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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-203130

Resumo

O primeiro estudo desenvolvido teve como objetivo determinar e comparar o perfil de suscetibilidade de isolados de P. multocida de suínos com lesões de pneumonia ou pleurite no Brasil durante dois períodos. A concentração inibitória mínima (CIM) de quatro antimicrobianos foi calculada para os isolados históricos (período de 1981 a 1997; n=44) e contemporâneos (período de 2011 a 2012; n=50) pelo teste de microdiluição em caldo segundo recomendações do CLSI. A menor frequência de isolados resistentes, tanto históricos quanto contemporâneos, foi observada para o florfenicol (0% e 6%, respectivamente), enquanto que a maior frequência foi observada para a tetraciclina (20,5% e 34%, respectivamente). Houve aumento do número de isolados resistentes para todos os antimicrobianos testados, devido, provavelmente, à pressão de seleção pelo uso de antimicrobianos para tratamento e prevenção de infecções por P. multocida. Em relação aos perfis de suscetibilidade, os isolados históricos e contemporâneos da P. multocida foram estatisticamente diferentes (p0.05) apenas para amoxicilina e enrofloxacina, que tiveram um aumento na frequência de isolados resistentes de 3,8% e 18%, respectivamente. Um segundo estudo foi desenvolvido com o objetivo de comparar os métodos de tipificação capsular dos sorotipos A e D de isolados de P. multocida de suínos utilizando técnicas fenotípicas (hialuronidase e acriflavina) e genotípica (PCR multiplex). Foram utilizados 44 isolados liofilizados de P. multocida de suínos do Rio Grande do Sul obtidos entre os anos de 1981 e 1997. Pelos testes fenotípicos, dois isolados foram classificados como tipo D (4,55%), 40 isolados como tipo A (90,9%) e dois isolados não foi tipificado (4,55%). No entanto, pelo teste genotípico, 38 isolados foram classificados como tipo A (86,36%) e 6 como tipo D (13,64%). Os resultados mostraram que, em alguns casos, não existe equivalência entre a tipificação fenotípica e genotípica de P. multocida, neste estudo diferindo em 4/44 isolados (9,09%). Foi concluído que a tipificação capsular de P. multocida pela PCR multiplex é mais eficiente e confiável que pelos métodos fenotípicos.

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The first study was carried out to determine and to compare antimicrobial susceptibility profile of P. multocida isolated from pigs with lesions of pneumonia or pleuritis in Brazil during two time periods. Historical isolates (period of 1981 to 1997; n=44) and recent isolates (period of 2011 to 2012; n=50) were use to assessed the MIC of four antimicrobial agents by microbroth dilution following CLSI recommendations. Florfenicol had the lowest level of resistance for both historical and recent isolates (0% and 6%, respectively), while tetracycline had the highest (20.5% and 34%, respectively). Resistance increased in recent isolates for all antimicrobial tested, most likely due to the selective pressure of antimicrobial usage to treat and prevent P. multocida infections. Regarding to susceptibility profiles, historical and recent P. multocida isolates were statistically different (p0.05) only for amoxicillin and enrofloxacin, wich had an increase in the resistance of 3.8% and 18%, respectively. The second study was performed to compare the capsular identification methods of type A and type D P. multocida isolates from pigs using both phenotypic (hyaluronidase and acriflavine tests) and genotypic (multiplex PCR) techniques. A total of 44 lyophilized P. multocida isolates, obtained between 1981 and 1997 from pig farms at Rio Grande do Sul State were analyzed. Phenotypic tests showed that two isolates were type D (4.55%), 40 were type A (90.9%) and two (4.55%) were untypable isolates (4.55%), while PCR showed that 38 isolates were type A (86.36%) and six were type D (13.64%). The results show that, in same cases, there is no equivalence between phenotypic and genotypic typification of P. multocida, in this study differing in 4/44 isolates (9.09%). We conclude that the capsular identification of P. multocida by multiplex PCR is more efficient and reliable compared to the phenotypic methods.

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