RESUMO
The Notch signaling pathway plays an important role in development and physiology. In Drosophila, Notch is activated by its Delta or Serrate ligands, depending in part on the sugar modifications present in its extracellular domain. O-fucosyltransferase-1 (OFUT1) performs the first glycosylation step in this process, O-fucosylating various EGF repeats at the Notch extracellular domain. Besides its O-fucosyltransferase activity, OFUT1 also behaves as a chaperone during Notch synthesis and is able to down regulate Notch by enhancing its endocytosis and degradation. We have reevaluated the roles that O-fucosylation and the synthesis of GDP-fucose play in the regulation of Notch protein stability. Using mutants and the UAS/Gal4 system, we modified in developing tissues the amount of GDP-mannose-deshydratase (GMD), the first enzyme in the synthesis of GDP-fucose. Our results show that GMD activity, and likely the levels of GDP-fucose and O-fucosylation, are essential to stabilize the Notch protein. Notch degradation observed under low GMD expression is absolutely dependent on OFUT1 and this is also observed in Notch Abruptex mutants, which have mutations in some potential O-fucosylated EGF domains. We propose that the GDP-fucose/OFUT1 balance determines the ability of OFUT1 to endocytose and degrade Notch in a manner that is independent of the residues affected by Abruptex mutations in Notch EGF domains.
Assuntos
Animais , Proteínas de Drosophila/metabolismo , Drosophila melanogaster/genética , Fucosiltransferases/metabolismo , Guanosina Difosfato Fucose/metabolismo , Guanosina Difosfato Manose/metabolismo , Receptores Notch/metabolismo , Asas de Animais/metabolismo , Alelos , Proteínas de Drosophila/genética , Drosophila melanogaster/anatomia & histologia , Drosophila melanogaster/metabolismo , Endocitose/genética , Fucosiltransferases/genética , Guanosina Difosfato Fucose/genética , Guanosina Difosfato Manose/genética , Imuno-Histoquímica , Hibridização In Situ , Peptídeos e Proteínas de Sinalização Intracelular/genética , Proteínas Mutantes/genética , Proteínas Mutantes/metabolismo , Mutação/genética , Fenótipo , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , Receptores Notch/genética , Transdução de Sinais , Asas de Animais/anatomia & histologiaAssuntos
Expressão Gênica/genética , Infecções por Papillomavirus/genética , Infecções por Papillomavirus/prevenção & controle , Infecções por Papillomavirus/virologia , Neoplasias do Colo do Útero/genética , /biossíntese , /genética , Proteínas Oncogênicas/biossíntese , Proteínas Oncogênicas/genética , Proliferação de Células , Proteínas Mutantes/biossíntese , Técnicas de Cultura de Células/métodos , Técnicas de Cultura de Células , Controle de Vetores de Doenças , Western Blotting/métodosRESUMO
A doença de Huntington (DH) é um distúrbio hereditário autossômico dominante, que está relacionado à expansão das repetições de CAG (citosina-adenina-guanina) no braço curto do cromossomo 4, o que leva à formação de uma proteína mutante associada, principalmente, à destruição neuronal do estriado. Manifesta-se por transtornos motores, cognitivos e neuropsicológicos, evoluindo progressivamente para estado demencial grave. A patogênese da doença ainda apresenta pontos obscuros. No entanto, recentes investigações têm possibilitado maior entendimento de sua origem e evolução, assim como de outras doenças neurodegenerativas
Huntington's disease is a hereditary autosomal dominant disorder which occurs due to the expansion of the repetitions CAG on the short arm of chromosome 4, which leads to the formation of a mutant protein itself associated principally to the destruction of neuronal of the striated tissue. It manifests through motor, cognitive and neuropsychological disorders where it evolves progressively to a serious demential state. The pathogenesis of this disease still presents obscure points although recent investigations made it possible to understand it better in its origin and evolution, the same as with other neurodegenerative diseases