Ocorrência do gene da toxina da síndrome do choque tóxico em Staphylococcus spp. isolados de leite de vacas com mastite e de leite cru refrigerado / Occurrence of the toxic shock syndrome toxin gene in Staphylococcus spp.isolated from bovine mastitis milk and refrigerated raw milk

Avaliou-se a presença do gene (tst-1) para Toxina da Síndrome do Choque Tóxico-1 (TSST-1), utilizando-se a técnica de Reaçãoem Cadeia da Polimerase (PCR) em um total de 264 Staphylococcus spp. isolados de leite. Desses, 221 eram Staphylococcusaureus, 33 Staphylococcus coagulase negativo (SCN) e 10 Staphylococcus coagulase positivo (SCP). As amostras eram oriundasde vacas com mastite (n=96) e de leite cru refrigerado (n=168), coletadas de 46 e 22 propriedades, respectivamente. As amostrasforam coletadas de rebanhos localizados em diferentes regiões dos Estados de Minas Gerais e Rio de Janeiro. Observou-seproduto de amplificação (250 pares de base-pb) na reação de PCR para tst-1 em sete amostras (2,6%), sendo todas as estirpesidentificadas como Staphylococcus aureus isoladas de leite cru refrigerado. Embora a detecção do gene não indique a produçãoda toxina, o monitoramento de estirpes bacterianas potencialmente produtoras torna-se importante como forma de realizar umlevantamento epidemiológico e controle dos rebanhos leiteiros brasileiros, uma vez que esse gene está associado aos elementosgenéticos móveis, representando um risco à possível transferência horizontal de genes para outras bactérias. Além disso, a presençadesses genes tem sido associada à presença de genes para enterotoxinas estafilocócicas, o que pode implicar o aumento dapatogenicidade dos isolados bacterianos e um potencial risco à saúde pública.(AU)

Was evaluated the presence of the gene (tst -1) for toxic shock syndrome toxin - 1 (TSST -1), using the technique of PolymeraseChain Reaction (PCR) on a total of 264 Staphylococcus spp. isolated from milk. Of these, 221 were Staphylococcus aureus, 33Staphylococcus coagulase negative (SCN) and 10 Staphylococcus coagulase positive (SCP). The samples were from cows withmastitis (n=96) and refrigerated raw milk (n=168), collected from 46 and 22 dairy herds, respectively. Samples were collectedfrom herds located in different regions of Minas Gerais and Rio de Janeiro States. Was observed PCR amplification of the tst-1gene (250 base pairs-bp) in seven (2.6 %) samples, and all strains of Staphylococcus aureus isolated from refrigerated raw milk.Although its detection in isolated does not mean that it will be expressed, monitoring of bacterial strains producing potentiallybecomes important as performing an epidemiological survey and control of Brazilian dairy herds, since this gene is associatedwith mobile genetic elements, representing a risk to possible horizontal gene transfer to other bacteria. Furthermore, the presenceof these genes have been associated with the presence of genes for enterotoxins, which may result in increased pathogenicity ofthe isolates and a potential risk to public health.(AU)

Staphylococcus coagulase positivo isolado de leite cru de tanques comunitários / Coagulase-positive Staphylococcus isolated from raw milk tanks community

A presença de mastite bovina no rebanho, associada a falhas nas práticas de higiene, contribuem para a queda na qualidade do leite cru, bem como pode torná-lo impróprio para o consumo pela possível presença de enterotoxinas estafilocócicas. Neste trabalho, quantificou-se Estafilococos coagulase positivo (ECP) a partir dos leites de 210 produtores armazenados em sete diferentes tanques de refrigeração comunitários localizados em municípios da Zona da Mata Mineira. As amostras foram coletadas entre fevereiro e abril de 2009, seguindo plaqueamento em ágar Baird-Paker e incubação a 37 °C durante 48h. Cinco colônias apresentando características típicas para Staphylococcus foram isoladas e caracterizadas por métodos bioquímicos tradicionais. Os resultados mostraram que em todos os tanques avaliados (7/7) foram isolados ECP. Desses, contagens superiores a 103 UFC /mL foram encontradas em cinco tanques de expansão refrigerados, sendo que três ainda apresentaram contagens superiores a 105 UFC /mL. Estes níveis são alarmantes, uma vez que vários estudos têm demonstrado a capacidade de produção de enterotoxinas por Staphylococcus spp. por mecanismos de detecção de quórum nas quantidades populacionais encontradas no presente trabalho. Esta alta pontuação indica problemas de contaminação de ECP no processo de ordenha, e também um indicativo de animais com mastite. (AU)

The presence of bovine mastitis in herd, associated with failures in hygiene practices contribute to reduction in quality of raw milk, and may make it unsuitable for consumption by possible presence of staphylococcal enterotoxin. This work was quantified coagulase positive staphylococci (ECP) from the stored milk from 210 producers in seven different community cooling tanks located in cities in the Zona da Mata Mineira. Samples were collected between February and April 2009, following plating on Baird-Paker and incubation at 37 ° C for 48h. Five colonies with characteristics typical of Staphylococcus were isolated and characterized by traditional biochemical methods. The results showed that all tanks evaluated (7/7) were isolated ECP. Of these, counts above 103 CFU/mL were found in five expansion tanks analyzed and three still had counts greater than 105 CFU/mL. These levels are alarming, since several studies have demonstrated the capacity of production of enterotoxins by Staphylococcus spp. by quorum sensing mechanisms in the amounts found in this study population. This high score indicates contamination problems ECP milking process, and also indicative of animals with mastitis. (AU)

Ocorrência do gene da toxina da síndrome do choque tóxico em Staphylococcus spp. isolados de leite de vacas com mastite e de leite cru refrigerado / Occurrence of the toxic shock syndrome toxin gene in Staphylococcus spp.isolated from bovine mastitis milk and refrigerated raw milk

Avaliou-se a presença do gene (tst-1) para Toxina da Síndrome do Choque Tóxico-1 (TSST-1), utilizando-se a técnica de Reaçãoem Cadeia da Polimerase (PCR) em um total de 264 Staphylococcus spp. isolados de leite. Desses, 221 eram Staphylococcusaureus, 33 Staphylococcus coagulase negativo (SCN) e 10 Staphylococcus coagulase positivo (SCP). As amostras eram oriundasde vacas com mastite (n=96) e de leite cru refrigerado (n=168), coletadas de 46 e 22 propriedades, respectivamente. As amostrasforam coletadas de rebanhos localizados em diferentes regiões dos Estados de Minas Gerais e Rio de Janeiro. Observou-seproduto de amplificação (250 pares de base-pb) na reação de PCR para tst-1 em sete amostras (2,6%), sendo todas as estirpesidentificadas como Staphylococcus aureus isoladas de leite cru refrigerado. Embora a detecção do gene não indique a produçãoda toxina, o monitoramento de estirpes bacterianas potencialmente produtoras torna-se importante como forma de realizar umlevantamento epidemiológico e controle dos rebanhos leiteiros brasileiros, uma vez que esse gene está associado aos elementosgenéticos móveis, representando um risco à possível transferência horizontal de genes para outras bactérias. Além disso, a presençadesses genes tem sido associada à presença de genes para enterotoxinas estafilocócicas, o que pode implicar o aumento dapatogenicidade dos isolados bacterianos e um potencial risco à saúde pública.

Was evaluated the presence of the gene (tst -1) for toxic shock syndrome toxin - 1 (TSST -1), using the technique of PolymeraseChain Reaction (PCR) on a total of 264 Staphylococcus spp. isolated from milk. Of these, 221 were Staphylococcus aureus, 33Staphylococcus coagulase negative (SCN) and 10 Staphylococcus coagulase positive (SCP). The samples were from cows withmastitis (n=96) and refrigerated raw milk (n=168), collected from 46 and 22 dairy herds, respectively. Samples were collectedfrom herds located in different regions of Minas Gerais and Rio de Janeiro States. Was observed PCR amplification of the tst-1gene (250 base pairs-bp) in seven (2.6 %) samples, and all strains of Staphylococcus aureus isolated from refrigerated raw milk.Although its detection in isolated does not mean that it will be expressed, monitoring of bacterial strains producing potentiallybecomes important as performing an epidemiological survey and control of Brazilian dairy herds, since this gene is associatedwith mobile genetic elements, representing a risk to possible horizontal gene transfer to other bacteria. Furthermore, the presenceof these genes have been associated with the presence of genes for enterotoxins, which may result in increased pathogenicity ofthe isolates and a potential risk to public health.

Staphylococcus coagulase positivo isolado de leite cru de tanques comunitários / Coagulase-positive Staphylococcus isolated from raw milk tanks community

A presença de mastite bovina no rebanho, associada a falhas nas práticas de higiene, contribuem para a queda na qualidade do leite cru, bem como pode torná-lo impróprio para o consumo pela possível presença de enterotoxinas estafilocócicas. Neste trabalho, quantificou-se Estafilococos coagulase positivo (ECP) a partir dos leites de 210 produtores armazenados em sete diferentes tanques de refrigeração comunitários localizados em municípios da Zona da Mata Mineira. As amostras foram coletadas entre fevereiro e abril de 2009, seguindo plaqueamento em ágar Baird-Paker e incubação a 37 °C durante 48h. Cinco colônias apresentando características típicas para Staphylococcus foram isoladas e caracterizadas por métodos bioquímicos tradicionais. Os resultados mostraram que em todos os tanques avaliados (7/7) foram isolados ECP. Desses, contagens superiores a 103 UFC /mL foram encontradas em cinco tanques de expansão refrigerados, sendo que três ainda apresentaram contagens superiores a 105 UFC /mL. Estes níveis são alarmantes, uma vez que vários estudos têm demonstrado a capacidade de produção de enterotoxinas por Staphylococcus spp. por mecanismos de detecção de quórum nas quantidades populacionais encontradas no presente trabalho. Esta alta pontuação indica problemas de contaminação de ECP no processo de ordenha, e também um indicativo de animais com mastite.

The presence of bovine mastitis in herd, associated with failures in hygiene practices contribute to reduction in quality of raw milk, and may make it unsuitable for consumption by possible presence of staphylococcal enterotoxin. This work was quantified coagulase positive staphylococci (ECP) from the stored milk from 210 producers in seven different community cooling tanks located in cities in the Zona da Mata Mineira. Samples were collected between February and April 2009, following plating on Baird-Paker and incubation at 37 ° C for 48h. Five colonies with characteristics typical of Staphylococcus were isolated and characterized by traditional biochemical methods. The results showed that all tanks evaluated (7/7) were isolated ECP. Of these, counts above 103 CFU/mL were found in five expansion tanks analyzed and three still had counts greater than 105 CFU/mL. These levels are alarming, since several studies have demonstrated the capacity of production of enterotoxins by Staphylococcus spp. by quorum sensing mechanisms in the amounts found in this study population. This high score indicates contamination problems ECP milking process, and also indicative of animals with mastitis.

Bactérias psicrotróficas em leite cru refrigerado / Psychrotrophic bacterials in raw milk refrigerated

O objetivo deste trabalho foi verificar a qualidade microbiológica de amostras de leite cru de tanques refrigerados recebidos por uma Cooperativa localizada no Estado de Minas Gerais. Amostras de quatro tanques de refrigeração coletivos e quatro tanques de refrigeração individuais foram coletadas e analisadas para a presença de bactérias psicrotróficas. Coletaram-se duas amostras de cada um dos tanques, sendo as mesmas em seguida plaqueadas em duplicata em Ágar Padrão para Contagem (PCA) utilizando-se a metodologia de pour plate. Após dez dias de incubação a 7ºC as placas foram analisadas. Na análise dos tanques comunitários as contagens variaram de 103 a 105 Unidades Formadoras de Colônias (UFC) mL-1, enquanto que para os tanques individuais a variação foi de 101 a 104 UFC mL-1. Embora alguns estudos demonstrem que as contagens acima de 106 UFC mL-1 é que podem interferir com a qualidade do leite e derivados, um monitoramento contínuo de boas práticas para prevenir a contaminação e multiplicação microbiana no leite deve ser implementado a fim de garantir a produção de leite de maior qualidade e evitar perdas para os produtores.(AU)

The objective of this work involved to monitoring microbiological quality of raw milk samples from refrigerated tanks received at a Minas Gerais state`s cooperative. Milk samples were collected from four collective and four individuals refrigerated containers and psychrotrophic bacteria were enumerated. Two samples of each tank were collected and pour plated in duplicate using Plate Count Agar (PCA). After 10 days of incubation at 7oC the plates were counted. Psychrotrophic bacterial numbers varied from 103 to 105 colony forming units (CFU) mL-1 and from 101 to 104 CFU mL-1 for collectives and individuals tanks, respectively. Although some studies demonstrated that more than 106 CFU mL-1 are need to altering the quality of milk and milk products, it is suggested a continuous monitoring of good manufacturing practices in order to prevent the psychrotrophic bacterial contamination and multiplication in milk, therefore, to guarantee the microbiological quality of milk and to avoid significant farmers´ economic losses. (AU)

Bactérias psicrotróficas em leite cru refrigerado / Psychrotrophic bacterials in raw milk refrigerated

O objetivo deste trabalho foi verificar a qualidade microbiológica de amostras de leite cru de tanques refrigerados recebidos por uma Cooperativa localizada no Estado de Minas Gerais. Amostras de quatro tanques de refrigeração coletivos e quatro tanques de refrigeração individuais foram coletadas e analisadas para a presença de bactérias psicrotróficas. Coletaram-se duas amostras de cada um dos tanques, sendo as mesmas em seguida plaqueadas em duplicata em Ágar Padrão para Contagem (PCA) utilizando-se a metodologia de pour plate. Após dez dias de incubação a 7ºC as placas foram analisadas. Na análise dos tanques comunitários as contagens variaram de 103 a 105 Unidades Formadoras de Colônias (UFC) mL-1, enquanto que para os tanques individuais a variação foi de 101 a 104 UFC mL-1. Embora alguns estudos demonstrem que as contagens acima de 106 UFC mL-1 é que podem interferir com a qualidade do leite e derivados, um monitoramento contínuo de boas práticas para prevenir a contaminação e multiplicação microbiana no leite deve ser implementado a fim de garantir a produção de leite de maior qualidade e evitar perdas para os produtores.

The objective of this work involved to monitoring microbiological quality of raw milk samples from refrigerated tanks received at a Minas Gerais state`s cooperative. Milk samples were collected from four collective and four individuals refrigerated containers and psychrotrophic bacteria were enumerated. Two samples of each tank were collected and pour plated in duplicate using Plate Count Agar (PCA). After 10 days of incubation at 7oC the plates were counted. Psychrotrophic bacterial numbers varied from 103 to 105 colony forming units (CFU) mL-1 and from 101 to 104 CFU mL-1 for collectives and individuals tanks, respectively. Although some studies demonstrated that more than 106 CFU mL-1 are need to altering the quality of milk and milk products, it is suggested a continuous monitoring of good manufacturing practices in order to prevent the psychrotrophic bacterial contamination and multiplication in milk, therefore, to guarantee the microbiological quality of milk and to avoid significant farmers´ economic losses.

Atividade inibitória de Staphylococcus aureus isolados de mastite bovina frente a lactococcus sp. isolados de queijo e a bactérias patogênicas

A produção de bacteriocinas por diferentes bactérias tem levado à realização de inúmeros estudos para identificar bacteriocinas com diferentes espectros de inibição. A capacidade de bacteriocinas inibir bactérias patogênicas tem sido descrita e por isso observa-se grande interesse em se utilizar essas substâncias como conservantes alimentares ou no controle de infecções microbianas em humanos e animais. Staphylococcus aureus é um agente comum da mastite bovina frequentemente isolado em diversos países, e altamente disseminado nos rebanhos leiteiros do Brasil. Por isso realizou-se triagem para avaliar a produção de bacteriocinas entre amostras de S. aureus isolados de vacas com mastite, pertencentes a 54 rebanhos localizados em Minas Gerais e do Rio de Janeiro. A produção de substâncias antimicrobianas de S. aureus foi observada em 40% (262) das 655 amostras testadas. Essas substâncias foram classificadas como bacteriocinas pelo teste de protrease. Dessas 262 bacteriocinas, 55 foram selecionadas para investigação do espectro inibitório frente a bactérias patogênicas Gram-positivas e Gram-negativas e Lactococcus sp. isolados de queijo. Verificou-se que nenhuma bactéria Gram-negativa foi inibida enquanto que mais de 80% das bacteriocinas inibiram as bactérias Gram-positivas. Para as amostras de Lactococcus sp. o espectro inibitório foi variado