Seleção de peptídeos específicos para anticorpos anti Leptospira Interrogans

Leptospira interrogans sorovar Copenhageni é o principal sorovar envolvido na Leptospirose humana, nas Regiões Sudeste e Nordeste do Brasil, sendo ainda escassas as informações nas demais regiões do país. É caracterizada por ser uma doença de caráter populacional e ambiental, seu controle está intimamente ligado a medidas de prevenção, aplicadas aos animais e ao ambiente no qual os mesmos são mantidos. A pesquisa de anticorpos constitui a principal prova de diagnóstico da leptospirose, incluindo teste sorogrupos – específicos, dos quais a prova de soro aglutinação microscópica (SAM) é a mais importante e amplamente utilizada. O objetivo nesse estudo foi verificar a viabilidade do uso da técnica Phage Display para selecionar peptídeos similares aos epítopos de anti Leptospira sorovar Copenhageni para subsidiar futuramente, um novo teste de diagnóstico. Após 3 ciclos de seleção, 92 clones foram selecionados e submetidos ao seqüenciamento. Assim foram seqüenciados 57 clones que demonstraram 54 seqüências distintas. Testes ELISA foram realizados para validação dos clones reativos e 3 deles foram reativos com altas absorbâncias. A tecnologia de Phage Display foi capaz de demonstrar reatividade, sinalizando a mimetização de possíveis peptídeos aos epítopos da Leptospira interrogans sorovar Copenhageni.

Leptospira interrogans serovar Copenhageni is the main sorovar involved in the Leptospirosis human, in the Southeast Regions and Northeast of Brazil, being still scarce the information in the too regions of the country. It is characterized by be an illness of his, environmental and population character control is intimate linked in proportion to prevention, applied to the animals and to the environment in which they are maintained. To research of antibodies I constituted to main test of diagnosis of the leptospirosis, including test serogroups – specific, of the which the microscopic amalgamation serum test (BE) is to more important and broadly utilized. The objective in that study was verify the feasability of the use of the technical one Phage Display for select similar peptides to the epítopos of anti Leptospira serovar Copenhageni for subsidize future, a new test of diagnosis. After 3 cycles of selection, 92 clones were selected and submitted to the sequencing. So were sequenced 57 clones that showed 54 distinct sequences. ELISA tests were performed to validate the reactive clones and three of them were reactive with high absorbance. Phage display technology was able to demonstrate reactivity, signaling the possible peptides mimicking the epitopes of Leptospira interrogans serovar Copenhageni.

Seleção de peptídeos específicos para anticorpos anti Leptospira Interrogans

Leptospira interrogans sorovar Copenhageni é o principal sorovar envolvido na Leptospirose humana, nas Regiões Sudeste e Nordeste do Brasil, sendo ainda escassas as informações nas demais regiões do país. É caracterizada por ser uma doença de caráter populacional e ambiental, seu controle está intimamente ligado a medidas de prevenção, aplicadas aos animais e ao ambiente no qual os mesmos são mantidos. A pesquisa de anticorpos constitui a principal prova de diagnóstico da leptospirose, incluindo teste sorogrupos específicos, dos quais a prova de soro aglutinação microscópica (SAM) é a mais importante e amplamente utilizada. O objetivo nesse estudo foi verificar a viabilidade do uso da técnica Phage Display para selecionar peptídeos similares aos epítopos de anti Leptospira sorovar Copenhageni para subsidiar futuramente, um novo teste de diagnóstico. Após 3 ciclos de seleção, 92 clones foram selecionados e submetidos ao seqüenciamento. Assim foram seqüenciados 57 clones que demonstraram 54 seqüências distintas. Testes ELISA foram realizados para validação dos clones reativos e 3 deles foram reativos com altas absorbâncias. A tecnologia de Phage Display foi capaz de demonstrar reatividade, sinalizando a mimetização de possíveis peptídeos aos epítopos da Leptospira interrogans sorovar Copenhageni.(AU)

Leptospira interrogans serovar Copenhageni is the main sorovar involved in the Leptospirosis human, in the Southeast Regions and Northeast of Brazil, being still scarce the information in the too regions of the country. It is characterized by be an illness of his, environmental and population character control is intimate linked in proportion to prevention, applied to the animals and to the environment in which they are maintained. To research of antibodies I constituted to main test of diagnosis of the leptospirosis, including test serogroups specific, of the which the microscopic amalgamation serum test (BE) is to more important and broadly utilized. The objective in that study was verify the feasability of the use of the technical one Phage Display for select similar peptides to the epítopos of anti Leptospira serovar Copenhageni for subsidize future, a new test of diagnosis. After 3 cycles of selection, 92 clones were selected and submitted to the sequencing. So were sequenced 57 clones that showed 54 distinct sequences. ELISA tests were performed to validate the reactive clones and three of them were reactive with high absorbance. Phage display technology was able to demonstrate reactivity, signaling the possible peptides mimicking the epitopes of Leptospira interrogans serovar Copenhageni.(AU)

Causas de condenações post-mortem de perus abatidos em estabelecimento com Serviço de Inspeção Federal (SIF) no estado de Minas Gerais, Brasil

Este estudo objetivou identificar as principais causas de condenações de perus abatidos sob Serviço de Inspeção Federal, além de verificar as estações do ano em que as condenações são mais frequentes. Foram utilizados dados do Serviço de Inspeção Federal de um matadouro-frigorífico exportador de aves localizado na mesorregião do Triângulo Mineiro e Alto Paranaíba, Minas Gerais, no período compreendido entre agosto de 2008 a julho de 2009. Foram inspecionadas 8.153.866 aves, procedentes de 19 municípios localizados nesta mesorregião. Destas, 1.767.503 (21,68%), tiveram algum tipo de condenação post-mortem. As principais causas de condenação (parcial e total) foram agrupadas segundo o mês e estação do ano, a fim de se verificar quais foram as condenações de maior e menor frequência. Foram condenados parcialmente 1.750.863 perus (21,47%) e 16.640 (0,21%) foram condenados totalmente. Dentre o número total de condenações post-mortem, 99,06% foi devido a condenações parciais e 0,94% devido a condenações totais. As causas de condenação parcial mais frequentes foram devido à aerossaculite (41,24%), seguida de contaminação biliar (23,73%). As causas de condenação total mais frequentes foram em função de aspecto repugnante (51,62%) e dermatose (22,71%). A estação do ano que apresentou maior frequência de condenações tanto totais quanto parciais foi a primavera. Verificou-se que na mesor

Toxinas e perfil protéico de amostras de Actinobacillus suis provenientes de plantéis suínos norte-americanos

Actinobacillus suis (A. suis) has arisen as a great threat to the North American hog herds. The clinical symptoms and lesions are particularly variable and may resemble the same caused by other pathogenic organisms, such as Actinobacillus pleuropneumoniae (App), which can similarly lead to the production of the toxins ApxI and ApxII. This study aimed to confirm the production of the toxins ApxI and ApxII, as well as, to investigate the production of toxins that are genetically similar to ApxIII, and analyze total protein to verify whether there is any similarity among the isolated samples obtained from different North American hog herds. In this study, all the strains of A. suis were positive for the genes that codify the toxins ApxI and ApxII using the multiplex polymerase chain reaction (PCR-multiplex) method; and total protein from 70 samples of A. suis, obtained from different North American hog herds, were analyzed through denaturing polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE), and were identical. The electrophoretic similarity observed among total protein of the analyzed bacteria indicates that there is the possibility of existing a cross protection in case of developing a probable universal vaccine with the antigens of A. suis.

Actinobacillus suis (A.suis) surgiu como uma grande ameaça aos plantéis suínos norte-americanos. Os sinais clínicos e as lesões são particularmente variáveis e podem lembrar aquelas causadas por outros organismos, como o Actinobacillus pleuropneumoniae (App), podendo ter como causa a similaridade na produção das toxinas ApxI e ApxII. Os objetivos do estudo foram confirmar a produção das toxinas ApxI e ApxII, investigar a produção de toxina geneticamente semelhante à Apx III e analisar as proteínas totais, verificando se existe similaridade entre os isolados provenientes de diferentes plantéis de suínos norte-americanos. Neste estudo, todas as cepas de A. suis foram positivas para os genes codificadores das toxinas ApxI e ApxII, usando o método de reação em cadeia de polimerase - multiplex (PCR-multiplex); e as proteínas totais de 70 amostras de A. suis, oriundos de diferentes plantéis suínos norte-americanos, foram analisadas por meio de eletroforese em gel de poliacrilaminda desnaturante (SDS-PAGE) e foram idênticas. A similaridade eletroforética observada entre as proteínas totais das bactérias analisadas indica a possibilidade de haver uma proteção cruzada a partir de uma provável vacina universal desenvolvida com esses antígenos para A. suis.

Toxinas e perfil protéico de amostras de Actinobacillus suis provenientes de plantéis suínos norte-americanos

Actinobacillus suis (A. suis) has arisen as a great threat to the North American hog herds. The clinical symptoms and lesions are particularly variable and may resemble the same caused by other pathogenic organisms, such as Actinobacillus pleuropneumoniae (App), which can similarly lead to the production of the toxins ApxI and ApxII. This study aimed to confirm the production of the toxins ApxI and ApxII, as well as, to investigate the production of toxins that are genetically similar to ApxIII, and analyze total protein to verify whether there is any similarity among the isolated samples obtained from different North American hog herds. In this study, all the strains of A. suis were positive for the genes that codify the toxins ApxI and ApxII using the multiplex polymerase chain reaction (PCR-multiplex) method; and total protein from 70 samples of A. suis, obtained from different North American hog herds, were analyzed through denaturing polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE), and were identical. The electrophoretic similarity observed among total protein of the analyzed bacteria indicates that there is the possibility of existing a cross protection in case of developing a probable universal vaccine with the antigens of A. suis.

Actinobacillus suis (A.suis) surgiu como uma grande ameaça aos plantéis suínos norte-americanos. Os sinais clínicos e as lesões são particularmente variáveis e podem lembrar aquelas causadas por outros organismos, como o Actinobacillus pleuropneumoniae (App), podendo ter como causa a similaridade na produção das toxinas ApxI e ApxII. Os objetivos do estudo foram confirmar a produção das toxinas ApxI e ApxII, investigar a produção de toxina geneticamente semelhante à Apx III e analisar as proteínas totais, verificando se existe similaridade entre os isolados provenientes de diferentes plantéis de suínos norte-americanos. Neste estudo, todas as cepas de A. suis foram positivas para os genes codificadores das toxinas ApxI e ApxII, usando o método de reação em cadeia de polimerase - multiplex (PCR-multiplex); e as proteínas totais de 70 amostras de A. suis, oriundos de diferentes plantéis suínos norte-americanos, foram analisadas por meio de eletroforese em gel de poliacrilaminda desnaturante (SDS-PAGE) e foram idênticas. A similaridade eletroforética observada entre as proteínas totais das bactérias analisadas indica a possibilidade de haver uma proteção cruzada a partir de uma provável vacina universal desenvolvida com esses antígenos para A. suis.

Toxinas e perfil protéico de amostras de Actinobacillus suis provenientes de plantéis suínos norte-americanos

Actinobacillus suis (A. suis) has arisen as a great threat to the North American hog herds. The clinical symptoms and lesions are particularly variable and may resemble the same caused by other pathogenic organisms, such as Actinobacillus pleuropneumoniae (App), which can similarly lead to the production of the toxins ApxI and ApxII. This study aimed to confirm the production of the toxins ApxI and ApxII, as well as, to investigate the production of toxins that are genetically similar to ApxIII, and analyze total protein to verify whether there is any similarity among the isolated samples obtained from different North American hog herds. In this study, all the strains of A. suis were positive for the genes that codify the toxins ApxI and ApxII using the multiplex polymerase chain reaction (PCR-multiplex) method; and total protein from 70 samples of A. suis, obtained from different North American hog herds, were analyzed through denaturing polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE), and were identical. The electrophoretic similarity observed among total protein of the analyzed bacteria indicates that there is the possibility of existing a cross protection in case of developing a probable universal vaccine with the antigens of A. suis.

Actinobacillus suis (A.suis) surgiu como uma grande ameaça aos plantéis suínos norte-americanos. Os sinais clínicos e as lesões são particularmente variáveis e podem lembrar aquelas causadas por outros organismos, como o Actinobacillus pleuropneumoniae (App), podendo ter como causa a similaridade na produção das toxinas ApxI e ApxII. Os objetivos do estudo foram confirmar a produção das toxinas ApxI e ApxII, investigar a produção de toxina geneticamente semelhante à Apx III e analisar as proteínas totais, verificando se existe similaridade entre os isolados provenientes de diferentes plantéis de suínos norte-americanos. Neste estudo, todas as cepas de A. suis foram positivas para os genes codificadores das toxinas ApxI e ApxII, usando o método de reação em cadeia de polimerase - multiplex (PCR-multiplex); e as proteínas totais de 70 amostras de A. suis, oriundos de diferentes plantéis suínos norte-americanos, foram analisadas por meio de eletroforese em gel de poliacrilaminda desnaturante (SDS-PAGE) e foram idênticas. A similaridade eletroforética observada entre as proteínas totais das bactérias analisadas indica a possibilidade de haver uma proteção cruzada a partir de uma provável vacina universal desenvolvida com esses antígenos para A. suis.

In silico analysis for identification of tick phagotopes selected by phage-displayed libraries

Phage display techniques have been widely employed to map epitope structures which have served as the basis for developing molecular vaccines. We have applied this technique to map specific epitopes of Rhipicephalus (Boophilus) microplus. In the present study, we have identified the potential immunogens using a process in which the selected phage clones were analyzed through bioinformatics, prior to final field tests. The present study demonstrates the feasibility of identifying important R. (B.) microplus phagotopes for vaccine development through screening of phage-displayed random peptide libraries and bioinformatics tools.

Técnicas de phage display têm sido amplamente empregadas para o mapeamento de epítopos os quais tem servido como base para o desenvolvimento de vacinas moleculares. Esta técnica foi aplicada no mapeamento de epítopos do Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Neste estudo, potenciais imunógenos foram identificados pela adoção de um processo em que os clones de fagos foram analisados por bioinformática, previamente à realização dos testes. Os resultados demonstraram a possibilidade da identificação de importantes mimetopos do R. (B.) microplus para o desenvolvimento de vacinas através da seleção de bibliotecas de phage display associada à análise de bioinformática.

In silico analysis for identification of tick phagotopes selected by phage-displayed libraries

Phage display techniques have been widely employed to map epitope structures which have served as the basis for developing molecular vaccines. We have applied this technique to map specific epitopes of Rhipicephalus (Boophilus) microplus. In the present study, we have identified the potential immunogens using a process in which the selected phage clones were analyzed through bioinformatics, prior to final field tests. The present study demonstrates the feasibility of identifying important R. (B.) microplus phagotopes for vaccine development through screening of phage-displayed random peptide libraries and bioinformatics tools.

Técnicas de phage display têm sido amplamente empregadas para o mapeamento de epítopos os quais tem servido como base para o desenvolvimento de vacinas moleculares. Esta técnica foi aplicada no mapeamento de epítopos do Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Neste estudo, potenciais imunógenos foram identificados pela adoção de um processo em que os clones de fagos foram analisados por bioinformática, previamente à realização dos testes. Os resultados demonstraram a possibilidade da identificação de importantes mimetopos do R. (B.) microplus para o desenvolvimento de vacinas através da seleção de bibliotecas de phage display associada à análise de bioinformática.

Causas de condenações post-mortem de perus abatidos em estabelecimento com Serviço de Inspeção Federal (SIF) no estado de Minas Gerais, Brasil

 Este estudo objetivou identificar as principais causas de condenações de perus abatidos sob Serviço de Inspeção Federal, além de verificar as estações do ano em que as condenações são mais frequentes. Foram utilizados dados do Serviço de Inspeção Federal de um matadouro-frigorífico exportador de aves localizado na mesorregião do Triângulo Mineiro e Alto Paranaíba, Minas Gerais, no período compreendido entre agosto de 2008 a julho de 2009. Foram inspecionadas 8.153.866 aves, procedentes de 19 municípios localizados nesta mesorregião. Destas, 1.767.503 (21,68%), tiveram algum tipo de condenação post-mortem. As principais causas de condenação (parcial e total) foram agrupadas segundo o mês e estação do ano, a fim de se verificar quais foram as condenações de maior e menor frequência. Foram condenados parcialmente 1.750.863 perus (21,47%) e 16.640 (0,21%) foram condenados totalmente. Dentre o número total de condenações post-mortem, 99,06% foi devido a condenações parciais e 0,94% devido a condenações totais. As causas de condenação parcial mais frequentes foram devido à aerossaculite (41,24%), seguida de contaminação biliar (23,73%). As causas de condenação total mais frequentes foram em função de aspecto repugnante (51,62%) e dermatose (22,71%). A estação do ano que apresentou maior frequência de condenações tanto totais quanto parciais foi a primavera. Verificou-se que na mesor