Sepsis due to Yersinia enterocolitica in an aborted equine fetus: case report / Sepse por Yersinia enterocolitica em um feto equino abortado: relato de caso

Yersinia enterocolitica is a bacterium with zoonotic potential and there are no previous records of this bacteria being isolated from aborted foals. This report aims to describe a case of sepsis due to Y. enterocolitica in a seven month old aborted equine. The fequinoetus was submitted to necropsy and samples of all the organs were collected for the histological exam. Samples of liver, lung, placenta, and stomach contents were collected for bacterial culture. Macroscopically, the liver was enlarged with yellowish heterogeneous color, heart with pale myocardial areas; lungs not collapsed, heavy and shiny, thickened umbilical cord covered with fibrin and pus. Histopathologically, there was moderate multifocal necrosuppurative myocarditis and thrombosis, moderate diffuse suppurative bronchopneumonia, mild multifocal fibrinonecrotic hepatitis, and moderate diffuse necrosuppurative omphalitis with intralesional bacterial myriads and thrombosis. Mild multifocal suppurative placentitis, nephritis, myositis, cystitis, and dermatitis were also observed, in addition to mild diffuse lymphoid rarefaction. The microbiological evaluation identified Y. enterocolitica in the liver, lung, and stomach fluid. This is the first report of sepsis due to Y. enterocolitica causing an abortion in a horse. This bacterium has zoonotic importance; therefore, it should be investigated in abortion in this species, serving as a differential diagnosis in reproductive disorders.(AU)

Yersinia enterocolitica é uma bactéria com potencial zoonótico, e não há informações desse agente como causa de abortamento em equinos. O objetivo deste relato é descrever um caso de sepse por Y. enterocolitica em um feto equino abortado aos sete meses. O feto foi submetido à necropsia, e amostras de todos os órgãos foram processadas para histopatologia. Para microbiologia, foram coletadas amostras de fígado, pulmão, placenta e conteúdo estomacal. Macroscopicamente, observou-se fígado aumentado com coloração amarelada heterogênea; coração com áreas pálidas no miocárdio; pulmões não colabados, pesados e brilhantes; e cordão umbilical espessado e recoberto por fibrina e pus. Na análise histopatológica, havia miocardite necrossupurativa multifocal moderada e trombose, broncopneumonia supurativa difusa moderada, hepatite fibrinonecrótica multifocal discreta e onfalite necrossupurativa difusa moderada com miríades bacterianas intralesionais e trombose. Observou-se também placentite, nefrite, miosite, cistite e dermatite supurativa multifocal discreta, além de rarefação linfoide difusa discreta. A avaliação microbiológica identificou Y. enterocolitica no fígado, no pulmão e no líquido estomacal. Este é o primeiro relato de sepse por Y. enterocolitica causando abortamento na espécie equina. Essa bactéria tem importância zoonótica, portanto deve ser investigada em casos de abortamento nessa espécie, servindo como diagnóstico diferencial em tal distúrbio reprodutivo.(AU)

Investigation of the effects of some phytochemicals on Yersinia ruckeri and antimicrobial resistance / Investigação dos efeitos de alguns fitoquímicos em Yersinia ruckeri e resistência antimicrobiana

Abstract In this study, it is aimed to investigate the effects of Moringa oleifera and Sorbus domestica plant extracts on bacterial disease agents Yersinia ruckeri in aquaculture. Morphological and biochemical properties of 2 different Y. ruckeri isolates were determined. Then, Real-Time PCR analysis and gene sequencing of the isolates were identified. Phytochemicals (M. oleifera and S. domestica) and antibiotics (Oxytetracycline (OX) and Enrofloxacin (ENR)) were used together in the antibiogram test of antibiotics compared to the effect status of antibiotics. Also, the effects of phytochemicals on Y. ruckeri growth was examined comparatively by spectrophotometrically measuring at 600 nm wavelength every 2 hours according to bacterial growth densities with 10 different groups formed on TSB medium. As a result of the study, it was observed that the isolates formed Gram negative, catalase positive, oxidase negative, mobile and typical Y. ruckeri colonies. After the biochemical tests performed with Microgen ID panel, 99.85% similarity was determined. The isolates overlap with the 16S rRNA gene region after sequence analysis, and 99% of the isolates were similar in phylogenetic analysis. After the antibiogram test, Oxytetracycline and Enrofloxacin antibiotics were resistant to Y. ruckeri but the effects of phytochemicals were less on solid medium (MHA). As a result of the measurements carried out in liquid medium (TSB), it was observed that phytochemicals such as M. oliefera and S. domestica inhibit the growth of bacteria by 40-50%. As the importance of antibiotic resistance is increasing day by day, we believe that these phytochemicals will give positive results in treatment instead of using antibiotics.

Resumo Neste estudo, objetiva-se investigar os efeitos dos extratos de plantas de Moringa oleifera e Sorbus domestica sobre agentes bacterianos Yersinia ruckeri na aquicultura. Foram determinadas as propriedades morfológicas e bioquímicas de 2 isolados diferentes de Y. ruckeri. Em seguida, a análise de PCR em tempo real e o seqüenciamento genético dos isolados foram identificados. Fitoquímicos (M. oleifera e S. domestica) e antibióticos (Oxitetraciclina e Enrofloxacina) foram usados ​​juntos no teste de antibiograma dos antibióticos em comparação com o status de efeito dos antibióticos. Além disso, os efeitos dos fitoquímicos no crescimento de Y. ruckeri foram examinados comparativamente por medição espectrofotométrica no comprimento de onda de 600 nm a cada 2 horas de acordo com as densidades de crescimento bacteriano com 10 grupos diferentes formados no meio TSB. Como resultado do estudo, observou-se que os isolados formaram colônias Gram-negativas, catalase-positivas, oxidase-negativas, móveis e típicas de Y. ruckeri. Após os testes bioquímicos realizados com o painel Microgen ID, foi determinada uma similaridade de 99,85%. Os isolados se sobrepõem à região do gene 16S rRNA após a análise da sequência e 99% dos isolados foram semelhantes na análise filogenética. Após o teste do antibiograma, os antibióticos Oxitetraciclina e Enrofloxacina foram resistentes a Y. ruckeri, mas os efeitos dos fitoquímicos foram menores no meio sólido (MHA). Como resultado das medições realizadas em meio líquido (TSB), observou-se que os fitoquímicos inibem o crescimento de bactérias em 40-50%. Como a importância da resistência aos antibióticos está aumentando dia a dia, acreditamos que as plantas que são mais alternativas e mais adequadas para o uso de antibióticos hoje em dia darão resultados positivos no tratamento.

Crohn's disease versus Yersinia enterocolitica infection - case report - a difficult differential diagnosis / Doença de Crohn's × Yersinia enterocolitica - um difícil diagnóstico diferencial - relato de caso

ABSTRACT The aim of this report is to present an unusual case of Crohn's disease affecting the terminal ileum; whose principal differential diagnosis was Yersinia enterolocolitica infection, as the histological features of the resected ileum was common to both diseases. We also describe how the infectious etiology was discarded and the implications for the patient follow-up.

RESUMO O objetivo desse relato é analisar um caso incomum de doença de Crohn, cujo diagnóstico diferencial, com possível infecção por Yersinia enterocilítica, foi dificultado pela presença de alterações histológicas das duas doenças. Descrevemos como foi realizada a exclusão de causas infecciosas e as implicações no acompanhamento do paciente.

Determinación de IgG contra Chlamidya trachomatis en mujeres con artritis de la Ciudad de Bogotá D.C. Un estudio piloto / Determination of IgG in women infected with Chlamydia trachomatis and reactive- arthritis from Bogota, Colombia: a pilot study

Objetivo. Evaluar la presencia de IgG contra C. trachomatis en mujeres entre 18 a 30 años con diagnóstico de artritis de la ciudad de Bogotá D.C. Métodos. Los grupos de estudio están compuestos por un grupo de casos AR (mujeres con diagnóstico de artritis reumatoide y reactiva) y un grupo control. Se obtuvieron muestras de suero y se realizó la determinación cuantitativa de IgG contra C. trachomatis, la determinación PCR (proteína C reactiva) y FR (factor reumatoide). Resultados. Las variables de talla y peso descritas en la población de estudio, muestran un comportamiento homogéneo, por lo cual no interfieren en los resultados obtenidos. Las medias se compararon por los test Mann Whitney y t test no pareado. El porcentaje de resultados positivos en la determinación cualitativa de PCR fueron de: 36,6% para el grupo de casos y 14,5% para el grupo control. En la determinación cualitativa de FR el porcentaje de resultados positivos fueron: 48,8% para el grupo de casos y 5,3% para el grupo control. Finalmente, el porcentaje de resultados positivos en la determinación de anticuerpos IgG específicos contra C trachomatis fue de 2,4% para el grupo de casos y 22,4% para el grupo de controles. Las variables de PCR y FR mostraron mayor frecuencia de resultados positivos en el grupo de casos, en comparación con el grupo control, lo cual se correlaciona con la existencia de procesos inflamatorios propios del desarrollo de artritis. Sin embargo el grupo control presentó mayor frecuencia de anticuerpos IgG específicos contra C. trachomatis en comparación con el grupo de casos. Estos resultados hacen necesario evaluar a futuro, el comportamiento de las pacientes del grupo control con resultados positivos de IgG contra C. trichomatis que permitirían observar una posible aparición de síntomas relacionados con artritis.

Objective. Evaluate the presence of IgG in women infected with C. trachomatis, and diagnosed with arthritis, aged 18-30 years, in Bogota, Colombia. Methods. This project is composed of two study groups: Firstly, female cases diagnosed with rheumatoid reactive-arthritis and secondly, a control group. Quantitative determination of IgG in serum samples from patients with C. trachomatis. Were determined also, PCR determination (C reactive protein) and RF (rheumatoid factor) were performed. The statistical analysis included the comparison of means, using Mann Whitney and unpaired t test. Results. Patient samples that were positive by PCR: 36.6% for the female case group, and 14.5% for the control group. In the qualitative determination of RF positives, results were: 48.8% for the case group and 5.3% for the control group. Finally, the percentages of positive results for IgG antibodies determination against C. trachomatis were: 2.4% for the case group and 22.4% for the control group. PCR and FR variables showed higher frequency of positive results in the female case group compared with the control group, which correlates with the presence of inflammatory processes, where it is typical in the development of arthritis. However, the control group had increased frequency of specific IgG antibodies against C. trachomatis, when it is compared with the case female group. These results need to be evaluated in the future, where, the control group that tested positive for IgG against C. Trachomatis, would allow to observe the possible apparition of symptoms related to arthritis.

Caracterização fenotípica e genotípica de cepas de yersinia enterocolitica isoladas de diferentes origens no Brasil / Phenotypic and genotypic characterization of Yersinia enterocolitica strains isolated from different origins in Brazil

Desde a sua inclusão na família Enterobacteriaceae, em 1972, Yersinia enterocolitica vem sendo extensivamente estudada, por se tratar de um patógeno de natureza zoonótica com relevância em saúde pública, amplamente distribuído na natureza em reservatórios aquáticos e fontes animais. Tendo o suíno como principal reservatório, por ser portador de cepas dos mesmos biosorotipos encontrados em humanos, Y. enterocolitica possui diversos genes de patogenicidade, tanto cromossomiais (inv, ail e ystA) como plasmidiais (virF), que lhes confere a capacidade de invadir e sobreviver em um organismo hospedeiro. Esse estudo teve como objetivo analisar cepas de Y. enterocolitica oriundas de fontes animal, alimentar, ambiental e humana de diferentes regiões do Brasil, para a detecção dos genes de virulência supracitados através da técnica da PCR em conjunto com testes fenotípicos, além da análise da susceptibilidade aos antimicrobianos através do método de disco-difusão para que, junto com os resultados da PCR, pudesse ser avaliado seu potencial patogênico. Para a avaliação da diversidade filogenética das cepas foram empregadas as técnicas de ERIC-PCR e do PFGE. Em um total de 60 amostras, foram encontradas 11(18 por cento) amostras pertencentes ao sorotipo O:3, biotipo 4 de origens humana e animal possuidoras de todos os genes de virulência. Dez amostras humanas (O:3/B4) apresentaram somente os 3 genes cromossomiais, e 9 amostras pertencentes ao biotipo 1A apresentaram o gene inv. No que tange à resistência aos antimicrobianos, 60 (100 por cento) amostras foram resistentes à ampicilina, 58(97 por cento) à cefalotina, 6(10 por cento) ao sulfametoxazol-trimetoprim, 7(12 por cento) à tetraciclina e 1(2 por cento) à amicacina. O perfil de resistência predominante foi AMP-KF-RL. Cinco amostras apresentaram resistência a cinco antibióticos, sendo a amostra YE42 resistente a 3 classes de antibióticos diferentes. O ERIC-PCR revelou a existência de 32 ERIC genótipos (EGT), gerando um índice discriminatório de diversidade de 0,924. Quarenta amostras pertencentes ao sorovar O:3 biotipo 4 de origens humana, animal, alimentar e ambiental ficaram agrupadas dentro de 12 EGTs em um conjunto com uma similaridade de 85 por cento. Já as amostras do Biotipo 1A isoladas de alimentos e ambiente são extremamente heterogênicas sorologicamente, e apresentaram padrões de banda mais diversificados. A análise do PFGE nos revelou a existência de nove clusters (A até I) agrupando os isolados com similaridade ≥ 85 por cento. Nestes clusters, foram agrupados trinta e seis padrões únicos de banda (PPT), gerando um índice discriminatório de diversidade de 0,957. O cluster A englobou todas as amostras do sorovar O:3 biotipo 4 isoladas de animal e de casos humanos. Com base nos resultados, conclui-se que cepas com os mesmos perfis genotípicos, isolados de humanos e animais, do sorovar O:3 e biotipo 4, encontram-se circulantes por vários estados do Brasil. Além disso, com base no exposto, sugere-se que o suíno possa funcionar como principal elemento na cadeia de transmissão de Y. enterocolitica para o homem, por albergar cepas dos mesmos genótipos encontrados em infecções humanas.

Yersiniose em Trachinotus marginatus (pampo): diagnóstico histopatológico e imuno-histoquímico / Yersiniosis in Trachinotus marginatus (pampo): histopathological and immunohistochemical diagnostic

Descreveu-se um surto de yersiniose em uma criação de pampo Trachinotus marginatus estudado no Laboratório de Piscicultura Estuarina e Marinha da Universidade Federal do Rio Grande. A enfermidade manifestou-se por transtornos natatórios, exoftalmia com panoftalmite e pela clássica boca vermelha, nome pelo qual se denomina "enfermidade da boca vermelha" (EBV). Na necropsia, foram observados focos de hemorragia peritoneal, esplenomegalia e hepatomegalia. Microscopicamente, foi observada panoftalmite com infiltrados inflamatórios densos que afetavam quase todas as estruturas oculares. Esses infiltrados estavam constituídos por granulócitos, linfócitos, macrófagos e células granulares eosinofílicas. No exsudado, observaram-se estruturas pequenas, pouco coradas, de aspecto bacteriano Gram negativo. O estudo imuno-histoquímico, que se utilizou de um anticorpo monoclonal anti-Yersinia ruckeri, resultou positivo. Este é o primeiro surto conhecido de yersiniose em Trachinotus marginatus no Brasil.

In the "Laboratório de Piscicultura Estuarina e Marinha da Universidade Federal do Rio Grande" the rearing of Trachinotus marginatus (pompano) is studied, and in one of these rearing a yersioniosis outbreak occured. The disease was manifested by swimming disturbances, exophthalmiawith panophthalmitis and the classic red mouth, (red mouth disease (RMD). The necropsies revealed focus of peritoneal hemorrhage, esplenomegalyand hepatomegaly.Microscopically a panophthalmitis with dense inflammatory infiltrates was observed, which affected almost all ocular structures. These infiltrates were constituted by granulocytes, lymphocytes, macrophages and eosinophylicgranular cells (ECG), in the exudatessmall structures less colored with Gram negative bacteria aspect were observed. The immunohistochemical, which used a monoclonal antibody anti- Yersinia ruckeri waspositive. The RMD is caused by enterobacteriaGram negative, which affects both freshwater and saltwater fish, with predominance in salmonids. This is the first known yersiniosis outbreak in Trachinotus marginatus in Brazil and it is necessary to keep this disease in mind at the moment of rearing fish of this species.

Infecciones por Yersinia / Yersinia infections

La Yersinia enterocolitica o la Yersinia pseudotuberculosis pueden tener diferentes formas de presentación entre las que están la enteritis o enterocolitis, la adenitis mesentérica asociada a ileitis distal, la septicemia, infecciones localizadas o manifestaciones extraintestinales. Es responsable de hasta 7 por ciento de los cuadros de gastroenteritis infecciosas y se asocia a una elevada mortalidad post-infección a corto y largo plazo, de 2 a 3 veces mayor. Esta infección bacteriana se adquiere mediante la ingesta oral de productos contaminados y/o inadecuadamente preparados. El aislamiento de Yersinia en las deposiciones es el examen más específico y siempre debe ser solicitado. Debido a su baja sensibilidad los estudios serológicos pueden ser útiles para el diagnóstico, y la reacción de polimerasa en cadena (PCR) puede constituirse próximamente en el examen de elección para el diagnóstico de esta infección. Los antibióticos útiles para su tratamiento son los aminoglicósidos, cefalosporinas de tercera generación, cloranfenicol, quinolonas, tetraciclinas y trimetoprim-sulfametoxazol.

Yersinia enterocolitica or yersinia pseudotuberculosis may have different presentation forms: among those are enteritis or enterocholitis, mesenteric adenitis associated with distal ileitis, septicemia, localized infections or extra-intestinal manifestations. It is responsible for up to 7 percent of infectious gastroenteritis and is associated with high post-infection mortality in the short and long term, which is 2 to 3 times higher. This bacterial infection is acquired through oral consumption of contaminated and/or inappropriately prepared products. Isolation of Yersinia in stool samples is the more specific exam and it should always be performed. Due to its low sensibility, serological studies may be useful for the diagnosis, and the polymerase chain reaction (PCR) may become the elective exam for the diagnosis of this infection in the future. Antibiotics that are useful for its treatment are aminoglycoside, third-generation cephalosporins, chloramphenicol, quinolones, tetracyclines, and Trimetoprim-sulfametoxasol.

Epidemiología de las infecciones por Yersinia enterocolítica / Aspects of the epidemiology of Yersinia enterocolitica: a review

Los brotes recientes de enfermedades transmitidas por los alimentos asociados a Salmonella, Listeria y Yersinia han destacado la importancia del conocimiento de los riesgos microbriológicos a que se expone la población por el consumo de estos alimentos contaminados. Tales brotes afirman la necesiad de mejorar los métodos de detección, del control del medio ambiente y de la vigilancia epidemiológica... Durante la década pasada, numerosos métodos basados en la detección del ADN bacteriano, tales como la PCR o las pruebas de hibridación, han demostrado superioridad por su mayor sensibilidad que supera por lejos la de los medios de cultivos convencionales. Una PCR en tiempo real es un método rápido y específico para la detección de Y. enterocolítica en diferentes muestras, proporcionando una alternativa superior a los métodos de detección actualmente disponibles. Esto permitiría identificar eficientemente los alimentos peligrosos debido a la contaminación con Y. enterocolítica.

Recent outbreaks of foodborne disease linked to Salmonella, Listeria, and Yersinia have highlighted consumer awarenss of microbiological problems in the food supply. Such outbreaks affirm the need form improved testing, environmental monitoring, and epidemiological surveillance. In the case of Yersinia, this bacterium's role as a newly emerged foodborne pathogen is discussed... During the las decade, numerous DNA-based methods, such as PCR and colony hybridization assays, have been designed to detect pathogenic Y. enterocolítica in natural samples more rapidly and with better sensitivity than can be achieved by culture methods. A rapid and specific real-time PCR method for the detection of pathogenic Y. enterocolitica bacteria in natural samples, provides a superior alternative to the corrently available detection methods and makes it possible to identify the foods at risk for Y. enterocolitica contamination.

Panoramic view of the occurrence of Yersinia species other than Y. pestis in Brazil

Data on the occurrence of Yersinia species. other than Y. pestis in Brazil are presented. Over the past 40 years, 767 Yersinia strains have been identified and typed by the National Reference Center on Yersinia spp. other than Y. pestis, using the classical biochemical tests for species characterization. The strains were further classified into biotypes, serotypes and phagetypes when pertinent. These tests led to the identification of Yersinia cultures belonging to the species Y. enterocolitica, Y.pseudotuberculosis, Y. intermedia, Y. frederiksenii and Y. kristensenii. Six isolates could not be classified in any of the known Yersinia species and for this reason were defined as Non-typable (NT). The bio-sero-phagetypes of these strains were diverse. The following species of Yersinia were not identified among the Brazilian strains by the classical phenotypic or biochemical tests: Y. aldovae, Y. rhodei, Y. mollaretti, Y. bercovieri and Y.ruckeri. The Yersinia strains were isolated from clinical material taken from sick and/or healthy humans and animals, from various types of food and from the environment, by investigators of various Institutions localized in different cities and regions of Brazil.

Adenitis mesentérica por Yersinia enterocolítica / Mesenteric adenitis due to Yersinia enterocolitic

Se presenta por primera vez en nuestro país un caso de adenitis mesentérica en una niña de 3 años asociado a infección por Yersinia enterocolítica. La cepa recuperada del coprocultivo correspondió al bioserotipo patogénico 4/O:3 y presentó además el plásmido de virulencia.

Biodiagnóstico de las diarreas agudas bacterianas y virales / Biodiagnóstico of acute bacterial and viral diarrhea

El diagnóstico de las diarreas agudas bacterianas se realiza mediante la prescripción de coprocultivos típicos u orientados, realizados después del interrogatorio. Después del examen macroscópico y microscópico de las heces (diagnóstico de orientación), el cultivo puede poner en evidencia Salmonella, Shigella, Campylobacter o Yersinia, que serán siempre considerados como patógenos, mientras que, salvo excepción notable, la presencia de E. coli forma parte de la flora cólica comensal. En el niño, los agentes responsables de las gastroenteritis virales son, por orden devreciente de frecuencia, los rotavirus (sobre todo los del grupo A), calicivirus, astrovirus y adenovirus. En el diagnóstico virológico de rutina sólo se detectan rotavirus y adenovirus 40-41. Algunos coprocultivos se realizan en el curso de un cotexto epdemiológico-clínico particular en búsqueda de bacterias enteropatógenas como Vibrio cholerae, Clostridium difficile o E. Coli enterohemorrágico. Este patotipo de E. Coli puede ser responsable del síndrome hemolítico y urémico ligado a la producción de toxinas. Su responsabilidad a menudo se establece por cultivo después de serotipado, por detección de las toxinas producidas o más raramente por métodos serológicos. La diarrea aguda es un fenómeno patológico definido según la OMS por la emisión de al menos tres heces líquidas o blandas al fía con menos de 14 días de antelación. Puede tener diferentes orígene, infecciosos o no. Cuando el origen de la diarrea aguda es infeccioso puede ser bacteriana, viral o parasitaria. Es frecuente en el niño,en el que representa una causa mayor de morbilidad y mortalidad en el mundo. En Frencia, cerca de tres millones de pacientes consultan por una diarrea aguda y sólo del 3 al 4% de estas consultas originan la prescripción de un coprocultivo (1). Es importante para el microbiólogo conseguir informació de los signos clínicos (dolores abdominales, fiebre, aspecto de las heces) y del contexto epidemiológico...

Importância de Yersinia enterocolitica em microbilogia médica / Importance of Yersinia enterocolitica in medical microbiology

Y.enterocolitica é um enteropatógeno invasivo de humanos que provoca uma série de sintomas clínicos intestinais e extra-intestinais que variam desde uma gastrenterite branda a uma linfadenite mesentérica que mimetiza apendicite e em casos raros pode evoluir para uma septicemia.A infecção causada por Y.enterocolitica pode levar a seqüelas imunológicas, incluindo artrite, eritema nodoso e glomerulonefrite.Amostras patogênicas de Y.enterocolitica são associadas a determinados sorogrupos e biotipos e a uma variedade de características fenotípicas relacionadas a virulência.Estudos de genética molecular demonstraram a importância do plasmídio pYV que codifica vários genes de virulência, bem como a importância de vários genes de virulência cromossomais na patogênese dessa bactéria.As infecções intestinais causadas por Y.enterocolitica são normalmente auto-limitadas não havendo usualmente a necessidade de antibioticoterapia.A ocorrência de infecções por Y.enterocolitica no Brasil não é tão freqüente como em países europeus, Japão e Estados Unidos.Essa revisão enfoca as características gerais, a patogênese, os sintomas clínicos, mecanismos de virulência, tratamento e susceptibilidade a antibióticos de amostras de Y.enterocolitica isoladas no Brasil e ao redor do mundo.

Papel das Yops secretadas por Yersinia sobre a resposta imune do hospedeiro / Role of Yops secreted by Yersinia in the host immune response

O gênero Yersinia compreende três espécies patogênicas para humanos: Y. pestis, Y. enterocolitica e Y. pseudotuberculosis. A patogenicidade de Yersinia está ligada à presença do plasmideo de 70-kb (pYV) que é comum às três espécies e codifica um sistema de secreção do tipo III e um conjunto de proteínas de virulência, incluindo aquelas conhecidas como Yops (Yersinia outer proteins), que são exportadas por este sistema quando as células do hospedeiro são infectadas pela bactéria. Duas Yops translocadoras (YopB e YopD) se inserem na membrana plasmática e funcionam no transporte de seis efetoras (YopO, YopH, YopM, YopJ e YopT) para o citosol da célula do hospedeiro. As Yops efetoras funcionam interferindo em múltiplas vias de sinalização da célula infectada. Como consequência, a resposta imune inata e adaptativa do hospedeiro fica afetada. Este trabalho enfoca o papel das Yops na modulação da resposta imune do hospedeiro

Análisis de una cepa de Yersinia enterocolitica aislada de heces diarreicas humanas en Argentina / Analysis of a Yersinia enterocoliticaisolated from human diarreic feces in Argentina

Algunos serotipos de Yersinia enterocolitica ocasionan desde diarreas hasta infecciones invasivas. El objetivo del trabajo fue analizar factores de virulencia y marcadores asociados en una cepa de Y. enterocolitica aislada de heces diarreicas humanas. El aislamiento deY. enterocolitica analizado fue incluído dentro del sub-grupo 1A.La determinación de resistencia al suero humano normal e hidrofobicidad de superficie, así como la búsqueda de los genes vir F y ail, resultaron negativos. Se demostró sin embargo producción de enterotoxina a 20 °C y también a 37 °C en condiciones de osmolaridad y pH similares a las del intestino humano. La enterotoxina, presentó reactividadpor la prueba del ratón lactante, aunque no se pudo comprobarpor PCR la presencia del gen yst. Los resultados obtenidos por nosotros, coincidentes con los de otros investigadores, indican que ciertos aislamientos clínicos de Y. enterocolitica del biotipo 1A (“avirulentas”), son capaces de causar enfermedad, probablemente a través de otros mecanismos, distintos a los caracterizados en especies de Yersinia enteropatógenas.

Some serotypes of Yersinia enterocoliticamight causediarrheas and/or invasive infections. The aim of this work was to analyze virulence factors and associated markers in a strain of Y. enterocolitica isolated from human diarrheic feces. The strain analyzed was included in the biotype 1A. The virulence markers determinationas well as the search of the genes vir F and ail,were negatives. However, it was demonstratedenterotoxin production at 20 °C, andat 37 °C in osmolarity conditions and pH similar to the human intestine. The enterotoxin presented reactivity for the infant mouse test, although it could not be proven the presence of yst gene by PCR. The results obtained by us, coincident with those of other investigators,indicated that certain clinical isolates of Y. enterocolitica of the biotype 1A (“avirulent”), could be the etiological agent of the illness trhough other mechanisms of virulence, that would differ from those previously characterized in species of enteropathogenic Yersinia.

Experimental kinetics of infection induced by Yersinia pseudotuberculosis isolated from stock animals

The course of in vivo infection of five isolates of Yersinia pseudotuberculosis was followed for three weeks in Swiss mice. The strains were isolated from diarrheic and normal feces and mesenteric lymph nodes of healthy and sick stock animals. Four strains of serogroup O:3 and one of serogroup O:1a, with and without the virulence plasmid, were inoculated intragastrically and intravenously in the mice. Groups of five animals were sacrificed at 6 h and 3, 6, 10, 15, and 21 days after inoculation, and organs and tissues were checked for possible macroscopic alterations. Development of infection was monitored at these times by performing viable bacterial counts in homogenates of selected tissues. The animals were cheked daily for clinical alterations. The results of the study showed that strains with the virulence plasmid infected organs and tissues at various times and at varying intensity by both routes of infection, the strain of type O:1a being the most invasive. Moreover, clinical and pathological alterations occurred only in animals inoculated with bacteria carrying the virulence plasmid, regardless of the route of infection.

Comparaçäo entre a capacidade ativadora policlonal de Yersinia enterocolitica O: 3 e outros ativadores / Comparison between the polyclonal activation capability of Yersinia enterocolitica O: 3 and others activators

Ativaçäo policlonal de linfócitos induzida por endotoxinas bacterianas e superantígenos pode contribuir para o desenvolvimento de auto-imunidade. O objetivo deste trabalho foi comparar a ativaçäo policlonal de linfócitos B provocada por Yersinia enterocolitica O: 3 com aquela provocada por LPS de E. coli e por hemácias de carneiro. Camundongos Swiss foram infectados por via intraperitoneal com 10µg de LPS de E. coli ou com uma suspensäo de hemácias de carneiro a 2,5 por cento. Um grupo de animais normais foi usado como controle. No quinto dia pós-inoculaçäo, cinco animais de cada grupo foram sacrificados e as células esplênicas secretoras de imunoglobulinas detectadas pelo teste de PFC-Proteína A isotipo específico. No grupo dos animais infectados com Y. enterocolítica O: 3, a maior ativaçäo ocorreu em relaçäo às células secretoras de IgM (13 vezes aumentadas em relaçäo aos animais controles), seguida por IgG2b e IgG1 (ambos nove vezes). No grupo inoculado com LPS de E. coli, a maior ativaçäo ocorreu com relaçäo às células secretoras de IgG1 (cinco vezes), e, no grupo inoculado com hemácias de carneiro, a maior ativaçäo ocorreu com relaçäo às células secretoras de IgG1 (16 vezes) e IgM (oito vezes). O perfil comparativo do número de PFC revelou que Y. enterocolitica O: 3 apresentou maior capacidade de estimular linfócitos B in vivo do que os outros ativadores.

Ativaçäo de linfócitos B das placas de Peyer de camundongos infectados por via gástrica com Yersinia enterocolitica O: 8 / Peyer's patches B lymphocyte activation of mice infected by gastric route with Yersinia enterocolitica O: 8

Foi realizada infecçäo experimental de camundongos Swiss, "SPF", com amostra virulenta de Y. enterocolitica O: 8, inoculada por via gástrica, com o objetivo de verificar a ativaçäo de células B presentes nas placas de Peyer dos animais e comparar com aquela provocada por uma amostra isogênica, curada do plasmídeo de virulência. Para tanto, foi determinada a cinética de células secretoras de imunoglobulinas inespecíficas e específicas dos diferentes isótipos (IgG, IgA e IgM), pela técnica de ELISPOT e pesquisada a presença de anticorpos específicos anti-Yersinia nos soros dos animais infectados, por meio de ELISA. Foi verificada uma ativaçäo das células secretoras de imunoglobulinas inespecíficas nas placas de Peyer. Para a amostra virulenta, a maior ativaçäo ocorreu no número de células secretoras de IgG, e o pico de secreçäo ocorreu no 35§ dia pós-infecçäo (aumento de 8,9 vezes em relaçäo aos animais controles). Nos animais infectados com a amostra avirulenta, a maior ativaçäo ocorreu para o isótipo IgA, no 21§ dia pós-infecçäo (aumento de 16,1 vezes). Näo foi possível a detecçäo de células secretoras de Igs específicas. Anticorpos específicos do isotipo IgG foram detectados apenas nos soros dos animais infectados com a amostra virulenta, a partir do 28§ dia pós-infecçäo. Conclui-se que ambas as amostras de Y. enterocolitica O: 8 provocaram ativaçäo policlonal de linfócitos B das placas de Peyer.

Humoral immune response in yersinia enterocolitica 0: 3 - infected balb/c mice

Balb/c mice were experimentally infected by oral or intravenous route with Yersinia enterocolitica 0:3 for evaluation of their humaral immune response. Agroup of normal mice was used as control. Five mice from each group were bled by heart puncture and their spleens were removed on the 3rd, 7th, 14th, 21st and 28th day after infection. Immunoglobulin-secreting spleen cells were detected by the isotype-specific protein A plaque assay. The presence of specific anti-Yersinia antibodies was determined in mouse serum by ELISA. In the group infected by the intragastric route there was a reduction of immunoglobuling-secreting spleen cells compared to control during the first week after infection; the animals did not develop anti-Yersinia antibodies. In the group infected by the intravenous route there was ans increase in the cells secreting immunoglobulins of all isotypes, with the following peaks of maximum activation: IgM on the 3rd day, IgG2a and IgG3 on the 7th day and IgA, IgG1 and IgG2b on the 14th day after infection. Specific antibodies of the IgG and IgM isotype were detected in the sera of these animals. Previous Balb/c mouse infection with Y. enterocolitica by the oral route did not change the patterns of humoral response to sheep red blood cells by these animals. We conclude that the immune humoral response differs between the animals inoculated intravenously or orally, with a short-term immunosupression being observed only in the latter group.