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1.
Clinics ; 68(6): 825-833, jun. 2013. graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-676926

RESUMO

OBJECTIVES: MiRNAs are intrinsic RNAs that interfere with protein translation. Few studies on the synergistic effects of miRNAs have been reported. Both miR-424 and miR-381 have been individually reported to be involved in carcinogenesis. They share a common putative target, WEE1, which is described as an inhibitor of G2/M progression. Here, we studied the synergistic effects of miR-424 and miR-381 on renal cancer cells. METHODS: The viability of 786-O cells was analyzed after transfection with either a combination of miR-424 and miR-381 or each miRNA alone. We investigated cell cycle progression and apoptosis with flow cytometry. To confirm apoptosis and the abrogation of G2/M arrest, we determined the level of pHH3, which is an indicator of mitosis, and caspase-3/7 activity. The expression levels of WEE1, Cdc25, γH2AX, and Cdc2 were manipulated to investigate the roles of these proteins in the miRNA-induced anti-tumor effects. To verify that WEE1 was a direct target of both miR-424 and miR-381, we performed a dual luciferase reporter assay. RESULTS: We showed that the combination of these miRNAs synergistically inhibited proliferation, abrogated G2/M arrest, and induced apoptosis. This combination led to Cdc2 activation through WEE1 inhibition. This regulation was more effective when cells were treated with both miRNAs than with either miRNA alone, indicating synergy between these miRNAs. WEE1 was verified to be a direct target of each miRNA according to the luciferase reporter assay. CONCLUSIONS: These data clearly demonstrate that these two miRNAs might synergistically act as novel modulators of tumorigenesis by down-regulating WEE1 expression in renal cell cancer cells. .


Assuntos
Humanos , Carcinoma de Células Renais/genética , Proteínas de Ciclo Celular/metabolismo , Ciclina B/metabolismo , Neoplasias Renais/genética , MicroRNAs/farmacologia , Proteínas Nucleares/metabolismo , Proteínas Tirosina Quinases/metabolismo , Western Blotting , Linhagem Celular Tumoral , Fenômenos Fisiológicos Celulares , Transformação Celular Neoplásica , Regulação para Baixo , Citometria de Fluxo , Regulação Neoplásica da Expressão Gênica , MicroRNAs/metabolismo , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real , Fatores de Tempo , Regulação para Cima
2.
RFO UPF ; 10(2): 97-102, jul.-dez. 2005. ilus
Artigo em Português | LILACS, BBO - Odontologia | ID: lil-442600

RESUMO

Foi realizada neste estudo uma análise da expressão das proteínas ciclina B1, Rb1 (gene do retinoblastoma 1), P27 (proteina 27), BMP4 (proteina morfogenética do osso) e LCA (antígeno leucocitário comum), pelo método imunoistoquímico da dupla marcação, em 24 casos de lesões proliferativas gengivais, divididas em três grupos de acordo com suas características histopatológicas: Grupo I (granuloma piogênico), Grupo II (fibroma ossificante periférico) e Grupo III (granuloma piogênico com calcificações). O LCA foi empregado como primeiro anti-corpo primário em todos as espécimes. Os genes ciclina B1, P27 e Rb1 têm um papel crítico na regulação da transição das fases do ciclo celular e frequentemente estão alterados em várias entidades neoplásicas. Portanto, foi objetivo do presente trabalho a comparação da expressão de tais proteínas entre as três lesões para obter informações sobre a atividade proliferativa das células presentes no tecido. O anticorpo anti-BMP4 foi empregado com o objetivo de avaliar e comparar sua expressão no estroma das lesões que produzem material mineralizado. Os resultados demonstraram semelhança quanto à expressão das proteínas ciclina B1, Rb1, P27 e LCA nas lesões do Grupo 1 e do Grupo III e expressão distinta em relação as lesões do Grupo II. A expressão da proteína BMP4 nas lesões dos Grupos II e III sugere origens diferentes para o material mineralizado de tais lesões. A ausência de expressão da proteína BMP4 nas lesões do Grupo I confrima a ausência de células osteoprogenitoras em seu estroma


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Receptores de Proteínas Morfogenéticas Ósseas , Ciclina B , Quinases Ciclina-Dependentes , Fibroma Ossificante , Granuloma Piogênico , Antígenos HLA , Proliferação de Células
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