 3 (2%) and L. infantum infection in 15 (10%) of them, with no association (p>0.05) of these infections with the breed, gender, age, or cutaneous abnormalities. The cutaneous abnormalities were based on 1 (4.8%) and 12 (57.1%) dogs infected by T. caninum and L. infantum, respectively. The dermatohistopathological abnormalities in the dogs infected with T. caninum included mild perivascular lymphohistioplasmacytic infiltrates in the clinically asymptomatic ones, while in those with dermatological abnormalities, acanthosis, epidermal orthokeratotic hyperkeratosis, melanomacrophages, and co-infection with Microsporum sp. and Trichophyton sp. were observed. InL. infantum infected, the histopathological findings included chronic granulomatous inflammatory infiltrates and structures compatible with amastigotes. Despite the low frequency of T. caninum infection, our findings suggest that this trypanosomatid, unlike L. infantum, does not cause any macroscopic skin abnormalities.

Resumo Leishmania infantum é um tripanosomatídeo que causa dermatopatia parasitária em cães. Trypanosoma caninum é outro tripanosomatídeo, que infecta a pele de cães, embora anormalidades cutâneas sejam ausentes. Este estudo teve como objetivo investigar a ocorrência da infecção por T. caninum e suas alterações cutâneas e histológicas associadas e compará-las com a ocorrência da infecção por L. infantum em cães. O estudo incluiu 150 cães, dos quais a infecção por T. caninum foi identificada em 3 (2%) e a infecção por L. infantum em 15 (10%) deles, sem associação (p>0,05) dessas infecções com a raça, sexo, idade ou anormalidades cutâneas. As alterações cutâneas foram observadas em 1 (4,8%) e 12 (57,1%) cães infectados por T. caninum e L. infantum, respectivamente. As anormalidades dermato-histopatológicas nos cães infectados por T. caninum incluíram infiltrados linfo-histioplasmocitários perivasculares leves nos clinicamente assintomáticos, enquanto naqueles com anormalidades dermatológicas, foram observados acantose, hiperqueratose ortoqueratótica epidermal e melanomacrófagos e co-infecção por Microsporum sp. e Trichophyton sp. Nos cães infectados por L. infantum, os achados histopatológicos incluíram infiltrados inflamatórios granulomatosos crônicos e estruturas compatíveis com amastigotas. A despeito da baixa frequência da infecção por T. caninum, nossos achados sugerem que esse tripanosomatídeo, diferentemente de L. infantum, não causa anormalidades macroscópicas na pele.

Seroprevalence of anti-TRYPANOSOMA CRUZI and anti-TOXOPLASMA GONDII antibodies in possible and potential organ donors in the south of Rio Grande do Sul state, Brazil

Serological profiles are important in cases of solid organ donation where serological findings, such as antibodies against Trypanosoma cruzi and toxoplasmosis, may interfere in organ donation by increasing morbidity and mortality. This study aimed to outline seroprevalence of anti-Trypanosoma cruzi and anti-Toxoplasma gondii antibodies in possible and potential organ donors in the south of Rio Grande do Sul (RS) State, Brazil. A cross-sectional quantitative and retrospective epidemiological study was carried out, based on secondary data. Data on serology were extracted from medical records found in the Sistema de Gestão Hospitalar (SIGH), a hospital management system used by a university hospital in the south of RS, Brazil. Sociodemographic variables, such as age, sex and race, as well as clinical variables, such as titration of IgM and IgG anti-T. cruzi and anti­T. gondii antibodies, were analyzed. Medical records were found to be poorly filled in, since 67.6% (506 records) could not be used due to lack of information. Seroprevalence of T. cruzi was 6.8% (5 cases), mostly in white males. Regarding seroprevalence of T. gondii, 76.2% (64 donors) were serologicaly positive, 10.9% of which were IgM positive. This is the first study on anti-T. cruzi and anti-T. gondii antibodies in organ donors in RS, Brazil and should be furthered since there may be consequences regarding organ uptake and donation.

A systematic review of the diagnostic aspects and use of Trypanosoma rangeli as an immunogen for Trypanosoma cruzi infection

Abstract INTRODUCTION: Trypanosoma rangeli is a protozoan that infects several domestic and wild mammals and shows significant distribution in Latin American countries. T. rangeli infection is similar to Chagas disease, both in diagnostic and prophylactic terms. Thus, the objective of this work was to review the diagnostic aspects and use of T. rangeli as an immunogen for Trypanosoma cruzi infection. METHODS: For this elaboration, Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-Analyses (PRISMA) guidelines were adopted with descriptors derived from the Medical Subject Headings (MeSH) platform in the PubMed/MEDLINE and SciELO databases. The inclusion criteria were defined as original articles on "Trypanosoma rangeli" and diagnostic aspects of T. rangeli infection in humans and/or research on the possible vaccines developed using T. rangeli strains for T. cruzi infection. RESULTS: After applying the inclusion and exclusion criteria, 18 articles were procured, of which 4 addressed research on the possible vaccines developed using T. rangeli for T. cruzi infection in vertebrates and the remaining 14 predominantly dealt with the diagnostic aspects of T. rangeli infection in humans. CONCLUSIONS: In this study, we formulated a compilation of the essential literature on this subject, emphasizing the need for more accurate and accessible techniques for the differential diagnosis of infections caused by both protozoa, and underscored several prospects in the search for a vaccine for Chagas disease.

Estandarización y validación de pruebas de elisa tipo indirecto para la determinación de los niveles de anticuerpos IgG e IgE antileishmania, como método complementario para el diagnóstico y seguimiento de la respuesta al tratamiento / Standardization and validation of elisa indirect type tests for the determination of the levels of IgG and IgE antileishmania antibodies, as a complementary method for diagnosis and followup of the response to treatmen

La leishmaniasis cutánea se caracteriza por la inducción de una respuesta inmune celular y humoral, siendo los niveles de anticuerpos IgG e IgE indicadores serológicos del diagnóstico, la progresión y resolución de la enfermedad. En el presente estudio se estandarizaron dos pruebas de ELISA indirecto para determinar los niveles séricos de anticuerpos IgG o IgE contra antígeno soluble de Leishmania braziliensis (ASL). Se trabajó a partir de la cepa de L. braziliensis (MHOM/BR/75/M2903). En el ELISA IgE se hizo un pretratamiento del suero con anticuerpos antiIgG humano y Polietilenglicol (PEG); la dilución óptima de la muestra para ambos ELISA fue 1/21, la dilución del conjugado fue 1/500 para el ELISA IgG y 1/100 para el IgE. Para el ELISA IgG estandarizado se encontró un índice de correlación de Kappa de 1 (p<0,05), frente al ELISA comercial rBiopharm®. Con una sensibilidad del 100%; 100% de especificidad, 100% valor predictivo positivo y 100% valor predictivo negativo. Sin embargo ambos test de ELISA presentaron reacciones cruzadas con anticuerpos anti-Trypanosoma. La validez de los resultados demuestran que los ELISAs estandarizados pueden ser utilizados como herramienta de diagnóstico y seguimiento al tratamiento leishmanicida.

Cutaneous leishmaniasis is characterized by the induction of a cellular and humoral immune responses, at levels of IgG and IgE indicators serological diagnosis, progression and resolution of disease. In this study two indirect ELISA tests were standardized to determine serum levels of IgG or IgE antibodies against soluble Leishmania braziliensis antigen (ASL). We worked from the strain of L. braziliensis (MHOM / BR /75 / M2903). In the IgE ELISA pretreatment serum was done with anti-human IgG and Polyethylene glycol (PEG) antibodies; the optimal dilution of the sample for both ELISA was 1/21, the conjugate dilution was for 1/500 and 1/100 IgG ELISA for IgE. For standardized ELISA IgG index Kappa correlation of 1 (p <0.05) compared to commercial ELISA r-Biopharm® found. With a sensitivity of 100%; 100% specificity, 100% positive predictive value and negative predictive value 100%. However both ELISA test showed cross-reactions anti-trypanosome antibodies. The results demonstrate that both ELISA can be used as diagnostic and monitoring tool. Being necessary to continue studies to validate these procedures and identify other possible cross-reactions.

Survey of trypanosoma (kinetoplastida: trypanosomatidae) infection in Monte Negro Municipality, State of Rondônia, western amazon, with first record of T. evansi in the state

Abstract INTRODUCTION: Trypanosomes can infect humans and animals. This is the first record of the occurrence of Trypanosoma evansi in Rondônia. METHODS: Blood samples were collected from 7 dogs and 22 humans. Furthermore, triatomines and tabanids were collected. RESULTS: It was observed that 42.8% of the dogs tested positive for T. evansi and 14.3% presented mixed infection; 15% of the triatomines tested positive for flagellates identified as T. cruzi TCI (3 specimens), T. cruzi TCI, and T. rangeli (1 specimen), and one with T. cruzi TCV. Two tabanids were infected with T. theileri. CONCLUSIONS: These findings may benefit vector control strategies.

Occurrence of triatomines in an urban residential complex in the municipality of Rio Branco, Acre, South-Western Amazon

Abstract INTRODUCTION: This study describes the occurrence of triatomines, and their positivity for trypanosomatids, in a residential complex in Rio Branco, Acre, Brazil. METHODS: Triatomines were collected through direct capture in a home environment. Positivity analysis for trypanosomatids was performed by PCR assays. RESULTS Collected insects consisted of 31 Rhodnius robustus, 4 Rhodnius montenegrensis, and 1 Panstrongylus geniculatus specimens. All were adults, with no presence of domiciliation, and with an infection rate of 30.6%. CONCLUSIONS Future studies are recommended in other locations of Rio Branco in order to develop a georeference database of the occurrence of triatomines in urban areas.

Genetic diversity and molecular survey of Trypanosoma (Megatrypanum ) theileri in cattle in Brazil's western Amazon region / Diversidade genética e levantamento molecular de Trypanosoma (Megatrypanum) theileri em bovinos na região da Amazônia Ocidental do Brasil

Abstract Trypanosoma (Megatrypanum) theileri is a flagellated protozoan that infects ruminants and it displays high genetic diversity. In this study, we investigated the prevalence rates of this protozoan based on hemoculture and molecular diagnosis. The isolates of T. theileri thus obtained were characterized by molecular markers SSU rDNA and gGAPDH and molecular diagnosis based on Cathepsin L-like gene (PCR-TthCATL). The PCR-TthCATL and hemoculture indicated an overall prevalence rate of 8.13%, and the CATL derived sequence named IB was identified for the first time in cattle in the western Amazon region, as well as IF in Brazil. We also describe a possible new PCR-TthCATL derived sequence in cattle, designated IL.

Resumo Trypanosoma (Megatrypanum) theileri é um protozoário flagelado que infecta ruminantes e apresenta alta diversidade genética. Neste estudo, investigamos as taxas de prevalência deste protozoário com base na hemocultura e no diagnóstico molecular. Os isolados de T . theileri obtidos foram caracterizados pelos marcadores moleculares SSU rDNA e gGAPDH e o diagnóstico molecular foi baseado no gene do tipo Catepsina L (PCR-TthCATL). O PCR-TthCATL e a hemocultura indicaram uma taxa de prevalência total de 8,13% e a sequência derivada do gene Catepsina L denominada IB de T. theileri foi identificada pela primeira vez em bovinos da Amazônia Ocidental, bem como a IF no Brasil. Também descrevemos uma possível nova sequência derivada da PCR-TthCATL em bovinos, designada IL.

Health education in chagas disease control: making an educational video

Several studies have shown that the population has relatively little information regarding Chagas disease (CD) and its vectors; however, this knowledge is relevant because community participation is vital for success in disease control actions. For this reason, and due to the lack of audiovisual material on this subject in the country, this study focused on making an educational documentary on CD and its vectors, which could be available to the population for free. The video preparation was divided into three phases: Pre-production, Production and Post-production. The site chosen for shooting was northwestern Rio Grande do Sul State due to the Triatoma infestans vector persistence in recent decades in that area. A documentary was obtained which addresses relevant CD aspects, such as its history, transmission, major vectors and biology, phases of the disease and, in particular, how to inspect the intra-domiciliary and peri-domiciliary areas in search of triatomine bugs or "kissing bugs". The use of videos as an educational tool helps broadcast information; therefore, this documentary is a public use tool, which aims to promote the control and prophylaxis of CD and its vectors.

Trypanosoma janseni n. sp. (Trypanosomatida: Trypanosomatidae) isolated from Didelphis aurita (Mammalia: Didelphidae) in the Atlantic Rainforest of Rio de Janeiro, Brazil: integrative taxonomy and phylogeography within the Trypanosoma cruzi clade

BACKGROUND Didelphis spp. are a South American marsupial species that are among the most ancient hosts for the Trypanosoma spp. OBJECTIVES We characterise a new species (Trypanosoma janseni n. sp.) isolated from the spleen and liver tissues of Didelphis aurita in the Atlantic Rainforest of Rio de Janeiro, Brazil. METHODS The parasites were isolated and a growth curve was performed in NNN and Schneider's media containing 10% foetal bovine serum. Parasite morphology was evaluated via light microscopy on Giemsa-stained culture smears, as well as scanning and transmission electron microscopy. Molecular taxonomy was based on a partial region (737-bp) of the small subunit (18S) ribosomal RNA gene and 708 bp of the nuclear marker, glycosomal glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (gGAPDH) genes. Maximum likelihood and Bayesian inference methods were used to perform a species coalescent analysis and to generate individual and concatenated gene trees. Divergence times among species that belong to the T. cruzi clade were also inferred. FINDINGS In vitro growth curves demonstrated a very short log phase, achieving a maximum growth rate at day 3 followed by a sharp decline. Only epimastigote forms were observed under light and scanning microscopy. Transmission electron microscopy analysis showed structures typical to Trypanosoma spp., except one structure that presented as single-membraned, usually grouped in stacks of three or four. Phylogeography analyses confirmed the distinct species status of T. janseni n. sp. within the T. cruzi clade. Trypanosoma janseni n. sp. clusters with T. wauwau in a well-supported clade, which is exclusive and monophyletic. The separation of the South American T. wauwau + T. janseni coincides with the separation of the Southern Super Continent. CONCLUSIONS This clade is a sister group of the trypanosomes found in Australian marsupials and its discovery sheds light on the initial diversification process based on what we currently know about the T. cruzi clade.

Bat trypanosomes from Tapajós-Arapiuns Extractive Reserve in Brazilian Amazon / Tripanossomas de morcegos da Reserva Extrativista Tapajós-Arapiuns na Amazônia Brasileira

Abstract Trypanosoma comprises flagellates able to infect several mammalian species and is transmitted by several groups of invertebrates. The order Chiroptera can be infected by the subgenera Herpetosoma, Schizotrypanum, Megatrypanum and Trypanozoon. In this study, we described the diversity of bat trypanosomes and inferred phylogenetic relationships among the trypanosomes from bats caught in Tapajós-Arapiuns Extractive Reserve (Resex) in Pará state. Trypanosomes from bats were isolated by means of hemoculture, and the molecular phylogeny was based on the trypanosome barcode (SSUrDNA V7V8 variable region). A total of 111 bats were caught in the area, belonging to three families (Emballonuridae, Molossidae and Phyllostomidae) and 12 species. The bat trypanosome prevalence, as evaluated through hemoculture, was 9% all positive cultures were cryopreserve (100% of isolation success). Phylogenetic trees grouped nine isolates in T. cruzi marinkellei branch and only one in T. dionisii branch. Studies on bat trypanosome diversity are important for identifying pathogenic species and for generating support for control measures, especially in such areas where humans inhabit the forest with close contact with bat species. In addition, this is the first study in Resex Tapajós-Arapiuns extractive reserve and further studies should be conducted to elucidate the role of these parasites as environmental degradation biomarkers.

Resumo Trypanosoma compreende flagelados capazes de infectar diversas espécies de mamíferos e são transmitidos por diferentes grupos de invertebrados. A ordem Chiroptera pode ser parasitada pelos subgêneros Herpetosoma, Schizotrypanum, Megatrypanum e Trypanozoon. Neste estudo é descrita a diversidade de tripanossomas de morcegos capturados na Reserva Extrativista Tapajós-Arapiuns, no Estado do Pará. Os tripanossomas de morcegos foram isolados através de hemocultura e os estudos filogenéticos baseados na região de barcode de tripanossomas (SSUrDNA V7V8 região variável). Foram capturados 111 morcegos pertencentes a três famílias (Emballonuridae, Molossidae e Phyllostomidae) e 12 espécies. A prevalência dos tripanossomas de morcegos, avaliada por hemocultura, foi de 9% para as culturas positivas e todas foram criopreservadas (100% de eficiência no isolamento). As árvores filogenéticas agruparam nove isolados no ramo de T. cruzi marinkellei e um único isolado de T. dionisii. Estudos sobre a diversidade de tripanossomas de morcegos são importantes para identificar espécies patogênicas e gerar suporte para medidas de controle, principalmente em áreas silvestres com contato entre as populações humanas e de morcegos. Além disso, este foi o primeiro estudo realizado na Resex Tapajós-Arapiuns e novos estudos devem ser conduzidos para elucidar o papel destes parasitas como marcadores de degradação ambiental.

Trypanosoma evansi (Kinetoplastida: Trypanosomatidae) in capybaras ( Hydrochoerus hydrochaeris ): prevalence, effect and sexual selection / Trypanosoma evansi(Kinetoplastida: Trypanosomatidae) en capibaras (Hydrochoerus hydrochaeris):prevalencia, efecto y selección sexual

AbstractParasites play a crucial role in the ecology of animals. They also appear to be important in mechanisms underlying sexual selection processes. In this article we study the prevalence, effect and potential role in sexual selection of the protozoon Trypanosoma evansi in capybaras, Hydrochoerus hydrochaeris. We collected our samples from the annual capybara cull of a ranch in Venezuela, using the volume of the snout scent gland as an indicator of dominance; the residuals of body weight as indicators of condition; and the residuals of the spleen mass as indicators of immune function. Overall prevalence was 30.9 % (N= 97) with no difference between males and females, and no relation between infection with T. evansi and condition. However, we found that infected animals had larger spleens (residuals), indicating an immunological cost of the infection. Furthermore, males with larger snout scent glands (more dominant) were less likely to be infected than males with smaller glands (less dominant), suggesting that by choosing males with a large glands, females may be using the gland as an indicator of health, which is consistent with the "good genes" view of sexual selection. Rev. Biol. Trop. 65 (1): 229-237. Epub 2017 March 01.

ResumenLos parásitos juegan un papel crucial en la ecología de todos los animales. También parecen ser importantes en los mecanismos subyacentes a la selección sexual. En este artículo estudiamos la prevalencia, el efecto y el papel potencial en procesos de selección sexual del protozoario Trypanosoma evansi sobre el capibara (chigüire o carpincho), Hydrochoerus hydrochaeris. Recolectamos las muestras en una finca ganadera en Venezuela donde se lleva a cabo la matanza anual de capibaras para aprovechar su carne. Usamos el volumen de la glándula del hocico (el "morrillo") como indicador de dominancia; los residuales del peso como indicadores de condición física; y los residuales del peso del bazo como indicadores de la función inmunológica. La prevalencia total fue de 30.9 % (N= 97) y no encontramos diferencia entre machos y hembras ni tampoco detectamos correlación entre estado de infección y condición física. Sin embargo, encontramos que los animales infectados tenían el bazo inflamado, lo que indica un costo inmunológico de la infección. Además los machos con morrillos más grandes (más dominantes) tendían a estar menos infectados que los machos con morrillos más pequeños (subordinados), lo cual sugiere que al escoger machos con morrillos grandes, las hembras pueden estar escogiendo machos saludables, lo cual es consistente con la visión "buenos genes" de la selección sexual.

Tripanosomatídeos em morcegos de áreas florestais com diferentes níveis de antropização na Mata Atlântica do Rio de Janeiro / Trypanosomatids in bats from forest areas with different levels of anthropization in the Atlantic Forest of Rio de Janeiro

Tripanosomatídeos (família Trypanosomatidae) são organismos unicelulares distribuídos mundialmente infectando invertebrados e vertebrados e incluem parasitos dos gêneros Trypanosoma e Leishmania, de grande importância em saúde pública. Os morcegos estão entre os hospedeiros mais antigos destes parasitos e constituem o único grupo de mamíferos com capacidade de voo. A grande capacidade de mobilidade, a longevidade, o hábito alimentar bastante eclético na maioria das espécies e a adaptação aos diversos ambientes, inclusive os sinantrópicos, fazem destes animais potenciais reservatórios (e dispersores) de espécies de tripanosomatídeos. O presente trabalho teve como objetivo avaliar as taxas de infecção por tripanosomatídeos em morcegos provenientes de áreas com diferentes níveis de preservação na Mata Atlântica do Rio de Janeiro. Morcegos foram capturados, utilizando redes de neblina, na Reserva Ecológica de Guapiaçu (REGUA), uma área com alto nível de preservação, e na Estação Biológica Fiocruz da Mata Atlântica (EFMA), que possui elevado grau de interferência antrópica. Nos 181 morcegos capturados, foram realizados: (i) exame direto em sangue; (ii) cultura de sangue e fragmentos de pele, baço e fígado; e (iii) diagnóstico molecular frente a infecção por Leishmania sp. utilizando como alvo um fragmento de kDNA destes parasitos.

Nossos resultados mostraram que a REGUA e a EFMA possuem riqueza de espécies de morcegos similar (15 e 14 espécies, respectivamente). As espécies mais comuns em ambas as áreas foram Carollia perspicillata (n=54 e 29), e Artibeus lituratus (n=18 e 16), além de Sturnira lilium, também abundante na REGUA (n=18). Dos 181 morcegos analisados, 24 (13%) foram positivos no hemocultivo (um deles também no exame a fresco), mas nenhuma cultura de outros tecidos foi positiva. O sequenciamento e análise filogenética utilizando o alvo 18S SSU revelou infecção por T. dionisii em 13 indivíduos (54%), sendo dois destes com infecção mista por T. cruzi. Outros 3 morcegos apresentaram infecção simples por T. cruzi e 4 apresentaram sequências similares a outras de tripanosomas de morcegos neotropicais ainda não identificados. Pela primeira vez detectamos a presença de Crithidia mellificae, um parasito monoxeno, infectando um mamífero, o morcego nectarívoro Anoura caudifer. A taxa de infecção por Leishmania em ambas as áreas foi similar (20% e 15%), sendo a infecção diagnosticada predominantemente em pele (14,4%). A fauna de quirópteros e a diversidade dos tripanosomatídeos a eles associados não diferiram significativamente entre as áreas, reforçando a grande capacidade que esses animais têm de adaptar-se aos ambientes com diferentes níveis de antropização. (AU)

Infecção por tripanosomatídeos em morcegos (Mammalia: Chiroptera) capturados em diferentes áreas do Brasil e desenvolvimento de uma PCR Multiplex como ferramenta diagnóstica da infecção por Leishmania spp. em mamíferos silvestres / Trypanosomatid infection in bats (Mammalia: Chiroptera) captured in different areas of Brazil and development of a Multiplex PCR as a diagnostic tool for Leishmania spp. in wild mammals

A capacidade de voo verdadeiro dos morcegos os permite explorar uma diversidade de ambientes com características epidemiológicas distintas. Embora sejam hospedeiros de outros tripanosomatídeos, sua participação no ciclo de transmissão de Leishmania spp. ainda é subestimada. Nesse sentido buscamos identificar a infecção em amostras de baço de morcegos previamente coletadas em seis localidades do Brasil, além de duas expedições realizadas em uma área de transmissão de Leishmaniose (Rebio Guaribas/PB). Entendendo a necessidade de refinar o diagnóstico molecular no sentido de evitar resultados falso-negativos, padronizamos um sistema de PCR Multiplex capaz de detectar simultaneamente a infecção por Leishmania spp. através do kDNA e a viabilidade da amostra por meio da detecção de um fragmento de DNA constitutivo do hospedeiro mamífero (gapdh). Das amostras de baço previamente coletadas 23,2% (32/138) foram positivas para Leishmania spp. As coletas realizadas na Rebio resultaram em 354 morcegos capturados, dos quais 183 foram examinados frente a infecção por tripanosomatídeos. Em quatro animais foi possível o isolamento de três espécies de Trypanosoma, a saber: T. cruzi TcI, T. dionisii, além do primeiro relato de T. marinkelei em Micronycteris minuta. Não foi possível o isolamento de Leishmania spp. entre as culturas de fragmentos de pele, baço ou fígado, entretanto no diagnóstico molecular 37,7% (69/183) foram positivos para o kDNA de Leishmania spp. Sete espécies, do total de 15 analisadas, foram relatadas, pela primeira vez, como hospedeiros de Leishmania spp. no Brasil. No geral, dentre as 101 amostras kDNA positivas, realizamos a PCR direcionada para o marcador HSP70(234) em 64, com amplificação de 76,5% delas (n=49). Destas, 37 foram submetidas ao sequenciamento, porém não obtiveram qualidade suficiente para serem analisadas.

A clonagem gênica foi realizada em 27 amostras, porém não foi possível a identificação do inserto e a caracterização das espécies. O sistema de PCR Multiplex foi desenhado para detectar um fragmento de 212pb do domínio catalítico do gene constitutivo gapdh, dentro das condições previamente estabelecidas para o diagnóstico de 120pb do kDNA de Leishmania spp. As melhores condições de amplificação foram obtidas usando tanto a enzima TaqDNA HiFidelity quanto o pré-mix de PCR por beads (Ge Healthcare®) sob a seguinte ciclagem: 95°C por 1 min, seguido de 30 ciclos de 95°C por 30 segundos, 61°C por 30 segundos e 72°C por 30 segundos e extensão final a 72°C for 1 min. O teste foi capaz de detectar até 0,1ng de DNA de Leishmania em 100ng de DNA de mamífero. A técnica se mostrou eficaz quando testadas em amostras de 106 mamíferos silvestres, utilizando tecidos de pele, baço e fígado, de mais de 20 espécies de mamíferos silvestres de quatro ordens: Chiroptera, Didelhimorphia, Lagomorpha e Rodentia. A reprodutibilidade da técnica permite que este teste possa ser incorporado a rotina do diagnóstico molecular de Leishmania spp. em mamíferos silvestres. A diversidade de morcegos naturalmente infectados e o seu encontro em todas as localidades analisadas, demonstra que esses animais são hospedeiros de espécie(s) de Leishmania em diferentes regiões do país, incluindo áreas endêmicas da parasitose e que o seu papel como reservatórios silvestres ainda necessita ser melhor definido. O monitoramento contínuo destes animais em expedições que busquem não somente o diagnóstico da infecção por Leishmania sp, mas que avancem no sucesso da caracterização em nível específico, é fundamental para o conhecimento das espécies envolvidas em cada localidade, em especial devido à complexidade e dinamicidade da transmissão destes parasitos na natureza. (AU)

Infections of Hypostomus spp. by Trypanosoma spp. and leeches: a study of hematology and record of these hirudineans as potential vectors of these hemoflagellates / Infecções de Hypostomus spp. por Trypanosoma spp. e Sanguessugas: um estudo hematológico e registro desses hirudíneos como potenciais vetores desses hemoflagelados

Abstract Among Kinetoplastida, the Trypanosoma is the genus with the highest occurrence infecting populations of marine fish and freshwater in the world, with high levels of prevalence, causing influences fish health and consequent economic losses, mainly for fish populations in situation stress. This study investigated infections of Hypostomus spp. by Trypanosoma spp. and leeches, as well as blood parameters of this host in the network of tributaries of the Tapajós River in the state of Pará, in the eastern Amazon region in Brazil. Of the 47 hosts examined, 89.4% were parasitized by Trypanosoma spp. and 55.4% also had leeches attached around the mouth. The intensity of Trypanosoma spp. increased with the size of the host, but the body conditions were not influenced by the parasitism. The number of red blood cells, and hemoglobin, mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC), mean corpuscular hemoglobin (MCH), total number of leukocytes and thrombocytes showed variations and negative correlation with the intensity of Trypanosoma spp. in the blood of the hosts. The results suggest that the leeches were vectors of Trypanosoma spp. in Hypostomus spp.

Resumo Dentre os Kinetoplastida, Trypanosoma é o gênero com maior ocorrência, infectando populações de peixes marinhos e de água doce em todo o mundo. Apresenta elevados níveis de prevalência, ocasiona impactos na saúde dos peixes e consequente perdas econômicas, principalmente para populações de peixes em situação de estresse. Este estudo investigou a infecção por Trypanosoma spp. e sanguessugas em Hypostomus spp. e parâmetros sanguíneos desse hospedeiro do sistema de tributários do Rio Tapajós, no Estado do Pará, Amazônia Oriental, Brasil. De 47 hospedeiros examinados, 89,4% estavam parasitados por Trypanosoma spp., e 55,4% tinham também sanguessugas na região da boca. A intensidade de Trypanosoma spp. aumentou com o tamanho dos hospedeiros, mas as condições corporais não foram influenciadas pelo parasitismo. O número de eritrócitos, hematócrito, hemoglobina, VCM, HCM, CHCM, número de leucócitos e trombócitos totais apresentaram variações e correlação negativa com a intensidade de Trypanosoma spp. no sangue dos hospedeiros. Os resultados sugerem que sanguessugas foram os vetores de Trypanosoma spp. in Hypostomus spp.

Trypanosomatids (Protozoa: Kinetoplastida) in three species of Armored Catfish from Mogi-Guaçu river, Pirassununga, São Paulo, Brazil / Tripanossomatídeos (Protozoa: Kinetoplastida) em três espécies de cascudos do rio Mogi-Guaçu, Pirassununga, São Paulo, Brasil

Abstract Trypanosome infections have been reported in several species of fish, in majority of cases described on the basis of morphological characteristics. Trypanosomes in fish are heteroxenous and transmitted by hirudineans. This study aims to evaluate the prevalence and density of infections by Trypanosoma sp. in blood from three species of catfish, Hypostomus regani, H. strigaticeps, H. albopunctatus, from the Mogi Guaçu River, Pirassununga, São Paulo, Brazil. Further, this study intends to characterize the Trypanosoma specimens found in the blood of these fish by morphological and molecular techniques. The trypanosomes overall prevalence observed was 47.6% with a general average density of 0.75 parasites/µl of blood. Hypostomus regani and Hypostomus strigaticeps showed a significant difference in prevalence. The average densities of parasites were not significantly different among the three fish species. Similar findings were observed for the monthly variations in densities. The parasites found in the three species of catfish studied showed similar morphological characteristics. The morphological data and the statistical analyses used in this study didn’t show the formation of groups. The analyses provided evidence of the presence of pleomorphisms in the trypanosomes found in the three studied fish.

Resumo Infecções por tripanossomas foram descritas em diversas espécies de peixes, sendo a maioria das descrições baseada nas características morfológicas. Tripanossomas de peixes são heteroxenos e transmitidos por hirudíneos. Este estudo tem como objetivo a avaliação da prevalência e densidade da infecção por Trypanosoma sp. no sangue de três espécies de cascudos, Hypostomus regani, H.strigaticeps, H.albopunctatus, do Rio Mogi-Guaçu, Pirassununga, São Paulo, Brasil. Além disso, pretende-se a caracterização das espécies de Trypanosoma encontradas no sangue desses peixes, por meio da utilização de técnicas morfólogicas e moleculares. A prevalência total de tripanossomas foi de 47,6%, e a densidade média foi de 0,75 parasitas/ µl de sangue. Hypostomus regani e Hypostomus strigaticeps apresentaram diferenças significativas em prevalência. As médias das densidades dos parasitas não apresentaram diferenças significativas entre as três espécies de peixes estudadas. O mesmo foi observado com a variação mensal das densidades. Os parasitas encontrados nas três espécies de cascudo possuíam características morfológicas semelhantes. As análises morfológicas e estatísticas obtidas neste estudo não mostraram a formação de grupos. As análises evidenciaram a presença de pleomorfismo dos tripanossomas encontrados nas três espécies de peixes estudados.