Avaliação distribuição mitocondrial na maturação in vitro de oócitos bovinos de ovários com baixa e alta contagem de folículos antrais / Mitochondrial distribution evaluation in vitro maturation of ovarian bovine oocytes with low and high antral follicle count

A Produção in vitro de embriões (PIVE) depende das etapas de maturação, fertilização e cultivo in vitro, sendo a maturação a etapa decisiva para o oócito atingir o estádio de mórula e blastocisto. Neste trabalho objetivou-se avaliar a qualidade de maturação in vitro, de acordo com a distribuição mitocondrial de oócitos provenientes de ovários de fêmeas de abatedouro, com baixa ou alta contagem de folículos antrais (CFA). Foram aspirados 243 ovários dos quais se selecionou 334 oócitos perante de cinco repetições para cada grupo. Os ovários foram separados em dois grupos: 1-baixa CFA (n=19), 2-alta CFA (n= 53) e os oócitos recuperados corados com a sonda MitoTracker Red. Os dados obtidos foram analisados pelo teste não paramétrico exato de Fisher (α=5%) mediante o software Statistical Analysis System for Windows (SAS Inst., Inc., Cary, NC).Em relação a localização das mitocôndrias o presente trabalho apresentou diferenças (p<0,001) entre oócitos imaturos e maturados, o que é desejável. Oócitos maturados apresentaram maior porcentagem de mitocôndrias dispersas no citoplasma e oócitos imaturos na periferia, independente do grupo experimental (baixa e alta CFA). Em oócitos imaturos, não houve diferença (p=0,1542) na localização das mitocôndrias entre os grupos baixa e alta CFA. No entanto, o grupo baixa CFA, após a maturação, apresentou menor quantidade de oócitos com mitocôndrias na periferia em relação aos de alta CFA (p = 0,0355), indicando melhor aquisição de competência desses oócitos para PIVE.

In vitro embryo production (PIVE) depends on the stages of maturation, fertilization and in vitro cultivation, being the decisive stage for the oocyte to reach the morula and blastocyst stage. This study aimed to evaluate the quality of in vitro maturation, according to the mitochondrial distribution of oocytes from ovaries of slaughter females with low or high antral follicle count (CFA). A total of 243 ovaries were aspirated from which 334 oocytes were selected for five replicates for each group. The ovaries were separated into two groups: 1-low CFA (n = 19) 2-high CFA (n = 53) and stained with the Mito Traker Red probe. Data obtained were analyzed by Fisher's exact nonparametric test ( α= 5%) using the Statistical Analysis System for Windows software (SAS Inst., Inc., Cary, NC). Regarding the location of mitochondria, the present study showed significant differences (p <0.001) between immature and mature oocytes, which is desirable. Mature oocytes had a higher percentage of dispersed mitochondria in the cytoplasm and immature oocytes in the periphery, regardless of the experimental group (low and high CFA). In immature oocytes, there was no difference (p = 0.1542) in the location of mitochondria between the low and high CFA groups. However, the oocytes of the low CFA group, after maturation, presented smaller number of oocytes with mitochondria in the periphery compared to the high CFA (p = 0.0355), indicating for this parameter a better competence of these oocytes for PIVE.

Avaliação distribuição mitocondrial na maturação in vitro de oócitos bovinos de ovários com baixa e alta contagem de folículos antrais / Mitochondrial distribution evaluation in vitro maturation of ovarian bovine oocytes with low and high antral follicle count

A Produção in vitro de embriões (PIVE) depende das etapas de maturação, fertilização e cultivo in vitro, sendo a maturação a etapa decisiva para o oócito atingir o estádio de mórula e blastocisto. Neste trabalho objetivou-se avaliar a qualidade de maturação in vitro, de acordo com a distribuição mitocondrial de oócitos provenientes de ovários de fêmeas de abatedouro, com baixa ou alta contagem de folículos antrais (CFA). Foram aspirados 243 ovários dos quais se selecionou 334 oócitos perante de cinco repetições para cada grupo. Os ovários foram separados em dois grupos: 1-baixa CFA (n=19), 2-alta CFA (n= 53) e os oócitos recuperados corados com a sonda MitoTracker Red. Os dados obtidos foram analisados pelo teste não paramétrico exato de Fisher (α=5%) mediante o software Statistical Analysis System for Windows (SAS Inst., Inc., Cary, NC).Em relação a localização das mitocôndrias o presente trabalho apresentou diferenças (p<0,001) entre oócitos imaturos e maturados, o que é desejável. Oócitos maturados apresentaram maior porcentagem de mitocôndrias dispersas no citoplasma e oócitos imaturos na periferia, independente do grupo experimental (baixa e alta CFA). Em oócitos imaturos, não houve diferença (p=0,1542) na localização das mitocôndrias entre os grupos baixa e alta CFA. No entanto, o grupo baixa CFA, após a maturação, apresentou menor quantidade de oócitos com mitocôndrias na periferia em relação aos de alta CFA (p = 0,0355), indicando melhor aquisição de competência desses oócitos para PIVE.(AU)

In vitro embryo production (PIVE) depends on the stages of maturation, fertilization and in vitro cultivation, being the decisive stage for the oocyte to reach the morula and blastocyst stage. This study aimed to evaluate the quality of in vitro maturation, according to the mitochondrial distribution of oocytes from ovaries of slaughter females with low or high antral follicle count (CFA). A total of 243 ovaries were aspirated from which 334 oocytes were selected for five replicates for each group. The ovaries were separated into two groups: 1-low CFA (n = 19) 2-high CFA (n = 53) and stained with the Mito Traker Red probe. Data obtained were analyzed by Fisher's exact nonparametric test ( α= 5%) using the Statistical Analysis System for Windows software (SAS Inst., Inc., Cary, NC). Regarding the location of mitochondria, the present study showed significant differences (p <0.001) between immature and mature oocytes, which is desirable. Mature oocytes had a higher percentage of dispersed mitochondria in the cytoplasm and immature oocytes in the periphery, regardless of the experimental group (low and high CFA). In immature oocytes, there was no difference (p = 0.1542) in the location of mitochondria between the low and high CFA groups. However, the oocytes of the low CFA group, after maturation, presented smaller number of oocytes with mitochondria in the periphery compared to the high CFA (p = 0.0355), indicating for this parameter a better competence of these oocytes for PIVE.(AU)

Microbiological profile of milk produced on dairy farms in the state of São Paulo according to the standards of Normative Instruction 62 of the Brazilian Ministry of Agriculture, Livestock and Food Supply / Perfil microbiológico do leite de propriedades paulistas em relação às condições exigidas pela InstruçãoNormativa 62 do MAPA

Objetivou-se avaliar o atendimento à Instrução Normativa 62 em propriedades leiteiras no estadode São Paulo, estudar a ocorrência de mastite subclínica de quartos mamários por meio do California MastitisTest (CMT) e da contagem de células somáticas (CCS), estabelecer a etiologia da mastite, analisar ocomprometimento da CCS das diferentes propriedades de acordo com os micro-organismos isolados e verificar ainfluência das condições climáticas na ocorrência de mastite. Os percentuais de mastite subclínica analisadospelo CMT em relação ao número de animais e quartos mamários foram de 48,3% (232/480) e 26,2% (496/1892)respectivamente. Considerando o limite atual de CCS da IN 62, 88,8% das propriedades atendem a IN 62. Noentanto, analisando o objetivo final da IN 62 que é atingir 400.000 céls/mL algumas propriedades já ultrapassame outras estão muito próximas desse limite. As frequências dos micro-organismos por propriedade foramdiferentes. As propriedades E e D tiveram os resultados mais críticos. Entre as 388 amostras positivas ao examemicrobiológico, Staphylococcus aureus foi o micro-organismo mais prevalente, com 34,02% dos isolados. OStreptococcus spp. foi o agente mais associado às elevadas CCS, com coeficiente de correlação de 0,20286. Otrabalho mostrou que os patógenos da mastite consistem em um fator de variação da resposta celular. Os microorganismosisolados representam uma redução na produção e qualidade do leite, além de oferecerem váriosriscos à saúde humana. A associação entre clima e mastite está subordinada ao tipo de manejo adotado,profilaxia e também à estrutura e limpeza das instalações da propriedade

The objectives of this study were to determine whether dairy farms in the State of São Paulomeet the Normative Instruction 62 (NI-62), to evaluate the occurrence of subclinical mastitis in mammaryquarters by the California Mastitis Test (CMT) and somatic cell count (SCC), to establish the etiology ofmastitis, to analyze SCC problems on the different farms according to the microorganisms isolated, and todetermine the influence of climatic conditions on the occurrence of mastitis. The incidence of subclinicalmastitis determined by the CMT according to the number of animals and mammary quarters analyzed was 48.3%(232/480) and 26.2% (496/1892), respectively. Considering the SCC limit current NI-62, 88,8% of the farmsmeet the standards of NI-62. However, considering the final objective of NI-62 which is to achieve 400.000cells/mL, some farms already exceed this limit. The frequency of microorganisms differed between properties, itwas observed the most critical effects on farm E and D. Staphylococcus aureus was the most commonmicroorganism isolated from the 388 samples positive in microbiological test, accounting for 34.02%.Streptococcus spp. was the agent most associated with elevated SCCs, with a coefficient of correlation of0.20286. This study showed that mastitis pathogens are responsible for variations in the cellular response. Themicroorganisms isolated cause a reduction in production and milk quality, in addition to posing a risk to humanhealth

Microbiological profile of milk produced on dairy farms in the state of São Paulo according to the standards of Normative Instruction 62 of the Brazilian Ministry of Agriculture, Livestock and Food Supply / Perfil microbiológico do leite de propriedades paulistas em relação às condições exigidas pela InstruçãoNormativa 62 do MAPA

Objetivou-se avaliar o atendimento à Instrução Normativa 62 em propriedades leiteiras no estadode São Paulo, estudar a ocorrência de mastite subclínica de quartos mamários por meio do California MastitisTest (CMT) e da contagem de células somáticas (CCS), estabelecer a etiologia da mastite, analisar ocomprometimento da CCS das diferentes propriedades de acordo com os micro-organismos isolados e verificar ainfluência das condições climáticas na ocorrência de mastite. Os percentuais de mastite subclínica analisadospelo CMT em relação ao número de animais e quartos mamários foram de 48,3% (232/480) e 26,2% (496/1892)respectivamente. Considerando o limite atual de CCS da IN 62, 88,8% das propriedades atendem a IN 62. Noentanto, analisando o objetivo final da IN 62 que é atingir 400.000 céls/mL algumas propriedades já ultrapassame outras estão muito próximas desse limite. As frequências dos micro-organismos por propriedade foramdiferentes. As propriedades E e D tiveram os resultados mais críticos. Entre as 388 amostras positivas ao examemicrobiológico, Staphylococcus aureus foi o micro-organismo mais prevalente, com 34,02% dos isolados. OStreptococcus spp. foi o agente mais associado às elevadas CCS, com coeficiente de correlação de 0,20286. Otrabalho mostrou que os patógenos da mastite consistem em um fator de variação da resposta celular. Os microorganismosisolados representam uma redução na produção e qualidade do leite, além de oferecerem váriosriscos à saúde humana. A associação entre clima e mastite está subordinada ao tipo de manejo adotado,profilaxia e também à estrutura e limpeza das instalações da propriedade(AU)

The objectives of this study were to determine whether dairy farms in the State of São Paulomeet the Normative Instruction 62 (NI-62), to evaluate the occurrence of subclinical mastitis in mammaryquarters by the California Mastitis Test (CMT) and somatic cell count (SCC), to establish the etiology ofmastitis, to analyze SCC problems on the different farms according to the microorganisms isolated, and todetermine the influence of climatic conditions on the occurrence of mastitis. The incidence of subclinicalmastitis determined by the CMT according to the number of animals and mammary quarters analyzed was 48.3%(232/480) and 26.2% (496/1892), respectively. Considering the SCC limit current NI-62, 88,8% of the farmsmeet the standards of NI-62. However, considering the final objective of NI-62 which is to achieve 400.000cells/mL, some farms already exceed this limit. The frequency of microorganisms differed between properties, itwas observed the most critical effects on farm E and D. Staphylococcus aureus was the most commonmicroorganism isolated from the 388 samples positive in microbiological test, accounting for 34.02%.Streptococcus spp. was the agent most associated with elevated SCCs, with a coefficient of correlation of0.20286. This study showed that mastitis pathogens are responsible for variations in the cellular response. Themicroorganisms isolated cause a reduction in production and milk quality, in addition to posing a risk to humanhealth(AU)

Restriction fragment length polymorphism in calpain (CAPN2) gene in crossbred cattle / Polimorfismo dos fragmentos de restrição no gene Calpaína (CAPN2) em bovinos mestiços

With advances in molecular genetics have been possible to predict the genetic value of the animal, in particular its potential to transmit desired characters to their offspring, including characters difficult to evaluate or with low heritability, as is the case of the meat tenderization. It is known that Bos taurus indicus features differences in meat tenderization, being assigned this variability to their lowest proteolysis post-mortem, as result of high activity of calpastatin. This inhibitor decreases the activity of calpain, which are the enzymes responsible for the degradation of muscle fibers during the maturation of the meat. Moreover, there were previously observed differences in the frequencies of allele A of calpain among European breeds (Hereford, Aberdeen Angus and Holstein) and Bos taurus indicus (Gir, Guzerá and Nelore). This variability has been related to tenderness of meat, as cattle with Bos taurus taurus origin have more tender meat than Bos taurus indicus, showing small values of shear force. One explanation is that the Capn2A product could confer greater proteolytic activity than the encoded by the allele Capn2B. If allele A is associated with tender meat, it will be possible the early identification of the animals that have the potential to produce meat with qualities that attend the needs of the consumer market, in order to add economic value to the final

O artigo não apresenta resumo.

Restriction fragment length polymorphism in calpain (CAPN2) gene in crossbred cattle / Polimorfismo dos fragmentos de restrição no gene Calpaína (CAPN2) em bovinos mestiços

With advances in molecular genetics have been possible to predict the genetic value of the animal, in particular its potential to transmit desired characters to their offspring, including characters difficult to evaluate or with low heritability, as is the case of the meat tenderization. It is known that Bos taurus indicus features differences in meat tenderization, being assigned this variability to their lowest proteolysis post-mortem, as result of high activity of calpastatin. This inhibitor decreases the activity of calpain, which are the enzymes responsible for the degradation of muscle fibers during the maturation of the meat. Moreover, there were previously observed differences in the frequencies of allele A of calpain among European breeds (Hereford, Aberdeen Angus and Holstein) and Bos taurus indicus (Gir, Guzerá and Nelore). This variability has been related to tenderness of meat, as cattle with Bos taurus taurus origin have more tender meat than Bos taurus indicus, showing small values of shear force. One explanation is that the Capn2A product could confer greater proteolytic activity than the encoded by the allele Capn2B. If allele A is associated with tender meat, it will be possible the early identification of the animals that have the potential to produce meat with qualities that attend the needs of the consumer market, in order to add economic value to the final

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