Parasitological diagnosis in ornamental freshwater fish from different fish farmers of five Brazilian states / Diagnóstico parasitológico em peixes ornamentais de diferentes pisciculturas de cinco estados brasileiros

This study aimed to search parasites in 333 ornamental fish from five Brazilian states (Ceará, Minas Gerais, São Paulo, Paraná and Santa Catarina). Fish were sent from eight farms located in the municipalities of Fortaleza, Patrocínio do Muriaé, São Francisco do Glória, Cascavel, Timbó, Iguape, Jacareí and Mairinque. All fish received anesthesia earlier to euthanasia procedures. After the search for parasites, it was verified that 70.6% (235/333) of fishes were infected by at least one type of parasite, being 12 types of parasites identified: monogeneans, digenean metacercariae, cestodes, nematodes, Lernaea cyprinacea, trichodinids, Piscinoodinium pillulare, Ichthyophthirius multifiliis, diplomonad flagellates, Ichthyobodo sp., Chilodonella sp., and Tetrahymena sp. The proportion of infected fishes among the farms is compared through statistical tests, besides, animal handling adopted in each farm is also discussed. The importance of ensuring fish health in order to make the ornamental freshwater fish industry economically viable and reduce losses in production is highlighted.

O objetivo deste estudo foi pesquisar parasitas presentes em 333 peixes ornamentais de cinco estados brasileiros (Ceará, Minas Gerais, São Paulo, Paraná e Santa Catarina). Os peixes eram oriundos de oito pisciculturas localizadas nos municípios de Fortaleza, Patrocínio do Muriaé, São Francisco do Glória, Cascavel, Timbó, Iguape, Jacareí e Mairinque. Todos os peixes foram anestesiados e eutanasiados para a pesquisa de parasitas. Após análise microscópica, foi verificado que 70.6% (235/333) dos peixes estavam infectados por ao menos uma espécie de parasita, sendo identificados 12 tipos: monogenoides, metacercárias, cestoides, nematoides, Lernaea cyprinacea, tricodinídeos, Piscinoodinium pillulare, Ichthyophthirius multifiliis, flagelados diplomonados, Ichthyobodo sp., Chilodonella sp., e Tetrahymena sp. A proporção de peixes infectados entre cada piscicultura é comparada através de testes estatísticos, além disso, o manejo adotado pelas diferentes pisciculturas também é discutido. A importância de assegurar a sanidade de peixes ornamentais, de forma a tornar a atividade economicamente viável e reduzir perdas na produção é enfatizada.

Centrocestus formosanus em peixes de água doce destinados ao consumo humano em Minas Gerais, Brasil / Centrocestus formosanus in freshwater fish destined for human consumption in Minas Gerais, Brazil

Centrocestus formosanus infesta as brânquias dos peixes, causando altas morbidades e mortalidades e, por consequência perdas econômicas. Este estudo relata a identificação de metacercárias de C. formosanus em peixes de água doce destinados ao consumo humano, provenientes de uma piscicultura em Minas Gerais. Um total de 172 peixes juvenis foram examinados e, destes, 107 apresentavam metacercárias. Esta ocorrência é indicativa de falhas nas práticas de controle de caramujos e representa risco à Saúde Pública.

Centrocestus formosanusinfects fish gills, producing high morbidities and mortalities and, consequently, economic losses. This study reports the identification of metacercaries of C. formosanuson fishes destined for human consumption, from a fish farming at Minas Gerais. From 172 juvenile fishes examinated 107 presented metacercaries in their gills. Its presence suggests lack of good management practices regarding snail control and it is a Public Health risk.

Centrocestus formosanus em peixes de água doce destinados ao consumo humano em Minas Gerais, Brasil / Centrocestus formosanus in freshwater fish destined for human consumption in Minas Gerais, Brazil

Centrocestus formosanus infesta as brânquias dos peixes, causando altas morbidades e mortalidades e, por consequência perdas econômicas. Este estudo relata a identificação de metacercárias de C. formosanus em peixes de água doce destinados ao consumo humano, provenientes de uma piscicultura em Minas Gerais. Um total de 172 peixes juvenis foram examinados e, destes, 107 apresentavam metacercárias. Esta ocorrência é indicativa de falhas nas práticas de controle de caramujos e representa risco à Saúde Pública.(AU)

Centrocestus formosanusinfects fish gills, producing high morbidities and mortalities and, consequently, economic losses. This study reports the identification of metacercaries of C. formosanuson fishes destined for human consumption, from a fish farming at Minas Gerais. From 172 juvenile fishes examinated 107 presented metacercaries in their gills. Its presence suggests lack of good management practices regarding snail control and it is a Public Health risk.(AU)

Metacercárias (Platyhelminthes: Digenea) em espécies de peixes ornamentais de água doce no Sudeste do Brasil: relato de caso / Metacercariae (Platyhelminthes: Digenea) in freshwater ornamental fish species in southeastern Brazil: case report

Metacercárias são larvas de trematódeos digenéticos comumente encontradas encapsuladas em brânquias, pele, músculos e órgãos internos. Geralmente não são prejudiciais aos animais quando em baixo número, porém, em altas infestações podem levar a óbito. O presente estudo relata infecções por metacercárias em 58 peixes ornamentais de água doce, provenientes de produtores de dois municípios do estado de São Paulo (Iguape e Jacareí), sudeste do Brasil. Após a análise, 13% dos animais (8/58) apresentaram metacercárias encistadas no tecido subcutâneo e 43% (25/58) apresentaram metacercárias encapsuladas em brânquias. Estes resultados destacam a importância do controle sanitário de peixes e na realização de diagnósticos que possam desenvolver programas de biosseguridade no cultivo de peixes ornamentais. É discutida a importância de assegurar a sanidade de peixes ornamentais de forma a tornar a atividade economicamente viável e reduzir perdas econômicas na produção.

Metacercariae are digenetic trematode larvae commonly encapsulated in gills, skin, muscles and internal organs and are generally not harmful to animals when in low numbers, but in high infestations can lead to death. The present study reports metacercariae infections in 58 freshwater ornamental fishes from producers in two municipalities of the state of São Paulo (Iguape and Jacareí), Southeastern Brazil. After analysis, 13% of the animals (8/58) had metacercariae encysted in subcutaneous tissue and 43% (25/58) presented metacercariae encapsulated in gills. These results highlight the importance of the Veterinary in the sanitary control of fish, with the ability to identify agents, establish diagnoses and from there develop biosecurity control programs in the production systems of ornamental aquatic organisms, in order to ensure the viability of the fish business, promote animal welfare, reduce manageable losses and contribute to its role for animal and environmental health as a whole.

Metacercárias (Platyhelminthes: Digenea) em espécies de peixes ornamentais de água doce no Sudeste do Brasil: relato de caso / Metacercariae (Platyhelminthes: Digenea) in freshwater ornamental fish species in southeastern Brazil: case report

Metacercárias são larvas de trematódeos digenéticos comumente encontradas encapsuladas em brânquias, pele, músculos e órgãos internos. Geralmente não são prejudiciais aos animais quando em baixo número, porém, em altas infestações podem levar a óbito. O presente estudo relata infecções por metacercárias em 58 peixes ornamentais de água doce, provenientes de produtores de dois municípios do estado de São Paulo (Iguape e Jacareí), sudeste do Brasil. Após a análise, 13% dos animais (8/58) apresentaram metacercárias encistadas no tecido subcutâneo e 43% (25/58) apresentaram metacercárias encapsuladas em brânquias. Estes resultados destacam a importância do controle sanitário de peixes e na realização de diagnósticos que possam desenvolver programas de biosseguridade no cultivo de peixes ornamentais. É discutida a importância de assegurar a sanidade de peixes ornamentais de forma a tornar a atividade economicamente viável e reduzir perdas econômicas na produção.(AU)

Metacercariae are digenetic trematode larvae commonly encapsulated in gills, skin, muscles and internal organs and are generally not harmful to animals when in low numbers, but in high infestations can lead to death. The present study reports metacercariae infections in 58 freshwater ornamental fishes from producers in two municipalities of the state of São Paulo (Iguape and Jacareí), Southeastern Brazil. After analysis, 13% of the animals (8/58) had metacercariae encysted in subcutaneous tissue and 43% (25/58) presented metacercariae encapsulated in gills. These results highlight the importance of the Veterinary in the sanitary control of fish, with the ability to identify agents, establish diagnoses and from there develop biosecurity control programs in the production systems of ornamental aquatic organisms, in order to ensure the viability of the fish business, promote animal welfare, reduce manageable losses and contribute to its role for animal and environmental health as a whole.(AU)

Lymphocystis virus in ornamental fish imported in Brazil / Lymphocystis vírus em peixes ornamentais importados para o Brasil

Lymphocystis is a chronic viral disease found in both fresh and marine water fishes, characterized by nodules that typically appear on the skin or fins. Lymphocystis is the most common viral infection of ornamental fish. This study aimed to identify fish showing clinical signs of Lymphocystis virus in an ornamental fish importation company and to highlight the importance of involving veterinary doctors to assure the health of ornamental fish, a relatively unexplored practice in Brazil. Seventeen ornamental fishes studied during quarantine presented with clinical signs of the disease, confirmed after microscopic analysis. Every single fish presented with enlarged fibroblastic cells typical of the Lymphocystis virus. In this case, lesions were removed with a scalpel blade and the fish were treated with an antibiotic in a hospital aquarium for seven days. Thirty days later, the fish were healthy and ready for sale. The study also reinforces the fact that it is extremely important to provide the staff with examples of good practices in handling fishes, provide the technical team with professional training, and avoid situations of stress on fishes in order to restrain opportunistic diseases. The enablement of veterinary doctors in establishments that trade aquatic ornamental fishes is also essential to allow them to perform their work in prevention and disease control.

Linfocitose é uma doença viral crônica encontrada em peixes de água doce e marinha, caracterizada por nódulos principalmente na pele e/ou nadadeiras. É a doença viral mais comum nos peixes de aquário. O objetivo do presente estudo de caso foi identificar os animais com sintomatologia clínica condizente com infecção por Lymphocystis vírus, em um estabelecimento importador de organismos aquáticos ornamentais, além de alertar para a importância de médicos veterinários capacitados na área de sanidade de animais aquáticos, relativamente a um agente pouco explorado nessa área no Brasil. Um total de dezessete peixes ornamentais foram estudados durante o período de quarentena, no qual apresentaram sinais clínicos da doença, confirmada por análise microscópica. Todos os peixes apresentaram células fibroblásticas de tamanho aumentado, típicas de Lymphocystis vírus. As lesões foram removidas com lâmina de bisturi e os peixes foram tratados com antibiótico em um aquário hospital por sete dias para prevenir contra infecções bacterianas secundárias. Após trinta dias, os peixes estavam completamente curados e disponíveis para venda. Este relato reforça a importância de hábitos de boas práticas de higiene e manipulação, além do fornecimento de treinamentos aos profissionais que manipulam diretamente os animais comercializados, a fim de diminuir situações desnecessárias de estresse

Lymphocystis virus in ornamental fish imported in Brazil / Lymphocystis vírus em peixes ornamentais importados para o Brasil

Lymphocystis is a chronic viral disease found in both fresh and marine water fishes, characterized by nodules that typically appear on the skin or fins. Lymphocystis is the most common viral infection of ornamental fish. This study aimed to identify fish showing clinical signs of Lymphocystis virus in an ornamental fish importation company and to highlight the importance of involving veterinary doctors to assure the health of ornamental fish, a relatively unexplored practice in Brazil. Seventeen ornamental fishes studied during quarantine presented with clinical signs of the disease, confirmed after microscopic analysis. Every single fish presented with enlarged fibroblastic cells typical of the Lymphocystis virus. In this case, lesions were removed with a scalpel blade and the fish were treated with an antibiotic in a hospital aquarium for seven days. Thirty days later, the fish were healthy and ready for sale. The study also reinforces the fact that it is extremely important to provide the staff with examples of good practices in handling fishes, provide the technical team with professional training, and avoid situations of stress on fishes in order to restrain opportunistic diseases. The enablement of veterinary doctors in establishments that trade aquatic ornamental fishes is also essential to allow them to perform their work in prevention and disease control.(AU)

Linfocitose é uma doença viral crônica encontrada em peixes de água doce e marinha, caracterizada por nódulos principalmente na pele e/ou nadadeiras. É a doença viral mais comum nos peixes de aquário. O objetivo do presente estudo de caso foi identificar os animais com sintomatologia clínica condizente com infecção por Lymphocystis vírus, em um estabelecimento importador de organismos aquáticos ornamentais, além de alertar para a importância de médicos veterinários capacitados na área de sanidade de animais aquáticos, relativamente a um agente pouco explorado nessa área no Brasil. Um total de dezessete peixes ornamentais foram estudados durante o período de quarentena, no qual apresentaram sinais clínicos da doença, confirmada por análise microscópica. Todos os peixes apresentaram células fibroblásticas de tamanho aumentado, típicas de Lymphocystis vírus. As lesões foram removidas com lâmina de bisturi e os peixes foram tratados com antibiótico em um aquário hospital por sete dias para prevenir contra infecções bacterianas secundárias. Após trinta dias, os peixes estavam completamente curados e disponíveis para venda. Este relato reforça a importância de hábitos de boas práticas de higiene e manipulação, além do fornecimento de treinamentos aos profissionais que manipulam diretamente os animais comercializados, a fim de diminuir situações desnecessárias de estresse(AU)

Methods for thermal inactivation of pathogens in mozzarella: a comparison between stretching and pasteurization / Métodos para inativação térmica de patógenos em mozarela: comparação entre filagem e pasteurização

This study aimed to evaluate the efficiency of stretching in the reduction of pathogens when compared to milk pasteurization, the official method to ensure safe cheese production. Whole buffalo milk was contaminated with Mycobacterium fortuitum, Listeria monocytogenes, Salmonella typhimurium, and Staphylococcus aureus. Part of the milk was used in mozzarella production and the other part was submitted to holder pasteurization. Pathogens were quantified before and after thermal processing (mozzarella stretching and milk pasteurization). Pasteurization and stretching led to the following reductions in log cycles, respectively: 4.0 and 6.3 for Mycobacterium sp.; 6.0 and 8.4 for Listeria sp.; >6.8 and 4.5 for Staphylococcus sp.; and >8.2 and 7.5 for Salmonella sp.(AU)

Este estudo teve como objetivo avaliar a eficácia da filagem na redução de patógenos,em comparação coma pasteurizaçãodo leite, que é o método oficialpara garantir aprodução de queijos seguros. Leite de búfala integral foi contaminado com Mycobacterium fortuitum, Listeria monocytogenes, Salmonella typhimurium e Staphylococcus aureus. Parte desse leite foi empregada na fabricação da mozarela e outra parte foi submetida à pasteurização lenta. Os patógenosforam quantificadosantes e após os processos térmicos (filagem da mozarela e pasteurização do leite). As reduções, em ciclos logarítmicos, causadas pela pasteurização e pela filagem, respectivamente, foram: 4,0 e 6,3 de Mycobacterium sp., 6,0 e 8,4 de Listeria sp., >6,8 e 4,5 de Staphylococcus sp. e >8,2 e 7,5 de Salmonella sp.(AU)

Avaliação da fervura na inativação de patógenos em leite integral de vaca, cabra e búfala experimentalmente contaminados / Milk boiling evaluation on inactivating pathogens in cow, goat and buffalo whole milk experimentally contaminated

A fervura do leite foi avaliada quanto à inativação de Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Salmonella Typhimurium (ATCC 14028) e Mycobacterium fortuitum (NCTC 8573) inoculados em leite integral de vaca, cabra e búfala. As amostras de leite, previamente tratadas, foram contaminadas com os patógenos. Três repetições foram realizadas com cada tipo de leite. As amostras foram analisadas antes e depois da fervura e também após 24h sob refrigeração. As amostras foram diluídas em série e a metodologia oficial foi usada para quantificar Staphylococcus aureus, e adaptada para se obter o NMP de Salmonella. O número de UFC de Mycobacterium foi obtido em meio Löwenstein-Jensen, incubados a 37°C/5 dias. Antes da fervura, as amostras tinham entre 6,8 e 8,0 log UFC ou NMP/mL, de cada agente. Após a fervura, Staphylococcus foi recuperado em uma das 3 amostras de leite de vaca (1x10 UFC/mL), e Salmonella em todas as três amostras de leite de búfala (0,3 NMP/mL cada). Mycobacterium não foi detectado em nenhuma das analises realizadas após a fervura. As amostras fervidas e refrigeradas mostraram ausência de crescimento de todos os agentes. Nas condições estudadas, os resultados comprovam a efetividade da fervura do leite em reduzir o risco microbiológico a níveis mínimos.

The inactivation of Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Salmonella Typhimurium (ATCC 14028) and Mycobacterium fortuitum (NCTC 8573) inoculated in cow, goat and buffalo whole milk submitted to the boiling was evaluated. Milk samples, previously treated, were contaminated with the pathogens and boiled. Tree replicates were performed with each kind of milk. Samples were analyzed immediately before and after the boiling, and also after 24h under refrigeration. Samples were serial diluted and official method was used to quantify Staphylococcus aureus, and it was adapted to get the MPN of Salmonella. The number of CFU of Mycobacterium was obtained on Löwenstein-Jensen medium, incubated to 37°C/5 days. Before boiling the milk samples had from 6.8 to 8.0 log CFU or MPN/mL, of each agent. After boiling, Staphylococcus was recovery in one of three cow milk samples (1x10 CFU/mL), and Salmonella in all three buffalo milk samples (0.3 MPN/mL each). Mycobacterium was not detected in any of analysis made after the boiling. Boiled and refrigerated samples showed no growth in all of them. Under the studied conditions, the results prove the effectiveness of domestic boiling to reduce biological risk to minimum levels.

Isolation of potential zoonotic Mycobacterium spp. from diseased freshwater angelfish (Pterophyllum scalare) from an aquarium / Isolamento de Mycobacterium spp. potencialmente zoonótica de peixes anjo de água doce (Pterophyllum scalare) doentes de um aquário

Nontuberculous mycobacteria infection is one of the most common chronic bacterial diseases in ornamental aquarium fish and appears to be directly related to stressful husbandry practices. Furthermore, it also represents zoonotic potential. Here we present the isolation and characterization of non-tuberculous mycobacteria from diseased freshwater angelfish (Pterophyllum scalare) in São Paulo, Brazil. Nine discarded breeding females with signs of disease were evaluated. The fish exhibited lethargy, loss of appetite, cachexia, skin ulcers, and exophthalmia. At necropsy, four fishes presented macroscopic granulomas in the spleen. Mycobacterium chelonae, M. fortuitum, M. gordonae, M. intracellulare and M. peregrinum were isolated and identified by hsp65 PCR restriction analysis. Histopathological analysis revealed microscopic lesions compatible with mycobacteriosis, and Mycobacterium bacillus were observed by Ziehl-Neelsen stain. Notably, all Mycobacterium species identified in this study have already been reported in human patients; therefore, diseased animals may be a source of infection for people who handle fish and aquariums.

A infecção por micobactérias não tuberculosas é uma das doenças bacterianas crônicas mais comuns em peixes ornamentais de aquário e parece estar diretamente relacionada a práticas de manejo estressantes. Além disso, também representa potencial zoonótico. Aqui, apresentamos o isolamento e a caracterização de micobactérias não tuberculosas de peixes-anjo de água doce doentes (Pterophyllum scalare) em São Paulo, Brasil. Foram avaliadas nove fêmeas reprodutoras descartadas com sinais de doença. Os peixes exibiam letargia, perda de apetite, caquexia, úlceras cutâneas e exoftalmia. Na necropsia, quatro peixes apresentaram granulomas macroscópicos no baço. Mycobacterium chelonae, M. fortuitum, M. gordonae, M. intracellulare e M. peregrinum foram isolados e identificados por análise de restrição por PCR de hsp65. A análise histopatológica revelou lesões microscópicas compatíveis com micobacteriose, e o bacilo de Mycobacterium foi observado pela coloração de Ziehl-Neelsen. Notavelmente, todas as espécies de Mycobacterium identificadas neste estudo já foram relatadas em pacientes humanos; portanto, animais doentes podem ser uma fonte de infecção para pessoas que manipulam peixes e aquários.

MILK BOILING EVALUATION ON INACTIVATING PATHOGENS IN COW, GOAT AND BUFFALO WHOLE MILK EXPERIMENTALLY CONTAMINATED / AVALIAÇÃO DA FERVURA NA INATIVAÇÃO DE PATÓGENOS EM LEITE INTEGRAL DE VACA, CABRA E BÚFALA EXPERIMENTALMENTE CONTAMINADOS

The inactivation of Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Salmonella Typhimurium (ATCC 14028) and Mycobacterium fortuitum (NCTC 8573) inoculated in cow, goat and buffalo whole milk submitted to the boiling was evaluated. Milk samples, previously treated, were contaminated with the pathogens and boiled. Tree replicates were performed with each kind of milk. Samples were analyzed immediately before and after the boiling, and also after 24h under refrigeration. Samples were serial diluted and official method was used to quantify Staphylococcus aureus, and it was adapted to get the MPN of Salmonella. The number of CFU of Mycobacterium was obtained on Löwenstein-Jensen medium, incubated to 37°C/5 days. Before boiling the milk samples had from 6.8 to 8.0 log CFU or MPN/mL, of each agent. After boiling, Staphylococcus was recovery in one of three cow milk samples (1x10 CFU/mL), and Salmonella in all three buffalo milk samples (0.3 MPN/mL each). Mycobacterium was not detected in any of analysis made after the boiling. Boiled and refrigerated samples showed no growth in all of them. Under the studied conditions, the results prove the effectiveness of domestic boiling to reduce biological risk to minimum levels.

A fervura do leite foi avaliada quanto à inativação do Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Salmonella Typhimurium (ATCC 14028) e Mycobacterium fortuitum (NCTC 8573) inoculados em leite integral de vaca, cabra e búfala. As amostras de leite, previamente tratadas, foram contaminadas com os patógenos. Três repetições foram realizadas com cada tipo de leite. As amostras foram analisadas antes e depois da fervura e também após 24h sob refrigeração. As amostras foram diluídas em série e a metodologia oficial foi usada para quantificar Staphylococcus aureus, e adaptada para se obter o NMP de Salmonella. O número de UFC de Mycobacterium foi obtido em meio Löwenstein-Jensen, incubados a 37°C/5 dias. Antes da fervura, as amostras tinham entre 6,8 e 8,0 log UFC ou NMP/mL, de cada agente. Após a fervura, Staphylococcus foi recuperado em uma das 3 amostras de leite de vaca (1x10 UFC/mL), e Salmonella em todas as três amostras de leite de búfala (0,3 NMP/mL cada). Mycobacterium não foi detectado em nenhuma das analises realizadas após a fervura. As amostras fervidas e refrigeradas mostraram ausência de crescimento de todos os agentes. Nas condições estudadas, os resultados comprovam a efetividade da fervura do leite em reduzir o risco microbiológico a níveis mínimos. PALAVRAS-CHAVE: Microbiologia. Mycobacterium fortuitum. Salmonella Typhimurium. Staphylococcus aureus. Tratamento térmico.