Natural infection by Microsporum canis in a capuchin monkey / Infeção natural por Microsporum canis em macaco capuchinho

This paper described a case of a capuchin monkey (Sapajus libidinosus) with non-pruritic skin lesions. During the physical examination, multifocal areas of alopecia with crusts, erythema and scaling compatible with dermatophytosis were reported on the right fore and hind limbs and on tail. Fungal culture findings revealed a diagnosis of dermatophytosis due to Microsporum canis. The animal was successfully treated with itraconazole. This is the first report of a dermatophytosis case in S. libidinosus and the first description of an effective treatment in this species.

O presente trabalho relata o caso de um macaco capuchinho (Sapajus libidinosus) com lesões de pele não-pruriginosas. Durante o exame físico foram encontradas lesões multifocais com crostas, eritema e descamação compatíveis com dermatofitose, nos membros anterior e posterior direitos, bem como na cauda. O animal não tinha outras alterações. O diagnóstico de dermatofitose por Microsporum canis foi realizado através de cultura fúngica das lesões. O animal foi tratado com sucesso com itraconazol. Este é o primeiro relato de um caso de dermatofitose em S. libidinosus e a primeira descrição de um tratamento eficaz para esta espécie.

Natural infection by Microsporum canis in a capuchin monkey / Infeção natural por Microsporum canis em macaco capuchinho

This paper described a case of a capuchin monkey (Sapajus libidinosus) with non-pruritic skin lesions. During the physical examination, multifocal areas of alopecia with crusts, erythema and scaling compatible with dermatophytosis were reported on the right fore and hind limbs and on tail. Fungal culture findings revealed a diagnosis of dermatophytosis due to Microsporum canis. The animal was successfully treated with itraconazole. This is the first report of a dermatophytosis case in S. libidinosus and the first description of an effective treatment in this species.(AU)

O presente trabalho relata o caso de um macaco capuchinho (Sapajus libidinosus) com lesões de pele não-pruriginosas. Durante o exame físico foram encontradas lesões multifocais com crostas, eritema e descamação compatíveis com dermatofitose, nos membros anterior e posterior direitos, bem como na cauda. O animal não tinha outras alterações. O diagnóstico de dermatofitose por Microsporum canis foi realizado através de cultura fúngica das lesões. O animal foi tratado com sucesso com itraconazol. Este é o primeiro relato de um caso de dermatofitose em S. libidinosus e a primeira descrição de um tratamento eficaz para esta espécie.(AU)

Comparison of phenotypic and genotypic identification methods of Pasteurella multocida serotypes isolated from pigs

Background: Pasteurella multocida serotypes A and D are commonly associated with pneumonia and pleuritis in pigs. Different phenotypic techniques, such as hyaluronidase and acriflavine tests, and genotyping techniques, such as PCR, are used to distinguish between these serotypes. The objective of this study was to compare the capsular identification methods of type A and type D P. multocida isolated from pigs using both phenotypic (hyaluronidase and acriflavine tests) and genotypic (multiplex PCR) techniques. Materials, Methods & Results: A total of 44 lyophilized P. multocida isolates, obtained between 1981 and 1997 from pig farms at Rio Grande do Sul State, Brazil, were analyzed. The isolates were reactivated in Brain Heart Infusion (BHI) broth and cultured in BHI broth and blood agar supplemented with 5% sheep blood. Colony identity was further confirmed by evaluating colony morphology in blood agar and confirming the absence of growth on MacConkey agar. Bacteria in Tryptone Soy Agar (TSA) were used for the Triple Sugar Iron (TSI), Sulfide-Indole-Motility (SIM), and nitrate, glucose, lactose, sucrose and mannitol fermentation tests. For hyaluronidase test, P. multocida colonies were streaked transversally across the entire plate, approximately 3-5mm apart, in order to observe their lines of growth. Following this, a hyaluronidase producing strain of Staphylococcus aureus[...](AU)

Frequency of Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) in fattening pigs in the state of Rio Grande do Sul, Brazil

Background: Staphylococcus (S.) aureus is an important nosocomial pathogen in humans and animals worldwide. The commonest class of antibiotics used to treat staphylococcal infections is the -lactams. Frequently, S. aureus strains show high resistance to methicillin and other -lactam antibiotics, called Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Although MRSA has emerged at slower rate in domestic animals, it has frequently been found in the nasal cavity of healthy piglets and its transmission between pigs and swine handlers has already been studied. The aim of this work was to assess the presence of MRSA in finishing pigs in the state of Rio Grande do Sul, Brazil. Materials, Methods & Results: A total of 350 nasal swabs were collected from 10 to 20 week old finishing pigs. Sampling was performed in five pig farms in northeast Rio Grande do Sul State, Brazil. Swabs were stored in tubes without transport medium and carried to the laboratory under refrigeration. The specimens were cultured in selective and differential Agar (Baird Parker) and then were incubated at 37ºC for 48 h. After isolation of typical colonies of S. aureus, they were inoculated in BHI (Brain Heart Infusion) broth at 37ºC for 24 h and tested for tube coagulase activity. Coagulase positive samples were selected for growth in Oxacillin Resistant Screening Agar (ORSA) supplemented with 2 mg/L [...](AU)

Frequency of Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) in fattening pigs in the state of Rio Grande do Sul, Brazil

Background: Staphylococcus (S.) aureus is an important nosocomial pathogen in humans and animals worldwide. The commonest class of antibiotics used to treat staphylococcal infections is the -lactams. Frequently, S. aureus strains show high resistance to methicillin and other -lactam antibiotics, called Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Although MRSA has emerged at slower rate in domestic animals, it has frequently been found in the nasal cavity of healthy piglets and its transmission between pigs and swine handlers has already been studied. The aim of this work was to assess the presence of MRSA in finishing pigs in the state of Rio Grande do Sul, Brazil. Materials, Methods & Results: A total of 350 nasal swabs were collected from 10 to 20 week old finishing pigs. Sampling was performed in five pig farms in northeast Rio Grande do Sul State, Brazil. Swabs were stored in tubes without transport medium and carried to the laboratory under refrigeration. The specimens were cultured in selective and differential Agar (Baird Parker) and then were incubated at 37ºC for 48 h. After isolation of typical colonies of S. aureus, they were inoculated in BHI (Brain Heart Infusion) broth at 37ºC for 24 h and tested for tube coagulase activity. Coagulase positive samples were selected for growth in Oxacillin Resistant Screening Agar (ORSA) supplemented with 2 mg/L [...]

Comparison of phenotypic and genotypic identification methods of Pasteurella multocida serotypes isolated from pigs

Background: Pasteurella multocida serotypes A and D are commonly associated with pneumonia and pleuritis in pigs. Different phenotypic techniques, such as hyaluronidase and acriflavine tests, and genotyping techniques, such as PCR, are used to distinguish between these serotypes. The objective of this study was to compare the capsular identification methods of type A and type D P. multocida isolated from pigs using both phenotypic (hyaluronidase and acriflavine tests) and genotypic (multiplex PCR) techniques. Materials, Methods & Results: A total of 44 lyophilized P. multocida isolates, obtained between 1981 and 1997 from pig farms at Rio Grande do Sul State, Brazil, were analyzed. The isolates were reactivated in Brain Heart Infusion (BHI) broth and cultured in BHI broth and blood agar supplemented with 5% sheep blood. Colony identity was further confirmed by evaluating colony morphology in blood agar and confirming the absence of growth on MacConkey agar. Bacteria in Tryptone Soy Agar (TSA) were used for the Triple Sugar Iron (TSI), Sulfide-Indole-Motility (SIM), and nitrate, glucose, lactose, sucrose and mannitol fermentation tests. For hyaluronidase test, P. multocida colonies were streaked transversally across the entire plate, approximately 3-5mm apart, in order to observe their lines of growth. Following this, a hyaluronidase producing strain of Staphylococcus aureus[...]

NANOTECNOLOGIA APLICADA À ELABORAÇÃO DE CARRAPATICIDAS SINTÉTICOS ASSOCIADOS A COMPOSTOS VEGETAIS PARA O CONTROLE DE Rhipicephalus (Boophilus) microplus

Rhipicephalus microplus causa quedas na produção e consequentes prejuízos econômicos à pecuária. A resistência aos acaricidas e o risco da presença de resíduos nos alimentos de origem animal têm impulsionado a busca por novas alternativas de controle. Vários compostos vegetais possuem potencial acaricida/repelente, porém, possuem limitações em sua aplicação. Nanocarreadores podem proteger esses compostos, aumentar sua solubilidade aquosa e biodisponibilidade, além de reduzir possíveis efeitos tóxicos. Dessa forma, o objetivo desse estudo foi desenvolver formulações carrapaticidas a partir de Nanopartículas Lipídicas Sólidas (NLS), Carreadores Lipídicos Nanoestruturados (CLN) e Nanopartículas de Zeína (NZ), associados à cipermetrina, clorpirifós e um composto vegetal (citral, mentol ou limoneno), caracterizar esses sistemas nanocarreadores e verificar sua atuação contra larvas e fêmeas ingurgitadas de R. microplus. Nove formulações foram desenvolvidas e caracterizadas por Dynamic Light Scattering (DLS) e Nanoparticle Tracking Analysis (NTA). As formulações 1 (NLS+cip+clo+citral), 2 (NLS+cip+clo+mentol), 3 (NLS+cip+clo+limoneno), 4 (CLN+cip+clo+citral), 5 (CLN+cip+clo+mentol) e 6 (CLN+cip+clo+limoneno) obtiveram médias de diâmetro de 286 a 304 nm; polidispersão de 0,16 a 0,18; potencial zeta de -15,8 a -20 mV, concentração de 3,37 ± 0,24 x 1013 a 5,44 ± 0,18 x 1013 partículas/mL; e Eficiência de Encapsulação (EE) > 98,01% para todos os princípios ativos, enquanto, para os mesmos parâmetros, as formulações de zeína NZ-1 (NZ+cip+clo+citral), NZ-2 (NZ+cip+clo+mentol) e NZ-3 (NZ+cip+clo+limoneno) obtiveram, respectivamente, valores médios de: 282,18 a 290,64 nm; 0,24 a 0,25; -3,35 a -6,10 mV; e concentração de 2,73 ± 2,67 x 1013 a 3,20 ± 3,03 x 1013 partículas/mL e EE > 96%. Todas as formulações foram avaliadas quanto ao seu potencial acaricida e comparadas com controles positivo (Colosso®) e negativos (água destilada; e nanopartículas sem princípio ativo). Na avaliação das formulações de nanocarreadores lipídicos, pelo Teste de Pacote de Larvas (TPL), os controles negativos não ocasionaram mortalidade das larvas, enquanto o controle positivo, avaliado na concentração de 0,512 mg.mL-1, causou 100% de mortalidade. As formulações de NLS 1, 2, 3 e de CLN 4, 5 e 6 foram avaliadas de 0,004 a 0,466 mg.mL-1. Na concentração de 0,007 mg.mL-1 atingiram 90,4, 75,9, 93,8, 100, 95,1, 72,7 % de mortalidade. Com excessão da 4, para a qual não foi possível determinar concentrações letais (CL), as formulações 1, 2, 3, 5 e 6 resultaram em CL50 e CL90 de: 0,0033 e 0,0072; 0,0054 e 0,0092; 0,0040 e 0,0081; 0,0023 e 0,0054; 0,0055 e 0,0094 mg.mL-1, respectivamente. Em relação às nanoformulações de zeína avaliadas pelo TPL, os controles negativos também não ocasionaram mortalidade das larvas, entretanto, o controle positivo (avaliado de 0,004 a 0,512 mg.mL-1), resultou em mortalidade de larvas > 71,9% na concentração de 0,064 mg.mL-1, enquanto as formulações de zeína (avaliadas de 0,004 a 0,466 mg.mL-1) ocasionaram mortalidade > 80 % na concentração de 0,029 mg.mL-1. Essas formulações NZ-1 (NZ+cip+clo+citral), NZ-2 (NZ+cip+clo+mentol) e NZ-3 (NZ+cip+clo+limoneno) ainda resultaram em altas taxas de mortalidade de larvas em menores concentrações, com CL50 e CL90 de: 0,0136 e 0,0352; 0,0115 e 0,0386; 0,0117 e 0,0301 mg.mL-1, respectivamente, e 0,0319 e 0,1028 mg.mL-1,vi respectivamente, para o controle positivo). As formulações de zeína foram também avaliadas pelo Teste de Imersão de Adultos (TIA) e as formulações NZ-1, NZ-2 e NZ-3 obtiveram, respectivamente: 50,2, 40,5 e 60,1% de eficácia sobre fêmeas ingurgitadas na concentração de 0,466 mg.mL-1, enquanto o controle positivo resultou em 39,4% de eficácia a 0,512 mg.mL-1. As formulações de zeína ainda apresentaram uma alta atividade residual, embora menor do que a do controle positivo. Esse estudo demonstrou que foi possível encapsular os princípios ativos priorizados e caracterizar os sistemas carreadores. Todas as nanoformulações foram capazes de proteger os princípios ativos contra a degradação em solução, o que é uma característica de estabilidade visada para produtos carrapaticidas comerciais. Dessa forma, nanoformulações podem ser uma alternativa para o desenvolvimento de novos biocarrapaticidas com menor quantidade de princípios ativos, visando-se promover um controle parasitário mais seguro, com menor risco de presença de resíduos nos alimentos de origem animal e no ambiente.

Rhipicephalus microplus causes declines in cattle production and consequent damage to livestock. The resistance of ticks and the risk of the presence of residues in food of animal origin have driven the search for new control alternatives. Several plant compounds have an acaricidal/repellent potential, however, they have limitations in their application. Nanocarriers can protect these compounds, increase their aqueous solubility and bioavailability, and reduce possible toxic effects. Thus, the objective of this study was to develop acaricide formulations from Solid Lipid Nanoparticles (NLS), Nanostructured Lipid Carriers (CLN) and Zein Nanoparticles (NZ), associated with cypermethrin (cip), chlorpyrifos (clo) and a plant compound (citral, menthol or limonene), characterize these nanocarrier systems and verify their performance against larvae and engorged females of R. microplus. Nine formulations were developed and characterized by Dynamic Light Scattering (DLS) and Nanoparticle Tracking Analysis (NTA). The formulations 1 (NLS+cip+clo+citral), 2 (NLS+cip+clo+menthol), 3 (NLS+cip+clo+limonene), 4 (CLN+cip+clo+citral), 5 (CLN+cip+clo+menthol) and 6 (CLN+cip+clo+limonene) obtained mean diameters from 286 to 304 nm; polydispersion from 0.16 to 0.18; zeta potential from -15.8 to -20 mV, concentration from 3.37 ± 0.24 x 1013 to 5.44 ± 0.18 x 1013 particles/mL; and Encapsulation Efficiency (EE) > 98.01% for all active ingredients, while, for the same parameters, zein formulations NZ-1 (NZ+cip+clo+citral), NZ-2 (NZ+cip+clo+menthol) and NZ-3 (NZ+cip+clo+limonene) obtained, respectively, mean values of: 282.18 to 290.64 nm; 0.24 to 0.25; -3.35 to -6.10 mV; concentration of 2.73 ± 2.67 x 1013 to 3.20 ± 3.03 x 1013 particles/mL and EE> 96%. All formulations were evaluated for their acaricidal potential and compared with positive (Colosso®) and negative (distilled water; and nanoparticles without active ingredient) controls. In the evaluation of lipid nanocarrier formulations, by the Larval Pack Test (TPL), the negative controls did not cause mortality of the larvae, while the positive control, evaluated at the concentration of 0.512 mg.mL-1, caused 100% mortality. The formulations of NLS 1, 2, 3 and CLN 4, 5 and 6 were evaluated from 0.004 to 0.466 mg.mL-1. At the concentration of 0.007 mg.mL-1 they reached 90.4, 75.9, 93.8, 100, 95.1, 72.7% of mortality. With the exception of 4, for which it was not possible to determine lethal concentrations (CL), formulations 1, 2, 3, 5 and 6 resulted in CL50 and CL90 of: 0.0033 and 0.0072; 0.0054 and 0.0092; 0.0040 and 0.0081; 0.0023 and 0.0054; 0.0055 and 0.0094 mg.mL-1, respectively. Regarding the zein nanoformulations evaluated by the TPL, the negative controls also did not cause mortality of the larvae, however, the positive control (evaluated from 0.004 to 0.512 mg.mL-1), resulted in larval mortality > 71.9% in the concentration 0.064 mg.mL-1, while zein formulations (evaluated from 0.004 to 0.466 mg.mL-1) caused mortality> 80% in the concentration of 0.029 mg.mL-1. These formulations NZ-1 (NZ + cip + clo + citral), NZ-2 (NZ + cip + clo + menthol) and NZ-3 (NZ + cip + clo + limonene) still resulted in high larval mortality rates in lower concentrations, with LC50 and LC90 of: 0.0136 and 0.0352; 0.0115 and 0.0386; 0.0117 and 0.0301 mg.mL-1, respectively, and 0.0319 and 0.1028 mg.mL-1, respectively, for the positive control). The zein formulations were also evaluated by the Adult Immersionviii Test (TIA) and the formulations NZ-1, NZ-2 and NZ-3 obtained, respectively: 50.2, 40.5 and 60.1% efficacy on engorged females at a concentration of 0.466 mg.mL-1, while the positive control resulted in 39.4% efficacy at 0.512 mg. mL-1. The zein formulations still showed a high residual activity, although less than that of the positive control. This study demonstrated that it was possible to encapsulate the prioritized active ingredients and characterize the carrier systems. All nanoformulations were able to protect the active ingredients against degradation in solution, which is a characteristic of stability aimed at commercial tick products. Thus, nanoformulations can be an alternative for the development of new biocarpathicides with less active ingredients, aiming to promote safer parasitic control, with less risk of the presence of residues in food of animal origin and in the environment.

Outbreak of cumarin poisoning in suckling piglets / Surto de intoxicação por cumarínico em leitões de maternidade

Background: Cumarin, also called warfarin, is used as an anticoagulant rodenticide. Pigs can be accidentally poisoned by ingestion of baits and/or dead rodents contaminated with cumarin and/or its criminal use. The clinical signs typically begin one to three days after ingestion of the rodenticide, when subcutaneous hematomas, epistaxis, among others symptoms, can be observed. The macroscopic and microscopic changes consist mainly of widespread hemorrhages in several organs. The objective of the present study is to report a rare case of cumarin poisoning in suckling piglets.Case: Four male piglets 18 days old were examined in the Department of Veterinary Pathology, Federal University of Rio Grande do Sul. The animals came from a farrowing unit located in the state of Rio Grande do Sul, Brazil, with a history of sudden death in piglets from different litters. The animals were submitted to necropsy. On external examination, the piglets had marked pallor of the oral and conjunctival mucosa and multiple petechiae and bruises on the skin of the ventral abdomen and bleeding on the white line of the hoof. During the internal examination, it was identified that there were multiple areas of hemorrhage in the subcutaneous tissue and skeletal muscles besides the thymus, liver, stomach, pancreas, bladder, kidney, heart and cerebellum. The mesenteric and inguinal lymph nodes, testicles and...(AU)

Derivados cumarínicos, também chamados varfarínicos, são compostos da cumarina utilizados como rodenticidas anticoagulantes em granjas de suínos como forma de controle de roedores [7]. Suínos podem se intoxicar acidentalmente através da ingestão de iscas e/ou roedores mortos por estas substâncias, ou pelo uso criminoso das mesmas [6]. Esses compostos inibem de forma competitiva a vitamina K epóxi redutase, enzima necessária para converter a vitamina K epóxi à sua forma reduzida, que é necessária para ativação dos fatores de coagulação II, VII, IX e X, consequentemente, a coagulação é comprometida [7]. A ingestão de 3 mg/kg em dose única pode ser suficiente para levar à intoxicação de suínos [2]. Já as doses de 0,05 mg/kg, se ingeridas por sete dias, também podem intoxicar os animais [5]. Os sinais clínicos normalmente surgem um a três dias após ingestão do raticida, sendo observados principalmente hematomas subcutâneos e epistaxe. As alterações macroscópicas e microscópicas consistem de hemorragias disseminadas em diversos órgãos [6]. O diagnóstico diferencial deve incluir carência de vitamina K; tratamento com quimioterápicos por períodos prolongados; intoxicação por chumbo, fosfato de zinco, ricina (da mamona), aflatoxinas e venenos ofídicos [6] e, principalmente, trombocitopenia púrpura dos leitões [9]. Dessa forma, a descrição de um surto de intoxicação por cumarínico pode...(AU)

Outbreak of cumarin poisoning in suckling piglets / Surto de intoxicação por cumarínico em leitões de maternidade

Background: Cumarin, also called warfarin, is used as an anticoagulant rodenticide. Pigs can be accidentally poisoned by ingestion of baits and/or dead rodents contaminated with cumarin and/or its criminal use. The clinical signs typically begin one to three days after ingestion of the rodenticide, when subcutaneous hematomas, epistaxis, among others symptoms, can be observed. The macroscopic and microscopic changes consist mainly of widespread hemorrhages in several organs. The objective of the present study is to report a rare case of cumarin poisoning in suckling piglets.Case: Four male piglets 18 days old were examined in the Department of Veterinary Pathology, Federal University of Rio Grande do Sul. The animals came from a farrowing unit located in the state of Rio Grande do Sul, Brazil, with a history of sudden death in piglets from different litters. The animals were submitted to necropsy. On external examination, the piglets had marked pallor of the oral and conjunctival mucosa and multiple petechiae and bruises on the skin of the ventral abdomen and bleeding on the white line of the hoof. During the internal examination, it was identified that there were multiple areas of hemorrhage in the subcutaneous tissue and skeletal muscles besides the thymus, liver, stomach, pancreas, bladder, kidney, heart and cerebellum. The mesenteric and inguinal lymph nodes, testicles and...

Derivados cumarínicos, também chamados varfarínicos, são compostos da cumarina utilizados como rodenticidas anticoagulantes em granjas de suínos como forma de controle de roedores [7]. Suínos podem se intoxicar acidentalmente através da ingestão de iscas e/ou roedores mortos por estas substâncias, ou pelo uso criminoso das mesmas [6]. Esses compostos inibem de forma competitiva a vitamina K epóxi redutase, enzima necessária para converter a vitamina K epóxi à sua forma reduzida, que é necessária para ativação dos fatores de coagulação II, VII, IX e X, consequentemente, a coagulação é comprometida [7]. A ingestão de 3 mg/kg em dose única pode ser suficiente para levar à intoxicação de suínos [2]. Já as doses de 0,05 mg/kg, se ingeridas por sete dias, também podem intoxicar os animais [5]. Os sinais clínicos normalmente surgem um a três dias após ingestão do raticida, sendo observados principalmente hematomas subcutâneos e epistaxe. As alterações macroscópicas e microscópicas consistem de hemorragias disseminadas em diversos órgãos [6]. O diagnóstico diferencial deve incluir carência de vitamina K; tratamento com quimioterápicos por períodos prolongados; intoxicação por chumbo, fosfato de zinco, ricina (da mamona), aflatoxinas e venenos ofídicos [6] e, principalmente, trombocitopenia púrpura dos leitões [9]. Dessa forma, a descrição de um surto de intoxicação por cumarínico pode...

AVALIAÇÃO DOS EFEITOS DE PRINCÍPIOS FITOTERÁPICOS E HOMEOPÁTICOS NO CONTROLE DE Rhipicephalus (Boophilus) microplus E COMPARAÇÃO DE TÉCNICAS PARA ESTIMATIVA DE ECLOSÃO DE LARVAS in vitro

O parasitismo por Rhipicephalus (Boophilus) microplus ocasiona grandes perdas econômicas nos rebanhos bovinos, e seu controle por meio de carrapaticidas sintéticos enfrenta problemas de resistência, além do risco de resíduos nos alimentos e ambiente. Com o objetivo de contribuir com informações relevantes para o controle desse parasita, o presente estudo teve três objetivos: 1) avaliar in vitro o efeito do óleo essencial de Ocotea elegans canela-sassafrás sobre larvas e fêmeas ingurgitadas de R. (B.) microplus; 2) avaliar medicamento homeopático no controle de infestações naturais; 3) comparar as técnicas de estimativa visual e de quantificação por amostragem de larvas eclodidas no teste de imersão de fêmeas adultas, visto a importância dessas no levantamento de substâncias com ação carrapaticida. No primeiro experimento Efeito acaricida e repelente in vitro do óleo essencial de Ocotea elegans (canela-sassafrás) sobre Rhipicephalus (Boophilus) microplus, foram adotados os testes: contato de larvas em papel impregnado (LPI), teste de repelência larvar (TR) e imersão de fêmeas adultas (AIT). A fim de verificar a eficácia, O. elegans foi avaliada nas concentrações de 0,78 mg/mL a 100 mg/mL. No AIT, a partir da concentração de 25 mg/mL, a eficácia foi superior a 90%. Os LPI (48h) a 100 mg/mL resultaram em taxas de mortalidade acima de 70%. Já o TR obteve repelência superior a 80% a partir da menor concentração avaliada. Em relação às concentrações letais (CL), a menor CL50 obtida no LPI foi de 25,59 mg/mL 48h pós tratamento. As CL50 e CL90 no AIT foram de 4,96 e 17,37 mg/mL e no TR de 0,04 e 1,24 mg/mL, respectivamente. Foi possível concluir que O. elegans demonstrou efeito significativo sobre fêmeas ingurgitadas e de repelência das larvas, e possivelmente pode ser um adjuvante no controle do carrapato bovino, devendo-se priorizar testes in vivo. No segundo experimento, Estudo da homeopatia no controle de infestações naturais por R. (B.) microplus em bovinos de leite, 24 fêmeas da raça Holandesa e Jersey x Holandesa foram divididas nos grupos controle (placebo) (n=12) e tratado (bioterápico 30 CH + Sulphur 30 CH) (n=12), administrado no concentrado (2kg/animal/dia) por 12 meses. De cada grupo coletou-se fêmeas ingurgitadas, a fim de comparar os parâmetros reprodutivos, e semi-ingurgitadas para avaliações morfo-histológicas dos ovários. Mensurou-se o peso vivo (PV), volume globular (VG) e realizou-se contagens de fêmeas ingurgitadas no corpo dos animais. Os resultados médios de PV, VG e n° de carrapatos não foram diferentes estatisticamente para os grupos controle e homeopatia: 616,5 kg e 618,6 kg, 27,9% e 27,3%, 12,19 e 13,58 carrapatos, respectivamente. Nas análises in vitro, as médias do peso das fêmeas (0,18 e 0,17 g), peso dos ovos (0,07 e 0,06 g), % de eclosão de larvas (70,1 e 76,6%) e índice de eficiência reprodutiva (54,3 e 60,6%), para os grupos controle e homeopatia, respectivamente, também não tiveram diferença estatística. Além disso, nenhuma alteração nos ovários foi observada nos estudos em foto-microscopia. Portanto, o medicamento homeopático avaliado não foi eficaz no controle de R. (B.) microplus e não interferiu nos parâmetros reprodutivos das fêmeas ingurgitadas. Finalmente, no estudo Alternative methods for egg hatch evaluation of Rhipicephalus (Boophilus) microplus em que comparou-se duas técnicas de estimativa de eclosão de ovos, fêmeas ingurgitadas coletadas de bovinos foram submetidas ao AIT com extratos vegetais e mantidas em incubadora para realizar a oviposição. Os ovos foram transferidos para seringas e incubados por 15 dias. A eclosão dos ovos foi avaliada em 210 seringas por estimativa visual (%) e também contadas até 100, em três repetições. Foram encontradas diferenças significativas entre os dois testes. Na estimativa visual (56,8%) a porcentagem de eclosão média foi maior do que na quantificação por amostragem (48,0%). Na quantificação por amostragem, não foram observadas diferenças estatísticas nas contagens das três amostras (48,1, 47,8 e 48,1%) e a correlação entre as repetições foi de 0,96, sugerindo que a contagem de uma amostra é suficiente e o resultado independente do avaliador. O presente estudo contribuiu com informações inéditas sobre o potencial acaricida e repelente de O. elegans. Discutiu-se que apesar do medicamento homeopático não ter tido efeito, tal conclusão não pode ser estendida a outras formulações homeopáticas, vias de aplicação e condições de manejo adversas às do presente estudo. Por fim, os resultados do estudo comparativo contribuem para o aperfeiçoamento do AIT e podem estimular os pesquisadores a optar por técnicas mais confiáveis na avaliação da eclosão de ovos.

The parasitism by Rhipicephalus (Boophilus) microplus causes large economic loss in cattle herds and its control through chemical acaricides faces problems of resistance and residues in food and in the environment. Aiming to contribute with relevant information for the control of this parasite, the present study had three objectives: 1) evaluate the effect in vitro of Ocotea elegans essential oil on larvae and engorged females of R. (B.) microplus, 2) evaluate homeopathic medicine to control R. (B.) microplus natural infestations, and 3) compare visual estimation and quantification by sampling techniques of larvae hatching in the engorged females immersion test, due to the importance of this technique in the screening of substances with antiparasitic action. In the first experiment, "In vitro acaricidal and repellent effect of Ocotea elegans essential oil on R. (B.) microplus", were adopted the tests: larval packet test (LPT), the larval repellency test (RT) and the adult immersion test (AIT). In order to verify efficacy, O. elegans was evaluated at concentrations of 0.78 mg/mL to 100 mg/mL. In the AIT, from the concentration of 25 mg/ml, the efficacies were higher than 90%. LPT (48h) at 100 mg/mL resulted in mortality rates higher than 70%. The RT obtained repellency higher than 80% sice the lowest concentration evaluated. In relation to the lethal concentrations, the lowest LC50 obtained in the LPT was 25.59 mg/mL, 48 hours post treatment. The LC50 and LC90 in the AIT were 4.96 and 17.37 mg/mL and in TR were 0.04 and 1.24 mg/mL, respectively. It was possible to conclude that O. elegans had significant effect in engorged females and larvae repellency and may be in the future an adjuvant for tick control, prioritizing in vivo tests. In the second experiment, Study of homeopathy in the control of natural infestation of R. (B.) microplus in dairy cattle, 24 females of the Dutch and Jersey x Dutch breed were divided in the control group (placebo) and treated (biotherapic 30 CH + Sulphur 30 CH) (n=12), administered in the concentrate at 2 kg/animal/day for 12 months. It was collected in each group engorged females to compare the reproductive parameters, and semi-engorged females for the ovaries histologic evaluation. The live weight (LW), packed cell volume (PCV) and counts of engorged females in the animals body were held. The average results of LW, PCV and ticks were not statistically different in the control and homeopathic groups: 616.5 kg and 618.6 kg, 27.9% and 27.3%, 12.19 and 13.58 ticks, respectively. In the in vitro analyzes, the average weight of females (0.18 and 0.17 g), egg weight (0.07 and 0.06 g), larvae hatching % (70.1 and 76.6%) and reproductive efficiency index (54.3 and 60.6%), to control and homeopatic groups, respectively, had no statistical difference as well. In addition, no changes in the ovaries were observed in microscopy. Therefore, the homeopathic medicine assessed didnt present efficacy in the R. (B.) microplus control, and didnt interfere in the reproductive parameters of engorged females. Finally, in the study "Alternative methods for egg hatch evaluation of Rhipicephalus (Boophilus) microplus" in which two techniques of egg hatching estimation were compared, engorged females collected from cattle were subject to the AIT with plant extracts and kept in an incubator to perform oviposition. Eggs were transferred to syringes and incubated for 15 days. Egg hatching was evaluated in 210 syringes by visual estimation (%) and also counted until 100 in three repetitions. Significant differences were found between the two tests. In the visual estimation (56.8%) the hatching percentage average was higher than in the quantification by sampling (48.0%). In quantification by sampling, no statistical differences were observed in the pairwise counts between the three samples (48.1, 47.8 and 48.1%) and, the correlation of repetitions was 0.96, suggesting that the count of one sample is sufficient and the result should not differ much, regardless of the evaluator. The present study contributed with unreleased information about the acaricide and repellent effect of O. elegans. It was discussed that despite the homeopathic medicine had not effect, such conclusion cannot be extended to other homeopathic formulations, process of application and management conditions adverse to the present study. Finally, the results of the comparative study contribute for the improvement of the AIT and may encourage researchers to choose more reliable techniques in the assessment of the egg hatching.

PERFIL DE SUSCETIBILIDADE A ANTIMICROBIANOS DE ISOLADOS HISTÓRICOS E CONTEMPORÂNEOS DE Pasteurella multocida DE SUÍNOS

O primeiro estudo desenvolvido teve como objetivo determinar e comparar o perfil de suscetibilidade de isolados de P. multocida de suínos com lesões de pneumonia ou pleurite no Brasil durante dois períodos. A concentração inibitória mínima (CIM) de quatro antimicrobianos foi calculada para os isolados históricos (período de 1981 a 1997; n=44) e contemporâneos (período de 2011 a 2012; n=50) pelo teste de microdiluição em caldo segundo recomendações do CLSI. A menor frequência de isolados resistentes, tanto históricos quanto contemporâneos, foi observada para o florfenicol (0% e 6%, respectivamente), enquanto que a maior frequência foi observada para a tetraciclina (20,5% e 34%, respectivamente). Houve aumento do número de isolados resistentes para todos os antimicrobianos testados, devido, provavelmente, à pressão de seleção pelo uso de antimicrobianos para tratamento e prevenção de infecções por P. multocida. Em relação aos perfis de suscetibilidade, os isolados históricos e contemporâneos da P. multocida foram estatisticamente diferentes (p0.05) apenas para amoxicilina e enrofloxacina, que tiveram um aumento na frequência de isolados resistentes de 3,8% e 18%, respectivamente. Um segundo estudo foi desenvolvido com o objetivo de comparar os métodos de tipificação capsular dos sorotipos A e D de isolados de P. multocida de suínos utilizando técnicas fenotípicas (hialuronidase e acriflavina) e genotípica (PCR multiplex). Foram utilizados 44 isolados liofilizados de P. multocida de suínos do Rio Grande do Sul obtidos entre os anos de 1981 e 1997. Pelos testes fenotípicos, dois isolados foram classificados como tipo D (4,55%), 40 isolados como tipo A (90,9%) e dois isolados não foi tipificado (4,55%). No entanto, pelo teste genotípico, 38 isolados foram classificados como tipo A (86,36%) e 6 como tipo D (13,64%). Os resultados mostraram que, em alguns casos, não existe equivalência entre a tipificação fenotípica e genotípica de P. multocida, neste estudo diferindo em 4/44 isolados (9,09%). Foi concluído que a tipificação capsular de P. multocida pela PCR multiplex é mais eficiente e confiável que pelos métodos fenotípicos.

The first study was carried out to determine and to compare antimicrobial susceptibility profile of P. multocida isolated from pigs with lesions of pneumonia or pleuritis in Brazil during two time periods. Historical isolates (period of 1981 to 1997; n=44) and recent isolates (period of 2011 to 2012; n=50) were use to assessed the MIC of four antimicrobial agents by microbroth dilution following CLSI recommendations. Florfenicol had the lowest level of resistance for both historical and recent isolates (0% and 6%, respectively), while tetracycline had the highest (20.5% and 34%, respectively). Resistance increased in recent isolates for all antimicrobial tested, most likely due to the selective pressure of antimicrobial usage to treat and prevent P. multocida infections. Regarding to susceptibility profiles, historical and recent P. multocida isolates were statistically different (p0.05) only for amoxicillin and enrofloxacin, wich had an increase in the resistance of 3.8% and 18%, respectively. The second study was performed to compare the capsular identification methods of type A and type D P. multocida isolates from pigs using both phenotypic (hyaluronidase and acriflavine tests) and genotypic (multiplex PCR) techniques. A total of 44 lyophilized P. multocida isolates, obtained between 1981 and 1997 from pig farms at Rio Grande do Sul State were analyzed. Phenotypic tests showed that two isolates were type D (4.55%), 40 were type A (90.9%) and two (4.55%) were untypable isolates (4.55%), while PCR showed that 38 isolates were type A (86.36%) and six were type D (13.64%). The results show that, in same cases, there is no equivalence between phenotypic and genotypic typification of P. multocida, in this study differing in 4/44 isolates (9.09%). We conclude that the capsular identification of P. multocida by multiplex PCR is more efficient and reliable compared to the phenotypic methods.