Probiotic and synbiotic in broiler diet: performance and Enterobacteriaceae / [Probiótico e simbiótico em ração para frangos: desempenho e Enterobacteriaceae]

The objective of this study was to evaluate the effects of probiotics and synbiotics on the performance and Enterobacteriaceae count of broiler chickens. A total of 640 one-day-old male broiler chicks were distributed in a completely randomized design with four treatments and eight replicates with 20 birds each. The treatments were: ration with performance enhancer (zinc bacitracin; positive control); ration without performance enhancer and probiotic/synbiotic (negative control); ration with probiotics; and ration with synbiotics. At 35 days, five birds from each treatment were euthanized and intestinal contents were harvested for determining the Enterobacteriaceae count. The performance data and average colony-forming units (CFUs) transformed as log CFU/g were subjected to analysis of variance and Tukey's test. The effects of probiotics and synbiotics were observed in the initial phase, with supplemented birds exhibiting comparable weight gain to those supplemented with bacitracin. No effect of the treatment on broiler performance was observed after 42 days. The enterobacterial count was comparable among all experimental treatments. Supplementation with probiotics and synbiotics did not compromise the performance of broilers and did not alter the Enterobacteriaceae count.(AU)

Objetivou-se avaliar o efeito do probiótico e do simbiótico sobre o desempenho e a contagem de Enterobacteriaceae em frangos. Foram utilizados 640 pintos de corte, machos, de um dia de idade, distribuídos em delineamento inteiramente ao acaso, com quatro tratamentos, oito repetições com 20 aves cada. Os tratamentos foram: ração com melhorador de desempenho (bacitracina de zinco) (controle positivo); ração sem melhorador de desempenho e sem probiótico/simbiótico (controle negativo); ração com probiótico e ração com simbiótico. Aos 35 dias, cinco aves por tratamento foram eutanasiadas para retirada de conteúdo intestinal e determinação de Enterobacteriaceae. As médias das unidades formadoras de colônias, transformadas em log/UFC/g, e de desempenho foram submetidas à análise de variância e comparadas pelo teste Tukey. Foi observado efeito do probiótico e do simbiótico na fase inicial, sendo que aves apresentaram os mesmos resultados de ganho de peso e de peso corporal que o grupo de aves alimentado com bacitracina. Aos 42 dias, não houve efeito dos tratamentos sobre o desempenho. Aves que não receberam nenhum aditivo não apresentaram maior contagem de enterobactérias, sendo semelhantes aos demais tratamentos. A adição do probiótico e do simbiótico não compromete o desempenho dos frangos e não altera a contagem de Enterobacteriaceae.(AU)

Staphylococcus aureus resistance to topical antimicrobials in atopic dermatitis

Abstract: Background: Topical antimicrobial drugs are indicated for limited superficial pyodermitis treatment, although they are largely used as self-prescribed medication for a variety of inflammatory dermatoses, including atopic dermatitis. Monitoring bacterial susceptibility to these drugs is difficult, given the paucity of laboratory standardization. Objective: To evaluate the prevalence of Staphylococcus aureus topical antimicrobial drug resistance in atopic dermatitis patients. Methods: We conducted a cross-sectional study of children and adults diagnosed with atopic dermatitis and S. aureus colonization. We used miscellaneous literature reported breakpoints to define S. aureus resistance to mupirocin, fusidic acid, gentamicin, neomycin and bacitracin. Results: A total of 91 patients were included and 100 S. aureus isolates were analyzed. All strains were methicillin-susceptible S. aureus. We found a low prevalence of mupirocin and fusidic acid resistance (1.1% and 5.9%, respectively), but high levels of neomycin and bacitracin resistance (42.6% and 100%, respectively). Fusidic acid resistance was associated with more severe atopic dermatitis, demonstrated by higher EASI scores (median 17.8 vs 5.7, p=.009). Our results also corroborate the literature on the absence of cross-resistance between the aminoglycosides neomycin and gentamicin. Conclusions: Our data, in a southern Brazilian sample of AD patients, revealed a low prevalence of mupirocin and fusidic acid resistance of S. aureus atopic eczema colonizer strains. However, for neomycin and bacitracin, which are commonly used topical antimicrobial drugs in Brazil, high levels of resistance were identified. Further restrictions on the use of these antimicrobials seem necessary to keep resistance as low as possible.

Antimicrobial activity of different filling pastes for deciduous tooth treatment

Guedes-Pinto paste is the filling material most employed in Brazil for endodontic treatment of deciduous teeth; however, the Rifocort® ointment has been removed. Thus, the aim of this study was to investigate the antimicrobial potential of filling pastes, by proposing three new pharmacological associations to replace Rifocort® ointment with drugs of already established antimicrobial power: Nebacetin® ointment, 2% Chlorhexidine Gluconate gel, and Maxitrol® ointment. A paste composed of Iodoform, Rifocort® ointment and Camphorated Paramonochlorophenol (CPC) was employed as the gold standard (G1). The other associations were: Iodoform, Nebacetin® ointment and CPC (G2); Iodoform, 2% Chlorhexidine Digluconate gel and CPC (G3); Iodoform, Maxitrol® ointment and CPC (G4). The associations were tested for Staphylococcus aureus (S. aureus), Streptococcus mutans (S. mutans), Streptococcus oralis (S. oralis), Enterococcus faecalis (E. faecalis), Escherichia coli (E. coli), and Bacillus subtilis (B. subtilis), using the methods of dilution on solid medium – orifice agar – and broth dilution. The results were tested using statistical analysis ANOVA and Kruskal-Wallis. They showed that all the pastes had a bacteriostatic effect on all the microorganisms, without any statistically significant difference, compared with G1. S. aureus was statistically significant (multiple comparison test of Tukey), insofar as G2 and G3 presented the worst and the best performance, respectively. All associations were bactericidal for E. coli, S. aureus, S. mutans and S. oralis. Only G3 and G4 were bactericidal for E. faecalis, whereas no product was bactericidal for B. subtilis. Thus, the tested pastes have antimicrobial potential and have proved acceptable for endodontic treatment of primary teeth.

Uso de óleo essencial de orégano, salinomicina e bacitracina de zinco na dieta de frangos de corte / Use of oregano essential oil, salinomycin and bacitracin zinc in diets of broiler chicken

O presente trabalho teve como objetivo avaliar dietas com óleo essencial de orégano, associado ou não com salinomicina, como alternativa à bacitracina de zinco sobre o desempenho zootécnico de frangos de corte. Foram utilizados 600 pintos de um dia de idade, machos, da linhagem Cobb® 500, criados até 42 dias de idade em boxes com cama de casca de arroz providos de comedouros tubulares e bebedouros nipple. O delineamento foi inteiramente casualizado, com seis dietas e 10 repetições de 10 aves cada. As dietas experimentais à base de milho e farelo de soja foram: controle positivo – antibiótico (bacitracina de zinco) + 0,05% de anticoccidiano (salinomicina), controle negativo – dieta basal (DB) sem aditivos, DB + 0,05% de salinomicina e 0,03% de óleo essencial de orégano (Orego-Stim®), DB + 0,03% de óleo essencial de orégano, DB + 0,05% de salinomicina e 0,05% de óleo essencial de orégano, DB + 0,05% de óleo essencial de orégano. Não foi encontrado efeito da utilização do óleo de orégano até 21 dias no desempenho das aves. Nos demais períodos, aos 35 e 42 dias, o desempenho das aves tratadas com 0,03% de óleo essencial de orégano + salinomicina apresentou resultados semelhantes ao controle positivo, levando à conclusão de que a dose de 0,03% de óleo essencial de orégano + salinomicina pode substituir a bacitracina de zinco + salinomicina em dietas para frangos de corte.

The inclusion of oregano essential oil, alone or associated with salinomycin, was evaluated as an alternative to zinc bacitracin on the performance of broiler chickens. This study used 600 male Cobb 500® day-old chicks, raised 42 days in boxes with rice hulls, provided with tubular feeders and nipple drinkers. The experimental design was completely randomized with six diets and 10 replications with 10 birds per experimental unit. The diets were based on corn and soybean meal: positive control - antibiotic (zinc bacitracin) + 0.05% anticoccidial (salinomycin), negative control - basal diet (BD) without additives, DB + 0.05% of salinomycin and 0.03% of oregano essential oil (Orego-Stim®), DB + 0.03% of oregano essential oil, DB + 0.05% of salinomycin and 0.05% of oregano essential oil, DB + 0.05% of oregano essential oil. There were no treatment effects on broiler performance until 21 days of age. In the other periods, at 35 and 42 days, the oregano essential oil at 0.03% combined with salinomycin presented similar effects as the positive control, leading to the conclusion that 0.03% of oregano essential oil associated with the salinomycin can replace zinc bacitracin + salinomycin in broiler chicken diets.

Production of peptide antibiotics by Bacillus sp: GU 057 indigenously isolated from saline soil

A total of 112 soil samples were taken from differents areas of district D.I.Khan and Kohat (KPK) Pakistan and screened for production of antibiotics against the Micrococcus luteus and Staphylococcus aureus. Widest zone of inhibition (18mm) was produced by microorganism isolated from saline soil. The strain was later identified as Bacillus GU057 by standard biochemical assays. Maximum activity (18mm inhibition zone) was observed against Staphylococcus aureus after 48 hours of incubation at pH 8 and 4% concentration of glucose. The antibiotic was identified by autobiography as bacitracin. The Bacillus strain GU057 was confirmed as good peptide antibiotic producer and can effectively be indulged as biocontrol agent.

Systematic mutagenesis method for enhanced production of bacitracin by Bacillus licheniformis mutant strain UV-MN-HN-6

The purpose of the current study was intended to obtain the enhanced production of bacitracin by Bacillus licheniformis through random mutagenesis and optimization of various parameters. Several isolates of Bacillus licheniformis were isolated from local habitat and isolate designated as GP-35 produced maximum bacitracin production (14±0.72 IU ml-1). Bacitracin production of Bacillus licheniformis GP-35 was increased to 23±0.69 IU ml-1 after treatment with ultraviolet (UV) radiations. Similarly, treatment of vegetative cells of GP-35 with chemicals like N-methyl N'-nitro N-nitroso guanidine (MNNG) and Nitrous acid (HNO2) increased the bacitracin production to a level of 31±1.35 IU ml-1 and 27±0.89 IU ml-1 respectively. Treatment of isolate GP-35 with combined effect of UV and chemical treatment yield significantly higher titers of bacitracin with maximum bacitracin production of 41.6±0.92 IU ml-1. Production of bacitracin was further enhanced (59.1±1.35 IU ml-1) by optimization of different parameters like phosphate sources, organic acids as well as temperature and pH. An increase of 4.22 fold in the production of bacitracin after mutagenesis and optimization of various parameters was achieved in comparison to wild type. Mutant strain was highly stable and produced consistent yield of bacitracin even after 15 generations. On the basis of kinetic variables, notably Yp/s (IU/g substrate), Yp/x (IU/g cells), Yx/s (g/g), Yp/s, mutant strain B. licheniformis UV-MN-HN-6 was found to be a hyperproducer of bacitracin.

Prevalência de Streptococcus pyogenes em crianças e adolescentes com 1 a 13 anos de idade, Teresina-PI, Brasil / Prevalence of Streptococcus pyogenes in children and adolescents with 1 to 13 years old, Teresina-PI, Brazil

O estudo teve o objetivo de identificar a prevalência de Streptococcus pyogenes na secreção de orofaringe em crianças e adolescentes com 1 a 13 anos de idade. Trata-se de uma abordagem quantitativa, na qual foi coletada secreção de orofaringe de 80 crianças e adolescentes moradores de uma vila na cidade de Teresina - PI. A cultura de orofaringe foi realizada em Trypticase Soy Agar acrescido de 5% de sangue de carneiro desfibrinado, seguido de incubação à temperatura de 35 +- 2o C em atmosfera de microaerofilia por 18-24 horas. A identificação do S pyogenes foi feita através da prova de catalase, sensibilidade a bacitracina e teste Pyrrolidonil Arilamidase (PYR)... A prevalência de S pyogenes encontrada está relacionada às condições geográficas sazonais, socioeconômicas e ambientais da região habitada. A importância do diagnóstico correto direciona a população para o tratamento adequado, visando a erradicação da bactéria, prevenindo as complicações supurativas e não supurativas, contribuindo também para o uso racional dos antimicrobianos.

Análise comparativa de métodos para identificação do Streptococcus pyogenes em secreção de orofaringe de escolares em Recife - PE, Brasil / Comparative analysis of methods for identificacion of Streptococcus pyogenes in throat secretion of school children in Recife-PE, Brazil

Os Streptococcus pyogenes b-hemolíticos do Grupo A (SBGA) são de relevante importãncia clínico epidemiológica, estando relacionados a patologias importantes. Com o objetivo de analisar a prevalência desta infecção em orofaringe de escolares assintomáticos e comparar métodos de diagnóstico do S. pyogenes, foi conduzido um estudo clínico-microbiológico. Foram cadastrados 873 escolares em 2 escolas públicas, a análise microbiológica da secreção orofaringeana foi realizada através do cultivo em meio de Agar sangue de carneiro 5%. SBGA foram identificados através dos testes de bacitracina Pyr e aglutinação em látex. Dos 873 escolares, foram examinados 753, a faixa etária variou de 5 a 18 anos de idade, sendo 54,3% do sexo masculino e 45,7% do sexo feminino. Foram identificados 6 portadores assintomáticos do SBGA, os quais foram submetidos ao tratamento com penicilina. O diagnóstico microbiológico do S. pyogenes realizado demonstrou que o teste de bacitracina apresentou um índice de concordância Kappa fraco e o Pyr teste regular quando comparados com a técnica aglutinação em látex. Nossos resultados mostram que apenas a utilização de testes presuntivos bacitracina e Pyr teste não propiciam o diagnóstico do SBGA, necessitando da utilização de testes específicos para identificação do sorogrupo dos estreptocos.

Streptococcus betahemolíticos en la orofaringe de escolares asintomáticos de dos instituciones del estado Zulia / Betahemolytic streptococcus in the oropharynx of asymptomatic school children from two institutions of the Zulia state

Exudados faríngeos de 331 pacientes asintomáticos, pertenecientes a dos instituciones escolares de esta ciudad, fueron procesados para investigar Streptococcus betahemolíticos. Los especímenes fueron inoculados en agar sangre de carnero con Kanamicina. La identificación presuntiva se efectuó según Facklam y cols., y la definitiva mediante pruebas inmunológicas. Del total de muestras procesadas, 129 (38,9 por ciento) fueron positivas para estas bacterias. La distribución por grupo serológico fue el siguiente: el 28,24 por ciento del grupo B, el 19,85 por ciento de los grupos G y F, el 16,03 por ciento del grupo A, el 10,69 por ciento del grupo C, y no agrupables el 5,34 por ciento. La mayor incidencia de estreptococos betahemolíticos correspondió al grupo etario de 7-10 años. En este estudio se obtuvieron 2 cepas (5,26 por ciento) pertenecientes al grupo B, susceptibles a la bacitracina (0,04 U). Microorganismos del grupo F (11,53 por ciento) y del G (7,69 por ciento) hidrolizaron el hipurato de sodio. El 100 por ciento de los aislamientos fueron sensibles a la penicilina y a los antibióticos de 2da y 3ra elección. Considerando el número de portadores asintomáticos, de estos microorganismos, es necesario aplicar medidas para el control de los mismos

Estreptococos betahemolíticos en la faringe de personal militar / Betahemolytic streptocococci in the pharynx of military personnel

Muestras de exudado faríngeo de 181 pacientes asintómaticos, pertenecientes a dos instituciones militares de Maracaibo, se procesaron para la investigación de estreptococos betahemolíticos. Las muestras fueron inoculadas en agar de sangre de carnero con Kanamicina, y la identificación se efectuó mediante pruebas bioquímicas y serológicas. Del total de muestras procesadas, 79 (43,64 por ciento) fueron positivas. la distribución por grupos serológicos fue la siguiente: G: 40 (50,63); B: 19 (24,05 por ciento); A: 11(11,92 por ciento); C: 7 (8,86 por ciento); F: 2 (2,53 por ciento). 7 (17,50 por ciento) del grupo G fueron susceptibles a bacitracina. Todos los aislamientos resultaron sensibles a penicilina. Se requiere continuar las investigaciones, a fin de establecer si el estado de portador constituye una fuente de diseminación de estreptococos betahemolíticos, particularmente de los grupos A, C y G, que han sido asociados con secuelas no supurativas

Contaminación bacteriana y presencia de Sinorhizobium meliloti en aguas de los canales de riego del río Neuquén / Bacterial contamination and presence of Sinorhizobium meliloti in irrigation canal water from the NeuquÚn River

A survey of the changes in populations of heterotrophic bacteria, coliform microorganisms and S. meliloti was conducted in samples taken from the water irrigation channels of the NeuquÚn River (Argentina). Fifty-six water samples were collected during the spring-summer seasons of 1997-1999 years. Both the heterotrophic plate count bacterial and the number of coliforms oscillated between 110-5050 CFU/ml and 8-1400 CFU/100 ml, respectively, during the period this study was carried out. Fecal coliforms were detected in 91.1 of the water samples investigated. Moreover, the results showed that S. meliloti capable of nodulating alfalfa (Medicago sativa L.) Cuf 101 were present in 68 of the water samples and in effectiveness studies, no isolate out of 25 evaluated could be classified as superior N fixers. That is, they did not produce plants equal in weight to nitrate-grown plants (KNO3 0.05). All the S. meliloti strains were resistant to novobiocin and bacitracin, while 72 of the microsymbionts demonstrated resistance to between seven and ten antibiotics. Results presented in this study showed that irrigation waters of the NeuquÚn river could act as dispersal agents of both ineffective S. meliloti strains and thermotolerant coliform bacteria.

Uso de bacitracina, L-piroglutamil amilaridasa y aglutinación en el diagnóstico de streptococcus B-hemolítico / Bacitracin, L-piroglutamyl amilaridase use and agglutination in B-hemolytic streptococcus identification

La utilización de la hidrólisis de pirrolidonyl B naftalamida (PYR) para la identificación presuntiva de Streptococcus B hemolitico grupo A, fue comparada con la prueba de susceptibilidad a discos de bacitracina 0.04 U, usando el método de aglutinación como estándar. El 99,3 por ciento de los Streptococcus grupo A fue correctamente identificado con PYR y el 100 por ciento con la prueba de bacitracina; esta última dio falsos positivos en 83,9 por ciento de las cepas grupo G, 85,7 por ciento en el grupo C y 20 por ciento en el grupo B. Ambos métodos mostraron una alta sensibilidad para la identificación de Streptococcus grupo A y destaca la especificidad de la prueba de PYR (100 por ciento) con respecto a prueba de bacitracina (40,7 por ciento)

Characterization of bacillus polymyxa isolates from different Brazilian soils

Setenta e oito isolados de B. polymyxa foram obtidos de diferentes solos brasileiros com intuito de se identificar estirpes com marcadores geneticos que pudessem ser utilizadas em experimentos de troca gênica nesta espécie de Bacillus. O DNA destes isolados foi extraído e observou-se que 4 deles apresentavam um plasmídio de tamanho semelhante. Trinta e dois isolados (incluindo os 4 contendo plasmídio) foram escolhidos para estudos complementares. Todos eles mostraram-se resistentes à polimixina-B e à bacitracina e sensíveis aos outros 12 antibióticos testados. Todos os isolados produziram uma substância inibitória contra uma estirpe de Staphylococcus aureus RN45O e 7 contra uma estirpe de Pseudomonas sp. Dos 32 isolados, 25 mostraram-se sensíveis ao fago EPy-2, específico para B.polymyxa, e 2 foram capazes de fixar o nitrogênio atomosférico (teste de reduçäo de acetileno). Entretanto, nenhuma destas características acima mencionadas pode ser atribuída à presença do plasmídio, já que isolados curados (sem o plasmídio) apresentavam as mesmas características fenotípicas que aqueles contendo o plasmídio em questäo

Salmonella em raçäo para aves no Brasil / Salmonella in poultry feeds in Brazil

This experiment was undertaken to determine the possible presence of Salmonella in poultry diets.A total of two hundred samples of ration fr4om 4 commercial poultry feed industries were examined.The results revealed the presence of salmonellae in 10 cents of the samples studied and 14 serotypes were identified.The produce for Salmonella isolation included the pre-enrichment step and the strains were submited to antimicrobial tests.The 29 strains were resistant to the followings antimicrobial agents(porcents

Evaluación e la baciracina zinc, como promotor de crecimiento en tilapia híbrida (Oreochromis sp) / Zinc bacitracin growth promoter effect evaluated in hibrid tilapia (Oreocromis sp)

Se evaluó el efecto promotor de crecimiento de la bacitracina zinc en tilapia híbrida, para lo cual se utilizaron 40 tilapias híbridas divididas en cuatro lotes: 1, 2, 3 y el testigo. A todos los peces se les suministró alimento balanceado empastillado, al que se le adicionó 100 mg, y 150 mg de bacitracina zinc por kilogramo de alimento respectivamente para los tres primeros lotes; al lote testigo se le suministró alimento sin promotor de crecimiento. los resultados revelan que hubo diferencias significativas al menos en un tratamiento (P > .05 < .10), para los lotes con mayor ganancia de peso (lote 2 y testigo) se tuvo como resultado (P<.39). Se concluye que la inclusión de bacitracina zinc como promotor de crecimiento a las dosis antes indicadas, no tuvo efecto en la especie tratada.

Estreptococos do grupo C isolados no Brasil: incidência das espécies, perfil de seuscetibilidade à penicilina e eritromicina e comportamento frente ao teste da bacitracina / Group C streptococci: susceptilities to penicilin, erythromycin and bacitracin

Uma coleção de 27 amostras de estreptococos do grupo C de Lancefield tiveram suas espécies determinadas através de testes bioquímicos. As amostras foram também examinadas quanto à suscetibilidade à penicilina, eritromicina e bacitracina (discos contendo 0,04UI). Uma das amostras era padrão do sorogrupo e as demais foram isoladas no Brasil. Das 1127 amostras estudadas, 112 foram obtidas de material clínico humano, sendo 105 classificadas como S. equisimilis, 3 como S. anginosus, 3 como S. zooepidemicus e 1 como S. dysgalactiae. Dentre as 15 amostras de origem animal, 6 amostras eram de S. equisimilis e 9 de S. zoopidemicus. Quinze das amostras humanas foram sensíveis à bacitracina pelo método de difusão em disco. A concentração mínima inibitória (CMI) da penicilina para as 112 amostras humanas variou de 0,0075 a 0,12 ug/ml e de 0,0075 a 0,03 ug/ml para as 15 amostras animais. O valor da CMI mais encontrado nas amostras de ambas as origens foi de 0,015 ug/ml. Quatorze das 127 amostras foram resistentes à eritromicina sendo que 10 destas eram humanas (S. equisimilis) e 4 animais (3 de S. equisimilis e 1 de S. zooepidemicus). Até 6% dos estreptococos do grupo C são sensíveis à bacitracina (resiltados falso-positivos) e isto representa uma percentagem aceitável. Se estudos adicionais confirmarem nossas observações, esforços para melhorar a identificação de amostras de grupo C deveriam ser feitos para evitar uma incorreta identificação presuntiva como estreptococos do grupo A nos laboratórios de rotina. Mais atenção deveria ser dada para a suscetibilidade à eritromicina uma vez que 11% das nossas amostras foram resistentes a este antimicrobiano, enquanto que os dados da literatura relatam uma resistência em torno de 2%.

Comportamento bioquímico de amostras de Streptococcus beta hemolítico / Biochemical behavior of beta hemolytic Streptococcus strains

Avaliamos o comportamento de 165 amostras de Steptococcus beta hemolítico grupadas sorologicamente, frente às provas fisilógicas recomendadas para a sua identificaçäo presuntiva (teste de sensibilidade à bacitracina, teste CAMP, hidrólise do hipurato de sódio, teste da bile esculina e tolerância ao caldo hipercloretado). O teste de sensibilidade à bacitracina mostrou-se altamente sensível para a identificaçäo presuntiva do grupo A (100%), embora tenha fornecido resultados falso-positivos para os grupos B (23,2%), C (100%) e G (58,8%). O teste CAMP identificou 97,5% das amostras do grupo B, tendo sido observado um percentual de 13,5% de provas positivas para o grupo A. Näo houve falso-positivos para o teste de hipurato de sódio, que identificou 84,2% dos Sterptococcus do grupo b., todos os grupos foram negativos para o teste da bile esculina, enquanto 23,2% das amostras do grupo B foram tolerantes ao calcio hipercloretado. Pela análise do emprego simultâneo dos testes mencionados, verificamos que apenas para as amostras de Streptococcus do grupo B, com determinadaos padröes de comportamento, foi possível a identificaçäo definitiva . Para os demais grupos torna-se necessário a utilizaçäo de testes fisiológicos adicinonais ou a grupagem sorológica para o diagnóstico de certeza