Inmunotitulación del complejo piruvato deshidrogenasa en hígado de rata durante un régimen de inducción represión / Immunetitulation pyruvate liver rat during a token of induction repression

Los efectos de nutrientes sobre la cantidad de PDC presente en las mitocondrias hepáticas fueron estudiados en ratas Sprague-Dawley que recibieron dietas ricas en sacarosa. Después de 21 días de recibir una dieta rica en sacarosa, libre de grasa (SLG), los animales se separaron en dos grupos, uno que continuó con la misma dieta (inducción) y el otro, la dieta suplementada con aceite de pescado al 10 por ciento (represión). Luego de 3 semanas, la actividad mitocondrial de PDC fue titulada con IgC anti-PDC de rata para establecer la cantidad de proteína necesaria para neutralizar 200 ug de IgG (PE; punto de equivalencia). La dieta SLG causó un incremento en la actividad del complejo y disminución en el PE en relación con los animales control, mientras que la dieta con aceite de pescado produjo efectos contrarios. La inmunotitulación es un método sensitivo para cuantificar cambios en la expresión de PDC causados por manipulaciones nutricionales

Efecto de dietas ricas en sacarosa, suplementadas o no con grasa poli-insaturada, sobre la expresión genética de la subunidad E1 del complejo piruvato deshidrogenasa en hígado de rata / Effect of dietary sucrose, supplementary or not with poli-unsaturated fat, on the genetic expression of the subunit E1 of pyruvate dehydrogenase complex in liver of rats

Cambios a largo plazo en la actividad del complejo piruvato deshidrogenasa (PDC) hepático en respuesta a distintas dietas modifican la cantidad de enzima presente. En este trabajo se determinaron los niveles de mRNA correspondientes a la subunidad E1 del complejo mediante RT-PCR semicuantitativo. Se determinó que la dieta rica en sacarosa produjo un incremento de 40 por ciento en los niveles de mRNA correspondiente a la subunidad E1 con respecto a los animales control luego de 7 días. Al cabo de 14 a 21 días, el incremento fue de sólo 20 por ciento. La adición de aceite de pescado a las dietas redujo los niveles de mRNA a niveles indistinguibles del control en sólo 7 días. La regulación de la expresión del gene para E1 puede atribuirse a modificaciones en las tasas de transcripción genética o en la estabilidad del mensajero transcrito, en forma similar a las enzimas que regulan la lipogénesis

Efectos de sustratos competitivos y de la insulina sobre la captación y el destino metabólico de la glucosa en corazón perfundido de ratas dislipémicas / Effects of competitive substrates ans insulin on glucose uptake and utilization in isolated perfused hearts of dyslipemic rats

Rats chronically fed (15 weeks) a sucrose-rich diet (SRD) developed hypertriglyceridemia (hyperTg), increased plasma free fatty acids (FFA), impaired glucose homeostasis and insulin insensitivity. An increase of Tg and glycogen (Gly) in heart muscle was also observed. HyperTg with altered glucose metabolism could have profound effects on myocardial glucose utilization. To test this hypothesis male Wistar rats were fed a semi-synthetic SRD (w/w: 62.5% sucrose, 8% corn-oil, 17% protein), and the control group (CD) received the same semi-synthetic diet, except that sucrose was replaced with starch for 90 days. At that time, the hearts from these animals were isolated and perfused for 30 min in the presence or absence of insulin (30 mU/ml). Levels of the exogenous substrates were similar to those found in the plasma of the animal in vivo in both dietary groups (glucose 8.5 mM, palmitate 0.8 mM in SRD and glucose 5-5 mM, palmitate 0.3 mM in CD). In the absence of insulin glucose uptake was reduced (40%) and lactate release was increased (50%) in SRD hearts. Glucose oxidation was depressed mainly due to both, an increase of PDH kinase and a decrease of 60% of PDHa (active form of PDHc). Insulin in the perfusion medium improved only glucose uptake. The results suggest that at least two different mechanisms might contribute to insulin resistance and to impaired glucose metabolism in the perfused hearts of dyslipemic SRD fed rats: 1) reduced basal and insulin-stimulated glucose uptake and its utilization and 2) increased availability and oxidation of lipids (low PDHa and PDH kinase activities), which in turn decreased glucose uptake and utilization. Thus, this experimental model may be useful to study how impaired glucose homeostasis, increased plasma FFA and hyperTg could contribute to heart tissue malfunction.