Efectos biológicos en células HEp-2, en la multiplicación del adenovirus tipo 6 y en la concentración de interferón en plasma humano en presencia de un RNA de transferencia fúngico / Biological effects in HEp-2 cells, adenovirus type 6 and interferon concentration in human plasma in the presence of a fungal transfer RNA

Introducción: Trabajos previos mostraron la capacidad antiviral in vitro, así como la utilidad como inductor de interferón natural (IFN-n) in vivo de un RNA de transferencia (tRNA) de origen fúngico, por este motivo se sigue estudiando esta molécula como una alternativa para el tratamiento antiviral. Objetivos: Estudiar el efecto del tRNA fúngico en la viabilidad, síntesis de DNA y en la multiplicación del adenovirus tipo 6 (AV-6) en células HEp-2, comparado su efecto con el producido por el polyl:polyC o por IFN-Ó. Valorar su capacidad como unductor a largo plazo de la síntesis de IFN-n in vivo. Material y métodos: Células HEp-2 se incubaron con diferentes concentraciones de las moléculas mencionadas durante 24 horas, y se determinó la viabilidad y la síntesis de DNA celular; adicionalmente cultivos tratados en las mismas condiciones se infectaron con 200 unidades formadoras de placas (ufp) del AV-6, se incubaron cinco días adicionales, y se valoró el grado de protección. In vivo a siete voluntarios clínicamente sanos se les administró intramuscularmente una dosis única de 100 mg del tRNA, y se determinó mediante la técnica de inhibición del efecto citopático (ECP) el nivel sérico de IFN-n, cinco días después de la inoculación. Resultados. El tRNA protegió a las células HEp-2 contra la infección por AV-6, mejor que el polyl:polyC y de forma similar al IFN-Ó. Ninguna de las tres sustancias afectó significativamente la viabilidad celular. En cambio, la síntesis de DNA sí disminuyó de manera directa en relación con la concentración de los inductores, no así con el IFN-Ó. En los plasmas de los sujetos tratados con el tRNA fúngico se encontró un aumento en la concentración de IFN-n (de 84.2 ñ 107.6 a 171.42 ñ 129.5 UI/mL) a los cinco días, aunque la diferencia no fue estadísticamente significativa. Conclusión. El tRNA fúngico mostró actividad antiviral contra el AV-6, no afectó la viabilidad pero sí la síntesis celular de DNA, y con una capacidad de mantener elevada hasta por cinco días la concentración plasmática de IFN-n en humanos

Los inductores de la síntesis de interferón endógeno ¿una posible opción terapéutica? / Endogenous interferon synthesis inducers. A possible therapeutic option?

La linfocina conocida como interferón (IFN) existe en tres tipos principales (-Ó, -ß y -ç), cada uno de ellos con diferente capacidad como agente antiviral, antitumoral o como inmunomodulador, esta características motivaron su aplicción exógena desde su descubrimiento como terapia para el tratamiento de diversos padecimientos, esto sin embargo, trajo consigo severos efectos colaterales del IFN exógeno, y de estimular la síntesis endógena en el organismo para aprovechar sus propiedades en la eliminación de alguna enfermedad (viral, tumoral, etc.), se han probado una enorme cantidad de compuestos, tanto de origen natural como sintético (inductores), lamentablemente hasta el momento no se ha encontrado al inductor idóneo, debido principalmente a factores, como: el tipo y grado de la infección o proceso tumoral, población estudiada, toxicidad de la molécula, etc., por estos motivos son necesarios la realización de un mayor número de trabajos para encontrar al mejor inductor, capaz de utilizarse con fines terapéuticos y que además muestre un mínimo de efectos secundarios al paciente al cual se aplique. En el presente trabajo se revisan algunos estudios que hablan de la utilidad, así como de los efectos secundarios de los inductores de la síntesis de IFN como el polyA:polyU, el PolyI:polyC, PolyI:polyC12U, Ridostine, Bropirimine y de un ARNt de orgien fúngico utilizados en el tratamiento de procesos infecciosos y tumorales

Hemangioendotelioma kaposiforme associado à síndrome de Kasabach-Merritt / Kaposiform hemangioendothelioma associated with Kasabach-Merritt

Objetivo: Descrever um caso de hemangioendotelioma kaposiforme, único tumor malígno de origem vascular específico da infância. Métodos: Relata-se o caso de lactente do sexo feminino com 40 dias de vida que apresentava um hemagioma gigante da face. O tumor evoluiu com crescimento rápido levando à compressäo da laringe com insuficiência grave. A criança tinha ainda uma coagulopatia trombocitopênica de consumo (síndrome de Kasabach-Merritt). Resultados: Ela foi admitica à UTI Pediátrica do Hospital das Clínicas da Universidade Estadual de Campinas e foi iniciada ventilaçäo mecânica. O tratamento durante dez dias com dexametasona levou à melhora por curto período. Foi inciado interferon alfa-2a na dose de 1,8 milhöes de unidades/m²/dia por via subcutânea, porém a paciente foi à óbito 4 dias após o início dessa terapia. A necrópcia revelou o diagnóstico de um hemangioendotelioma kapasiforme. Conclusäo: Discutem-se a evoluçäo fatal pouco freqüente de um hemangioma gigante e suas complicaçöes hematológicas.

Indución a la producción de interferón endógeno en humanos e inhibición de la replicación in vitro de adenovirus tipo 6, virus herpes simple tipo 1 y virus sincitial respiratorio utilizando un ARN de transferencia / Induction of endogenous interferon production in humans and inhibition of the in vitro replication of type 6 adenovirus, type I herpes simplex virus, and respiratory syncytial virus using a transfer RNA

El interferón (IFN) es una linfocina con actividad inmunomoduladora, antitumoral y antiviral; por esta razón en numerosos laboratorios se trabaja intensamente en la búsqueda de nuevas moléculas capaces de inducir su producción de manera natural en el organismo humano, y de este modo utilizarlas contra diferentes padecimientos (virales y tumorales). Con este fin, en el presente trabajo se evaluó la capacidad de un ARN de transferencia (ARNt) de origen fúngico, como agente inductor de la síntesis de interferón tanto in vivo como in vitro. Para ésto, se aplicaron por vía intramuscular 200 mg del inductor a siete sujetos clínicamente sanos; a cada uno de ellos se les tomó dos muestras de sangre para obtener el plasmo, una antes de la aplicación del ARNt y otra 2 horas después. A las muestras de plasma se les determinó el nivel de interferón mediante la técnica de inhibición del efecto citopático utilizando el virus de la estomatitis vesicular. Los niveles de interferón en los plasmas variaron de 10 a 320 unidades internacionales (UI) por mL, antes de la aplicación y de 80 a 1,280 UI/mL 2 horas después de la misma, al realizar el análisis estadístico las diferencias encontradas fueron significativas. Para valorar la capacidad del ARNt en la protección contra las infecciones virales in vitro, se incubaron células Vero con diferentes concentraciones del ARNt durante 24 h, posteriormente se infectaron con adenovirus tipo 6 (AV-6), virus de herpes simple tipo 1 (VHS-1) o virus sincitial respiratorio (VSR), los cultivos se incubaron cinco días adicionales y se cuantificó el efecto del inductor sobre la multiplicación viral. Los cultivos incubados previamente con el ARNt de origen fúngico, e infectados posteriormente con uno de los virus mencionados, presentaron menor daño citopático que los cultivos usados como controles virales; dicha reducción del efecto citopático fue dependiente de la dosis. Los resultados indican que el ARNt utilizado es capaz de estimular la síntesis de IFN in vivo e in vitro, lo cual abre la posibilidad de utilizarlo en el tratamiento de las infecciones virales, sólo en el tratamiento de las infecciones virales, sólo o en combinación con antivirales ya conocidos

Induçäo de interferon humano de membrana aminiótica: papel de particulas defectivas interferentes / induction of human amniotic interferon by strains of paramyxovirus: Role of defective interfering particles

Resumo: A amostra Cantell de vírus parainfluenza 1 necessita de partículas defectivas interferentes (DI) para a produçäo de interferon (IFN) humano. A amostra Mill Hill do vírus da doença de Newcastle aparentemente näo as requer, embopra seja um indutor de IFN ainda mais potente. Para examinar este comportamento diverso, foram feitas passagens seriadas em ovos embrionados em baixa e alta multiciplidade de infecçäo com estes vírus, sendo que esta última propicia a formaçäo de particulas DI. Após cada passagem, o interferon humano de membrana aminiótica (IFN-MA) foi induzido e foram determinados os títulos hemaglutinante e infeccioso dos vírus e o do IFN-MA. A amostra Cantell mostrou uma reduçäo de 10.000 vezes em seu titulo infeccioso com as passagens em alta multiciplidade. Os títulos de IFN-MA produzidos foram cerca de 300 unidades por ml nas passagens em baixa multiciplidade. Contudo, a capacidade indutora desta amostra subiu de 1.200 para 4.200 unidades por ml nas passagens com alta multiplicidade. Coma amostra Mill Hill, as passagens seriadas em baixa ou alta multiplicidade de infecçäo näo modificaram os títulos infectantes ou as quantidades geradas de IFN-MA pela amostrra Cantell. Com a amostra Mill Hill, todavia, näo pode ser demonstrada a formaçäo de partículas DI, nem modificaçöes dos títulos de IFN-MA foram observados com a adiçäo de partículas DI da amostra Cantell (au)

Jacalin: an excellent lectin for obtaining T cell growth activity from rat spleen cells

The parameters involved in the choice of an optimal T cell growth activity (TCGAc) induction protocol using rat spleen cells simultated with jacalin were studied. In the absence of serum, 5 microng/ml jacalin was sufficient to obtain maximal TCGAc, Supernatants could be harvested at any time between 24 and 72 h since significant consumption of TCGAc was not observed during this interval. TCGAc recovery was increased in the presence of 5% fetal calf serum, with the optimal jacalin dose being about 25 microng/ml. The recommended harvesting time was 24 h to reduce TCGAc loss due to cellular proliferation. Human or rat sera were not suitable since they absorb significant amounts of jacalin, thus shifting the optimal lectin concentration to > 800 microng/ml. Indomethacin (1 microng/ml) had little enchancing effect on TCGAc production by rat cells but rendered conditioned media less inhibitory of cytotoxic T lymphocyte L (CTLL) proliferation. Addition of 50 ng/ml phorbol myristate acetate is not recommended if the supernatants are to be used for T cell line maintenance, since the agent interferes with CTL function, while only doubling TCGAc production. Jacalin-stimulated TCGAc recovery is comparable, in titer, to that obtained with concanavalin A under the best conditions, but the former is less expensive due to the large quantities of lectin recovered from a single jackfruit, besides being less toxic for rat spleen cells